17/09/2008

TEMA 5

Enzimas y Coenzimas

Enzimas
Catalizadores biolgicos. Protenas de forma globular
Especficas
E
fi
para un substrato
b t t particular
ti l (Estreo
(

especificidad)
f
)
Aceleran reacciones especficas qumicas(103-10 20)
Actan en disolucin acuosa, a pH y temp. ptimos
Son las unidades funcionales del metabolismo celular

Reacciones acopladas (catabolismo anabolismo)

17/09/2008

COOC-H
H-C

COOC-H
C-H

Fumarato
(= ,trans)

Maleato
(= ,cis)

COO-

COO+ N H3+

Aspartasa
COOH3+N-C-H
C-H2
COO-

COOH-C- NH3+
C-H2
COO-

L-Aspartato

D-Aspartato

Enzima

pH ptimo

Pepsina

1.5

Tripsina

7.7

Catalasa

7.6

Arginasa

9.7

Fumarasa

7.8

Ribonucleasa

7.8

17/09/2008

Enzima

Temp. pt.
(oC)

Mamferos

37

Bacterias y algas

aprox.

100

Bacterias rticas

aprox.

Bacterias en muestra de hielo antigua

17/09/2008

Enzimas
Catalizadores biolgicos. Protenas de forma globular
Especficas
E
fi
para un substrato
b t t particular
ti l (Estreo
(

especificidad)
f
)
Aceleran reacciones especficas qumicas(103-10 20)
Actan en disolucin acuosa, a pH y temp. ptimos
Son las unidades funcionales del metabolismo celular
Reacciones acopladas (catabolismo anabolismo)

Reguladoras de rutas metablicas (Oligomricas)

17/09/2008

Enzima

(gr).

: fermento

1800s

fermentacin del azcar por levaduras

Vitalistas
Mecanicistas
1926, James B. Summer
1930s
1930
s

Ureasa

Pepsina
Tripsina
Quimotripsina
Carboxipeptidasa
Enzima Amarillo viejo (flavoprotena NADPH)

Medicina

Transaminasas

Industria
Qumica

P i ili
Penicilina

Transformacin
de Alimentos

Fermentaciones
Quesos
Vinos

Agricultura

Rhyzobium

17/09/2008

Estructura
globular
l b l
Hervir con HCl
Tripsina
Temperatura elevada
pH extremo
Inactiva

Funcionalidad

S: PM 250, 0.8 nm

C f t
Cofactor
E: PM 100000, 7 nm
Inorgnico:
Fe2+, Mn2+, Zn2+,etc.

Orgnico:
g
Coenzimas
NAD,
FAD,
CoASH.
Grupo Prosttico

17/09/2008

Holoenzima

Apoenzima

Enzimas que requieren

elementos inorgnicos
Citocromo oxidasa
Catalasa, peroxidasa

Fe2+, Fe+,

Cit
Citocromo
oxidasa
id

Cu2+
C

DNA polimerasa
Anhdrasa carbnica
Alcohol deshidrogensa

Zn2+

Hexoquinasa
Glucosa 6-fosfatasa

Mg2+

Arginasa

2
Mn2+

Piruvato quinasa

K+, Mg2+

Ureasa

Ni2+

Nitrato reductasa

Mo2+

17/09/2008

Coenzimas: Actan como transportadores eventuales de

tomos especficos o de grupos funcionales
Coenzimas

Entidad transferida

Pirofosfato de tiamina . Aldehdos

Dinucletido de flavina y adenina. tomos

de hidrgeno

Ion hidruro (H-)

Coenzima A . Grupos acilo

Dinucletido de nicotinamida y de adenina

Fosfato de Piridoxal . Grupos amino

5-Desoxicobalamina ((Coenzima B12)) tomos de H y g
grupos
p

alquilo
Biocitina . CO2
Tetrahidrofolato . Otros grupos
monocarbonados

Coenzimas

Adenosine Triphosphate (ATP)

Coenzyme A (CoA)

Nicotinamide Adenine
Dinucleotide (NAD+)

Nicotinamide Adenine Dinucleotide

Phosphate (NADP+)

Flavin Adenine Dinucleotide (FAD)

17/09/2008

VITAMINAS
C (cido
ascrbico)

B1 (t
(tiamina)
a
a)
B2
(riboflavina)
B3 (cido
pantotnico)

Enfermedades
carenciales

FUNCIONES
Coenzima de algunas peptidasas.
Interviene en la sntesis de colgeno
Coenzima de las descarboxilasas y de
las
as e
enzima
a que ttransfieren
a s ee g
grupos
upos
aldehdos
Constituyente de los coenzimas FAD y
FMN
Constituyente de la CoA

B5 (niacina)

Constituyente de las coenzimas NAD y

NADP

B6
B6
(piridoxina)

Interviene
Interviene en las reacciones de
transferencia de grupos aminos.

B12
(cobalamina)
Biotina

Beriberi
e be
Dermatitis y lesiones
en las mucosas
Fatiga y trastornos del
sueo
Pelagra
Depresin, anemia

Coenzima en la transferencia de grupos

metilo.
Coenzima de las enzimas que
transfieren grupos carboxilo, en
metabolismo de aminocidos.

Substrato

Escorbuto

Anemia perniciosa
Fatiga, dermatitis

Enzima

Urea

Ureasa

Arginina

Arginasa
Pepsina

Lis, Arg

Tripsina
Amilasa
Rec A

rec A

HSP70

Protena de
choque trmico

gen

Caract.

Comit de la Unin Internacional de Bioq. y Biol. Mol. (IUBMB)

http://www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme/

http://www.enzyme-database.org/

http://us.expasy.org/enzyme/

17/09/2008

Clases de Enzimas:
1. Oxidorreductasas
2 Transferasas
2.
T
f
3. Hidrolasas
4. Liasas
5. Isomerasas
6. Ligasas

Enzimas:
No.

Clase

Tipo de reaccin
que catalizan

Oxidorreductasas De xido reduccin

(transferencia de e-)

Ejemplo
Deshidrogenasas
Peroxidasa
Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas

Reduccin: ganancia de electrones (hidrgeno o prdida de

oxgeno)
Oxidacin: prdida de electrones (hidrgeno o ganancia de
oxgeno).
La Oxidacin y la Reduccin son reacciones acopladas (REDOX)

10

17/09/2008

1. Oxido-reductasas
( Reacciones de oxido-reduccin).

Si una molcula se reduce, tiene que haber otra que se oxide

Enzimas:
No.

Clase

Tipo de reaccin que

catalizan

Oxidorreductasas

De xido reduccin (transferencia de

e-))

Transferasas

Transferencia de grupos

Ejemplo
Deshidrogenasas
Peroxidasa Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas

Kinasas
Transaminasas

11

17/09/2008

2. Transferasas
(Transferencia de grupos funcionales)

grupos aldehdos
gupos acilos

Succinato Deshidrogenasa

grupos glucosilos

Citocromo c oxidasa.

grupos fosfatos (kinasas)

3. Hidrolasas
(Reacciones de hidrlisis)

Transforman polmeros en monmeros.

Actan sobre:
enlace ster
enlace glucosdico
enlace peptdico
enlace C-N

12

17/09/2008

4. Liasas
(Adicin a los dobles enlaces)

Entre C y C
Entre C y O
Entre C y N

5. Isomerasas
(Reacciones de isomerizacin)

13

17/09/2008

Enzimas:
No.

Clase

Tipo de reaccin que

catalizan

Oxidorreductasas

Transferasas

Hidrolasas

Liasas

Isomerasas

Transferencia de g
grupos
p en el
interior de las molculas para
dar formas ismeras

Mutasas
Epimerasas
Racemasas

Ligasas

Formacin de enlaces C-C,

C-S, C-O y C-N. Mediante
reacciones de condensacin,
acopladas a la ruptura del ATP

Sintetasas

De xido reduccin (transferencia de e-)

Transferencia de grupos
Hidrlisis, con transferencia de grupos
funcionales del agua
Lisis de un substrato, generando un
doble enlace, o
Adicin de un substrato a un doble
enlace de un 2o. substrato
(Sintasa)

Ejemplo
Deshidrogenasas
Peroxidasa Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas
Kinasas
Transaminasas
Pirofosfatasa
Tripsina
Aldolasa
(Sintasas)
Descarboxilasa pirvica

6. Ligasas
(Formacin de enlaces, con aporte de ATP)

Entre C y O
Entre C y S
Entre C y N
Entre C y C

14

17/09/2008

E + S

SE

E + P

Cmo detectar una enzima?

1.

Actuacin global de la reaccin catalizada.

2
2.

Utilizar un procedimiento analtico para la determinacin de S

que desaparece o los productos de la reaccin que aparecen.

3.

Si la enzima requiere cofactores (ines metlicos o

coenzimas).

4.

La dependencia de la actividad enzimtica con la [S] o sea KM

del S.

5.

El pH ptimo.

6.

Un intervalo de temperatura en la que la enzima es estable y

muestra actividad elevada.

15

17/09/2008

1.0 Unidad de Actividad Enzimtica

Es la cantidad que transforma 1.0 M (10-6 M) de S /min
a 25oC, en las condiciones de medida ptima.

La Actividad Especfica
Es el no. de U de enzima / mg de protena.
Es una medida de la pureza de la enzima.
Catalasa de
Aspergillius niger
4000-8000 U/mg de prot.
100 mg $ 209.80 USD.

Catalasa de
Hgado de bisonte
2000-5000 U/mg de prot.
1 g $ 768.50 USD.

El Nmero de Recambio de una Enzima

Es el no. de molculas de S transformadas / unidad de tiempo,
por una molcula de enzima
(o por un slo sitio cataltico,
cataltico cuando la E, es el limitante)
limitante).

Enzima.

Moles de S, transf./ min.

a 20-38 oC.

Anhidrasa carbnica
-Amilasa
-Galactosidasa
Fosfoglucomutasa

36 000 000
1 000 000
12 000
1 240

16

17/09/2008

17

17/09/2008

18

17/09/2008

19