UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYO

FACULTAD DE MEDICINA
ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA

GUIA DE PRACTICA N 03
PREPARACIN Y ESTERILIZACIN DE MEDIOS DE CULTIVO
I. INTRODUCCION
Cultivar un microorganismo significa promover el desarrollo de ste en medios de cultivo y
condiciones de laboratorio controladas.
En consecuencia, los medios de cultivo son compuestos necesarios para el desarrollo bacteriano y
deben contener:
a)

Sustancias nutritivas apropiadas (protenas, carbohidratos, sales minerales, etc)

b)

Tener un pH conveniente; generalmente de 6.8 a 7.6.

c)

Estar previamente esterilizados.

d)

Estar protegidos de contaminacin.

Tipos de medios de cultivo.

Por su CONSISTENCIA:
a) Slidos. Son aquellos que contienen un agente solidificante entre sus componentes,
normalmente agar. Se preparan en placas de Petri o en tubos en slant (tubos con la superficie
del medio inclinada).
b) Lquidos. Se denominan caldos y se preparan en tubos o erlenmeyers.
Por su COMPOSICIN:
a) Medios generales. Permiten el desarrollo de una gran variedad de microorganismos.
b) Medios de enriquecimiento. Favorecen el crecimiento de un determinado grupo de
microorganismos, sin llegar a inhibir totalmente el crecimiento del resto.
c) Medios selectivos. Permiten el crecimiento de un tipo de microorganismos determinado,
inhibiendo el desarrollo de los dems.
d) Medios diferenciales. Son aquellos en los que se pone de relieve alguna propiedad que un
determinado tipo de microorganismos posee.
La poblacin de microorganismos desarrollada en un medio se denomina cultivo. Cuando ste
contiene una sola especie de microorganismo, se denomina cultivo puro o axnico (proveniente de
una sola clula), cuando contiene ms de una especie de microorganismos se denomina cultivo
mixto.
Un cultivo axnico se obtiene artificialmente en el laboratorio. Tomando las precauciones
especiales, en el laboratorio, instrumentos y recipientes utilizados, ya que los microorganismos
estn por todas partes, en la naturaleza., los microorganismos contaminantes deben ser
eliminados.

UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYO

FACULTAD DE MEDICINA
ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA

Una colonia est constituido por una poblacin de clulas descendientes de un solo
microorganismo lo suficientemente grande como para ser visible sobre la superficie de un medio
slido.
OBJETIVOS:
Al finalizar la presente prctica el alumno de medicina ser capaz de:

Conocer y aprender las tcnicas de preparacin de diferentes medios de cultivo, su esterilizacin y

almacenaje
Conocer y comprender la importancia, utilidad, composicin y usos de los medios de cultico ms
utilizados en microbiologa.

Conocer el fundamento de los medios de cultivo

III. MATERIAL:

Placas petri estriles

Tubos de ensayo estriles
Matraces erlenmeyer
Mechero,
esptula, autoclave y bao mara.
Algodn, papel, hilo
Balanza

MEDIOS DE CULTIVO:
o
o
o
o
o
o
o
o
o

Agar Mac Conkey

Agar XLD
Agar SS
Agar LIA
Agar TSI
Agar SIM
Agar CITRATO
Agar Mueller Hinton
Agar Manitol Salado

IV. PROCEDIMIENTOS:
Pesar las sustancias segn indique la composicin del medio de cultivo y

agregarlos a un matraz erlenmeyer.

Disolver los ingredientes, a bao mara, en la cantidad de agua destilada

indicada.

Enfriar moderadamente y ajustar el pH entre 6.8 7.4 u otro que fuese

indicado.
-

Colocar un tapn de algodn en la boca del matraz y cubrirlo con papel

ajustndolo con hilo al cuello del recipiente.

Esterilizar en autoclave a 121C durante 15 min.

Distribuir los medios de cultivo en placas y/o tubos estriles:

UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYO

FACULTAD DE MEDICINA
ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA

a)

Los medios lquidos repartirlos en tubos y/o placas estriles frente a la llama de mechero.
A los medios slidos repartidos en tubos, antes que solidifiquen, se les dar la inclinacin
respectiva.

b)

Realizar el control de esterilidad de los medios de cultivo incubado los tubos y/o placas en
la estufa a 37C durante 24 horas.

c)

Conservar los tubos y/o placas de medio de cultivo en la refrigeradora hasta su posterior
uso.