1.

ALCALOIDES PURINICOS
1.1 INTRODUCCION:

Los alcaloides Purinicos son metabolitos secundarios derivados de

los nucletidos de purina que se han encontrado en cerca de 100
especies en 13 rdenes de reino vegetal. Las metilxantinas, tales
como cafena (1, 3,7 - trimetilxantina) y teobromina (3,7dimetilxantina), y los cidos metiluricos se clasifican como
alcaloides purinicos.
Las bases puricas son compuestas con ncleo de la purina,
heterocclico que resulta formalmente de la formacin de un anillo
entre un ncleo piridinico y otro imidazolico. Su origen biosintetico,
que no implica ningn aminocido, su carcter anftero as como
sus caractersticas especiales de solubilidad (solubilidad en agua
caliente y disolvente colorados) hace que estos compuestos no se
consideren frecuentemente como pertenecientes al grupo de los
alcaloides. Esto es evidente en el caso de los nucletidos, de
distribucin universal, pero lo es menos en el caso de algunos
compuestos con marcadas propiedades farmacolgicas como la
cafena, teofilina o teobromina: numerosos autores y tratados los
consideran como << alcaloides puricos>>
1.2 ALCALOIDES PURINICOS:

La derivados de purina cafena, teobromina, y teofilina son por lo

general referido como alcaloides purinicos.
Como alcaloides se tienen una distribucin limitada, pero sus
orgenes son muy estrechamente vinculados con los de las bases de
purina adenina y guanina, los componentes fundamentales de
nuclesidos, nucletidos, y los cidos nucleicos. La cafena, en forma
de bebidas tales como el t, caf, y la cola es uno de los ms
ampliamente consumida y socialmente aceptado estimulantes
naturales. Tambin se utiliza con fines medicinales, pero la teofilina
es mucho ms importante como un compuesto de frmaco debido
de sus propiedades relajantes musculares, utilizado en el alivio del
asma bronquial. La teobromina es un constituyente principal de
cacao, y el chocolate relacionada productos.
Se encuentra en un gran nmero de otras bebidas no alcohlicas.
Se aisl la cafena de t y caf en la dcada de 1820, pero la
biosntesis principal y las vas catablicas de cafena no eran
totalmente establecidas hasta 2000. La cafena sintasa altamente
purificada fue obtenida a partir de hojas de t despus de que se
codificara un gen enzimtico y se clono, esto facilit estudios
moleculares en la regulacin de la produccin de cafena
principalmente, a las plantas de caf
Aparte de los nucletidos que constituyen los cidos nucleicos
(adenina, guanina) y de los esteres fosfricos de los nucleosidos
(ATP, etc.), el ncleo de la purina no es muy frecuente en los
vegetales

1.1.1 La cafena (1, 3,7-trimetilxantina). Se encuentra en las

semillas de los cafetos (1-2%), en las de la cola (1-3%), en las
hojas de t (2-4%). se encuentra as mismo en la hoja de mate
y en las semillas de guaran, dos drogas sudamericanas
utilizadas en la preparacin de bebidas estimulantes
1.1.2 La teofilina (1,3-dimetilxantina) se encuentra en
pequea cantidad en la hoja de t y en la semilla de cola. La
teobromina (3,7- dimetilxantina) se acumula (0.9-3%) en los
tegumentos de la semilla de cacao
La cafena y la teofilina se emplean en teraputica, la primera se
encuentra disponible en grandes cantidades (descafenizacion de
cafs) y la segunda se obtiene fcilmente por sntesis

Fig., n1 estructuras de alcaloides

purinicos

1.3 BIOSINTESIS DE LOS ALCALOIDES PURINICOS

El anillo de purina se elabora gradualmente por juntando pequeos

componentes de primaria metabolismo. El componente ms grande
que se incorpora es la glicina, que proporciona una C2N unidad,
mientras que los tomos de carbono restantes provienen de la
formacin de (por medio de N10 -formil- tetrahidrofolato) y
bicarbonato. Dos de los cuatro tomos de nitrgeno son
suministrados por glutamina, y una tercero por el cido asprtico. La
Sntesis de los nucletidos adenosina 5 -monofosfato (AMP) y
guanosina 5 -monofosfato (GMP) es por medio de inosina 5
-monofosfato (IMP) y xantosina 5 - Monofosfato (XMP), y los
alcaloides purinicos luego se ramifican distancia a travs de XMP. La
metilacin, entonces la prdida de fosfato, genera el nuclesido 7 metilxantosina, que es entonces liberado del azcar. Metilaciones
sucesivas en los nitrgenos dan cafena por va de la teobromina,
mientras que una secuencia de metilacin diferente puede dar
cuenta de la formacin de la teofilina.

1.4

ENSAYOS DE DROGAS MEDICINALES CON DROGAS PRICAS

Fig., n2 BIOSINTESIS de los
alcaloides
purinicos
La identidad de las drogas
contempladas
en la Farmacopea se
verifica mediante un estudio morfolgico, anlisis de sus
caractersticas microscpicas y por reacciones qumicas sencillas.
La reaccin ms clsica denominada reaccin de la murexida
est actualmente en desuso: solo se utiliza para la identificacin
de la guaran (que debido a su forma de preparacin no puede
identificarse al microscopio). Tras la extraccin (CH2CL2) de la
droga, filtracin y eliminacin del disolvente, el residuo seco se
trata con perxido de hidrogeno en medio clorhdrico diluido.
Despus de evaporar a sequedad aparece una coloracin rojo vivo
que vira a violeta por adicin de amoniaco diluido.

El ensayo propiamente dicho comprende principalmente la

determinacin de la perdida por desecacin, la valoracin de
cenizas totales y el anlisis por CCF de una tintura de la droga
en etanol de 60 (revelando con KI/I2, tras pulverizacin con una
disolucin etanolica de cido clorhdrico).
La cafena se valora por CLAR: en una columna que contiene
slice octadecilsilada y la fase mvil est constituida por una
mezcla metanol- agua (35 -65). La disolucin que se inyecta se
obtiene por extraccin de la droga por metanol caliente. Despus
de filtrar, se evapora a sequedad una fraccin alcuota de la
disolucin metanolica y se retoma a la fase mvil
1.5 CAFEINA

Caf consiste en la semilla seca madura de Coffea arabica, C.

canephora, C.liberica, u otro Especie Coffea (Rubiaceae). Las
plantas son pequeos rboles de hoja perenne, ampliamente
cultivadas en varios partes del mundo, por ejemplo, Brasil y otros
pases de Amrica del Sur y Kenia. El fruto es desprovisto de su
cubierta de la semilla, luego se seca y se tuesta para desarrollar
su caracterstico color, olor, y degustar. Semillas de caf
contienen 1.2 % de la cafena y trazas de teofilina y
teobromina.
Estos se combinan principalmente en la semilla verde con cido
clorognico (7.5 %), o asar los libera y hace algo de
descomposicin del cido clorognico tambin cido qumico y el
cido cafeico. El trigonelina derivado de cido nicotnico est

presente en verde semillas a la extensin de aproximadamente

0,25-1 %; durante el tostado, esto se convierte ampliamente en
cido nicotnico. Los aceites voltiles y taninos proporcionan olor y
sabor. Una proporcin de la cafena puede sublimar durante el
proceso de tostado, proporcionando alguna cafena comercial.
Caf descafeinado, que contiene hasta 0,08 % de cafena, se
obtiene la eliminacin de la cafena, por lo general por percolacin
acuosa antes de asar. Este proceso ofrece otra fuente de cafena.
1.5.1 BIOSNTESIS DE LA CAFENA

Principal va de biosntesis de cafena es una de cuatro pasos

secuencia que consta de tres metilaciones y uno nucleosidasa las
reacciones. El esqueleto de xantina de la cafena es derivado de
los nucletidos de purina. El paso inicial en la cafena la
biosntesis es la metilacin de la xantosina por un SAM
dependiente N -metiltransferasa.
Sugieren fuertemente que la principal ruta a la cafena es un
xantosina (7 metilxantosina- 7 - metilxantina - teobromina - va
cafena, como se puede apreciar (en la Fig. n3). Aunque la
informacin ha sido obtenido principalmente de caf (Coffea
arabica) y t (Camellia sinensis), la evidencia disponible indica
que la va es esencialmente el mismo en otro alcaloide purinico
que se sintetiza en otra plantas, como mate'
y el cacao
(Theobroma cacao)

Fig., n3 BIOSINTESIS de la cafena

1.5.2 La biosntesis de la cafena de xantosina

El primer paso en la va de biosntesis de la cafena de la

xantosina es la conversin de la xantosina a 7 metilxantosina (Fig.
n3). Esta reaccin es catalizada por 7 metilxantosina sintasa.
Los genes que codifican 7 metilxantosina sintasa, fueron
aislados de C. arbica. Las protenas recombinantes obtenido a
partir de estos genes exhibicin 7 - metilxantosina sintasa la
actividad in vitro. Aunque Schulthe propuso la inclusin de 7
-metil - XMP en la biosntesis de la cafena va en el caf, XMP no
se convierte en 7- metilxantosina por las enzimas recombinantes.
El segundo paso de la biosntesis de la cafena implica una
nucleosidasa que cataliza la hidrlisis de 7 - metilxantosina.

Aunque N- methylnucleosidasa, era parcialmente purificada a

partir de hojas de t por Negishi, aislamiento de la enzima nativa,
as como ADN que codifica la enzima an no se ha logrado.
Recientes detallada estudios estructurales sobre el caf 7 metilxantosina sintasa sugerido que la transferencia de metilo y la
escisin de nuclesido pueden ser acoplado y catalizada por una
sola enzima.
Las Dos ltimas Etapas de la Sntesis de la cafena tambien catalizadas
por SAM- dependiente N - metiltransferasa(s), pero esta enzima Es
diferente de la N -metiltransferasa que cataliza la Primera Etapa en la
ruta. Las actividades de Nativo N -metiltransferasa se han detectado en
crudo y parcialmente extractos purificados de Plantas de t y caf, y una
Preparacin Muy purificada ha Sido obtenida de las jvenes hojas de t.
La enzima Asigna el Nombre de la cafena sintasa, que cataliza los
ltimos DOS PASOS de la biosntesis de la cafena , la conversin de 7metilxantina a la cafena hacia la teobromina (Fig. n3 ) . El Gen Que
codifica la cafena sintasa se clon un joven partir Hojas de t Por Kato
et al. ( 2000 ) . Then from , los genes plurales
codificacin N- metiltransferasas Que Tienen Diferentes sustrato
Se han reportado especficidades (ver section 3.1) .