Bases Genticas do Cncer:

CNCER:
Crescimento desordenado de clulas que invadem os tecidos e rgos, podendo
espalhar-se (metstase) para outras regies do corpo.
Dividindo-se rapidamente, estas clulas tendem a ser muito agressivas e incontrolveis,
determinando a formao de tumores (acmulo de clulas cancerosas) ou neoplasias malignas.
Por outro lado, um tumor benigno significa simplesmente uma massa localizada de clulas que
se multiplicam vagarosamente e se assemelham ao seu tecido original, raramente constituindo
um risco de vida.
Mutaes gnicas

Desregulao do ciclo celular

Proliferao celular descontrolada = Cncer

Oncogenes
Genes supressores de tumor
Genes de reparo do DNA
GENES QUE CONTROLAM O CICLO CELULAR E APOPTOSE:

Proto-oncogenes : ativao do ciclo celular

proliferao celular

Genes supressores: bloqueio do ciclo celular: perda de funo

proliferao celular

GENES DE REPARO DO DNA: mutaes em genes celulares (oncogenes e genes supressores)

INSTABILIDADE GENMICA

Danos no DNA

Bloqueio do ciclo celular (Checkpoint)

Reparo do DNA
Apoptose

Protena ATM

Identifica leso no DNA

Sinal para p53 ativar os genes de reparo DNA

ESQUEMA GERAL PARA MECANISMOS DE ONCOGNESE:

Pela ativao de proto-oncogene,

Mutao ou perda de genes supressores tumorais,

Ativao de genes anti-apoptticos ou perda de genes pr-apoptticos

PROTO-ONCOGENE:
Genes promotores do crescimento e diferenciao celulares contraparte normal de
um oncogene (sem mutao).
Mutao Dominante Ganho de funo
ONCOGENE:
Genes mutados cuja expresso alterada estimula a proliferao celular de forma
anormal.
Quais so as funes dos produtos dos oncogenes?
Componentes da maquinaria que coordenam o ciclo celular, estimulam a proliferao celular:

Fatores de crescimento: super produo crescimento continuado

Receptores: mutao ou amplificao de genes que codificam receptores aumenta a
sinalizao.
Transdutores de sinais: mutaes em genes que codificam mensageiros secundrios
Fatores de transcrio: mutao induz ativao constante de genes imediatos e
crescimento celular.

COMO OS ONCOGENES TORNAM-SE ATIVADOS E CAUSAM CNCER EM CLULAS HUMANAS?

Mutao de Ponto: protena estrutural e funcionalmente aberrante

Aberraes Cromossmicas (Rearranjos Cromossmicos): protena quimrica
ou expresso elevada
Amplificao Gnica: super expresso de protena estruturalmente normal
Insero de DNA viral: insero de oncogenes-virais

MUTAO DE PONTO: ONCOGENE H-RAS

Mutao do aminocido 12: glicina valina (cncer bexiga, mama, clon)

Causa mudana na conformao da protena ras que no pode converter GTP
GDP, que permanece ativado induzindo a proliferao celular progresso
para o cncer

REARRANJOS CROMOSSMICOS

Espresso desregulada de proto-oncogenes

Translocao cromossmica:
Leucemia mielide crnica: t(9;22)(q34;q11) protena quimrica (truncada) abl/bcr
atividade de quinase aumentada
Linfoma de Burkitt: t(8;14): gene c-myc ativado expressado em nveis elevados
contribue para o cncer
AMPLIFICAO

Aumento do nmero de cpias (dezenas-centenas de vezes) de oncogenes

(erros de replicao do DNA): c-Myc, Her-2/Neu, CCND1
Double minutes (DM): DNA circular extracromossmico
Regies Homogeneamente Coradas (HSR): intracromossmico

GENES SUPRESSORES DE TUMOR

Regulam negativamente o crescimento celular e desenvolvimento do tumor:

quando mutados ou deletados o controle do ciclo celular perdido.
Padro Recessivo Perda de Funo

Experimentos com fuso celular: clulas normais x clulas tumorais

clulas tumorais hbridas voltam ao estado normal.

O CNCER DESENVOLVE POR EVOLUO CLONAL

Desenvolve de uma nica clula alterada (cerca de 10 ou mais mutaes seleo)

Iniciao: alterao gentica de uma clula (mutao) vantagem de crescimento ou

sobrevivncia
Promoo do tumor: agentes como hormnios ou trauma, ou mudanas que aumentam a
evoluo clonal, estimulam o crescimento celular.
Evoluo Clonal: base para o desenvolvimento do cncer (anos). Evoluo continuada
de mais clulas malignas que crescem ou sobrevivem melhor desenvolvimento e
progresso tumoral.
Progresso tumoral: desenvolvimento do cncer requer pequenos mltiplos passos
(mutao e seleo). Cada passo confere a clula uma vantagem adicional de
sobrevivncia ou crescimento (necessidade reduzida para fatores de crescimento ou
resistncia a apoptose)

Gentica do Sistema Imune / Imunogentica

A sntese de componentes do sistema imunolgico est intimamente ligada a expresso
gentica.

SISTEMA IMUNOLGICO:
Sistema composto por clulas, barreiras biolgicas e molculas especficas; responsveis pela
deteco, preveno e eliminao de invasores do nosso organismo.
COMPLEXO DE HISTOCOMPATIBILIDADE PRINCIPAL MHC

Inclui uma srie de mais de 200 genes que esto na regio do brao curto do
cromossomo 6.
Estas molculas tem a capacidade de formar complexos com peptdeos exgenos.
So molculas apresentadoras de antgenos.

TIPOS DE MHC
Classe I: Formam complexos com peptdeos que so reconhecidos por linfcitos T8
Classe II: So mais encontrados nas clulas apresentadoras de antgenos (APCs) e so
reconhecidas por linfcitos T4
Classe III: codificam enzimas do sistema complemento
Os loci dos MHC so os mais polimrficos dos seres humanos, expressando centenas de
alelos diferentes, resultando numa grande variabilidade de molculas MHC.
ANTGENO
Antgeno uma substncia, geralmente uma protena, com capacidade de induzir uma resposta
imune especfica. Ele pode ser uma substncia geneticamente determinada na superfcie de uma
hemcia, de uma clula viva nucleada ou uma bactria, ou pode no estar relacionado a
nenhuma clula viva.
chamado de endgeno se for produzido no interior da clula do hospedeiro (por exemplo, o
vrus, um parasita intracelular) e exgeno se for produzido fora dela (por exemplo, um fungo,
uma bactria, etc.)
Sendo em geral muito grande, o antgeno apresenta eptopos ou determinantes antignicos que
so os locais em que ocorre o contato do antgeno com o anticorpo.
ANTICORPO
So as protenas do soro, do tipo gamaglobulina, denominadas imunoglobulinas.

Apresenta partopos ou stios combinatrios que so stios de ligao antgeno-anticorpo. As

reaes antgeno-anticorpo dependem de stios mutuamente ajustveis e especficos, em um
sistema de chave-fechadura.
GENTICA DA SNTESE DOS ANTICORPOS:

Teoria Um Gene- Um Anticorpo: Impossvel

Hoje: Vrios mecanismos so responsveis por gerar a diversidade de anticorpos

1.Mltiplos genes de Ig na linhagem germinativa: para cada cadeia H e L uma pessoa

possui mais de 80 segmentos V e 6 J diferentes localizados continuamente na linhagem
germinativa; existem mais de 30 segmentos D para as cadeias H.
2. Recombinao Somtica (VDJ): nos linfcitos B maduros h recombinases que
quebram o DNA entre os segm. V e D e aps so ligados por ligases com novos
rearranjos - o processo de corte e reunio ou recombinao somtica.
3. Diversidade Juncional: aps a montagem das novas regies V,D e J ocorrem novas
delees ou inseres de nucleotdeos na reg. J.
4. Hipermutao Somtica: aps a estimulao pelo antgeno os linfcitos B sofrem
uma dif.sedundria e a taxa de mutao dos genes V,D E J aumenta para aprox. 10-3
por base/diviso.
5. Mltiplas combinaes de cadeias H e L: h combinao aleatria de cadeias H e L
na montagem da Ig.
GRUPOS SANGUNEOS
Os grupos sanguneos so antgenos situados na superfcie das hemcias. Constituem,
juntamente com as protenas do soro e enzimas dos eritrcitos, polimorfismos importantes como
marcadores genticos. So clinicamente essenciais em transfuses de sangue, transplantes de
rgos e obstetrcia, na incompatibilidade materno-fetal. Alm disso, so usados em medicina
legal para identificao e na investigao de paternidade.
Atualmente so conhecidos mais de 20 sistemas de grupos sanguneos diferentes. Alguns so
muito bem estudados, outros pouco compreendidos. Dentre os vrios grupos sanguneos, sero
abordados aqui os mais importantes.

Reao de Polimerase em Cadeia (PCR)

A PCR permite amplificar um gene de cpia nica em milhes de cpias, a partir de
uma pequena quantidade do DNA original (DNA molde).
O pr-requisito essencial a determinao da regio do gene que ser amplificada. Em
seguida, so desenhados e sintetizados um par de oligonucleotdeos iniciadores (primers)
complementares s regies flanqueadoras da sequncia a ser amplificada em cada fita do DNA.
Geralmente, primers especficos possuem tamanho entre 17 a 30 nucleotdeos, teor de GC entre
40 a 60% e no so auto-complementares ou complementares entre si.
O processo composto de trs etapas: desnaturao, hibridizao (anelamento) e
extenso, que juntas correspondem a um ciclo da reao. Normalmente so realizados de 25 a
35 ciclos para cada reao na qual a taxa de amplificao exponencial, 2 n de ciclos.
1) DESNATURAO: a 94 C, as fitas do DNA so separadas.
2) HIBRIDIZAO: geralmente entre 45 a 65 C, os primers hibridizam com suas
sequncias complementares no DNA molde desnaturado.
3) EXTENSO: a 72 C, a DNA Polimerase, na presena ons Mg2+ e dNTPs
(desoxinucleotdeos), sintetiza uma nova fita de DNA a partir da extremidade 3 OH do primer
que se encontra hibridizado ao DNA molde. A descoberta da enzima Taq DNA Polimerase,
oriunda da bactria Thermus aquaticus, que vive em fontes hidrotermais, permitiu automatizar o
processo utilizando-se os termocicladores. A enzima Taq possui uma atividade tima a 72 C,
mas permanece estvel at 94 C.
Alm da amplificao para clonagem molecular, a tcnica de PCR possui outras
aplicaes como: teste de paternidade, diagnstico de doenas genticas e infecciosas, medicina
forense, testes de organismos transgnicos, anlise de polimorfismo de DNA, sequenciamento
de DNA e vrias aplicaes no uso das metodologias do DNA recombinante.

Diagnstico de Doenas Genticas

AMNIOCENTESE
A amniocentese um exame invasivo no qual uma amostra do lquido amnitico
retirada de dentro do tero e examinada em laboratrio, para determinar se o beb possui algum
problema de sade. Trata-se de um exame diagnstico, o que significa que capaz de dizer
praticamente com certeza se o beb tem ou no determinado problema. A amniocentese um
dos grandes avanos no acompanhamento da gravidez. Alm de diagnosticar sndromes
cromossmicas (como a sndrome de Down), tambm revela o sexo do beb e a maturidade dos
pulmes dele.
Que tipo de problema a amniocentese detecta?
O exame capaz de identificar centenas de sndromes:

Problemas cromossmicos como a sndrome de Down e a trissomia do

cromossomo 18.

Defeitos congnitos no tubo neural como espinha bfida e anencefalia (que tambm so
detectveis mais tarde pelo ultra-som).

A amniocentese tambm revela se h incompatibilidade do fator Rh entre a me e o beb

(se o beb for Rh positivo e a me Rh negativo), e, mais no final da gravidez, se os pulmes do
beb j esto maduros, caso os mdicos estejam pensando em antecipar o parto. O exame, no
entanto, no diagnostica todos os tipos de anormalidades. Um dos exemplos que s pela
amniocentese no d para saber se a criana tem lbio leporino ou fenda palatina. Esses
problemas
podem
ser
diagnosticados
por
uma
ultrassonografia
detalhada.