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La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras molculas. Los inhibidores
enzimticos son molculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas,
mientras que los activadores son molculas que incrementan dicha actividad. Asimismo,
gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. Muchas drogas o
frmacos son molculas inhibidoras. Igualmente, la actividad es afectada por
la temperatura, el pH, la concentracin de la propia enzima y del sustrato, y otros factores
fsico-qumicos.
Algunas enzimas son usadas comercialmente, por ejemplo, en la sntesis de antibiticos y
productos domsticos de limpieza. Adems, son ampliamente utilizadas en diversos
procesos industriales, como son la fabricacin de alimentos, destincin de jeans o
produccin de biocombustibles.
Historia
Desde finales del siglo XVIII y principios del siglo XIX, se conoca la digestin de
la carne por las secreciones del estmago y la conversin del almidn enazcar por los
extractos de plantas y la saliva. Sin embargo, no haba sido identificado el mecanismo
subyacente.
En el siglo XIX, cuando se estaba estudiando la fermentacin del azcar en
el alcohol con levaduras, Louis Pasteur lleg a la conclusin de que esta fermentacin era
catalizada por una fuerza vital contenida en las clulas de la levadura,
llamadas fermentos, e inicialmente se pens que solo funcionaban con organismos vivos.
Escribi que "la fermentacin del alcohol es un acto relacionado con la vida y la
organizacin de las clulas de las levaduras, y no con la muerte y la putrefaccin de las
clulas".Por el contrario, otros cientficos de la poca como Justus von Liebig, se
mantuvieron en la posicin que defenda el carcter puramente qumico de la reaccin de
fermentacin.
En 1878 el fisilogo Wilhelm Khne (18371900) acu el trmino enzima, que viene
del griego "en levadura", para describir este proceso. La palabra enzima fue
usada despus para referirse a sustancias inertes como la pepsina. Por otro lado, la
palabra "fermento" sola referirse a la actividad qumica producida por organismos
vivientes.
En 1897 Eduard Buchner comenz a estudiar la capacidad de los extractos de levadura
para fermentar azcar a pesar de la ausencia de clulas vivientes de levadura. En una
serie de experimentos en la Universidad Humboldt de Berln, encontr que el azcar era
fermentado inclusive cuando no haba elementos vivos en los cultivos de clulas de
levaduras. Llam a la enzima que causa la fermentacin de la sacarosa,
zimasa. En 1907 recibi el Premio Nobel de Qumica "por sus investigaciones
bioqumicas y el haber descubierto la fermentacin libre de clulas". Siguiendo el ejemplo
de Buchner, las enzimas son usualmente nombradas de acuerdo a la reaccin que
producen. Normalmente, el sufijo "-asa" es agregado al nombre del sustrato (p. ej.,
la lactasa es la enzima que degrada lactosa) o al tipo de reaccin (p. ej., la ADN
polimerasa forma polmeros de ADN).
Tras haber mostrado que las enzimas pueden funcionar fuera de una clula viva, el
prximo paso era determinar su naturaleza bioqumica. En muchos de los trabajos
iniciales se not que la actividad enzimtica estaba asociada con protenas, pero algunos
cientficos (como el premio Nobel Richard Willsttter) argumentaban que las protenas
eran simplemente el transporte para las verdaderas enzimas y que las protenas per se no
eran capaces de realizar catlisis. Sin embargo, en 1926, James B. Sumner demostr que
la enzima ureasa era una protena pura y la cristaliz. Summer hizo lo mismo con la
enzima catalasa en 1937. La conclusin de que las protenas puras podan ser enzimas
fue definitivamente probada por John Howard Northrop y Wendell Meredith Stanley,
quienes trabajaron con diversas enzimas digestivas como la pepsina (1930), la tripsina y
la quimotripsina. Estos tres cientficos recibieron el Premio Nobel de Qumica en1946.
El descubrimiento de que las enzimas podan ser cristalizadas permita que sus
estructuras fuesen resueltas mediante tcnicas de cristalografa y difraccin de rayos X.
Esto se llev a cabo en primer lugar con la lisozima, una enzima encontrada en
las lgrimas, la saliva y los huevos, capaces de digerir la pared de algunas bacterias. La
estructura fue resuelta por un grupo liderado por David Chilton Phillips y publicada en
1965. Esta estructura de alta resolucin de las lisozimas, marc el comienzo en el campo
de la biologa estructural y el esfuerzo por entender cmo las enzimas trabajan en el
orden molecular.
Eduard Buchner.
ESPECIFICIDAD:
Las enzimas suelen ser muy especficas tanto del tipo de reaccin que catalizan como
del sustrato involucrado en la reaccin. La forma, la carga y las
caractersticas hidroflicas/hidrofbicas de las enzimas y los sustratos son los
responsables de dicha especificidad. Las enzimas tambin pueden mostrar un elevado
grado de estereoespecificidad, regioselectividad y quimioselectividad.
Algunas de estas enzimas que muestran una elevada especificidad y precisin en su
actividad son aquellas involucrados en la replicacin y expresin del genoma. Estas
enzimas tienen eficientes sistemas de comprobacin y correccin de errores, como en el
caso de la ADN polimerasa, que cataliza una reaccin de replicacin en un primer paso,
para comprobar posteriormente si el producto obtenido es el correcto. Este proceso, que
tiene lugar en dos pasos, da como resultado una media de tasa de error increblemente
baja, en torno a 1 error cada 100 millones de reacciones en determinadas polimerasas
de mamferos. Este tipo de mecanismos de comprobacin tambin han sido observados
en la ARN polimerasa, en la ARNt aminoacil sintetasa y en la actividad de seleccin de los
aminoacil-tRNAs.
Aquellas enzimas que producen metabolitos secundarios son denominadas promiscuas,
ya que pueden actuar sobre una gran variedad de sustratos. Por ello, se ha sugerido que
esta amplia especificidad de sustrato podra ser clave en la evolucin y diseo de nuevas
rutas biosintticas.
MODELO DE LA "LLAVE-CERRADURA"
Las enzimas son muy especficas, como sugiri Emil Fischer en 1894. Con base a sus
resultados dedujo que ambas molculas, enzima y sustrato, poseen complementariedad
geomtrica, es decir, sus estructuras encajan exactamente una en la otra, por lo que ha
sido denominado como modelo de la "llave-cerradura", refirindose a la enzima como a
una especie de cerradura y al sustrato como a una llave que encaja de forma perfecta en
dicha cerradura. Sin embargo, si bien este modelo explica la especificidad de las enzimas,
falla al intentar explicar la estabilizacin delestado de transicin que logran adquirir las
enzimas.
Diagrama que esquematiza el modo de accin del modelo del encaje inducido.
En 1958 Daniel Koshland sugiere una modificacin al modelo de la llave-cerradura: las
enzimas son estructuras bastante flexibles y as el sitio activo podra cambiar su
conformacin estructural por la interaccin con el sustrato. Como resultado de ello,
la cadena aminoacdica que compone el sitio activo es moldeada en posiciones precisas,
lo que permite a la enzima llevar a cabo su funcin cataltica. En algunos casos, como en
las glicosidasas, el sustrato cambia ligeramente de forma para entrar en el sitio activo. El
sitio activo continua dicho cambio hasta que el sustrato est completamente unido,
momento en el cual queda determinada la forma y la carga final.
Mecanismos:
Las enzimas pueden actuar de diversas formas, aunque, como se ver a continuacin,
siempre dando lugar a una disminucin del valor de G:
Estructura:
Reduciendo la energa del estado de transicin, sin afectar la forma del sustrato, mediante
la creacin de un ambiente con una distribucin de carga ptima para que se genere
dicho estado de transicin.
Proporcionando una ruta alternativa. Por ejemplo, reaccionando temporalmente con el
sustrato para formar un complejo intermedio enzima/sustrato (ES), que no sera factible
en ausencia de enzima.
Reduciendo la variacin de entropa necesaria para alcanzar el estado de transicin
(energa de activacin) de la reaccin mediante la accin de orientar correctamente los
sustratos, favoreciendo as que se produzca dicha reaccin.
Incrementando la velocidad de la enzima mediante un aumento de temperatura. El
incremento de temperatura facilita la accin de la enzima y permite que se incremente su
velocidad de reaccin. Sin embargo, si la temperatura se eleva demasiado, la
conformacin estructural de la enzima puede verse afectada, reduciendo as su velocidad
de reaccin, y slo recuperando su actividad ptima cuando la temperatura se reduce. No
obstante, algunas enzimas son termolbiles y trabajan mejor a bajas temperaturas.
Cabe destacar que este efecto entrpico implica la desestabilizacin del estado basal, y
su contribucin a la catlisis es relativamente pequea.
DINMICA Y FUNCIN:
La dinmica interna de las enzimas est relacionada con sus mecanismos de catlisis. La
dinmica interna se define como el movimiento de diferentes partes de la estructura de la
enzima, desde residuos individuales de aminocidos, hasta grupos de aminocidos o
incluso un dominio proteico entero. Estos movimientos se producen a diferentes escalas
de tiempo que van desde femtosegundos hasta segundos. Casi cualquier residuo de la
estructura de la enzima puede contribuir en el proceso de catlisis por medio de
FUNCIN BIOLGICA:
Las enzimas presentan una amplia variedad de funciones en los organismos vivos. Son
indispensables en latransduccin de seales y en procesos de regulacin, normalmente por medio
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de quinasas y fosfatasas. Tambin son capaces de producir movimiento, como es el caso de
la miosina al hidrolizar ATP para generar la contraccin muscularo el movimiento de vesculas por
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medio del citoesqueleto. Otro tipo de ATPasas en la membrana celular son lasbombas de
iones implicadas en procesos de transporte activo. Adems, las enzimas tambin estn implicadas
en funciones mucho ms exticas, como la produccin de luz por la luciferasa en
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las lucirnagas. Los virus tambin pueden contener enzimas implicadas en la infeccin celular,
como es el caso de la integrasa del virus HIV y de latranscriptasa inversa, o en la liberacin viral,
como la neuraminidasa del virus de la gripe.
Una importante funcin de las enzimas es la que presentan en el sistema digestivo de los
animales. Enzimas tales como las amilasas y las proteasas son capaces de degradar molculas
grandes (almidn o protenas, respectivamente) en otras ms pequeas, de forma que puedan ser
absorbidas en el intestino. Las molculas de almidn, por ejemplo, que son demasiado grandes
para ser absorbidas, son degradadas por diversas enzimas a molculas ms pequeas como
la maltosa, y finalmente a glucosa, la cual s puede ser absorbida a travs de las clulas del
intestino. Diferentes enzimas digestivas son capaces de degradar diferentes tipos de alimentos.
Los rumiantes que tienen una dieta herbvora, poseen en sus intestinos una serie de
microorganismos que producen otra enzima, la celulasa, capaz de degradar la celulosa presente
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en la pared celular de las plantas.
Varias enzimas pueden actuar conjuntamente en un orden especfico, creando as una ruta
metablica. En una ruta metablica, una enzima toma como sustrato el producto de otra enzima.
Tras la reaccin cataltica, el producto se transfiere a la siguiente enzima y as sucesivamente. En
ocasiones, existe ms de una enzima capaz de catalizar la misma reaccin en paralelo, lo que
permite establecer una regulacin ms sofisticada: por ejemplo, en el caso en que una enzima
presenta una actividad constitutiva pero con una baja constante de actividad y una segunda
enzima cuya actividad es inducible, pero presenta una mayor constante de actividad.
Las enzimas determinan los pasos que siguen estas rutas metablicas. Sin las enzimas, el
metabolismo no se producira a travs de los mismos pasos, ni sera lo suficientemente rpido para
atender las necesidades de la clula. De hecho, una ruta metablica como la glucolisis no podra
existir sin enzimas. La glucosa, por ejemplo, puede reaccionar directamente con el ATP de forma
que quede fosforilada en uno o ms carbonos. En ausencia de enzimas, esta reaccin se
producira tan lentamente que sera insignificante. Sin embargo, si se aade la
enzimahexoquinasa que fosforila el carbono 6 de la glucosa y se mide la concentracin de la
mezcla en un breve espacio de tiempo se podr encontrar nicamente glucosa-6-fosfato a niveles
significativos. Por tanto, las redes de rutas metablicas dentro de la clula dependen del conjunto
de enzimas funcionales que presenten.
La coenzima cido flico (izquierda) y el frmaco anti-cancergeno metotrexato(derecha) son muy similares en
estructura. Como resultado, el metotrexato es un inhibidor competitivo de muchas enzimas que utilizan folato.
EFECTOS EN EL PH
Todas las enzimas presentan un pH ptimo de actividad. El pH puede afectar de varias maneras:
El centro activo puede contener aminocidos con grupos ionizados que pueden variar con el pH.
El sustrato puede verse afectado por las variaciones del pH.
Aplicacin
Enzimas utilizadas
Proteasas
Tripsina
Betaglucanasas y
arabinoxilanasas
Amiloglucosidasas y
Procesado de
alimentos
La amilasa cataliza la
degradacin del almidn
en azcares sencillos.
Alimentos para
bebs
Elaboracin de
cerveza
Usos
Cebada germinada
utilizada para la
elaboracin de malta.
Zumos de frutas
Industria lctea
pululanasas
Proteasas
Acetolactatodecarboxilasa
(ALDC)
Incrementa la eficiencia de la
fermentacin mediante la reduccin de la
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formacin de diacetilo.
Celulasas, pectinasas
Lipasas
Lactasas
Rotura de
la lactosa en glucosa y galactosa.
Papana
Amilasas, amiloglucosidasas y
glucoamilasas
Glucosa isomerasa
Conversin
de glucosa en fructosa durante la
Queso de Roquefort.
Digestin de carne
Glucosa.
Fructosa.
Ligninasas
Detergentes
biolgicos
Principalmente proteasas,
producidas de forma
extracelular porbacterias.
lquido.
Amilasas
Lipasas
Celulasas
Limpiadores de
lentes de contacto
Proteasas
Catalasa
Proteasa (ficina)
Industria fotogrfica
Biologa molecular