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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y
TECNOLOGA DE LOS
ALIMENTOS
LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
ESTANCIAS
Laboratorio Agroalimentario Gmez-Beser
UNIVERSIDAD DE CRDOBA
FACULTAD DE VETERINARIA
Licenciatura en Ciencia y Tecnologa de los Alimentos
2
LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
NDICE
1.
1.2.
1.3.
Laboratorio Enolgico......................................................................... 7
1.4.
2.
2.2.
LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
1. Aspectos generales
Gmez-Beser es un laboratorio agoralimentario y de anlisis clnicos dotados de
la ms avanzada tecnologa para el anlisis de todo tipo de productos alimentarios
(materias primas, productos intermedios y productos terminados) y muestras clnicas.
Actualmente los Laboratorios cuentan con un equipo humano de profesionales
con diferente formacin pero complementaria, consiguiendo formar un equipo
multidisciplinar, capaz de dar respuesta a todas las demandas de todos los clientes.
Entre ellos se encuentran Bilogos, Tecnlogos de Alimentos, Farmacuticos,
Qumicos, Enlogos, tcnicos superiores en Medio Ambiente y Tcnicos superiores en
Anlisis Clnico.
Las muestras que se trabajan en el laboratorio y las tcnicas analticas que
emplean se centran en:
Anlisis microbiolgicos, fsico-qumicos y de aguas (alimentos)
Anlisis enolgicos
Anlisis de aguas y residuos
Anlisis clnicos
Anlisis de piscinas
Anlisis de tierras y residuos
Anlisis Legionella
Adems, consta de un equipo especializado que realizan consultora y asesora
tcnica tanto en productos como en procesos, para as dar una respuesta a los problemas
que la industria alimentaria encuentra en su produccin. Ofrecen:
Control de la Industria (Auditora e inspeccin)
Asesoramiento en Legislacin Tcnica alimentaria
Estudio de etiquetado de productos alimenticios
Diseo de fichas tcnicas de productos
Servicio de tramitacin ante la administracin
Estudios y Proyectos
Mejora de Rendimientos y Procesos
Implantacin de Sistemas de Calidad:
PGH (Planes Generales de Higiene)
APPCC (Anlisis de Peligros y Puntos de Control Crtico)
ISO 9000
ISO 2000
BRC
LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
1.1.
Laboratorio de Microbiologa
Aguas
Recuento de aerobios a 37 C
Recuento de aerobios a 22 C
Recuento de Coliformes totales
Recuento de Coliformes fecales
Recuento de Clostridium perfringens
Recuento de Clostridium sulfito reductores
Recuento de E. Coli
Investigacin de E. Coli
Recuento de Estafilococos aureus
Investigacin de Estafilococos aureus
Recuento de Estreptococos fecales
Deteccin y recuento de Legionella pneumophila
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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Alimentos
1.2.
Composicin nutricional
Estudios de caducidad
Estudios de potabilidad del agua
Caracterizaciones fsicas
Composicin qumica
Estudio de vinos y vinagres
Caracterizacin de sales
Elaboracin fichas tcnicas de producto
Anlisis de aguas residuales
Caracterizaciones fsicas
6
LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
1.3.
Cromatografa Inica
Cromatografa de Gases
Espectrofotometra de Absorcin Atmica
Espectrofotometra molecular: Visible y UV
Laboratorio Enolgico
Vino y vinagre
Extracto seco
Cenizas
Masa volmica
Nitrgeno
Densidad
pH
Plomo
Protenas
Hierro
Cobre
Acidez total (actica)
Grado alcohlico
Anhdrido sulfuroso
Relacin extracto seco /
acidez total
Metanol
Bebidas alcohlicas
Acidez voltil
Acidez total
cido ascrbico
cido ctrico
Anhdrido sulfuroso
Arsnico
Azcares
Cadmio
Calcio
Cenizas
Cloruros
Densidad
Extracto seco
Grado alcohlico
Hierro
pH
Plomo
Sacarosa
Ferrocianuro
Cobre
Nitrgeno fcilmente
asimilable
cido mlico
IP
1.4.
Abs. 280nm
BE
Tartrico
Lctico
Metanol
Succnico
Actico
Laboratorio Clnico
En los ltimos aos, los laboratorios han ido adaptndose a los avances
cientficos procurando incorporar la tecnologa de vanguardia y someterse a los
controles de calidad nacionales en internacionales, as como las BPL (Buenas Prcticas
de Laboratorio) en las instalaciones.
En esta estancia, se realizan anlisis de sangre y orina gracias al trabajo de ATS,
Tcnicos de Laboratorio y administrativos, que garantizan la calidad de los servicios
analticos.
LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Medio de cultivo
g/L
Estado
Utilidad
pH
Rappaport
76 g/L
Lquido
Enriquecimiento
Salmonella/Shigella (S/S)
7.3-7.7
MKTTN
26.8 g/L
Lquido*
Eniquecimiento S/S
7.4-7.8
XLD
(xilosa, lisina y
desoxicolato)
56.68
g/L
Slido
Crecimiento S/S
7.2-7.6
S/S
(Salmonella/Shigella)
63.1 g/L
Slido
Crecimiento S/S
7.2-7.6
37 g/L
Lquido
58 g/L
Slido*
Verde Brillante
40 g/L
Lquido
VRB
38 g/L
Slido
TSA
(Trypticase soja agar)
40 g/L
Slido
Caldo Triptfano
16 g/L
Lquido
TTC
(Cloruro trifenil
tetrazolio)
56 g/L
Slido
Confirmacin
Staphylococcus aureus
(S.A.)
Crecimiento S.A.
Confirmacin de Coliformes
totales (CT)
Crecimiento CT
Confirmacin CT y E. Coli
en aguas
Confirmacin CT y E. Coli
en aguas
Crecimiento CT y E. Coli en
aguas
9
7-7.4
7-7.4
7.2-7.6
7.2-7.6
7.1-7.5
7-7.4
7-7.4
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CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
TBX
(Tryptone Bile Agar)
EMB
(Eosina azul metileno)
36.5 g/L
Slido
Crecimiento Escherichia
Coli (E. Coli)
7-7.4
39.5 g/L
Slido
Confirmacin E. Coli
6.7-7.1
VRBG
39.5 g/L
Slido
Agar prpura
41.5 g/L
Slido
Crecimiento de
Enterobacterias (EB)
Confirmacin EB
Agua de peptona
20 g/L
Lquido
Crecimiento de bacterias
7-7.4
Agar nutritivo
28 g/L
Slido
7.2-7.6
YEAST
20g/L
Slido
17.5 g/L
Slido
Relacin
1:1
Slido
SB
(Slanetz y Bartley)
43.4 g/L
Slido
Crecimiento Enterococos
intestinales para pozos
6.8-7.2
m-CP
(medio Clostridium
Perfringens)
35.5 g/L
Slido*
Crecimiento Clostridium
perfringens para pozos
7.2-7.8
DG18
(Dichloran Glicerol)
31.7 g/
820mL
Slido*
Crecimiento de Mohos y
Levaduras
5.4-5.8
OGYEA
(Sabouraud
Oxitetraciclina)
37 g/L
Slido
Crecimiento de Mohos y
Levaduras
6.8-7.2
Slido*
Crecimiento Pseudomona
aeruginosa
7-7.4
Slido
Crecimiento Estreptococos
fecales
6.8-7.2
Slido
Crecimiento Clostridium
sulfito reductor
6.8-7.2
Slido
Crecimiento Clostridium
sulfito reductor
6.8-7.2
Slido
Confirmacin Enterococos
intestinales
6.8-7.2
PCA
(Plate count agar)
PCA + LD
(Leche descremada)
CET
45.3 g/L
(Agar Cetrimida)
KAA
(Kanamicina, esculina,
48 g/L
azida)
SPS
(Sulfito Sulfadiazina
41.3 g/L
plimixina)
TSC
(Agar Triptosa-Sulfito45 g/L
Cicloserina)
BE
64.5 g/L
(Bilis Esculina)
(* Medios que tienen suplemento)
10
7.2-7.6
6.8-7.2
6-6.4
6.8-7.2
6.7-7
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CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Material:
-
Probeta de 1 litro
Matraces Erlenmeyer de 1 litro
Bao mara
Balanza analtica
Agitador
Algodn
Imanes
Botes de 200 y 500 mL
Equipo:
- Autoclave
Procedimiento:
1. En la probeta, medir 1 litro de agua destilada y aadirla al matraz.
Colocar en el bao mara para aumentar su temperatura. Esto facilitar tanto la
disolucin del medio, como el posterior estado de ebullicin con el que deben
concluir.
2. Pesar los reactivos necesarios para preparar 1 litro de medio (cantidad
indicada por el fabricante). Verter el contenido en el matraz con agua destilada,
colocado sobre un agitador con un imn en su interior con el fin de disolver y
homogeneizar el medio.
3. Tapar el matraz con algodn para evitar la evaporacin del agua. Una vez
homogeneizado, se coloca en un calefactor, donde estar en continua agitacin hasta
alcanzar el estado de ebullicin, que ser el estado donde daremos por acabada la
preparacin del medio.
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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Para los medios sealados con un asterisco (*), una vez llegado al estado de
ebullicin, se le aade el suplemento adecuado:
- Para m-CP: suplemento especfico del medio.
- Para DG18: Glicerina.
- Para CET: Glicerina.
- Para BP: Yema de huevo con telurito.
- Para MKTTN: suplemento especfico del medio.
4. Tras retirar el Erlenmeyer del calefactor, se extrae el imn con ayuda de
otro imn y, antes de verter el medio en los botes donde se conservarn, se
introducen dos muestras del medio en dos tubos estriles, donde uno se utilizar para
medir el pH del medio, y el otro para, posteriormente, esterilizar e incubar en la
estufa, con el fin de comprobar que el medio est totalmente estril.
Verter en los botes; para medios slidos se emplearn botes de 200 ml, y para
medios lquidos botes de 500ml. Posteriormente, se pega un trozo de cinta de testigo
para autoclave, y se rotulan con la siguiente informacin:
- Nombre del medio, por ejemplo: BP.
- Lote: n de la semana del ao, y ao de la realizacin del medio. Por
ejemplo: L29/13.
- Fecha de caducidad: Siendo sta para los medios lquidos 3 meses desde
su elaboracin, y para los medios slidos 2 meses tras su preparacin.
Por ejemplo: 20/09/13
5. Preparados los tarros, se colocan en las canastas del autoclave para
esterilizarlos a 121C durante 20 minutos.
6.
12
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CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
13
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CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
2.2.
Anlisis de aguas
2.2.1. Filtracin de aguas por membrana
Material:
-
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CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Procedimiento:
Para realizar la filtracin de aguas por membrana utilizaremos un mechero
Bunsen para trabajar en condiciones estriles.
1. Limpiar con alcohol la superficie del portafiltros. Para ello, vertemos alcohol
en el portafiltros y flameamos con el mechero Bunsen.
2. Colocar un filtro de membrana sobre el soporte con la ayuda de unas pinzas
de acero previamente flameadas con alcohol.
3. Situar un recipiente estril sobre el soporte hasta que est fijo.
4. Verter 100 ml del agua problema en el recipiente, y aplicar el vaco hasta
que el lquido se haya filtrado.
5. Romper el vaco y extraer el recipiente. Con las pinzas flameadas el filtro del
soporte.
6. Se coloca el filtro dentro de una plaza Petri sobre el medio de cultivo
adecuado, con la cuadrcula hacia arriba, procurando que no se formen
burbujas entre la membrana y el medio de cultivo.
7. Las placas se incuban en posicin invertida en la estufa con la temperatura
adecuada.
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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Microorganismos a
analizar
Aerobios mesfilos a
37C
Medio de Crecimiento
Temperatura
de incubacin
Tiempo de
incubacin
37C
48 horas
Coliformes totales
30C
24 horas
Coliformes fecales
44.5C
24 horas
Staphylococcus aureus
Filtro en placa de BP
37C
48 horas
Pseudomonas
37C
48 horas
Estreptococos fecales
37C
48 horas
Microorganismos a
analizar
Aerobios mesfilos a
37C
Medio de Crecimiento
Temperatura
de incubacin
Tiempo de
incubacin
37C
48 horas
Coliformes totales
30C
24 horas
Coliformes fecales
44.5C
24 horas
Staphylococcus aureus
Filtro en placa de BP
37C
48 horas
Pseudomonas
37C
48 horas
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CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Microorganismos a
analizar
Coliformes totales y
Escherichia coli
Medio de Crecimiento
Temperatura
de incubacin
Tiempo de
incubacin
37C
24 horas
Microorganismos a
analizar
Aerobios mesfilos a
22C
Medio de Crecimiento
Temperatura
de incubacin
Tiempo de
incubacin
22C
48 horas
Clostridium
perfringens
44.5C en
campana de
anaerobiosis
24 horas
Filtro en placa SB
37C
48 horas
37C
24 horas
Enterococos
intestinales
Coliformes totales
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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
2.2.2. Lecturas
Transcurrido el tiempo de incubacin a la temperatura indicada, se procede a las
lecturas.
Lecturas
Colonias caractersticas
Aerobios mesfilos
Coliformes totales
Coliformes fecales
Staphylococcus aureus
Pseudomonas
Estreptococos fecales
Clostridium perfringens
Enterococos intestinales
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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
2.2.3. Confirmaciones
Si hay presencia de alguna colonia sospechosa en las lecturas realizadas, se
procede a las confirmaciones.
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CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Confirmacin de Pseudomonas
Si al aplicar la luz UV en la placa se observan colonias claramente fluorescentes,
se dice que el resultado es positivo en Pseudomonas.
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ESTANCIAS
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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Material:
-
Procedimiento:
Para realizar la filtracin de aguas por membrana utilizaremos un mechero
Bunsen para garantizar las condiciones estriles.
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CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Microorganismo a
investigar
Medio de
crecimiento
Temperatura de
incubacin
Tiempo de
incubacin
Legionella
Siembra masiva en
placa de GVPC
37C
10 das
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CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Lectura de Legionella
Las lecturas se realizan desde el tercer o cuarto da hasta el final de la
incubacin. Las colonias tpicas de Legionella son colonias blancas con un halo ms
claro alrededor.
En el caso de que las colonias sean sospechosas, se proceder a su confirmacin.
Confirmacin de Legionella
La placa de GVPC se divide en 3 cuadrantes, nombrndolas como A, B y C.
Se atemperar una placa de BCY (sin cistena) y otra de BCYE (con cistena), y
se dividirn tambin en 3 cuadrantes, nombrndolos de la misma manera.
Posteriormente, con ayuda de un asa estril, se toman varias colonias del
cuadrante A de la placa de GVPC y se siembran en el cuadrante A de la placa BCY. A
continuacin, se realiza lo mismo con la placa BCYE, y as con el resto de cuadrantes.
Una vez sembradas las placas, se introducen en la estufa de 37 C durante 4 das.
Transcurrido ese tiempo, debe observarse que en la placa BCYE ha habido
crecimiento, y en la de BCY hay ausencia de ste. Si es as, es posible que sea
Legionella y se procedera a la siguiente confirmacin.
Si no se ha producido crecimiento en ninguna placa, o lo ha habido en todas, se
descarta la posibilidad.
En el caso de sospecha de Legionella, se efecta la confirmacin con un kit
comercial de confirmacin de Legionella, que se basa en la aglutinacin del ltex.
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ESTANCIAS
Procedimiento:
1. En una tarjeta de aglutinacin, se vierte una gota de suspensin tampn y
una gota de Legionella ltex en cada uno de los crculos numerados de la
tarjeta.
2. Posteriormente, en el crculo nmero 1 se aadir una gota de control
positivo, y en el crculo 2, una gota de control negativo. Si se observa que en
el crculo nmero 1 se produce un precipitado, ausente en el crculo 2, se
interpreta que es Legionella positivo.
3. A continuacin, se coge una colonia de la placa BCYE con ayuda de un asa
estril, y se mezcla con los reactivos vertidos anteriormente en los crculos 3,
4, 5 y 6.
4. Se tomarn como Legionella positivo aquellos crculos que, tras mezclarlos
con la colonia a investigar, aparece aglutinacin.
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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
2.3.
Anlisis de alimentos
2.3.1. Microbiologa de alimentos
Material:
-
Mechero Bunsen
Agua de peptona
Probeta de 100 ml
Bolsas estriles Stomacher
Balanza analtica
Hojas de bistur
Depresores estriles
Pipeta automtica de 1 ml
Pipeta manual de 10 ml
Asas estriles
Tubos de ensayo estriles
Placas preparadas de Baird
Parker y DG18
Equipos:
- Campana de flujo laminar
- Homogeneizador Stomacher
Procedimiento:
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ESTANCIAS
Las determinaciones y diluciones que hay que realizar varan segn el grupo de
alimentos al que pertenece la muestra.
Grupos
Determinaciones
Diluciones
A (alimentos fros)
10-3
B (alimentos calientes)
10-2
Dulce
10-4
Pescado crudo
10-4
Pescado cocido
10-3
Seco-salado
Molusco bivalvo
Conserva
AM, CSR, CP
Fruta / Verdura
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ESTANCIAS
Productos aperitivos
Preparados crnicos
10-4
Carne cruda
10-4
Huevos
10-4
Helados
Especias
AM = Aerobios mesfilos
S/S = Salmonella/Shigella
CT = Coliformes totales
SAL = Salmonella
EC = Escherichia coli
LIST = Listeria
CP = Clostridium perfringens
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ESTANCIAS
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ESTANCIAS
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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Microorganismos a
analizar
Medio de Crecimiento
Temperatura
de incubacin
Tiempo de
incubacin
Aerobios mesfilos
PCA
30C
72 horas
Coliformes totales
30C
24 horas
Coliformes fecales
44.5C
24 horas
Enterobacterias
37C
24 horas
Escherichia coli
TBX
44.5 C
24 horas
Clostridium sulfito
reductor
SPS
37C
24 horas
Staphylococcus aureus
BP
37C
48 horas
Estreptococos fecales
KAA
37C
48 horas
20C
5 das
20C
10 das
20C
5 das
Mohos y levaduras
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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
2.3.2. Lecturas
Transcurrido el tiempo de incubacin a la temperatura indicada, se procede a las
lecturas de placas.
Lecturas
Aerobios mesfilos
Coliformes totales
Colonias caractersticas
Todas aquellas que crezcan, excepto
aquellas que lo hagan en la superficie
Colonias rosas, normalmente con forma de
elipse con precipitado alrededor
Coliformes fecales
Enterobacterias
Escherichia coli
Colonias verdes
Estreptococos fecales
Mohos y levaduras
Salmonella/Shigella
Listeria Monocytogenes
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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
2.3.3. Confirmaciones
Si existe presencia de alguna colonia sospechosa en las lecturas realizadas se
procede a las confirmaciones.
Confirmacin de Enterobacterias
Se pasa una colonia tpica (rosa fucsia/violeta con precipitado alrededor) a una
placa de Agar Nutritivo (AN) y se realiza siembra masiva. Esta placa se incuba a 37C
durante 24 horas.
Pasado este tiempo, se realiza la prueba de la oxidasa al crecimiento presente en
la placa de AN. Si la prueba oxidasa da negativo (no vira a color azul), se pasa a una
placa de Agar Prpura (AP), realizando siembra masiva con ayuda de un asa de siembra
estril, y se incuba a 37C durante 24 horas.
Se concluye el resultado positivo a la presencia de Enterobacterias en el
alimento si, transcurrido el tiempo de incubacin, el medio de la placa de AP vira a
amarillo.
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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
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ESTANCIAS
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LICENCIATURA EN
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ESTANCIAS
Enterotube test
El test Enterotube consiste en un tubo de plstico con distintos compartimientos,
formado por 12 medios de cultivo diferentes, que permiten la determinacin de 15
reacciones bioqumicas.
Est concebido para la inoculacin simultnea
de los 12 medios con una sola colonia, utilizando la
aguja de inoculacin dispuesta en el centro.
La combinacin de reacciones resultante,
junto con la gua de interpretacin (libro de cdigos),
permite la identificacin de Enterobacterias con
importancia clnica.
Las reacciones qumicas que tienen lugar en este test son las siguientes:
Prueba
Reaccin
Negativo
Positivo
Glucosa
Fermentacin de glucosa
De rojo a naranja
De amarillo a dorado
Produccin de gas en la
fermentacin de la glucosa
Descarboxilacin de la
lisina
Descarboxilacin de la
ornitina
Sin desprendimiento
de cera
Con desprendimiento
de cera
Amarillo
Morado
Amarillo
Morado
Gas
Lisina
Ornitina
H2S
Produccin de H2S
De beige a mbar
claro
Negro
Indol
Produccin de indol
Incoloro
Rosa o rojo
Adonitol
Fermentacin de adonitol
De rojo a naranja
De amarillo a dorado
Lactosa
Fermentacin de lactosa
De rojo a naranja
De amarillo a dorado
Arabinosa
Fermentacin de arabinosa
De rojo a naranja
De amarillo a dorado
Sorbitol
Fermentacin de sorbitol
De rojo a naranja
De amarillo a dorado
VP (VogesProskauer)
Produccin de acetona
De incoloro a mbar
claro
Rojo
Dulcitol
Fermentacin de dulcitol
Verde
De amarillo a dorado
PA
Desaminacin de
fenilalanina
De negro a gris
oscuro
Urea
Hidrlisis de la urea
Cualquier tono de
verde
De incoloro a mbar
claro
Citrato
Verde
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LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Procedimiento:
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ESTANCIAS
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ESTANCIAS
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LICENCIATURA EN
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ESTANCIAS
A (alimentos en crudo)
B (alimentos tratados
con calor)
Pescados crudos
Pescados cocidos
Pescados seco-salado
Frutas y verduras
Carnes
Helados
Especias
Procedimiento:
Para el estudio de Listeria en alimentos se realiza una dilucin 1:10, tomando 5
gramos de alimento y 45 ml de Caldo One.
Al igual que anteriormente, se debe crear un ambiente estril encendiendo un
mechero Bunsen. Se coloca la bolsa de Stomacher sobre la balanza, con la apertura
hacia arriba y fijada mediante un adhesivo. Taramos la balanza, y aadimos 5 gramos
del alimento a investigar con ayuda de un depresor estril y una hoja de bistur, si fuera
necesario.
A continuacin, se aaden 45 ml de Caldo One y se homogeniza introduciendo
la bolsa en el Stomacher durante varios segundos.
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CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Confirmacin de Listeria
En primer lugar, se realizan 3 pruebas de forma directa: Oxidasa (-), Catalasa
(+), y prueba de ltex aglutinacin (-).
-
41
LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Kit Microbact
1. Con un asa estril, se toma la mayor cantidad posible de colonias
sospechosas, y se introducen en un bote que contiene una solucin que
provoca la estabilidad y la proliferacin de la bacteria. Se homogeniza
durante unos segundos con el agitador Vrtex.
2. Una vez homogeneizado, con ayuda de una pipeta automtica, se inoculan
0.1 ml en casa pocillo del Microbact. Adems, en el ltimo pocillo se aade
0.1 ml de hemolisina.
3. Incubamos el Microbact a 37C en posicin horizontal. La lectura puede
realizarse transcurridas entre 4-24 horas de incubacin.
4. Terminado el tiempo de incubacin, se observa un cambio de color debido al
contacto de la bacteria con los reactivos de cada pocillo. El kit Microbact
incorpora una plantilla en la que se explican los posibles cambios de color y
su significado (positivo o negativo).
42
LICENCIATURA EN
CIENCIA Y TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS
ESTANCIAS
Bibliografa
Programas Normalizados de Trabajo de Gmez-Beser
Colaboracin de Elena Berejano Paraj
http://www.laboratoriosgomezbeser.com/
http://www.aesan.msc.es/AESAN/web/cadena_alimentaria/detalle/criterios_micr
obiologicos.shtml
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