Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
53
Resumo O teor de nitrato um importante ndice da qualidade dos alimentos, mas existem problemas na sua
quantificao. O objetivo deste trabalho foi comparar procedimentos de quantificao de nitrato em tecido
vegetal. Em amostras de matria seca da parte area de trs cultivares de alface adubadas com cinco doses de
nitrognio, provenientes de experimento realizado em casa de vegetao, foi feita extrao de nitrato com gua
desionizada e quantificao, utilizando os procedimentos da coluna redutora contendo cdmio, da destilao, do
cido saliclico e da mistura redutora contendo zinco. Os procedimentos do cido saliclico e da mistura redutora
contendo zinco superestimam os teores de nitrato na matria seca de alface, pois so mais sujeitos presena de
interferentes e ao efeito da cor do extrato. Os procedimentos da coluna redutora contendo cdmio e o da
destilao so os mais adequados na quantificao de nitrato em tecido vegetal. Contudo, a simplicidade e o
menor custo da destilao em relao coluna redutora indicam que a destilao deve ser recomendada.
Termos para indexao: Lactuca sativa, anlise de plantas, nitrognio.
Introduo
A concentrao de nitrato um importante ndice da
qualidade dos alimentos. Quando ingerido pelo homem,
o nitrato sofre ao microbiana na saliva e reduzido a
nitrito, o qual reage com aminas e d origem a compostos nitrosos, como as nitrosaminas, que so
carcinognicos. Em crianas, o nitrito pode provocar a
metemoglobinemia, doena que causa o impedimento
do transporte de oxignio dos alvolos pulmonares para
os tecidos, o que pode levar morte (Wolff &
Wasserman, 1972; Swann, 1975).
A quantificao de nitrato em extratos de diferentes
origens pode ser feita por colorimetria, destilao,
54
Material e Mtodos
A determinao de nitrato foi feita em amostras de
matria seca da parte area de alface proveniente de
experimento realizado em casa de vegetao, no qual
se utilizou amostra da camada arvel (020 cm) de um
Argissolo Vermelho-Amarelo distrfico, coletado em rea
de pastagem, com a seguinte caracterizao qumica:
P resina, 8 mg dm-3; MO, 37 g dm-3; pH em CaCl2
0,01 mol L-1, 4,8; K+, Ca2+, Mg2+, H+Al, SB e CTC, respectivamente, 2,1, 22, 10, 38, 34 e 72 mmolc dm-3; e V, 47%.
Os tratamentos consistiram da combinao fatorial
de cinco doses de N e trs cultivares de alface, com
quatro repeties, em delineamento em blocos ao acaso.
Foram usadas 0, 141,5, 283, 566 e 1.132 mg/vaso de N
(uria) e as cultivares Lucy Brown, Vernica e Elisa.
A matria seca da parte area das plantas foi moda
e subamostras foram trituradas em almofariz para passar em peneira de 0,355 mm (42 mesh) de abertura de
malha. A extrao do nitrato foi feita com gua
desionizada e os procedimentos empregados na sua
quantificao foram o da coluna redutora contendo Cd
(Follett & Ratcliff, 1963), o da destilao (Bremner &
Keeney, 1965), o que utiliza o cido saliclico (Cataldo
et al., 1975) e o procedimento que emprega mistura redutora contendo Zn (Ulrich, 1948), que est descrito
no protocolo analtico de Moraes & Cantarella (2003).
Em todas as determinaes de nitrato foram utilizados reagentes p.a. e foi feita uma prova em branco com
gua desionizada a cada 10 amostras.
55
Segundo Lara et al. (1978), a atividade do Cd esponjoso decresce ao longo do tempo. Assim, no incio de
cada dia de anlise e aps a passagem de alquotas de 3
amostras pela coluna, ela foi reativada pela passagem
de 25 mL de HCl 0,1 mol L-1, 50 mL de gua desionizada
e 25 mL de soluo-tampo pH 9,69,7 diluda a 1:9 (v/v)
com gua desionizada.
Procedimento da destilao (Bremner & Keeney,
1965)
A extrao de nitrato foi semelhante realizada no
procedimento anterior, tendo sido utilizados 0,2 g de
matria seca e 20 mL de gua desionizada. Aps a extrao, o material foi filtrado em papel-filtro qualitativo
e foi feita a destilao dos extratos em microdestilador
Kjeldahl (Bremner & Keeney, 1965). Como uma adaptao para tecido vegetal, empregaram-se 5 mL de extrato e 0,4 g de liga de Devarda, para que todo o nitrato
da amostra fosse convertido a amnio em uma nica
destilao. A seguir, foi feita a quantificao de N na
forma de amnio do destilado por meio de titulao com
soluo padronizada de H2SO4 0,00263 mol L-1. Considerou-se que a concentrao de N-NO 2- presente
nas amostras era desprezvel e, assim, os resultados
de N-NO3-+N-NO2- foram convertidos e expressos
como N-NO3-. A eficincia do procedimento, estimada
por meio da recuperao de N-NO3- em solues-padro contendo 0, 25, 50, 100, 150, 200, 250 e 300 mg L-1 de
N-NO3- foi, em mdia, de 104%.
Procedimento do cido saliclico (Cataldo et al.,
1975)
A extrao de nitrato foi semelhante empregada
no procedimento 1, utilizando-se 0,1 g de matria seca
e 10 mL de gua desionizada. Aps a extrao, foi
adicionado, por meio de medida calibrada, 0,5 g de
carvo ativado por amostra para a obteno de extratos incolores. Aps agitao e repouso de 10 min,
o material foi filtrado em papel-filtro quantitativo de
filtragem lenta. Alquotas de 0,2 mL de extrato receberam 0,8 mL de soluo de cido saliclico
(HC7H5O3) 50 g L -1 em H 2SO4 concentrado e 19 mL
de NaOH 2 mol L-1 e em seguida foi feita leitura da
absorbncia a 410 nm. Os resultados foram convertidos em teores de N-NO 3- na matria seca das plantas, com o auxlio de uma curva de calibrao preparada a partir de solues diludas de NaNO3, que receberam o mesmo tratamento dado s amostras.
56
Resultados e Discusso
Em todos os procedimentos de quantificao foram
detectados efeitos significativos das doses de N no teor
de nitrato e diferenas entre as cultivares de alface, o
que gerou uma faixa ampla de teores, conveniente
Coluna
redutora
Destilao
cido
saliclico
Mistura
redutora
02,87
06,63
11,43
20,80
34,14
01,50
03,96
05,18
12,00
29,89
01,29
02,33
03,79
10,59
21,47
02,57
06,11
10,03
19,11
33,95
01,17
03,52
04,18
10,99
30,48
01,92
02,15
03,26
10,68
21,37
13,57
18,06
24,11
33,76
43,11
10,34
13,17
17,32
24,99
40,86
10,70
13,12
14,45
24,21
37,11
03,60
07,32
13,73
21,91
33,47
03,57
07,19
07,87
13,60
28,72
03,18
04,63
05,80
12,69
26,70
22,59A
12,93B
88,88**
13,27**
0,69ns
4,97
3,28
19
86,86**
10,25**
1,23ns
4,52
2,98
30
212,12**
0,76ns
1,39ns
11,37C
10,77C
Valores do teste F
179,26**
Nitrognio (N) 248,81**
55,98**
27,26**
Cultivares (C)
6,08**
3,61**
NxC
2,77
3,28
DMS (N)
1,83
2,17
DMS (C)
21
26
CV (%)
Procedimentos (P)
P x variveis
DMS para P
(1)N
57
58
Concluses
1. Os procedimentos com a coluna redutora contendo cdmio e de destilao so os mais adequados na
quantificao de nitrato em tecido vegetal.
2. A simplicidade e o menor custo da destilao, quando comparados com a coluna redutora, sugerem que a
destilao deve ser preferida neste tipo de anlise.
Agradecimento
Fapesp, pela bolsa concedida a Jos Ricardo
Mantovani.
Referncias
ANDERSON, K.A.; CASE, T.E. Evaluation of plant nitrate extraction techniques and effect on commonly used analytical methods of
detection. Communications in Soil Science and Plant Analysis,
v.30, p.1479-1495, 1999.
BENINNI, E.R.Y.; TAKAHASHI, H.W.; NEVES, C.S.V.J.;
FONSECA, I.C.B. Teor de nitrato em alface cultivada em sistemas
hidropnico e convencional. Horticultura Brasileira, v.20, p.183186, 2002.
BRASIL. Ministrio da Agricultura e do Abastecimento. Secretaria
de Defesa Agropecuria. Oficializa os mtodos analticos fsicoqumicos para controle de produtos crneos e seus ingredientes.
Instruo Normativa n. 20, de 21 de julho de 1999. Dirio Oficial
[da] Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, 09
set. 1999. Seo 1, p.30.
BREMNER, J.M.; KEENEY, D.R. Exchangeable ammonium, nitrate and nitrite by steam-distillation methods. In: BLACK, C.A.
(Ed.). Methods of soil analysis: chemical and microbiological properties. Madison: American Society of Agronomy; Soil Science Society of America, 1965. p.1191-1206.
CASTRO, S.R.P.; FERRAZ JNIOR, A.S.L. Teores de nitrato nas
folhas e produo da alface cultivada com diferentes fontes de
nitrognio. Horticultura Brasileira, v.16, p.65-68, 1998.
59
SAH, R.N. Nitrate-nitrogen determination - a critical review. Communications in Soil Science and Plant Analysis, v.25, p.28412869, 1994.
SWANN, P.F. The toxicology of nitrate, nitrite and N-nitrous compounds. Journal of the Science of Food and Agriculture, v.26,
p.1761-1770, 1975.
TABER, H.G.; KILLORN, R. Determination of nitrate in unfiltered
extracts of muskmelon tissue by ion-selective electrodes. Communications in Soil Science and Plant Analysis, v.24, p.1231-1241,
1993.
ULRICH, A. Plant analysis - methods and interpretation of results. In:
KITCHEN, H.B. (Ed.). Diagnostic techniques for soils and crops.
Washington: The American Potash Institute, 1948. p.157-198.
WOLFF, I.A.; WASSERMAN, A.E. Nitrates, nitrites, and nitrosamines. Science, v.177, p.15-19, 1972.
ZAGO, V.C.P.; EVANGELISTA, M.R.; ALMEIDA, D.L. de;
GUERRA, J.G.M.; NEVES, M.C.P.; RUMJANEK, N.G. Aplicao
de esterco bovino e uria na couve e seus reflexos nos teores de nitrato
e na qualidade. Horticultura Brasileira, v.17, p.207-211, 1999.