PREPARO DE AMOSTRAS PARA

ANALITOS ORGNICOS

Por qu necessrio o preparo da amostra??

Amostra coletada

HPLC, ou LC-MS/MS

Material desenvolvido por:

Amostra = no apropriada para a anlise...POR QU??

Prof. Dr. Fbio Augusto (Unicamp)

Profa. Dra. Maria Elisa Pereira Bastos de
Siqueira (Unifal-MG)
Profa. Dra. Isarita Martins (Unifal-MG)

Muito suja contm outros componentes na matriz que

interferem com a anlise
Muito diluda analitos no esto concentrados
suficientemente para perimitir a deteco
Matriz no compatvel ou perigosa para a coluna/sistema
cromatogrfico

Amostragem

Coleta de amostras representativas do

material a ser analisado

Preparo das
amostras

Eliminao de interferentes e
isolamento dos analitos de interesse

Identificao e/ou
quantificao
Processamento dos
resultados

Avaliao dos
resultados

Mtodo idealizado de preparo de amostra

analito

Separar analitos
quantitativamente dos
interferentes da matriz

Separao, identificao e quantificao

dos analitos
Mtodos algbricos/ estatsticos para
estimar quantidades e incertezas
Deciso sobre aes a serem tomadas
em face aos resultados

Preparo de amostras:
finalidades
Isolar os componentes de interesse (analitos)
de uma matriz.
O preparo de amostras envolve procedimentos de
extrao e pode tambm incluir etapa de purificao
(cleanup) para amostras muito complexas.
Esta etapa tambm objetiva trazer os analitos num
nvel de concentrao adequado para a deteco e
assim, tcnicas de preparo de amostras tipicamente
incluem o enriquecimento.

interferente

Volume Vam da
amostra contendo n
gramas de analito
Concentrao = Cam

matriz
Cromatografar a
poro concentrada e
limpa de analito

CG/CLAE

n g de analito
concentrados em
um volume Vam
Vfinal << Vam
Cfinal >> Cam

Finalidades do preparo de
amostras
1. Purificao (clean up) da amostra
- eliminao de interferentes que possam danificar o
sistema cromatogrfico ou que possam interferir na
identificao e/ou quantificao dos analitos.

2. Pr concentrao dos analitos

Benefcios do preparo de
amostras
1. Tornar a matriz compatvel com a fase mvel e o
detector.
2 Proteger o sistema e coluna cromatogrfica de
2.
contaminao por partculas e material de elevado
peso molecular:

Benefcios do preparo de
amostras
3. Remover interferncias:
- simplificando a extrao;
- diminuindo o tempo de anlise;
- aumentando o limite de carga/ sensibilidade.

- aumento da vida til da coluna;

- menor gasto com manuteno;
- menos problemas operacionais.

4. Concentrar componentes de interesse:

- aumentando a sensibilidade (detectabilidade);
- aumentando a reprodutibilidade.

Preparo de amostras
biolgicas
Materiais biolgicos so complexos: contm protenas,
sais, bases, lipdeos, carboidratos e compostos
orgnicos s vezes similares quimicamente aos
orgnicos,
analitos.
Analitos: presentes em quantidades muito pequenas
na amostra e ainda ligados s protenas.

COMO SEPARAR ANALITOS, MATRIZ E

INTERFERENTES?

3. Caractersticas da instrumentao disponvel

-O detector sensvel? seletivo? especfico? para o analito
- Algum componente do sistema incompatvel com constituintes
d amostra
da
t ou reagentes
t usados?
d ?
4. Requisitos tcnico-gerenciais
- Existe metodologia oficial a ser seguida?
- Quantas amostras sero analisadas por dia?
- Existe pessoal capacitado para cumprir estas demandas?

COMO SEPARAR ANALITOS, MATRIZ E

INTERFERENTES?
1. Propriedades fsico-qumicas dos constituintes da amostra
- analitos, interferentes e matriz so volteis?
- polares? apolares?
- amostra:
t
slida?
lid ? lquida?
l id ? gasosa??
- analitos so quimicamente e/ou termicamente estveis?
2. Concentrao de analitos e interferentes na amostra
- Quais as concentraes esperadas de analitos e de
interferentes na amostra?

Preparo de amostras
Os objetivos da anlise indicam quanto de esforo
deve ser envidado no preparo da amostra.
Quesitos para um eficiente preparo da amostra:
a)) Perda mnima da amostra e boa recuperao
p do analito;;
b) Componentes existentes na amostra e sem interesse
devem ser removidos eficientemente;
c) No devem ocorrer problemas no sistema
cromatogrfico;
d) O procedimento deve ser feito de forma conveniente e
rpido;
e) O custo da anlise deve ser baixo.

Preparo de amostras:
tipos de tcnicas
1) Exaustivas

Preparo de amostras:
tipos de tcnicas
2) No-exaustivas
baseadas em princpios de equilbrio

O objetivo a remoo completa dos analitos da

matriz e sua transferncia para a fase extratora.

2.1 Pequeno volume da fase extratora: SPME

- extrao lquido-lquido e extrao em fase

slida (SPE)

2.2 Baixa constante de distribuio

amostra/fase extratora: headspace

Tratamento prvio de
amostras

Tratamento prvio de
amostras

REMOO DE PROTENAS: precipitao,

ultrafiltrao e dilise

REMOO DE PROTENAS: VANTAGENS

Desproteinizao requer:
(a) temperaturas elevadas
(b) alterao da fora inica ou osmtica ou do pH;

(a) Simplicidade (2 a 3 etapas)

(b) Baixo custo
(c) Facilidade de automao

(c) agentes orgnicos de precipitao;

(d) enzimas proteolticas.

Tratamento prvio de
amostras
REMOO DE PROTENAS - PROBLEMAS

Tratamento prvio de
amostras
REMOO DE PROTENAS - Agentes mais usados:

precipitao incompleta das protenas (e algumas

globulinas podem permanecer no sobrenadante e
passarem para o sistema de deteco);

diluio da amostra (mais usado para concentraes

mais elevadas de analitos);

b) cidos: tricloractico, perclrico, sulfosaliclico,

tngstico

gerao de picos no CLAE ou interferncia na leitura

espectrofotomtrica devido ao agente precipitante
usado.

c) Hidrxido de zinco

a) Solventes orgnicos miscveis em gua (metanol,

(metanol
etanol, acetonitrila, acetona, entre outros)

Tratamento prvio de
amostras

Tratamento prvio de
amostras

HIDRLISE DE CONJUGADOS

HIDRLISE DE CONJUGADOS

(a) Especfica ou enzimtica, onde so utilizadas

enzimas como as -glicuronidases e as aril-sulfatases

(a) Especfica ou enzimtica, onde so utilizadas

enzimas como as -glicuronidases e as aril-sulfatases
Fontes: Helix pomatia (tbm sulfatases) e a Patella vulgata,
Helix aspersa e a Escherichia coli.
- mais lenta, porm, menos vigorosa e mais seletiva, e no
degrada os analitos;
- exige que a atividade da enzima seja avaliada periodicamente,
atravs do estudo de sua eficincia no processo de hidrlise; alm
disto, a atividade da enzima pode ser inibida por componentes da
matriz.

Tratamento prvio de
amostras
HIDRLISE DE CONJUGADOS
b) No-especficos, utilizando-se a hidrlise cida ou
alcalina.
- utiliza condies extremas de pH e de temperatura;
- formao de produtos que interferem na extrao e
derivatizao, ou no perfil cromatogrfico dos analitos.

PARTIO: Princpio bsico de operao

analito apolar

matriz aquosa

Principais processos fsico-qumicos de separao usados

em metodologias de preparo de amostras
A

PARTIO

Os analitos so removidos da amostra por

dissoluo em solvente apropriado

ADSORO

Os analitos so coletados na superfcie

p
de
um slido com elevado poder adsortivo

VOLATILIZAO

Os analitos so evaporados
seletivamente e separam-se da
matriz e dos interferentes

PARTIO: fundamentos tericos

solvente apolar

1 volume Vam da amostra com concentrao Cam do

analito
2 volume Vext do solvente extrator adicionado
3 analitos dissolvem-se no solvente extrator at
que ocorra o equilbrio

Como a afinidade dos analitos pelo solvente apolar maior

que sua afinidade pela matriz, eles tendem a se DISSOLVER
(serem absorvidos) nessa fase apolar, imiscvel na matriz
Na separao por partio, os analitos so transferidos da matriz
para um solvente extrator, formando uma soluo

No equilbrio:

Cres concentrao residual na amostra

Cext concentrao na fase extratora

K = Cext / Cres

K = constante de distribuio
Parmetro bsico do equilbrio de partio

PARTIO: fundamentos tericos

Equilbrio de partio:

1. Solventes orgnicos: hidrocarbonetos (hexano, ter

de petrleo); solventes organoalogenados
(clorofrmio, diclorometano), etc.

Cext = next/ Vext

K = Cext / Cres

PARTIO: materiais mais comuns

K = next/ nres . Vam/ Vext

2. Polmeros: acima da temperatura de transio vtrea

(Tg), os polmeros orgnicos tm comportamento
dissolvente semelhante aos dos lquidos convencionais

Cres = nres /Vam

A constante de distribuio K pode ser expressa em termos do
volume de amostra Vam e da fase extratora Vext usada, e das massas
extradas next e residual (no-extrada) nres

ADSORO: fundamento da operao

Polidimetilsiloxano
PDMS, silicona (Tg = -120C)

Poliacrilatos
R = metila, etila, etc. (Tg = - 24C)

ADSORO: fundamentos tericos

Cada stio
ativo: liga uma
molcula por
vez
A superfcie contm nmero grande, porm finito, de stios ativos

Adsoro temporria!!!
Os analitos so transferidos seletivamente da matriz
para o adsorvente

ADSORO: fundamentos tericos

Kads = coeficiente de adsoro. DEPENDE da afinidade do
analito pelo slido adsorvente e pela matriz (similar ao K
para a partio)

ligao do analito no
stio ativo

Atrao entre dipolos (van der

Waals): FISISORO

Por ligao qumica covalente:

QUIMISORO

ADSORO: classes de material adsorvente

1. CARVES: carvo ativo, carvo ativo grafitizado
(Carboxeno), peneiras moleculares carbonceas
(Carbosleves).
Grande afinidade por compostos orgnicos volteis (e amostras
gasosas). Elevada estabilidade trmica (Tmax = 400 450 o. C)

fisisoro

Quanto mais elevado o Kads, maior a quantidade de

analito adsorvida no equilbrio.

2. ADSORVENTES INORGNICOS: quase sempre de

alumina (Al3O2) e slica (SiO2) s vezes recobertos por
filmes orgnicos quimicamente ligados.
Mais usados para compostos orgnicos de diferentes
volatilidades (amostras gasosas e lquidas). Alta estabilidade
trmica (Tmax = 400 450 o. C)

ADSORO: classes de material adsorvente

3. POLMEROS ORGNICOS: grande variedade de
materiais

VOLATILIZAO: fundamentos tericos

matriz aquosa ou slida

fase gasosa (headspace)

analito voltil

interferente no-voltil

Menor estabilidade trmica (Tmax= 180 - 350 o C); podem se

decompor e introduzir contaminantes (artefatos) nos extratos.

Tenax TA
Polioxi de 2,6- difenileno
O headspace (espao confinante) pode ser introduzido
diretamente no CG ou passar por outras etapas para
isolamento do analito.

VOLATILIZAO: fundamentos tericos

Pode-se empregar um modelo simplificado similar ao da
partio:
1. Volume Vm da amostra em contato com volume
Vhs do headspace

VOLATILIZAO: fundamentos tericos

Constante de Henry Khs
Khs = Chs/ Cres

Khs

Chs

2. Antes do equilbrio: concentrao Cam do

analito no-voltil
3. Aps o equilbrio: Cres na amostra e Chs no
headspace

Mais analito
transferido da
amostra para o
headspace!!!

O valor de Khs varia com:

natureza do analito e da matriz constituinte da amostra
temperatura

Constante de Henry Khs

amostra aquosa: pH, presena de sais, partculas, etc.

Khs = Chs/ Cres

EXTRAO LQUIDOLQUIDO (ELL)

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:
procedimento convencional

Baseia-se na afinidade da
f
forma
li fli
lipoflica
d analito
do
lit por
um solvente orgnico
Ocorre partio dos analitos
entre a amostra aquosa e o
solvente extrator orgnico.

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:
procedimento convencional
A quantidade extrada depende do volume de amostra e de
solvente extrator e da constante de distribuio K
= Vam / Vext
Eficincia da extrao = K / K +
Aumento do volume do extrator incrementa a frao extrada de um
analito
li em um determinado
d
i d volume
l
da
d amostra, mas pode
d
comprometer o efeito de pr-concentrao do analito extrado.

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:
procedimento convencional
Escolha do agente
extrator:

Solvente

- maior compatibilidade
com a ELL: baixo ponto
de ebulio e baixa
viscosidade;

Heptano

0.0003

Ci l h
Ciclo-hexano

0 006
0.006

Hexano

0,014

Pentano

0,040

- seletividade maior:
solventes menos polares

Clorofrmio

0,815

Inalterado x Metablitos

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:
procedimento convencional

Tipos de solvente

Isooctano

Solubilidade
%
0.0002

Diclorometano

1,6

ter etlico

6,89

lcool Isobutlico

8,50

Acetato de Etila

8,70

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:
procedimento convencional

Concentrao do extrato:

Triagem Mistura de solventes.

Fluxo de N2 Acelera a
vaporizao sem aumento da
t
temperatura.
t

Anlise direcionada Solvente

com maior afinidade pelo analito.

O2 Oxidar compostos mais

sensveis

cido hiprico: acetato de etila

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO
procedimento convencional: efeito do pH

EXTRAO
(lquido-lquido)
= molcula de gua

EFEITO SALTING OUT

CH2 CH N
CH3

Na+

H
H

Cl-

NaCl (cloreto de sdio)

CH2 CH N
CH3

H
H

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:
procedimento convencional

Extrao cida:
pH cido substncias de
carter cido prevalecem na
forma no ionizada, lipoflica

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO: procedimento

convencional

INFLUNCIA DO pH NA
HIDROSSOLUBILIDADE/LIPOSSOLUBILIDADE
substncias de carter cido. Ex. cido 11-nordelta -9-THC-COOH
O
C OH

O
C OH

CH3

OH
CH3
CH3

CH3

Extrao bsica:

C5H11

OH

OH-

cido 11-nor-delta 9-THC-COOH

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:
procedimento convencional

O
C O

C5H11

Forma
noionizada

OH

H+

CH3
CH3

Forma
ionizada
C5H11

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO: procedimento

convencional
INFLUNCIA DO pH NA
HIDROSSOLUBILIDADE/LIPOSSOLUBILIDADE
substncias de carter bsico. Ex. anfetaminas

pH bsico substncias
carter bsico prevalecem
forma no ionizada, lipoflica

de
na

CH2 CH N
CH3

H H
+
CH2 CH N
H
CH

H+

Forma ionizada

Anfetamina

CH2 CH N

OH-

CH3

H
H

Forma no-ionizada

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:
procedimento convencional

EXTRAO
(lquido-lquido)

urina
Drogas/
metablitos

Vantagem:

Solvente
orgnico

extremamente simples e rpida

urina

Desvantagens:
grande volume de solventes
descarte do material

Agitao
Centrifugao

formao de emulso
Separao da
fase orgnica

seletividade sofrvel
extrato

efeito de pr-concentrao limitado

Extrao em fase slida

EXTRAO EM FASE
SLIDA
SOLID PHASE
EXTRACTION (SPE)

Permite a separao seletiva,

purificao e a concentrao de
compostos
presentes
em
matrizes complexas

CARTUCHO PARA SPE: seringa de polipropileno ou de

vidro, contendo uma pequena quantidade de material
sorvente ou adsorvente finamente granulado

OPERAO BSICA DE SPE

Escolha do cartucho
DEPENDE:
volume da amostra, tipo de matriz, nmero e
tipo de analitos, entre outros...
Mais usados: volume pequeno 200mg (1,2
mL amostra); volume grande 500mg (4-5
mL amostra).
Massa de sorvente varia entre 25 mg e 10 g

OPERAO BSICA DE SPE

Pre-tratamento da amostra, dependendo de:
- tipo de analito;
- tipo de matriz;
- natureza da reteno qumica.
ENVOLVE:
- ajuste de pH;
- centrifugao;
- filtrao;
- diluio;
- adio de tampo, etc

OPERAO BSICA DE SPE

Etapa 1 Condicionamento do dispositivo de
extrao
Passagem de pequeno volume de solvente apropriado
para umedecer o sorvente (grupos funcionais ligados) e
garantir interao consistente

OPERAO BSICA DE SPE

Etapa 1 Condicionamento do dispositivo de extrao

- depende da aplicao do material

de recheio;
- necessrio p
para ativar a fase;;
- no permite que o material seque.

Natureza do solvente: depende do sorvente [slica e sorventes

apolares metanol; sorventes polares solventes orgnicos] e da
matriz

Equilibrio: Sorvente/ fase tratada com soluo similar

(em polaridade, pH, etc) matriz para maximizar a
reteno dos analitos.

OPERAO BSICA DE SPE

OPERAO BSICA DE SPE

Etapa 2 Eluio da amostra (lquida ou aquosa)

Etapa 2 Eluio da amostra (lquida ou aquosa)

- volume de L a L;

Passagem da amostra no sorvente

- ajustes de pH, fora inica pode ser feito;

(analito permanece na forma no dissociada para
ficar mais retido no adsorvente))
Base fraca: pH 2 acima do pKa
cido fraco: pH 2 abaixo do pKa
- passar a amostra com vcuo ou presso;
- fluxo pode afetar a eficincia.

OPERAO BSICA DE SPE

Etapa 3 Lavagem do sorvente (clean up)
Natureza do solvente para
clean up: poder de dissoluo
suficiente para dessorver
materiais fracamente sorvidos
(interferentes?) mas no
espcies fortemente sorvidas
(analitos?)

OPERAO BSICA DE SPE

Etapa 3 Lavagem do sorvente (clean up)
- eluio do material no desejado ou no
retido lavado com mesmo solvente da
amostra;
- passando um solvente mais forte que a
amostra pode remover algumas impurezas
indesejveis
(pode
retirar
o
analito.
Perigoso para a anlise).

descarte

10

OPERAO BSICA DE SPE

Etapa 4 Dessoro dos analitos

OPERAO BSICA DE SPE

Etapa 4 Dessoro dos analitos

Solvente: deve possibilitar

dessoro completa
(quantitativa) dos analitos
Volume do solvente: o
menor possvel (prconcentrao)
Preferncia a solventes
volteis

- eluio com pequeno volume de solvente

adequado (forte); Concentra o analito
- duas alquotas pequenas so mais
eficientes que uma grande;

Anlise cromatogrfica
Aplicao da SPE: analitos no-volteis e semi volteis em
amostras aquosas + separao cromatogrfica

- interao por vrios segundos aumentam

a eficincia da extrao.

SPE: Mecanismos de
separao

REGRAS NO USO DA SPE

Analito deve ser adsorvido no sorvente da SPE

Deve haver tempo suficiente de contato

1. Adsoro: material slido que no

apresenta filme lquido depositado na
partcula - slica gel

analito/sorvente
Interferentes endgenos da amostra devem ser

seletivamente separados dos analitos

Analitos devem ser capazes de ser eficientemente
removidos do sorvente

Slica: dimetro da partcula: 30-50 m

Superfcie: 500-600 m2 /g

SPE: Mecanismos de
separao
2. PARTIO: com fase quimicamente
ligada (comportamento similar a de um
filme de sorvente lquido na superfcie =
partio)
p
)

- fase normal: polar + matriz

apolar
retm analitos polares
e os apolares so eludos

FASE NORMAL : polares

-INTERAES POLARES (Dipolo-dipolo, pontes de H)

Si
CN
Cianopropil

C N
H O

NH2
Aminopropil

2OH
Diol

Si

O
OH

Si

NH

NH

11

SPE: Mecanismos de
separao
-fase reversa: apolar + matriz
polar
retm analitos apolares
e os polares
l
so
eludos
l d
90% de uso em anlises de frmacos e
toxicantes
Deseja reter um analito apolar no
dissociado num meio aquoso. Matriz polar:
urina

SPE FASE REVERSA: REGRAS

Reteno: mecanismos no-polares ou interaes
hidrofbicas
Matriz (amostra): aquosa (fluidos biolgicos,
guas)
Caractersticas
C
t ti
dos
d analitos:
lit exibirem
ibi
grupos
funcionais no polares (a maioria de analitos
orgnicos)
Esquema de eluio: interaes hidrofbicas so
rompidas com solues mais hidrofbicas ou com
solventes (metanol, diclorometano, etc ou
combinao de gua ou tampes/solventes)

Papel crtico do pH em SPE

FASE REVERSA: apolares

-INTERAES NO-POLARES (Van der Waals)

C8
Octila

Si

PH
Fenila

CH
Ciclo
hexila

Si

Si

SPE: Mecanismos de
separao
-fases especiais e mecanismos
mistos: fase mista contm parte
da molcula apolar e parte com
radicais polares: usadas para
reter analitos polares e apolares
Pouco eficiente: retm muitos interferentes

SPE: Mecanismos de
separao
3. Pareamento inico
Fase apolar + matriz polar
com analitos inicos.
inicos Adio de
contra-on neutraliza o analito
que retido na fase apolar
(=mecanismo da fase reversa)
dentro da prpria matriz passa um on e depois
um contra on

12

SPE: Mecanismos de
separao

SPE: TROCA INICA

-INTERAES INICAS (Eletrosttica)

4. Troca inica

Fase
modificada
com
funcionalidade inica; analito de
carga oposta fase ser retido.
Trocadores
aninicos
fortes
alquilamneo) e fracos (amina)

SPE TROCA INICA : regras

Amostra (matriz)
Caractersticas do analito

Esquema de eluio

Si

O-

NH3

SCX
Si
cido
benzenosulfnico

SO3-

(tetra

Trocadores
catinicos
fortes
(cido
sulfnico) e fracos (cido carboxlicos)

Mecanismos de reteno

CBA
cido
carboxlico

interaes eletrostticas
- o sorvente e os grupos funcionais do
analito devem ter cargas opostas
no polar ou polar
troca catinica para compostos bsicos (ex:
aminas))
troca aninica para compostos acdicos (ex.
cidos carboxlicos, cidos sulfnicos, fosfatos)
quebra de ligaes eletrostticas
- modificao do pH para neutralizar grupos
funcionais do analito ou sorvente;
- uso de um contra-on de grande seletividade
para o sorvente com relao ao analito

INSTRUMENTAO PARA SPE

SAX
Trimetil
aminopropil

Si

N+(CH3)3

SO3

NH3

Natureza dos solventes x SPE

Concentrao no
equilbrio:

Se for usada a partio: K = Cext / Cres

K=f

afinidade sorvente
afinidade matriz/ solvente de eluio

Cext = na fase sorvente

extratora
Cres = na amostra ou
solvente de eluio

Carregamento
g
da amostra

Clean up

Dessoro dos analittos

Soro dos analitos

Dessoro de interferentes

Dessoro de analitos

K alto

K baixo

K baixo

Matriz com menor afinidade

pelos analitos do que o
sorvente

Solvente com maior

afinidade pelos
interferentes de que o
sorvente

Solvente com maior

afinidade pelos analitos de
que o sorvente

INSTRUMENTAO PARA SPE

O SPE pode trabalhar on line

(analitos transferidos diretamente
para o CG ou HPLC)) ou off
do SPE p
line (analitos coletados em tubos e
transferidos para o cromatgrafo)

13

DISCOS DE SPE
Operao similar filtrao vcuo
Recomendados: para grandes volumes de
amostra contendo material particulado

Extrao mais rpida de que em

cartuchos, permitindo uso de vazes
elevadas de amostra.
Volumes maiores de amostra podem ser
necessrios para aumentar a
detectabilidade dos analitos.

DISCOS DE SPE

DESVANTAGENS DA SPE
Maior dificuldade para otimizar seu uso
(desenvolvimento do mtodo)
Grande variedade de substncias qumicas,
muitas escolhas para manipular solventes
Vrias etapas e maior tempo requerido
Maior custo por amostra

Exemplos de aplicaes da SPE em Anlises Toxicolgicas

VANTAGENS DA SPE
uso de pequeno volume de solvente
pouco manuseio da amostra
ausncia de emulso
facilidade na automao
baixo consumo de vidrarias

Aplicaes

Grupo
funcional do
analito

Matriz

Sorventes

Solvente de
eluio

Anlise de
frmacos,
drogas de
abuso
Anlise de
praguicidas

Anis
aromticos,
cadeias
alquil

gua,
tampes,
fludos
biolgicos

Octadecil,
octil, etil,
ciclohexil,
fenil,
cianopropil

Metanol,
acetonitrila,
acetato de etila,
clorofrmio,
metanol
acidificado,
hexano

Anlise de
f i
fenis,
aminas

Hidroxilas,
aminas

Hexano,
l
leos,
clorofrmio

Cianopropil,
diol, slica,
aminopropil,
amina

Metanol,
iisopropanol,
l
acetona

Herbicidas,
frmacos

Aminas,
piridinas

gua,
tampes
cidos,
fludos
biolgicos

Trocador
fortemente ou
fracamente
catinico

Tampes
bsicos, tampes
com alta fora
inica

cidos
orgnicos,
fosfatos

cidos
carboxlicos,
cidos
sulfnicos,
fosfatos

gua,
tampes
bsicos,
fludos
biolgicos

Trocador
fortemente ou
fracamente
aninico

Tampes cidos,
tampes com
alta fora inica

menor tempo de anlise

menor custo de mo de obra

14

EXTRAO POR HEADSPACE

DETERMINAO DE VOLTEIS

HEADSPACE

Amostra (urina,
sangue ou saliva)
+ sulfato de sdio
+ PI

seringa

ESTUFA 70C
30 min
i

GC

15