Laboratorio

de Anlisis Instrumental

FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGA

LABORATORIO DE ANLISIS INSTRUMENTAL

BLOQUE DE PRACTICAS 1

Carreras: Biotecnologa y Qumico Farmacutico Bilogo

Chvez Rodrguez Nallely

Jimnez Caballero Luis
Morales Cedillo Rodrigo
Villalobos Mario

9 de Septiembre de 2013

Laboratorio de Anlisis Instrumental

Practica 0: Reaccin de yodato potsico por el hidrgeno sulfito de sodio
en presencia de almidn
Introduccin
Antes de comenzar hay que definir que el pH es una medida de acidez/alcanilidad
de una solucin acuosa a determinada temperatura, que tiene un rango de 0 14.
(Prichard, E., 2003).
De acuerdo a la prediccin en las reacciones se forma el complejo almidn pentayoduro para determinar de acuerdo a la concentracin de los reactivos y la
temperatura aplicada, se vera afectada la reaccin. (Durn, C., 2010).
Las reacciones redox se producen por la transferencia directa de electrones,
donde intervienen un agente oxidante y uno reductor, donde ordinariamente se
tienen el carcter bimolecular. Los mecanismos estequiometricos dependen de si
los centros de reaccionan sin modificacin de sus esferas de coordinacin o de si
la reaccin debe ir acompaada por una sustitucin de ligando. (Duward, F., 1998)

Fig.1 Arcoris esperado con la metodologa presentada a continuacin. (Duran, C.,

2010.)
Objetivo
General
Determinar de acuerdo a un experimento cualitativo de colorimetra el
porcentaje de errores que puede tener un analista.
Especifico

Laboratorio de Anlisis Instrumental

Reafirmar conceptos de: Rx. Redox, Rx. De dismutacion, e indicadores de

pH.

Metodologa
Se puso una gota de los indicadores de fenolftalena, tomolftalena y 4 nitrofenol
en cada una de las 7 cubetas de espectrofotmetro, respectivamente para tener
una serie de soluciones en diferentes vasos y se etiquetaron estos como A, B y C;
en dischos vasos se vertieron 0.5ml de la disolucin preparada de hidrgeno
sulfito de sodio (NaHSO3), y en el segundo se verti la misma cantidad disolucin
pero esta vez de Yodato de Potasio (KIO3); al final con los indicadores vertidos as
como las disoluciones se observ si hubo un cambio de coloracin, en el cual a
por medio de distintivas cantidades el resultado final deba ser un arcoris
mostrando las diferentes ondas a las que se puede leer en un espectrofotmetro.
Resultados

Imagen 1. Arcoiris obtenido de la conjuncin de diales de todos los equipos.*

*Nota: No se pueden reportar cantidades exactas, ya que ningn equipo registro a
grandes rasgos el volumen agregado de reactivo.

Laboratorio de Anlisis Instrumental

Discusin de resultados
La reaccin se produjo en varias etapas, las cuales fueron:
1 Etapa:
Los iones hidrogensulfito (HSO3-) reducen a los iones yodato (IO3-) a iones yoduro
(I-) segn la reaccin

donde se determina la velocidad de la reaccin total. La estequiometria de la

reaccin indica que se consumen ms rpidamente los iones HSO3- . Cuando se
agotan los iones I- que se han producido reaccionan con los iones IO3- sobrantes.
(Durn, C., 2010)
2 Etapa:
Los iones yoduro producidos en la primera reaccionan con los iones yodato en
exceso produciendo yodo (I2).

Esta reaccin es muy rpida y el I2 producido reacciona con el almidon para

producir un complejo almidon-pentayoduro que presenta un color azul oscuro casi
negro. La aparicin de este complejo indica que la primera etapa de la reaccin se
ha completado y ha tenido lugar la segunda. (Durn, C., 2010)
Reaccin completa

Despus de realizar el experimento y compararon resultados donde se concluy

que debido a la falta de precisin en la concentracin de indicador no se pudieron
4

Laboratorio de Anlisis Instrumental

obtener los resultados esperados durante el experimento, ya que se obtuvieron
muchas tonalidades de verde, tanto as como amarillos por lo que se tuvo que
recurrir al control de pH y tratar de obtener la coloracin adecuada la cual a final
de cuentas no logro ser obtenida debido a lo previo dicho, tambin se pudieron
apreciar varios rojos y anaranjados e inclusive se obtuvo un rosado el cual no se
encuentra dentro de los colores del arcoris lo cual pona en duda el experimento y
fue lo que al mismo tiempo nos llev a la conclusin de que la falta o exceso de
indicador en las soluciones fueron las culpables del tropiezo del experimento mas
sin embargo se pudo obtener una diferente gama de coloridos para dar a ejemplo
a como es el espectro electromagntico el cual se usa en un espectrofotmetro.
Conclusin
Se contemplo de manera exacta una variacin en los resultados de todos,
quedando en evidencia los diferentes mtodos que se usaron, que de
sobremanera inexactos, e ineficientes.
Referencias
Prichard, E. (2003) Practical Laboratoy Skills Training Guides: Measurement of
pH, Cambridge, United Kingdom.
Durn, C. (2010), Reacciones encadenadas : del reloj de yodo al arco iris
qumico, Revista Eurela sobre enseanza y divulgacin de las ciencias, Vol. 8
(1), p.p. 105-110.
Duward, F., (1998) Qumica Inorgnica, Barcelona, Espaa, Ed. Revert.

Laboratorio de Anlisis Instrumental

Prctica 1: Evaluacin del funcionamiento y uso de distintos sistemas de
medicin de volmenes
Introduccin
Precisin
Describe la reproducibilidad de los resultados, es decir, la concordancia entre los
valores numricos de dos o mas mediciones repetidas o que se han efectuado
exactamente de la misma forma. En general, la precisin de un mtodo analtico
se obtiene con facilidad mediante la simple repeticin de la medida.
Se utilizan tres trminos para describir la precisin de un conjunto de datos
repetidos: desviacin estndar, varianza y coeficiente de variacin. (Skoog, D.,
2008).
Exactitud
Describe si un resultado experimental es correcto expresado como la cercana de
la medicin a un valor verdadero, o aceptado. La exactitud es un termino relativo
en el sentido de que un mtodo es exacto o inexacto dependiendo en gran medida
de las necesidades del cientfico y de las dificultades del problema analtico.
(Skoog, D., 2008).
Errores aleatorios
Siempre que en una misma muestra se repiten las mediciones analticas, se
obtiene una dispersin de los datos, que se le conoce como errores
indeterminados o aleatorios. (Skoog, D., 2008).
Errores personales
Son aquellos que se introducen en una medicin como consecuencia de los
criterios que debe adoptar un analista. (Skoog, D., 2008).
Objetivo
General
o Identificar a travs de mediciones de rutina, los errores que presenta el
analista.
o Conocer el uso adecuado de pipetas de vidrio y de pipetas semiautomticas
para evaluar de que manera es eficiente su funcionamiento.

Laboratorio de Anlisis Instrumental

Especifico
o Calcular el CV, la DS, y el % de error, en base a los datos obtenidos en la
metodologa.
o Reafirmar conceptos: exactitud, precisin, error, desviacin estndar,
coeficiente de variacin, etc.
Metodologa

EVALUACION DEL
USO Y
FUNCIONAMIENTO
DE SISTEMAS DE
MEDICIN

A) PESO-VOLUMEN CON PIPETA SEMIAUTOMTICA

1. Colocar un recipiente coulter-counter de 20 ml en una balanza
analtica y pesarlo.
2. Con la pipeta semiautomtica medir 50 L de agua y depositarla en el
recipiente.
3. Registrar el peso del volumen y multiplicarlo por 1000 (1 L = 1 mg)
4. Repetir 19 veces los puntos 2 y 3
5. Calcular el CV y el % de error
6. Comparar los resultados del CV y el % de error con otros compaeros
que hayan usado la misma pipeta.
B) PESO-VOLUMEN CON PIPETAS DE VIDRIO
1. Colocar un recipiente coulter-counter de 20 ml en una balanza
analtica y pesarlo.
2. Con la pipetas terminal y subterminal de 1 ml medir 1 ml de agua,
depositarla en el recipiente y registrar el peso del volumen en gramos.
3. Repetir 19 veces el punto 2.
4. Calcular el CV y el % de error.
5. Comparar los resultados del CV y el % de error, con otros compaeros
que
c) EVALUACIN DE LA MEDICIN A TRAVS DE DILUCIONES
1. Seleccionar 20 tubos y las pipetas adecuadas para hacer dilucin 1:25
de la solucin.
2. Hacer una dilucin 1:25 de dicromato de potasio al 5 % con agua
destilada
3. Repetir el paso 2 diecinueve veces con las mismas pipetas
4. Mezclar cuidadosamente cada tubo
5. Leer la absorbencia a 510 nm, despus de ajustar el espectrofotmetro
con agua
6. Calcular el promedio, la desviacin estndar y el coemiciente de
variacin con las absorbencias.

Resultados
A) Peso-volumen con pipeta semiautomtica
Peso del
Volumen
4,89
9,77
14,65
19,52
24,40

Gramos
4,89
4,88
4,88
4,87
4,88

Laboratorio de Anlisis Instrumental

29,28
34,20
39,11
43,99
48,91
53,78
58,66
63,59
68,47
73,34
78,49
83,11
91,20
96,26

4,88
4,92
4,91
4,88
4,92
4,87
4,88
4,93
4,88
4,87
5,15
4,62
8,09
5,06

Tabla 1
Datos registrados del peso de agua utilizando
Pipeta semiautomtica
Desviacin
Coeficiente
Promedio % de
estndar
de variacin
error
.7387
10.58
5.006 45.82

B) Peso-volumen con pipeta de vidrio
Peso del
Volumen
9,78
19,42
29,02
38,62
48,22
58,82
68,02
78,22
88,42
98,78
108,42
118,02

Gramos
9,78
9,64
9,6
9,6
9,6
10,6
9,2
10,2
10,2
10,36
9,64
9,6
8

Laboratorio de Anlisis Instrumental

128,22
138,62
148,82
158,02
168,78
178,42
188,62

10,2
10,4
10,2
9,2
10,76
9,64
10,2

Tabla 2
Datos registrados del peso de agua utilizando
Pipeta de Vidrio
Desviacin
Coeficiente
Promedio % de
estndar
de variacin
error
.4524
4.55
9.927 8.85

C) Evaluacin de la medicin a travs de diluciones

Numero
Abs 590
de
nm
Disolucin
1
0,01
2
0,012
3
0,011
4
0,006
5
0,009
6
0,002
7
0
8
0,007
9
0,004
10
0,004
11
0,004
12
0,004
13
0,004
14
0,004
15
0,003
16
0,003
17
0,004
18
0,005
9

Laboratorio de Anlisis Instrumental

19
20

0,005
0,004

Tabla 3. Numero de diluciones de Dicromato de potasio a 590nm
Desviacin
Coeficiente
Promedio % de
estndar
de variacin
error
.0030
.5858
.0052 41.4
Discusin de resultados
El error de medicin obtenido con respecto al permitido fue alto debido al uso
incorrecto de pipetas.
En el caso de las pipetas graduadas para leer el menisco sin error, el aparato
volumtrico debe estar en la posicin vertical y los ojos del analista deben
encontrarse a la altura del menisco.

Fig.1.0 Representacin de lectura para el caso de pipetas volumtricas.

Para el caso de pipetas automticas un factor que intervino fue el uso correcto del
material, debido a que se debe limpiar con un papel la punta para retirar el
exceso. (Brand, 2008).

10

Laboratorio de Anlisis Instrumental

Fig.1.1 representacin grafica de precisin y exactitud. (brand, 2008).

A)Tanto en la tabla como en la grfica 1 se puede determinar que obtuvimos un
erros sistemtico ya que gran parte de los puntos van hacia un cierto lado de la
grfica, as mismo el porcentaje de error obtenido en este experimento es del
45.82%, este es un porcentaje demasiado alto ya que para que sea confiable el
dato no debe de sobrepasar el 3%, se piensa que el error ms que nada fue de la
persona a la hora de maniobrar con la pipeta.
B)
En el experimento B determinamos que el erros obtenido es Aleatorio ya
que presenta cierta tendencia la grfica en ciertos rangos, el valor mnimo
aceptable para que estos datos sean confiables es del 5% y dado que obtuvimos
un porcentaje de error del 8.85% podemos denotar que esta fuera del valor real la
medicin, estos factores pueden deberse a diferentes factores tanto a la hora de
maniobrar la pipeta, pudo ser tambin las condiciones de la propipeta as como si
el experimentador agrego o no la ltima gota de esta y/o limpio el exceso de
material en la punta
C)
En este experimento se obtuvo un porcentaje de error del 45.82%, es un
valor demasiado alto y muy alejado del valor real, as mismo la lectura de este
debi de ser en 510 nm, sin embargo se ley a 590 nm por error del encargado del

11

Laboratorio de Anlisis Instrumental

experimento, dado que el rango de lectura en el espectrofotmetro cambia se
piensa que dichas lecturas mostradas en la tabla 3 son inadecuadas, sin embargo
se compar con las lecturas del equipo B de la seccin 3 y se obtuvo un error
aleatorio y se cree que fue por parte del experimentador y as tambin por parte de
la exactitud de la pipeta ya que se tom un volumen mnimo de la muestra y se
realiz con una pipeta de 1 mL en lugar de una micro pipeta, por ende el rango de
error aumenta
Conclusin
Para la medicin de volmenes, los errores no solo dependen del instrumento,
sino principalmente del analista; por tal motivo es importante capacitar al personal
sobre el uso adecuado del material (en este caso de medicin, para manipular los
anualitos de forma adecuada y ofrecer un resultado eficaz y confiable.
Referencias
o Brand, (2008). Informacin sobre la medicin de volumen. Brand. pp.21
o Skoog, D., (2008), Principios de Anlisis Instrumental. Mc Graw Hill.
Espaa., p.p. 967 980.

12

Laboratorio de Anlisis Instrumental

Practica 2: Determinacin de protenas por el mtodo de lowry
Introduccin
El mtodo de Lowry es una tcnica calorimetra basada en la cuantificacin de los
grupos fenlicos, que permite valorar el aminocido de tirosina, nico aminocido
fenlico de las protenas. (Gil A., 2010).
Este mtodo utiliza tres sistemas para producir coloracin por la presencia de
protenas. En primer lugar el Cu+, forma complejos de coordinacin con dos
enlaces peptdicos consecutivos de protenas, dando lugar a un compuesto
coloreado azul y en segundo lugar el compuesto es capaz de reducir al reactivo de
Folin-Ciocalteu (acido fosfotungstico y fosfomolibdico) dando un color ms
azulado. Por ltimo el reactivo de Folin tambin reacciona con los residuos de
tirosina de la cadena polipeptidica, produciendo un color azul por la reaccin de
fosfomolibdato en medo bsico (Roca P., 2003).
Entre las ventajas de este mtodo se encuentran que es muy sensible, se ve
menos afectado por la turbidez de la muestra, es ms especifico que la mayora
de otros mtodos, relativamente simple. (UAM,2008).

Objetivo
General
! Elaborar una curva de calibracin para la cuantificacin de protenas empleando
un mtodo fotomtrico
Especifico
! Determinar si hay diferencia estadsticamente significativa en la precisin y la
exactitud entre los mtodos de Bradford y Lowry para analizar las ventajas y
desventajas con respecto a otros mtodos para la cuantificacin de protenas
! Analizar el efecto de sustancias no protenicas, en el desarrollo de color para
identificar el mecanismo mediante el cual interfieren en la reaccin. Conocer y

13

Laboratorio de Anlisis Instrumental

aplicar conocimientos fundamentales de qumica analtica para la elaboracin
de curvas de calibracin.
! Analizar los efectos de los interferentes en este mtodo.
! Determinar y analizar los resultados considerando precisin y exactitud
Metodologa

CURVA DE CALIBRACIN
Se prepar una serie de
tubos contenida en la tabla
1 del manual de prcticas de
Anlisis Instrumental pp.15
Se cubrieron los tubos con
papel parafilm.

ANLISIS ESTADSTICO
Se prepararon 10 tubos en
las mismas Condiciones que
el tubo 3 de la tabla 1 del
manual de prcticas de
Anlisis Instrumental pp.15

NOTA:El tubo 6 es el blanco.

INTERFERENCIAS DEL
MTODO
Se prepararon 5 tubos en las
mismas Condiciones que el
tubo 3 de la tabla 1 del
manual de prcticas de
Anlisis Instrumental pp.15
y se aadi 0.1mL de las
soluciones interfetentes
contenidas en la Tabla 1 del
Manual de Prcticas pp.16.

NOTA: TODAS LAS REACCIONES ANTERIORES FUERON LEDAS A 590 nm.

Resultados
Cantidad de
A 590
Tubo No.
protena (g)
Serie a
Serie b
1
.1
0.002
-.056
2
.2
.046
-.074
3
.3
.057
-.004
4
.4
.083
.020
5
.5
.117
.044
Tabla 1. Curva de calibracin de albmina Mtodo de Lowry
Ecuacion de la Recta :

Y = 0.276X 0.0191

Pendiente = 0.0.276

14

Laboratorio de Anlisis Instrumental

Ordenada al orgen = 0..0191
Coeficiente de correlacin = 0..971
La curva no cumple la ley de Bauger y Beer
La pendiente indica el valor de abencia molar
El eje de Y indica la distancia recorrida por la radiacin de onda
El coeficiente de correlacin indica si los datos obtenidos son confiables

Tubo No.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Absorbencia590
Hb
.031
.035
.032
.025
.034
.047
.033
.036
.042
.044

Cantidad de protena
(g)
1.8X^-4
1.96X10^-4
1.85X10^-4
1.59X10^-4
1.92X10^-4
2.39X10^-4
1.88X10^-4
1.99X10`-4
2.21X10^-4
2.28X10^-4

Tabla 2. Rplicas para el anlisis estadstico

Confiabilidad del 95%
Promedio
S
S^2
cV

1.83X10^-4 2.13X10^-4
1.98X10^-4
2.41X10^-5
5.84X10^-10
0.121

Tabla 3. Anlisis Estadstico, Limite de Confianza del 95%

Numero de
Tubo
1
2
3
4
5

Sustancia
Tris 1M, pH 7.0
Glicerol 1%
Detergente Comercial
1%
DOdecil Sulfato de
Sodio 1%
Acido Tricloroacetico

Abs 590nm
Hemoglobina
0
.320
.422

g de Proteina

.472

1.7793

.420

1.5909

.0692
1.2286
1.5981

15

Laboratorio de Anlisis Instrumental

5%
Tabla 4. Efecto de algunas Sustancias no Proteicas en el Mtodo de Lowry
Discusin de resultados
De la curva de calibracin se pudo determinar que no se llevaba a cabo la ley de
Baouger y Beer ya que la absorbencia aumentaba al aumentar la concentracin de
esta sin tener un parmetro definido, adems nuestro factor de correlacin fue de
0.971 esto nos da a entender que su confiabilidad es elevada, sin embargo no es
lo suficientemente bueno para ser aceptado, las razones por las cuales se
pudieron deber esto pudo ser desde el principio al medir los reactivos y colocarlos
en los tubos as como tambin pudo ser la preparacin de los reactivos
Las absorbencias fueron calculadas con la ecuacin de la recta de la curva de
calibracin y nos dieron los resultados dados en la tabla 4, obteniendo diferentes
masas de protenas en cada uno como se muestra
Conclusin
Los mtodos presentan diferencias significativas, sin embargo, habr una
variacin en los resultados dependiendo de la protena que se este estudiando.
Adems de presentar los tpicos errores por parte del investigador.
Referencias
o

Gil A. (2010).Tratado de Nutricin Tomo II. Editorial Panamericana. Mxico.

Pp.539
Roca P. (2003).Bioqumica tcnicas y mtodos. Editorial Hlice.
Espaa.pp.130
UAM (2008).Cuantificacin de protenas, obtenido el 6 de Septiembre del
2013 a las 18.50 en: http://
docencia.izt.uam.mx/hgm/metodos/documentos/ppt/cuantificacion%2520de
%2520proteinas.ppt

16

Laboratorio de Anlisis Instrumental

Prctica 3: DETERMINACIN DE PROTENAS POR EL MTODO DE
BRADFORD
Introduccin
Un mtodo rpido y preciso para determinar la concentracin de una protena es
esencial en muchos campos de estudio, el ensayo que se adapta a esta
descripcin ser conoce como el ensayo, o mtodo, de Bradford, que consiste en
teir de azul de Coomassie G250 a la protena, la forma catinica del teido, en la
que predomina el ensayo acido de la solucin, tiene una longitud de onda mxima
de 470, y en contraste, la forma aninica del teido, el cual se une a la protena,
tiene una longitud de onda leble mxima de 595 nm, (Bradford, M., 1976).
Objetivo
General
" Elaborar una curva de calibracin para la cuantificacin de protenas
empleando un mtodo fotomtrico.
Especifico
" Determinar si hay diferencia estadstica significativa en la precisin y
exactitud respecto al mtodo de Lowry para analizar las ventajas y desventajas
con respecto a otros mtodos en la cuantificacin de protenas.
" Analizar el efecto de sustancias no protenicas, en el desarrollo de color para
identificar el mecanismo mediante el cual interfieren en la reaccin.
Metodologa

CURVA DE
CALIBRACIN
Se prepar una serie de
tubos contenida en la
tabla 1 del manual de
prcticas de Anlisis
Instrumental pp.15
Se cubrieron los tubos
con papel parafilm.
NOTA:El tubo 6 es el
blanco.

INTERFERENCIAS DEL
MTODO
ANLISIS
ESTADSTICO
Se prepararon 10 tubos
en las mismas
Condiciones que el tubo
3 de la tabla 1 del
manual de prcticas de
Anlisis Instrumental pp.
15

Se prepararon 5 tubos en
las mismas Condiciones
que el tubo 3 de la tabla
1 del manual de
prcticas de Anlisis
Instrumental pp.15 y se
aadi 0.1mL de las
soluciones interfetentes
contenidas en la Tabla 1
del Manual de Prcticas
pp.16.

NOTA: TODAS LAS REACCIONES ANTERIORES FUERON LEDAS A 595nm.

17

Laboratorio de Anlisis Instrumental

Resultados
Tubo
Mg protena
Serie A
Serie B
1
.1
0.451
0.381
2
.2
0.666
0.629
3
.3
0.859
0.8
4
.4
0.979
0.992
5
.5
1.01
1.035
Tabla 1 (arriba) y 2 (abajo) Curva de Calibracin de Albumina Mtodo
Bradford
Pendiente
1.671
Ordenada al Origen
0.3637
Coeficiente de Correlacin
0.9576
Con los datos obtenidos de Absorbancia y concentracin de cada medicin se
realiz la curva de calibracin, la cual mostro un coeficiente de variacin del
0.9576, valor muy cercano a 1, por lo tanto indica que existe una muy buena
relacin de tipo lineal entre la concentracin y la Absorbancia
Esta curva no cumple con la ley de Bouger y beer ya que su correlacin es de
.09576 que a pesar se elevado no entra dentro de los parmetros permitidos de
esta.

Tubo
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Abs(590 nm)
1.326
1.351
1.334
1.343
1.278
1.385
1.380
1.401
1.506
1.603

Promedio
DS
Varianza
CV
Lim Confianza

.06969
.0573
3.29X10^-3
.0822
0.6612 0.732

Mg de protena(albumina)
0.6582
0.6731
0.6630
0.6680
0.6295
0.6935
0.6905
0.7031
0.7659
0.8239

18

Laboratorio de Anlisis Instrumental

Tabla 2. Replicas para el anlisis Estadstico

Tubo
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Sustancia
Tris pH 7
Glicerol 1%
Detergente 1%
Dodecil sulfato de
sodio 1%
cido
tricloroacetico 5%
Fenol
Mercatoeptanol
Tris pH 10
Urea
(NH4)2SO4

Abs(590 nm)
1.488
1.526
0
0.857

Mg protena
0.7312
0.7539
0
0.3536

1.549

0.7647

1.576
1.557
1.506
0
0

0.7839
0.7725
0.7420
0
0

Tabla 3. Efecto de Algunas Sustancias no Proteicas en el mtodo de

Bradford
Discusin de resultados
De la curva de calibracin se pudo determinar que no se llevaba a cabo la ley de
Bouger y Beer ya que la absorbencia aumentaba al aumentar la concentracin de
esta sin tener un parmetro que definido , adems nuestro factor de correlacin
fue de 0.957 esto nos da a entender que su confiabilidad es elevada, sin embargo
no es lo suficientemente bueno para ser aceptado, las razones por las cuales se
pudieron deber esto pudo ser desde el principio al medir los reactivos y colocarlos
en los tubos as como tambin pudo ser la preparacin de los reactivos
Las absorbencias fueron calculadas con la ecuacin de la recta de la curva de
calibracin y nos dieron lso resultados dados en la tabla 2, obteniendo diferentes
masas proteicas en cada uno como se muestra teniendo casi todos los tubos
dentro del intervalo permitido calculado de protenas en estas
As mismo se realizaron las 10 interferencias dando en algunas una absorbencia
de cero, esto pudo ser por diversas razones tanto en la mala manipulacin del
reactivo como hacer mal los clculos o incluso error del encargado del
experimento, sin embargo, dentro de este mtodo que fue el de Bradford consta
de mayor sensibilidad y es en un punto de vista de los mejores a utilizar ya que la
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Laboratorio de Anlisis Instrumental

reaccin tarda solo 5 minutos en terminar y esta misma tiene 1 hora promedio de
vida estable
Conclusin
Se demostr la sensibilidad ya mencionada del mtodo, asi mismo que cada error
cometido nos alejo ms de nuestro resultado optimo, perdiendo fiabilidad en los
resultados.
Y donde las interferencias demostraron que la robustez de este mtodo se ve
mermada, por estos agentes qumicos.
Referencias
!

Bradford, M. M. 1976. A Rapid and Sensitive Method for the Quantiation of

Microgram Quantities of protein utilizing the Principle of Protein-Dye Binding.
Anal. Biochem. P.p. 9-10

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