Faculdade de Cincias Agrrias e Veterinrias de

Jaboticabal Departamento de Microbiologia

UNESP

Esterilizao e Desinfeco
MSc Ana Cludia de Oliveira

Introduo
10 referncia de desinfetante : A Odissia onde
Homero cita o uso do enxofre (800 a.C.)
Ainda hoje utilizado para conservar frutas secas, sucos
e vinhos.
Cidade de Veneza: pioneira em controle sanitrio.
Holands Anton Van Leeuwnhoek (1676): foi um
marco na histria da microbiologia e desinfeco.
Louis Pasteur (1822-1895): desenvolveu o mtodo fsico
denominado pasteurizao.

 Em hospitais esto associadas a uma inadequada

desinfeco de ambientes e artigos mdicos.

De acordo com a OMS, as doenas parasitria, virais e

bacterianas so as principais causas de morte
prematura, 1 cada 3.

 A OMS aponta as principais razes pelas quais

algumas
doenas
infecciosas
no
so
controladas/erradicadas:
Disseminao da pobreza
Crescimento populacional desordenado
Aumento das concentraes urbanas
Movimentos grandes de refugiados
Degradao ambiental
Globalizao das economias
Aumento das viagens internacionais
Resistncia a antibiticos

Nas ltimas duas dcadas, trinta novas e emergentes

infeces tem sido alvo de grande preocupao: do
HIV ao Ebola.
No Brasil calcula-se que 80% dos hospitais no fazem
controle de infeco hospitalar.
As bactrias so os agentes principais das infeces
emergentes de pacientes hospitalares.

Microrganismos podem ser transmitidos de pessoapessoa por qualquer equipamento de uso comum.
Medidas preventivas: lavagem de mos entre os
pacientes e descontaminao do material e rea
utilizados.
Contaminao cruzada: fenmeno de contaminao de
uma pessoa para outra ou de uma pessoa por um
objeto inanimado contaminado.

Controle de microrganismos

Em laboratrios
No lar
Nos hospitais
Na indstria

Mtodos antigos de controle microbiano:

Secagem
Salinizao de alimentos
Cozimento

Esterilizao e desinfeco:
Termos empregados:
Descontaminao: Conjunto de operaes de limpeza, de
desinfeco e/ou esterilizao de superfcies contaminadas
por agentes potencialmente patognicos.
Limpeza: Procedimento usado para remover materiais
estranhos: p, materia orgnica, materia inorgnica e
grande nmero de microrganismos.

 Desinfeco: Destruio dos microrganismos por meios

fsicos e qumicos, na forma vegetativa, sem a destruio
de esporos.
Esterilizao: Processos fsicos ou qumicos utilizados para
eliminar as formas vegetativas e esporuladas de
instrumentos e outros materiais.

Modos de ao dos germicidas:

Desidratao e coagulao
Alquilao
Desnaturao protica
Permeabilidade da parede celular
Oxidao

Desinfeco
Definio:
Conjunto de operaes de natureza fsica ou qumica com
o objetivo de reduzir o nvel de contaminao por
microrganismos nos itens inanimados.
Visa a eliminao de microrganismos na forma vegetativa,
excetuando-se os esporos bacterianos ou suas endotoxinas.

Desinfeco:
Classificao:
Alto nvel: destri todos os microrganismos na forma
vegetativa com exceo de esporos bacterianos. Requer
enxague do material com gua estril e manipulao com
tcnica asseptica.
Mdio nvel ou nvel intermedirio: os agente aplicados
so eficientes para destruir as bactrias vegetativas
(incluindo micobactrias da tuberculose), a maioria dos
vrus e fungos.
Baixo nvel: os agente utilizados apresentam atividade
antibacteriana sobre a maioria das bactias, alguns vrus e
fungos, porm no inativam microrganismos mais
resistentes (micobactria e esporos bacterianos.

NVEL DE DESINFECO:
cl.vegetat
bacilo tub
esporos
fungos
vrus lipdicos
vrus no
lipdicos

ALTO
+
+
+
+
+
+

INTERM
+
+
++
++-

BAIXO
+
++
+-

 Anti-sepsia:
procedimento
atravs
do
qual
microrganismos presentes em tecidos so destrudos aps a
aplicao de agentes antimicrobianos.
Caractersticas de um bom anti-sptico:
Atividade germicida sobre a flora cutnea, sem causar
irritao pele ou mucosas.
No provocar reaes alrgicas ou queimaduras.
Possuir baixo teor de toxicidade.

 Em microbiologia, o critrio de morte de um

microrganismo baseado em uma nica propriedade: a
capacidade de se reproduzir.
Avaliao de um agente microbicida: cultiva-se uma
amostra do material tratado nmero de sobreviventes.
Uma cl. microbiana considerada viva:
Origina uma colnia visvel em gar
Produz crescimento (turvao) em meio lquido
Multiplica-se em hospedeiro animal ou vegetal

Morte exponencial: os microrganismos morrem em uma

relao constante, em um dado perodo de tempo.
Ex.: 1milho de bactrias
O agente microbicida elimina 90% /min.
Padro:
10 min: 100.000
20 min: 10.000
30 min: 1.000
40 min: 100
50 min:10
60 min: 1
O tempo necessrio para destruir as ltimas 9 bactrias o
mesmo que destruiu as primeiras 900.000.

Stios de ao dos agentes antimicrobianos

Principais fatores interferentes e determinantes

Tamanho da populao
microbiana
O sucesso da desinfeco
depende de uma rgida
limpeza prvia.

Intensidade ou concentrao
do agente microbicida

Tempo de exposio

Temperatura

Valor de pH
Dependente do tipo de desinfetante/microrganismo/artigo
submetido.
pH 7 : sensibilizam clulas vegetativas e favorecem a
difuso do agente.
Perxido de hidrognio: independe do valor de pH.
Compostos quaternrios de amnio e clorexidina so mais
efetivos pH >7.
Glutaraldedo: ativo em temperatura ambiente (pH 7,5-8,5),
a medida que a temperatura se aproxima de 700 C a
dependncia em relao ao pH diminui.

Dureza da gua
Os ons clcio e magnsio presentes na gua interagem com
detergentes e outros compostos orgnicos
precipitados
insolveis.
Compostos quaternrios de amnio so marcadamente
afetados.
Umidade relativa
Afeta diretamente a atividade de compostos na forma gasosa
xido de etileno
Perxido de hidrognio
Formaldedo

Caractersticas do microrganismo:
De maneira genrica, a ordem de resistncia ao agente
antimicrobiano :
Esporos bacterianos > Cl. Bacterianas > Fungos > Leveduras
> Vrus

DESINFECO:
CALOR MIDO
FERVURA, VAPOR 750,PASTEURIZAO
750a30M.
CALOR SECO
PASSAR FERRO
LQUIDOS QUMICOS
ALDEDOS, FENLICOS,CLORADOS,PERXIDO
H2
GASES QUMICOS
FORMALDEDO

OUTROS- RADIAO ULTRAVIOLETA

CARACTERSTICAS DE UM
DESINFETANTE IDEAL

AO RPIDA

AMPLO ESPECTRO

ATIVO EM PRESENA DE MATRIA ORGNICA

ATXICO

COMPATVEL COM DIVERSOS TIPOS DE

MATERIAIS

EFEITO RESIDUAL NA SUPERFCIE

CARACTERSTICAS DE UM
DESINFETANTE IDEAL

INODORO OU DE ODOR AGRADVEL

ECONMICO

SOLVEL EM GUA

NO POLUENTE

SER COMPATVEL COM SABES,

DETERGENTES E OUTROS PRODUTOS
QUMICOS

PRODUTO

NVEL DE
TEMPO DE
DESINFECO EXPOSIO

RESTRIES DE
USO

Glutaraldedo
a 2%

ALTO

45 minutos

Materiais porosos
retem o produto

cido
peractico +
peroxido de
hidrognio

ALTO

30 minutos

Danifica metais

Hipoclorito
de sdio a
1%

MDIO

30 minutos

Danifica metais e
mrmore

lcool a 70%

MDIO

Quaternrio
de Amonia

BAIXO

30 segundos Danifica acrlico e

borracha
30 minutos

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FORMALDEDO E VAPOR DE
FORMALDEDO

Monoaldedo que um gs solvel em gua.

Desvantagens principais - menor rapidez de ao

e carcinogenicidade (altas doses de exposio)

Ao: ativo apenas na presena de umidade para

formao do grupo metanol

Exposio mxima no ambiente: 0,1 a 0,5 ppm.

Biodegradabilidade: 1 a dois dias.

Txico

KRAMER A et all. Hyg Med. 1996; 21: 536-557.

MC DONENNELL & RUSSEL D. Clin Microbiol Rev. 1999; 12: 147-179.

VAPOR DE FORMALDEDO

Gerado em mquina prpria a partir de formol a

2%.

Indicao: materiais termosensveis.

Embalagens: papel grau cirrgico.

Indicador biolgico: B. stearothermophillus

HURREL D. J Science Serv Manag. 1987; 41-44.

Temperatura: 50 a 60o.C conforme o ciclo a

temperatura em que oferecido o aparelho
atualmente no pas.

Tempo do ciclo: 3 horas e meia.

Exposio do pessoal: como existe uma fase,

chamada fase lquida, em que o formaldedo
extrado no h exposio.

CLOREXIDINA
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PRODUTOS UTILIZADOS NA
DESINFECO
NOVOS GERMICIDAS
ORTHOPHTALALDEDO desinfetante de alto
nvel com ao semelhante a do glutaraldedo,
porm com menos odor e menor ao corrosiva.
GUA SUPER OXIDADA - desinfetante de alto
nvel menos txico e menos corrosivo, trata-se de
gua super oxidada por reao qumica obtida pela
eletrlise da gua (com titnio e corrente eltrica)

ESTERILIZAO
Definio:

...CONSIDERA-SE ESTERILIZAO O PROCESSO

PELO

QUAL

DESTRUDOS

OS

MICRORGANISMOS

A TAL

SO

PONTO QUE A SUA

PROBABILIDADE DE SOBREVIVNCIA MENOR

QUE 1 PARA 1.OOO.OOO.

fonte: BRUNCH CW, BRUNCH MK - 2000

Esterilizao:
Mtodos utilizados: Depende da natureza do material e
quantidade de microrganismos a serem destrudos.
Agentes esterilizantes:

Calor
Filtrao
Radiao
xido de etileno
Glutaraldedo
Formaldedo

Pr requisitos:
Instrumental efetivamente limpo
Abertura dos instrumentais com articulaes
Tesouras

semi abertas

Escolha do invlucro

protegidas com gazes

ESTERILIZAO
MTODO

FSICO

EQUIPAMENTO /
SOLUO

TEMPERATURA

TEMPO

121C

30 minutos

134C

4 minutos

170C

1 hora

160C

2 horas

Glutaraldedo
(imerso)

ambiente

10 horas

cido peractico +
perxido de hidrognio
(imerso)

ambiente

8 hora

Gravitacional
Vapor
Autoclave
sob
presso
Pr-vcuo
Calor
seco

Lquido
QUMICO

Gasoso

Estufa

xido de etileno
Plasma de perxido
de hidrognio

ASPECTOS QUE INTERFEREM NA ESTERILIZAO

Quantidade de matria orgnica presente

Material com estrutura diferente da original
Artigos diferentes em tamanho e material na mesma
carga
Desenho do material (ranhuras, dobradias)
Locais de difcil acesso e pontos frios

PARMETROS DOS PROCESSOS DE

ESTERILIZAO

Temperatura

Presso

Tempo

Grau de penetrao do agente

esterilizante

Umidade

Concentrao

ESTERILIZAO - INVLUCRO
OBJETIVOS
Permitir a esterilizao do artigo.
Garantir esterilidade do artigo at o momento do uso.
Facilitar a transferncia do contedo com tcnica
assptica.

ESTERILIZAO - INVLUCRO
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ESTERILIZAO - INVLUCRO
TIPO DE INVLUCRO

INDICAO

OBSERVAO

TECIDO DE ALGODO CRU

CALOR MIDO

H dificuldade de monitorizao do
desgaste do tecido. NBR 13456/96

PAPEL GRAU CIRRGICO

CALOR MIDO
XIDO DE ETILENO

Especificao tcnica por meio da

NBR 12946/93

PAPEL CREPADO

CALOR MIDO
XIDO DE ETILENO

Menor resistncia trao (projeto

23.001.04-008 / 98

PAPEL KRAFT

EM DESUSO

Irregularidade e inconstncia na
gramatura.
Pode
apresentar
alquiltiofeno, causa nuseas e
cefalia nos indivduos expostos

FILME TRANSPARENTE

CALOR MIDO
XIDO DE ETILENO

Especificao tcnica por meio da

NBR 13386/95

TYVEC

CALOR MIDO
XIDO DE ETILENO
PLASMA DE PERXIDO DE
HIDROGNIO E RADIAO
GAMA

Alto custo

NO TECIDO

CALOR MIDO
XIDO DE ETILENO
PLASMA DE PERXIDO DE
HIDROGNIO

VALIDAO DO PROCESSO DE
ESTERILIZAO
INDICADOR BIOLGICO
Certifica a eficcia do processo de esterilizao.
Primeira gerao tiras de papel impregnado com
Bacillus Subtillis e Stearothermophillus, o material
encaminhado ao laboratrio para incubao e o resultado
sai em um perodo de 2 a 7 dias.
Segunda gerao ampolas contendo esporos do
Bacillus Stearothermophillus, com leitura final de 48
horas.
Terceira gerao s disponvel para o processo
vapor. A leitura realizada no mximo em 3 horas.

OUTROS MTODOS

Radiao ultravioleta destruio dos cido nuclicos

xido de Etileno alquila e desnatura as protenas

Pasteurizao, gua aquecida a 65 C por 60 min

(enterococcus faecalis, HIV)
Microondas (2,45 Hz) entre 60 seg e 5 min

Altas Temperaturas
O calor mido muito mais eficiente que o calor seco para
destruir os microrganismos.
Calor mido: causa a desnaturao das protenas vitais
como as enzimas.
Calor seco: causa oxidao dos constituintes orgnicos da
clula.

Medidas de susceptibilidade microbianas a altas

temperaturas
Tempo de morte trmica (TMT): o mais curto espao de
tempo requerido para destruir todos os microrganismos de
uma amostra.
Tempo de reduo decimal (valor D): o tempo requerido
para diminuir uma populao microbiana de uma amostra
em 90% tempo exigido para que a curva do tempo de
morte trmica passe ao longo de um ciclo logartmico.
Medidas extremamente importantes na indstria de
alimentos, onde o tempo de processamento timo e a
temperatura devem ser estabelecidos para vrios alimentos
enlatados.

ESTUFA CALOR SECO

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Segundo a distribuio de calor:
1 Por gravidade
2 Mecnica (mais eficiente,distribuio de calor mais uniforme)
EXEMPLOS DE TEMPERATURA E TEMPO NECESSRIO DE
EXPOSIO:

Temperatura

tempo

171o.C

60 minutos

160o.C

120 minutos

149o.C

150 minutos

141o.C

180 minutos

121o.C

12horas

Filtrao
Utilizada para materiais que no podem ser esterilizados
pela autoclavao, como vitaminas e protenas
termossensveis.
Tambm utilizada para separar diferentes tipos de
microrganismos e para coletar amostras microbianas.
Um dos primeiros indcios de que os vrus realmente
existiam foi a observao de que a remoo de bactrias
com um filtro no removia necessariamente a capacidade
produtora de doena.

AUTOCLAVE
Mtodo confivel e de primeira escolha
Modo de ao
esteriliza por termocoagulao
atravs do calor latente

Calor latente a quantidade de calor que uma

substancia pode absorver

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