DEPARTAMENTO CIENCIAS DE LA VIDA Y AGRICULTURA

CARRERA DE INGENIERA AGROPECUARIA

SANTO DOMINGO

Asignatura:

Microbiologa

Estudiante:

Pallasco O. Nelly M.

Nivel:

Tercero

Docente:

Ing. Gustavo Nez J. M.Sc

Prctica:

No. 3

Fecha:

30 de octubre de 2014

Grupo:

Tema:

Informe de Preparacin y dispensacin de medios

de cultivo para hongos y bacterias

Perodo
Octubre 2014 Enero 2015

INTRODUCCION:
El medio de cultivo debe poseer nutrientes y factores de crecimiento
suficientes y estar lejos de algn microorganismo que lo contamine,
teniendo en cuenta que para que estos medios se desarrollen

se

utiliza el AGAR conocido como un elemento solidificante usado

en la preparacin de medios de cultivo.

II

OBJETIVOS:

Objetivo general:
Aprender tcnicas y mtodos de preparacin y uso de medios de cultivo para el
desarrollo de microorganismos presentes en el ambiente, suelo, aire y agua, para
poderlos estudiar, diferenciar y clasificar
Objetivos especficos:

III

Aprender las tcnicas de dispensacin de medios de cultivo en cajas petri.

Elaborar medios de cultivos para microorganismos
REVISION DE LITERATURA:

MEDIO DE CULTIVO
(Eduardo, French, & Teddy, 1980) Mantienen estas siguientes definiciones:
Son unas soluciones estriles las cuales contienen macro y micronutrientes y
sustancias que les permiten el crecimiento de organismos.
Las condiciones proporcionadas en laboratorio para los medios de cultivo, es
necesario que estos sean sembrados en el medio de cultivo elegido donde van a
crecer y desarrollarse para dar colonias.
Microorganismos
Estos seres estn habitados en la tierra, soportando condiciones altas de pH,
temperatura y la tensin del oxgeno, habitando grandes nichos ecolgicos,
requieren de carbono, oxgeno, nitrgeno, dixido de carbono e hidrgeno para su
desarrollo, pero algunas necesitan de factores de crecimiento como suero, sangre y
extracto de levadura entre otros.
Cultivo
Es en donde crecen los organismos con el nico fin de experimentar con ellos o
usarlos en la industria.

Cultivo puro
Es aquel en donde existe una sola especie de microorganismo que est libre de todo
contaminante.
Agentes solidificante
1. Agar-agar

(Eduardo, French, & Teddy, 1980) Es una gelatina vegetal, derivado de polisacrido
donde

se extrae de las algas por medio del cido sulfrico diluido a una

temperatura de 80 C.
Propiedades
Fuente especificada no vlida. Propiedades del agar son:
Se funde a 80 -100 C. Resiste altas temperaturas de esterilizacin sin
aturdir.

Se cristaliza a 35 50 C.

Obtiene firmeza en medios de cultivos a concentraciones de entre 1,5 a 2,0

%.
Se hidroliza a pH de 2 y pH 9. Su valor nutritivo es nulo y tiene uno que otro
factor de crecimiento.
Tipos de medios de cultivos
Por su consistencia:
1. Lquidos
Fuente especificada no vlida. Estos se usan para incrementar las bacterias,
determinando sus propiedades fisiolgicas y as incrementar las bacterias y
hongos para usarlos en fines experimentales y estudios de crecimiento de
microorganismos. Estos tienen su uso en la preparacin de productos (cidos
orgnicos, antibiticos, etc.).
2. Slidos
Fuente especificada no vlida. Sirven para el

aislamiento de hongos,

bacterias, y para su mantenimiento. Estos son preparados en frascos, placas

Petri y tubos de ensayo.
SEGN SUS PROPIEDADES NUTRITIVAS
A. Carentes de nutrientes
Agua
Usar agua destilada.
Sustancias que no poseen nutrientes son:
Laboratorio
Cao
Destilatorio

 Agar agua (sustancia solida)

Nitrgeno lquido
B. Nutritivas
1. Naturales
Contienen solo material vegetal natural.
2. Semisinteticos complejos
Contiene el 50 % natural y 50 % sustancias qumicas.
3. Sintticos definidos
Son qumicamente determinados. (Eduardo, French, & Teddy, 1980)
IV

MATERIALES Y EQUIPOS:

Equipos
-Estufa de incubacin
-Estufa de esterilizacin
-Cmara de flujo laminar
-Autoclave
-Cocineta elctrica

Materiales
-Pipetas volumetricas - automticas
-Probetas
-Vasos de precipitados
-Erlenmeyer
-Matraces
-Kit de diseccin
-Mechero de alcohol
-Platos petri
-Tubos de ensayo

Reactivos e insumos
-Alcohol antisptico
-Medios de cultivo
V

PROCEDIMIENTO:

1.-Se prepar el medio de cultivo PDA, el cual contiene el alimento necesario para el
desarrollo de microorganismos, se compone de agar, dextrosa y papa, utilizado para
aislar hongos, debido a que priva el desarrollo de las bacterias. (Prez & Jurez,

1997)

Este medio de cultivo se elabor de acuerdo al microorganismo que sea de mucho

inters pero se lo puede variar aadiendo algn compuesto que le ayude al
desarrollo. (Ingraham, 1998)
2.- Se agreg 48 g. de agar patata para 1200 ml y Manitol 32 g. por 200 ml

Foto tomada por: Vera

Cinthya
2.- Se calent el agua destilada a 40 C y se agreg el PDA para aumentar los anti
microbios evitando que crezcan las bacterias en el medio de cultivo, se coloc las
soluciones en la hornilla hasta que el agar y el manitol se disuelva.

Foto tomada por: Vera

Cinthya

3.- Se distribuy en botellas de cristal para

minutos a 15 p.s.i.

esterilizar en la autoclave por 20

Foto tomada por: Vera

Cinthya
4.- Se dej enfriar la solucin para luego ingresar a la cmara de flujo laminar para
lo cual es imprescindible que tenga la luz blanca encendida y se encendi el
mechero para colocar la solucin en la caja petri

esterilizada previamente

procurando que la boca del frasco este cerca del mechero esto sirve para evitar
contaminaciones en el medio.
Se prepararon 60 cajas de Agar patata y 14 de manitol para los medios de cultivo.

Foto tomada por: Vera

Cinthya
VI

RESULTADOS:

Se aprendi a preparar un medio de cultivo para los microorganismos, y adems se

aplicaron las tcnicas necesarias para su manejo, y se practic la forma correcta
para colocar la solucin preparada en la caja petri.
VII

CONCLUSIONES:

Se pudo elaborar estos medios de cultivos de forma fcil, permitiendo ser analizado
debido a su fcil obtencin y reproduccin.

EL elaborar los medios de cultivos es muy eficiente debido a que podemos

aislar el microorganismo que necesitamos analizar.

VIII

RECOMENDACIONES:

Al colocar el PDA en la caja petri es necesario poner las dosis exactas en la caja
para que no se desperdicie.
Al colocar el medio de cultivo dentro de la caja petri realizarlo de la manera como el
tutor lo indique para as evitar algn tipo de contaminacin y no daar el medio de
cultivo.

IX

BIBLIOGRAFIA:

1. Bibliografa
Eduardo, R., French, & Teddy. (1980). Metodos de la investigacion Fotopatologica.
Costa Rica.
Ingraham, J. (1998). Introduccion a la microbiologia. Barcelona, Espaa: Reverte.
Prez, R., & Jurez, A. (1997). Bioqumica de los microorganismos. Barcelona,
Espaa: Reverte.