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RELATRIO
DA
BBM
2013-2014, MEBIOM
RESUMO
A actividade laboratorial TP3 baseou-se na caracterizao cintica da
enzima invertase. Esta enzima capaz de catalisar a hidrlise da
sacarose nos seus diferentes monmeros.
Ento a finalidade do trabalho prtico foi estudar a influncia que a
quantidade de substrato tem na actividade da enzima.
Aps a medio da absorvncia de cada soluo e atravs dos
mtodos de Lineweaver-Burk e Michaelis-Menten, foi possvel
determinar o Km (concentrao de substrato) e a velocidade mxima
correspondente enzima em estudo.
Os valores obtidos
respectivamente,
para
Km
para
velocidade
so,
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BBM
2013-2014, MEBIOM
Resultados
Com a realizao da actividade laboratorial obtivemos o valor de
absorvncia de cada uma das concentraes de sacarose ao longo do
tempo, em que ocorria a aco da enzima.
Concentra
o de
sacarose
(g/L)
15
Absorvncia
min0
min1
min3
min5
min7
0,057
0,093
0,335
0,703
0,655
30
0,01
0,202
0,942
1,599
2,244
45
0,011
0,236
0,788
1,422
2,477
60
75
0,005
0,004
0,375
0,117
1,084
0,453
1,782
0,91
2,415
1,37
0,3
0,931
1,735
2,057
100
Concentrao
de sacarose
(g/L)
15
30
45
60
75
100
min0
min1
min3
min5
min7
0,0811
0,0260
0,0271
0,0201
0,0189
0,0142
0,1234
0,2514
0,2913
0,4546
0,1516
0,3665
0,4076
1,1204
0,9395
1,2871
0,5461
1,1074
0,8397
1,8919
1,6840
2,1067
1,0828
2,0516
0,7833
2,6492
2,9229
2,8500
1,6229
2,4297
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BBM
2013-2014, MEBIOM
3.0000
15g/L
Linear (15g/L)
2.5000
Linear (15g/L)
Linear (15g/L)
30g/L
Linear (30g/L)
Linear (30g/L)
2.0000
45g/L
Linear (45g/L)
Linear (45g/L)
1.5000
60g/l
Linear (60g/l)
75g/l
Linear (75g/l)
1.0000
Linear (75g/l)
100g/l
Linear (100g/l)
Linear (100g/l)
0.5000
0.0000
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2013-2014, MEBIOM
GRFICO 1 : CONCENTRAO DE AUCAR (G/MOL, EIXO DOS YY) EM FUNO DO TEMPO (MIN, EIXO
DOS XX)
Concentra
o de
Sacarose
(g/L)
Velocida
de
(g/Lmin)
15
(1)
0,1041
30
0,3845
45
0,4055
1/V
1/S
Velocidade
(mol/Lmin)
(2)
(3)
(4)
9,606
1
0,0667
0,0003042
2,600
8
2,466
0,0333
0,0011235
0,0222
0,0011848
1/V
(Lmin/m
ol)
(5)
3287,608
07
890,0910
27
843,9950
Inverso da
concentra
o
mol/Lmin
(6)
22,8160
11,4080
7,6053
Concentra
o mol/L
(7)
0,04382889
2
0,08765778
4
0,13148667
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1
60
0,4031
75
0,2321
100
0,3613
2,480
8
4,308
5
2,767
8
68
0,0167
0,0011778
0,0133
0,0006782
0,0100
0,0010557
849,0200
94
1474,536
84
947,2460
56
5,7040
4,5632
3,4224
0,17531556
8
0,21914446
0,29219261
3
(3) Inverso da
(5) Inverso da
Grfico de Michaelis-Menten
0
0
0
0
Velocidade(mol/min) 0
0
0
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
Concentrao (mol/L)
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Vmax [ S]
Km+[ S ]
+
v Vmx [ S ] Vmx
Linewearer Burk
3500
3000
f(x) = 114.14x + 325.94
2500
2000
Inverso da velocidade
1500
1000
500
0
0.0000
10.0000
20.0000
30.0000
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GRFICO 3 : LINEWEAVER-BURK
y= 114,14x + 325,94
y=
mx +
1
Km
1
1
=
+
V
Vmx [ S ] Vmx
.
possvel ento chegar aos valores de Vmx e Km:
Vmx
(g/Lmin
)
0,00307
Km(mM
)
Produto
Substra
to
350,187
2
332,615
6
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DISCUSSO
No
presente
trabalho,
pretendia-se
caracterizar
cintica
de
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Menten
Nesta figura possvel observar o Km, constante de Michaelis, que
representa a concentrao de sacarose (substrato) para a qual a
velocidade metade da velocidade mxima. Esta constante uma
medida
de
afinidade,
sendo
que
valores
muito
elevados
v =vmax
[ S]
Km+[S]
|114.094061.2|
61.2
0.864281
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que
diz
respeito
aos
erros
sistemticos
nesta
atividade
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