XI JORNADAS DE INVESTIGACIN, Revista Investigacin Cientfica

Vol. 3, No. 2, Especial, Nueva poca. Mayo - Agosto 2007.

ISSN 1870-8196
POLIMORFISMO DEL GEN N-ACETILTRANSFERASA (NAT-2) EN UN GRUPO
DE INDIVIDUOS ZACATECANOS
Aguilar-Gonzlez Juan Antonio*, Hernndez Barrales Marisa*, Avalos-Daz
Esperanza, Lpez Saucedo Adrin** y Ayala-Lujn Jorge Luis*.
*CA 149 Lab. de Diagnstico Molecular, Unidad Acadmica de Ciencias Qumicas,
**U. Acadmica de Medicina Humana, rea de Ciencias de la Salud Campus UAZ
S XXI. Unidad Acadmica de Biologa Experimental, Universidad Autnoma de
Zacatecas. marisahb@gmail.com
Palabras clave: genotipos, NAT-2, SNPs
La mayora de las drogas de uso teraputico son sujetas a procesos de
biotransformacin por sistemas enzimticos localizados en el retculo endoplasmico
de los hepatocitos. Algunos agentes teraputicos experimentan una variabilidad
individual, en la que una misma dosis en un individuo produce un efecto teraputico,
mientras en otros individuos puede producir una respuesta farmacolgica
exagerada, llevando a reacciones adversas y toxicidad. Estas diferencias
individuales se deben a polimorfismos genticos de enzimas involucradas en
reacciones de biotransformacin. La N acetiltransferasa 2 (NAT-2) es una enzima
de fase II involucrada en la biotransformacin de drogas y otras sustancias
exgenas, esta enzima cataliza la transferencia de grupos acetilo a partir de la
acetil-CoA al grupo amino primario de la molcula aceptora. NAT-2 es una protena
de 290 aminocidos que se expresa en altos niveles en hgado y es codificada por
el gen NAT2 localizado en el cromosoma 8p22 (Blue y cols 1990, Hickman y cols.
1994). Este gen tiene un marco de lectura abierto de 870 pb y contiene varias
sustituciones de nucletidos, por lo que el gen presenta diferentes alelos en el
genoma de los individuos. Este polimorfismo en el gen resulta en la produccin de
protenas NAT2 con actividad o estabilidad enzimtica variable, actualmente se han
descrito alrededor de 36 alelos donde el tipo silvestre es representado como NAT24, y los alelos mutados restantes poseen una combinacin caracterstica de
sustituciones de 1-4 nucletidos que ocurren en posiciones definidas dentro de la
secuencia codificante de 870 pb. Se han identificado dos fenotipos acetiladores:
acetiladores lentos que son homocigotos para los alelos de baja actividad y
acetiladores rpidos que poseen uno o ms de los alelos de alta actividad (Hein y
cols 2000). La proporcin de fenotipos acetiladores rpidos o lentos vara en
diferentes poblaciones tnicas y geogrficas, y se ha mostrado que el polimorfismo
estatus acetilador puede representar un factor de riesgo para la susceptibilidad
individual a enfermedades como Diabetes mellitas, Alzheimer y varios tipos de
cncer (Butcher 2002). En este contexto surge la necesidad de la caracterizacin
gentica de diferentes poblaciones para contribuir a clarificar la influencia de la
variacin gentica en la morbilidad y mortalidad por cncer y otras enfermedades
cronico-degenerativas. En virtud de que existen pocos trabajos realizados en
poblaciones mexicanas para este gen, resulta muy importante abordar este tipo de

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estudios. El objetivo de este trabajo es caracterizar los alelos NAT2 en poblacin de
origen zacatecana para posteriormente identificar la frecuencia de alelos, genotipos
y acetiladores rpidos y lentos. La estrategia que seguimos para la determinacin
de los genotipos NAT2 implica la amplificacin del gen de 1.2 Kb mediante la
Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR) y anlisis de los alelos mediante los
Polimorfismos en los Fragmentos de Restriccin (RFLPs) para las enzimas Kpn I
(alelo M1), Taq I (alelo M2) y Bam HI (alelo M3). Hemos recopilado una serie de
muestras de DNA de individuos zacatecanos sanos obtenidas a partir de leucocitos
de sangre perifrica con las cuales estamos constituyendo un banco de DNA
genmico. El DNA fue extrado con DNAzol, la integridad y la pureza de cada
muestra fue verificada por electroforesis en gel de agarosa y por espectrofotometra
respectivamente. Con estas muestras iniciamos y obtuvimos la estandarizacin de
las condiciones para la amplificacin del gen y los ensayos de digestin con las
diferentes enzimas de restriccin. El anlisis de los genotipos obtenidos de los
individuos analizados hasta el momento nos muestra la presencia de alelos
silvestres y mutantes por lo que consideramos que estos polimorfismos sern de
utilidad para clasificar a los individuos como acetiladores lentos rpidos en el tipo
de poblacin en estudio.
Este trabajo es apoyado con recursos PROMEP/103.5/04/2860.