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INSTRUES PARA A
COLETA DE AMOSTRAS
AMBIENTAIS
Guia de Amostragem Ambiental
---- Dr. Georges Kaskantzis Neto -----INSTRUES PARA COLETA DE AMOSTRAS AMBIENTAIS
INTRODUO
Os procedimentos apresentados neste documento so baseados nos Procedimentos
Tcnicos PT-0169, 0172 e 0174 do Sistema de Gesto da Qualidade da DEPAM e
so complementares ao Procedimento Geral para Atendimento a Acidentes
Ambientais desenvolvido pela Coordenadoria Estadual de Acidentes Ambientais
(CEAA), rgo vinculado Diretoria de Controle de Recursos Ambientais (DIRAM) do
Instituto Ambiental do Paran (IAP).
1) PLANEJAMENTO DA COLETA DE AMOSTRAS
A coleta de amostras tem como objetivo identificar e mensurar os impactos causados
pela atividade poluidora ou acidente ambiental. Desta forma, sempre que o dano for
constatado os procedimentos de coleta, preservao, transporte e anlise de
amostras, anotaes na ficha de coleta, fotografias ou filmagens efetuadas, sero
utilizados como prova na elaborao do parecer tcnico e no laudo de percia.
No planejamento da coleta deve ser considerado o tipo da amostra coletada; local de
coleta; quantidade da amostra, a identificao, acondicionamento e transporte da
amostra e a ficha de coleta. Caso exista o procedimento padronizado para a coleta,
ele deve ser seguido e citado no relatrio.
Considerando que procedimentos podem ser contestados em juzo importante que
cada pequeno detalhe, por mais insignificante que parea ser seja considerado, uma
vez que, se reveste de enorme importncia. Dada importncia da amostragem,
antes do incio dos trabalhos, ela deve ser planejada de forma cuidadosa.
2) COLETA DE AMOSTRAS
Aps o planejamento, devemos preparar os equipamentos e materiais necessrios
para a coleta, como por exemplo, sacos, baldes, cordas, equipamento (pHmetro,
oxmetro, condutivmetro, termmetro etc.) e os equipamentos de proteo individual
do analista.
No recomendado que as pessoas sem treinamento adequado manuseiem os
frascos das caixas de coleta, como por exemplo, cido ntrico-sulfrico utilizados para
preservar as amostras coletadas. Essas substncias em contato com a pele ou
inalados, podem provocar queimaduras graves e srias intoxicaes. Na seqncia
so apresentados os Procedimentos Tcnicos para amostragem de gua, efluentes
lquidos; solo e animais.
---- Dr. Georges Kaskantzis Neto -----necessrio indicar as seguintes informaes: identificao da empresa ou do
acidente, local (rio, efluente), ponto de coleta (montante, local, jusante), data e horrio.
Todos os frascos coletados no mesmo ponto so considerados como uma nica
amostra. Desta forma, devem ser afixadas etiquetas iguais na caixa de coleta e
frascos.
3.2) Preenchimento das Fichas de Coleta
O correto preenchimento da ficha de coleta fundamental para a anlise dos
resultados dos ensaios de laboratrio e para a elaborao dos laudos e pareceres
tcnicos. As principais informaes que devem ser indicadas na ficha so:
a) As coordenadas do local do acidente e dos pontos de coleta (utilize o GPS);
b) A identificao e caracterizao do corpo hdrico: nome, tipo, como por
exemplo, se for manancial de abastecimento ou se est em rea de proteo
ambiental (APA) e a distncia do local do acidente;
c) A identificao dos pontos de coleta: local, data, hora;
d) Constatao de mortandade de animais (peixes, aves, etc.).
Anotar todas as informaes consideradas significativa e importantes para a
elaborao dos pareceres e laudos tcnicos. Observar que a ficha de coleta um
documento legal e, dependendo do seu preenchimento, pode contribuir ou no para
a correta elucidao dos fatos. Fotografar todos os locais e situaes significativas
incluindo, o local do derrame do produto, zona de mistura gua-produto, peixes e
animais mortos. Fazer tomadas detalhadas e enquadramentos que demonstrem o
contexto do acidente e impactos causados. No caso de acidente ambiental com morte
de peixes, preencher o formulrio especfico.
3.3) Acondicionamento e Transporte das Amostras para o Laboratrio
A caixa trmica deve ser preenchida com gelo (dentro de sacos plsticos) assim que
concluda a coleta da amostra. Tampar bem os frascos e arranj-los no interior da
caixa de coleta de forma que no virem no caso do gelo derreter. Fechar bem as
caixas para manter a temperatura e evitar que a gua proveniente do gelo derretido
vaze e molhe o compartimento de carga dos veculos ou nibus. Uma vez coletadas,
identificadas e preservadas as amostras, necessrio envi-las imediatamente ao
laboratrio para anlise. Alguns ensaios de laboratrio devem ser realizados no prazo
mximo de 24 horas a partir da coleta.
4) AMOSTRAGENS EM GUA
Sempre que o efluente ou compostos derramados em um acidente atingirem um corpo
hdrico, seja crrego, rio, lago ou reservatrio, necessrio coletar amostras de gua.
Para que se possa determinar e quantificar o impacto do contaminante no corpo
hdrico importante que se colete amostras no local de incorporao do contaminante
no corpo hdrico, a montante do local do acidente, para caracterizar a qualidade da
gua antes de receber a influncia do produto e a jusante do local do vazamento para
caracterizar o impacto.
Alm dos trs pontos de coleta obrigatria, recomenda-se tambm coletar amostras
em outros trechos do corpo hdrico afetado pelo acidente. Os parmetros de anlise
so: pH, oxignio dissolvido (OD), condutividade, temperatura do meio e da amostra.
Para acidentes com leo, no se pode medir pH e OD, pois o produto danifica os
equipamentos. A medio da temperatura obrigatria.
---- Dr. Georges Kaskantzis Neto -----4.1) Instrues para Coleta da Amostra de gua
Realizar a coleta da amostra com balde descartvel previamente enxaguado duas
vezes com a gua do prprio corpo hdrico que ser investigado. Caso o acesso ao
corpo hdrico seja difcil, utilizar uma corda na ala do recipiente (balde). Coletar a
amostra a 20 cm de profundidade, imergindo o balde ou frasco em contra - corrente
ou provocando o efeito movendo lentamente o frasco em contracorrente. Uniformizar
o contedo com agitao e encher os frascos.
Utilizar um recipiente novo (balde) para cada amostra para evitar a contaminao da
amostra seguinte com os resduos da anterior. No final da coleta, furar os recipientes
antes de encaminh-los para descarte. Na falta de baldes descartveis, coletar a
amostra com o prprio frasco. Nunca deixar os recipientes contaminados intactos ou
perto da populao, para no serem utilizados no transporte e consumo de gua.
A Tabela 1 indica o procedimento recomendado para o enchimento dos frascos com
amostras de gua para anlise no laboratrio. No caso de vazamentos acidentais de
leos, cujas amostras apresentem grande quantidade de leo, colete apenas uma
amostra por ponto de no mnimo 2,0 litros. No preserve em campo, encaminhe
imediatamente ao laboratrio para homogeneizao.
FSICO-QUMICA
BACTERIOLGICO
(Utilize um frasco pequeno de
vidro esterilizado e com tampa
de vidro, observe sempre a
DATA DE VALIDADE).
PROCEDIMENTO DE COLETA
TOXICIDADE
Colete com balde e encha o frasco at a boca.
(frasco de propileno de 300mL
ou 5 litros - testes com peixes)
Obs.: nas caixas de coleta, os frascos vm identificados atravs de etiquetas.
Uso do solo
rea residencial
0 a 11 cm 1
0 a 35 cm
0 a 15 cm
0 a 15 cm
Pastagem
0 a 20 cm
20 a 40 cm
40 a 60 cm
0 a 10 cm
10 a 30 cm
Procedimento de
amostragem
No mnimo 500 g
Acondicionamento
Preservao
No aplicvel
Identificao
Procedimento de
amostragem
Quantidade da
amostra coletada
No mnimo 500 g
Acondicionamento
Preservao
Identificao
---- Dr. Georges Kaskantzis Neto -----Remover vegetao e outros detritos da superfcie do solo a ser
amostrado.
Procedimento de
Amostragem
Quantidade de
amostra por coleta
No mnimo 500 g
Acondicionamento
Preservao
Identificao
Solo
gua
BTEX e TPH
BTXE
BTXE
PAH's
TPH
PAH's TPH
Metais: Pb, Cd, As
Cr, Hg, Zn
BTXE
PAH's
PAH's
Etanol
Etanol
leos vegetais
leos vegetais
7) AMOSTRAGENS DE ANIMAIS
Verificar sempre se h mortandade de animais (peixes, aves, anfbios, pequenos
mamferos ou animais de grande porte) que possa ter ocorrido como conseqncia
do acidente ou lanamento. Se a constatao for positiva, anotar na ficha de coleta
as espcies de animais e quantidades estimadas. Em seguida, planejar a coleta de
amostras representativas.
7.1) Instrues para Coleta de Aves
No caso de acidentes com leo deve-se evitar a limpeza dos indivduos, pois esta
medida pode acarretar problemas para as aves. Estas devem ser envolvidas em
panos ou mesmo em jornal (que um excelente isolante trmico) e encaminhadas
imediatamente em caixas de papelo, ou outra forma disponvel de transporte, para o
---- Dr. Georges Kaskantzis Neto -----hospital veterinrio conveniado para o atendimento em acidentes ambientais ou
centro de reabilitao preparado para receber animais nestes casos.
Os indivduos mortos devem ser coletados, envolvidos em sacos plsticos e jornais e
condicionados em recipientes de isopor com gelo. Informaes como o local da coleta,
data e nome do coletor, entre outras, devem ser anotadas e colocadas junto ao
material e, posteriormente encaminhados ao rgo competente. interessante que
seja descrita a forma como foram encontrados os espcimes. A quantidade tanto de
indivduos quanto de espcies um elemento bsico para a elaborao do parecer e
laudo tcnico.
Devem ser observadas as aves vivas que estejam freqentando o local do acidente e
adjacncias, os aspectos do seu comportamento e aquelas que se encontram
manchadas com leo ou outro produto. O porte, tamanho aproximado, colorao,
forma e tamanho do bico, enfim, caractersticas que possam ser usadas para uma
possvel distino da espcie ou grupo taxonmico tambm devem ser registradas.
7.2) Instrues para Coleta de Anfbios
Raramente so encontrados em acidentes ambientais, porm se observados mortos
ou moribundos devem ser coletados e transportados em vidros com lcool a 40%.
Anotar as cores de cada espcie coletada antes da fixao.
7.3) Instrues para Coleta de Invertebrados
Os invertebrados que devem ser coletados so os aneldeos (minhocas), insetos
(besouro, mosquito, louva-a-Deus), crustceos (siri, caranguejo), moluscos (ostra,
mexilho, berbigo), nematdeos (vermes do solo). Eles podem ser acondicionados
em vidros, separados em sacos plsticos e colocados todos em um mesmo frasco.
Os frascos devem ser devidamente identificados com local de coleta, data e nome do
coletor para serem posteriormente encaminhados para o rgo competente.
interessante que seja descrita a forma como foram encontrados os espcimes.
7.4) Instrues para Coleta de Animais de Grande Porte
Nos casos de acidentes ambientais, inclusive aqueles com leo, raro encontrar
mamferos de mdio e grande porte mortos ou moribundos. Porm, se encontrados,
devem ser colocados em sacos plsticos (sacos de 100L de lixo que servem para este
propsito), envolvidos em jornal e acondicionados em caixas de isopor compatveis
com o seu tamanho.
Em seguida devem ser encaminhados ao laboratrio j contatado e autorizado para
proceder s anlises relativas necropsia. Eventualmente podem ser encontrados
vestgios de animais que tiveram contato com leo, nas margens de corpos hdricos
e outros substratos, os quais devero ser descritos e encaminhados para avaliao.
7.5) Instrues para Coleta de Peixes
Coletar os peixes ainda vivos ou moribundos, nunca os mortos, devido rpida
decomposio das suas vsceras, adotando os seguintes procedimentos:
---- Dr. Georges Kaskantzis Neto -----Cada folha de jornal deve conter apenas uma amostra e ser identificada. As
plantas no devem se sobrepor, quando arrumadas sobre o jornal, a menos
que se trate de pequenos galhos muito ramificados, que devem ser dobrados
para caber no espao e mantidos assim, por pequenos pedaos de papel.
A posio das plantas deve obedecer a sua forma natural de insero da folha
e inflorescncias. As razes grossas ou carnosas, talos, frutos e cabeas florais
devem ser cortados e secos livremente antes da prensagem. As frutas
carnosas so preferencialmente laminadas para observao das sees
transversais e longitudinais.
As flores grandes devem ser cortadas longitudinalmente para a visualizao
das suas partes internas. As plantas muito suculentas devem ser separadas e
cortadas em lminas, parte de sua polpa pode ser previamente removida ou
submersa em gua quente, lcool ou benzeno antes de ser prensada.
Montagem do Herbrio
O conjunto que ser prensado se compe de folhas contendo as amostras,
papeis absorventes ou secantes e de papelo corrugado, usado para a
ventilao entre duas amostras, cobertos por duas grades ou placas de
madeira (30x40 cm), pressionados por dois ou trs cintos grossos, no sentido
da largura do conjunto, que devem ser mantido o mais apertado possvel.
A prensa deve ser mantida em local seco e quente natural ou artificial. Aps
algumas horas, ocorre a perda de gua e, os cintos devem ser apertados
novamente. Para ambiente artificial, a prensa deve ser aberta a cada 24 horas,
ou a cada 6 horas para plantas suculentas ou muito molhadas, e os papeis
absorventes devem ser trocados. O procedimento deve ser repetido vrias
vezes ao longo de intervalos regulares de tempo at que no se observe mais
a presena de gua no papel absorvente.
Na seqncia as plantas so armazenadas em pastas, estantes horizontais,
arquivos metlicos, caixas de papelo ou madeira. Para a proteo contra
insetos, utiliza-se para-diclorobenzeno ou cristais de naftalina.
A constatao de contaminao da planta coletada e, preservadas em AFA
(soluo de lcool, formaldedo e cido actico), pode ser realizada atravs de
dissecao e estudos anatmicos da estrutura celular. Os ensaios mais
utilizados so:
Anlises morfo-anatmica Foliar:
a. Alterao da dimenso foliar (comprimento, largura e rea foliar);
b. Alterao da densidade estomtica (contagem de estmatos);
c. Anlise da estrutura e da espessura do limbo foliar
Anlise morfo-anatmica do Lenho:
a) Medida de traquedes axiais em material dissociado;
b) Estrutura anatmica do lenho;
c) Composio polissacardica da parede celular dos traquedes.
Determinao de leo: Extrao com hexana e anlise cromatogrfica.
10
Quadro 1. Tipo de frasco para preservar amostra e prazo para o ensaio de amostras coletadas de gua.
Parmetro
Acidez
Alcalinidade
Alumnio*
Arsnio*
Brio*
Cdmio*
Clcio*
Chumbo*
Cianeto
Cloreto
Cloro residual
Tipo de frasco
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Clorofila a
Vidro mbar
Clorofila a
Volume Mnimo
de amostra
Preservao da
Amostra
Prazo para
Anlise
Acondicionamento
para Transporte
Caixa trmica com
gelo
Caixa trmica com
gelo
200mL
No aplicvel
48 horas**
200mL
No aplicvel
48 horas**
500mL
180 dias
No Aplicvel
500mL
180 dias
No Aplicvel
500mL
180 dias
No Aplicvel
500mL
180 dias
No Aplicvel
500mL
180 dias
No Aplicvel
500mL
180 dias
No Aplicvel
1000mL
250mL
No aplicvel
7 dias
200mL
No aplicvel
Determinar em
campo
1000mL
No aplicvel
12 horas
100mL
(Amostra filtrada)
48 horas**
90 dias
11
Cobalto*
Cobre*
Coliforme Total e
Fecal (gua in
natura)
Coliforme Total e
Fecal (clorada)
Condutividade
Cor verdadeira
Cromo*
Cromo hexavalente
DBO 5
Dixido de carbono
livre (CO2)
DQO
Dureza total
Fenis
Ferro*
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Vidro esterilizado
com tampa
esmerilada
Plstico auto clavado
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
500mL
180 dias
No Aplicvel
500mL
180 dias
No Aplicvel
200mL
24 horas
100mL
0,1 mL tiossulfato de
sdio 1,0%
24 horas
100mL
No aplicvel
28 dias
100mL
No aplicvel
48 horas
500mL
180 dias
No Aplicvel
100mL
No aplicvel
48 horas**
2000mL
No aplicvel
48 horas**
100mL
No aplicvel
48 horas**
100mL
48 horas
100mL
No aplicvel
48 horas
1000mL
48 horas
500mL
180 dias
12
Ferro solvel*
Polipropileno ou
vidro
200mL
Fitoplncton
300mL
1 a 2mL de lugol
No aplicvel
Fluoreto
polipropileno
100mL
No aplicvel
28 dias
100mL
28 dias
500mL
180 dias
No Aplicvel
500mL
180 dias
No Aplicvel
500mL
13 dias
No Aplicvel
500mL
180 dias
No Aplicvel
500mL
No aplicvel
48 horas
100mL
No aplicvel
48 horas**
500mL
48 horas
500mL
7 dias
100mL
48 horas
1000mL
7 dias
Fsforo
Magnsio*
Mangans*
Mercrio*
Nquel*
Nitrato
Nitrito
Nitrognio orgnico
amoniacal
Nitrognio Kjeldahl
Ortofosfato
leos e graxas
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Vidro
180 dias
No Aplicvel
12 meses
48 horas**
No aplicvel
Caixa trmica com
gelo
Caixa trmica com
gelo
Caixa trmica com
gelo
13
Oxignio consumido
em meio cido
Oxignio Dissolvido
Pesticida
Organoclorados
pH
Potssio*
Prata*
Pseudomonas
aeruginosa
Selnio*
Slica solvel
Sdio*
Slidos
Sulfato
Sulfeto
Polipropileno ou
vidro
150mL
No aplicvel
Wiinlker
300ml
48 horas
48 horas ****
No aplicvel
1000mL
2mL HCL 6N
14 dias
100mL
No aplicvel
48 horas***
No aplicvel
500mL
180 dias
No aplicvel
500mL
180 dias
No aplicvel
200mL
0,2ml de tiossulfato de
sdio 1,0%
24 horas
500mL
180 dias
No aplicvel
100mL
No aplicvel
28 dias
500mL
180 dias
No aplicvel
1200mL
No aplicvel
07 dias
200mL
No aplicvel
07 dias
Polipropileno
300mL
07 dias
14
Surfactantes
Polipropileno ou
vidro
500mL
No aplicvel
Toxicidade
Brachydanio rerio
Polipropileno ou
vidro
5000mL
No aplicvel
Polipropileno ou
vidro
250mL
No aplicvel
vidro mbar
250mL
No aplicvel
vidro mbar
50mL
No aplicvel
100mL
No aplicvel
48 horas
500mL
180 dias
No aplicvel
20mL formaldedo 4%
No aplicvel
Toxicidade
Daphnia magna
Toxicidade
Scenedesmus
subspicatus
Toxicidade
Vbrio fisheri
Turbidez
Zinco*
Polipropileno ou
vidro
Polipropileno ou
vidro
Zooplncton
300mL
Volteis
Vidro transparente
com tampa
40mL
48 horas**
03 dias em
geladeira ou 60
dias em freezer
03 dias em
geladeira ou 60
dias em freezer
03 dias em
geladeira ou 60
dias em freezer
03 dias em
geladeira ou 60
dias em freezer
12 meses
24 horas
14 dias
No aplicvel Caixa
trmica c/ gelo
Caixa trmica com
gelo
15
QUADRO 2 - Tipo de frasco para preservar amostra e prazo para o ensaio de amostras de efluentes lquidos
Tipo de frasco
Volume
Mnimo
Amostra
Preservao da
Amostra
Prazo para
Ensaio
Acondicionamento para o
transporte
Alumnio*
Polipropileno ou vidro
500 mL
5 mL de HNO 3 conc./L
180 dias
No aplicvel
Brio*
Polipropileno ou vidro
500 mL
5 mL de HNO 3 conc./L
180 dias
No aplicvel
Cdmio*
Polipropileno ou vidro
500 mL
5 mL de HNO 3 conc./L
180 dias
No aplicvel
Clcio*
Polipropileno ou vidro
500 mL
5 mL de HNO 3 conc./L
180 dias
No aplicvel
Chumbo*
Polipropileno ou vidro
500 mL
5 mL de HNO 3 conc./L
180 dias
No aplicvel
Cianeto
Polipropileno
1000 mL
2mL NaOH6N/L
48 horas**
Cobalto*
Polipropileno ou vidro
500 mL
5 mL de HNO 3 conc./L
180 dias
No aplicvel
Cobre*
Polipropileno ou vidro
500 mL
5 mL de HNO 3 conc./L
180 dias
No aplicvel
Cromo*
Polipropileno ou vidro
500 mL
5 mL de HNO 3 conc./L
180 dias
No aplicvel
Cromo hexavalente
Polipropileno ou vidro
300 mL
No aplicvel
48 horas**
DBO 5 dias
Polipropileno ou vidro
2000 mL
No aplicvel
48 horas**
DQO
Polipropileno ou vidro
100 mL
1 mL deH 2 SO 4
conc/L
48 horas**
Parmetro
16
Fenis
Polipropileno ou vidro
1000 mL
1mL de H 2 SO 4
conc./L
48 horas**
Ferro*
Polipropileno ou vidro
500 mL
5 mL de HNO 3 conc./L
180 dias
No aplicvel
Polipropileno ou vidro
200 mL
Aps processo de
filtrao, adicionar 5mL
de HNO 3 conc./L
180 dias
No aplicvel
Fluoreto
polipropileno
100 mL
No aplicvel
28 dias
Fsforo
Polipropileno ou vidro
100 mL
No aplicvel
28 dias
Magnsio*
Polipropileno ou vidro
500 mL
5 mL de HNO 3 conc./L
180 dias
No aplicvel
Mangans*
Polipropileno ou vidro
500 mL
5 mL de HNO 3 conc./L
180 dias
No aplicvel
Ferro solvel*
17
Acondicionamento p/
transporte
03 meses
03 meses
Cobalto *
03 meses
Cobre *
03 meses
Cromo total *
03 meses
Exame Ictiopatolgico
Mnimo de 5 exemplares
20 dias
No aplicvel
Ferro *
03 meses
Mangans *
03 meses
Mercrio *
03 meses
Parmetro
Tipo de frasco
Chumbo *
Cdmio *
18
Nquel *
03 meses
Pesticida
Organoclorados**
Papel alumnio
14 dias
Zinco *
03 meses
19