Mtodo de anlise baseado em medidas de

absoro de radiao eletromagntica.

Determinao de compostos inorgnicos e

orgnicos como, por exemplo:
identificao de princpios de frmacos
determinao da concentrao dos mesmos.

Amostras analisadas podem estar em qualquer

estado fsico.

Espectrofotometria ptica

Comprimento de onda corresponde a luz visvel (VIS)

ou ultra-violeta (UV), faixa entre aproximadamente 180
a 800 nm.

PRINCPIOS GERAIS:

A poro de uma molcula que tem

propriedades que lhe permitem absorver luz
conhecida como cromforo.

A absoro de luz tambm possvel no caso

de ons metlicos de transio enquanto
passam por transies eletrnicas que
envolvem eltrons de camadas d ou f.

Vrios fenmenos podem ocorrer com a

radiao luminosa devido a um material:
Reflexo ou Refrao
Absoro
Transmisso.

Transmitncia = frao da luz incidente em um

comprimento especfico de onda, que passa
por uma amostra de matria.
Absorbncia = Capacidade do material em
absorver radiaes em uma especfica frequncia
de radiao ou de onda.
O comprimento de onda absorvido por uma
certa substncia caracterstico ou depende
da sua estrutura.
DNA e RNA = 260nm
Protenas = 280nm
Clulas bacterianas = 600nm

Lei relaciona a intensidades da radiao incidente e

emergente.
Utilizada para correlacionar com a concentrao do material
presente na soluo.
A radiao incidente deve ser monocromtica
I = I0 10-lC
I0 = intensidade da radiao incidente
I = intensidade transmitida pela amostra
l = comprimento (cm)
= absorbitividade molar (L mol-1 cm-1)
C = concentrao da amostra (mol L-1)

Monocromia = luz produzida por apenas

uma cor, um comprimento de onda

Ex: Soluo de sulfato de cobre (cor azul, absoro nos 600 nm). Vamos ver
em que forma a intensidade da luz (potncia radiante) muda ao atravessar a
soluo dentro de uma cuba de 1 cm de espessura.

instrumento utilizado para medir a intensidade da luz em

funo de um comprimento de onda especfico que
pode transmitir ou absorver a intensidade de luz
monocromtica.

Amostra a ser avaliada deve estar em um recipiente (cubeta)

de quartzo para radiao espectral do UV.
de vidro ou plstico para a regio da luz VIS (boa disperso)
Detectores altamente sensveis para captar a luz transmitida.
Dados obtidos pelo detector enviados para dispositivo
processador de dados, onde ocorre a transformao em
sinal: numrico, grfico.

 Instrumento de feixe simples tem um nico caminho para

que a luz percorra atravs do instrumento.

Instrumento de feixe duplo um dispositivo no qual o feixe original de luz

se divide de tal forma que metade dela passa atravs de uma soluo de
referncia (ou branco), enquanto a outra metade passa pela amostra.

Detector arranjo de diodo

Anlise Qualitativa: dependendo de quanto de luz que a

amostra absorver vai determinar qual a espcie, pois o
espectro caracterstico daquela determinada espcie
qumica (orgnica e inorgnica)
protenas, cidos nuclicos (DNA, RNA, frmacos, ons, etc)

Anlise Quantitativa: dependendo da absorbncia ir

determinar a concentrao da amostra.

A condio especial para qualquer determinao

quantitativa observar a Lei de Beer-Lambert.

Controle do pH, das tcnicas de extrao por solventes, o

ajuste do estado de oxidao, a conservao da
amostra e outros fatores so muito importante.

Por que e para que desenvolver

espectrofotomtricos?
Qual a sua importncia?
1.

2.

3.

mtodos

Preencher as necessidades dos laboratrios de

anlises clnica face o crescente nmero de
anlises.
Aumento do nmero de espcies qumicas a
serem determinadas no sangue como anlise
de rotina.
Alm da necessidade de diminuir o custo
dessas anlises.

Maior velocidade no processamento das anlises.

Maior confiabilidade dos resultados.

Diminuio de contaminaes .

Diminuio na gerao de resduos.

Menor consumo de amostras e reagentes.

Reduo de custos.

Espectroscopia Infravermelha
Princpios
Lei envolvida
Equipamentos
Tcnicas de FTIR (Fourier Transform Infrared) e NIR
(Near infrared) e suas aplicaes.