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Agradecimentos

Agradecimentos:
Fundao Hemocentro de Braslia
Laboratrio Central de Sade Pblica do Estado de Santa Catarina
LACEN/SC
Universidade Federal de Santa Catarina - UFSC
Faculdade de Sade Pblica da Universidade de So Paulo - USP

Agradecimentos Especiais:
Beatriz Mac Dowell Soares
Jos Antnio de Faria Vilaa
e aos servidores da Fundao Hemocentro de Braslia,
pelo apoio incondicional para a execuo deste projeto.

Equipamentos - Utilizao e monitoramento em Unidades Hemoterpicas e Laboratrios de Sade Pblica

Recomendaes de uso

Introduo
A qualidade dos diversos ensaios realizados em laboratrios depende, alm de outros fatores, do bom funcionamento dos instrumentos e equipamentos utilizados. A utilizao constante, o mau uso ou at a no utilizao
temporria de equipamentos fazem com que eles se afastem do seu padro adequado de desempenho.
Assim, compete ao profissional de laboratrio manusear de forma tecnicamente correta os instrumentos ou
equipamentos utilizados na sua rotina de trabalho, cuidar de sua conservao e fazer seu monitoramento.
Este manual apresenta os equipamentos mais utilizados em laboratrios de sade pblica e em unidades
hemoterpicas, alm das tcnicas de manuseio, dos cuidados de conservao recomendados e dos procedimentos
indicados para monitorar esses equipamentos.

Conceitos Bsicos
Calibrao: anteriormente denominado aferio, o procedimento que tem por objetivo verificar, sob
condies especificadas, a relao entre os valores indicados por um instrumento ou equipamento e os valores
correspondentes das grandezas estabelecidas por padres de referncia. feita inicialmente pelo fabricante e periodicamente por assistncia tcnica credenciada. Todo ajuste implica, necessariamente, em nova calibrao
Padro de referncia: material ou sistema de medio capaz de reproduzir valores de uma grandeza, para
servir como referncia.
Monitoramento: conjunto de procedimentos que tm por objetivo criar um histrico de uso de um determinado instrumento ou equipamento. Inclui, dentre outros, registros de calibrao, registros de aquisio e registros
de manuteno.
logia.

Preciso: o grau de concordncia de uma medida quando repetida vrias vezes, seguindo a mesma metodo-

Quais so as recomendaes gerais de instalao de equipamentos?


Utilizar, se possvel, geradores para evitar interrupo das atividades e danos aos equipamentos durante
cortes de energia.
Fazer aterramento da rede eltrica.
Seguir instrues de instalao contidas nos manuais dos equipamentos, os quais devem estar em portugus.
Providenciar, se necessrio, traduo dos manuais.
No usar o mesmo ponto eltrico para mais de um equipamento, evitando sobrecarga e acidentes.
Utilizar, sempre que possvel, um estabilizador de voltagem.
Colar etiquetas para identificao da voltagem em todas as tomadas e no cabo de cada equipamento.
Fazer contrato de assistncia tcnica com empresas especializadas ou manter equipe de manuteno interna qualificada e treinada.

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Quais so as recomendaes gerais de instalao de equipamentos?


Utilizar, se possvel, geradores para evitar interrupo das atividades e danos aos equipamentos durante
cortes de energia.
Fazer aterramento da rede eltrica.
Seguir instrues de instalao contidas nos manuais dos equipamentos, os quais devem estar em portugus.
Providenciar, se necessrio, traduo dos manuais.
No usar o mesmo ponto eltrico para mais de um equipamento, evitando sobrecarga e acidentes.
Utilizar, sempre que possvel, um estabilizador de voltagem.
Colar etiquetas para identificao da voltagem em todas as tomadas e no cabo de cada equipamento.
Fazer contrato de assistncia tcnica com empresas especializadas ou manter equipe de manuteno interna qualificada e treinada.

Quais so as recomendaes gerais para utilizao de equipamentos?


Treinar os tcnicos nos procedimentos de utilizao e de limpeza dos equipamentos.
Manter manual de cada equipamento acessvel para consulta.
Manter equipamentos cobertos, quando fora de uso, evitando tecidos que soltem fibras, pois podem interferir no funcionamento.
Evitar tambm capas plsticas, porque a condensao da umidade nesse material favorece a oxidao e o
crescimento de fungos.
Desligar os equipamentos da corrente eltrica antes dos procedimentos de limpeza.
Desinfetar os equipamentos antes de encaminhar para a manuteno.

Quais os desinfetantes mais indicados para a limpeza de equipamentos?


Devem ser seguidas as orientaes do fornecedor dos equipamentos constantes do manual.
Em alguns casos, para descontaminao, podem ser usados os mesmos desinfetantes indicados para a limpeza das superfcies de trabalho dos laboratrios. No entanto, nas partes metlicas voc deve evitar o uso de substncias corrosivas.
Veja, no Anexo 1, os desinfetantes, suas atribuies para o uso de suas aes e, no Anexo 2, as principais caractersticas e aplicaes desses desinfetantes.

Importante
Para obter calibrao com certificado necessrio que a maioria dos
procedimentos sejam realizados sob condies especiais e por tcnicos
treinados, considerando-se diversas variveis como, por exemplo, temperatura, umidade relativa, presso atmosfrica, alm de clculos matemticos e dados estatsticos.

Como proceder para obter calibrao com certificado?


Para obter calibrao com certificado necessrio que a maioria dos procedimentos sejam realizados sob condies
especiais e por tcnicos treinados, considerando-se diversas variveis como, por exemplo, temperatura, umidade relativa,
presso atmosfrica, alm de clculos matemticos e dados estatsticos.
Esses procedimentos esto descritos em literatura especializada como ISO 8655 que trata de Procedimentos de avaliao de dispositivos volumtricos operados por pisto, ISO 4787, referente Calibrao de material
volumtrico, ABNT NBR ISO/IEC 17025 ou normas tcnicas como a ASTM E77. Informaes sobre essa legislao
voc pode obter ao Instituto Nacional de Metrologia, Normalizao e Qualidade Industrial Inmetro ou junto aos
laboratrios da Rede Brasileira de Calibrao RBC, que so credenciados pelo Inmetro.
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Balanas

Para que so usadas as balanas em laboratrios?


As balanas so equipamentos mecnicos ou eletrnicos utilizados em laboratrios para pesagens de substncias usadas na preparao de soluo de reagente e, tambm, para calibrao de instrumentos volumtricos.
Instrumentos volumtricos so aqueles indicados para medir volumes com preciso. Ex. bales volumtricos e pipetas volumtricas.

Quais as principais caractersticas das balanas?


As balanas apresentam duas caractersticas importantes: capacidade de pesagem e resoluo. A capacidade
de pesagem o limite mximo que o equipamento pode pesar. A resoluo indica o intervalo de leitura de uma
balana, ou seja, que frao de grama ele capaz de indicar (0,1 g, 0,01 g, 0,001 g, 0,0001g ou pesos menores).

Quais os tipos de balanas utilizadas em laboratrios?


As balanas utilizadas so: semianaltica e analtica.
A semianaltica tem capacidade de pesagem que pode chegar a mais de 5.000 g e intervalo de leitura de
0,1g ou 0,01g ou 0,001g, dependendo do modelo da balana. indicado para pesar, por exemplo: 1.000 g, 2.1 g,
3,21 g 9,301g.
A analtica tem capacidade de pesagem de at 200 g e o intervalo de leitura de 0,0001 g. indicado para
pesar, por exemplo: 5,3251 g.
H, ainda, as balanas semimicro, micro e ultramicro, com intervalos de leitura de 0,00001 g, 0,000001 g e
0,0000001 g, respectivamente. A capacidade de pesagem das duas ltimas de cerca de 5 g. So balanas extremamente
sensveis que requerem cuidados especiais na instalao e no manuseio.

Importante
Verifique a capacidade de pesagem e a resolu da balana no manual do fabricante.

Qual o princpio de funcionamento das balanas utilizadas em laboratrio?


As balanas funcionam comparando duas cargas: uma padro (peso ou fora eletromagntica) e outra a substncia a ser pesada.
Nas mecnicas, os pesos podem estar no interior do equipamento e serem adicionados por um boto que
regula a quantidade a ser pesada ou, tambm, estar na parte externa da balana, representado por um brao de
pesagem, acoplado ao prato, ou pesos-padro, no caso da balana com dois pratos.
As balanas eletrnicas utilizam uma fora eletromagntica em substituio aos pesos.

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Figura 1 Balana mecnica com pesos internos

Figura 2 Balana eletrnica

Ao adquirir uma balana, solicite que seja calibrada por um laboratrio da Rede Brasileira de Calibrao (RBC)
ou por empresa credenciada.
As balanas devem ser calibradas no local de instalao.

Como instalar uma balana em laboratrio?


Leia atentamente as instrues do fabricante e siga as recomendaes de instalao.
Escolha um local bem iluminado, afastado do uso de substncias corrosivas, longe de torneiras, livre de
correntes de ar e sem trnsito de pessoas.
Instale uma bancada de alvenaria ou mesa apropriada para balanas, com o tampo de concreto ou mrmore, sem interferncia de equipamentos que promovam vibraes (centrfugas, aparelhos de ar condicionado etc.). A bancada ou mesa no deve estar encostada em paredes.
Providencie a calibrao da balana no local de instalao.

Quais os cuidados que devem ser observados para conservao de balanas?


Siga rigorosamente as instrues do fabricante e mantenha o manual do equipamento em local acessvel
para consulta.
Aps nivelar, no mova a balana para que no desnivele.
Limpe delicadamente a balana aps o uso, utilizando pincel de cerdas macias.
Para limpeza faa, cuidadosamente, a remoo do prato se o modelo da balana permitir. Lembre-se de retirlo com a balana travada.
Mantenha a balana coberta e desligada quando estiver sendo usada.

Como fazer o monitoramento de balanas?


Verificar se a balana est calibrada utilizando o peso padro. Alm disso, o laboratrio deve ter suas balanas
calibradas anualmente pelo Inmetro, laboratrio da Rede Brasileira de Calibrao ou empresa credenciada e ter um
contrato de manuteno com empresa especializada.

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Pesagens
Quais os cuidados que devem ser observados em uma pesagem?
Nivele a balana, conforme instrues do manual do equipamento.
Nunca coloque substncia diretamente sobre o prato da balana.
Use papel ou recipientes apropriados para pesagem.
Utilize papel ou recipientes de pesagem que no reajam com a substncia a ser pesada. Exemplo: no pese iodo
no papel alumnio.
Em balanas sem gabinete, certifique-se de que no h corrente de ar interferindo na pesagem.
Para travar ou destravar uma balana, gire o boto com movimento suave e lento.
Zere a balana antes e aps o uso.
Utilize sempre equipamentos de proteo individual e nunca faa pesagens diretamente sobre o prato
da balana.

Como fazer a pesagem em uma balana mecnica?


1. Verifique se est nivelada.
2. Zere a balana.
3. Pese o papel ou recipiente de pesagem.
4. Anote esse peso.
5. Some esse peso ao valor correspondente quantidade da substncia a ser pesada. O valor final encontrado
o total a ser pesado.
6. Trave a balana e marque ou adicione o peso correspondente ao valor final.
7. Adicione a substncia at que a escala da balana atinja o valor determinado, no caso de balanas de pesos internos ou at que o fiel da balana estabilize em zero, no caso de balana com pesos externos.

Como fazer a pesagem em uma balana eletrnica?


1. Verifique se est nivelada.
2. Ligue a balana e aguarde pelo menos 30 minutos para a sua estabilizao.
3. Coloque o papel no recipiente de pesagem, no centro do prato da balana.
4. Tare a balana.
5. Adicione a substncia at obter o valor exato que deseja pesar.
Tarar a balana descontar o peso do papel ou recipiente de pesagem.

Ateno
No momento de adicionar ou retirar as substncias, use o
dispositivo de travamento, para no forar o mecanismo da
balana. Em balanas que no tem dispositivos de travamento,
faa o procedimento com o recipiente de pesagem fora do prato.

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Pipetas
Para que so utilizadas as pipetas?
As pipetas so instrumentos ou equipamentos utilizados para medir ou transferir lquidos. Problemas de
pipetagem so fontes comuns de erro em diagnsticos laboratoriais. Esses problemas podem ser causados por
falha na tcnica de pipetagem, erro na escolha da pipeta, problemas de ajuste do equipamento ou falta de cuidados
de conservao.

Quais so os tipos de pipetas mais utilizados em laboratrios?


As pipetas mais utilizadas so as sorolgicas ou graduadas, as pipetas de volume fixo ou ajustvel e tambm
pipetas multicanal. So usadas ainda as pipetas de Pasteur, somente para transferir lquidos. Quanto ao funcionamento,
as pipetas classificam-se em manuais, semiautomticas e automticas.
Para lquidos densos, viscosos ou volteis tambm so indicadas as pipetas de deslocamento positivo. Essas
pipetas so muito utilizadas em tcnicas de biologia molecular, uma vez que so desenvolvidas para que no haja
contato da substncia pipeta com o corpo da pipeta, prevenindo a contaminao de uma amostra para outra.
Veja, na Figura 1, alguns tipos de pipetas utilizadas:

Figura 1 Exemplos de pipetas

O que so pipetas graduadas?


So instrumentos de vidro ou plstico utilizados para medir diversos volumes. Essas pipetas apresentam
menor preciso se comparadas com os manuais de volume fixo ou ajustvel. As pipetas graduadas trazem impressas as indicaes de uso, a escala de diviso do volume, a capacidade e a temperatura de referncia.

Que cuidados devem ser observados na utilizao de pipetas graduadas?


Antes de usar essas pipetas, verifique se as extremidades superior e inferior no esto quebradas.
Utilize equipamento auxiliar de pipetagem. Nunca pipete com a boca.
Ajuste o menisco, erguendo a pipeta na altura de seus olhos.
Aps o uso, deixe essas pipetas totalmente submersas, por 24h, em soluo de hipoclorito de sdio a 2%,
para garantir sua desinfeco e, tambm, para evitar que os resduos sequem no seu interior.

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Quais so os equipamentos auxiliares de pipetagem mais utilizados?


Veja, na Figura 2, os auxiliares de pipetagem mais utilizados.

eltrico

manual
(pera)

manual

Figura 2 Equipamentos auxiliares de pipetagem

O que so pipetas manuais de volume fixo ou ajustvel?


So equipamentos de metal ou plstico, de grande preciso, projetados para pipetar um nico volume (volume fixo) ou um volume selecionado dentro de uma faixa (volume ajustvel).
Veja, na figura 3, apresentao esquemtica de uma pipeta manual com mbolo, que a mais usada em
laboratrios.

Figura 3 pipeta manual com mbolo

Quais so os principais acessrios disponveis para essas pipetas?


Os principais acessrios so as ponteiras e o suporte para manter a pipeta na posio vertical.

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Cuidados com as pipetas

Como escolher a melhor ponteira?


Consulte os manuais do fabricante da pipeta a ser utilizada e observe os seguintes cuidados:
Escolha ponteiras adequadas s pipetas, s faixas de volume e utilize ponteiras filtro, quando solicitado
pela metodologia.
No
compre
contaminao.

ponteiras

de

material

reciclado,

para

evitar

Observe com ateno o acabamento das ponteiras, que devem ter pontas bem polidas.
No reutilize ponteiras. Esses materiais so de baixo custo. Alm disso, os procedimentos adotados para lavagem no garantem a completa remoo de resduos, constituindo-se em fonte de
contaminao das reaes.
No esquea de que as ponteiras devem ser descontaminadas em hipoclorito de sdio de sdio a 2% e
autoclavadas antes de serem descartadas.

Como aclopar a ponteira pipeta?


Encaixe verticalmente a ponteira na pipeta. Esse procedimento suficiente para garantir o bom acoplamento
da ponteira adequada. Se voc apertar muito a ponteira, ter problemas no momento de ejet-la, alm de poder
quebrar o ejetor.

Quais os cuidados para o bom funcionamento das pipetas de volume fixo ou ajustvel?
Leia o manual do fabricante do equipamento antes de utiliz-lo.
Mantenha sempre a pipeta em suporte apropriado na posio vertical, para evitar agregao de partculas
em seu interior.
No deixe que a pipeta toque a ponta na base do suporte para evitar avarias.
Limpe a pipeta com lcool etlico a 70% (p/p), antes e aps o uso, com especial ateno para o terminal de acoplamento da ponteira.
Verifique se h dificuldade no deslizamento do mbolo ou se h vazamento no sistema.

Ateno
Use luvas e avental longo de mangas compridas sempre que
voc executar procedimentos com pipetas, mesmo aqueles que
no envolvam pipetagens de amostras biolgicas.

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Que cuidados devem ser observados com pipeta multicanal?


Essas pipetas requerem os mesmos cuidados observados com as monocanal. Observe ainda:
Ao iniciar pipetagem, se todas as ponteiras esto bem acopladas.
Ao aspirar, se o lquido se encontra no mesmo nvel em todos os canais.
Utilize sempre ponteiras iguais.

Importante
1- Faa o teste hidrosttico em todas as pipetas;
2- Em pipeta multicanal o teste hidrosttico deve ser feito
individualmente em cada canal;
3- Qualquer problema de vedao, a pipeta deve ser tirada da
rotina e deve ser encaminhada para a manuteno

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Pipetagem normal e reversa

O que a pipetagem normal e a reversa?


A pipetagem normal aquela que voc utiliza rotineiramente. A pipetagem reversa indicada para volumes de at 20l e para pipetar fluidos viscosos como a glicerina ou volteis como acetona.
Veja, no quadro 1, o desempenho das pipetagens normal e reversa nas diversas possibilidades.
Quadro 1 Desempenho das pipetagens normal e reversa
Parmetros

Desenvolvimento das formas de pipetagens

Normal

Reversa

Fluidos com alta viscosidade

Bom

Excelente

Exatido

Bom

Bom

Volume at 20 microlitros ( l)

Regular

Excelente

Volumes superiores a 20 l

Bom

Bom

Fluidos muito volteis

Regular

Bom

Exatido o grau de concorrncia entre o resultado de uma medio e o valor de um padro proveniente calibrado.

Quais os principais cuidados durante a pipetagem?


Verifique se a ponteira est corretamente acoplada pipeta.
Faa a pipetagem com a pipeta na posio vertical.
Aspire e dispense o lquido, mantendo velocidade lenta e constante.

Qual o procedimento para pipetagem normal?


Para fazer pipetagem normal, siga os seguintes passos:
1. Selecione o volume desejado.
2. Pressione o acionador do mbolo da pipeta at o primeiro estgio.
3. Mergulhe a ponteira, aproximadamente, 5 milmetros abaixo da superfcie do lquido.
4. Libere o acionador do mbolo, gradativamente, at a sua posio original, aspirando o lquido.
5. Dispense o lquido, pressionando o mbolo at o segundo estgio.
6. Libere, lentamente, o acionador do mbolo at a sua posio original.
7. Descarte a ponteira em recipiente de boca larga e paredes rgidas, contendo hipoclorito de sdio a 2%.

Ateno
No limpe ou seque a ponteira utilizando gaze ou
papel absorvente, pois esse procedimento pode
implicar erros de volume. Retire o excesso de lquido
que se acumular no exterior da ponteira, raspando-a
delicadamente na borda do tubo que contem o lquido
pipetado.
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Qual procedimento para pipetagem reversa?


Para fazer pipetagem reversa, siga os seguintes passos:
1. Selecione o volume desejado.
2. Pressione o acionador do mbolo da pipeta at o segundo estgio.
3. Mergulhe a ponteira, aproximadamente, 5 milmetros abaixo da superfcie do lquido.
4. Libere o acionador do mbolo, gradativamente, at a posio inicial, aspirando o lquido.
5. Pipete o volume selecionado, pressionando, gradativamente, o acionador do mbolo at o primeiro estgio. Note que h um resduo lquido que fica na ponteira.
6. Retorne lentamente o acionador at a posio de descanso.
7. Descarte a ponteira em recipiente de boca larga, contendo hipoclorito de sdio a 2%.

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Teste hidrosttico e calibrao


Como saber se h vazamentos no sistema?
Para verificar a presena de vazamento em pipetas, faa o teste hidrosttico:
1- Providencie um recipiente contendo gua destilada.
2- Fixe cuidadosamente a ponteira na pipeta.
3- Aspire a gua at o primeiro estgio da pipeta.
4- Tampe a extremidade inferior da ponteira com um dedo.
5a Para pipetas com volume at 1 ml: pressione o acionador do mbolo at o segundo estgio, permanecendo assim, aproximadamente, 20 segundos.
5b Para as pipetas com volumes maiores do que 1ml: pressione o acionador do mbolo at um ponto
mdio entre o primeiro e segundo estgios.
6- Solte lentamente o acionador do mbolo at a sua posio original.
7- Retire o dedo da extremidade da ponteira e verifique se a gua se desloca. Se isso ocorrer, h problema na
vedao na pipeta ou no seu acoplamento com a ponteira.

Ateno
Em pipetas de volume varivel, recomenda-se fazer o
teste hidrosttico com o volume ajustado no limite
mximo.

Como fazer calibrao de pipetas?


Para esse procedimento voc vai precisar de:
Um recipiente contendo gua destilada.
Papel ou recipiente para pesagem.
Termmetro para leitura pontual ou instantnea, calibrado.
Duas tabelas: 1 Distribuio de densidade absoluta da gua segundo temperatura e 2 Limites de
tolerncia para pipetas de volume varivel (Anexo 3).
Uma balana analtica.
Veja, como fazer:
1. Mea a temperatura da gua e anote.
2. Faa o teste hidrosttico.
3. Coloque o papel ou recipiente de pesagem sobre o prato da balana.
4. Pese o papel, obedecendo aos procedimentos indicados para a balana mecnica ou eletrnica, de acordo com o
modelo que voc utilizar.
5. Com a ponteira devidamente aclopada pipeta, aspire gua e dispense-a no papel usado a tcnica de
pipetagem reserva.
6. Anote o valor indicado no visor da balana.
7. Repita o passos dos itens 4 e 6, por mais de quatro vezes.
8. Conhecendo a temperatura da gua, verifique na Tabela 1 sua densidade.
9. Determine o volume dispensado pela pipeta, empregando a frmula:
v (ml) = m (g)
d (g/ml)
10.

Verifique na tabela 3 a tolerncia para o volume da pipeta.

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Ateno
Pipetas com volumes inferiores a 20 l devem ser calibradas
em balanas micro ou ultramicro. Essas Balanas no so usuais
em laboratrios e nestes casos o procedimento de calibrao
descrito uma simples verificao da capacidade volumtrica
do equipamento.

Veja o exemplo, na tabela 1, de uma pipeta de 200 l (0,2 ml) com a temperatura da gua a 20C e densidade
da gua = 0,99823 g/mL
Volume pipetado de gua = Massa da gua pipetada (g)
Densidade da gua a 20(g/ml)

Veja agora, na Tabela 2, a tolerncia admitida para o volume de 200 l, de acordo com o fabricante do equipamento utilizado.

Ateno
Os limites de tolerncia variam para cada fabricante. Consulte a
tolerncia admitida no manual da pipeta que voc est utilizando.

A tolerncia admitida para o equipamento utilizado neste exemplo de +- 1,6 L, portanto, a faixa de volume
admitida para 200 L de 198,4 a 201,6 L.
Compare essa tolerncia com os valores obtidos com as 5 pipetas.
Concluso: nesse exemplo foi obtido um valor fora do limite de tolerncia (pipeta 3). Qualquer valor fora
desse limite indica que a pipeta precisa ser ajustada. Encaminhe-a para a manuteno corretiva em empresa especializada.

Como fazer ajustes na pipetas com problemas de calibrao?


Tanto os ajustes corretivos como quaisquer outros procedimentos que impliquem desmontagem da pipeta
devero ser realizados obrigatoriamente por profissionais habilitados.
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Termmetros
Para que so usados termmetros em laboratrio?
So instrumentos utilizados para medir temperaturas. Em laboratrios, o controle da temperatura de fundamental importncia, na realizao de ensaios, na conservao de substncias e no prprio ambiente do laboratrio.
Os termmetros, tambm, so utilizados para fazer o monitoramento de alguns equipamentos.

Quais so os termmetros mais utilizados em laboratrios?


Os termmetros mais utilizados so:
Termmetros de mxima e mnima e termmetros de leitura pontual ou instantnea.

Para que so utilizados os termmetros de mxima e mnima?


Os termmetros de mxima e mnima indicam a ocorrncia de cortes de temperatura pontual (temperatura
do momento), portanto no devem ser utilizados para indicao de temperatura do momento pois so de baixa
preciso.

Como fazer a leitura em termmetro de mxima e mnima?


Veja, na figura 1, um termmetro de mxima e mnima.
ma.

Esses termmetros possuem duas colunas: uma indica a temperatura mxima e a outra a temperatura mniPara fazer a leitura, observe os indicadores em cada coluna. Leia a temperatura inferior de cada indicador.

Figura 1 Representao de um termmetro de mxima e mnima.


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Lembre-se
Lembre-se que, aps a leitura, os indicadores devem ser trazidos
de encontro coluna, pelo acionamento de um boto ou com
auxlio de um im, de acordo com o modelo de termmetro. A
partir desse momento, o termmetro est pronto para registrar
as temperaturas mxima e mnima de um novo perodo

Para que so utilizados os termmetros de leitura pontual ou instantnea?


Os termmetros de leitura pontual ou instantnea, tambm conhecidos como termmetros comuns de laboratrio, so utilizados para medir a temperatura do momento em determinado local. Sua preciso varia conforme o
tipo de termmetro.

Quais so os tipos de termmetros para leitura pontual ou instantnea?


Os termmetros mais utilizados para leitura pontual ou instantnea da temperatura so: os eletrnicos e os
de lquido em vidro, conhecidos como termmetro de bulbo de mercrio ou lcool. A resoluo dos termmetros
de lquido em vidro varia muito: a maioria de 0,5 C e seu ajuste no economicamente vivel. A resoluo dos
eletrnicos de pelo menos 0,1 C e podem ser reajustados.
Resoluo: intervalo de leitura; a menor variao indicada do mostrador.
Entre os eletrnicos, existem os termmetros com sensor nico, utilizados para a leitura da temperatura em um
nico ponto de equipamento e os com mltiplos sensores, para leitura em mais de um ponto do equipamento. Esses
termmetros possuem mostrador de leitura analgico ou digital.

Como utilizar esses termmetros no monitoramento de equipamentos?


Para fins de monitoramento, observe as seguintes recomendaes:
Utilize um termmetro exclusivo para cada equipamento.
No coloque o termmetro prximo s fontes geradores de energia trmica, como evaporador de uma
geladeira ou a resistncia de uma estufa ou banho-maria.
No encoste o bulbo ou o sensor do termmetro em qualquer superfcie.
Os termmetros utilizados em estufas, geladeiras e congeladores devem ter seus bulbos ou sensores colocados em uma soluo de glicerol 10% em gua (v/v), que mantm temperatura estvel.
Instale o mostrador de termmetro eletrnico na parte externa de geladeiras, freezers e estufas, pois a
abertura da porta desses equipamentos ocasiona alterao na temperatura.

Ateno
Voc pode adquirir um termmetro de referncia, que deve ser
certificado e anualmente calibrado pelo Inmetro ou por um
laboratrio da Rede Brasileira de Calibrao. Somente mantenha em uso
aqueles com leitura igual do termmetro de referncia.

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Homogeneizadores de bolsas para coleta de sangue


e agitadores de plaquetas
Para que so usados os homogeneizadores?
So equipamentos utilizados durante a coleta de bolsas de sangue para garantir a perfeita homogeneizao
do anticoagulante com o sangue. Esses equipamentos podem ser dotados de mecanismos capazes de pesar a bolsa
e marcar o tempo de coleta.

Quais os cuidados a serem tomados com homogeneizadores?


Leia atentamente e siga as recomendaes do fabricante. Mantenha o manual acessvel para consulta.
Limpe sempre o equipamento com um pano umedecido em gua e sabo, retirando os resduos de sabo
com um pano umedecido somente em gua. Seque em seguida.
Se houver acidente com material biolgico, faa a desinfeco com pano umedecido em lcool etlico
70% (p/p), utilizando equipamentos de proteo individual.
Solicite, a cada quatro meses, que a assistncia tcnica calibre e ajuste, se necessrio, a velocidade de homogeneizao, o relgio (timer) e a preciso de pesagem de equipamento.

Importante
Voc pode adquirir peso padro de 500 g, certificado pelo
Inmetro, para calibrar diariamente a capacidade de pesagem do equipamento.

Agitadores de Plaquetas
Para que so usados os agitadores de plaquetas?
So equipamentos eletromecnicos, utilizados para evitar agregao plaquetria, durante o perodo de estocagem. Podem ser rotativos (rbita de 360 sobre um eixo horizontal) ou de agitao horizontal.

Quais os principais cuidados que devem ser observados com agitadores de plaquetas?
Leia atentamente e siga as recomendaes do fabricante.
Mantenha o material acessvel para consulta.
Limpe sempre o equipamento com pano umedecido em gua e sabo, retirando resduos com um pano
umedecido em gua e seque em seguida.
Se houver acidentes com material biolgico, faa a desinfeco com pano umedecido em lcool etlico
70% (p/p), utilizando equipamentos de proteo individual.
Se o equipamento for do tipo que utiliza trava, certifique-se que a trava foi corretamente fechada ou se h
problemas de fechamento.
Solicite que a assistncia tcnica faa, a cada quatro meses, o controle da velocidade de agitao para os
agitadores rotativos de 2 a 6 rotaes por minuto (rpm).
Os concentrados de plaquetas devem ser mantidos sob agitao a uma temperatura de 200C a 24C. A
temperatura do ambiente deve ser monitorada a cada quatro horas, conforme normas do Ministrio
da Sade.
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Microscpios

O que so microscpios e quais os mais utilizados em laboratrios?


Microscpios pticos so equipamentos que utilizam lentes para ampliar imagens. A capacidade de ampliao
de um microscpio determinada multiplicando-se a capacidade de ampliao da objetiva pela ocular. A capacidade
mxima de ampliao da maioria dos microscpios de 1.000 vezes.
Os mais utilizados em laboratrios so pticos comuns e os de fluorescncia. Veja, na Figura 1, os principais
componentes de um microscpio ptico comum.
ocular
tubo principal

brao

charriot
boto micromtrico
boto macromtrico

revlver porta-objetivas
objetivas
platina
condensador
diagrama de abertura

base

lmpada

Figura 1 Microscpio ptico comum

Os microscpios pticos comuns podem ter condensador de campo claro ou campo escuro.
O de condensador de campo claro utilizado para se fazer leitura de bacterioscopias e reaes como
VDRL e o condensador de campo escuro utilizado, por exemplo, para fazer uma pesquisa de treponemas.

O microscpio de fluorescncia utilizado para fazer leituras de vrias reaes, como, por exemplo, a FTAabs, empregada no diagnstico sorolgico da sfilis.

Como instalar microscpios?


Leia o manual do fabricante e siga as recomendaes de instalao.
Instale-os em ambientes limpos, sem poeira, livres de emisso de vapores de produtos qumicos, bem ventilados e que tenham sistema permanente de ar condicionado. Umidade e altas temperaturas ocasionam a proliferao de fungos que podem danificar as superfcies pticas.

Lembre-se
Lembre-se que o ambiente deve ser escurecido no momento da leitura em microscpios de fluorescncia.
Equipamentos - Utilizao e monitoramento em Unidades Hemoterpicas e Laboratrios de Sade Pblica

18

Quais os cuidados que devem ser observados com microscpios?


Leia atentamente o manual do fabricante, seguindo as instrues de uso. Mantenha o manual acessvel
para a consulta.
Nunca use xilol ou etanol 96%, porque as lentes podem descolar.
Faa a limpeza das lentes (objetivas oculares), utilizando uma soluo de etanol (60%)/ ter etlico (40%).
Utilize papel absorvente macio para limpeza das lentes. O uso de papel toalha comum ou gaze pode provocar riscos as lentes.
Nunca toque as lentes com os dedos.
Limpe o equipamento utilizando um pincel de cerdas macias para retirada da poeira que poder se agregar
aos mecanismos de movimentao da lmina, do condensador e de ajuste de foco, dificultando seu funcionamento.
Limpe o equipamento com o etanol a 70% (p/p aps fazer leitura em amostras contaminadas). Esse
procedimento no pode ser realizado nas partes pticas.
Nunca utilize substncias oxidantes ou corrosivas na limpeza dos microscpios.
Mantenha o equipamento, quando fora de uso, coberto com o tecido que no solte fibras; no utilize
capas plsticas porque a condensao de umidade nesse material favorece a oxidao e o crescimento de
fungos.
Nunca deixe o microscpio sem as oculares a no ser que as aberturas estejam tampadas, para evitar a
entrada de p.
No desmonte os microscpios, porque na remontagem pode ocorrer desalinhamento dos componentes
pticos. Esse procedimento deve ser realizado por tcnicos especializados.

H alguma recomendao para as objetivas de imerso?


Sim. Essas objetivas devem ser secas, aps o uso, com papel absorvente macio para retirar todo o leo. Em
seguida, devem ser limpas com uma soluo de etanol (60%) ter etlico (40%).

Ateno
No toque as objetivas com os dedos e nunca utilize
xilol e etanol 96% para que as lentes no descolem.

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19

Equipamentos termocontrolveis

Banhos-maria e termoblocos
Para que so utilizados os banhos-maria e os termoblocos?
Esses equipamentos so utilizados para manter constante a temperatura requerida para uma determinada
reao.

Qual a diferena entre banhos-maria e termoblocos?


O que difere banhos-maria de termoblocos o meio de transferncia da energia trmica. Nos banhos-maria, a
gua aquecida transfere energia trmica reao. Nos termoblocos, a energia trmica transferida pelo bloco metlico aquecido, podendo atingir temperaturas superiores a 100C.

Quais so os cuidados que se deve ter com banhos-maria?


Lave o banho-maria mensalmente ou sempre que houver depsitos. Para esse procedimento utilize gua
e sabo neutro; se necessrio, limpe as partes metlicas com esponja de ao e sabo neutro, tomando
cuidado de deslig-lo da tomada e de no coloc-lo diretamente sob gua corrente.
Retire todo o sabo e seque o equipamento com um pano limpo.
Coloque gua no equipamento, pelo menos at um nvel que garanta a cobertura da resistncia e do sensor de temperatura. Somente utilize gua destilada ou deionizada.
Verifique diariamente as condies do equipamento, observando o nvel de gua e se h presena de
depsitos ou contaminantes.
Se houver incrustaes na resistncia e no sensor, desligue o equipamento e substitua a gua destilada
por uma soluo fraca de cido clordrico (10%), at que a incrustao se dissolva. A seguir, lave-o e preencha-o outra vez com gua destilada.
Tenha cuidado com toques involuntrios durante a utilizao desses equipamentos ou durante a limpeza
do laboratrio, para no alterar a posio do termostato.
Mantenha o banho-maria tampado para evitar evaporao da gua e variao da temperatura.

Como proceder se a temperatura do banho-maria no estabilizar no limite recomendado


para a tcnica a ser executada?
Verifique se foram tomados todos os cuidados indicados.
Observe se o bulbo do termmetro est submerso, livre de contatos com as superfcies internas do equipamento
e afastado da resistncia.
Ajuste o termostato e deixe o equipamento sob observao.
Caso persistam os defeitos, chame a assistncia tcnica.

Equipamentos - Utilizao e monitoramento em Unidades Hemoterpicas e Laboratrios de Sade Pblica

20

Quais so os cuidados que se deve ter com termoblocos?


Faa limpeza diria com pano umedecido em lcool etlico 70% (p/p).
Observe que a limpeza deve ser feita com o termobloco frio e desligado.
Utilize um swab umedecido em lcool etlico 70% (p/p) para limpar as cavidades do termobloco.
No deixe cair lquidos no interior de termobloco.

Como proceder se a temperatura do termobloco no estabilizar no limite recomendado para a tcnica a ser executada?
Chame a assistncia tcnica.

Como fazer o monitoramento de banhos-maria e termoblocos?


O monitoramento desses equipamentos deve ser feito em dois momentos:
1. diariamente, faa a leitura da temperatura para controle da estabilidade, com termmetro de leitura
pontual ou instantnea. Registre esses dados na planilha Controle de banho-maria e termobloco.
(Anexo 6)
2. a cada utilizao do equipamento, verifique a temperatura antes e durante o processo.

Ateno
Lembre-se que banhos-maria e termoblocos so equipamentos projetados
para trabalhar na temperatura requerida pela tcnica. Por isso no cabe traar grfico. Caso ocorram variaes de temperatura, essa informao deve
ser anotada no campo Observaes da planilha Controle de banho-maria
e termobloco, registrando tambm o tipo de interveno feita.

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21

Equipamentos termocontrolveis
Estufas bacteriolgicas
Para que so utilizadas estufas bacteriolgicas?
So utilizadas principalmente para cultivo de microrganismos e incubao de reaes.
O monitoramento da temperatura em estufas bacteriolgicas indispensvel para garantia da qualidade
dos ensaios microbiolgicos. Os microrganismos, em sua maioria, so exigentes e crescem em faixas de temperaturas estreitas e especficas.

Quais so os cuidados que devem ser observados na utilizao de estufas?


No incube quantidade excessiva de material. Obedecendo essa regra, voc garantir a boa circulao
interna do ar.
No encoste nenhum material nas paredes da estufa, evitando superaquecimento do material.
No coloque nenhum material na base da estufa, para evitar obstruo da principal fonte de calor.
Com a estufa desligada e fria, limpe-a mensalmente com um pano umedecido em gua e sabo. Retire os
resduos de sabo com pano umedecido apenas em gua.
Tenha cuidado com a ao de agentes externos que alterem a posio do tesmostato, a exemplo
de toques involuntrios durante a utilizao desses equipamentos ou durante a limpeza do laboratrio.

Ateno
Na ocorrncia de acidentes com material biolgico, faa a desinfeco com
um pano umedecido em lcool etlico a 70% (p/p), utilizando equipamentos
de proteo individual.

Como monitorar estufas bacteriolgicas?


Faa diariamente, na primeira hora de funcionamento do laboratrio, duas leituras: uma utilizando o termmetro de leitura pontual ou instantnea e outra utilizando o de mxima e mnima.
Faa outra leitura no horrio de maior manuseio do equipamento, com termmetro de leitura pontual ou instantnea.
A cada leitura registre os dados obtidos da planilha Controle de Estufa (Anexo 7); faa um grfico com base
nestes dados.
Veja um exemplo com os dados do monitoramento de uma estufa destinada a cultura bacteriolgica, com
limites de tolerncia estabelecidos: limite inferior 35,5C e limite superior 36,5C.
Equipamentos - Utilizao e monitoramento em Unidades Hemoterpicas e Laboratrios de Sade Pblica

22

Monitoramento de equipamentos - Controle de estufa

Instituio: XXX

Laboratrio: Microbiologia

Equipamento n 05

Ms: 02

Responsvel pelo CQ

Responsvel pelo Laboratrio


Primeira leitura

Dia

Hora

Ano: XX

Segunda leitura

Temperatura

Temperatura

Temperatura

mxima

mnima

pontual

Hora

Temperatura

Observaes

pontual

01

7:00

36,5

35,5

36,0

11:00

36,0

02

7:00

36,5

35,5

36,5

11:05

36,0

03

7:00

36,5

36,0

36,0

11:45

36,5

04

7:00

36,5

36,0

36,5

11:00

36,5

05

7:00

36,5

35,0

36,5

11:10

36,0

06

7:15

39,0

34,0

38,0

10:50

36,5

Ajuste do
termostato

07

7:00

39,0

35,0

39,0

11:00

37,0

Ajuste do
termostato

08

7:15

39,0

37,0

38,5

11:55

37,5

Ajuste do
termostato

09
10

30
31

Data/ Aes corretivas ou preventivas: 08/02 Encaminhada para manuteno

Equipamentos - Utilizao e monitoramento em Unidades Hemoterpicas e Laboratrios de Sade Pblica

23

Grfico de Temperatura de Estufa

Como voc pode observar, o monitoramento da estufa registrado no grfico apontou claramente o funcionamento
inadequado do equipamento, com temperatura fora dos limites de tolerncia estabelecidos em dias consecutivos, mesmo
aps terem sido feitos ajustes no termostado. Isso significa que podem ter corrido problemas de vedao, de isolamento
trmico, no termostado ou na resistncia, devendo o equipamento ser prontamente encaminhado para manuteno.

Ateno
As planilhas devem ser arquivadas pelo menos por 5 anos, conforme normas do Ministrio da Sade.

Equipamentos - Utilizao e monitoramento em Unidades Hemoterpicas e Laboratrios de Sade Pblica

24

Equipamentos termocontrolveis
Geladeiras e congeladores
Quais so os cuidados que devem ser observados com geladeiras e congeladores?
No forre as prateleiras e no sobrecarregue o equipamento com excesso de material, pois isso interfere
na circulao de ar e ocasiona diferentes temperaturas no seu interior.
Descongele e limpe o equipamento sempre que houver uma camada de gelo superior a 1 cm. Lembrese que o excesso de gelo prejudica o desempenho do equipamento, pois o gelo funciona como isolante
trmico. Antes de descongelar o equipamento, transfira todo seu contedo para outra geladeira ou freezer
e no utilize nenhum instrumento pontiagudo para remover o gelo.
Na limpeza utilize um pano umedecido em gua e sabo neutro, remova os resduos de sabo com pano
umedecido em gua, secando em seguida. Se houver acidentes com material contaminado, faa a desinfeco com lcool 70% (p/p).
Verifique periodicamente as borrachas de vedao das portas. Falhas na vedao acarretam formao
excessiva de gelo. Providencie para que sejam trocadas as borrachas com defeito.
Geladeiras e congeladores do tipo que descongelam automaticamente no so recomendadas para laboratrios, pois o processo de descongelamento automtico ocasiona grandes variaes de temperatura.

Ateno

O material estocado na parte interna das portas das geladeiras e congeladores


sofre grande variao trmica durante a abertura das mesmas.

Como fazer monitoramento de geladeiras e congeladores?


Faa diariamente, na primeira hora do funcionamento do laboratrio, duas leituras: uma utilizando o termmetro de leitura pontual ou instantnea e outra utilizando o de mxima e mnima.
Faa outra leitura no horrio de maior manuseio de equipamento, com termmetro de leitura pontual ou
instantnea.
Registre os dados de cada leitura na planilha Controle de Geladeira e congeladores de Laboratrio (Anexo 4).
Veja o exemplo de planilha com os dados do monitoramento mensal de geladeira utilizada em laboratrio de sorologia para estocagem de reagentes.

Equipamentos - Utilizao e monitoramento em Unidades Hemoterpicas e Laboratrios de Sade Pblica

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MONITORAMENTO DE EQUIPAMENTOS
CONTROLE DE GELADEIRA E CONGELADOR DE LABORATRIO
Instituio ______________________________________________ Laboratrio____________________________________
Equipamento n._________________________________________ Ms _________________________Ano_____________
Responsvel pelo CQ______________________________________ Responsvel pelo laboratrio____________________

Primeira Leitura
Dia

Segunda Leitura

Hora

Temperatura
Mxima

Temperatura
Mnima

Temperatura
Pontual

Hora

Temperatura
Pontual

01

7:00

5,5

2,0

2,0

14:00

5,0

02

7:00

5,5

2,0

3,0

14:30

5,5

03

7:00

5,0

2,0

2,5

14:00

4,5

04

7:00

5,5

2,0

2,5

14:10

4,0

05

7:00

6,0

2,0

3,0

14:30

6,0

06

7:00

6,0

2,5

3,5

14:20

5,5

07

7:00

7,5

2,5

4,0

14:10

6,0

08

7:00

7,5

2,5

3,5

14:30

9,0

09

7:00

4,5

2,0

4,0

14:30

3,5

10

7:00

5,0

2,0

3,5

14:20

4,5

11

7:00

5,0

2,0

2,5

14:10

4,0

12

7:00

5,5

2,0

3,0

14:30

5,5

13

7:00

6,5

2,5

3,5

14:00

6,0

14

7:00

6,0

2,0

3,0

14:30

5,0

15

7:00

7,0

2,0

2,5

14:00

6,0

16

7:00

8,0

2,5

3,0

14:00

8,5

17

7:00

6,0

2,0

2,5

14:10

5,5

18

7:00

5,5

2,5

4,0

14:30

5,0

19

7:00

6,0

2,0

4,0

14:10

5,5

20

7:00

6,0

2,0

4,5

14:30

5,0

21

7:00

5,5

2,0

4,0

14:30

4,5

22

7:00

5,5

2,0

3,0

14:20

5,0

23

7:00

6,0

2,0

3,5

14:10

5,5

24

7:00

6,0

2,0

3,0

14:30

6,0

25

7:00

8,0

2,0

2,5

14:00

9,0

26

7:00

5,0

2,5

4,0

14:30

3,0

27

7:00

5,0

2,0

4,5

14:00

4,5

28

7:00

5,0

2,5

3,0

14:10

4,0

29

7:00

6,5

2,5

3,5

14:30

5,0

30

7:00

6,0

2,0

2,0

14:20

5,5

31

7:00

5,5

2,0

2,5

14:10

5,0

Equipamentos - Utilizao e monitoramento em Unidades Hemoterpicas e Laboratrios de Sade Pblica

Observaes

Ajuste do termostato

Ajuste do termostato

Ajuste do termostato

26

Observe a representao grfica dos dados referentes s duas leituras das temperaturas pontuais dessa geladeira.
Grfico de temperatura de geladeira

Este grfico permite uma avaliao do desenvolvimento do equipamento e sua adequao ao procedimento tcnico. Nele esto indicados os limites de tolerncia estabelecidos: limite superior 8C e limite inferior
2C. Note que, nesse exemplo, a temperatura ultrapassou os limites de aceitao trs vezes ao longo do ms, nas
leituras feitas nos horrios de maior utilizao de equipamento. Todas as leituras feitas na primeira hora mantiveram-se dentro dos limites de tolerncia. A hiptese mais provvel aponta para o possvel mau uso da geladeira
(abertura frequente e demorada da porta, por exemplo) o que indica erro ocasional, que no descredencia o
equipamento para seu objetivo.

Como proceder quando ocorre uma temperatura fora dos limites de tolerncia estabelecidos?
Verifique se todos os cuidados foram obedecidos e faa as correes necessrias.
Deixe o equipamento sob observao.
Caso persistam os defeitos, verifique quais os materiais devem ser colocados em outra geladeira: descarte
aqueles que possam ter perdido sua condio de uso e chame a assistncia tcnica especializada.

H alguma recomendao especial para geladeiras e congeladores destinados a estocagem de sangue ou hemocomponentes?
Sim. Nas geladeiras deve observar os procedimentos rotineiros para controle da temperatura mxima e mnima. A temperatura pontual deve ser verificada a cada 4 horas, pois o concentrado de hemcias e o sangue so
sensveis a pequenas variaes de temperatura. Esses produtos devem ser estocados entre 2C e 6C, e as leituras
registradas na planilha Controle de Geladeiras e congeladores de Unidades Hemoterpicas.(Anexo 5)
Essas geladeiras devem ter mecanismos de circulao interna de ar para garantir a distribuio uniforme da
temperatura e devem ser dotadas de sistema de alarme sonoro e visual.
Em congeladores, a temperatura pontual deve ser verificada a cada 4 horas. O plasma e o crioprecipitado
devem ser estocados em temperatura igual ou inferior a -20C.

Ateno
A conservao de sangue e hemocomponentes devem ser feita em geladeiras
e congeladores exclusivos para este fim.
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Outros equipamentos e insumos


Centrfugas
Para que so utilizadas as centrfugas?
As centrfugas so classificadas em dois tipos: as convencionais ou comuns e as refrigeradas.
Esses equipamentos so encontrados em vrios modelos e devem ser escolhidos de acordo com o uso a que se
destinam. Assim, pode-se utilizar centrfuga com diferentes rotores, velocidades de rotao e capacidade de carga.
Os rotores podem ser especficos para bolsas de sangue, tubos, microtubos, tubos capilares ou placas.

Quando usar centrfugas refrigeradas?


Escolha centrfugas refrigeradas quando a tcnica determinar e nos casos em que o calor possa alterar as
caractersticas do material a ser centrifugado. Nesses casos as centrfugas comuns no podem ser utilizadas,
pois seu funcionamento gera calor, que irradiado para a cmara de centrifugao.

Como utilizar centrfugas?


Leia atentamente e siga as recomendaes do fabricante. Mantenha o manual acessvel para consulta.
Pese o material a ser centrifugado. Para equilibrar a centrfuga, coloque os pares de mesmo peso nas caapas de forma balanceada, de acordo com as instrues do fabricante. Em centrfugas cujas caapas so
removveis, pese o material dentro delas.

Quais os cuidados que devem ser observados com centrfugas?


Lubrifique, de acordo com as instrues do fabricante, as partes mveis da centrfuga.
Limpe, semanalmente, as caapas, com pano umedecido em gua e sabo.
Retire o excesso de sabo com pano umedecido em gua e enxugue.
Limpe mensalmente o rotor e a parte interna da centrfuga, usando pano embebido em soluo de lcool
etlico a 70%(p/p).

Ateno
No caso de acidente com material biolgico, limpe a cmara interna, as caapas e o rotor com pano embebido em lcool etlico a 70% (p/p), utilizando
equipamentos de proteo individual.

Como fazer o monitoramento de centrfugas?


Nas centrfugas comuns deve ser feita calibrao da rotao, do temporizador e do tacmetro (quando houver), a cada quatro meses ou aps qualquer servio de manuteno, por tcnico especializado. Nas centrfugas refrigeradas, alm dos itens j mencionados deve ser feita a calibrao do termmetro, tambm a cada quatro meses
ou aps qualquer servio de manuteno, por tcnico especializado.
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Outros equipamentos e insumos

Equipamentos utilizados nos testes ELISA


Quais os cuidados que devem ser observados na utilizao de equipamentos para
testes ELISA?
Os equipamentos utilizados para incubao, lavagem e leitura dos testes ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) normalmente so instalados nos laboratrios na forma de comodato e o pessoal tcnico que ir
No entanto, observe alguns cuidados gerais quando da utilizao desses equipamentos.
Ligue a incubadora antes de iniciar a pipetagem das amostras, para que estabilize na temperatura selecionada.
Faa, no incio e no trmino do uso dirio da lavadora, um ciclo de lavagem do equipamento com gua
destilada para retirar sais do tampo que possam cristalizar ou obstruir a passagem da soluo de lavagem.
Desobstrua, semanalmente, o pente da lavadora com o auxlio de um fio de ao inox.
Faa, a cada 15 dias, a desinfeco da lavadora, fazendo vrias lavagens utilizando lcool etlico 70% (p/p).
Aps esse procedimento, deixe a lavadora em repouso por pelo menos 30 minutos. Em seguida, faa
vrios ciclos de lavagem com gua para retirar qualquer resduo de lcool.
No incio de cada ciclo de lavagem, verifique se a lavadora est dispensando o volume desejado ou se est
havendo extravasamento da soluo de lavagem.
Nunca deixe o nvel do recipiente destinado ao descarte de lquidos de lavagem ultrapassar o nvel indicado,
evitando que ocorra refluxo da soluo para o interior do equipamento, que pode causar danos ao equipamento ou contaminao da reao.
Solicite manuteno antes de utilizar um equipamento que tenha ficado em desuso.
Verifique periodicamente os filtros das leitoras, se estiverem acessveis; caso contrrio, solicite que esse
procedimento seja feito por tcnico especializado sempre que fizer manuteno do equipamento.
Faa a manuteno peridica desses equipamentos a cada 4 meses para lavadoras, 6 meses para leitoras e a cada 12 meses para incubadoras.

Equipamentos - Utilizao e monitoramento em Unidades Hemoterpicas e Laboratrios de Sade Pblica

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Outros equipamentos e insumos


Bales Volumtricos
Para que so usados os bales volumtricos?
Bales volumtricos so instrumentos indicados para a preparao de solues por serem mais precisos que
provetas, bqueres e Erlenmeyers. A qualidade e a exatido de um teste laboratorial dependem de um conjunto de
procedimentos que devem ser realizados corretamente. As solues e tampes empregados em testes laboratoriais
devem ser rigorosamente preparados. Para isso, alm do correto procedimento de pesagem das substncias empregadas, necessrio preciso na medida do volume final.

Quais os cuidados que devem ser observados no uso de bales volumtricos?


Os bales volumtricos so ajustados pelo fabricante para medir os volumes e devem ser manipulados com
muito cuidado para que no percam a transparncia e a previso. Por isso, no devem ser expostos a substncias corrosivas, como hidrxido de sdio (soda custica), cido fluordrico e cido fosfrico. Tambm no devem ser submetidos a temperaturas superiores a 150C, que podem causar alteraes do volume, conforme norma ISO 4787. Veja, na
figura 1, uma representao esquemtica de balo volumtrico.

Figura 1 Balo volumtrico

Como calibrar bales volumtricos?


Como voc j sabe, a calibrao com certificado feita por rgo credenciado. O procedimento descrito a
seguir uma simples verificao de capacidade volumtrica desse instrumento.
Para isso, utilize o princpio de pesagem de uma substncia com densidade conhecida (gua, por exemplo) a
uma determinada temperatura.
Voc vai precisar de:
Uma balana analtica calibrada, com capacidade de pesagem superior ao peso da gua.
Um termmetro de leitura pontual ou instantnea, calibrado.
gua destilada.
Funil de haste longa.
Uma pipeta para ajuste de menisco.
Duas tabelas:
Distribuio da densidade absoluta da gua segundo temperatura, e
Distribuio dos limites de tolerncia para os diversos volumes (Anexo 3).
Equipamentos - Utilizao e monitoramento em Unidades Hemoterpicas e Laboratrios de Sade Pblica

30

Veja como fazer a verificao da capacidade de bales volumtricos:


1 Pese o balo vazio, tampado e seco, obedecendo aos procedimentos indicados para balanas mecnicas
e eletrnicas, de acordo com o modelo que voc utilizar. Retire o balo da balana para realizar os passos
2, 3 e 4.
2 Adicione gua at prximo marca de referncia do balo, utilizando o funil.
3 Verifique a temperatura da mquina e anote.
4 Ajuste o mecanismo com a marca da referncia, utilizando a pipeta.
5 Pese o balo agora contendo gua.
6 Diminua o peso do balo com gua e o peso do balo sem gua. O resultado a massa de gua (g).
7 Conhecendo a temperatura da gua, localize na Tabela 1 do Anexo 3 o valor da densidade (g/mL) da gua.
8 Divida a massa da gua (g) pela densidade da gua (g/mL). O resultado correspondente ao volume calibrado do recipiente.
9 Com esse resultado, consulte a tolerncia na Tabela 2 do Anexo 3 e observe se os valores obtidos esto
dentro dos limites aceitveis.
Lembre:
Volume (ml) = massa (g)
densidade (g/ml)
Acompanhe o exemplo:
Massa de um balo de 100 ml = 70,06 g
Massa do balo com gua = 169,86 g
Massa da gua (169,86 g -70,06 g) = 99,80 g
Temperatura da gua = 20C
Densidade da gua a 20C = 0,99823 g/ml (outras temperaturas veja na tabela 1 do Anexo 3)

Temperatura (C)

Densidade (g/mL)

20

0,99823

Volume calibrado do recipiente =

massa da gua (g)


Densidade da gua a 20C (g/mL)

No exemplo: Volume calibrado do recipiente =

99,80
0,99823

= 99,97 mL

Consulte a tolerncia (na tabela 2 do Anexo 3).


Volume do recipiente
Tolerncia para o volume

100 mL
0,10 mL

Como pode-se observar, a variao permitida para volumes de 100 mL de +- 0,10 mL. Nesse exemplo, a
diferena entre o volume do balo e o volume encontrado (100 ml 99,97 ml) 0,03ml, o que permite concluir que
o balo est ajustado.
Para se fazer medidas de volume ou preparar reagentes, s utilize instrumentos volumtricos calibrados.

Ateno
Como as balanas, na maioria dos laboratrios, tem a capacidade de pesagem
de cerca de 600g, recomendado que os bales de 500 mL ou mais, sejam
calibrados por empresas especializadas.
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31

Autoclaves

Para que so utilizadas as autoclaves?


As autoclaves so equipamentos utilizados para promover a esterilizao com o vapor mido. Existem autoclaves horizontais e verticais, com mecanismo distintos de funcionamento. Nas autoclaves horizontais, a cmara de
autoclavao ou esterilizao recebe vapor d gua, que gerado em uma caldeira externa. A autoclave vertical gera
o vapor d gua dentro da cmara de esterilizao.
Veja a figura 1, a representao esquemtica de autoclave vertical.

Figura 1 Autoclave

Quais os cuidados que devem ser observados na utilizao das autoclaves?


Leia atentamente e siga as recomendaes do fabricante. Mantenha o manual acessvel para consulta.
Verifique se o manmetro est zerado, quando o equipamento estiver desligado e sem produo de vapores.
Distribua os materiais na autoclave, de forma a garantir a circulao do vapor. No esquea de que se a
autoclave estiver muito cheia, e o vapor no atingir todos os materiais, ocorrer prejuzo do processo de
esterilizao.
Antes de ligar o equipamento, verifique se as garras de fechamento esto firmemente apertadas.
Observe se o vapor est sendo liberado pela vlvula de exausto. Se voc detectar qualquer obstruo da
vlvula, desligue imediatamente o equipamento, aguarde seu resfriamento e s reinicie a autoclavao
Nunca abra a autoclave antes de total resfriamento.
Mantenha o cesto e a cmara de autoclavao sempre limpo. Lave-os com esponja de ao e sabo,
retirando resduos de sabo da gua, secando em seguida.
Em autoclaves verticais, tenha os seguintes cuidados adicionais:
Verifique sempre o nvel da gua, antes de iniciar o procedimento de autoclavao, e certifique-se de que a resistncia esteja submersa.
Troque a gua uma vez por semana.
Mantenha a vlvula de exausto de vapores aberta por pelo menos 15 minutos aps o inicio da fervura, para
garantir a total eliminao do ar residual.
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Importante

Reserve uma autoclave exclusivamente para esterilizao de material


contaminado (expurgo).

Como saber se a autoclavao est sendo eficiente?


A eficincia dos processos de autoclavao, em qualquer tipo de equipamento, pode ser avaliada por um
controle biolgico. Para esterilizaes por vapor d gua deve ser utilizado o Bacillus stearothermophilus, que pode
ser adquirido em diversas apresentaes comerciais.

Como fazer o controle biolgico, utilizando Bacillus stearothermophilus?


Para fazer esse controle, voc vai precisar de uma fita com Bacillus stearothermophilus, de um banho-maria a 56C
e do meio Triptic Soy Broth (TSB).
1. Coloque a fita dentro da cmara de autoclavao, junto com os materiais que sero autoclavados.
2. Retire-a ao final da autoclavao.
3. Numa capela de fluxo laminar prximo chama de bico Bunsen, abra cuidadosamente o envelope que
contm fita e coloque-a em meio de Triptic Soy Broth (TSB).
4. Incube em banho-maria, a uma temperatura de 56C, por 24 horas. A turvao do meio indica crescimento bacteriano e, consequentemente, falha no processo de autoclavao.

Quando utilizar o controle biolgico?


Esse controle deve ser feito mensalmente dentro da rotina de utilizao do equipamento e uma vez ao ms
com a autoclave cheia.
Sempre que ocorrer turvao no meio TSB,
chame a assistncia tcnica.

Como fazer monitoramento de autoclaves?


Chame a assistncia tcnica, para fazer a calibrao do equipamento, sempre que necessrio ou pelo menos
uma vez no ano.

Ateno
Todo procedimento de limpeza e manuteno de equipamentos ou instrumentos deve ser feito com o uso de Equipamentos de Proteo Individual.

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33

Anexo 1

Desinfetantes usados em laboratrios diluio e ao


Validade
Desinfetante

Diluio
(g/litro)*

Tempo de desinfeco (minutos)

Inativa

= 1 semana

Virus
lipdicos

Amplo
aspectro

Bactrias
vegetativas

Vrus
Lipdicos

Vrus
no
lipdicos

Esporos
bacterianos

Compostos
de Amnia
Quaternria

1 a 20

10

NE

Compostos
Fenlicos

10 a 50

10

NE

**

Hipocloridos b

5 a 10

10

30

0,075 a 16

10

30

770

10

NE

**

Isopropanol

700 a 850

10

NE

**

Soluo de
Formaldeido

20 a 80
(de gs)

10

30

Glutaraldeido

20

10

30

Iodofrmio b

Etanol

** Resultados variveis com vrus distintos


NE no eficaz
a = De desinfetante puro, armazenado em condies apropriadas
b = Halgeno disponvel

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Anexo 2

Desinfetantes usados em laboratrios


Caractersticas e aplicaes
Caractersticas Importantes
Desinfetante

Corrosivo

Resduos

Compostos de Amnia Quaternria

Inat. por
Subst.
Orgnica

Irritante
para
Pele

Irritante
para
Olhos

Possveis Aplicaes

Txico

Superfcie
de
trabalho

Superfcies
Sujas de
Vidro

Descont.
de
Equip. e
Sup.

Irritante
Respiratrio

Compostos Fenlicos

Hipocloritos b

Iodofrmio b

Etanol

Isopropanol

Soluo de Formaldeido

Glutaraldeido

Lquidos
para
descarte

Legenda
b = halgeno disponvel

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35

Anexo 3

Tabela 1 Distribuio da densidade absoluta da gua, segundo temperatura


Temperatura (C)

Densidade (g/ml)

Temperatura (C)

Densidade (g/ml)

0.99987

21

0,99802

1,00000

22

0,99780

10

0,99973

23

0,99756

11

0,99963

24

0,99732

12

0,99952

25

0,99707

13

0,99940

26

0,99681

14

0,99927

27

0,99654

15

0,99913

28

0,99626

16

0,99897

29

0,99597

17

0,99880

30

0,99567

18

0,99862

40

0,99224

19

0,99843

50

0,98807

20

0,99823

100

0,95838

Tabela 2 Distribuio dos limites de tolerncia para os diversos volumes


Volume do
recipiente
Tolerncia
Classe A

ml

10

25

50

100

200

250

500

1000

2000

ml

0,01

0,01

0,02

0,02

0,04

0,06

0,10

0,03

0,05

0,08

0,11

0,15

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Anexo 4
Monitoramento de equipamentos
Controle de geladeira e freezer de laboratrio
Instituio

Laboratrio

Equipamento n

Ms

Responsvel pelo CQ

Responsvel pelo Laboratrio


Primeira Leitura

Dia
Hora

Temperatura
Mxima

Temperatura
Mnima

Ano
Segunda leitura

Temperatura
Pontual

Hora

Temperatura
Pontual

Observaes

01
02
03
04
05
06
07
08
09
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31

Data/ Aes Corretivas ou preventivas

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Anexo 5
Monitoramento de equipamentos - Controle de geladeira e freezer de laboratrio
Instituio

Laboratrio

Equipamento n

Ms

Responsvel pelo CQ

Responsvel pelo Laboratrio


Segunda
leitura

Primeira Leitura
Dia
Hora

Temperatura
Mxima

Temperatura
Mnima

Temperatura
Pontual

Hora

Temperatura
Pontual

Terceira
Leitura

Hora

Temperatura
Pontual

Ano

Quarta
Leitura

Hora

Temperatura
Pontual

Quinta
Leitura

Hora

Temperatura
Pontual

Sexta
Leitura

Hora

Temperatura
Pontual

01
02
03
04
05
06
07
08
09
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31

Data/Aes corretivas ou preventivas


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Anexo 6

Monitoramento de equipamentos - Controle de banho-maria e termobloco


Instituio

Laboratrio

Equipamento n

Ms

Responsvel pelo CQ

Responsvel pelo Laboratrio

Nvel de gua
Contaminaes e
Depsitos:
Dia

1 - adequado

Intervenes:

1 Limpeza
2 Manuteno

2 - Baixo

3 Acrscimo dgua

S Sim

4 Ajuste do termostato

N - No

Temperatura do Dia

Ano

5 Outros (indicar)
Nvel da gua

Depsitos e Contaminaes

Intervenes

01
02
03
04
05
06
07
08
09
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
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Anexo 7

Monitoramento de equipamentos - Controle de estufa


Instituio

Laboratrio

Equipamento n

Ms

Responsvel pelo CQ

Responsvel pelo Laboratrio


Primeira Leitura

Dia

Hora

Temperatura
Mxima

Temperatura
Mnima

Ano
Segunda leitura

Temperatura
Pontual

Hora

Temperatura
Pontual

Observaes

01
02
03
04
05
06
07
08
09
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31

Data/ Aes Corretivas ou preventivas


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Referncias bibliogrficas

BABOR, J.A. & AZNREZ, J.I. Qumica General Moderna. Editorial Marin & Cia., 7 edicin, 1964, pp.324.
ELDER, B.L.; HANSEN, S.A.; KELLOG, J.A.; MARSIK, F.J. &
ZABRANSKI, R.J. Verification and Validation of Procedures in the Clinical Microbiology Laboratory. 1997. American
Society of Microbiology.
KAPLAN, L.A. & PESCE, A. J. Clinical Quemistry: theory, anlisis and correlation. Mosby-Year Book Inc., St. Louis, 3rd.
Edition, 1996, chapter 1, pp.3-44.
Laboratory Biosafety Manual. Second Edition. World health Organization. Ginebra. 1993.
Mantenimiento y Reparacin del Equipo de Laboratorio, Diagnstico por Imagen y Hospital. Organizacin Mundial
de la Salud. Ginebra. 1996.
Ministerio de Salud. Portara 1.376 del 19/11/93. Diario Oficial n 229 del 02/12/93. Seccin 1.
Portara MERCOSUR GMS/Res. N 130/96.
Quality Control in Microbiology. U.S. Department of Health & Human Services. Public Health Service. Centres for
Disease Control Public Health Practice Program Office. Atlanta, Georgia, 1987. Reprinted August 1990.

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Crditos e autoria
Ministrio da Sade
Secretaria de Vigilncia em Sade
Departamento de DST, Aids e Hepatites Virais
Unidade de Laboratrio - D-DST/AIDS-HV
Coordenao Geral de Sangue e Hemoderivados

Coordenadora de Produo do Projeto TELELAB


Mirian Franchini
Autores:
Cristine Ferreira
Edward Zorzo
Luiz Fernando de Goes Siqueira
Maria Cndida de Souza Dantas
Maria do Carmo Gomes Pinheiro
Maria Luiza Bazzo
Maria Lcia Ricciotti Ribinik (pedagogia)

Equipamentos - Utilizao e monitoramento em unidades hemoterpicas


e laboratrios de sade pblica - Braslia: Ministrio da Sade, Departamento de DST, Aids e Hepatites Virais. 2001.
88 p. : il. (Srie TELELAB)
1. Equipamentos - Utilizao e monitoramento em unidades
hemoterpicas e laboratrios de sade pblica I. Departamento de
DST, Aids e Hepatites Virais (Brasil) II. Srie TELELAB
Equipamentos - Utilizao e monitoramento em Unidades Hemoterpicas e Laboratrios de Sade Pblica

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