CONCEPTOS DE ESTERILIZACION

La esterilidad indica la ausencia total de formas viables de microorganismos. No existen

grados de esterilidad; esta es, por lo tanto, un trmino absoluto. Un objeto nunca puedes
estar "parcialmente" estril. El termino esterilizacin se refiere a los procedimientos que
conducen a la destruccin o separacin de toda forma de vida, macro, micro o
submicroscopica. Los procedimientos para lograr la esterilizacin son variados pero todos
apuntan a eliminar totalmente los microorganismos. Otros trminos relacionados que se
utilizan son asepsia (sin sepsis), que consiste en evitar la sepsis mediante procedimientos
que intentan impedir la introduccin de microorganismos y reducir el nmero de los que
estn presentes; o antisepsia (contra la sepsis) que es el proceso que se aplica al tejido
vivo con el objeto de prevenir la multiplicacin de las formas vegetativas de los grmenes
y provocar sepsis. La desinfeccin consiste en la destruccin de los microorganismos
patgenos en su estado vegetativo que se encuentran sobre elementos inertes.
Los agentes que matan las clulas se denominan con la terminacin "cida" o "biocida",
mientras que los agentes que inhiben el crecimiento de clulas (sin matarlas) son
llamados agentes "estticos". As, el trmino bactericida se refiere aquellos que matan a
las bacterias, y el de bacteriosttico, a los que inhiben el crecimiento de clulas
bacterianas. Un bactericida mata bacterias, un fungicida mata hongos y as
sucesivamente.
AGENTES FISICOS
El calor es el mtodo ms confiable de esterilizacin. La destruccin bacteriana de una
poblacin bacteriana por medio del calor es un proceso gradual y la cintica de
destruccin es exponencial.
El tiempo requerido para la esterilizacin esta universalmente relacionado con la
temperatura de exposicin. Tres parmetros pueden ser utilizados para indicar el grado de
resistencia al calor que tienen los microorganismos.
El punto trmico letal, es la temperatura ms baja en la cual muere una poblacin
bacteriana en determinado tiempo (10minutos).
El tiempo trmico letal, es el menor tiempo necesario que se utiliza para matar el
100% de una poblacin de microorganismos a determinada temperatura bajo
condiciones especficas del medio.
La reduccin decimal del tiempo, que es el tiempo necesario en minutos para
matar el 90% de la poblacin. Es una modificacin del tiempo trmico letal.
Debido a la elevada temperatura empleada en la esterilizacin por calor, un cambio
mnima en esta altera significativamente el tiempo de la muerte trmica.
Para el estudio de los mtodos de produccin del efecto letal en los microorganismos es
necesario clasificarlos en 2 grandes grupos: el calor seco, que corresponde al fuego

directo o al aire caliente y el calor hmedo, producido por la ebullicin, el vapor del agua a
presin (autoclave), la tindalizacin y la pasteurizacin.
MECANISMO DE LESION TERMICA
El efecto letal del calor hmedo por encima de determinada temperatura se atribuye a la
desnaturalizacin y coagulacin de las protenas, pero lo que sucede en realidad es un
proceso ms complejo y es la coagulacin de la enmascara otros fenmenos que ocurren
en la clula.
El efecto del calor seco se debe a la desnaturalizacin proteica, las lesiones de oxidacin
y los efectos txicos por niveles elevados de electrolitos. Al carecer de agua, el grupo de
cadenas polares de una cadena peptdica es menor y requiere ms energa para abrir
molculas, por lo cual resulta menos eficiente que el calor hmedo.
CALOR SECO
Puede ser clasificado en calor directo (tambin denominado incineracin), como la llama
de mechero de Bunsen. Pasar los objetos por la llama es til para esterilizar tijeras y
pinzas que se sumergen previamente en alcohol y se deja flamear fuera del mechero
para evitar que se destemplen, pero aun as, este no es el mtodo de eleccin para
esterilizar material de ciruga. Tambin se emplea para esterilizar el mango de Kolle, antes
y despus de efectuar una siembra, este mismo mtodo tambin se utiliza para destruir
animales de laboratorio infectados, esqueleto y otros materiales de desecho en hornos
crematorios.
El calor seco puede utilizarse de forma indirecta mediante el uso de hornos de
esterilizacin por aire caliente. En estos se requiere de 160 C durante 2 horas y 170C
durante 1 (se recomienda para elementos de vidrio o de metal) no se emplea en caucho,
papel o tela porque se queman, ni tampoco en medios de cultivo. Este mtodo tiene la
ventaja de eliminar los pirgenos de bacterias gramnegativos.
CALOR HUMEDO
a) Con Presin: el autoclave.
Para conocer las dificultades a vencer para obtener una perfecta operacin de
esterilizacin se debe conocer el funcionamiento del autoclave y el significado de
los trminos en uso.
Cuando a un lquido cualquiera se le aplica calor, este se calienta hasta cambiar
de estado y pasa a su forma gaseosa. La temperatura que alcanza un lquido para
pasar al estado gaseoso se llama punto de ebullicin. Este punto no se altera
por mucho que se aplique calor. Mientras el lquido est recibiendo calor, aumenta
su temperatura, pero llegado al punto de ebullicin se necesita calor extra, el cual
es utilizado para vencer la presin que ejerce la atmosfera sobre la superficie del
lquido y convertirse en vapor; esta cantidad extra de calor se llama calor de
vaporizacin (539 caloras por gramo para el caso de agua). Si el vapor es
enfriado, llega a convertirse en lquido, y en ese cambio de estado emite

exactamente el mismo calor extra que recibi para convertirse en vapor, a este
fenmeno de lo denomina condensacin.
El agua con presin atmosfrica, al pasar al estado de vapor, aumenta
considerablemente su volumen. Este aumento es contenido para el caso del
autoclave, por sus paredes, las que, al no poder aumentar de volumen,
incrementan la presin interna. Este aumento de presin hace que el agua cese de
bullir que, por el momento se establezca un equilibrio, el que no es ms que un
nuevo punto de ebullicin del agua a esa presin. Se necesita otra vez cierta
cantidad de vapor para producir ms vapor y como consecuencia aumenta la
presin. Esta situacin se repetir hasta llegar a un momento en que la presin
destruira paredes del autoclave, lo cual se evita con una vlvula de seguridad que
a cierta presin deja escapar el vapor.
El vapor dentro del autoclave choca con objetos fros (material a esterilizar); de
esta forma el vapor se enfra y se condensa, al condensarse se contrae y se retrae
el volumen. El agua de condensacin vuelve al sistema para ser nuevamente
calentado y retorna al ciclo.
Si se saca agua al sistema y se aumenta la temperatura, el vapor se sobrecalienta,
se seca y acta como calor de esterilizacin seco. Si el vapor sobrecalentado no
encuentra ningn objeto frio, la esterilizacin no se realiza porque la cantidad de
calor liberado por este es menor que el lentamente liberado por la condensacin
del vapor saturado
Por lo tanto en la autoclave debe haber una relacin constante entre presin y
temperatura, en la cual el volumen no vara.

BIBLIOGRAFIA
Brody T. & et al. (1999). LABORATORY SUPPLIES, Academic Press. San Diego (Edic. II) vol1
(422-489) (pg. 79-82)