1.

TEMA: Fotocolorimetra
2. OBJETIVOS:
Determinar el funcionamiento del espectrofotmetro
Establecer la longitud de onda de mxima absorbancia del KMnO4 en solucin
Obtener los siguientes grficos
A vs C
A vs (para el estndar 3)
A vs (para todos los estndares a 530 y 620nm; dos grficos)
%T vs C (normal y semilogartmico)
Determinar el contenido de manganeso en una muestra de suelo
3. FUNDAMENTO TERICO
3.1. Fundamento
El manganeso presente en el suelo se extrae mediante una fusin con KHSO 4, luego por
oxidacin con peryodato de potasio, el color resultante de permanganato de potasio
obtenido se compara con estndares y se determina su absorbancia a una longitud de
onda de 526nm donde se produce su mximo de absorcin.
4. CONSULTA
4.1 Fundamento de la absorcin molecular de la radiacin electromagntica por qu las
sustancias presentan coloracin?
El color que percibimos por la luz es inmaterial, proveniente de los rayos del sol o
proyectores artificiales. Como referencia de luz se toma los rayos que provienen del sol al
medioda. Los colores que obtenemos por la descomposicin de la luz solar o
artificialmente, utilizando focos emisores de luz de una determinada longitud de onda, se
denominan colores aditivos.
En la retina del ojo humano existen tres clases diferentes de frecuencias fotolumnicas que
perciben las sensaciones del color. Los colores se perciben porque los objetos tienen la
propiedad de absorber determinada cantidad de luz y rechazar otra.
El color que percibimos de un objeto es el rayo de luz que refleja. As, un objeto es rojo
porque absorbe los rayos azules y amarillos y rechaza los rojos y por tanto, el
procesamiento que hace nuestro cerebro para este tipo de rayos, es lo que denominamos
color rojo. Si los rayos absorbidos fueran rojos y rechazara los azules y amarillos, el color
que percibiramos sera el verde. Las superficies que las vemos de color negras es porque
absorben todos los rayos y, por lo tanto no reflejan ninguno por lo que hay una ausencia
de color. Los objetos blancos reflejan todos los colores, o sea, los rechazan. Manteniendo
las premisas anteriores, si a un color-luz aadimos otro color-luz, la mezcla resultante ha
de darnos, forzosamente, un color-luz ms luminoso, ms claro.

4.2 Definicin de absorbancia y transmitancia

Transmitancia.- es la relacin entre el poder de radiacin transmitido por una muestra (P)
y el poder de radiacin que incide sobre el blanco (Po), ambos medidos en la misma
posicin del espectro y en la misma rendija. Se supone que el haz es de radiacin paralela
y que incide sobre las superficies planas y paralelas de la muestra, formando ngulos
rectos.

Absorbancia.- es el logaritmo en base 10 del recproco de la transmitancia T, en el que el

disolvente puro es el material de referencia. La absorbancia de un medio aumenta cuando
la atenuacin del haz se hace mayor.

4.3 Diseo y funcionamiento del colormetro de Duboscq, fotmetro de filtro

Colormetro de Duboscq.- La luz procedente de una fuente adecuada tal como luz solar
difusa o de una lmpara de tungsteno, se refleja en los cilindros colorimtricos que
contiene las disoluciones mediante un espejo. Los cilindros estn montados de tal forma
que se puedan mover verticalmente por medio de un tornillo de cremallera. Los cilindros
se elevan hasta que los mbolos se sumerjan bien en la solucin. Uno de los cilindros se
fija en una posicin conveniente y el otro se sube o baja hasta que los colores en las dos
mitades del ocular sean equiparables. El espesor de cada solucin bajo el mbolo se lee en
la escala impresa en los acoplamientos del cilindro. Normalmente se halla un promedio de
varias medidas para hacer los clculos.

Fotmetro de filtro.- Los fotmetros constituyen una herramienta sencilla y relativamente

barata para realizar anlisis por absorcin. Los fotmetros de filtros son, a menudo, ms
convenientes, robustos y fciles de mantener y utilizar que los espectrofotmetros ms
sofisticados.
Adems, es caracterstico de los fotmetros su elevado rendimiento energtico, y por ello,
la buena relacin seal/ruido, incluso con detectores y circuitos relativamente sencillos y
baratos. Cuando el mtodo no requiere una alta pureza espectral (como sucede con
frecuencia) los anlisis cuantitativos se pueden realizar con la misma exactitud.
Instrumento de haz sencillo.- formado por una lmpara de filamento de wolframio, una
lente para proporcionar un haz de luz paralelo, un filtro y una clula fotovoltaica. La
corriente producida se indica con un microampermetro en cuya superficie lleva una
escala lineal de 0 a 100. La medida del porcentaje T supone un ajuste mecnico o elctrico
de la aguja medidora mientras que el obturador interrumpe el haz incidente. En algunos
instrumentos, el ajuste para obtener la respuesta correspondiente a la escala completa
(100 por 100T) cuando se sita al disolvente en la trayectoria de la luz, necesita cambiar el
potencial aplicado a la lmpara. En otros, se modifica el tamao de apertura de un
diafragma situado en la trayectoria de la luz. Como la seal de la clula fotovoltaica es
lineal respecto a la potencia de la radiacin que recibe, la lectura de la escala, cuando es la
muestra la que se encuentra en la trayectoria de la luz, ser el porcentaje de
transmitancia, es decir, el porcentaje de la escala total.
Para obtener directamente el valor de la absorbancia de la disolucin se sustituye esta
escala por otra logartmica.
Instrumento de doble haz.- Aqu, el haz de luz se divide mediante un espejo semiplateado
que transmite aproximadamente el 50 por 100 de la radiacin que incide sobre l y refleja

el otro 50 por 100. Un haz pasa a travs de la muestra y de all se dirige a la clula
fotovoltaica; el otro pasa a travs del disolvente y se dirige a un detector similar. Las
seales de salida elctrica de las clulas fotovoltaicas pasan a travs de resistencias
variables, una de ellas est calibrada como una escala de transmitancia en unidades
lineales de 0 a 100. Entre las dos resistencias se conecta un medidor de corriente sensible
que sirve como detector nulo. Cuando la diferencia de potencial entre AB es igual a
aqulla entre CD, no pasa corriente a travs del detector nulo; bajo cualquier otra
circunstancia se indica una corriente. Al principio, el contacto izquierdo se ajusta a 0 por
100 T, el obturador se cierra y el indicador del detector nulo se lleva a cero
mecnicamente. En estas condiciones la marca central corresponde a cero de corriente. A
continuacin se coloca el disolvente en las dos cubetas, y el contacto A se ajusta a 100
(ajuste del 100 por 100 T); con el obturador abierto, se ajusta el contacto C hasta que se
obtenga corriente cero. Al reemplazar el disolvente de una de las cubetas por la muestra
se observa un descenso en la potencia radiante que llega a la fotoclula de trabajo y el
correspondiente descenso en el potencial de salida; el galvanmetro seala una corriente.
La prdida del equilibrio se compensa moviendo A hacia un valor inferior. Alcanzado de
nuevo el equilibrio, el porcentaje de transmitancia se lee directamente en la escala.

4.4 Mtodos de medicin de la absorcin de la radiacin

Los mtodos de operar es colorimetra y espectrofotometra se basan en la comparacin
de una muestra desconocida con sustancias patrones.

Mtodo de las series patrn.- Se prepara una serie de disoluciones patrn del
constituyente que se analiza; la concentracin de las soluciones difiere en una cantidad
adecuada. Se desarrolla el color de la muestra desconocida del mismo modo que en las
disoluciones patrn y la desconocida se compara con los patrones. Esta comparacin
puede ser por:
Comparacin Directa.- la muestra y las soluciones patrn se colocan en tubos de iguales
caractersticas y el analizador es el ojo humano
Comparacin indirecta.- el color se mide como absorbancia o transmitancia usando algn
tipo de fototransformador, se elabora una curva de calibracin, y mediante regresin
lineal encontramos la concentracin de la muestra.
Mtodo de compensacin.- El mtodo de compensacin es utilizado en el colormetro de
Duboscq, la exactitud es del orden del 2 al 5% aunque depende de muchos factores. La
muestra desconocida, que debe contener el reactivo necesario para el desarrollo del
color, se coloca en un tubo o cilindro que posee la base transparente. Una disolucin
patrn de la misma sustancia y con el color desarrollado de igual modo, se coloca en un
segundo tubo o cilindro, idntico al anterior. La profundidad (espesor, camino ptico) de
la disolucin patrn se fija en un valor conveniente y la profundidad de la disolucin
desconocida se vara hasta que la luz situada bajo los tubos se observe, mirando desde
arriba con idntica intensidad (transmisin). Al ser la misma sustancia la que est presente
en los tubos que contienen la disolucin patrn y la desconocida, la absortividad molar es
la misma para ambas. Las transmitancias observadas son idnticas, porque hay el mismo
nmero de partculas absorbentes en el camino ptico. Conociendo la concentracin de la
solucin patrn, y se mide la distancia del camino ptico para la muestra y calculamos la
concentracin de la misma:

5. METODOLOGA
5.1. Materiales y Reactivos
Tubos de Nessler
KHSO4
Balanza analtica
H2SO4 0.25N
Vasos de precipitacin
H3PO4 0.25N
Balones aforados
Mezcla cida (H2SO4 + H3PO4)
Bao de agua
Agua estabilizante (mezcla cida + 0.1gKIO4)
4
KMnO 0.1N
KIO4
5.2. Procedimiento
5.2.1 Estndares
Preparar una serie de estndares como se indican en la tabla 6-1
5.2.2 Realizacin de Lecturas

Comparar visualmente el juego de estndares en los tubos Nessler, comprar la muestra

obtenida con estos estndares.
Determinar la absorbancia o el porcentaje de transmitancia del estndar en el fotmetro
eligiendo los filtros de 530 y 620nm.
Determinar la absorbancia o el porcentaje de transmitancia del estndar nmero tres
utilizando filtro de 420, 470, 530, 620, 670nm
En el espectrofotmetro, calibrar a 56nm de longitud de onda y medir la absorbancia y o
el % de transmitancia de los estndares de la muestra.
5.2.3 Muestra
Prepara la muestra de suelo segn las siguientes instrucciones
Pesar en la balanza analtica alrededor de 0.1g de suelo, pasar por un tubo de ensayo
pirex seco y agregar 0.5g de KHSO4, mezclar y fundir en el mechero.
Calentar con 5 ml de H2SO4 0.25N en bao Mara, filtrar y luego lavar con 5 ml de mezcla
cida. Agregar 0.25g de KIO4, llevar a ebullicin por 30 segundos en un mechero SIN
DERRAMAR LA MUESTRA.
Calentar a bao Mara por 15 minutos y diluir a 50ml con agua estabilizante. El color
resultante comparar con los estndares. De ser necesario hay que realizar diluciones.
Hacer lecturas con el estndar ms cercano en el colormetro de Duboscq, luego
determinar la absorbancia o la transmitancia de la muestra a las longitudes de onda de
530 y 620nm en el fotocolormetro y, en el espectrofotmetro realizar las lecturas a
526nm.