INDICE

AGRADECIMIENTOS ..................................................................................................................................... 2
INTRODUCCIN ............................................................................................................................................. 3
CAPTULO I: DISEO DE LA INVESTIGACIN ....................................................................................... 6
1.1

Descripcin de la Realidad Problemtica .................................................................................... 6

1.2

Formulacin del Problema. ............................................................................................................ 6

1.3

Justificacin e importancia de la Investigacin ........................................................................... 6

1.4 Objetivo de la Investigacin ................................................................................................................ 7

1.4.1 Objetivo General ............................................................................................................................ 7
1.5 Hiptesis de la investigacin. .............................................................................................................. 7
1.6 Variables e Indicadores ....................................................................................................................... 7
1.6.1 Variable Independiente ................................................................................................................. 7
1.6.2 Variable Dependiente ................................................................................................................... 7
1.7 Tipo y Nivel de la Investigacin .......................................................................................................... 7
CAPTULO II: MARCO TERICO ................................................................................................................ 8
2.1 Antecedentes de la Investigacin....................................................................................................... 8
2.2 Marco Histrico. .................................................................................................................................... 8
2.3 Marco Conceptual ................................................................................................................................. 9
CAPITULO III: CARACTERIZACION DEL PET ....................................................................................... 11
3.1 Propiedades fsicas ............................................................................................................................ 11
3.2 Propiedades y Caractersticas .......................................................................................................... 12
3.3 Aspectos del uso de tereftalato de polietileno ................................................................................ 12
3.4 Degradacin ........................................................................................................................................ 13
3.5 Degradacin mediante proceso qumico......................................................................................... 13
3.6 Degradacin natural del PET ............................................................................................................ 14

Biodegradacin de xenobioticos con la bacteria Pseudomona

AGRADECIMIENTOS
A mis maestros, gracias por su tiempo, por su apoyo as como por la sabidura que me
transmitieron en el desarrollo de mi formacin profesional, en especial a la Profesora Valdivia, por
haber guiado el desarrollo de este trabajo y llegar a la culminacin del mismo.

INTRODUCCIN
Desde el inicio de la humanidad el hombre ha interactuado con el ambiente y lo ha modificado
para satisfacer sus necesidades. En dicho proceso el hombre ha transformado una gran cantidad
de materias primas en objetos ms complejos que dejan como resultado un gran nmero de
desechos que no han podido ser reintegrados de forma natural al ambiente.
La produccin de desechos, conocidos coloquialmente como basura, asciende a 2 billones de
toneladas anuales. Tan solo en Mxico, cada habitante genera un kilogramo de basura al da
(INE, 2005).
Uno de los desechos ms comunes es el plstico. Esto se debe en gran medida a que muchos de
los objetos utilizados en nuestra vida diaria estn constituidos en su totalidad por este material.
Tan solo en la industria de los alimentos podremos encontrar que muchos de los empaques son
plsticos.
Su peligrosidad reside en la cantidad que se produce y desecha anualmente a nivel global. Es tal
la demanda de plsticos en la industria que la sobreproduccin de ste ha hecho insuficientes los
mtodos de reciclaje y reuso, trayendo como consecuencia contaminacin, tanto por el volumen,
como por tiempo de degradacin, como por los lixiviados que se generan, derivados del proceso.
En Mxico se produce 2,164.50 miles de toneladas de plstico anualmente, lo que representa el
11% de la produccin total de basura. La magnitud de dichos datos se puede comprender al
conocer que cada ao se producen 9 mil millones de botellas de plstico, de las cuales 900
millones contaminan bosques y ros y tan slo es reciclado el 0.4% del total producido
(SEMARNAT, 2008).
Pero a pesar que las botellas de plstico son una importante fuente de contaminacin por el
espacio que ocupan, no debe olvidarse el dao que producen las bolsas de plstico, que, aunque
no son tan voluminosas, son abundantes (entre 500 mil millones y un billn consumidas y

desechadas anualmente en Mxico) y terriblemente txicas al combinarse con desechos

orgnicos (INE, 2005).
En nuestro pas se acostumbra tirar la basura envuelta en bolsas, lo cual aumenta la dificultad de
reciclarlas y/o darles un tratamiento adecuado que evite que al fotodegradarse contaminen el
suelo y los mantos freticos.
Los desechos han sido una realidad desde la formacin de la Tierra y su descomposicin es un
proceso que se da de forma natural como parte de la cadena de formacin y regeneracin de
materia. Sin embargo, se ha excedido dicha capacidad de la naturaleza para procesar los
contaminantes. Es por ello, que es fundamental encontrar un mtodo natural que degrade los
desechos a fin de optimizarlo por los medios que nos dan el entendimiento y el manejo los
procesos que ya existen en la naturaleza. En la biorremediacin podemos encontrar la solucin a
dicho problema, ya que sta se basa en el uso de sistemas biolgicos para la reduccin de
sustancias txicas y contaminantes, pretendiendo acelerar ciclos naturales mediante la
combinacin de colonias y cambios genticos en enzimas y bacterias (Manahan, 2007).
La bsqueda de mtodos de biorremediacin que solucionarn, en especfico, los vertidos de
petrleo, llev a la deteccin de bacterias capaces de degradar algunos componentes de los
hidrocarburos. Al conjunto de bacterias degradantes encontradas en los vertidos de petrleo se
les conoce como tapete microbiano, entre las que se pueden encontrar Micrococus,
Mycobacterium, Nocardia, y Pseudomonas. En stas ltimas basaremos nuestro trabajo debido a
la rapidez con las que logran oxidar diversos compuestos (Manahan, 2007).
El carbn es el principal componente de los seres vivos. Pero adems, es fuente principal de
alimento para algunos organismos como las bacterias mencionadas con anterioridad. Es de ah de
donde proviene su poder degradante. Los hidrocarburos, el polietileno en especfico, tienen una
serie de cadenas complejas de carbn que comparten algunas similitudes con las cadenas de
carbn de materia orgnica.

Por ello, basndose en la existencia de las cadenas de carbn en el polietileno, si se somete a la

bacteria Pseudomona, que ya ha sido estudiada con anterioridad y sealada como degradante de
petrleo, a un medio cuya nica fuente de carbn sea un derivado de ste, el polietileno, la
bacteria tendr que degradarlo como parte de su metabolismo, logrando as su descomposicin.

CAPTULO I: DISEO DE LA INVESTIGACIN

1.1 Descripcin de la Realidad Problemtica
El pet es usado en botellas y envases desechables , despus de ser usados en la mayora de los
casos el usuario desecha la botella vaca a la basura y cada envase fabricado con PET tarda
aproximadamente 500 aos en degradarse. Esto causa una gran contaminacin en la tierra y en el
agua.
Actualmente, los desechos de estas botellas constituyen un problema medioambiental debido a la
gran cantidad acumulada ya que, a pesar de no ser un material nocivo, poseen gran resistencia a
la degradacin. Debido a esto, son importantes los mtodos para el reciclaje de este material,
entre los cuales se encuentran el reciclaje mecnico y el qumico.
1.2 Formulacin del Problema.
Evaluar la accin de degradacin la bacteria Pseudomona que ya ha sido estudiada con
anterioridad y sealada como degradante de petrleo, en un medio mnimo donde la nica fuente
de carbono necesaria sea un derivado de ste, el polietileno, a fin de que sea degradado de forma
ptima y sin repercusiones para el ambiente.
1.3 Justificacin e importancia de la Investigacin
El polietileno es uno de los plsticos que ms contamina el ambiente debido a que es utilizado de
forma indiscriminada. Adems, su proceso natural de degradacin es lento ya que le toma entre
50 y 300 aos completarlo y se producen una gran cantidad de lixiviados. La biorremediacin es
una prctica en la que se ha encontrado que ciertos tipos de bacterias son capaces de acelerar la
descomposicin de estos derivados de carbono con un mnimo de desechos dainos. Las
bacterias Pseudomonas son capaces de degradar estos productos ya que forman parte de su
nutricin. Por ello, se decidi evaluar su efectividad para lo que se aislaron colonias de
Pseudomonas a partir de muestras de agua estancada y suelo procedentes de tiraderos de
basura, reportadas como un reservorio de estos organismos, mismos que posteriormente fueron

cultivados en un medio donde el polietileno fue la nica fuente de carbn. Es as como las
Pseudomonas, no teniendo otra fuente de carbn en su dieta, degradaron el polietileno,
reduciendo en un 58% el peso original de la muestra, en un tiempo de siete semanas. Este
procedimiento result ser muy efectivo al compararse con el periodo prolongado de tiempo que
requiere una bolsa de plstico para degradarse sin accin de ninguna prctica de biorremediacin.
Si se decidiera implementar sta como una tcnica para la degradacin de desechos plsticos,
sera necesario separar y triturar las bolsas dejndolas como nica fuente de carbono, para
someterse a la accin degradante de tapetes microbianos que incluyeran bacterias Pseudomonas.

1.4 Objetivo de la Investigacin

1.4.1 Objetivo General
Que la bacteria Pseudomona se evaluada dentro de un laboratorio, como agente degradador de
uno de los derivados del petrleo que mayor impacto ecolgico tiene, el polietileno, basndose en
los principios generales de la biorremediacin.
1.5 Hiptesis de la investigacin.
Si se somete a la bacteria Pseudomona sp, a un medio mnimo, teniendo como nica fuente de
carbono el polietileno, entonces terminar por degradarlo como parte natural de su metabolismo.
1.6 Variables e Indicadores
1.6.1 Variable Independiente
Tereftalato de polietileno (pet)
1.6.2 Variable Dependiente
La bacteria Pseudomona sp.
1.7 Tipo y Nivel de la Investigacin
Descriptiva

CAPTULO II: MARCO TERICO

2.1 Antecedentes de la Investigacin
TEMA
EVALUACIN DE LA BACTERIA PSEUDOMONA COMO DEGRADADOR DEL POLIETILENO
UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
TESIS
PARA OPTAR EL GRADO DE MAGISTER EN:
BIOTECNOLOGA
AUTOR
ROCO MILUSKA ESCALANTE GUZMN
LIMA PER
2002
2.2 Marco Histrico.
El exceso de basura generado da con da, es uno de los problemas con ms repercusiones a
largo plazo hoy en da.
Las actividades diarias de la sociedad actual han provocado un incremento de desechos, lo cual
ha trado repercusiones que, hasta hace unos pocos aos, haban pasado desapercibidas, tales
como el calentamiento global, la lluvia cida e incluso las variaciones meteorolgicas
(Smith,2007).
La explotacin de los combustibles fsiles y la creacin de materiales sintticos durante el siglo
XX introdujeron al ambiente una serie de compuestos que los microorganismos no suelen

encontrar, por lo que no son capaces de degradarlos. La gran mayora de estos compuestos son
txicos para cualquier ecosistema, lo que ocasiona severos daos ecolgicos (Ronald ,1995).
La globalizacin ha incrementado la demanda de productos que requieren de empaques u
envoltorios, aumentando considerablemente los desperdicios conformados en su mayora por
plstico (Smith, 2007).
En los ltimos aos la contaminacin del plstico ha sido un tema controversial. Incluso ya tiene
su propia categora en la clasificacin de los desechos. Varios libros clasifican a la contaminacin
por plstico como el conjunto de materiales, ya sean bolsas o carteles, que debido a su volumen
no pueden ser reciclados y que pueden llegar a tardar cientos de aos en reincorporarse al
ambiente (Hernndez ,2000).
El plstico es un material altamente reciclable, pero la falta de conciencia ciudadana y la escasez
de centros de reciclaje hacen que este mtodo sea ineficaz, a pesar de los programas
gubernamentales que se han implementado en los ltimos aos (Smith, 2007).
De acuerdo con el Instituto Nacional de Recicladores, en 1997 el consumo de plstico en Mxico
fue de 29 kg/habitante, y en el ao 2005 fue de 49 kg/habitante
2.3 Marco Conceptual
Pseudomonas: Es un gnero de bacilos rectos o ligeramente curvados, Gram negativos, oxidasa
positivos, aerbicos estrictos aunque en algunos casos pueden utilizar el nitrato como aceptor de
electrones.
Biodegradacin: Es el resultado de los procesos de digestin, asimilacin y metabolizacin de un
compuesto orgnico llevado a cabo por bacterias, hongos, protozoos y otros organismos.
El tereftalato de polietileno (PET): Es un polmero termoplstico lineal, con un alto grado de
cristalinidad. Como todos los termoplsticos puede ser procesado mediante extrusin, inyeccin,
inyeccin y soplado, soplado de preforma y termoconformado.
Evaluacin: La evaluacin es la accin de estimar calcular o sealar el valor de algo.

Xenobiotico: Se aplica a los compuestos cuya estructura qumica en la naturaleza es poco

frecuente o inexistente debido a que son compuestos sintetizados por el ser humano en el
laboratorio. La mayora han aparecido en el medio ambiente durante los ltimos 100 aos.
Bacteria: Las bacterias son microorganismos procariotas que presentan un tamao de unos
pocos micrmetros.

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CAPITULO III: CARACTERIZACION DEL PET

3.1 Propiedades fsicas
PET en su estado natural es una resina incolora, semi-cristalino. Basado en cmo se procesa,
PET puede ser semi-rgida a rgida, y es muy ligero. Se hace una buena barrera de gas y
humedad justa, as como una buena barrera para el alcohol y disolventes. Es fuerte y resistente a
los impactos.
Alrededor del 60% de cristalizacin es el lmite superior para los productos comerciales, con la
excepcin de las fibras de polister. Adems de polmero, aproximadamente 60% cristalina
alrededor del 40% de las cadenas de polmero amorfo restantes. Eliminar los productos pueden
ser producidos por enfriamiento rpido de polmero fundido por debajo de la temperatura de
transicin vtrea Tg para formar un slido amorfo. Como el vidrio, formas de PET amorfos cuando
sus molculas no se les da suficiente tiempo para organizarse de forma ordenada cristalina
ordenada a medida que se enfra la masa fundida. A temperatura ambiente, las molculas se
congelan en su lugar, pero si lo suficiente energa trmica se vuelve a poner en ellos mediante el
calentamiento por encima de Tg, comienzan a moverse de nuevo, permitiendo que los cristales de
nucleacin y crecimiento. Este procedimiento se conoce como la cristalizacin en estado slido.
Cuando se deja enfriar lentamente, el polmero fundido forma un material ms cristalino. Este
material tiene esferulitas que contienen muchos cristalitos pequeos cuando se cristaliz a partir
de un slido amorfo, en lugar de formar una gran cristal nico. Luz tiende a dispersarse ya que
cruza las fronteras entre cristalitos y las regiones amorfas entre ellos. Esta dispersin significa que
el PET cristalino es opaco y blanco en la mayora de los casos. Estirado de la fibra es uno de los
pocos procesos industriales que producen un producto casi de un solo cristal.

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3.2 Propiedades y Caractersticas

Presenta como caractersticas ms relevantes:

Alta transparencia, aunque admite cargas de colorantes.
Alta resistencia al desgaste y corrosin.
Muy buen coeficiente de deslizamiento.
Buena resistencia qumica y trmica.
Muy buena barrera a CO2, aceptable barrera a O2 y humedad.
Compatible con otros materiales barrera que mejoran en su conjunto la calidad barrera de los
envases y por lo tanto permiten su uso en mercados especficos.
Reciclable, aunque tiende a disminuir su viscosidad con la historia trmica.
Aprobado para su uso en productos que deban estar en contacto con productos alimentarios.
3.3 Aspectos del uso de tereftalato de polietileno

Algunas caractersticas:
Acta como barrera para los gases, como el CO2, humedad y el O2.
Es transparente y cristalino, aunque admite algunos colorantes.
Liviano, permite que una botella pese 20 veces menos que su contenido.
Impermeable.
Levemente txico, recientemente se ha descubierto que las botellas que se usan para embotellar
zumos de frutas cidos liberan algo de antimonio(Sb), aunque por debajo de los lmites que
admite la OMS (20g/L)[cita requerida]
Inerte (al contenido).

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 Resistente a esfuerzos permanentes y al desgaste, ya que presenta alta rigidez y dureza.

Alta resistencia qumica y buenas propiedades trmicas, posee una gran indeformabilidad al
calor.
Totalmente reciclable.[cita requerida]
Superficie barnizable.
Estabilidad a la intemperie
Alta resistencia al plegado y baja absorcin de humedad que lo hacen muy adecuado para la
fabricacin de fibras.
No es biodegradable
3.4 Degradacin

El Tereftalato de Polietileno (PET) puede ser degradado mediante diferentes mtodos: proceso
qumico y el proceso natural. Siendo el qumico, el mtodo que puede hacer un reuso del material
para un nuevo producto, obtencin de combustibles entre otras cosas. Esto es debido a que
puede ser modificada su estructura molecular.1 El proceso natural, puede tardar una gran
cantidad de tiempo debido al tiempo de vida del PET, puede llegar a degradarse en un
aproximado de 500 aos o ms.
Para realizar la degradacin qumica del PET se deben tomar en cuenta primeramente las
propiedades fsicas y mecnicas del desecho de PET.
3.5 Degradacin mediante proceso qumico

Degradacin por medio de fluido supercrtico: Este tipo de degradacin se hace mediante el uso
de disolventes en condiciones supercrticas. Los disolventes ms comunes para la degradacin
del material son tolueno, acetona, benceno, xileno y etil-benceno, usados a temperaturas entre
583-643 K y presiones de 4 6 MPa.

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Mediante este proceso se obtiene estireno y otros aromticos con tiempos de reaccin muy
cortos, esto es debido a las buenas transferencias de masa y calor que consiguen. La gran
desventaja de esta opcin de degradacin se encuentra en los costos del proceso y en que los
productos obtenidos son bsicamente los mismos que en craqueotrmico y cataltico.
Poliestireno disuelto en corrientes petroqumicas: el polmero es disuelto en una corriente de
aceite de ciclo ligero; se realiza el craqueo trmico en reactor de contacto corto a una temperatura
de 723-823 K. Al realizarse este proceso se observa que existe una sinergia en el rendimiento de
proceso al realizar la mezcla, pero se forma un alto contenido de aromticos que son aportados a
la degradacin del poliestireno restringe el uso del producto como combustible.
Hidrocraqueo: se procesa aceite proveniente de pirlisis de plsticos, con el fin de obtener un
producto que cumpla con las propiedades de un combustible. Este proceso se lleva a cabo en un
reactor tubular continuo, usando como Catalizador(desambiguacin) /Catlisis xido de aluminio a
temperaturas de 623-723 K. Mediante este proceso se obtienen conversiones de Poliestireno
hasta el 98% mediante un proceso trmico y el 88% sobre Pt/Al2O3, durante un tiempo de
reaccin de 240 minutos a 685 K y 6 MPa de H2. La disminucin en la conversin del proceso
cataltico frente al trmico se encuentra relacionada con que el Pt/Al2O3 promueve reacciones de
terminacin, posiblemente por hidrogenacin de radicales.
3.6 Degradacin natural del PET

Foto degradacin: la luz ultravioleta del sol provee energa de activacin requerida para iniciar la
incorporacin de oxgeno en el polmero. Este proceso hace que el plstico se rompa y fragmente
en trozos cada vez ms pequeos hasta que las cadenas polimricas alcancen un peso molecular
suficientemente bajo para que pueda ser metabolizada por los microorganismos. Cabe destacar
que este proceso es muy lento y puede tardar 50 aos o ms para que el plstico se degrade
completamente.7
Degradacin de termo- oxidacin: en este mecanismo de degradacin el oxgeno maneja un rol
fundamental para que se pueda llevar a cabo este proceso ya que depende en gran medida de la

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disponibilidad de oxgeno. Ya que en presencia de oxgeno, las reacciones de escisin de la

cadena dominan sobre las reacciones de ampliacin moleculares. Los radicales alquilo reaccionan
rpidamente con el oxgeno y forma radicales peroxilo, lo que se puede hacer abstraccin de
hidrgeno inter o intramolecular para formar hidroperxidos polimricos. La Termo-oxidacin y la
oxidacin de los productos de polietileno se llevan a cabo a un rango de temperaturas de 150250C, es decir, las condiciones de procesamiento, han sido objeto de varios estudios. El proceso
y los mecanismos de degradacin a altas temperaturas difieren de los mecanismos que tienen
lugar durante envejecimiento a largo plazo a temperaturas moderadas. Una temperatura ms alta
significa reacciones ms rpidas y mayor cantidad de radicales libres. La disponibilidad de
oxgeno llegar a ser limitada debido a que la velocidad de difusin y solubilidad de oxgeno es
demasiado baja. Mientras que a menor concentracin de oxgeno, la probabilidad de que dos
radicales alquilo vecinos sobrevivirn el tiempo suficiente para reaccionar con cada uno otro en
lugar de reaccionar con el oxgeno es ms alta y las reacciones de ampliacin moleculares
estarn conduciendo a una ampliacin dominante de la distribucin del peso molecular. A
temperaturas de reaccin ms bajas, que son las reales durante la degradacin ambiental, la
degradacin as como los tiempos de reaccin son mucho ms largos, el nmero de radicales es
ms pequeo y el oxgeno tiene ms tiempo para difundir a los sitios de reaccin.8
Biodegradable por medio de microorganismos: se han llevado a cabo investigaciones sobre la
degradacin del Tereftalato de Polietileno por medio del uso de microbios y esterasa Feruloil
esterasa , en las cuales se ha estudiado el impacto de degradacin en la estructura cristalina y
presencia de microbios de especie Nocardia en el interior de la estructura qumica del tereftalato
de polietileno. Se ha demostrado con un anlisis de difraccin de rayos x y micrografas
electrnicas (SEM) que aunque la biodegradacin por este medio es lenta y dbil es posible que
actu de manera positiva en el tereftalato de polietileno.

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CAPTULO IV: TECNOLOGA Y CLCULOS DE INGENIERA

4.1 Diseo y seleccin de equipos
4.2 Requerimientos de servicios y suministros
4.3 Rendimiento.
4.3.1 Costo inversin
4.3.2 Costo por tonelada procesada
CONCLUSIONES.
BIBLIOGRAFIA

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