SULFOBACILLUS

THERMOSULFIDOXIDANS
Cristian Guisande Donado
CINDEFI - CONICET

H.R. Watling et al. / Hydrometallurgy 93 (2008) 5765

INTRODUCCIN
Este seminario es una breve recopilacin de informacin acerca del
Sulfobacillus Thermosulfidooxidans.
Esta bacteria fue encontrada en un cultivo de ka muestra Bao 9
(Copahue) en medio MAC 1.8 + Fe(II) (5.58 g/L)
Fue sembr en placas de Petri doble capa agarosa con Fe(II)+S4O6-2
Posteriormente se cultivo por separado en medios MAC 1.8 + Fe(II)
(5.58 g/L) y MAC 3.0 + S4O6-2(3 g/L)
Fue identificada tras la secuenciacin del DNA codificante para el
RNA-16S y la posterior comparacin con la base de datos BLASTN
con un 99% de identidad .

CLASIFICACIN
Dominio

Bacteria

Filo

Firmicutes

Clase

Clostridia

Orden

Clostridiales

Familia

Costridiales Family (XVII Incertae Sedis)

Gnero

Sulfobacillus

Especie

Sulfobacillus thermosulfidooxidans

CARACTERISTICAS
Caracterstica
Type Strain

Descripcin
AT-1, DSM 9293, VKM B-1269

Gram

Positivo

Forma

Bastn

Largo

1-6 m

Dimetro
Colonias en agar +Fe(II)
Existencia
Endosporas

0.6-0.8 m
Redondas, brillantes, inicialmente amarillas luego marrn
rojizo.
En pares o cadenas cortas
Endosporas esfricas o ligeramente ovalada se encuentran
subterminalmente, terminal, o paracentralmente.

CARACTERISTICAS
Caracterstica
pH de crecimiento

Rango
1.5 -5.5

Temperatura de crecimiento

20-60 C

Crecimiento

Descripcin

Optima
1.9-2.4

50-55C

Aerbico Estricto.
Anaerobiosis no ocurre con NO3 Mixotrofico y organogrfico facultativo
Oxida Fe+2, S0, S2O32-, S4O6 2 y sulfuros minerales en
presencia de sustrato orgnico
Crece poco organotroficamente en: EL, CASEINA,
CLUCOSA, SCUROSA, FRUTOSA TREALOSA, MANOSA,
RAFINOSA, GLUTAMATO y GLUTATIONATO REDUCIDO
El crecimiento autotrfico es muy pobre.

MEDIO DE CULTIVO
DSM665. SULFOBACILLUS MEDIUM
Solucin B:

Solucin A:
(NH4)2SO4

3.00 g

FeSO4 7 H2O

44.20 g

KCl

0.10 g

Agua destilada

300.00 ml

K2HPO4

0.50 g

H2SO4, 10 N

1.00 ml

MgSO47 H2O

0.50 g

Esterilizada por filtracin.

Ca(NO3)2

0.01 g

Agua destilada

700.00 ml

Ajustar pH to 2.0 - 2.2 con H2SO4

Solucin C:
Extracto de levadura (1% p/v en agua)
20.00 ml

LOCALIZACIN NATURAL
Menas mierales

Habitat
Sitios Acidos Sulfurosos
fumarolas, lugares volcanicos
pasivos mineros, drenajes accidos,

Pirita
Arsenopirita
Sulfuros de Cobre
Sulfuro de Zinc

Distribucin Geogrfica
Inglaterra Europa Escandinavia Islandia
Norte America
Sudamerica
Russia Eastern Europe (DSM 9293,Kazakhstan)
India Pakistan
Asia Pacifico

MORFOLOGIAS

Bulaev, A. G. et al. Polymorphism of Sulfobacillus thermosulfidooxidans strains dominating in processes of high-temperature oxidation of gold-arsenic
concentrate. Microbiology 80, 326334 (2011).

MORFOLOGIA

Bulaev, A. G. et al. Polymorphism of Sulfobacillus thermosulfidooxidans strains dominating in processes of high-temperature oxidation of gold-arsenic
concentrate. Microbiology 80, 326334 (2011).

ENSAYOS REALIZADOS Y
APLICACIONES BIOTECNOLOGICAS

CINTICA DE OXIDACON DE HIERRO (II)

[Fe(II)]initial (g L1 )
2
5
10
15
20

Specic growth rate

(h1 )
0.197 0.012
0.220 0.025
0.248 0.096
0.247 0.139
0.250 0.084

Bio-oxidation rate
(g L1 h1 )
0.292 0.034
0.480 0.056
0.697 0.140
0.643 0.058
0.654 0.067

Yield (
E9 cells g1 )
4.177 0.960
7.616 1.197
4.206 0.522
3.197 0.993
3.909 0.534

Medio de Cultivo: 0.4 g L1 (NH4)2SO4, 0.8gL1 MgSO47H2O,

0.4gL1 K2HPO4,+ 10gL1 of Fe(II) + 0.1 g L1 EL
Condiciones: Bioreactor de 2L, at 50 C 31.43 rad s1
pH= 1.6 (constante, correjido con H2S04 y NaOH)
Pina, P. S., Oliveira, V. a., Cruz, F. L. S. & Leo, V. a. Kinetics of ferrous iron oxidation by Sulfobacillus thermosulfidooxidans. Biochem. Eng. J. 51, 194197 (2010).

RESISTENCIA A METALES
Concentraciones de metales en solucin ms altas en las que se observo
crecimiento bacetriano crecimiento bacteriano en test de toleracian a metales.
Tolerancia metal (g/L)
Aislado

Fe

Cu

Zn

Ni

Co

N1-45-01

2.5a

15

35

S. Thermosufidooxidans DSM 9293T

4.4

19

13

1.5

N19-45-01

4.4

50

50

<5

N45-45-02

2.5a

35

10

10

N1-45-02

3.2a

35

13

N45-45-01

2.8a

20

10

N19-50-01

2.5a

50

35

10

<5

N22-45-01

4.4

50

50

<5

<5

a Concentracion maxima de la soluciones en pruebas de biolixiviacin

Watkin, E. L. J. et al. Metals tolerance in moderately thermophilic isolates from a spent copper sulfide heap, closely related to Acidithiobacillus caldus,
Acidimicrobium ferrooxidans and Sulfobacillus thermosulfidooxidans. J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 36, 461465 (2009).

RESISTENCIA A METALES
Elemento (g/L)
Cu

Ni

Co

Zn

As(V)

S. acidophilus

b 0.3

0.6 (1.5)

2.9 (5.9)

1.6 (3.3)

1.9 (3.7)

S. thermosuldooxidans

19 (22)

8.8 (11)

1.5 (2.9)

13 (16)

3.7 (7.5)

S. thermotolerans

1.6 (3.2)

0.6 (1.5)

b 0.3

1.6 (3.2)

3.7 (7.5)

S. sibiricus

19 (22)

0.6 (1.5)

0.3 (0.6)

3.3 (6.5)

7.5 (11)

Los genes de resistencia al arsnico arsA, y arsB fueron

identificados en el DNA cromosmico.
Watling, H. R., Perrot, F. a. & Shiers, D. W. Comparison of selected characteristics of Sulfobacillus species and review of their occurrence in acidic and
bioleaching environments. Hydrometallurgy 93, 5765 (2008).
van der Merwe, J. a., Deane, S. M. & Rawlings, D. E. The chromosomal arsenic resistance genes of Sulfobacillus thermosulfidooxidans. Hydrometallurgy 104, 477
482 (2010).

BIOLIXIVIACIN DE CALCOPIRITA
Lixiviacin de Calcopirita a 50C
Medio de Cultivo: DSM 150

Potencial redox
pH
Fe(II),
Cu , and Fe(TOT)(filtrado)

Stott, M. & Sutton, D. Comparative leaching of chalcopyrite by selected acidophilic bacteria and archaea. Geomicrobiol. 3741 (2003).
doi:10.1080/01490450390206692

BIOLIXIVIACIN DE PIROTITA
Efectos del ajuste de pH (H2SO4 4M): Extraccin Total 65.28% contra 23.8%

Medio 9K: 3.0 g/L (NH4)2SO4, 0.1 g/L, KCl, 0.5 g/L K2HPO4, 0.5 g/L MgSO47H2O, 0.01 g/L Ca(NO3)2.
S(10g/K) + EL (0.02%; pH=1.6 Condiciones: 52C, 160rad/minc
Ni, Z., Gu, G., Yang, H. & Qiu, G. Bioleaching of pyrrhotite by Sulfobacillus thermosulfidooxidans. J. Cent. South Univ. 21, 26382644 (2014).

BIOLIXIVIACIN DE PIROTITA
Efectos de la concentracin de pulpa: altas concentraciones inhiben el proceso

Medio 9K: 3.0 g/L (NH4)2SO4, 0.1 g/L, KCl, 0.5 g/L K2HPO4, 0.5 g/L MgSO47H2O, 0.01 g/L Ca(NO3)2.
S(10g/K) + EL (0.02%; pH=1.6 Condiciones: 52C, 160rad/minc
Ni, Z., Gu, G., Yang, H. & Qiu, G. Bioleaching of pyrrhotite by Sulfobacillus thermosulfidooxidans. J. Cent. South Univ. 21, 26382644 (2014).

BIBLIOGRAFIA/REFERENCIAS
Milton S da Costa, Fred A Rainey, Luciana Albuquerque. "Chapter: Genus Sulfobacillus". IN: Paul De Vos, George M Garrity, Doroty
Jones, Noel R Krieg, Wolfgang Ludwig, Fred A Rainey, Karl-Heinz Schleifer, William B Whitman. Bergeys Manual of Systematic
Bacteriology Vol. 3, 2nd ed, New York, Springer, 2009: pages Vol. 3, 1181-1184;
Donati , Sand. Microbial Procesing of Metal sulfides - New York, Springer,
Catalog of MicrLeibniz-Institut DSMZ - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH
Bulaev, A. G. et al. Polymorphism of Sulfobacillus thermosulfidooxidans strains dominating in processes of high-temperature
oxidation of gold-arsenic concentrate. Microbiology 80, 326334 (2011).
Ni, Z., Gu, G., Yang, H. & Qiu, G. Bioleaching of pyrrhotite by Sulfobacillus thermosulfidooxidans. J. Cent. South Univ. 21, 26382644
(2014).
Stott, M. & Sutton, D. Comparative leaching of chalcopyrite by selected acidophilic bacteria and archaea. Geomicrobiol. 3741
(2003). doi:10.1080/01490450390206692
Pina, P. S., Oliveira, V. a., Cruz, F. L. S. & Leo, V. a. Kinetics of ferrous iron oxidation by Sulfobacillus thermosulfidooxidans. Biochem.
Eng. J. 51, 194197 (2010).
van der Merwe, J. a., Deane, S. M. & Rawlings, D. E. The chromosomal arsenic resistance genes of Sulfobacillus thermosulfidooxidans.
Hydrometallurgy 104, 477482 (2010).
Watkin, E. L. J. et al. Metals tolerance in moderately thermophilic isolates from a spent copper sulfide heap, closely related to
Acidithiobacillus caldus, Acidimicrobium ferrooxidans and Sulfobacillus thermosulfidooxidans. J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 36, 461
465 (2009).
Watling, H. R., Perrot, F. a. & Shiers, D. W. Comparison of selected characteristics of Sulfobacillus species and review of their
occurrence in acidic and bioleaching environments. Hydrometallurgy 93, 5765 (2008).

MUCHAS GRACIAS!