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Elaborado por:
Ctia Cantante n 17102
Sandra Trindade n 15692
Sara Maridalho n 16911
2004
PREFCIO:
Esta monografia foi elaborada no
mbito da cadeira de
Expor
essa
aprendizagem,
como
forma
de
conhecimento
Tpicos de resumo:
As clulas dendrticas so cruciais na defesa contra patogenes;
Os patogenes invasores so reconhecidos pelos receptores TLR e
outros receptores, tais como as lectinas tipo C expressas na superfcie
das clulas dendriticas;
Contudo, alguns patogenes como o HIV-1 e o Micobacterium
tuberculosis subvertem as funes das DCs para escapar vigilncia
imunitria, alvejando o sinal DC das lectinas tipo C;
Para tal, estes patogenes podem desviar o sinal DC por mecanismos
distintos que implicam uma adaptao do patogene ao sinal DC, o que
pode suportar a sobrevivncia dos patogenes.
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Clulas dendrticas
As clulas dendrticas, assim denominadas devido sua cobertura ser
constituda por longas extenses de membrana semelhante membrana das
dendrites das clulas nervosas, contribuem no desenvolvimento de respostas
imunitrias especficas a um patogene. Actualmente so conhecidas quatro
formas das referidas clulas com origem na medula ssea: clulas Langerhans,
clulas dendrticas intersticiais, clulas mielides e clulas dendrticas linfides.
Cada uma destas, como j mencionado, resulta de clulas estaminais
hematopoiticas, via diferentes caminhos e em diferentes locais (5).
No obstante as suas diferenas, todas elas apresentam elevados nveis
de molculas complexo de histocompatibilidade maior classe II (MHC II) e
membros da famlia B7 co-estimulatrios (B7-1 e B7-2). Como tal, constituem
clulas de apresentao antignica mais potentes do que macrfagos ou at
mesmo clulas B, os quais necessitam de activao prvia de modo a
funcionarem como clulas de apresentao antignica. Assim, as clulas
dendrticas so potentes activadores de clulas T simples, de memria e
efectivas. Contrariamente, macrfagos e clulas B, em descanso, no se
encontram aptas a activar clulas T simples e so pobres activadoras de
clulas T de memria e clulas T efectivas (5).
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Receptores Toll-Like
Cada TLR reconhece componentes patognicos especficos tais como,
lipoprotenas, lipopolissacardeos ou DNA bacteriano. Recebe e passa
informao, atravs de uma cascata de sinais intracelulares, activada pela
interaco patogene-clula dendrtica, deduzindo processos celulares que
levam maturao da clula dendrtica e induo de citoquinas. Estas so
responsveis pela produo de resposta inflamatria e consequente transporte
de macrfagos e neutrfilos aos locais de inflamao (1).
O meio de citoquina no qual as clulas T prontas por antignios se
diferenciam determina o subgrupo que se desenvolve. Especificamente, IL-4
crucial para o desenvolvimento de uma resposta TH2 e IFN, IL-12 e IL-18, so
importantes no que respeita ao desenvolvimento de clulas TH1. Os
macrfagos ou clulas dendrticas activadas por contacto com bactrias ou
parasitas intracelulares, entre outros, correspondem fonte de IL-12
responsvel pela diferenciao de TH1, como previamente referido, da mesma
forma que uma exposio inicial de clulas TH simples (CD4+T) a IL-4, numa
resposta imunitria originar a sua diferenciao em clulas TH2. Apresenta
ainda uma particular importncia, o facto de as citoquinas produzidas, quer por
TH1, quer por TH2 apresentarem dois efeitos caractersticos no que respeita ao
desenvolvimento de subgrupos. Em primeiro lugar promovem o crescimento do
subgrupo que as produz e posteriormente inibem o desenvolvimento e
actividade do outro subgrupo, num processo denominado de cross regulation.
Por exemplo, o IFN inibe preferencialmente a proliferao de subgrupos TH2
enquanto que o IL-4 e IL-10, regulam a secreo de IL-12, uma das principais
citoquinas no que diz respeito diferenciao de TH1, por macrfagos e clulas
dendrticas (5).
A sinalizao do TLR pode ainda resultar no recrutamento e activao
de agentes cruciais na apresentao de antignio s clulas T, tais como,
macrfagos, clulas natural killer e clulas dendrticas (5).
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Lectinas tipo C
Contrariamente aos TLRs, as lectinas tipo C reconhecem carbohidratos
especficos presentes nos componentes da parede celular dos patogenes e
incorporam-nos para degradao em compartimentos lisossomais para realar
o processamento antignico e apresentao por clulas dendrticas (5). No caso
das clulas dendrticas que apresentam complexo de histocompatibilidade
maior classe II (MHC tipo II), o fragmento antignico e o referido complexo
formam uma estrutura na superfcie das mesmas que pode ser reconhecida por
clulas T (CD4+T) nos ndulos linfticos de modo a que a produo de clulas
capazes de reconhecer o antignio em questo se inicie. No que respeita a
clulas dendrticas que apresentam complexo de histocompatibilidade maior
classe I, estes correspondem a alvos para inspeccionar clulas T (CD8+T) e,
caso estejam reactivas, as clulas que transportam o antignio sero
destrudas. As lectinas tipo C, reconhecem tambm carbohidratos em
glicoprotenas de modo a permitir tolerncia a antignios e mediar processos
celulares tais como sinalizao e adeso celular e migrao (2).
A ligao das lectinas tipo C ao patogene, depende do clcio, existindo
dois locais de ligao de clcio num loop responsvel por uma salincia
constatvel na superfcie proteica. Um destes locais de ligao essencial
para a conformao do domnio de reconhecimento de carbohidrato,
posteriormente referido, enquanto que o outro essencial no que respeita
coordenao directa das estruturas de carbohidratos. Quatro aminocidos
interagem com o clcio neste local e determinam o reconhecimento de
estruturas carbohidratadas especficas (1). A razo pela qual se designam de
lectinas tipo C est tambm relacionada com o clcio, pois, como referido,
apresentam um domnio de reconhecimento de carbohidratos dependente do
clcio (2).
At actualidade, tm sido descritas imensas lectinas tipo C, como um
exemplo o DC-SIGN. Este encontra-se envolvido na captura de diferentes
patogenes e frequentemente co-expresso com o receptor de manose. A sua
expresso maioritariamente induzida por IL-4 (apresenta uma expresso
condutora preferencial de clulas TH2 comparativamente com o receptor de
manose). O domnio de reconhecimento de carbohidrato, presente no DC-SIGN, separado da regio transmembranar por aquilo a que se designa de
domnio neck. Este ltimo formado por sete a oito sequncias repetidas em
tandem que afectam a formao de oligomeros e consequentemente
influenciam a especificidade para o carbohidrato. Esta oligomerizao dos
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Figura 4 - Modelo do monmero da gp120 do HIV1 baseado em estrutura atmica (adaptado de (4)).
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Figura 6 - Ligao do HIV-1 aos receptores e co-receptores das clulas T (adaptado de (10)).
Pensa-se que o HIV se liga superfcie das clulas dendrticas, mas que no
as infecta. Estas migram e carregam o vrus para os ndulos linfticos, para onde
transferido e infecta as clulas T CD4+ activadas. Os macrfagos CD4+ tambm
podem ser infectados, mas so encontrados com pouca frequncia no sangue e
ndulos linfticos. Embora as clulas T CD4+ sejam o alvo principal, existem outras
clulas que no expressam as protenas CD4 que tambm podem ser infectadas, o
que sugere que o vrus pode usar diferentes receptores moleculares. O HIV tambm
pode infectar clulas T CD4+ em repouso, devido ao seu DNA proviral poder ser
transportado para o ncleo atravs de protenas virais associadas que carregam
sinais de localizao nuclear (4).
Durante a infeco inicial/primria do HIV, as clulas T CD4+ especficas para
o vrus so estimuladas pelos antignios virais para proliferar. Como o vrus infecta
e se replica nas clulas CD4+, estas so preferencialmente destrudas. Ao mesmo
tempo, d-se uma expanso dramtica das clulas T CD8+ especficas do vrus,
que coincide com a supresso da virmia. Contudo, a proliferao das clulas T
CD8+ dependente da ajuda das clulas T CD4+, existindo um balano entre a
destruio e a sobrevivncia das clulas T CD4+ que ajuda a produzir as clulas
CD8+ especficas do vrus e activadas (4).
Disfuno imune: A forma como o HIV mata as clulas alvo ainda no bem
compreendida. Existem vrios mecanismos diferentes que tm sido propostos, que
incluem a acumulao de RNA e no integrao de DNA nas clulas do citoplasma
e a ligao intracelular do CD4 s gp120. As clulas infectadas podem-se ligar a
clulas no infectadas atravs das conexes gp120-CD4 com clulas gigantes
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b)
c)
d)
e)
e)
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Figura 9 - a) O sinal DC expresso pelas clulas dendrticas imaturas nos tecidos mucosos
e ndulos linfticos e pelas percursoras das clulas dendrticas no sangue. O HIV-1 capturado pelo
sinal DC que expresso pelas percursoras das clulas dendrticas, no sangue, aps a infeco ou
pelas clulas dendrticas imaturas nos locais de entrada das mucosas, durante a transmisso sexual.
O sinal DC liga-se ao HIV-1 e o conjunto, penetra na clula e escapa internalizao em
compartimentos lisossomais e reciclado, voltando superfcie celular. Escondendo-se
intracelularmente nas clulas dendrticas, o HIV-1 fica protegido durante a migrao para os tecidos
linfticos. Quando chega aos tecidos linfticos, as clulas dendrticas transmitem o HIV-1 s clulas
T CD4+ em trans, o que resulta na produtividade da infeco das mesmas. b) As elevadas
concentraes de HIV-1, permitem uma infeco das clulas dendrticas, que resulta na produo do
HIV-1 pelas clulas dendrticas, que subsequentemente infectam as clulas T. A incorporao do
HIV-1 pelo sinal DC pode permitir uma infeco em cic das clulas dendrticas, pela apresentao do
vrus infeccioso aos CD4 e co-receptores que proporcionam uma infeco eficiente das clulas
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Consideraes finais:
Alguns estudos recentes mostram, claramente, que o sinal DC expresso
pelas clulas dendrticas um receptor de patogenes, que pode estar
envolvido na disseminao e imunossupresso de vrios patogenes
infecciosos. Embora funcione de forma semelhante das lectinas tipo C, actua
como um receptor de antignios para antignios alvo em compartimentos
lisossomais para a apresentao s clulas T, os patogenes virais parecem
alvejar o sinal DC para que ocorra a sua transmisso, enquanto que os no
virais, tais como as micobactrias, modelam a activao imunitria induzida
pelas clulas dendrticas, atravs do sinal DC (1).
No caso dos patogenes virais, um dos exemplos estudados o do HIV1, com o qual as clulas dendrticas imaturas so das primeiras clulas a
interagir nos locais de infeco, capturando-o nos locais de entrada e
transportando-o para os tecidos linfides, nos quais a sua ligao
eficientemente transmitida s clulas T CD4. O sinal DC o responsvel pela
captura do HIV-1, atravs da grande afinidade interactiva que tem com as
gp120 do envelope do vrus. O sinal DC reala tambm a infeco das clulas
T, sendo a sua presena crucial para uma infeco precoce rpida e eficiente
das mesmas, onde os nveis de HIV-1 so baixos. A funo do sinal DC na
infeco por HIV-1, tem sido, maioritariamente, baseada em modelos in vitro,
mas os modelos de primatas podem tambm ser usados para decifrar o
mecanismo do sinal DC na transmisso e patogenicidade da infeco com
vrus da imunodeficincia, para estudos in vivo. O HIV-1 ligado ao sinal DC
esconde-se nas clulas dendrticas, perto da membrana celular, sem ser
degradado, sendo incorporado, aps ligao, em organelos lisossomais no
cidos. Esta incorporao fundamental para o aumento da infeco das
clulas T mediada pelo sinal DC, fazendo com que as partculas de HIV-1
ligadas ao sinal DC, se mantenham estveis e retenham a sua infecciosidade
por perodos de tempo prolongados. Alm do sinal DC, as lectinas tipo C e os
proteoglicanos, funcionam tambm como receptores em trans do HIV-1 (1).
Concluindo, a observao inicial de que o HIV-1 alveja o sinal DC para a
disseminao do vrus, parece representar um mecanismo mais geral, utilizado
por outros vrus e possivelmente outros patogenes no virais. Muitos estudos
indicam que o sinal DC pode ser um alvo universal para estratgias designadas
para combater infeces, tais como as do HIV-1, assim como as infeces
provocadas por outros patogenes.
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Trabalhos futuros:
Experincias futuras iro determinar o mecanismo molecular atravs do
qual o HIV-1 e outros vrus, so capturados e se escondem em clulas
dendrticas, escapando maquinaria de processamento e subsequente
activao imunitria. No caso particular do HIV-1, experincias futuras podem
determinar o mecanismo molecular atravs do qual o sinal DC aumenta a
infeco das clulas T e elucidar quando que a diversidade na
multimerizao e organizao da membrana do sinal DC instrumental para a
sua funo como receptor em trans para o HIV-1. Estudos futuros tambm so
necessrios para dissecar o mecanismo atravs do qual os patogenes no
virais alvejam o sinal DC, por exemplo, atravs do produto micobacteriano
ManLAM, que induz o seu efeito imunossupressivo nas clulas dendrticas e a
forma como deslocam o balano entre a sinalizao dos TLRs e lectinas tipo C.
As propriedades de sinalizao do sinal DC que resultam na inibio da
sinalizao intracelular de TLRs, tambm merecem estudos, pois ser
importante compreender que outras lectinas tipo C podem proceder neste
sentido. Permanece tambm sem resposta, em adio ao HIV-1, quais os
outros vrus que suprimem as funes das clulas dendrticas, alvejando o sinal
DC. O conjunto imunossupressivo que caracteriza as interaces dos CMV e
HIV-1 indica que, possivelmente, exista um mecanismo imuno-modelado. De
facto, a perda de glicoprotenas do envelope que so codificadas pelos vrus,
deve reflectir a secreo de ManLAM e deve interferir com funes das clulas
dendrticas espectadoras. Contrariamente, outros tipos de patogenes devem
ser capturados pelo sinal DC para o processamento e apresentao de
antignios, o que, deste modo, facilita uma resposta imunitria contra estes
patogenes. Um rato homlogo das funes do sinal DC in vivo como um
receptor de patogenes para antignios nascidos no sangue e futuras
investigaes sobre a funo do sinal DC no rato homlogo, sero importantes
na determinao da sua importncia in vivo (1).
O facto de outras lectinas tipo C poderem reconhecer patogenes
semelhantes ao sinal DC e poderem funcionar como receptores em trans, abre
uma nova rea de pesquisa sobre como que os diferentes subtipos de clulas
dendrticas in vitro e in vivo, expressam diferentes tipos de receptores de
lectinas tipo C e de TLRs que reconhecem e lidam com diferentes patogenes.
provvel que a expresso das vrias lectinas tipo C por parte dos subtipos de
clulas dendrticas, esteja envolvida na captura de uma gama de diferentes
antignios e, atravs de diferentes vias de sinalizao, as clulas T induzidas
pelas clulas dendrticas, devem predispor-se para responder a tipos TH1 ou
TH2. Ser extremamente importante, para identificar a especificidade do
carbohidrato que cada tipo de lectina tipo C expressa atravs das clulas
dendrticas e para compreender como que as glicosilaes diferenciais de
patogenes, devem efectuar alvos para os subtipos de clulas dendrticas in vivo
e conduzir eliminao ou sobrevivncia de patogenes. De forma similar, as
glicosilaes diferenciais especficas das clulas e tecidos, devem tambm ser
importantes para o controlo do reconhecimento do prprio antignio, migrao
de clulas dendrticas e adeso celular (1).
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Referncias bibliogrficas:
1) Kooyk, Y. & Geijtenbeek, T., 2003, DC-SINAL: Escape Mechanism for
Pathogens, Nature Reviews/ Immunology, Vol.3/September, 697-709;
2) Wagner, E. & Hewlett, M., 2004, Basic Virology, Blackwell Science Inc., 2nd
edition, UK, 440pp;
3) Roit, I., Brostoff, J. & Male, D., 2001, Immunology, Mosby, 6th edition,
London, 480 pp.
4) Dimmock, N., Easton, A. & Leppard, K., 2001, Introduction to Modern
Virology, Backwell Science Ltd, 5th edition, UK, 449 pp;
5) Goldsby, R. A., Thomas, J. K., Osborne, B. A., Kuby, J.; Immunology,
fifth edition; W. H. Freeman and Company, New York, 2003.
6) www.luc.edu/depts/biology/hiv.htm;
7) www.the scientist.com;
8) www.roche-diagnostics.it/salute(HIV/HIV.html;
9) www.icb.ufmgb.br/vIcd/grupo3.htm;
10) www.roche.com/pages/facets/16/fusinh.htm;
11) www.cwrv.edu/med/biochemistry/faculty/cho.html;
12) www.lions.odu.edu/~kkiburn/bio405-sample1/sld012.htm.
13)www.freeman.com.
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