LABORATORIO DE BIOLOGA MOLECULAR

UNIVERSIDAD DE CORDOBA
PROGRAMA DE BIOLOGA
LABORATORIO N 1 RECOMENDACIONES TCNICAS
EN LAS PRCTICAS DE LABORATORIO
1. OBJETIVO
Presentar recomendaciones bsicas y tcnicas previas a las prcticas de
laboratorio.
2. RESPONSABLES
Docente a cargo de la prctica, auxiliar de laboratorio, monitor, estudiantes de
biologa y cualquier otra persona que ejecute prcticas en el laboratorio de
biologa molecular.
3. DEFINICION DE REA DE TRABAJO
Superficie donde se genere, practique o ejecute cualquier actividad propia del
laboratorio, en el laboratorio de biologa molecular existen tres reas de trabajo
debidamente sealadas e identificadas como son rea de Pre-PCR, PCR y
Post-PCR
4. RECOMENDACIONES TCNICAS
Presentarse cinco (15) minutos antes del comienzo de la prctica.
Iniciar la prctica de laboratorio lo ms pronto posible al ingreso de los
estudiantes
Ubicarse en grupos de trabajo de forma equitativa, igual nmeros de alumnos
por grupo.
Cada grupo de prcticas se responsabilizar de su zona de trabajo y de su
material.
Si presenta heridas o rasguos en la piel cubrir esto con una cura o un vendaje
apropiado e informe a el docente a cargo.
Antes de iniciar las practicas colocarse la bata de laboratorio, la cual debe ser
preferiblemente manga larga y 30 centmetros por debajo de la cintura.
Despojarse de todo tipo de joyas y adornos.
Usar calzado cerrado de material resistente e impermeable.
Utilizar siempre y correctamente la bata de laboratorio y en caso necesario
utilizar gorro para mantener el cabello recogido y cubierto totalmente.
Usar guantes de ltex limpios y estriles, y desecharlos una vez terminada la
practica.
Lavar bien las manos antes de empezar a comenzar la practica de laboratorio.
Emplear guantes y cubreboca en el momento en que este en contacto directo
con reactivos, muestras o material esterilizado.
Efectuar limpieza y desinfeccin del rea de trabajo una vez haya concluido la
prctica, empleando soluciones desinfectantes.

Nunca transporte reactivos o muestras abiertos, fuera del laboratorio.

No pipetear con la boca reactivos, utilice los dispositivos para tal fin.
Las reas del laboratorio estn destinadas estrictamente a las actividades de
investigacin por lo cual se excluye cualquier otro uso, inclusive la
manipulacin y consumo de alimentos, la aplicacin de cosmticos y lentes de
contacto.
No corra o grite dentro del laboratorio.
Al finalizar la jornada de prcticas asegrese que toda las llaves y controles de
agua estn cerrados y verificar si existen fugas, en tal caso avisar al
departamento de mantenimiento.
Despojarse de la bata, gorro, cubreboca y guantes una vez halla terminado la
practica, no salir al exterior del laboratorio con la bata puesta.
Mantenga las luces y equipos elctricos apagados y desconectados cuando no
estn en uso.
Conocer las normas de bioseguridad descritas en el manual de bioseguridad.

MANUAL DE BIOSEGURIDAD
1. OBJETIVO
Inculcar a los estudiantes una mentalidad preventiva que minimice la
probabilidad de que ocurran accidentes en el laboratorio de Biologa molecular.
2. RESPONSABLES
Docente a cargo de la prctica, auxiliar de laboratorio, estudiantes de biologa,
monitor y cualquier otra persona que ejecute prcticas en el laboratorio de
biologa molecular.
3. ALCANCE
Esta gua establece las pautas y recomendaciones necesarias para tener un
ambiente controlado y libre de peligros en el momento de realizar las practicas
de laboratorio
4. DEFINICIONES
Bioseguridad:
Conjunto de medidas preventivas, destinadas a mantener el control de factores
de riesgo laborales procedentes de agentes biolgicos, fsicos o qumicos,
logrando la prevencin de impactos nocivos, asegurando que el desarrollo o
producto final de dichos procedimientos no atenten contra la salud y seguridad
de los estudiantes y todo el personal que realice practicas en el laboratorio.
Toda muestra, reactivo o material que este en contacto directo con estos
deben ser considerados como potencialmente infectantes y nocivos y se debe
tomar las precauciones necesarias para prevenir que ocurra algn tipo de
accidente.
5. INSTRUCCIONES AL PERSONAL
5.1 El auxiliar de laboratorio en cuestiones de bioseguridad es su jefe
inmediato, por lo tanto debe estar atento a sus sugerencias e indicaciones.
5.2 Informe al auxiliar de laboratorio o al docente cualquier riesgo, incidente o
accidente que usted detecte, a fin de que se tomen las medidas preventivas
correctivas necesarias.
5.3 Los primeros auxilios sern prestados, por el personal del servicio medico,
en el bienestar Universitario.
6.1 Pasos a seguir despus del accidente
6.1.1 Lavado del rea expuesta:
Exposicin Perctanea:
Lave inmediatamente el rea expuesta con agua y jabn germicida; si la herida
est sangrando, apritela o estimule el sangrado, siempre que el rea corporal

lo tolere. Posteriormente, aplique solucin desinfectante despus de concluido

el lavado.
6.1.1.2 Exposicin en Mucosas : Lave profusamente el rea con agua o
solucin salina.
6.1.1.3 Exposicin en Piel No Intacta : Lave el rea profusamente con solucin
salina y aplique solucin antisptica.
6.1.1.4 Exposicin en Piel Intacta : Lave simplemente el rea con agua y jabn
profusamente.
6.1.2 Evaluacin del accidente
6.1.2.1 Reportar accidente: Todos los estudiantes y el personal que labore en
el laboratorio deben conocer la importancia de informar inmediatamente una
exposicin ocupacional y tener garantas de la confidencialidad y el respeto con
el cual ser tratado.
6.1.2.2 El reporte se debe hacer dentro de las primeras 24 - 72 horas de
presentado el accidente.
6.1.2.3 El auxiliar de laboratorio debe registrar todos los accidentes laborales
que se presenten en el laboratorio.
SIMBOLOGA PREVENTIVA DE ACCIDENTES
Smbolo
Leyenda
las superficies pueden calentarse durante
su uso.
Esta es capaz de generar corrientes
letales. Utilice las mismas precauciones
que con cualquier dispositivo elctrico. No
opere sin la cubierta en su lugar. No opere
en humedad o ambientes hmedos en los
cuales esta pueda causar dao en los
componentes elctricos internos, no opere
con cables conectores con alambres
sueltos
radiacin ultravioleta que puede ser
perjudicial para la piel y los ojos, no se
exponga a esta radiacin sin proteccin de
ocular o de piel
Este
aviso
alerta
de
situaciones
potencialmente peligrosas.

8.1 Etiqueta de un producto qumico

El etiquetado reglamentario de las sustancias y los preparados peligrosos es un
medio sencillo para informarle y alertarle sobre los peligros relacionados con su
utilizacin. Cuando los productos son transvasados a otros envases, la etiqueta
deber ser sistemticamente reproducida.

8.1.1 En las etiquetas habr, entre otras cosas, uno o varios smbolos de
peligro, as como un nmero restringido de indicaciones sobre los riesgos y
sobre las medidas de prevencin a adoptar.
8.1.2 La etiqueta le informa inmediatamente sobre el producto y le permite
evitar las confusiones y los errores a la hora de utilizarlo.
8.1.3 La etiqueta es imprescindible en caso de accidente, le dar las
indicaciones necesarias sobre el comportamiento a seguir en caso de
accidente.

1 Identificacin del producto (nombre qumico de la sustancia o nombre

comercial del preparado).
2 Composicin (para los preparados relacin de sustancias peligrosas
presentes, segn concentracin y toxicidad).
3 Responsable de la comercializacin (Nombre, direccin y telfono).
4 Identificacin de peligros.
5 Descripcin del riesgo .
6 Medidas preventivas.

8.2 Pictograma de productos qumicos.

Riesgos de incendio o explosin
Smbolo

Significado

Descripcin de los riegos

Productos de fcil inflamacin

bajo la accin de una fuente de
energa
(llama,
chispa)
a
temperatura ambiente.
Productos que pueden inflamarse
F+
fcilmente
Extremadamente bajo la accin de una fuente de
inflamable
energa (llama,
chispa) incluso por debajo de
los 0.

Medidas
preventivas

F Fcilmente
inflamable

Prohibido fumar.
Almacenar
los
productos en un
lugar
bien
ventilado
Guardar
los
productos
inflamables
(smbolo F) bien
separados de los
Productos que pueden favorecer productos
O Comburente
o activar la
comburentes (O).
combustin.
No utilizar cerca
de una fuente de
calor.
No llevar ropas
sintticas.
Prohibido fumar.
Evitar el exceso de
calor y proteger
Productos que pueden explotar contra los rayos
E Explosivo.
por la accin del calor, de un solares.
choque o de un rozamiento
No ponerlos cerca
de
fuentes
de
calor,
lmparas,
radiadores, etc

Riesgos de alteracin de la salud

Smbolo

Significado

Descripcin de los riegos

cancergenos o problemas
de esterilidad.

Productos peligrosos en
caso de penetracin en el
organismo por la nariz, la boca o
a travs de la piel.
T Txico

Productos que pueden

alterar el conjunto del organismo
o lesionar nicamente, ciertos
T+

Muy rganos:
pulmones,
hgado,
Txico
corazn, nervios.

Pueden causar profundas

alteraciones en el organismo,
incluso la muerte. Dependiendo
X n Nocivo
del grado de toxicidad que
presentan, estos productos son
calificados de Txicos y de Muy
Txicos o de Nocivos.

Ciertos de estos productos

son definidos como cancergenos,
X I Irritante
ya que pueden provocar cncer.

Otros son definidos como

mutgenos, ya que pueden
implicar mutaciones genticas
que pueden provocar tumores

Productos que pueden

provocar la destruccin de tejidos
vivos..
C Corrosivo
Queman la piel y las
mucosas,
pueden
producir
lesiones graves que pueden
provocar cicatrices.

Medidas
preventivas

R
Radioactivo

Prohibido fumar
Utilizar Equipos de
Proteccin
Individual
(EPI)
para
evitar
cualquier contacto.
Trabajar en locales
bien ventilados.
Buena
higiene:
lavarse las manos,
no comer durante la
utilizacin de los
productos.
Conservar
los
productos en el
envase de origen.
Tras el uso, lavarse
bien la cara y las
manos.
Verter siempre el
producto en el agua
y no al contrario.

Riesgos para el medio ambiente

Smbolo

Significado

Descripcin de los riegos

Medidas
preventivas

Tratar el producto y
Se
trata
de
sustancias
N Peligro
sus
desechos
contaminantes y txicas para la
para el Medio
(separe,
recicle,
fauna, para el aire, la capa de
Ambiente
elimine), de acuerdo
ozono.
con la legislacin.

6 ALMACENAMIENTO DE SUSTANCIAS TERATOGNAS, MUTGENICAS

Y CANCERGENAS
Son aquellas sustancias que estn clasificadas como carcingenos a los
humanos o razonablemente sospechoso como cancerigenos a los humanos;
teratgenos o mutagnicas en las monografas de la Agencia Internacional del
Cncer (IARC) o estn catalogadas como tal por el proveedor de la sustancia.
Almacene las sustancias carcingenas, mutagnicas y teratgenas separadas
de otras sustancias. Identifique en un croquis o un plano de laboratorio la
localizacin de estas sustancias. Limita la cantidad almacenada de estas
sustancias a lo estrictamente necesario para una semana de trabajo. Mantenga
un inventario de las sustancias carcingenas en el laboratorio.
Mantenga al personal femenino en estado de gestacin totalmente aislado de
las reas donde se utilicen estas sustancias.
10. INSTRUCCIONES PARA EL TRATAMIENTO DE ACCIDENTES
En caso de accidente, avisa inmediatamente al profesor. Recuerda que no
debes llevar a cabo actuaciones inseguras, si vas a realizar los primeros
auxilios tienes que estar seguro de que no vas a empeorar el estado del
accidentado (proteccin) y asegrate que t no sufres riesgo (autoproteccin).

11. NORMAS DE SEGURIDAD EN LA UTILIZACIN DE EQUIPOS

11.1Normas generales
11.1.1 Los equipos y aparatos nunca deben colocarse en zonas de paso, en
particular en los pasillos del laboratorio.
11.1.2 Todos los aparatos con toma elctrica debern cumplir las normativas
de seguridad correspondientes. Nunca deben utilizarse en zonas mal aisladas y
expuestas a la humedad.

11.1.3 Las fuentes de calor (calentadores, termobloques, etc.), sobre todo si se

alcanzan temperaturas elevadas, debern estar debidamente sealizadas para
evitar quemaduras accidentales.
11.1.4 Todos los procedimientos de utilizacin de aparatos deberan contar
obligatoriamente con apartados relativos a su utilizacin segura.
11.2 Nevera
Un adecuado mantenimiento, limpieza y desinfeccin sistemticos de los
aparatos reduce considerablemente los riesgos asociados a su utilizacin. Sin
embargo, aun en estas condiciones, hay que tener en cuenta lo siguiente:
11.2.1 No deben almacenarse cultivos de microorganismos patgenos por
inhalacin en recipientes que no estn convenientemente cerrados,
especialmente si la cmara tiene un sistema de circulacin de aire.
11.2.2 No deben almacenarse reactivos que contengan compuestos voltiles
inflamables (ter etlico, por ejemplo) en neveras que no posean un sistema de
proteccin antideflagracin. En los aparatos de tipo domstico que se utilizan
en el laboratorio debe anularse la lmpara de la luz.
11.3Congelador
La congelacin es un proceso que mantiene la viabilidad de muchas muestras
de ADN, de ah un potencial riesgo y las siguientes recomendaciones:
11.3.1 Tratar de identificar en ficheros, listas, etc. el contenido de lo
almacenado y sus riesgos potenciales.
11.3.2 El material potencialmente infeccioso debe colocarse en tubos,
recipientes, etc. bien cerrados. No se llenarn completamente, para evitar que
rebosen por efecto del aumento de volumen tras la congelacin.
11.3.3 Descongelar peridicamente, limpiar y desinfectar si fuese procedente.
11.3.4 Utilizar guantes para manipular el contenido. Si la temperatura es baja
(por ejemplo -70C o inferior), los guantes representan una proteccin
adicional.
11.4 Incubadoras
La limpieza y la desinfeccin, peridicas y sistemticas, son el mtodo
recomendable para reducir los riesgos derivados de la contaminacin
accidental del personal del laboratorio.
11.5Termociclador Y Bao Termorregulado
11.5.1 Los termocicladores constituyen una nueva fuente de accidentes, entre
los ms frecuentes son las explosiones cuando se usan para calentar las
muestras, ya que la diferencia de velocidad de calentamiento produce burbujas
que pueden estallar.
11.5.2 Las botellas o matraces deben tener el tapn aflojado, ya que si est
cerrado estallan fcilmente.
11.5.3 Estar siempre presente, con la ropa y pantalla facial adecuadas, y
controlar la intensidad del aparato, que slo puede ser la mxima con agua y la
mnima si se usa con gel de agarosa.

11.5.4 Deber existir una tabla bien visible de los tiempos en cada posicin del
potencimetro y de las cantidades a emplear.
11.6Centrfuga
Los mayores riesgos derivan, sobre todo, de la contaminacin por los aerosoles
generados durante la centrifugacin de materiales biolgicos y, en menor
medida, de los traumatismos accidentales. Se recomienda:
11.6.1 Cuando se centrifugue material biolgico potencialmente infeccioso
deben utilizarse tubos cerrados; la centrfuga debe disponer de rotores o
cestillos de seguridad que protejan al operador de los posibles aerosoles.
11.6.2 La rotura accidental de un tubo y su vertido en la cubeta representa una
incidencia importante que debe ser comunicada inmediatamente al auxiliar de
laboratorio o al docente responsable de la prctica, de forma que se proceda a
la desinfeccin segura del aparato.