UNIVERSIDAD Autnoma DE

GUERRERO
UNIDAD Acadmica DE CIENCIAS
NATURALES
Qumico Farmacutico Bilogo
Hematologa

Prctica 2: EXTRACCIN, TINCIN Y OBSERVACIN

DE MEDULA SEA.
Mara Elena Ramrez Salazar

M. C. Sandra Quintana Ponce

GRUPO: 602
Equipo: 5

Chilpancingo de los Bravo Guerrero a, 26 de febrero de 2015

Prctica 2: EXTRACCIN, TINCIN Y OBSERVACIN DE MDULA SEA.
OBJETIVOS:

Extraer mdula sea de fmur de conejo, realizar el extendido en

portaobjetos, teir con la coloracin de Wrigth.
Observar, identificar y dibujar todos los estados de maduracin de las
clulas de la mdula sea.

INTRODUCCIN Y FUNDAMENTOS:
La medula sea es un tejido situado en el interior de algunos huesos en los
adultos cuya finalidad bsica es la fabricacin de las clulas sanguneas.
Habitualmente, se llaman clulas sanguneas a los leucocitos (glbulos blancos),
hemates (glbulos rojos o eritrocitos) y plaquetas (o trombocitos).
El material lquido obtenido se puede someter a mltiples estudios segn requiera
la situacin patolgica que ha llevado a la realizacin de la prueba. Hoy en da,
estos estudios especiales son prcticamente imprescindibles para la tipificacin de
muchas enfermedades que afectan a la medula sea. El inmunofenotipo o estudio
mediante citometra de flujo, los estudios citogenticos (cariotipos, FISH), los
cultivos celulares, los estudios moleculares de genes especficos y los cultivos
microbiolgicos son algunos de estos estudios especiales frecuentemente
realizados con el material medular extrado.
El estudio citolgico se realiza sobre una gota (copos) del material obtenido
extendida en un portaobjetos y teido mediante colorantes especficos que nos
permitirn identificar observando bajo el microscopio las caractersticas y linaje de
las clulas normales y patolgicas existentes en la medula sea. El uso de
diferentes tipos de colorantes y tcnicas, (Ej: tinciones de Wright,
mieloperoxidasas) permite distinguir mejor algunas estirpes de clulas. La
realizacin de varias tinciones permitir afinar el diagnstico.
Se define como frote, frotis o extendido, a la preparacin microscpica delgada y
transparente, extendida entre dos cristales (porta o cubreobjetos), obtenida de un
lquido orgnico espeso o tejido semilquido o pastoso (sangre, aspirados,
secreciones, exudados, etc.)
El frote perifrico se utiliza para el estudio de las caractersticas citolgicas de las
clulas de la sangre, lo cual permite valorar el funcionamiento general de la
mdula sea a travs de sus componentes celulares, lo cual implica la evaluacin
de las lneas eritrocticas, leucocitaria y megacarioctica, determinando

anormalidades en forma, tamao, color e inclusiones citoplasmticas, dando una

medida cuantitativa y cualitativa de los elementos que lo conforman.
La preparacin y tincin de un extendido de sangre perifrica o de mdula sea es
una tcnica fundamental en hematologa, ya que la informacin obtenida puede
conllevar a:
1) El diagnstico correcto de una enfermedad.
2) Orientar al clnico para brindar la teraputica adecuada.
3) Monitorear el proceso de recuperacin del paciente.

MATERIAL:

Portaobjetos
Jeringa
Coloracin Wrigth
Buffer pH 6.4
Metanol

Microscopio
Agua destilada
Rejilla de tincin

PROCEDIMIENTO:

1.
2.
3.
4.
5.

Preparar frotis
Fijar con metanol
Teir con el colorante de Wright y dejar reposar 4 minutos.
Agregar solucin buffer al 6.4 y reposar por 9 minutos.
Enjuagar con agua destilada.

Pierna de conejo de

la cual se extraer
el

fmur

obtencin

Extraccin del
fmur.

Extraccin
medula
sea
fmur de conejo.

para
de

medula sea

Colocacin de
en
medula
portaobjetos.

la
el

Medula
sea
portaobjetos.

sobre

Realizacin del
frotis.

de
de

Realizacin de la
tincin de Wright y
solucin buffer.

Reposo despus de
agregar
solucin
Wright y sustancia
buffer.

Enjuague
del
colorante para su
posterior
observacin
al
microscopio.

DISCUSIN:

DISCUSIN:

La prctica consisti en extraer medula sea de fmur de conejo, realizar

un frotis, teirla con colorante Wright, para su posterior observacin al
microscopio y poder apreciar las diferentes clulas que la conforman as
como su etapa de maduracin de cada una de estas clulas.

En la tincin que realizamos no fue posible apreciar de manera correcta las

diferentes etapas de maduracin de las clulas esto fue debido a que la
tincin no fue muy exitosa, probablemente el tiempo que se dej con el

colorante no fue el adecuado ya que no se logr colorear los ncleos de las

clulas ni diferenciar cada una de las clulas ya que comparada con la
muestra que nos proporcion la maestra, en esta se apreciaban y
distinguan los ncleos de los linfocitos y neutrfilos se apreciaron de
color prpura oscuro. Los ncleos de los monocitos de color lila, los
basfilos prpura azulado muy oscuro. Los grnulos de los neutrfilos se
apreciaban de color lila, bastante finos. Las plaquetas coloracin violeta o
prpura.

CONCLUSIN:

Para la realizacin de un frotis de manera adecuada se debe tener presente

la forma en como este se hace, ya que de lo contrario el frotis no ser el
adecuado, para la tincin se tiene que conocer la tcnica as como tambin
los tiempos que se deben dejar con cada solucin para lograr un buen
teido y as al momento de observar las tinciones al microscopio poder
apreciar lo que se pretende, en este3 caso las diferentes clulas
hematopoyticas y su etapa de maduracin. Tambin se tiene que conocer
y saber los fundamentos de coloracin de cada una de las clulas para as
determinar de qu clulas se tratan al momento de la observacin.

BIBLIOGRAFA:

Rodak; Hematologa fundamentos y aplicaciones clnicas; Examen de

extendido de sangre perifrica; 2 edicin; edit. Panamericana; Buenos
Aires 2004; Pg. 173- 182.

Coloracin
de
Wright
y
Giemsa;
https://qbhematologia.files.wordpress.com/2011/08/prc3a1ctica-3.pdf.