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ENTOMOLOGIA FORENSE
CONCEITO BSICO
Insects
other
arthropods
Other
animals
ENTOMOLOGIA FORENSE
HISTRICO
Sung Tz.u (1235, China)
ENTOMOLOGIA FORENSE
HISTRICO
- Jean Bergeret (1855): primeiro IPM
ENTOMOLOGIA FORENSE
HISTRICO
NO BRASIL
- Roquete-Pinto (1908)
- Oscar Freire (1914 1923)
- A Entomologia Forense caiu no esquecimento
- Monteiro-Filho & Penereiro 1987: ressurgimento
ENTOMOLOGIA FORENSE
HISTRICO
......... NO BRASIL A PARTIR DE 1987
ENTOMOLOGIA FORENSE
HISTRICO
......... NO BRASIL A PARTIR DE 1987
- Grupos mais recentes: MG, AP e GO
- Em breve no ES
OBS: Ainda existe grande distncia entre a Percia Oficial e a
rea acadmica no Brasil.
ENTOMOLOGIA FORENSE
- Diversos centros renomados de investigao, como
o FBI (Federal Bureau Investigation) dos EUA.
Prdio do FBI.
ENTOMOLOGIA FORENSE
- CSI: Incio no ano 2000, nos EUA, e em 2001 no BR.
ENTOMOLOGIA FORENSE
- Podemos dividir em:
Entomologia Urbana
Produtos Estocados
Mdico-Legal / Criminal
ENTOMOLOGIA FORENSE
- URBANA
Cupim de madeira
ENTOMOLOGIA FORENSE
- URBANA
Cupim de parede
ENTOMOLOGIA FORENSE
- PRODUTOS ESTOCADOS
Sitophilus zeamais
(Besouro do caruncho)
ENTOMOLOGIA FORENSE
- PRODUTOS ESTOCADOS
ENTOMOLOGIA FORENSE
- PRODUTOS ESTOCADOS
ENTOMOLOGIA FORENSE
- MDICO-LEGAL / CRIMINAL
SEQUESTRO
ESTUPRO
HOMICDIO
MAUS TRATOS
QUEM A VTIMA?
QUEM O AUTOR?
QUANDO FOI A MORTE?
ENTOMOLOGIA FORENSE
- MDICO-LEGAL / CRIMINAL
Permanecemos em 2o lugar
MAUS TRATOS
Miase em idosa
- Escabiose;
- Pediculose;
- Miase
- Larvas e pupas nas fezes
Crianas negligenciadas
Idosos negligenciados
Campo
Mesembrinella bellardiana
Tanatologia Forense
Conceito - A Tanatologia mdico-legal ou forense
o ramo da medicina legal que estuda o morto e
a morte, assim como os fenmenos dela
decorrentes.
Rigidez cadavrica
-Msculos mandibulares
Instalao
-Msculos do pescoo
- Msculos do trax
- Membros superiores
- Msculos do abdome
- Membros inferiores
Circulao ps-morte
Circulao ps-morte
Putrefao
Fase coliquativa
Putrefao
Fase de esqueletizao
2 ORDENS
Diptera (moscas)
Coleoptera (besouros)
Sarcophagidae
Muscidae
Ordem Diptera
Famlia Caliphoridae (a mais importante)
Chrysomya megacephala
Chrysomya albiceps
Chrysomya putoria
Mesembrinella bellardiana
Hemilucilia segmentaria
Sarconesia chlorogaster
Ordem Diptera
Famlia Sarcophagidae
Ordem Diptera
Famlia Sarcophagidae
- Segunda famlia de maior importncia forense.
Ravinia sp.
Sarcophaga sp.
Oxysarcodexia sp.
Peckia sp.
Ordem Diptera
Famlia Muscidae
Graphomya sp
Musca domestica
Atherigona orientalis
Synthesiomya nudiseta
Ophyra aenensces
Morellia sp.
INTRODUO
Entomologia Forense
Aplicao de conhecimentos sobre insetos em casos judiciais
Gentica Forense
Estudo do DNA e tcnicas moleculares aplicados a anlises
de vestgios biolgicos relacionados rea judicial
Entomogentica Forense
RELEVNCIA DO ESTUDO
- 1 em 14 mulheres estuprada no mundo (Abrahams et al. 2014).
- Anurio de Segurana Pblica: em 2011 foram 43.869 mulheres
estupradas e em 2012 51.121 estupros.
- RJ, 2012: 6.029 notificaes, ou seja, 36,9 por 100 mil habitantes
- SSP de SP: 1 estupro a cada 40 minutos.
- IPEA: entre 2009 e 2011 quase 17 mil feminicdios no Brasil, ou
seja, 5.664 por ano (um em cada 90 minutos) .
- Muitas vtimas de estupro so assassinadas e encontradas dias
depois, j em decomposio
- Vtimas em decomposio: quase no se encontram provas
- Muitos suspeitos inocentes (grande exposio social)
OBJETIVOS
- Contribuir com a Percia Oficial do Brasil para a
materializao de provas contra autores de crimes sexuais
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA
ETAPA MOLECULAR
ETAPA ENTOMOLGICA
ETAPA MOLECULAR
ETAPA ENTOMOLGICA
ETAPA MOLECULAR
MATERIAL E MTODOS
EXPERIMENTO IN VITRO NO BRASIL
ETAPA ENTOMOLGICA
- Laboratrio de Diptera Museu Nacional/UFRJ (Dra. Mrcia Couri)
- Laboratrio de Entomologia Forense do ICCE PC/RJ (Dra. Janyra)
ETAPA MOLECULAR
- Laboratrio de DNA do IPPGF PC/RJ (Dr. Rodrigo Grazinoli)
MATERIAL E MTODOS
EXPERIMENTO IN SITU NO BRASIL
ETAPA ENTOMOLGICA
- Laboratrio de Diptera Museu Nacional/UFRJ (Dra. Mrcia Couri)
ETAPA MOLECULAR
- Laboratrio de DNA do IPPGF PC/RJ (Dr. Rodrigo Grazinoli)
MATERIAL E MTODOS
EXPERIMENTO IN VITRO NOS EUA
ETAPA ENTOMOLGICA
- Laboratory of Forensic Entomology, Department of Biological
MATERIAL E MTODOS
DIPTERA UTILIZADO NAS ETAPAS ENTOMOLGICAS NO BRASIL
- Adultos e imaturos de Chrysomya albiceps
b
Larva (a) e adulto (b) de Chrysomya albiceps.
MATERIAL E MTODOS
DIPTERA UTILIZADO NAS ETAPAS ENTOMOLGICAS NO BRASIL
- Adultos e imaturos de Chrysomya albiceps
Predominncia
Voracidade
Fcil diferenciao
MATERIAL E MTODOS
EXPERIMENTO IN VITRO NO BRASIL
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Entomologia Forense do ICCE, da Polcia Civil - RJ
- 600 g de carne moda + 3,0 mL de smen
- Estmulo oviposio em carne moda: potes protegidos da luz
- Coletas de imaturos a cada 24h de decomposio
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Entomologia Forense do ICCE, da Polcia Civil - RJ
- Criao de adultos com gua ad libitum e mel (50%).
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Entomologia Forense do ICCE, da Polcia Civil - RJ
- Pote aps 192h (8 dias) de decomposio
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Entomologia Forense do ICCE, da Polcia Civil - RJ
- Coleta das larvas e pupas a cada 24 horas (a partir do 2 dia)
Frascos com lcool 70%, para armazenamento das larvas e pupas coletadas.
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Entomologia Forense do ICCE, da Polcia Civil - RJ
- Dissecao dos imaturos
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Entomologia Forense do ICCE, da Polcia Civil - RJ
- Material do trato digestrio dos imaturos
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
2 Amplificao do DNA
3 Eletroforese capilar
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
1 Extrao do DNA
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
1 Extrao do DNA
- Tcnica de fenol-clorofrmio
DNA
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
APS A EXTRAO, FOI FEITA A QUANTIFICAO DE DNA TOTAL
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
6) Soluo tampo
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
dATP
dCTP
dGTP
dTTP
(nucleotideos)
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
dATP
dCTP
dGTP
dTTP
(nucleotideos)
94C
DENATURAO
2. Alternncia de temperaturas
(Termociclador)
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
dATP
dCTP
dGTP
dTTP
(nucleotideos)
94C
57C
DENATURAO ANELAMENTO
2. Alternncia de temperaturas
(Termociclador)
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
dATP
dCTP
dGTP
dTTP
(nucleotideos)
94C
57C
72C
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
Termociclador
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF), da Polcia Civil- RJ
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NO BRASIL
3 - Eletroforese capilar para anlise Y-STR
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NO BRASIL
Nmero de imaturos dissecados
Tempo de Decomposio
TOTAL
Nmero de imaturos
48 horas (2 dia)
15 larvas e 00 pupas
72 horas (3 dia)
14 larvas e 00 pupas
96 horas (4 dia)
14 larvas e 00 pupas
15 larvas e 00 pupas
13 larvas e 00 pupas
08 larvas e 12 pupas
02 larvas e 13 pupas
8 dias
81 larvas e 15 pupas = 96
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NO BRASIL
Eletroferograma Y-STR/48h (2 DIA)
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NO BRASIL
Eletroferograma Y-STR/72h (3 DIA)
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NO BRASIL
Eletroferograma Y-STR/120h (5 DIA)
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NO BRASIL
Eletroferograma Y-STR/144h (6 DIA)
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NO BRASIL
Eletroferograma Y-STR/192h (8 DIA)
Locais
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NO BRASIL
DYS389 I
16
14
DYS390
15
Questionado
Referncia
16
16
16
16
14
14
14
14
14
23
23
23
23
30
30
15
15
30
15
Hapltipo de
16
DYS389 II
DYS458
Hapltipo
15
15
16
DYS19
15
15
15
15
14
14
14
14
14
10
10
10
10
10
12
12
12
22
22
DYS385
DYS393
14
DYS391
10
14
DYS439
DYS635
22
22
12
12
12
12
11
11
11
11
11
15
15
15
15
15
15
DYS438
DYS448
20
20
20
20
DYS392
GATA H4
DYS437
15
20
MATERIAL E MTODOS
EXPERIMENTO IN SITU NO BRASIL
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN SITU NO BRASIL
Batalho CFA da PM-ES
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN SITU NO BRASIL
Batalho CFA da PM-ES
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN SITU NO BRASIL
Batalho CFA da PM-ES
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN SITU NO BRASIL
Batalho CFA da PM-ES
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN SITU NO BRASIL
Batalho CFA da PM-ES
- Coleta de imaturos a cada 24h, at 14 dias de decomposio
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN SITU NO BRASIL
Batalho CFA da PM-ES
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN SITU NO BRASIL
Batalho CFA da PM-ES
Frascos com lcool 70%, para armazenamento das larvas e pupas coletadas.
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN SITU NO BRASIL
Batalho CFA da PM-ES
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN SITU NO BRASIL
Laboratrio de Entomologia Forense do ICCE - RJ
Dissecao do imaturo
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN SITU NO BRASIL
Laboratrio de Entomologia Forense do ICCE - RJ
TAMPO DE EXTRAO
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN SITU NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF) - RJ
2 Amplificao do DNA
3 Eletroforese capilar
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN SITU NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF) - RJ
DNA
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN SITU NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF) - RJ
Ultrafiltrao em Microcon
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN SITU NO BRASIL
Laboratrio de Gentica Forense (IPPGF) - RJ
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN SITU NO BRASIL
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN SITU NO BRASIL
Tempo de Decomposio
TOTAL
Nmero de imaturos
96 horas (4 dia)
51 larvas e 00 pupas
53 larvas e 00 pupas
76 larvas e 00 pupas
28 larvas e 00 pupas
32 larvas e 00 pupas
48 larvas e 01 pupa
11 larvas e 28 pupas
00 larvas e 18 pupas
00 lavras e 23 pupas
00 larvas e 57 pupas
00 larvas e 20 pupas
14 dias
446
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN SITU NO BRASIL
Eletroferograma Y-STR / 144h (6 dia)
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN SITU NO BRASIL
Eletroferograma Y-STR / 288h (12 dia)
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN SITU NO BRASIL
Eletroferograma Y-STR / 336h (14 dia)
Locais
16
16
16
16
14
DYS389 I
Hapltipo
Questionado
Hapltipo de
Referncia
16
16
14
14
23
DYS390
30
DYS389 II
DYS458
15
15
15
30
30
15
15
16
DYS19
15
DYS385
15
15
DYS393
14
DYS391
10
12
DYS439
DYS635
DYS392
22
12
12
12
12
22
22
12
12
GATA H4
11
DYS437
15
DYS438
DYS448
20
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN SITU NO BRASIL
- Amplificao de 8 regies de interesse, na unio dos horrios
- Locais allicos amplificados compatveis com a amostra referncia
MATERIAL E MTODOS
EXPERIMENTO IN VITRO NOS EUA
113
MATERIAL E MTODOS
EXPERIMENTO IN VITRO NOS EUA
- Espcie predominante em cadveres na regio: Chrysomya megacephala
a
Larva (a) e adulto (b) de C. megacephala
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN VITRO NOS EUA
Laboratory of Forensic Entomology, Florida International University - FIU
- Estmulo oviposio em frascos especficos
- 600 g de carne moda + 3,0 mL de smen
- Coletas de imaturos a cada 24h de decomposio, por 14 dias.
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN VITRO NOS EUA
Laboratory of Forensic Entomology, Florida International University - FIU
- Uso de gaiolas entomolgicas
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN VITRO NOS EUA
Laboratory of Forensic Entomology, Florida International University - FIU
- Armazenamento dos imaturos de C. megacephala.
MATERIAL E MTODOS
ETAPA ENTOMOLGICA IN VITRO NOS EUA
Laboratory of Forensic Entomology, Florida International University - FIU
- Retirada visceral dos imaturos de C. megacephala.
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NOS EUA
Crime Laboratory / CSI of Miami Dade Police
1 Extrao do DNA
2 Amplificao do DNA
3 Eletroforese capilar
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NOS EUA
Crime Laboratory / CSI of Miami Dade Police
1 Extrao do DNA
- Extrao baseada em partculas magnticas
Large Volum Protocol
Tubo especfico
20 l de proteinase K, mantida
em temperatura ambiente
Equipamento EZ1 Advanced XL, da Qiagen
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NOS EUA
Crime Laboratory / CSI of Miami Dade Police
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NOS EUA
Crime Laboratory / CSI of Miami Dade Police
Concentrao de DNA
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NOS EUA
Crime Laboratory / CSI of Miami Dade Police
MATERIAL E MTODOS
ETAPA MOLECULAR IN VITRO NOS EUA
Crime Laboratory / CSI of Miami Dade Police
3- Eletroforese capilar
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NOS EUA
TOTAL
Tempo de Decomposio
Nmero de imaturos
72 horas (3 dia)
15 larvas e 00 pupas
96 horas (4 dia)
16 larvas e 00 pupas
16 larvas e 00 pupas
18 larvas e 00 pupas
17 larvas e 03 pupas
15 larvas e 04 pupas
16 larvas e 04 pupa
15 larvas e 05 pupas
08 larvas e 07 pupas
11 larvas e 06 pupas
06 larvas e 09 pupas
00 larvas e 15 pupas
14 dias
208
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NOS EUA
Eletroferograma Y-STR/72h (3 DIA)
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NOS EUA
Eletroferograma Y-STR/120h (5 DIA)
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NOS EUA
Eletroferograma Y-STR/168h (7 DIA)
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NOS EUA
Eletroferograma Y-STR/216h (9 DIA)
RESULTADOS E DISCUSSO
EXPERIMENTO IN VITRO NOS EUA
# 16 regies amplificadas em 16
# Extrao eficiente
# Compatibilidade allica com a
amostra de referncia
# Sem perfil de mistura
72h
120h
168h
(3 dia) (5 dia) (7 dia)
216h
(9 dia)
Hapltipo Hapltipo de
Querstionado Referncia
DYS456
16
16
16
16
16
DYS389 I
14
14
14
14
14
DYS390
23
23
23
23
23
DYS389 II
30
30
30
30
DYS458
15
15
15
15
15
DYS19
16
16
16
16
16
DYS385
15
15
15
15
15
DYS393
14
14
14
14
14
14
DYS391
10
10
10
10
10
10
DYS439
12
12
12
12
DYS635
22
22
22
22
DYS392
12
12
12
12
12
GATA H4
11
11
11
11
11
DYS437
15
15
15
15
15
DYS438
DYS448
20
20
20
20
20
15
22
15
OBRIGADO A TODOS
biochamoun@gmail.com