CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLGICO

industrial y de servicios N 24

MANUAL DE PRCTICAS
IDENTIFICAR LEUCEMIAS Y REALIZAR TCNICAS DE
VALORACIN HEMOSTTICA

NOMBRE DEL ALUMNO:___________________________ GRUPO:________

NOMBRE DEL PROFESOR_________________________________________

CICLO ESCOLAR: AGOSTO 2011-ENERO2012

INTRODUCCIN

Al trmino del curso el alumno ser competente para:

Distinguir los tipos de Leucemias y realizar pruebas de Laboratorio para
valorar los mecanismos hemostticos con un estricto control de calidad.

Al finalizar cada unidad el alumno ser capaz de:

1.-Clasificar las Leucemias indicando las manifestaciones clnicas y el
diagnstico de laboratorio.
2.- Analizar los mecanismos hemostticos e identificar los diferentes
trastornos hemorrgicos.
3.-Aplicar las tcnicas de laboratorio para valorar la funcin hemosttica.

El presente manual
pretende ser una gua de trabajo
de los
procedimientos para el diagnstico de los componentes de la sangre.
especialmente el poder demostrar las caracteristicas de las clulas de la
sangre sobre todo si se sospecha de una patologa como es el caso de las
leucemias.estas pueden ser diagnosticadas gracias a las tinciones
especiales .

INDICE
PRCTICA N 1
PREPARACIN DE ANTICOAGULANTE
PRCTICA No 2
OBTENCIN DE MUESTRAS
PRCTICA N 3
BIOMETRA HEMTICA
PRCTICA N 4
RECUENTO DE PLAQUETAS: MTODO DIRECTO
PRCTICA N5
RECUENTO DE PLAQUETAS: MTODO INDIRECTO

 PRCTICA No. 6
TIEMPO DE SANGRADO: MTODO DE DUKE
PRCTICA N7
TIEMPO DE COAGULACIN: MTODO DE LEE Y WHITE
PRCTICA N 8
TIEMPO DE COAGULACIN: MTODO DE TUBO CAPILAR
PRCTICA N 9
DETERMINACIN DEL TIEMPO DE COAGULACIN EN EL PLASMA RECALCIFICADO
PRCTICA N10
RETRACCIN DEL COAGULO
PRCTICA N 11
PRUEBA DE LAZO O TORNIQUETE
PRCTICA N 12
TIEMPO DE PROTROMBINA. POR MTODO DE QUICK
PRCTICA N 13
CONSUMO DE LA PROTROMBINA
PRCTICA N 14
TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA

PRCTICA N 15

TIEMPO DE TROMBINA
REFERNCIAS BIBLIOGRAFICAS

PRCTICA N 1
PREPARACIN DE ANTICOAGULANTES
FUNDAMENTO
Debido a que en hematologa se requiere estudiar a la sangre con sus elementos formes asi
como hacer recuento de sus clulas y revisiones morfolgicas, es indispensable obtener la
sangre con un anticoagulante que sea capaz no solo de mantener la sangre sin coagularse,
sino que preserve, de la mejor manera posible, la morfologa celular. Para esto, existen
diversos anticoagulantes, que actan de diferentes modos: la heparina es un inactivador de
la trombina y de la tromboplastina, los citratos, oxalatos, EDTA remueven el calcio, ya sea
precipitndolo como sal (oxalato) o fijndolo en forma no ionizada (citratos y EDTA). La
desfibrinacin es un mtodo alterno para obtener sangre lquida mediante a remocin de la

fibrina formada al coagularse la sangre. Sin embargo, de esta manera no se evita la

coagulacin y, por lo tanto, la sangre pierde diversos factores de coagulacin, pudiendo sufrir
diversas alteraciones morfolgicas. Por otro lado es obvia la importancia que tiene la eleccin
y dosificacin correcta del anticoagulante.
No debemos olvidar que una cantidad insuficiente de anticoagulante puede provocar una
coagulacin parcial y que el exceso del mismo diluye la muestra, con los consecuentes
errores de medicin. Por otro lado, el anticoagulante inadecuado puede ocasionar distorsin
de las clulas. Por lo anterior, resulta obvia la importancia que tiene la eleccin y dosificacin
correcta del anticoagulante.
Cuando requerimos estudiar los factores de la coagulacin, es conveniente utilizar,
adicionalmente, material siliconizado, con la finalidad de retrazar la activacin del factor VII y
la adherencia de las plaquetas a las paredes del tubo
OBJETIVOS: al terminar la prctica, el alumno ser capaz de
1. Preparar correctamente los principales anticoagulantes de importancia en hematologa
2. Seleccionar el anticoagulante ms adecuado para cada determinacin
MATERIAL Y EQUIPO

Balanza analtica
MATERIAL BIOLGICO

Ninguno
REACTIVOS

Oxalato de Amonio
Oxalato de Potasio
Citrato Disdico
Dextrosa
cido etilen diamino tetractico (EDTA)
Heparina
Agua destilada
Tubos de ensaye de 13 x 100 mm, con tapn
Matraces aforados de 100 ml
Tubos de centrfuga de 5ml
Pipetas serolgicas de 5ml

PROCEDIMIENTO:
Oxalatos
Se utiliza la mezcla de oxalatos de amonio y potasio en proporcin 3:2, la que es
conocida como mezcla de Wintrobe o de Heller y Paul. La sal de Amonio tiende a aumentar
el volumen eritrocitario en tanto que la de potasio lo disminuye. Con las proporciones
mencionadas, se logra mantener el volumen sin alteraciones.
Preparacin:
Oxalato de amonio1.2 g

Oxalato de potasio0.8 g
Agua destilada100.0 ml
En tubos sin tapn, se coloca 0.1 ml de anticoagulante por cada ml. De sangre que se
vaya a depositar, es decir, que si necesitamos 5ml de sangre, deberemos colocar 0.5ml de la
mezcla de oxalatos. Con la finalidad de evitar dilucin, los tubos destapados se ponen en un
incubadora hasta que se evapore el agua y quede nicamente el polvo seco.
Ventajas:
1. Bajo costo
2. No modifica el volumen eritrocitario
3. El plasma obtenido se puede utilizar para otros exmenes (como bioqumicos por
ejemplo), exceptuando aquellos en los que el nitrgeno contenido en el oxalato de
amonio pudiera ocasionar una interferencia. Como en las determinaciones de urea
Desventajas:
1. Puede producir hemlisis
2. No pueden hacerse extendidos sanguneos despus de algunos minutos, ya que se
producen alteraciones leucocitarias como vacuolas en los neutrfilos, degeneracin
nuclear en los leucocitos, fagocitosis de cristales de oxalato.
Citratos
a) Citrato de Sodio
Se utiliza en solucin de 3.8% que es isotnica
Preparacin:
Citrato disdico3.8 g
Agua destilada.100.0 ml
En tubos de preferencia graduados, se colocan 0.5 de la solucin de citrato de sodio,
para aforar a 5ml con la sangre. Su uso se ha restringido al estudio de la coagulacin.
Ventajas:
1. Es excelente para realizar pruebas de coagulacin
2. Bajo costo
Desventajas:
1. No es til para estudios morfolgicos pues altera la morfologa eritrocitaria y
leucocitaria
2. Debido a que ocasiona dilucin importante (i a 10) no es til para realizar otras
determinaciones cuantitativas

b) ACD (cido ctrico-dextrosa)

Tiene su principal aplicacin en bancos de sangre pues preserva la sangre hasta por tres
semanas y se puede transfundir sin toxicidad. En el laboratorio de hematologa, se utiliza
para preservas los antgenos de los eritrocitos cuando estos se quieren estudiar.

Preparacin:
Citrato sdico (monocido)..2.0 g
Dextrosa...3.0 g
Agua destilada (libre de pirgenos)20.0ml
Se usa en proporcin de 4 ml de sangre por un ml de anticoagulante. La sangre as obtenida
se conserva en refrigeracin a 4C.
Ventajas:
1) Conserva las clulas viables durante tres semanas
2) No es txico, por lo que se puede transfundir
Desventajas:
1) No es til para la mayora de los estudios hematolgicos cuantitativos porque
ocasiona gran dilucin
EDTA
El cido etilen diamino tetractico se puede utilizar como sal diposdica o tripotcica.
Tiene una actividad anticoagulante muy intensa ya que impide que se ionice el calcio por
quelacin del mismo, adems, conserva la morfologa celular durante muchas horas, por lo
que es el anticoagulante de mayor uso en hematologa. La sal tripotsica es ms soluble
razn por la que se usa preferentemente. En los contadores automticos, que cuentan
plaquetas, tambin funciona mejor ya que no deja partculas que puedan ser contadas como
plaquetas.
Preparacin:
EDTA(disdico o tripotsico)..2.0 g
Agua destilada.100.0ml
Se disuelve el EDTA en el agua de preferencia a 37C y posteriormente se filtra, se
deporita en tubos a razn de 0.1ml de anticoagulante para 5ml de sangre. Se puede
evaporar a sequedad con lo que se evita totalmente la dilucin de la muestra.
Ventajas:
1) Es muy barata
2) Fcil de preparar
3) Tiene gran poder anticoagulante porque se requieren bajas concentraciones
4) Conserva excelente la morfologa celular
5) Evita la aglutinacin plaquetaria
6) Se considera el mejor anticoagulante para hematologa habitual
Desventajas:
Ninguna
Heparina

Es un anticoagulante habitual de gran potencia; se considera el mejor para prevenir la

hemlisis y las alteraciones morfolgicas. Sin embargo, su uso se ha limitado debido a que
su costo es significativamente mayor que los anticoagulantes artificiales. La heparina se
puede obtener en sales de sodio, calcio o amonio.
Preparacin
Heparina1000 UI/ml
Colocar en un tubo una gota de solucin de Heparina y evaporar a sequedad. Esta
cantidad es suficiente para anticoagular 7ml de sangre.
Un mtodo alterno consiste en aspirar la heparina con la jeringa y regresarla
nuevamente al recipiente: la cantidad que queda impregnada en las paredes de la aguja es
suficiente 10ml de sangre.
Ventajas:
1) Tiene una gran actividad anticoagulante natural
2) No ocasiona alteraciones morfolgicas
3) El plasma obtenido puede ser utilizado para otra prueba bioqumica
4) Es ideal para gasometras
Desventajas:
1) Su costo es ms elevado que el de los dems anticoagulantes.
COMENTARIOS
Es importante mencionar que, aun con el mejor anticoagulante, se puede tener errores
que ocasionen defectos analticos. Para minimizarlos, conviene tener en cuenta lo siguiente:
1) Al obtener una muestra de sangre, hay que depositarla de inmediato en el tubo con
anticoagulante y mezclarla perfectamente por inversin del tubo o mediante un
mezclador mecnico rotatorio, nunca por agitacin, que podra hemolizarla.
2) Los extendidos sanguneos debern realizarse lo ms pronto posible para evitar que la
accin del anticoagulante provoque alteraciones morfolgicas.
3) Si en un lapso de 24 horas no se realizaran las determinaciones analticas, es
conveniente refrigerar la muestra de 4-8C.
4) Si se van a efectuar exmenes en plasma, es conveniente separarlo por
centrifugacin lo ms pronto posible.
Actualmente, para la obtencin de muestras, se utiliza un sistema de tubos al vaci, que ya
tienen anticoagulante y que se identifica por lo colores del tapn.
TAPN
Lavanda
Azul claro
Negro
Amarillo Claro
Verde
Rojo

ANTICOAGULANTE
EDTA
Citrato de Sodio
Oxalatos
ACD
Heparina
Sin Anticoagulante

PRCTICA No 2
OBTENCIN DE MUESTRAS
Fundamento:
En todo laboratorio clnico, podemos afirmar que la calidad de un examen empieza
con la calidad de la muestra. El de hematologa no es la excepcin, por lo que resulta
fundamental conocer la metodologa correcta para la obtencin de las muestras, as como las
ventajas, desventajas, las indicaciones y los riesgos.
Para algunas determinaciones en las que se requiere una pequea muestra es posible
obtenerla mediante puncin capilar, sin embargo, para la mayora de exmenes se utiliza la
puncin venosa por las razones que mas adelante se mencionan.
Nunca debemos olvidar que todo el material que se use para obtener muestras debe
ser estril y desechable. Los riesgos importantes de transmisin de enfermedades, como
Hepatitis y SIDA, nos obligan a tomar estas medidas y a no poner al paciente en peligro de
contaminacin por reutilizar material, a pesar de que sea esterilizado. Por otro lado es
importante considerar las medidas de bioseguridad para evitar que nosotros podamos
contaminar al obtener muestras de pacientes enfermos.
Objetivos: Al terminar la prctica, el alumno ser capaz de:
1 Justificar la indicacin de los mtodos de obtencin de muestras.
2 Obtener correctamente muestras capilares y venosas de calidad analtica.
Material y Equipo
Ninguno
Material Biolgico
Ninguno
Material de Laboratorio
Torundas de algodn
Lancetas estriles
Tubos capilares con heparina
Tubos capilares con heparina
Alcohol etlico a 70%
Jeringas de 10 ml desechables. Con agujas de 21 x 32 mm
Tubos con anticoagulante
Tubo de ltex para ligadura
Maneral y agujas Vacutainer desechables calibre 21 x 32 mm
Tubos vacutainer tapn lavanda (EDTA)
Tubos vacutainer tapn azul claro (citrato de sodio)
Gradilla

Procedimiento:
PUNCIN CAPILAR
Es tambin conocida como puncin cutnea y se utiliza cuando se requiere obtener
cantidades muy pequeas de sangre y la puncin venosa resulta difcil. La metodologa para
realizarla es la siguiente:
1.- Seleccionar el sitio adecuado. Los sitios ms utilizados son: el lbulo de la oreja, la yema
de un dedo y el taln. Este ltimo es el de eleccin en recin nacidos. Es importante
asegurarse de que el sitio elegido se encuentre tibio, para garantizar que los vasos
sanguneos se encuentren dilatados y la sangre fluya libremente, de lo contrario, se obtendr
muy poca sangre.
2.- Asepsia. Usando una torunda con alcohol, frotar perfectamente el sitio elegido para la
puncin mediante un barrido, sin pasar la torunda nuevamente por le mismo sitio. Con esto,
se elimina suciedad y detritus celulares y se evita la introduccin de grmenes al puncionar.
Antes de hacer esto, dejar que el alcohol se evapore hasta sequedad.
3.- Puncin. Con la lanceta estril y desechable, hacer la puncin insertndola de un solo
golpe en un ngulo de 90 y verificando que se introduzca hasta el tope. De esta manera,
siempre se logra hacer una puncin uniforme con profundidad y amplitud.
4.- Obtencin de la muestra. Desechar la primera gota de sangre que aparezca pues
contiene lquido tisular y diluye la sangre. Dejar que la sangre fluya libremente y recogerla en
un tubo capilar con o sin heparina, segn sea necesario. No hacer expresin del sitio de
puncin ya que con ello se ocasiona la salida del lquido entersticial. Existen en el mercado
pequeos recipientes especiales para recibir la sangre capilar (microtainer BD), con y sin
anticoagulante, que permiten manejar la muestra de mejor manera que con los tubos
capilares. Una vez obtenida la sangre necesaria, se aplica en el lugar del pinchazo una
torunda con alcohol, haciendo presin para evitar que siga sangrando.
Ventajas:
1.- Gran facilidad para obtener pequeas cantidades de sangre, aun en pacientes con venas
difciles.
2.- Es la forma preferida para la realizacin de frotis sanguneos.
Desventajas
1.- Solo puede obtener una pequea cantidad de sangre. Si se requiere mas muestra, es
necesario volver a puncionar.
2.- La muestra fcilmente se hemoliza.
3.- Los valores obtenidos son diferentes a los de sangre venosa. Es necesario obtener
valores de referencia.
4.- No se debe usar en pacientes con riegos de infeccin, pues se favoreca con las
punciones repetidas

PUNCIN VENOSA
Es la mas utilizada para obtener muestras de sangre. Es una forma sencilla y
adecuada para obtener la cantidad de sangre necesaria para realizar un gran numero de
pruebas, inclusive grandes cantidades que se pueden distribuir en varios tubos, de acuerdo
con las necesidades especificas. La metodologa es la siguiente:
1.- Preparacin. Se informa al paciente del procedimiento que se realizara, con la finalidad de
calmarlo. Una puncin siempre genera un cierto grado de tensin nerviosa, el paciente debe
estar sentado cmodamente o acostado.
2.- Seleccionar el sitio adecuado. El mas usado es la fosa ante cubital, en la vena mediana
ceflica, dado que es mas fcil de localizar y palpar en casi todos lo pacientes, con
excepcin de los obesos. Sin embargo, si esto no es posible, es necesario buscar otro sitio
para la puncin. Algunas veces se tiene que utilizar las venas del dorso de la mano, pero es
necesario tener un cuidado especial y experiencia para evitar la formacin de hematomas
alrededor de stos vasos mviles que carecen de fijacin. En general, las venas deben de
examinarse y evaluarse, si son profundas y no logran palparse bien, no se debe intentar
pincharlas, pues seria tanto como actuar a ciegas. Para realizar la puncin el la yugular
interna, humeral y femorales es necesario poseer mucha experiencia, por el riesgo que ello
implica.
3.- Asepsia. Usando una torunda con alcohol, se frota perfectamente el sitio elegido para la
puncin mediante un barrido, sin pasar la torunda por el mismo sitio. Con esto, se eliminan
suciedad, detritus celular y se evita la introduccin de grmenes al puncionar. Antes de hacer
esto, dejar que el alcohol se evapore a sequedad.
4.- Torniquete. Mientras que el alcohol se seca, se aplica un torniquete, unos 7 cm por
encima del sitio de puncin. No se debe dejar por mas de un minuto pues se provocara
xtasis venosa que podra modificar los valores hemticos. Desde luego que el torniquete no
debe ser muy apretado, pues podra ser molesto para el paciente. se invita al paciente a
apretar el puo, con lo que se favorece la fijacin de la venas adems de que la compresin
muscular aumenta el flujo venoso con dilatacin de las venas.
5.- Venopuncion. Se fija ala vea en posicin, sosteniendo el brazo del paciente con la mano
mientras se estiran y comprimen los tejidos blandos situando justo debajo de donde se va a
puncionar. Se toma la jeringa o el maneral del Vacutainer de manera que el bisel de la aguja
se encuentre hacia arriba. Poniendo al aguja paralela al trayecto de la vena. Se hace avanzar
la punta de la aguja debajo de la piel de 0.5 cm y luego se perfora la pared de la vena. La
introduccin se hace con suavidad pero con la suficiente rapidez para reducir las molestias.
6.- Obtencin de la muestra. Si se utiliza una jeringa se tira hacia atrs el embolo de la
jeringa de, manera suave, lenta y uniforme medida que la sangre va fluyendo. Se debe
permitirle flujo de la sangre sin forzarlo, para evitar la hemlisis. Si se utiliza un sistema de

tubos al vaco, en cuanto la aguja haya penetrado en la vena, se introduce un tubo en le

maneral de sujecin, el que se mantiene fijo con la otra mano, hasta que el tapn del tubo
sea atravesado por la aguja situada dentro del maneral. Una vez que el tubo se lleno, se
extrae y se repite la operacin con tantos tubos sea necesario. En ambos casos, en cuanto la
sangre empieza a fluir, se retira el torniquete; al tener la sangre suficiente, se invita al
paciente a abrir su puo. La aguja se retira en sentido inverso o como se introdujo,
hacindolo tambin de manera suave pero con un solo movimiento. De inmediato, se coloca
una torunda de algodn con alcohol en el sitio de puncin, ejerciendo presin sobre la zona
mantenindola as por lo menos de 3 a 4 minutos para evitar la formacin de hematomas.
Recordar que estos sern testimonios elocuentes de la torpeza del operador.
7.- Depsito e identificacin de las muestras. Inmediatamente despus de estriada la aguja,
las muestras se deben depositar en los tubos necesarios, con o sin anticoagulante, retirando
previamente la aguja y hacindola resbalar suavemente por las paredes del tubo. De otra
manera, se puede ocasionar hemlisis. En caso de haber utilizando un sistema la vaci, la
seleccin de esto se hizo previamente. No olvidar que, en cuanto se deposite una muestra en
un tubo con anticoagulante, es indispensable mezclarla por lo menos 5 minutos para
garantizar una correcta anticoagulacin. Asimismo, es de vital importancia la identificacin
inmediata y correcta de los tubos para evitar posibles confusiones de muestras que seria
catastrficas.
8.- Orden de extraccin. Para evitar la activacin de la coagulacin con las consecuentes
alteraciones de las pruebas, as como la contaminacin entre los diferentes aditivos de los
tubos, se recomienda seguir el siguiente orden en la extraccin de los tubos Citrato,
Heparina, EDTA, Oxalato y finalmente los tubos sin aditivo.
9.- Desecho de la aguja. La aguja se desprende de la jeringa o maneral usando, de
preferencia, un eliminador de agujas (BD), que al llenarse ser esterilizado antes de ser
eliminado en la basura. Si no cuenta con este, las agujas se deben depositar en una solucin
de hipoclorito de sodio para su in activacin. Para esto, con una pinza se retira la aguja y se
deposita en la solucin de hipoclorito de sodio al 10 %. En ningn caso se debe tapar la
aguja manualmente ya que con esto nos podramos pinchar e inmediatamente retirar ambas
y depositarlas en un recipiente que posteriormente se incinerara. Recomendamos que las
gujas ms manejadas o tiradas irresponsablemente puedan ser una va de transmisin de
Hepatitis o de SIDA.
VENTAJAS
1.- Se pueden obtener cantidades grandes de sangre con la misma molestia
2.- Es posible hacer exmenes mltiples y repetidos con la misma muestra
3.- Las muestras no se hemolizan fcilmente cuando se obtiene de manera adecuada
4.- Los valores obtenidos son reproductibles y estandarizados
5.- se puede utilizar en la mayora de los pacientes
DESVENTAJAS
1.- Difcil de ejecutar en pacientes que tienen venas muy delgadas
2.- El xtasis venoso prolongado provoca hemoconcentracin.

PRCTICA N 3
BIOMETRA HEMTICA
DETERMINACIN DEL HEMATOCRITO
Objetivo:
El hematocrito es el porcentaje del volumen total de sangre compuesto de glbulos
rojos. Es una medicin compuesta por el tamao y nmero de GR y es parte de la Biometra
Hemtica Completa. Este examen mide el nmero de glbulos rojos (GR), glbulos blancos
(GB), la cantidad total de hemoglobina en la sangre y la fraccin de la sangre compuesta de
clulas (hematocrito).
Fundamento e importancia clnica:
La sangre es centrifugada a alta velocidad hasta que las clulas son reducidas a un
paquete de volumen constante, este volumen es reportado con un porcentaje del volumen
de la sangre completa.
Valores normales: Varones: 40- 54% Mujeres: 37- 47%
MICROHEMATOCRITO
Material:
Centrifuga de micro hematocrito
Tabla de lectura de micro hematocrito,
Tubos de micro hematocrito,
Material biolgico:
Se puede usar sangre recolectada con anticoagulante EDTA o heparina o se puede usar
tambin sangre tomada directamente de una puncin capilar que est impregnado de
Heparina.

Procedimiento:
1.- Llene un tubo capilar hasta las partes de longitud con sangre completa que est
perfectamente mezclada.
2.- Selle el extremo del capilar con plastilina o por calentamiento.
3.- Coloque el tubo capilar en una centrfuga de micro hematocrito con la parte sellada
hacia fuera, cubre la centrfuga hacia la derecha hasta que marque 5 min.
4.- Espere y calcule el valor del hematocrito, en una tabla especial para su lectura.
Cuando use tubos calibrados se puede leer directamente en la centrfuga.

MACROHEMATOCRITO
Fundamento:
La sangre completa centrifugada a alta velocidad hasta que las clulas son reducidas
a un paquete de volumen constante normalmente en esta tcnica se usa tubos Wintrobe y la
centrifugacin se prolonga por 30 min.
Material:
Centrifuga clnica, tubos de Wintrobe, agujas de Wintrobe con bulbo.
Valores normales:
Varones: 40- 54%
Mujeres: 37 47%
Material biolgico:
Se puede usar sangre recolectada con anticoagulante EDTA o Heparina.
Procedimiento:
1.- Llene el tubo Wintrobe hasta la marca de 10 con una aguja de Wintrobe.
2.- Evite la formacin de burbujas.
3.- Coloque el tubo en una centrfuga clnica y equilibre el otro extremo.
4.- Anote el valor obtenido y multiplique por 10 y sta equivaldr al valor del macro
hematocrito.
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN GLOBULAR
Objetivo:

La prueba depende del hecho de que la sangre a la que se ha aadido anticoagulante

los glbulos rojos sedimenten hasta formar una columna compacta en la parte inferior del
tubo.
Fundamento e importancia clnica:
El examen se realiza comnmente cuando hay sospecha de trastornos
reumatolgicos. La velocidad de sedimentacin globular (VSG) puede ser utilizada para
controlar enfermedades inflamatorias o malignas, fiebre reumtica e infarto del miocardio
agudo. A pesar de ser un examen de exploracin selectiva (no est considerado como
prueba diagnstico para ningn trastorno en particular), es til para detectar y controlar
tuberculosis, necrosis de tejido (muerte de tejido), enfermedad del tejido conectivo y otras
enfermedades no sospechadas, en las cuales los sntomas son vagos o los hallazgos a
travs del examen fsico son mnimos.
Material:
Tubo de Wintrobe
Aguja de Wintrobe
Gradilla para VSG
Cronmetro
Material biolgico:
Se puede usar sangre recolectada con EDTA ya que este no afecta la VSG. Los
oxalatos y la heparina pueden hacerlo.
Procedimiento:
1.- Se mezcla bien la sangre y mediante una jeringa con aguja de Wintrobe se llena el tubo
de Wintrobe hasta la marca de 10, introduciendo la punta de la aguja hasta el fondo del tubo
a medida que se llena, se eleva la punta de la aguja cuidando que este permanezca por
debajo del menisco de la sangre para que no se formen burbujas.
2.- El tubo se coloca en la gradilla, en una posicin exactamente vertical por espacio de una
hora.
3.- Se lee la VSG mediante la longitud de la columna del plasma sobre las clulas.
4.- Se informa el resultado en mm/hr. Este dato debe ser
Valores normales:
Varones 5 mm/hr
Mujeres 13 mm/hr

DETERMINACIN DE HEMOGLOBINA
Objetivo:
La hemoglobina es el componente principal de los glbulos rojos, es una protena
conjugada que sirve de vehculo para el transporte de O y C 2.

Fundamento e importancia clnica:

Las clulas rojas de una muestra de sangre son hemolizadas y la hemoglobina es
convertida en cianato- hemoglobina mediante la adicin de cianuro de potasio y ferrocianuro
de potasio, la intensidad del color producida es directamente proporcional a la cantidad de
hemoglobina presente y es medida en un espectrofotmetro a 540 nm.
La concentracin de hemoglobina de la muestra original es calculada a partir de la curva
de referencia.
Material:
Espectrofotmetro
Cubetas 12 x 75,
Pipetas de Shali
Tubos
Goma con boquilla
Reactivo de Drabklin.
Material biolgico:
Se puede usar sangre recolectada con anticoagulante como EDTA o Heparina.

Procedimiento:
1.- Coloque exactamente 5 ml de un reactivo de Drabklin. En un tubo limpio y seco.
2.- Usando la pipeta de Shali adicione .02 ml de sangre completamente bien mezclada
3.- Lave varias veces la pipeta con solucin de Drabklin, tomando la precaucin de que la
parte de fuera de la pipeta no contenga sangre. Mezcle bien y deje reposar a temperatura
ambiente por un tiempo de 10 min.
4.- Mida la densidad ptica del problema contra un blanco de reactivo en un
espectrofotmetro a 540 nm. Calcule la concentracin usando una curva de calibracin como
referencia.
Valores normales:
Varones 13.5/100ml
Mujeres 11.5/100ml
RECUENTO DE GLBULOS BLANCOS
Material biolgico:
Sangre venosa con EDTA
Material:
Cmara de Neubaber
Pipeta de Thoma para glbulos blancos
Boquilla con tubo de hule
Microscopio
Agitador mecnico

Acido actico Glacial al 2.3%

Fundamento:
La sangre se diluye con una solucin que lisa los eritrocitos y el remanente, que
contiene las clulas nucleares, es contado en un hematocitmetro.
Procedimiento:
1.- Con una pipeta para glbulos blancos se aspira la sangre perfectamente mezclada hasta
la marca de 0.5.
2.- Se seca la parte exterior de la punta de la pipeta para retirar la sangre adherida,
asegurando que el nivel de sangre dentro de la pipeta no haya variado.
3.- Se aspira el lquido diluyente (Acido actico Glacial al 2.3%) para llenar la pipeta hasta la
marca de 1.
As se obtiene una dilucin 1: 20.
4.- Se coloca la pipeta en el agitador mecnico por 1 minuto.
5.- Se elimina las 3 o 4 primeras gotas para quitar el diluyente que no contiene sangre.
6.- Controlando con el dedo ndice el cierre del extremo de la pipeta que se mantiene casi
vertical, se lleva la punta sobre el borde del cubrehematocitmetro de la cmara de
Neubaber. Disminuyendo la presin del dedo ndice, se deja que el lquido penetre
lentamente entre la cuadricula y el cubrehematocitmetro hasta que la plataforma de
recuento este completamente cubierta. El lquido es extrado al interior por capilaridad.
7.- La cmara se deja reposar durante 3 minutos para que los glbulos sedimenten, despus
se lleva al microscopio.
8.- Con el objetivo de 10x se observa la cuadricula; se reduce adecuadamente la iluminacin
y se procede a contar las clulas de las cuatro esquinas del cuadrado; cada cuadro tiene a
su vez 16 cuadros ms pequeos; cuente solamente los que estn a la izquierda y encima de
las lneas y deseche las que estn a la derecha y abajo.
Clculo:
La cantidad de clulas por mm3 es igual a las clulas contadas por el factor de
dilucin entre el volumen contado en mm3 .
Cada cuadro grande incluye un volumen de 1/10 y la dilucin usada es igual a 1:20 .
G.B = N de cel. En cuatro cuadros X factor de dilucin/Vol. Contado en mm 3
G.B = N de cel. Contadas en cuatro cuadros X 20 / 4/10 mm3
Esto significa que el recuento de leucocitos en el nmero de clulas contadas en los cuatro
cuadros grandes multiplicados por 50.
Nmero de glbulos contados en las reas de L1, L2, L3 y L4 X Factor de dilucin (50).
Valores normales:
Adultos: 5 000 a 10 000 por mm3
DIFERENCIAL LEUCOCITARIO
Fundamento e importancia clnica:
Las caractersticas de las distintas clulas sanguneas pueden ponerse en evidencia
mediante la coloracin diferencial de una delgada capa o extendido de sangre, lo que
permitir estudiar los elementos sanguneos tanto cualitativamente como cuantitativamente.

Material biolgico:
Sangre venosa con anticoagulante EDTA.
Material:
Portaobjetos
Gradilla de tincin
Piceta.
Microscopio
Colorante de Wright.
Procedimiento:
1.- En un portaobjetos limpio y seco, colocar en uno de sus extremos una gota de sangre
pequea recientemente extrada, extender con otro portaobjetos la gota formando un ngulo
de 30 o 45.
2.- Dejar secar el frotis
MTODO DE WRIGTH:
3.- Colocar el frotis sobre la gradilla de tincin y cubrirlo con colorante de Wright durante 3
min.
4.- Al cabo de este tiempo aadir sobre el colorante solucin de buffer durante 7 min, sta
servir para diluir el colorante.
5.- Con una piseta lavar el frotis con agua.
6.- Escurrir el frotis y secar la laminilla por la parte de abajo con una torunda con alcohol, con
el fin de limpiar el coloraste escurrido para permitir observar mejor la preparacin.
7.- Se deja secar el frotis a temperatura ambiente en posicin semivertical.
8.- Observar al microscopio con el objetivo de inmersin (100x)

MTODO DE MAY GRUNGWALS GIEMSA:

3.- Coloque el frotis sobre una gradilla de tincin y cbralo con colorante de May Grungwals
por 3 min.
4.- Sin tirar el colorante adicione agua destilada y djela por 1 min.
5.- Sin lavar el frotis adicione colorante de Giemsa diluido (este se prepara adicionando una
gota de colorante por cada cm3 de agua destilada)
6.- Deje que se tia por 15 min., al trmino de los cuales se lava con agua destilada.
7.- Se deja secar el frotis a temperatura ambiente en posicin semivertical.
8.- Observe al microscopio con el objetivo de inmersin 100X.
TINCIN CITOQUMICA DE PEROXIDASA EN MDULA OSEA
(MIELOPEROXIDASA, MPO)
Algunas tinciones citoqumicas definen ms especficamente las caractersticas de las
diferentes lneas celulares que los colorantes de Romanovsky. Estas tinciones son
especialmente tiles en el diagnstico de malignidades hematolgicas.

Los grnulos primarios de las series de neutrfilos y eosinfilos contienen la enzima

mieloperoxidasa. Los monolitos son dbilmente positivos, los linfocitos y eritroblastos son
negativos. La reaccin consiste en la oxidacin de la bencidina por la peroxidasa en
presencia de perxido de hidrgeno (H2O2), el cual es reducido a agua (H2O). Usando 3,3,
diaminobencidina, los grnulos se tien de un color caf-marrn.
La mieloperoxidasa es una de las tinciones esenciales para el diagnostico correcto de las
leucemias agudas, por ejemplo, nos permite distinguir una leucemia linfoblstica de una
leucemia mieloblstica.
Muestra:
Frotis de Mdula sea sin teir. (1)
Procedimiento:
1.- Colocar el frotis en un soporte que deje todos sus bordes libres (dos varillas de vidrio
colocadas paralelamente una de otra a una distancia de 6 cm, puede servir para este
propsito), cubrirlo con solucin de formalina amortiguada para su fijacin durante30 seg.
Lavar con agua corriente.
2.- En un vaso de precipitado de 50 ml, mezclar lo siguiente: 10mlde buffer de fosfatos de pH
7.4, 7.5 mg de3,3 diaminobencidina (DAB) y 100microlitros (0.1 ml) de Perxido de hidrgeno
al 3 %.
3.- En una charola horizontal coloque un soporte (aplicador, agitador, etc) y sobre el coloque
uno de los extremos del frotis ya fijado con la muestra hacia abajo.
4.- Filtre la mezcla previamente preparada sobre la charola y permita que la solucin se
introduzca por capilaridad en el espacio libre que queda entre la superficie de la charola y el
porta-objetos. Incube por 15 min. En este medio a temperatura ambiente.
5.- Lave con agua corriente y contra tia con hematoxilina de Mayer (2). Lave con agua
corriente y deje secar al aire. Observe al microscopio con objetivo de inmersin en aceite en
busca de clulas con grnulos positivos de color marrn.

Interpretacin:
La actividad de Peroxidasa est presente en todas las fases del desarrollo de neutrfilos,
localizada en los grnulos no especficos. Los grnulos especficos eosinfilos muestran
intensa actividad de peroxidasa, mientras que los basfilos no se tien. Los monocitos se
tien dbilmente y los linfocitos y eritroblastos son negativos. Los megacariocitos tambin
son negativos.
Los blastos de la leucemia mieloblstica aguda son positivos, mientras que los de la
linfoblstica son negativos. En la leucemia monoblstica aguda por lo general los blastos son
negativos, aunque ocasionalmente pueden dar una reaccin dbilmente positiva. La reaccin
tambin puede ser positiva en mieloblastos indiferenciados que carecen de grnulos
azurfilos (M1). La demostracin de actividad de peroxidasa en por lo menos 3 % de blastos
francamente leucmicos establece un diagnstico de LMA. En las variantes de LMAs M2, M3
y M4, ms del 85 % son MPO positivos.

Notas:
1.- La peroxidasa es sensible a la luz por lo cual los frotis debern teirse inmediatamente o
guardarse en la oscuridad. Las resinas para montaje con cubreobjetos (Permount) causan
una rpida decoloracin, por lo cual no se recomienda su uso. La mieloperoxidasa tambin
es sensible al calor y al metanol, sin embargo, los eritrocitos y los normoblastos retienen su
actividad de peroxidasa despus del tratamiento con metanol. Este fenmeno es el resultado
de la reaccin qumica no enzimtica entre la hemoglobina y los reactivos de tincin y se
refiere como una reaccin de pseudoperoxidasa o reaccin de Lepehne, la cual puede ser
usada especficamente para identificar clulas que contienen hemoglobina.
2.- El tiempo requerido para la contratincin con la hematoxilina de Mayer se establece para
cada lote de reactivo.
BIBLIOGRFIA
Lee, Richard., et. al.
Wintrobes Clinical Hematology. 9. Ed.
Lea & Febiger, Philadelphia, 1993, p. 24, 1878
VALORES CORPUSCULARES DE LOS ERITROCITOS
Se han introducido procedimientos para el estudio de las anemias que han sustituido los
estndares cuantitativos, objetivos por impresiones subjetivas, tales como:
Volumen corpuscular medio, Concentracin corpuscular media de hemoglobina y
Concentracin media de hemoglobina.
Para determinar estos valores se requieren los datos del recuento de eritrocitos,
concentracin de hemoglobina y hematocrito.
VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO
Objetivo:
Determinar el volumen medio de los glbulos rojos con una formula matemtica.
Fundamento e importancia clnica:
Forma uno de los llamados ndices eritrocitarios; estos se calculan a partir de datos
obtenidos de un anlisis clnico a partir del valor del hematocrito, Hb y el recuento de
glbulos rojos.
Clculo:
VCM = (% Hto)(10) ]
GR (millones)
Valores normales:
Mujeres 80-100 3 POR CLULA
Hombres 80-120 3 por clula

CONCENTRACIN CORPUSCULAR MEDIA DE HEMOGLOBINA

Es la concentracin media de Hb por 100 ml de clulas rojas concentradas, en por ciento.
Clculo
CCMH = [Hb (gr/100ml) X 100
% Hto
Valores normales:
32-33%
CONCENTRACIN MEDIA DE HEMOGLOBINA:
Es el contenido en peso de hemoglobina en un eritrocito individual medio.
Clculo:
HCM = Hb (gr/100 ml) x 10
Eritrocitos (millones)
Valores Normales:
27 a 33 Picogramos

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS:

En la mayora de las anemias las variaciones del tamao medio de los eritrocitos (VCM) van
paralelas a cambios similares del peso de hemoglobina (HCM), por lo tanto el VCM y la HCM
dan variaciones similares.

PRCTICA N 4
RECUENTO DE PLAQUETAS: MTODO DIRECTO
Objetivo: el alumno realizar por el mtodo directo, la tcnica para determinar el nmero de
plaquetas por mm3 de sangre.

Fundamento: En una pipeta de thoma para eritrocito, se mezcla sangre capilar o venosa con
anticoagulante, con un lquido diluyente (oxalato de amonio al 1%) que destruye a los
glbulos rojos facilitando el recuento de las plaquetas de un hemacitometro.
TEORIA: Las plaquetas o trombocitos son fragmentos de clulas que se originan en la m
dula sea y provienen de los megacariocitos, son de forma irregular miden de 2 a 4 micras
(m) de dimetro y desempean 3 funciones principales en la hemostasia.
1
2
3

auto agregacin y formacin de un tapn hemosttico

la actividad tromboplastinica
la retraccin del coagulo

Material y Equipo:
microscopio
agitador mecnico para pipetas de thoma
hemacitometro, papel filtro
pipeta de thoma para eritrocitos
boquilla y tubo de goma
cmara hmeda
Material Biolgico:
1 ml. De sangre capilar o venosa con anticoagulante
Reactivos:
Liquido de disolucin (solucin de oxalato de amonio al 1 %)
Procedimientos:
1. Aspirar sangre en la pipeta para eritrocitos hasta la marca de 0.5 y llenar con
liquido de dilucin hasta la marca de 101
2. Agitar
3. Cargar la cmara de neubauer (hemacitmetro)
4. Dejar reposar durante 20 min. En cmara hmeda
5. Contar con la plaqueta en toda la cuadricula central con el microscopio de
contraste de fase y a mayor aumento
6. La cifra obtenida se multiplica por 2000 y nos da el numero de plaquetas por
mm3
Valores Normales:
De 150 000 a 450 000 plaq/mm3

PRACTICA N 5
RECUENTO DE PLAQUETAS: MTODO INDIRECTO

Objetivo: obtencin por el mtodo indirecto, el numero de plaquetas por mm3 de sangre
Fundamento: se tie con wright un frotis de sangre reciente y se observa en el microscopio,
diferenciando las plaquetas por su morfologa
Material y Equipo:
Microscopio
Portaobjetos
Material Biolgico:
Sangre capilar o venosa con anticoagulante
Reactivos:
Colorante de wright Giemsa
Aceite de inmersin
Procedimiento:
1. Preparar un frotis sanguneo inmediatamente despus de obtenida la sangre
venosa o directamente por puncin de un dedo sin presionar
2. Dejar secar a temperatura ambiente
3. Teir con colorante de wright
4. Contar el numero de plaquetas por 1000 eritrocitos
5. Determinar el numero de glbulos rojos (recuento de eritrocitos)
6. Clculos; numero de plaquetas/1000 eritrocitos = x
Calculo Xx n de eritrocitos7mm3 =plaquetas /mm3
1000
VALORES NORMALES:
De 200 000 a 400 000/ mm3

PRACTICA N6
TIEMPO DE SANGRADO: MTODO DE DUKE
Objetivo: obtencin del tiempo que dura la hemorragia procedente de una puncin cutnea
habitual
Fundamento: La lesin de una pared vascular produce vasoconstriccin debido a la
liberacin de serotonina por las plaquetas con la liberacin de tromboplastina por los tejidos,
desencadenando el proceso de coagulacin.
Material:

Lanceta desechable estril

Tiras de papel filtro
Cronmetro de mano
Torundas con alcohol

Procedimiento:
1- Se limpia perfectamente, con una torunda de algodn con alcohol, el lbulo de la oreja
esperando que se evapore el exceso de alcohol. (se puede hacer tambin la puncin del
dedo anular izquierdo)
2- Puncione con una lanceta estril el sitio elegido, inmediatamente ponga en marcha el
cronometro.
3- Seque la sangre sin tocar la piel con el papel filtro cada 15 seg. hasta que cese la
hemorragia, se detiene el cronometro anotando el tiempo transcurrido.
Valores normales: de 1 a 6 minutos
NOTA: Una forma prctica de contar con exactitud el tiempo de sangrado es: contando las
marcas de sangre sobre el papel filtro que se tomo cada 15 segundos

PRCTICA N 7
TIEMPO DE COAGULACIN: MTODO DE LEE Y WHITE
Objetivo: La obtencin del tiempo requerido para la formacin de un coagulo slido
Fundamento: La sangre total formara un coagulo firme cuando se extrae del sistema
vascular y se pone a una superficie extraa
Teora: La coagulacin sangunea, es aquella fase de la hemostasia en la que se forma el
tapn de fibrina. Los mtodos son demasiado sencillos de realizar, pero requieren una
atencin extrema en cuanto su tcnica, si se requiere conseguir resultados verdaderos.
Procedimiento:
1- Se obtiene sangre venosa con una jeringa estril, poniendo en marcha el cronometro
inmediatamente en que la sangre penetra en la jeringa.
2- Quitar la aguja con mucho cuidado y pasar un ml de sangre a cada tubo de ensaye
(mnimo 2 tubos)
3- Introducir los tubos en bao de agua a 37C
4- Se vierten los tubos a intervalos de medio minuto hasta que cada uno pueda invertirse
formando un ngulo de 90 sin que se vierta el contenido.
Valores normales: De 5 a 8 minutos

PRCTICA N 8
TIEMPO DE COAGULACIN: MTODO DE TUBO CAPILAR
Objetivo: La obtencin del tempo requerido para la formacin de un coagulo slido .
Fundamento:
En sangre capilar se observa la formacin de coagulacin tomando correctamente el tempo
desde que se hace la puncin hasta la formacin del mismo.
Material:

Tubos capilares
Algodn
Alcohol
Lancetas o agujas estriles

Procedimiento
1.- Se limpia el lbulo de la oreja o la yema del dedo con una torunda de algodn con
alcohol.
2.- Con una lanceta desechables , se hace la puncin
3.- Se desechan las dos primeras gotas
4.- Inmediatamente despus se llena dos tubos capilares sin anticoagulante y se pone en
marcha el cronometro.
5.- Se coloca en una superficie plana a 37 C despus de 3 min., se fracturan los tubos
separando uno de otro, observndose el coagulo se detiene el reloj, anotando el tiempo
transcurrido.
Valores Normales : De 4 a 8 minutos.

PRCTICA N 9
DETERMINACIN DEL TIEMPO DE COAGULACIN EN EL PLASMA RECALCIFICADO
Objetivo:
Obtencin del tiempo de coagulacin del plasma recalcificado
Fundamento:
Al plasma oxalato o citrato se le agrega CaCl2 para obtener el tiempo que tarda la formacin
del coagulo.
Material y Equipo:
Bao mara
Tubo de ensaye
Cronometro
Material Biolgico:
Sangre con anticoagulante
Citrato de sodio 3.8%
CaCl 0.02 M
Procedimiento:
1.- Colocar 0.1 ml. De plasma en un tubo de ensaye de 10 x7.5 mm. Mantenindolo en bao
mara a 37 C
2.- Reposar 1 min.
3.- Agregar 0.2 de CaCl2 0.02 M inmediatamente que se coloca el CaCl2 se pone en marcha
el cronometro
4.- Agitar suavemente la mezcla y dejarla reposar a 37 C durante 70 segundos
5.- A partir de este tiempo inclinamos el tubo ligeramente cada 5 segundos hasta que se
observa la formacin del coagulo se detiene el cronometro anotando el tiempo.
Valores normales: De 80 a 160 segundos

PRCTICA N10
RETRACCIN DEL COAGULO
Objetivo: obtencin de la cantidad de fibrina formada y su retraccin adems se mide el
nmero y la funcin de las plaquetas.
Fundamento: la retraccin del coagulo es directamente proporcional al numero de plaquetas
e inversamente al hematocrito.
Material y Equipo:
-Equipo para extraccin de sangre venosa.
-Gradillas para tubos.
-Tubos de ensaye con silicn o vacutainer.
Procedimiento:
1.-Se extraen 5 ml de sangre en un tubo vacutainer.
2.-Se coloca en la gradilla durante 1hr y se observa el coagulo.
3.-Despus se despega y se retira el coagulo (En ocasiones es conveniente dejar un
aplicador dentro del tubo y una vez formado el coagulo este se saca).
4.-Se lee el volumen del liquido que quedo en el tubo (tambin existen algunos glbulos pero
no es necesario hacer correccin.)Este volumen se anota como porcentaje del volumen
inicial de sangre completa en el tubo.
Cifras normales para la retraccin del coagulo: 48-64%.

PRCTICA N 11
PRUEBA DE LAZO O TORNIQUETE
Objetivo: Medir la resistencia de las paredes capilares al aumento de presin y a la anoxia .
Fundamento: Esta prueba tiene como objeto estudiar el estado de las paredes de los vasos
capilares y al mismo tiempo las funciones plaquetarias de adhesividad y agregacin
,aumentando la presin interna capilar por obstruccin del flujo venoso .El numero de
petequias ,producido en un rea seleccionada informa de la normalidad y anormalidad de
la prueba. La prueba se hace directa al paciente.
Material y Equipo:
-Equipo completo para medir presin arterial.
-Paciente.
Tcnica:
1.-Inspeccione la piel de la mitad superior del antebrazo del paciente en busca de
petequias ,si las hay marquetas con un punto de tinta ,si se encuentra petequias solamente
en un antebrazo ,escoja el que no tenga para hacer las pruebas.
2.-Tome la presin arterial.
3.-Infle el brazo del baumanometro hasta que alcance la presin igual a la mitad de la suma
de las presiones.
4.-Transcurridos los 3 o 5 minutos, desinfle el brazal, qutelo y espere a que el brazo se
descongestione.
5.-Cuente el numero de petequias que haya apreciado en el rea marcada.
Valores Normales:
De 0 a 10 petequias.
Nota: No debe haber mas de 5 petequias en un rea circular de 2.5 cm. Con una presin
de 5 minutos, no mas de 10 petequias.

PRCTICA N 12
TIEMPO DE PROTROMBINA. POR MTODO DE QUICK
Objetivo: Obtencin del tiempo en segundos que tarda la protrombina en trasformarse en
trombina .
Fundamento: en presencia de un exceso de tromboplastina y una cantidad optima de calcio
el plasma coagula rpidamente (entre 11 y 12 segundos)
Tcnica:
1 Se colocan 4.5 ml de sangre que se obtiene por puncin venosa con jeringa estril
desechable en un tubo de 13 x 100 mm que contenga 0.5 ml de anticoagulante para
protrombina mezclar suavemente
2 Colocar en un bao Maria un tubo de solucin de CaCl2 al 0.02 molar (1 o 2 ml segn el
numero de determinaciones ) tener dispuesta una pipeta graduada en decimos para servir el
CaCl2
3 Centrifugar el tubo con sangre y anticoagulante a 1500 r.p.m durante 5 min. Separar el
plasma en el otro tubo limpio y colocar en un recipiente que tenga hielo
4 En un tubo de 10 x 75 mm colocar 0.1 ml de suspensin de tromboplastina agregar 0.1 ml
de plasma agitar y colocar en el bao Maria a 37 c durante un min.
5 Agregar 0.1 ml de solucin CaCl2 al soplar estas poner en marcha el cronometro agitar
dentro del agua suavemente la mezcla de los tres constituyentes dejar reposar hasta el
segundo 10 a partir del cual se examina el tubo hasta el momento en que aparece el coagulo
este es el preciso momento en que se detiene el cronometro
6 La prueba se repite dos veces con plasma problema los resultados no pueden variar en
mas de 1 seg.

Clculos:
Para conocer el procedimiento de actividad protrombinica de una muestra determinada
(normales 70-100 %)
Valores normales:De 11 a 14 seg.
Se utiliza la curva de solucin de tromboplastina (de acuerdo con la marca que se adquiera o
aplicando la formula sig.
T.P.N.-8.7
--------------------- X 100= % DE ACTIVIDAD
T.P.P.-8.7
Donde
T.P.N.= tiempo de protrombina normal
T.p.p.= tiempo de protrombina del plasma
VALORES NORMALES
TIEMPO DE PROTROMBINA =80-100 % DE ACTIVIDAD
PRCTICA N 13
CONSUMO DE LA PROTROMBINA
Objetivo: la actuacin de la tromboplastina sobre la protrombina es de molcula a molcula
Fundamento: Para la mxima conversin de protrombina se requiere de la integridad de
todos los factores que participan en la primera fase de la coagulacin cuando hay diferencias
de uno de ellos se consume poca protrombina en la conversin de trombina
TCNICA DE QUICK
1 Preparar sangre del paciente para tiempo de protrombina segn a tcnica descrita
2 En un tubo de 13 x 100 mm sin anticoagulante y perfectamente limpio depositar 5 ml de
sangre del paciente llevarlo al bao Maria a 37 C durante 2 horas
3 Centrifugar el tubo y separar el suero
4 Agregar 0.1 ml de citrato de sodio por cada ml de suero incubar a 37 C esta muestra por
30 min. El suero queda listo para usarse.
5 En un tubo de 12 x 75 mm depositar 100 mg. de Sulfato de Bario y agregar 1 ml de plasma
agitar
6 Incubar esta muestra a 37 c durante 15 min. Agitando cada 5 min.
7 Centrifugar a 3.000r.p.m durante 5 min. y separa el plasma este plasma tratado con
Sulfato de Bario est prcticamente exento de: protrombina , factor estable , factor powerstuar (X) , componente troboplastinico de plasma (IX)

8 En un tubo de 10 x 75 mm se colocan:
-0.1 ml de tromboplastina
-0.1 ml de plasma absorbido por el Sulfato de Bario
-0.1 ml de Cloruro de Calcio
9 Incubar esta mezcla duarte 1 min. y agregar 0.1 ml de suero al momento de soplar el suero
poner en marcha el cronometro
10 Trascurridos 13 seg. Comenzar a a absorber la mezcla a pequeos intervalos en el
momento en que se forme el coagulo detener el cronometro.
Valor normal Mas de 30 seg.
Los tiempos entre 15 y 30 seg. son sospechosos de anormalidad
Los menores de 15 seg. Son francamente anormales.
En concentracin porcentual debe consumirse mas del 70 % de la protrombina del plasma el
% de protrombina que se consumi durante la coagulacin es el cociente de dividir
% de protrombina del suero x 100
----------------------------------------------------------------% de protrombina del plasma
PRCTICA N 14
TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA
Objetivo: Obtencin del tiempo parcial para diferenciarla de la tromboplastina completa.
Fundamento:
El extracto de cefalina no coagula el plasma hemoflico tan rpido como el normal.
Esta prueba es sensible a la deficiencia de todos los factores plasmticos de la coagulacin
excepto el factor VII y el factor plaquetario.
Material y Equipo:

Equipo para determinacin de la tromboplastina parcial.

Tubos de ensaye 13 x 100 mm.
Bao mara a 37C

Material Biologico:

Sangre citratada para tiempo de protrombina, segn la tcnica descrita.

Tcnica:

1. Precalentar un bao de agua a 37C durante 3 minutos, los tubos de 13 x 100 mm y el

volumen suficiente de plasma para el numero de pruebas que se van a efectuar, 0.1 ml.
por prueba.
2. Ponga 0.1 ml. de la tromboplastina reconstituida en uno de los tubos e incubarlos a 37C
durante 3 minutos, midiendo exactamente el tiempo con un cronometro.
3. Aada 0.1 ml. de la solucin de CaCl 2 0.02 M precalentado, expulsando rpidamente
con una pipeta o jeringa, simultneamente empiece a medir el tiempo con un cronmetro
mezclando con el contenido del tubo mediante un giro rpido.
4. Retire el tubo del bao de agua a los 30 segundos aproximadamente inclinando con
suavidad de un lado a otro con una velocidad no mayor de una vez por segundo.
5. Vigile la aparicin de un gel y detenga el cronmetro en el momento visual de su
formacin.
Valores normales. De 30 - 60 segundos

PRCTICA N 15
TIEMPO DE TROMBINA
Objetivo: Obtencin del tiempo de trombina necesario par convertir el fibrinogeno en fibrina.
Fundamento:
La trombina es una enzima derivada de la protrombina, que se mide por su accin
sobre el fibrinogeno.
Material y equipo:

Equipo para la determinacin de trombina.

Bao de agua a 37 C
Tubos de ensaye
Cronmetro

Material Biolgico:
Muestra de sangre citratada para tiempo de trombina
Tcnica:
Se hace por duplicado con plasma normal y problema.

1. Se colocan 0.2 ml. de plasma en un tubo de 13 x 100 mm en bao mara a 37C

durante 3 minutos.
2. Se aade 0.2 ml de solucin de trombina diluida, inmediatamente se empieza a medir
el tiempo con un cronmetro y se mezcla suavemente el contenido del tubo.
3. Al cabo de 15 segundos, se empieza a observar el tubo, el momento en que se forma
el coagulo, se detiene el cronmetro anotando el tiempo.
4. Normalmente el tiempo es de 18 20 segundos.
5. Cuando el problema se coagula en un tiempo mayor de 26 segundos, es decir mayor
que la relacin 1: 3, se procede a hacer diluciones del plasma problema con plasma
normal de la siguiente manera:
ml
0.1
0.05
0.02

-Plasma Problema-Plasma Problema-Plasma Problema-Plasma Problema-

ml
0.1
0.15
0.18

-Plasma Normal
-Plasma Normal
-Plasma Normal
-Plasma Normal

Si con las diluciones del tiempo de trombina se corrige a lo normal se interpretar

como deficiencia de fibrinogeno, si no se corrige, se interpretar como que existe algn factor
antitrombinico.
El plasma problema y el plasma control pueden incubar a 37C por un periodo de 2
horas y despus se mide el tiempo de trombina de plasma normal, debe pensarse en
fibrinolisis y debe efectuarse prueba de lisis de euglobina.

EJERCICIOS

DE
EVALUACIN

PRACTICA N 1
PREPARACION DE ANTICOAGULANTES
I.- Encuentra las diferentes palabras en la siguiente sopa de letras.
1.- Hematologa
2.- Anticoagulante

F H E
R M U
I E D

3.-Desfibrinacin
4.-Oxalatos

M O F I T A
L R N U P K
F F O E R G

N
L
Y

5.-Heparina
6.- Citratos

O L
A I
C U

7.- EDTA

T I A T U
L O S O T
R E O L I

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L
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P

II.- De acuerdo a las palabras localizadas en la sopa de letras anterior.

Contesta las siguientes preguntas.
1. Estudia la sangre, su funcionalidad, patologa y sus elementos formes, hace el
recuento de las clulas sanguneas y realiza revisiones morfolgicas.
_________________________.
2. Es capaz no solo de mantener la sangre sin coagularse, sino que preserva, de la
mejor manera posible, la morfologa celular. ___________________________.
3. Es un mtodo alterno para obtener sangre liquida mediante la remocin de la fibrina
formada al coagularse la sangre._____________________________.
4. Este tipo de anticoagulantes no modifican el volumen eritrocitario, ya que el plasma
obtenido se puede utilizar para otros exmenes. __________________________.
5. Anticoagulante habitual de gran potencia; acta como inactivador de la trombina y de
la tromboplastina, ya que se considera el mejor para prevenir la hemlisis y las
alteraciones. Se obtiene del sodio, calcio o amonio. ___________________________.

6. Son excelentes anticoagulantes para la realizacin de pruebas de coagulacin.

_____________________________.
7. Conocido como acido etilen diamino tetracetico, se puede utilizar como sal diposdica
o tripotcica. Tiene una actividad anticoagulante muy intensa, ya que impide que se
ionice el calcio por quelacin y evita la aglutinacin plaquetaria.
_____________________________.

III.- Rellena los espacios en blanco en base a los anticoagulantes.

TAPON

ANTICOAGULANTE

Morado
Citrato de sodio
Negro
Amarillo
Verde

ACD
Sin anticoagulante

PRACTICA N 2
OBTENCION DE MUESTRAS
I.- Contesta las siguientes preguntas correctamente.

1.- Conocida tambin como puncin cutnea, ya que se utiliza cuando se requiere obtener
cantidades muy pequeas de sangre? ______________________________.
2.- Sitios del cuerpo utilizados para este tipo de puncin? _________________________,
_________________________ y _________________________.
3.- Principal material utilizado para realizar este tipo de puncin? ____________________.
4.- Es una forma sencilla y adecuada para obtener la cantidad de sangre necesaria para
realizar un gran numero de pruebas; es la mas utilizada para obtener muestras se sangre?
______________________________.
5.- Con esto, se eliminan suciedad, detritus celular y se evita la introduccin de grmenes al
organismo al punciona el lugar seleccionado? _________________________.
6.- Este se aplica unos 7 cm. por encima del sitio de puncin. No se debe dejar por mas de
un minuto, ya que provocara xtasis venosa? _________________________.
II.- En la siguiente sopa de letras, localiza los nombres de 8 materiales e
instrumentos de laboratorio utilizados en la realizacin de esta prctica.
E E N A T A B R E S
M A N S T R E G U A
A L I N C E S T R I
N A M O A D I A B L
T N O R M I T E L I
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E E D I S T I U R L
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PRACTICA N 3
BIOMETRIA HEMATICA
DERERMINACION DEL HEMATOCRITO

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I.- Contesta las siguientes preguntas correctamente.

1.- Es el porcentaje del volumen total de sangre compuesta de G. R.?
________________________________.
2.- En esta tcnica se utilizan tubos Wintrobe y la centrifugacin se prolonga por 30
minutos? _____________________________.
3.- Esta prueba depende del hecho de que la sangre a la que se ha aadido anticoagulante
los glbulos rojos sedimenten hasta formar una columna compacta en la parte inferior del
tubo? ___________________________.
4.- Esta es el componente principal de los G. R., es una protena conjugada que sirve de
vehiculo para el transporte de O y CO2 ? _____________________
5.- En esta prctica la sangre se diluye con una solucin que lisa los eritrocitos y el
remanente, que contiene las clulas nucleares, es contado con un hematocitmetro.
_______________________________.
6.- Por medio de esta prctica, las caractersticas de las distintas clulas sanguneas pueden
ponerse en evidencia mediante la coloracin diferencial de una delgada capa o extendido de
sangre, lo que permite estudiar los elementos sanguneos tanto cualitativamente como
cuantitativamente.
_________________________________.

PRACTICA N 4
RECUENTO DE PLAQUETAS: METODO DIRECTO
I.- Subraya la respuesta correcta.
1.- Son fragmentos de clulas que se originan en la medula sea?
a) Glbulos Rojos

b) Neutrfilos

c) Plaquetas

2.- Con que otro nombre se les conoce?

a) Plaquetas

b) Trombocitos

c) Macrfagos

b) 7 y 10 micras

c) 0.5 y 2 micras

3.- Estas miden entre?

a) 2 y 4 micras

4.- Sus valores normales son de?

a) 100,000 a 500,000 plaq/mm

b) 150,000 a 450,000plaq/mm

c) 10,000 a 1, 000 000 plaq/mm

5.- Se le conoce tambin como cmara de newbaber?

a) Papel filtro

b) Hemacitmetro

c) Caja de Petri

6.- Tiempo de reposo del hemacitmetro sobre la cmara hmeda?

a) Entre 20 y 25 min.

b) Entre 10 y 25 min.

c) Entre 30 y 45 min.

7.-Las plaquetas desempean 3 funciones principales en la hemostasia. Cules son?

a) Hacer fuerte al organismo
c) Ayudar al combate de enfermedades

b) La retraccin del coagulo

d) Actividad tromboplastinica

e) Auto-agregacin y formacin de un tapn hemosttico.

8.- Tipo de puncin utilizada

para la realizacin de
____________________________ o ___________________________.
PRACTINCA N 5
RECUENTO DE PLAQUETAS: METODO INDIRECTO

esta

practica?

I.- Contesta las siguientes preguntas correctamente.

1.- Tipo de mtodo utilizado para obtener el nmero de plaquetas por mm?
___________________________________.
2.- Instrumento ptico utilizado con el fin de diferenciar las plaquetas en la realizacin de
esta practica? ____________________________.
3.- A que temperatura se debe dejar secar el frotis sanguneo para obtener excelentes
resultados en esta practica?______________________________.
4.- Reactivos utilizados en esta practica? ______________________________ y
______________________________.
5.- Al Determinar el nmero de Glbulos Rojos tambin se le conoce como?
______________________________.
6.- Sus valores normales son de?
a) 10,000 a 50,000 plaq/mm

b) 150,000 a 450,000plaq/mm

c) 200,000 a 400, 000 plaq/mm

II.- Localiza las 5 palabras relacionadas con esta prctica.

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M
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PRACTICA N 6
TIEMPO DE SANGRADO: METODO DE DUKE
I.- Contesta las siguientes pregunta de acuerdo a las palabras que se
encuentran en la sopa de letras.
1.- Que produce la lesin de una pared vascular?
______________________________________________.
2.- La vasoconstriccin se produce debido a la liberacin de ______________ por las
plaquetas con la liberacin de ____________________ por los tejidos.
3.- A que proceso desencadena todo lo antes mencionado?
______________________________________________.
A
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II.- Enumere el procedimiento de esta practica en orden correcto.

_____ Detener el cronometro anotando el tiempo transcurrido.
_____ Puncione con una lanceta estril el sitio elegido, inmediatamente ponga en marcha el
cronometro.

_____ Se limpia perfectamente, con una torunda de algodn con alcohol, el lbulo de la oreja
esperando que se evapore el exceso de este (se puede realizar tambin por medio de la
puncin del dedo anular de la mano izquierda).
_____ Seque la sangre sin tocar la piel con el papel filtro cada 15 segundos hasta que cese
la hemorragia.

PRACTICA N 7
TIEMPO DE COAGULACION: METODO DE LEE Y WHITE
I.- Contesta las siguientes preguntas anotando en el parntesis la letra
correspondiente a la respuesta correcta.
1. Que es la coagulacin sangunea? ( ).
2. Objetivo de la practica al realizarla por el mtodo de Lee y White ( ).
3Cul es el tiempo normal para la coagulacin de la sangre en una persona sana? ( ).
4A que temperatura se introducen los tubos en bao de agua? ( ).
5Intervalos de tiempo al que se vierten los tubos? ( ).

Respuestas
a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
h)
i)
j)

Reaccin fsica de la sangre.

40 C
Obtencin del aspectos fsicos como color, olor, ph, etc
De 10 a 20 minutos
37 C
Fase de la hemostasia en la que se forma el tapn de fibrina.
Tres minutos.
De 5 a 8 minutos.
Obtencin del tiempo requerido para la formacin de un coagulo slido.
Medio minuto

PRACTICA N 8
TIEMPO DE COAGULACION: METODO DE TUBO CAPILAR

I.- Rellena los espacios en blanco obteniendo la palabra correcta del

cuadro siguiente.
tiempo
dedo
lanceta
coagulo
puncin
algodn

lancetas
anticoagulante
37
tubos
3
coagulo

sanguneo
sangre
tiempo
tiempo
reloj
yema

2
torunda
coagulo
alcohol
puncin
2

4
cronometro
oreja
8
formacin
alcohol

Objetivo:
La obtencin del ___________ requerido para la ____________de un ____________ solid.
Fundamento:
En ____________ capilar se observa la formacin de un ____________ tomando
correctamente el ____________ desde que se hace la ____________ hasta la formacin del
____________ ____________.
Material:
Tubos capilares
____________
____________
____________ agujas estriles
Procedimiento:
1.- Se limpia el lbulo de la ____________ o la ____________ del ____________ con una
____________ de algodn con ____________.

2.- Con una ____________ desechable se hace la ____________.

3.- Se desechan las __________ primeras gotas
4.- Inmediatamente despus se llenan __________ tubos capilares sin _______________ y
se pone en marcha el _______________.
5.- Se coloca en una superficie plana a _____ C despus de ___ minutos, se fracturan los
__________ separando uno de otro. Observndose el coagulo se detiene el __________,
anotando el __________ transcurrido.
Valores normales: De ___ a ___ minutos.
PRACTICA N 9
DETERMINACION DEL TIEMPO DE COAGULACION EN EL PLASMA RECALCIFICADO

I.- Coloca el procedimiento de la prctica en correcto orden.

Objetivo:
Obtencin del tiempo de coagulacin del plasma recalificado.
Fundamento:
Al plasma oxalato o citrato se le agrega CaC 12 para obtener el tiempo que tarda la formacin
del coagulo.
Material y Equipo:
Bao maria
Tubo de ensaye
Cronometro
Material Biolgico:
Sangre con anticoagulante
Citrato de sodio 3.8%
CaCL 0.02M
Procedimiento:
___ Se detiene el cronometro anotando el tiempo.
___ A partir de ese tiempo inclinamos el tubo ligeramente cada 5 segundos
hasta que se observa la formacin del coagulo.
___ Colocar 0.1 ml. de plasma en un tubo de ensaye de 10 x 7.5 mm.
Mantenindolo en bao maria a 37C.

___ Agita suavemente la mezcla y dejarla reposar a 37C durante 70

segundos.
___ Agregar 0.2 de CaC12 M inmediatamente que se coloca el CaC12 se pone
en marcha el cronometro.
___ Reposar 1 minuto.

Valores Normales: De 80 a 160 segundos.

PRACTICA N 10
RETRACCION DEL COAGULO
I.- Localiza las diferentes palabras relacionadas con la practica en la
siguiente sopa de letras.
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Fibrina
Retraccin
Coagulo
Plaquetas
Hematocrito
Sangre
Tubo vacutainer
Gradilla
Aplicador
Glbulo

PRACTICA N 11
PRUEBA DE LAZO O TORNIQUETE
I.- Coloque el procedimiento de la prctica en correcto orden.
Objetivo:
Medir la resistencia de las paredes capilares al aumento de presin y a la anoxia.
Fundamento:
Esta prueba tiene como objeto estudiar el estado de las paredes de los vasos capilares y al
mismo tiempo las funciones plaquetrias de adhesividad y agregacin, aumentando la
presin interna capilar por obstruccin de flujo venoso. En nmero de petequias, producido
en un rea seleccionada informa de la normalidad y anormalidad de la prueba. La prueba se
hace directa al paciente.
Material y equipo:
Equipo completo para medir presin arterial.
Tcnica:
___ Infle el brazo del baumanometro hasta que alcance la presin igual a la mitad de la suma
de las presiones.
___ Cuente el numero de petequias que haya apreciado en el rea marcada
___ Inspeccione la piel de la mitad superior del antebrazo del paciente en busca de
petequias, si las hay mrquelas con un punto de tinta, si se encuentran petequias solamente
en un antebrazo, escoja el que no tenga estas para realizar la prueba.
___ Transcurridos los 3 o 5 minutos, desinfle el brazal, qutelo y espere a que el brazo se
descongestione.

___ Tome la presin arterial.

Valores normales:
De 0 a 10 petequias.
Nota:
No debe haber mas de 5 petequias en un rea circular de 2.5 cm. Con una presin de 5
minutos, no mas de 10 petequias.
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PRACTICA N 12
TIEMPO DE PROTROMBINA: METODO DE QUICK

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I.- Coloque el procedimiento de la prctica en correcto orden.

Objetivo:
Obtencin del tiempo en segundos que tarda la protrombina en transformarse en trombina.
Fundamento:
En presencia de un exceso de tromboplastina y una cantidad ptima de calcio el plasma
coagula rpidamente (entre 11 y 12 segundos).
Tcnica:
___Dejar reposar hasta el segundo 10 a partir del cual se examina el tubo hasta el momento
en que aparece el coagulo este es el preciso momento en que se detiene el cronometro.
___Se colocan 4.5 ml de sangre que se obtiene por puncin venosa con jeringa estril
desechable en un tubo de 13 x 100 mm que contenga 0.5 ml de anticoagulante para
protrombina y mezclar suavemente.
___Centrifugar el tubo con sangre y anticoagulante a 1500 r.p.m. durante 5 minutos. Separar
en plasma en el otro tubo limpio y colocar en un recipiente que contenga hielo.
___La prueba se repite dos veces con plasma problema. Los resultados no pueden variar en
ms de 1 segundo.

___Colocar en un bao Maria un tubo de solucin de CaCl12 al 0.02 molar (1 o 2 ml segn el

numero de determinaciones) tener dispuesta una pipeta graduada en decimos para servir el
CaCl2.
___Agregar 0.1 ml de solucin CaCl2 al soplar estas poner enmarca el cronometro y agitar
dentro del agua suavemente la mezcla de los 3 constituyentes.
___En un tubo de 10 x 75 mm colocar 0.1 ml de suspensin de tromboplastina agregar 0.1
ml de plasma, agitar y colocar en el bao Maria a 37 C durante 1 minuto.
Clculos:
Para conocer el procedimiento de actividad protrombinica de una muestra determinada
(normales 70 100%).
Valores normales:
De 11 a 14 segundos.
Tiempo de protrombina: 80 100 % de actividad.

II.- Localiza las palabras relacionadas con la practica anterior en la

siguiente sopa de letras.
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PRACTICA N 13
CONSUMO DE LA PROTROMBINA
I.- Coloca el procedimiento de la prctica en correcto orden.
Objetivo:
La actuacin de la tromboplastina sobre la protrombina es de molcula a molcula.
Fundamento:
Para la mxima conversin de protrombina se requiere de la integridad de todos los factores
que participan en la primera fase de la coagulacin cuando hay diferencias de uno de ellos
ya que se consume poca protrombina en la conversin de trombina,
Tcnica de Quick:
___ En un tubo de 10 x 75 mm se colocan:
0.1 ml de tromboplastina
0.1 ml de plasma absorbido por el Sulfato de Bario
0.1 ml de Cloruro de Calcio.

___ Agitar e incubar esta muestra a 37C durante 15 minutos. (Agitar cada 5 minutos).
___ Centrifugar el tubo y separar el suero.
___ En un tubo de 12 x 75 mm depositar 100 mg de Sulfato de Bario y agregar 1ml de
plasma.
___ Preparar la sangre del paciente para tiempo de protrombina segn la tcnica descrita.
___ Centrifugar a 3000 r.p.m durante 5 minutos y separar el plasma. Este plasma tratado con
Sulfato de Bario esta prcticamente exento de: protrombina, factor estable, factor powerstuar
(X), componente tromboplastinico de plasma (IX).
___ Agregar =.1 ml de citrato de sodio por cada ml de suero. Incubar esta muestra a 37C
por 30 minutos (As queda el suero listo para usarse).
___ Incubar esta mezcla durante 1 minuto y agregar 0.1 ml de suero al momento de soplar el
suero poner en marcha el cronometro.
___ En un tubo de 13 x 100 mm sin anticoagulante y esteril depositar 5 ml de sangre del
paciente. Colocarlo en el bao Maria a 37C durante 2 horas.
___ Transcurridos 13 segundos, comenzar a absorber la mezcla a pequeos intervalos. En el
momento en que se forme el coagulo detener el cronometro.
Valores normales:
Ms de 30 segundos.
Los tiempos entre 15 y 30 segundos son sospechosos de anormalidad.
Los tiempos menores de 15 segundos son francamente anormales.
En concentracin porcentual debe consumirse mas del 70% de la protrombina del
plasma el % de protrombina que se consumido durante la coagulacin es el cociente
de dividir.
% de protrombina del suero x 100
___________________________
% de protrombina del plasma

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
Autor
Henry John Bernard

Titulo

Editorial

Diagnstico y tratamiento
Masson-Salvat
Clinico por el Laboratorio

Lugar

Ao

Espaa

1997

Zilva, Joan F.
Pannall, P. R.
Ganong, William F.
MD
Lynch
Rapahel,
Mellor, Spare, Inwood
Kathleen
Morrison
Treseler
Gonzalez de Buitrago
Jose Manuel
Elmer W. Koneman
Stephen D. Allen
William M. Janda

Bioqumica Clnica en el
diagnostico y tratamiento

Salvat

Espaa

1979

Fisiologa Mdica

El manual
moderno

Mxico

1994

Metodos de Laboratorio

Interamericana

Mexico

1977

Laboratorio Clinico y
Pruebas de Diagnostico
Tecnicas y Metodos de
Laboratorio Clinico

Manual
Moderno

Mexico

2005

Masson

Espaa

2004

Diagnostico
Microbiolgico texto y
atlas a color

Editorial
Medica
Panamericana

Espaa

Quinta Edicin
2001