Detencin molecular mediante RT-PCR de

calicivirus y enterovirus en nios menores de 6 aos

con sndrome diarreico
Natalie Wildermann, Leticia Porto-espinoza, Reyna Moronta, Mariangela Bracho, Luciana
Costa, Diana Callejas
Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiologa 2010; 30: 145-150

A nivel mundial la diarrea es una de las afecciones ms resaltantes debido a si

morbi-mortalidad, siendo los nios menores de 5 aos los que se ven ms
afectados. Las enfermedades gastroentericas causadas en edades tempranas
pueden producir deficiencia en el desarrollo fsico y mental, y esto puede traer
graves consecuencias a lo largo del desarrollo. Reportndose acerca de 10
millones de casos a nivel mundial, con una alta tasa de mortalidad.
En nuestro pas la diarrea se encuentra ubicada en segundo lugar de mayor
incidencia epidemiolgicamente, siendo el Zulia el estado con mayor nmero de
reportes. En investigaciones anteriores se encontraron un gran nmero de
nios infectados y un total de 231 casos de muertes. Se conocen una gran
variedad de virus productores de diarrea, siendo calicivirus y enterovirus los
transmitidos principalmente por va fecal-oral, debido a contacto directo y
consumo de alimentos y aguas contaminadas. Los calicivirus los podemos
encontrar en pases en va de desarrollo y enterovirus est asociado a pases
con sobrepoblacin y zonas socioeconmicamente pobres.
Durante los ltimos aos han evolucionado las tcnicas de deteccin de virus
cuya replicacin en cultivos son pocas o nulas, por ejemplo los virus estudiados.
Actualmente el mtodo ms sensible y especfico en la deteccin de virus es la
Reaccin en Cadena de Polimerasa (PCR) y la Retrotranscripcin Reversa- PCR
(RT-PCR). En la investigacin realizada en el municipio Maracaibo se tomaron
150 muestras de heces de pacientes de ambos sexos en edades comprendidas de
0 a 6 aos, asistidos en diversos centros de salud del municipio, seleccionando
de estas solo 67 para estudiar la presencia de calicivirus y enterovirus.

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En la investigacin estudiada encontramos que enterovirus posee una mayor

frecuencia de infeccin, y calicivirus posee una baja proporcin de casos
positivos, por ende el estudio de la presencia de estos virus en nios con
sndrome diarreico es de suma importancia. En esta investigacin se detect
enterovirus como posible agente etiolgico de diarrea, lo que pone en evidencia
la circulacin del virus en la poblacin estudiada. A pesar de que la
poliomielitis esta erradicada en Venezuela, en sus planes de inmunizacin es
administrada la Polio Oral (VPO) y la vacuna inactivada de la polio (VPI) en
nios menores de 5 aos, por lo tanto debemos evaluar a enterovirus como
agente etiolgico, ya que este causa efectos secundarios como diarrea, fiebre y
exantema y podemos encontrar partculas virales en las muestras de heces. Es
necesaria la

realizacin de una secuenciacin

de muestras de heces para

establecer si proviene de virus salvaje o virus vacunal. Por otro lado los
pacientes pudieron estas expuestos a enterovirus infecciosos encontrados en
muestras de agua para consumo humano, aguas para el riego de cultivos, aguas
recreacionales y de alimentos.
La presencia de casos positivos de enterovirus y calicivirus no estn ligados a la
edad, sin embargo los resultados nos indican una baja presencia de diarrea a
medida que los pacientes se hacen mayores, esto se debe a la adquisicin de
memoria inmunitaria por exposiciones previa a estos virus. La baja presencia
de calicivirus observada durante el primer ao de edad, se puede atribuir a la
inmunidad protectora que le confiere la leche materna.
Los resultaos obtenidos por esta investigacin son vlidos, ya que se le tomaron
muestras de heces a 150 pacientes peditricos, de los cuales 67 fueron
estudiados con las pruebas serolgicas de PCR y RT-PCR, la efectividad de
estas tcnicas radica en su especificidad y sensibilidad para la deteccin del
genoma de diversos agentes virales. En el caso de los calicivirus y algunos
enterovirus el mtodo ms especfico y exacto es este.
Los resultados obtenidos son importantes, debido a que los mtodos
diagnsticos utilizados (PCR y RT-PCR), son los ms efectivos en la actualidad
para la deteccin de los virus estudiados. Con esta metodologa se confirma la
efectividad de amplificacin de los primers empleados para la secuencia de la
regin 5`-NTR de enterovirus observando bandas bien definidas de los casos
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positivos. As mismo, los resultados para calicivirus revelaron bandas definidas

de la regin que codifica para el Gen de la ARN polimerasa. Por otro lado, cabe
destacar que calicivirus no ha sido predominante en los casos evaluados debido
a la limitante de los cebadores utilizados, los cuales solo detectan calacivirus
del tipo Norwalk y no para los sapovirus que son los agentes ms importantes
en diarrea en infantes.
Finalmente los resultados obtenidos son aplicables a nuestros futuros
pacientes, porque aportan datos que pudieran ser de utilidad para futuras
investigaciones relacionadas, puesto que los mtodos diagnsticos utilizados en
esta investigacin, son los ms especficos y utilizado en la actualidad, y
modifica nuestra futura prctica mdica, debido que al transcurrir de los aos
estas tcnicas diagnsticas van progresando y hacindose ms sensibles y
especficas para los virus causantes de enfermedades gastrointestinales con
una

poblacin

que

posea

caractersticas

similares

las

descritas

anteriormente.

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