Xenobioticos y la Formacin de Aductos

INDICE GENERAL
INTRODUCCION3
XENOBIOTICOS..4
Dao celular inducido por radicales libres..5
ADUCTOS
7Agentes de los Aductos8
Formacin de Aductos..9
PROTENAS..... 16
CONCLUSIONES...........................................................................................................30
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS............................................................................31
ANEXOS.........................................................................................................................32

Xenobioticos y la Formacin de Aductos

INTRODUCCIN

Los Xenobioticos actan mediante la formacin de aductos con las

protenas y el ADN.

Esta formacin de aductos requiere la existencia de

grupos electroflicos en el Xb y de centros nucleoflicos tales como grupos

amino, sulfhidrilo, hidroxilo, presentes en otras molculas (protenas, ARN y
ADN).

Estos aductos distorsionan la estructura de las protenas y/o cidos

nucleicos y, por tanto, su funcin o replicacin en su caso. En el caso del ADN
y las protenas explicaremos en nuestro trabajo detalladamente cuales son los
agentes que actan en los aductos,

la formacin de los aductos, tambin

formacin de aductos de ADN. En el caso de las protenas veremos cmo se

clasifican los aductos en ellas explicando as cada clase con ejemplos.

XENOBIOTICOS Y LA FORMACION DE ADUCTOS

XENOBITICOS (Xbs)

Xenobioticos y la Formacin de Aductos

Segn Joven, J. en el artculo La respuesta de los humanos a los xenobiticos, los
xenobiticos son las substancias extraas al organismo y que entran en l, como por
ejemplo los frmacos, los medicamentos. Tambin incluyen aquellos elementos que
nos son propios pero alcanzan el organismo por vas diferentes a las habituales y
sobre todo compuestos ambientales ms o menos articiales (insecticidas,
carcingenos, etc.).
Otras fuentes sealan que el xenobitico es todo compuesto qumico que no forma
parte de la composicin de los organismos vivos. Suelen ser contaminantes
(concentracin en exceso) de determinados ambientes y generalmente ejercen algn
tipo de efecto sobre los seres vivos, aunque no tengan toxicidad aguda.

Muchos Xbs (en su mayora carcingenos) actan en el organismo mediante la

formacin de especies reactivas de oxgeno (ROS) o a travs de la formacin de
aductos con las protenas y con el ADN. La formacin de aductos requiere la
existencia de grupos electroflicos (deficientes en electrones) en el Xb ( carcingeno)
y de centros nucleoflicos (ricos en electrones) tales como grupos amino, sulfhidrilo,
hidroxilo, presentes en otras molculas (protenas, ARN y ADN). Estos aductos
distorsionan la estructura de las protenas y/o cidos nucleicos y, por tanto, su funcin
o replicacin en su caso. En el caso del ADN, normalmente el dao producido puede
ser reparado, pero si no lo es, se introduce una base inapropiada en la nueva cadena
de ADN, lo que originara una mutacin.
Dao celular inducido por radicales libres
Dos de los mecanismos principales del dao celular inducido por xenobiticos son:
1.- Aumento de la formacin de especies reactivas de oxgeno (radicales libres,
perxidos, etc.), con el consiguiente estrs oxidativo. La evolucin de estos procesos
ha necesitado de la evolucin paralela de sistemas de proteccin.

Xenobioticos y la Formacin de Aductos

2.- Unin covalente a macromolculas (protenas, polisacridos, lpidos, ADN) que
pierden su funcin y expresan el dao celular. (Anexo 1)
Estrs oxidativo:
El estrs oxidativo es un estado de la clula en el cual se encuentra alterada la
xido-reduccin intracelular, es decir el balance entre prooxidantes y
antioxidantes. Este desbalance se debe a una excesiva produccin de especies
reactivas de oxgeno (ROS) y/o por deficiencia en los mecanismos antioxidantes,
conduciendo a dao celular.
Especies reactivas de oxgeno:
El oxgeno es necesario para la vida, pero en determinadas condiciones, por
reacciones de naturaleza qumica, por accin enzimtica, por efecto de las
radiaciones ionizantes, etc., pueden producirse una serie de ROS (molculas o
radicales libres), capaces de reaccionar con otros compuestos presentes en el
organismo y, consecuentemente, llegar a producir un dao celular. Un radical
libre (RL) es aquella especie qumica, cargada o no, que tiene en su estructura al
menos un electrn desapareado. Los RL son muy peligrosos porque son muy
inestables y, por tanto, tienen una vida media muy corta (tienden a aparearse
robando electrones).

Xenobioticos y la Formacin de Aductos

Destino molecular del estrs oxidativo:
Cuando las especies reactivas oxidantes superan las defensas antioxidantes se
produce el estrs oxidativo, el cual genera dao a macromolculas. El posible
destino celular bajo condiciones de estrs, depender de varios factores: el
contenido endgeno de defensas antioxidantes, el grado de estimulacin de las
mismas bajo la condicin de estrs, la reversibilidad de las modificaciones a
macromolculas

producidas,

la

magnitud

del

estrs

oxidativo

sus

consecuencias funcionales.
Los compuestos celulares ms sensibles a los efectos de estos oxidantes son:
1. Las protenas
2. Los lpidos insaturados
3. Los cidos nucleicos
4. Los carbohidratos.

Figura

1:
Destinos moleculares del dao oxidativo

ADUCTOS
La palabra aducto se origina por la contraccin de las palabras adicin y producto, y se
refiere a una entidad qumica que se produce por la unin de dos molculas mediante
un enlace covalente. Esta unin es de naturaleza reversible, es decir, los elementos
pueden retornar a su forma libre en algn momento.
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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

Los aductos de ADN son formas de ADN que resultan de una exposicin a
carcinognicos. Un aducto de ADN, una vez formado, puede repararse. Esto significa
una vuelta a la estructura original de ADN. Tambin puede ser mal reparado, lo que
resulta en una mutacin. Por ejemplo, en el caso de los fumadores, los aductos seran
los carcinognicos presentes en el humo de tabaco. Los aductos de ADN son tiles
como biomarcadores precoces del cncer, es decir, sirven para detectar cncer en
pacientes.

Los aductos de protena, a pesar de no tener efectos biolgicos adversos, sirven para
medir la exposicin a substancias extraas.
Agentes carcinognicos
Los carcingenos son agentes capaces de producir cncer. Se encuentran, entre
otros, en el humo del tabaco, contaminantes de alimentos y en solventes usados en la
industria y la manufactura.

Se pueden clasificar en:

Agentes qumicos, tales como nitrosaminas, agentes alquilantes e hidrocarburos
aromticos policclicos. Suelen llamarse carcingenos qumicos.
Agentes fsicos, tales como la radiacin ionizante (rayos X y rayos ), luz U.V. y
fibras minerales.
Agentes biolgicos, como retrovirus.
Factores genticos.
Agentes qumicos:
Carcingenos qumicos
Se dividen en dos grandes categoras iniciadora (genotxica) y promotora (nogenotxica):

Xenobioticos y la Formacin de Aductos

1.- Genotxicos: Producen alteraciones en el material gentico del husped. Por

ejemplo, los agentes inorgnicos, como el arsnico, cromo, nquel, que interfieren con
enzimas relacionadas con la replicacin del ADN alterando la fidelidad. Pueden ser de
accin:
a) Directa: Si no requieren activacin y reaccionan con grupos nucleoflicos en
los cidos nucleicos. Por ejemplo, los gases mostaza ntrico y sulfrico.
b) Indirecta: Si requieren activacin por enzimas. Como por ejemplo, los
hidrocarburos policclicos aromticos (benzopireno, cloruro de vinilo) y las aminas.
2.- No genotxicos: Alteran la expresin de genes por transcripcin o traduccin pero
no alteran la secuencia primaria del ADN. Estos cambios se relacionan con
alteraciones en la proliferacin y diferenciacin celular. Ejemplos: xenobiticos
inmunosupresores, hormonas y promotores tumorales (fenobarbital).
Agentes fsicos mutagnicos:
Las radiaciones poseen un elevado potencial mutagnico (5% de los cnceres en el
hombre) al incidir sobre la molcula de ADN, a la que alteran de distintos modos,
causando roturas en las cadenas de nucletidos o induciendo la formacin de enlaces
covalentes estables entre bases de la misma o distinta cadena, lo que genera a su vez
errores durante la replicacin o expresin del ADN.
La accin de los mutgenos puede ser directa o, a veces, indirecta, mediante la
interaccin con otras molculas y la formacin de radicales libres que daaran el ADN.
Las radiaciones ionizantes (con energa suficiente para provocar la separacin de uno
o ms electrones de un tomo o de una molcula), producen la liberacin de grandes
cantidades de energa capaz de romper los enlaces qumicos de las molculas de
ADN y de protenas.
Formacin de aductos
En este caso el txico, o algn metabolito reactivo, pueden quedar unido
covalentemente a macromolculas (Anexo 3 y 4) como el ADN o la hemoglobina.
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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

Unin covalente de intermediarios reactivos a biomolculas
La principal fuente de intermediarios reactivos derivados de los Xbs es el hgado, ya
que es el lugar principal de su metabolismo. La unin covalente a protenas celulares
(del citoplasma, retculo endoplsmico o ncleo), as como a cidos nucleicos u otras
macromolculas, causa un dao que depender, fundamentalmente, de:
- La reactividad del compuesto y su vida media
- La extensin de la unin
- La molcula a la que se une.
- Lmite de tolerancia.
En el caso del ADN, puede desencadenarse una alteracin mutagnica la cual, a su
vez, desencadene un proceso carcinognico.
Formacin de aductos de ADN
Un gran nmero de Xbs pueden daar el ADN. En el siguiente esquema se observa la
conversin de un carcingeno en un aducto de ADN y las posibles consecuencias.

Carcingeno
prximo

Carcingeno

Carcingeno
ltimo

Aducto de
ADN

Detoxificacin

Reparacin

Normal

Mutacin

Muerte

Cncer

Figura 2. Formacin de aductos de ADN

Existen 4 grandes clases de compuestos que ejercen sus efectos mediante la
formacin de aductos covalentes con bases del ADN:
a) hidrocarcuros aromticos policclicos (PAH),
b) aminas aromticas,
c) nitrosaminas
d) otros agentes alquilantes

Xenobioticos y la Formacin de Aductos

Todos ellos tienen grupos electroflicos o grupos que se pueden convertir en

electroflicos metablicamente (epxidos, hidroxilaciones). Estos grupos forman
enlaces covalentes con nuclefilos presentes en el ADN, lo que origina la accin
cancergena.
A) Hidrocarburos aromticos policclicos
Se forman como productos de la combustin de petrleo y material biolgico,
tambin se generan en el tabaco, whisky, carnes a la brasa y por combustin
incompleta de combustibles fsiles (carbn y gasolina). Forman aductos con bases
pricas, especialmente guanina, pero solamente tras la activacin enzimtica a
carcingeno prximo o ltimo.

Regin
bahabah
a baha

Carcing
eno

Carcingeno
prximo

Carcingeno
ltimo

Fenantreno
inactivo
Figura 3. Hidrocarburos Aromticos

B) Aminas Aromticas
Se usan en la industria del tinte del caucho (goma). Un ejemplo es el 2acetilaminofluoreno (AAF) que causa en animales mltiples cnceres (vejiga, hgado,

Xenobioticos y la Formacin de Aductos

intestino, odo, tiroides y pecho) (en ratas necesita del orden de g). Se ha usado
como insecticida y algunos compuestos relacionados se encuentran en las carnes
cocinadas (millonsima de g).

Carcingeno

Carcingeno
prximo

Carcingeno
ltimo

Figura 4. Aminas Aromaticas

C) Nitrosaminas
Se forman en las carnes y pescados ahumados por interaccin entre aminas
naturales y nitritos aadidos como conservantes, pero su presencia mayoritaria est
en el tabaco y sus productos. Actualmente se sabe que los efectos carcingenos de
las nitrosaminas estn relacionados con los mecanismos bioqumicos que las activan
(por ej. las oxidasas microsomales de funcin mixta).

Espontnea

NMethylnitrosourea

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

Figura 5. Nitrosaminas
La mayora de las nitrosaminas requieren la activacin enzimtica para formar
el carcingeno ltimo. El mecanismo bioqumico por medio del cual se produce el
cncer se cree que tiene relacin con la metilacin de algunas bases nitrogenadas en
el ADN, probablemente con la escisin (eliminacin) de las bases nitrogenadas
alquiladas ms que con el nivel de alquilacin.
D) Otros agentes alquilantes
Entre los carcingenos qumicos ms significativos en la iniciacin del cncer
destacan los agentes alquilantes (metilo, etilo). Estos atacan grupos nucleoflicos del
ADN y

pueden iniciar la secuencia de sucesos que dan lugar al crecimiento y

replicacin de clulas neoplsicas (cancerosas).

Un ejemplo es el cloruro de vinilo (gas descubierto en 1817, usado en la
industria del plstico como PVC):

Agente monofuncional
CH2=CH-Cl

Grupos metilo
unidos a N
(izqda) u O
(derecha)
en Guaninas
contenidas en el
ADN

Cloruro de vinilo

Unin
al resto de la molcula de
Figura 6. Otros agentes
alquilantes
ADN

Otro ejemplo de este grupo es el gas mostaza, con grupos suficientemente

electrfilos que no requieren activacin (carcingeno directo). El trmino mostaza se
refiere a las ampollas que producen estos agentes en la piel. En agua, los compuestos
originarios forman un electrfilo que reacciona con nuclefilos biolgicos. Las
mostazas nitrogenadas reaccionan con las bases de los cidos nucleicos La reaccin
del N7 de la guanina con la mecloretamina se ilustra en la imagen.

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

Figura 7. Gas mostaza

La base modificada puede aparearse anormalmente durante la replicacin (3) e

inducir mutaciones, pero tambin puede ser eliminada del ADN (4), lo que produce
escisin de la cadena, o producir la fragmentacin del ADN (5) al romperse el anillo.
Tambin puede haber entrecruzamiento de cadenas de ADN (6). Puesto que los
agentes alquilantes modifican el crecimiento celular, la mitosis, la diferenciacin y la
funcin de la clula, las clulas que se estn dividiendo ms rpido, son las ms
susceptibles a la accin de estos agentes. En clulas que se dividen lentamente, los
procesos de reparacin del ADN pueden revertir los efectos de la modificacin del
ADN. Las mostazas nitrogenadas son, por tanto, mutgenicas y carcingenas. Sin
embargo, y debido a la propia accin de estos agentes sobre las clulas en divisin,
muchos de ellos se usan en el tratamiento contra el cncer.

Finalmente, la estructura de las ADN polimerasas tambin influye en la

inhibicin de las mismas por txicos. La polimerasa- contiene uno o ms grupos SH
crticos, por lo que es muy sensible a sustancias que reaccionan con estos grupos,

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

como es el caso de la N-etilmaleimida. La polimerasa- no tiene grupos SH crticos por
lo que no es sensible a tales sustancias.

Consecuencias del dao al ADN: Mutaciones

PROTENAS
La modificacin covalente de protenas puede tener profundos efectos sobre su
estructura y actividad biolgica. Algunos efectos bien conocidos incluyen la
fosforilacin, carboxilacin, metilacin, glicosilacin y unin a cidos grasos. Todo ello
puede afectar a la estructura de membranas, metabolismo energtico, transporte de
metabolitos e iones, etc.
La disminucin de la incorporacin de aminocidos radiactivos en protenas es
con frecuencia secundario a los efectos de los txicos sobre la produccin de energa
o sobre la sntesis de mARN. Muy pocos txicos inhiben la sntesis de protenas por
inhibicin de etapas implicadas en su sntesis. Entre ellos estn la cicloheximida, que
bloquea la peptidil transferasa, la puromicina, que produce la terminacin prematura

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

de la cadena y liberacin de la recien sintetizada. Otros inhibidores (CCl 4 y tolueno)
producen la disgregacin de poliribosomas en monoribosomas y a veces en
subunidades ribosmicas.
Algunos txicos pueden inducir la sntesis especfica de protenas. La metalotionena,
por ejemplo, es una protena que une metales (Zn2+, Cd2+, Hg2+, Me-Hg1+ y otros
metales pesados catinicos). Esta capacidad se debe al alto contenido en cistenas
(33%) y grupos SH. La administracin de estos metales hace que aumente la sntesis
de metalotionena al aumentar, previamente, la sntesis del mARN correspondiente.
As, la metalotionena del tejido renal aumenta por exposicin repetida al mercurio.
Otros agentes que inducen la sntesis de metalotionena son los corticosteroides y el
CCl4.
Reacciones con protenas
Entre los intermediarios reactivos que pueden unirse de forma covalente a las
protenas se encuentran los siguientes:

Aldehdos
Carbonilos Y :
Haluros de alquilo:

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

Epxidos:

En la literatura actual se describen muchos aductos, que se clasifican en 5 tipos:

1. Aducto de acetaldehdo,
2. Aducto de hidroxietil radical,
3. Aducto de malondialdehdo (MDA),
4. Hbrido de acetaldehdo con MDA, llamado aducto MAA
5. Aducto del 4-hidroxinonenal.

Cuando una protena reacciona qumicamente con una molcula muy pequea, como
acetaldehdo, hidroxietil radical, malondialdehido o una combinacin de ellas, la
protena cambia su estructura molecular y de esta manera puede provocar una
respuesta inmune. La propiedad mencionada puede tener varias aplicaciones: por
ejemplo, puede tener utilidad diagnstica, ya que si en un animal se obtienen
anticuerpos contra una protena transformada, posteriormente se pueden usar para
reconocer esa protena en la sangre de los pacientes. Tambin se puede producir una
inmunizacin pasiva si se inyecta la protena a los animales para inducir la
degranulacin de los mastocitos, con liberacin de histamina.

Los residuos de acetaldehdo unidos a la protena pueden explicar el dao tisular

mediante la unin de un factor del complemento con las clulas natural killer y tambin
pueden explicar la migracin de neutrfilos que se observa en los pacientes.

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

1.- Aductos de acetaldehdo

Todas las vas que metabolizan el etanol llegan al metabolito acetaldehdo, de peso
molecular bastante bajo (44), que normalmente se une a una macromolcula de
protena o a un lpido, que tambin puede actuar como macromolcula aceptora. Sin
embargo, cuando existe una alta concentracin de acetaldehdo en estado
estacionario debido a un consumo excesivo de alcohol, tambin se produce la
reaccin entre el acetaldehdo y el grupo amino terminal o amino-lisina de un pptido y
se forma una base de SCHIFF.

Esta unin es reversible, es decir, al bajar las concentraciones, los componentes

pueden volver a la forma libre, pero la base de SCHIFF es inestable. Podra
estabilizarse mediante algn reductor endgeno, pero an no se ha descubierto
ninguno, y esto se ha logrado solamente in vitro. Tambin podra hacerlo ciclndose
por medio de una reacomodacin molecular con el segundo aminocido de la cadena
y formando una estructura estable. Los anticuerpos contra una u otra forma son
diferentes y es posible generar anticuerpos monoclonales contra cada una de ellas. Lo
dicho es general con todos los tipos de aductos, pero se observan reactividades
cruzadas entre algunos de ellos.

En resumen, los mecanismos por los cuales el consumo crnico de alcohol eleva la
concentracin de acetaldehdo y lleva a la formacin de aductos de las protenas, que
pueden producir citotoxicidad o inflamacin, estn claros. Adems, la endotoxemia y la
activacin de las clulas de Kpfer por TNF alfa producen un aumento del hidroxietil
radical, que tambin conduce a la formacin de aductos.

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

2.- Patogenia de la esteatosis

Cuando el alcohol es la principal fuente de energa, debido a una ingesta excesiva,

genera el acetaldehdo, que se transforma posteriormente en acetato y entra de esta
forma al ciclo de Krebs; deriva en gran parte hacia la formacin de cidos grasos. La
betaoxidacin est detenida, lo que aumenta la cantidad de equivalentes reducidos de
NADH; la clula, en un esfuerzo por recuperar los niveles normales de NAD,
transforma piruvato en cido lctico y gliceraldehido 3 fosfato en glicerol 3 fosfato, que
se une a los cidos grasos para formar los triglicridos, cuya acumulacin produce la
esteatosis heptica.

Este proceso es rpido y reversible: si una persona consume alcohol en exceso el

viernes y el sbado (ms de 6 vasos), va a tener esteatosis heptica el domingo, pero
el martes o mircoles ya no va a tener absolutamente nada, siempre que detenga la
ingesta.

Si se inmuniza un conejo con acetaldehdo con seroalbmina de conejo, la misma

seroalbmina del animal se transforma in vitro con acetaldehdo. Cuando se pone en
la placa de ELISA para demostrar que hay reactividad, reacciona contra otro aducto de
cualquier otra protena; o sea, cuando el acetaldehdo est unido a la protena, los
anticuerpos reconocen esa protena transformada, y no la que est sin transformar. En
este caso se habla de un aducto independiente de la protena transportadora.

Los aductos se hacen en condiciones de 200 milimolar de acetaldehdo, lo cual es

bastante debatido en la literatura, porque son concentraciones imposibles de alcanzar
en el ser humano; otros tipos de reducciones ocurren con dichas concentraciones y

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

hay muchas explicaciones al respecto, pero lo que importa es que, cuando se practica
esto in vitro, despus hay cierta correlacin con lo que se encuentra in vivo.

3.- Aductos de hidroxietil radical

El hidroxietil radical es producto de la oxidacin del etanol, en la cual se saca un

electrn del carbono alfa de la molcula de etanol. In vitro, esto ocurre en presencia de
una reaccin de Fenton, que contiene Fe+2 y perxido de hidrgeno. El hidroxietil
radical que se forma se une a una protena como la hemoglobina, se forma el radical
hidroxilo en presencia de la reaccin de Fenton, que sustrae un electrn del carbono
alfa del etanol, y as se forma el hidroxietil radical. ste se une a residuos de tirosina
de las protenas, o sea, se une a residuos distintos.

Los experimentos demostraron que, en condiciones de Fenton, aumentaba la unin

del etanol a la hemoglobina; para esto se utiliz etanol radioactivo, que se uni a la
protena en gran cantidad, en estas condiciones. Hay varios mecanismos que explican
la formacin del radical; entre ellos est la activacin de las clulas de Kpfer por
cloruro de gadolinio. Se puede atrapar un superxido y el hidroxietil radical se forma
con una nitrona, atrapador de radicales libres que es en s mismo un radical libre, pero
es estable y se puede detectar por varios mecanismos. El citocromo P450 2E1, que en
su metabolismo forma el alfa hidroxietil radical, tambin se puede atrapar y detectar,
incluso en la bilis.

En los experimentos con glutatin el propsito era que el glutatin disminuyera la

incorporacin del hidroxietil radical a la molcula de hemoglobina, que es la molcula
que utilizada en estos estudios. Para verificarlo, se coloc glutatin en presencia de la
reaccin de Fenton y, curiosamente, se encontr una mayor incorporacin a la

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

protena en concentraciones muy bajas de glutatin, de 0,1 milimolar. Este hecho
puede ser relevante cuando hay carencia de glutatin reducido, que es un mecanismo
de defensa; se encuentra en equilibrio con el glutatin oxidado en una relacin de 20:1
y, en condiciones de estrs oxidativo, puede caer a 1:1 o menos.

Para estudiar la reaccin con ms acuciosidad se recurri a una tcnica de EPR

(espectrometra de resonancia paramagntica de electrn), que toma a la molcula y
la hace vibrar de acuerdo a su electrn no apareado en un campo magntico. Los
investigadores fabricaron una estructura con la nitrona y el carbono que tiene el
electrn no apareado, que se atrapa, con lo que la nitrona estabiliza ese electrn y
permite el estudio de la molcula respectiva.

Las constantes del nitrgeno y del protn permiten determinar a qu molcula

corresponde, pero adems se puede transformar el carbono del etanol en carbono 13
y se puede variar la razn magnetognica de este carbono, de modo que se duplique
la seal, la que ser su huella dactilar para demostrar que se est trabajando con el
radical indicado. Posteriormente, se calcula el rea bajo la curva de la primera
vibracin y se obtienen valores comparativos con distintas concentraciones de
glutatin, que van de 0 a 10 milimolar. As se observa que, en concentraciones muy
bajas, la seal es alta; en cambio, cuando pasa sobre 1 milimolar, la seal es mucho
ms baja y el glutatin empieza a actuar como antioxidante.

Como conclusin, cabe sealar que los antioxidantes, en este caso el glutatin,
pueden actuar por ambos caminos, dependiendo de la concentracin que tengan en la
clula. Al llegar a cierto nivel, aumenta la seal, acta como prooxidante y despus de
esto empieza recin a actuar como scavenger.

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

La inyeccin de estas protenas en un conejo produce exactamente lo mismo que las
protenas de acetaldehdo transformadas por el aducto. El aducto de hemoglobina de
hidroxietil radical se reconoce diferencialmente de la hemoglobina control; sin
embargo, los ttulos son ms bajos y este tipo de aducto es bastante difcil de trabajar.
De varios conejos tratados, slo algunos van a dar este tipo de reactividad.

4.- Hbridos de acetaldehdo y MDA

El MDA se une con acetaldehdo en cierta concentracin y, en conjunto con una

protena, forma aductos cclicos y aductos de estructura abierta. Cuando un animal se
trata con este tipo de aductos y posteriormente se prueba con hemoglobina tratada
con los mismos aductos, stos se reconocen. Cuando la hemoglobina se trata slo con
acetaldehdo tambin hay un reconocimiento parcial, lo que quiere decir que hay una
reactividad cruzada entre estos tipos de aductos. Lo anterior no es raro, porque el
acetaldehdo est presente en la protena que se inmuniz.

En un estudio clnico realizado en 23 alcohlicos sin dao heptico reunidos en una

unidad de tratamiento de dependencia del alcohol versus 18 controles que declararon
ser abstemios por razones religiosas y que tenan valores normales de transaminasas
y GGT, mediante el aducto hbrido se encontr un anticuerpo que reconoca una
protena de 30 kilodalton, ubicada en la membrana de los glbulos rojos de los
pacientes alcohlicos. Estos anticuerpos estaban presentes en 87 % de los alcohlicos
(20 de los 23) y en 0% de los controles. En estos ltimos no se encontraron
anticuerpos contra estos aductos, ni reconocieron estas mismas protenas los
anticuerpos contra acetaldehdo o hidroxietil radical. Entonces, hay una diferencia
potencial en los aductos de este tipo.

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

En otro estudio se evaluaron los anticuerpos en el suero de 17 pacientes obesos,
mediante protenas tratadas in vitro con la modificacin molecular. Como resultado, los
pacientes con esteatohepatitis no alcohlica reconocieron esta protena con el hbrido,
menos la protena de control, que fue sustrada. Tambin reconocieron a los pacientes
que tienen anticuerpos capaces de reconocer las protenas transformadas por
acetaldehdo.

En conclusin, los pacientes obesos con esteatohepatitis no alcohlica pueden

desarrollar aductos hbridos de acetaldehdo y MDA, y los pacientes obesos pueden
desarrollar anticuerpos antiacetaldehdo y antiacetaldehdo-MDA. La presencia de
aductos y anticuerpos podra tener algn papel en la patogenia de la esteatohepatitis
no alcohlica.

Respuesta del sistema inmune

El sistema inmunolgico acta como sistema de defensa del organismo, protegindolo

de los xenobiticos, agentes infecciosos (virus, bacterias) y clulas neoplsicas que
dan lugar a tejido canceroso. La exposicin a sustancias peligrosas causa efectos
adversos sobre el sistema inmune. Estas sustancias pueden ser inmunosupresoras,
que debilitan los mecanismos de defensa natural del organismo, o pueden hacer que
el sistema inmune pierda la capacidad de controlar la proliferacin celular, causando la
leucemia o linfoma.
Otra respuesta importante del sistema inmune es la alergia o hipersensibilidad. Ello
ocurre cuando el sistema inmune acta de forma exagerada frente a un agente
extrao o su metabolito, causando la autodestruccin. Entre los xenobiticos que

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

pueden causar estas alteraciones se encuentran el berilio, cromo, niquel,
formaldehido, pesticidas, resinas y plsticos.
Carcinognesis qumica en humanos

A) Causas y grado de mortalidad de cnceres humanos

Se estima, mediante estudios epidemiolgicos, que entre un 35-80% de
los cnceres estn asociados con el medio ambiente en que vivimos o
trabajamos. Las migraciones de poblaciones junto con la diferente
incidencia del cncer entre comunidades ha dado mucha informacin
sobre el papel del medio ambiente en la incidencia del cncer.

Factores implicados en la etiloga del cncer humano

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

Test de genotoxicidad (Test de AMES)

Se han desarrollado muchos tests de genotoxicidad para medir la capacidad de

mutgenos y carcingenos de producir cambios cuantificables en el genotipo de
clulas procariotas y eucariotas detectables mediante cambios en el fenotipo.
Normalmente se utiliza para ello la mutacin de genes, dao cromosmico, dao y
reparacin del ADN y transformacin celular. Se han desarrollado ensayos en
bacterias, hongos, clulas de roedores, humanas, etc.

La mayora de los ensayos de transformacin en mamferos miden la aparicin de

clulas alteradas morfolgicamente por el agente mutgeno o carcingeno. Suelen
usarse clulas derivadas de fibroblastos de ratn, que son clulas muy uniformes tanto
en su crecimiento como en la morfologa. Sin embargo, si el efecto es mediante un
mecanismo no-genotxico o epigentico, como ocurre con los promotores de tumores,
no se detecta mediante estas tcnicas. Ello se refleja parcialmente en la prdida de
relacin entre mutagnesis y carcinognesis. Hasta el momento se dispone de pocos
ensayos para la identificacin de promotores tumorales, y la mayora de ellos han sido
identificados a travs de experimentos de iniciacin-promocin en roedores.

Una de las pruebas que se utilizan para correlacionar la capacidad carcinognica con
la capacidad de afectar al ADN celular es el denominado TEST de AMES. Se realiza
aadiendo a cultivos de Salmonella typhimurium el carcingeno cuya mutagenicidad
se pretende analizar. Estos cultivos se realizan en un medio carente de histidina, de
forma que solamente crecen bacterias con mutaciones en alguno de los genes que
metabolizan este aminocido. A mayor nmero de colonias mayor capacidad
mutagnica del carcingeno. El mayor problema de este Test es la utilizacin de
bacterias, las cuales no son capaces de activar metablicamente muchos
carcingenos como ocurre en humanos y animales. Ello llev a la adicin al medio de
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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

cultivo de extractos de hgado de animales. As se consigue reproducir, con bastante
fiabilidad, la correlacin observada en los ensayos con animales, ahorrando tiempo y
dinero. (Anexo 5)

Sitios de accin de frmacos seleccionados usados en el tratamiento del cncer

CONCLUSIONES

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

Los mecanismos por los cuales el consumo crnico de alcohol eleva la
concentracin de acetaldehdo y lleva a la formacin de aductos de las
protenas, que pueden producir citotoxicidad o inflamacin, estn claros.
Adems, la endotoxemia y la activacin de las clulas de Kpfer por TNF alfa
producen un aumento del hidroxietil radical, que tambin conduce a la
formacin de aductos.

Tambin cabe sealar que los antioxidantes, en este caso el glutatin, pueden
actuar por ambos caminos, dependiendo de la concentracin que tengan en la
clula. Al llegar a cierto nivel, aumenta la seal, acta como prooxidante y
despus de esto empieza recin a actuar como scavenger.

Por ltimo, los pacientes obesos con esteatohepatitis no alcohlica pueden

desarrollar aductos hbridos de acetaldehdo y MDA, y los pacientes obesos
pueden desarrollar anticuerpos antiacetaldehdo y antiacetaldehdo-MDA. La
presencia de aductos y anticuerpos podra tener algn papel en la patogenia de
la esteatohepatitis no alcohlica.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Joven, J. La respuesta de los humanos a los xenobiticos. Recuperado de:
http://www.crbreus.org/docencia/genomica/notas/6.pdf

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

Moncada, C.(2003) Aductos, mecanismos patgenos. Universidad de Chile.
Recuperado de: http://www.mednet.cl/link.cgi/Medwave/PuestaDia/Cursos/3198

GreenFacts. Aducto. Recuperado de:

http://www.greenfacts.org/es/glosario/abc/aducto.htm

Universidad de Alca. Xenobiticos. Recuperado de :

http://www2.uah.es/tejedor_bio/bioquimica_ambiental/T2_inicio.pdf

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

ANEXOS

MECANISMOS DE TOXICIDAD DE XENOBITICOS

XENOBITICOS

metabolitos estables

metabolitos reactivos
(txico ltimo)

BIOTRANSFORMACION

GSH

uniones
covalentes

DETOXIFICACIN

ELIMINACIN

Mutacin

haptenos

CANCER

RESPUESTA
INMUNE

Ca ++

alteraciones
metablicas

peroxidacin
lipdica

dao celular

NECROSIS

Anexo 1: Mecanismos de toxicidad de xenobiticos

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Xenobioticos y la Formacin de Aductos

Anexo 2: Ejemplos de agentes carcingenos

Anexo 3: Benzopireno formando aductos sobre la guanina

Anexo 4: Compuestos que inducen toxicidad mediante su unin covalente a

molculas biolgicas

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Anexo 5: Test de AMES

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