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Resumo
Este artigo apresenta uma viso geral da cromatografia gasosa bidimensional, ilustrando diferenas e
semelhanas entre a cromatografia gasosa bidimensional de fraes parciais ou de heartcut (GC-GC) e a
cromatografia gasosa bidimensional abrangente (GCGC). Uma abordagem simplificada do histrico da
cromatografia gasosa bidimensional, seus fundamentos tericos e questes relacionadas instrumentao,
conjunto de colunas e detectores so apresentados. O uso da GCGC tem se mostrado bastante conveniente para
matrizes complexas como as provenientes da rea da petroqumica,
alimentos, aromas e fragrncias, forense, ambiental etc. Quando
Palavras-chave
comparada GC-GC, seu potencial traduz-se em menor tempo de
Cromatografia gasosa bidimensional
anlise, maior capacidade de pico, maior sensibilidade e na obteno de
abrangente, Cromatografia gasosa
cromatogramas estruturados, permitindo uma investigao mais
bidimensional de fraes parciais ou
detalhada da complexidade das matrizes investigadas, especialmente
de heartcut.
quando associada a detector de espectrometria de massas por
tempo-de-voo.
Abstract
This article presents an overview of two-dimensional gas chromatography, pointing to similarities and
differences between heartcut (GC-GC) and comprehensive two-dimensional gas chromatography (GCGC). A
simplified approach of the history of two-dimensional gas chromatography, its theoretical basis and issues related
to instrumentation, columns sets, modulators and detectors are presented. GCGC has been regarded as a
convenient technique for complex matrices, such as petrochemicals,
food and beverage, flavour and fragrance, environmental samples,
Keywords
forensic samples, etc. A comparison of both two-dimensional
Comprehensive two-dimensional
techniques shows that GCGC provides shorter analysis times, higher
gas chromatography, heartcut twopeak capacity, sensitivity and chromatographic structure, allowing a
dimensional gas chromatography
deeper investigation of the complexity of investigated matrices,
especially when associated with time-of-flight mass spectrometry.
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1.
Introduo
N 1 k
4 1+ k
(eq.1)
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2.
Histrico
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Fundamentos
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L
R s
(eq.2)
(eq.3)
(eq.4)
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Cromatografia Gasosa
Bidimensional Abrangente
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Figura 4. Ilustrao esquemtica do processo de gerao e visualizao dos cromatogramas em GCGC (adaptado de Dallge e
colaboradores24).
apresenta-se
como
curvas
de
nvel
monocromticas. A Figura 4 tambm ilustra com
clareza o estreitamento das bandas cromatogrficas
devido ao do modulador. Esse fenmeno
resulta em picos mais intensos e estreitos, que
aumentam a relao sinal/rudo e, portanto, a
detectabilidade.
Algumas das caractersticas e vantagens
da GCGC relativamente 1D-GC e GC-GC
no que tange a amostras e/ou matrizes complexas
so: (a) aumento da capacidade de pico, o qual
implica a melhora da separao cromatogrfica
entre os analitos e tambm entre analitos e
interferentes da matriz21; (b) aumento da
detectabilidade devido ao estreitamento das
bandas cromatogrficas decorrente do processo
de modulao; (c) toda a amostra submetida
aos dois processos de separao; (d) o tempo
para completar o processo de separao nas duas
colunas o mesmo necessrio para a anlise da
amostra na primeira dimenso; (e) a estruturao
de cromatogramas obtidos por GCGC pode
auxiliar na identificao de componentes
desconhecidos e facilitar na identificao de
compostos pertencentes a determinadas classes
qumicas. A estrutura cromatogrfica tambm
pode ser uma ferramenta na identificao de
amostras atravs da anlise da impresso digital
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de
amostras
consideradas
padro
(fingerprinting), isto , comparao de
cromatogramas de amostras desconhecidas com
outros de amostras padro; (f) cada componente
analisado por GCGC apresenta dois tempos de
reteno, o que confere maior confiabilidade na
identificao dos compostos do que a 1D-GC
proporciona. Disso tudo, depreende-se que a
quantidade de informao obtida sobre os
constituintes de amostras complexas quando se
utiliza GCGC bem maior do que aquela
alcanada pelo uso da GC-GC, sendo o tempo de
anlise reduzido.
A literatura cientfica prdiga em artigos
de reviso sobre a tcnica de GCGC, alguns
deles focados nos conceitos bsicos, nos
desenvolvimentos instrumentais, tratamento
terico, tratamento de dados, quimiometria e
detectores. Alm desses, as aplicaes nas mais
diversas reas tm sido reportadas na literatura
cientfica: petroqumica, forense, ambiental,
alimentos, leos e graxas, aromas e fragrncias,
leos essenciais etc. 4,8,15-19,21,22,24-30,38,50-56. O
leitor interessado em investigar em maior
profundidade alguns dos tpicos mencionados
neste artigo pode dirigir-se a alguma dessas
fontes.
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4.1. Moduladores
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longitudinalmente
modulado
(LMCS,
longitudinally modulated cryogenic system),
que se encontra representado no diagrama da
Figura 5C. Uma camisa de refrigerao feita de
ao resfriada pela passagem de dixido de
carbono lquido e se movimenta verticalmente
sobre um trilho instalado no interior do
cromatgrafo, atuando como uma armadilha
criognica. A camisa envolve a parte inicial da
segunda coluna e fica na extremidade inferior do
trilho, resfriando aquele setor da 2D (posio C
coleta ou amostragem). Neste ponto, a baixa
temperatura proporcionada pela camisa promove
a coleta e concentrao da banda cromatogrfica
por resfriamento e/ou partio, de acordo com as
propriedades fsico-qumicas dos analitos. A
seguir, a camisa se move rapidamente para cima
(posio L - liberao) e o setor anteriormente
resfriado aquecido pelo ar quente do forno,
liberando rapidamente a banda cromatogrfica
anteriormente amostrada e concentrada. O local
da 2D para onde a camisa se moveu passa a sofrer
a ao do fluido criognico e ocorre estreitamento
da banda cromatogrfica nesta nova posio.
Posteriormente, a camisa retorna posio inicial,
liberando a banda cromatogrfica reconcentrada
para a segunda coluna, enquanto uma nova banda
cromatogrfica amostrada/concentrada na
posio inferior da 2D, completando o ciclo de
modulao. O LMCS representou um avano
relativamente aos moduladores existentes,
entretanto, o resfriamento indireto com dixido de
carbono lquido pode no ser suficiente para que
sejam retidos compostos muito volteis. Uma
vantagem desse modulador em relao aos seus
antecessores que, na etapa de liberao da banda
cromatogrfica, no necessrio aquecimento,
pois a temperatura no interior do forno suficiente
para provocar a remobilizao dos analitos para a
fase mvel. O emprego deste tipo de interface se
mostrou confivel e a mesma tem sido usada por
vrios anos por diversos pesquisadores.
Posteriormente,
outros
moduladores
criognicos que no apresentam partes mveis na
sua configurao foram idealizados. O
funcionamento desse tipo de modulador emprega
jatos de fluido criognico e est ilustrado na
Figura 3B. Os jatos resfriadores podem ser de
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Figura 7. Diagrama de cores de extrato de sedimento de rio enriquecido com oito agrotxicos 1:
triclorfom; 2: tricloroguaiacol; 3: propanil; 4: fipronil; 5: propiconazol I e II; 6: trifloxistrobina; 7:
permetrina cis e trans; 8: difenoconazol I e II; 9: azoxistrobina. Conjunto de colunas empregado
em um GCGC-ECD: DB-5ms (30 m x 0,25 mm x 0,25 m e DB-17ms (1,70 m x 0,18 mm x
0,18 m). As flechas indicam os locais no espao de separao, onde haveria coeluio entre os
analitos e interferentes da matriz.
As bandas cromatogrficas so de 10 a 50
vezes mais estreitas na segunda dimenso do que
em 1D-GC, resultando em larguras de pico da
ordem de 100 ms ou menos, o que requer uma
alta velocidade de aquisio de dados. Essa
velocidade de aquisio de dados depende do
processo fsico-qumico envolvido na deteco e
tambm dos sistemas eletrnicos de converso
de sinal, que devem ser compatveis com as
exigncias do sistema GCGC73.
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