Mutao e Reparao

do DNA
Profa. Karlla Greick Batista Dias Penna
karllagreick@yahoo.com.br

Definio

Sntese de Protena

Modificao sbita no conjunto gnico de um organismo

Mutao pode alterar

a sntese protica

Mutao: Bom ou Ruim? Variabilidade Gentica

Mutaes
Classificao Geral

Mutao Cromossmica: Nmero ou Estrutura

Mutaes Gnicas: Genes individuais

Processo Evolutivo

A muta
mutao a fonte b
bsica de toda variabilidade
gentica, fornecendo a mat
gen
matriaria-prima para a evolu
evoluo

Classificao das Mutaes

Mutao como fonte de variabilidade

1. Recombinao: Rearranjos  Novas combinaes
2. Seleo Natural  Preserva as combinaes mais adaptadas
3. Ausncia de Mutao  Genes com apenas uma forma
1

Quanto Natureza 1. Mutao espontnea

2. Mutao induzida

Quanto ao Tipo de Clula 1. Mutao germinativa

2. Mutao somtica

Mutao em Nvel Molecular

Mutao em Nvel Molecular

Modificaes Tautomricas

Quanto Alterao de Bases

Transverso
Transio

AT
CG

TA
GC

AT

TA

CG

GC

Sem Efeito Ps-troca

1. Mutao silenciosa: Troca de base
sem troca de aminocido
2. Mutao Neutra: Troca de base,
troca de aminocido, sem afetar a
atividade de protena

Mutao em Nvel Molecular

Mutao em Nvel Molecular

Alterao do Quadro de Leitura (Frameshift)

Deleo

Mutao em Nvel Molecular

Insero

Mutao por Radiao

Tipo de Radiao

Ionizante: Raios-X, Gama e Csmicos

No-Ionizante: Luz Ultravioleta

Mutao em Nvel Molecular

Taxa espontnea: 10-5 a 10-6 evento/locus/gerao

Pontos quentes (Hotspots): Stios + propcios a mutao

Mutao por Radiao

Radiao Ionizante

originam rupturas numa ou nas duas

cadeias de DNA

Mutao por Radiao

Mutao por Radiao

Radiao No-Ionizante

Mutao induzida quimicamente

Luz Ultravioleta: Dmeros de Pirimidina

Alteram a dupla hlice
impedindo a replicao do DNA

Erros durante reparao

Anlogos de bases nitrogenadas

Ex: 5-BrU  anloga da Timina

cido nitroso (desamina as bases)

Adenina transforma em hipoxantina (pareia com C)

Citosina transforma em uracila (pareia com A)

Guanina transforma em xantina (pareia com C)

Hidroxilamina (reage com C)

Acridinas (insere ou deleta uma ou mais bases)

Alquilantes (transfere grupamentos metila (-CH3 ) ou eltila (CH2-CH3) principalmente na G)

Mutao Espontnea
A maioria das mutaes ocorre por mecanismos endgenos, por
hidrlise espontnea, erros durante a replicao e recombinao ou
ainda por exposio a metablitos txicos como as espcies reativas
de oxignio.

Alteraes espontneas mais freqentes:

depurinao e desaminao

Reparao do DNA

Continuamente ocorrem leses acidentais no DNA, sendo os

processos de reparo de DNA responsveis pela manuteno da
estabilidade da informao gentica ao longo das geraes.
 As leses podem ser causadas por fatores ambientais e acidentes
metablicos.

Reparao do DNA
Tipos de Reparao do DNA

Reparao do DNA
Reparao por Fotorreatividade Enzimtica

Fotorreativao

1. Reparao por fotorreatividade enzimtica

1. Fotoliase reconhece e se liga ao dmero

2. Absoro de luz  Converso em monmeros

2. Reparao de bases alteradas

3. Reparao por exciso de base
4. Reparao por exciso de nucleotdeos
5. Reparao de bases malpareadas
6. Sistema de reparao por desvio

Reparao do DNA

Reparao do DNA
Reparao por Exciso de Base

Reparao de Bases Alteradas

Ao de enzimas especficas: O6-Metilguanina-metiltransferase

Remove a metila

Uracila-DNA-Glicosilase hidrolisa a
ligao glicosdica e retira a base

Ao da DNA-Polimerase I que insere
a base certa

DNA-Ligase que restaura a fita

CH3-Cys-Enzima

Reparao do DNA
Reparao por Exciso de Base

Reparao do DNA
Reparao por Exciso de Nucleotdeo (REN)
1. Reconhecimento da leso (UvrA + UvrA + UvrB = A2B)
2. Inciso da fita lesada em ambos os lados da leso (UvrB+UvrC = UvrBC)
3. Exciso do seguimento contendo a leso (UvrD)
4. Sntese do novo seguimento de DNA e Ligao (DNAPol I + DNA Ligase)

Reparao do DNA

Reparao do DNA

REN: Sistema Uvr (E. coli)

Reparao de Bases Malpareadas

DNA-Polimerase: 1 erro  108 nt (Reparo: 1 erro  1010 ou 1011 nt)

Remover bases malpareadas: Qual das bases a errada?

ATP
Helicase 5  3

3 (4 a 5nt)
5 (8nt)

Exciso de 12 a 13nt
UvrD

Sinalizao por metilao

de stios especficos

Reparao do DNA

Reparao do DNA

Reparao de Bases Malpareadas: Sistema Mut

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

MutS  pb malpareado
Reconhece stio do erro
MutL se liga a MutS
Deslizamento at GATC (ATP)
MutH  Reconhece GATC
Cliva: GATC at o malpareamento
Remoo da fita clivada (SSB)
Sntese e ligao da nova fita

Sistema de Reparao por desvio

No remove leses mas utiliza o processo de

replicao ou recombinao.
 Reparo por recombinao ps-replicao
 Reparo pelo sistema SOS
 Reparo sujeito a erro

Reparao do DNA
Reparo por Recombinao

Reparao do DNA
Reparo pelo sistema SOS
Mais de 15 genes esto envolvidos nesse processo (genes SOS), cuja
expresso induzida por um defeito severo a ponto de impedir a sntese
de DNA. Estes genes do origem a protenas de reparo como, por
exemplo, endonucleases de exciso, helicases,entre outras.

Na E. coli, de fundamental importncia a protena RecA, pois s ela

capaz de parear duas molculas de DNA homlogas e catalisar as reaes de
trocas de fitas, permitindo reparao e recuperao de leses.

Reparao do DNA
Reparo sujeito a erro
Qualquer uma das quatro bases inserida no local lesado, a fim de
garantir a continuidade do processo de replicao. Devido ao fato de no
haver a informao precisa (molde), o prprio mecanismo de reparo
acaba sendo o causador de uma mutao, pois a chance de introduzir
uma base incorreta na cadeia grande. De qualquer forma, para a clula
prefervel incorporar uma base incorreta e permitir que a replicao
continue, do que no replicar mais.
Na E. coli, esse sistema de reparao envolve dois genes principais:
umuC e umuD. Esses genes so tambm genes SOS e, portanto, seus
produtos esto em abundncia somente aps a clula ter o sistema SOS
ativado.

Os dmeros de pirimidinas constituem um exemplo tpico desse tipo de

dano. Quando a forquilha de replicao encontra um dmero, a sntese
pra e s reiniciada a alguma distncia alm do dmero, ficando uma
lacuna no DNA na qual a enzima de recombinao RecA se liga. Essa
ligao ativa em RecA uma atividade enzimtica completamente
independente da recombinao: ela destri o repressor dos genes SOS
(repressor LexA). Dessa maneira, a protena RecA promove reparao
do material gentico de duas formas: por recombinao, com
troca das fitas, e por induo dos genes SOS.

Doenas Causadas por Deficincia de Reparo no Homem

DOENA

SENSIBILIDADE

SUSCETIBILIDADE
AO CNCER

SINTOMAS

ENZIMA
OU
PROCESSO
AFETADO

Xeroderma
pigmentoso

UV, purina
alquilada

Carcinoma de pele

Fotossensibilidade
de pele e olhos

Reparo por
exciso de
Nucleotdeos

Anemia de
Fanconi

Agentes que
fazem
ligao cruzada

Leucemias

Pancitopenia
hipoblstica;
anomalias
congnitas

Reparo de
DNA
cruzado
interfitas

Sndrome de
Bloom

UV

Leucemias

Fotossensibilidade;
mudanas faciais

DNAhelicase
acessria
para
replicao

Tabela modificada de Alberts et al, 2002. Biologia molecular da clula.

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Doenas Causadas por Deficincia de Reparo no Homem

Concluso

Mutao: Alterao do cdigo gentico

Efeito benfico x Efeito malfico

Mutaes cromossmicas numricas/estruturais

Mutaes gnicas (Nvel molecular)

Mecanismos de reparao de erros

Sistemas enzimticos complexos que removem
vrios tipos de erros

Manuteno da integridade do DNA

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