Desenvolvimento de miclio e semente

No cultivo de cogumelos comestveis no se utilizam esporos. O seu tamanho reduzido faz com
que sejam difceis de manusear e as suas caractersticas genticas podem diferir das do seu
progenitor. Para alm disso, os esporos de cogumelos precisam de algum tempo para
germinar, enquanto outros fungos, como os bolores verdes, germinam e disseminam-se muito
mais rapidamente.
O cogumelo desejado deve ser capaz de colonizar o substrato antes de outros fungos ou
bactrias. Para realizar tal processo, o miclio pr- cultivado do cogumelo (isento de quaisquer
contaminantes) inocula- do num substrato estril.

Colonizao micelial
Durante o seu desenvolvimento, o miclio coloniza o substrato, usando os nutrientes
disponveis. Esta fase referida, geralmente, como colonizao micelial. Quando alguns
nutrientes se esgotam, ou quando h uma mudana de clima, o miclio atinge outra fase: a
reproduo. Na maioria das espcies de cogumelos, a temperatura tima para a colonizao
micelial de, aproximadamente, 25C. Um maior desenvolvimento do miclio desejado
tambm pode ser provocado por uma modificao do ambiente, p.ex. uma concentrao alta
de CO2 favorvel para o crescimento do miclio (mas no para a produo da cultura).
Depois de ter colonizado o substrato, o miclio capaz de produzir corpos de frutificao. O
nmero e a qualidade dos corpos de frutificao dependem do ambiente.
Fatores essenciais para induzir a formao de corpos de frutificao:

Mudana da temperatura
Humidade alta
Deficincia de um nutriente
Concentrao de CO2 no ar
Luz
Trauma fsico

As mudanas devem ser realizadas apenas quando o miclio tiver colonizado completamente o
substrato. So as condies menos favorveis para o desenvolvimento vegetativo que
estimulam o miclio a frutificar.
A frutificao de alguns cogumelos pleuroto (p.ex. estirpes de Pleurotus ostreatus)
verifica-se quando, aps o desenvolvimento micelial, sofrem um choque de frio (uma
diferena entre 5 C a 10 C). Para alm disso, dever-se- reduzir tambm a
concentrao de CO2. Embora o desenvolvimento micelial possa realizar-se na
escurido, a luz essencial para se conseguir a frutificao.
Os miclios de shiitake (Lentinula edodes), plenamente desenvolvi- dos em sacos de
substrato, so postos de molho em gua, durante um ou dois dias e, depois, so
sujeitos a um choque fsico para estimular a frutificao. O choque remover o CO2
preso.
No comeo da fase reprodutiva formam-se pequenos primrdios (corpos iniciais de
frutificao). Sob as condies apropriadas, estes pri- mrdios transformam-se em corpos de
frutificao. Os nutrientes so transportados do miclio para os corpos de frutificao por

meio de um fluxo constante de humidade. A evaporao de humidade na superfcie dos

cogumelos necessria para que o fluxo seja contnuo.
Deve-se escolher uma espcie que frutifica a uma temperatura prxima s temperaturas
atmosfricas ao ar livre. Desta maneira, limitam-se investimentos no controle climatolgico e
reduzem-se os custos de energia.
As nicas espcies de cogumelos actualmente cultivadas a temperaturas prximas ou mesmo
abaixo de 30 C so: pleurotos (Pleurotus cystidiosus / abalonus / ostreatus var. florida),
Volvariella volvacea, Agaricus bitorquis, Stropharia rugoso- annulata e orelha-de-pau
(Auricularia polytricha).

Espcie de cogumelo/Nome comum

Lentinula edodes/ shiitake
Pleurotus ostreatus / cogumelo ostra,
pleuroto ostreceo, shimeji

Tdm
5-35

T dm ptimo
20-30

5-35

Tfrutificao
8 -25

20-25

5-25

Tcnicas
1,2,3
2, 3

Tdm: Amplitude na qual o miclio permanece vivel; a rapidez de crescimento reduz-se tanto
na extremidade alta como na extremidade baixa.
Tdm ptimo: Amplitude tima de temperatura requerida para a frutificao; a temperatura
mais importante.
Tcnicas para a preparao do substrato: 1 Lenhos de madeira, 2 Substrato pasteurizado ou
pr-aquecido, 3 Substrato esterilizado.

O local para a explorao de cogumelos

Devem-se ter em considerao os seguintes fatores:

Distncia at ao mercado
Disponibilidade de material de substrato de boa qualidade
Transporte tanto dos produtos como do material de substrato
Disponibilidade de gua limpa

Cho da sala de cultivo

O cho cimentado, ligeiramente inclinado, proporciona uma superfcie lisa, que fcil de
limpar e que permite a drenagem da gua em excesso.
Portas, janelas e outras aberturas
As portas devem fechar adequadamente de forma a prevenir a entrada de insetos nos recintos
de cultivo. O uso duma porta dupla, com uma malha de arame diante da segunda porta de
entrada, pode ajudar a que os insetos no entrem. As mesmas regras so aplicveis s janelas.
Os orifcios, atravs dos quais o ar sopra quer para dentro ou para fora dos recintos, devem
dispor, no mnimo, de um filtro simples ou pano que funcione como barreira. O cheiro do
miclio de cogumelos muito atrativo para as moscas dos cogumelos.

Higiene e desinfeo
Isto aplica-se unidade de produo de semente, ao local de produo de substrato, aos
recintos de incubao e s unidades de produo. O laboratrio de semente deve estar
separado do local de cultivo. No se deve realizar uma incubao ou colonizao micelial no
mesmo recinto onde se recolhem os cogumelos. Resduos, sacos contaminados e substrato
residual devem ser removidos imediatamente dos recintos e da explorao e, preferivelmente,
ser transportados para um lugar afastado.

Produo de semente
Ao material de propagao dos cogumelos referimo-nos geralmente com o termo
semente.
Disponibilidade da cultura de semente
A disponibilidade de semente de boa qualidade constitui o fator limitante para o
cultivo de cogumelos em muitos pases em vias de desenvolvimento. A importao
geralmente complicada pela burocracia alfandegria, os custos altos de transporte e a
dificuldade de manter a semente refrigerada durante o transporte. Portanto, pode ser
necessrio que o produtor de cogumelos produza a seu prprio material de inoculao
(semente). Se for possvel obter semente de boa qualidade da espcie desejada de
cogumelo, a um preo razovel, recomendvel concentrar-se no processo de cultivo
de cogumelos. Caso assim no seja, a semente deve ser produzida ou propagada pelo
produtor de cogumelos.
O procedimento completo da produo de semente implica a preparao do meio de
cultivo, o enchimento dos tubos de ensaio ou placas de Petri, a sua esterilizao e o
processo de inoculao de recipientes de maior dimenso com esta cultura.
A produo de semente requer um laboratrio limpo e conhecimento especializado.
A prtica, a produo de semente no to fcil. As estirpes apropriadas das espcies
de cogumelo requeridas devem ser mantidas sob condies rigorosas para prevenir a
sua degenerao. Se isto no for possvel, dever-se- utilizar a cultura de tecidos de
um cogumelo fresco e saudvel para a produo de semente. Para alm disso, o
recinto da produo de semente deve ser mantido meticulosamente limpo para
prevenir qualquer contaminao.

A cultura inicial
A cultura inicial (ou cultura me) pode ser preparada utilizando-se um corpo de
frutificao, fresco e saudvel, ou pode ser obtida dum produtor de semente ou dum
laboratrio. Depois, preparam-se vrias culturas de agr com base na cultura inicial.

Estas servem para inocular recipientes de maior dimenso (p.ex. garrafas) com
semente me, que pode ser usada para inocular o substrato final para semente.
Os requisitos para uma unidade de produo de semente so, no mnimo:

Uma unidade de esterilizao (panela de presso, autoclave).

Ambiente estril: caixa de inoculao ou uma cabina com fluxo laminar do ar
Equipamento de laboratrio, como sejam placas de Ptri, tubos de ensaio,
balana, lcool, chama, recinto de incubao

O equipamento supramencionado encontra-se normalmente disponvel em hospitais,

estaes experimentais e universidades.
As matrias-primas incluem:

Ingredientes para a preparao dos meios de cultivo

Material de substrato
Cultura pura ou cogumelos frescos da estirpe desejada de certa espcie de
cogumelo
Recipientes de semente

Processo de esterilizao
Os gros de cereal, a serradura e o composto contm grandes quantidades de
contaminantes. Um nico gro de cereal pode conter milhares de bactrias, fungos e
actinomicetos. Cada um destes agentes no desejados, os chamados contaminantes,
capaz de provocar a deteriorao dos substratos que no foram esterilizados
adequadamente ou que foram inoculados sob condies no higinicas. Um
aquecimento de 15 minutos a 121 C geralmente suficiente para destruir todos os
organismos. Tal aquecimento da parte central, interior, dos substratos com uso de
vapor leva bastante tempo, dependendo da maneira que a unidade de
esterilizao/pasteurizao enchida e tambm da capacidade da fonte de
aquecimento.
O aquecimento a vapor num tambor de petrleo durante, minimamente, 6 horas
geralmente necessrio para fazer com que a parte central, interior, dos sacos de
substrato seja aquecida adequadamente. Esteriliza-se sacos de 4 litros, enchidos com 2
kg de substrato para semente, durante, no mnimo, 2 horas a 121C.
Panelas de presso
A opo mais barata obter uma ou mais panelas de presso grandes. Escolher
panelas de presso que mantenham a presso mesmo quando a temperatura final
tenha sido atingida.
As panelas de presso mais simples deixam sair vapor quando a presso se torna
demasiado alta. Neste caso, a presso no interior descer, geralmente, para abaixo de
1 atmosfera de sobrepresso, provocando a ebulio dos meios de cultivo. Tal deve ser

evitado. Ao usar este tipo de panela de presso, as placas de Ptri ou as garrafas com
meios de agr podem tornar-se sujas. As panelas de presso devem dispor de um
suporte no seu interior, que d origem a uma distribuio mais uniforme da
temperatura no interior da panela de presso. A fonte de calor ou de origem externa
(bicos de gs, carvo, madeira) ou est incorporada (eltrica). A vantagem de panelas
de presso que dispem de elementos aquecedores eltricos, controlados por
termstato, que permitem que a temperatura seja ajustada com preciso.

Ambientes limpos
Um ambiente limpo essencial para a produo de semente. Particularmente,
necessrio que os recipientes com meios de cultivo esterilizados sejam abertos sob
condies asspticas. O ar transporta numerosos contaminantes, que infetam
facilmente os meios de cultivo esterilizados. Portanto, necessrio utilizar armrios e
recintos de inoculao especiais para efetuar o manuseamento e a preparao das
culturas (de tecidos).
Recintos de inoculao
O interior dum recinto de inoculao deve ser fabricado de materiais no
biologicamente degradveis. Todas as superfcies devem ser lisas e fceis de limpar. As
prateleiras devem ser concebidas de tal maneira que o cho que se encontra por baixo
delas possa ser limpo facilmente. As prateleiras so tipicamente feitas de ferro
galvanizado ou frmica.
Armrios de inoculao
Estes armrios simples para inoculao so muito utilizados em todo o mundo. Podem
ser construdos de forma barata com uso de materiais localmente disponveis. Deve-se
poder abrir o vidro dianteiro de modo a ser possvel encher o armrio com meios de
cultivo esterilizados. O interior desinfetado com uso de uma soluo 70% de lcool
etlico.
Armrios com fluxo laminar do ar
Um sistema de fluxo laminar do ar (LAF, Laminar Air Flow) consti- tudo por um
ventilador, uma conduta de ar, um filtro HEPA (High Efficiency Particle Air /de Alta
Eficincia para Partculas do Ar) e uma cobertura.Num fluxo laminar do ar, os
contaminantes podem disseminar-se apenas numa direo. Num fluxo turbulento do
ar, possvel que os es- poros se movam em diferentes direes, provocando um
maior grau de contaminao. Os produtores classificam os ventiladores conforme o
volume do ar que podem soprar atravs de materiais com resistncia especificada.
Uma velocidade do ar de, aproximadamente, 0,45 m/s considerada a melhor para
obter, adequadamente, um fluxo laminar do ar. O ventila- dor deve ser regulado de
forma gradual e, para alm disso, ter a capacidade de empurrar o dobro do volume do
ar requerido atravs do filtro para atingir a velocidade necessria do ar, de forma a

compensar perdas de presso provocadas quando o filtro estiver cheio com

partculas.Os filtros e ventiladores formam o mago de qualquer sistema com fluxo
laminar do ar, mas deve-se ter em considerao tambm outros fatores: as
capacidades e higiene dos operadores do sistema; a construo de condutas de ar e
filtros, para assegurar que no possvel que ar contaminado seja aspirado para
dentro.

Culturas
Os primeiros passos da produo de semente so efetuados em meios de cultivo
artificiais. Estes devem conter suficientes nutrientes, como sejam sacridos/glcidos,
para os cogumelos se desenvolverem e um agente solidificador (agr ou gelatina). O
miclio desenvolve-se na superfcie do meio de cultivo e, depois, ser usado para
inocular maiores quantidades de substrato, como serradura ou gros de cereal.
Podem-se utilizar tubos de ensaio ou placas de Petri como recipientes de culturas.

Culturas de tecidos
O miclio novo e vigoroso pode ser obtido a partir dum novo corpo de frutificao,
com uso de um bisturi, lcool, amostras em posio inclinada esterilizadas de agr,
placas de Ptri ou garrafas com agr, uma chama (sem fumo) e uma mesa limpa de
trabalho ou, preferivelmente um armrio com fluxo laminar do ar ou uma caixa de
inoculao.
Lavar minuciosamente o cogumelo.
1. Mergulhar o bisturi em lcool e, depois, aquecer com chama at se tornar
incandescente.
2. Deixar arrefecer durante 10 segundos.
3. Romper ou rasgar o cogumelo ao comprido
(no cortar com faca, visto que contaminantes da superfcie podem pegar-se lmina).
4. No tocar com as mos o interior dos pedaos cortados.
5. Usar o bisturi aquecido para remover um pequeno pedao (2x2 mm2
suficiente) do tecido interior.
6. Ter cuidado para no incluir tecido da superfcie exterior.
7. Abrir o tubo de ensaio/placa de Petri

(Ao usar tubos de ensaio: aquecer a boca do tubo na chama para destruir esporos no
desejados).
8. Depois, colocar suavemente o tecido, presente no bisturi, no centro do agr.
9. Meter imediatamente o tampo de algodo.
10. Inocular, no mnimo, trs culturas, mas preferivelmente ainda mais.
11. Incubar os tubos de agr ou as placas de Petri recm inoculados a 25 C
durante, aproximadamente, dez dias.
Dentro de trs a quatro dias, o miclio ter coberto o tecido e ter-se- ramificado no
agr. O miclio deve ser branco e desenvolver-se a partir do tecido. Se se formarem
miclios de cor amarela, azul, verde ou cinzenta, em outros pontos da superfcie, tratase de contaminantes fngicos. Um desenvolvimento cremoso, brilhante, geralmente
indica uma contaminao bacteriana.
Se no houver nenhum crescimento no agr, controlar o seguinte:
a. Possivelmente o cogumelo demasiadamente velho. Tentar outra vez com um
mais novo.
b. Possivelmente o bisturi no arrefeceu antes de recolher a amostra do tecido,
de forma que houve um sobreaquecimento do miclio.

Meio de extrato de Batata-Dextrose-Agr (BDA)

Ingredientes: 200 g de batata cortada em cubos, 20 g de p de agr, 20 g de dextrose
ou acar branco comum, 1 litro de gua.
1.
2.
3.
4.
5.

Lavar e pesar as batatas e cort-las em pequenos pedaos

Cozer durante 15 at 20 minutos at se tornarem moles.
Retirar as batatas.
Acrescentar gua ao caldo at se obter exatamente 1 litro.
Acrescentar a dextrose e o agr. necessrio acrescentar a quantidade
apropriada de acar e agr, seno o meio de cultivo tornar-se- ou
demasiadamente mole ou demasiadamente duro.
6. Mexer, de vez em quando, e aquecer suavemente at o agr se ter derretido. O
agr deve estar quente ao verter-se nos tubos de ensaio ou garrafas, seno
ficar encaroado.
7. Encher, aproximadamente, um quarto dos tubos de ensaio.
8. Depois, fechar os tubos ou as garrafas com tampes de algodo.
Meio de caldo com farelo de arroz

A receita supramencionada de BDA usada correntemente para a conservao duma

cultura. No entanto, para a propagao de culturas a receita seguinte mais barata e
mais fcil de preparar.
Ingredientes: 200 g de farelo de arroz, 1 litro de gua, 20 g de gelatina.
1.
2.
3.
4.

Cozer o farelo de arroz em gua durante, aproximadamente, 10 minutos.

Filtrar, guardar o caldo, derreter a gelatina.
Verter em garrafas
Esterilizar.

Preparao de amostras em posio inclinada (slants)

Depois de encher os tubos de ensaio ou as garrafas com o meio de cultivo, devem ser
esterilizados antes do seu uso. As unidades de esterilizao mais correntemente
usadas em laboratrios de pequenas dimenses so as panelas de presso, mas
tambm possvel utilizar autoclaves.

Procedimento
1. Deitar gua numa panela de presso at atingir o nvel do suporte.
2. Colocar as garrafas ou os tubos de ensaio nos suportes, cobrindo-os com uma
cobertura de plstico para prevenir que os tampes de algodo sejam
humedecidos por gua.
3. Depois, fechar bem o tampo de algodo.
4. O orifcio da sada de presso deve estar aberto desde o comeo para permitir
que o ar possa sair. Vai durar alguns minutos desde o momento de ebulio at
sada do vapor.
5. Fechar o orifcio de ventilao. O medidor de presso mostra a subida da
presso.
6. Esterilizar sob presso durante 20-30 minutos.

De modo a aumentar a rea de superfcie, os tubos de ensaio ou as garrafas so

colocadas numa posio inclinada quando o agr ainda est lquido. Ter cuidado para
que o agr no toque o tampo de algodo, seno pode ser contaminado. No mover
ou manusear os tubos de ensaio at o agr se ter solidificado, se no uma pequena
parte do agr pode solidificar do outro lado do slant ou demasiadamente perto do
tampo de algodo.

Preparao de subculturas
Inocular mais tubos de ensaio, usando os mtodos supramencionados.

Por motivos de degenerao, recomenda-se no fazer transferncias de uma culturame mais de oito vezes ou utilizar culturas-me em gar durante mais de dois anos.
O miclio degenerar-se- aps um certo nmero de transferncias, de forma que no
possvel continuar ilimitadamente as transferncias de culturas em gar.

Recipientes de semente
Os recipientes de semente devem ser feitos de material resistente ao calor:
geralmente vidro e polipropileno (PP). Os recipientes de semen- te devem ser testados
para ver se podem resistir temperatura dentro da unidade de esterilizao. Se a
presso for superior a 1 atmosfera de sobrepresso, a temperatura ser superior a
121 C. s vezes, os sacos de PP rompem-se facilmente aps terem sido sujeitos ao
processo de esterilizao. Evitar o uso de sacos com costuras: estas tendem a abrir- se
aps o tratamento pelo calor.
Para a semente me usam-se, geralmente, garrafas de vidro ou de plstico resistente
ao calor. Tambm possvel utilizar frascos com boca larga, garrafas de leite e garrafas
de dextrose. As garrafas de dextrose so ideais, visto que estas podem ser obtidas
grtis em hospitais e que tm aberturas fceis de tapar com algodo. Tambm podem
ser usados para a semente final, mas se o miclio do material inoculado se tiver
desenvolvido demasiado, formando um grande torro, as garrafas tero de ser
partidas para tir-lo. Os sacos de polipropileno com tampes de algodo (ou filtros),
para permitir o arejamento, so de uso muito comum para a semente final (tanto em
serradura como gros de cereal). O seu tamanho varia entre 2,5 e 15 litros no caso de
semente em gros de cereal. Deve-se fazer com que se realize uma troca de gases
metablicos, como seja CO2, com o ar ambiente; contudo, deve-se prevenir que
esporos no desejados entrem no recipiente.

Semente me
A semente me pode ser usada para inocular a semente em gros de cereal ou uma
segunda gerao de semente me. Em laboratrios simples, no se deve utilizar
semente me em gros de cereal para inocular outra gerao de semente me do
mesmo tipo, visto que o risco de contaminao e degenerao ser demasiadamente
alto.

Preparao de semente em gros de cereal

A vantagem principal de gros de cereal que so muito nutritivos para fungos e que
formam facilmente grnulos. Os grnulos podem ser espalhados facilmente no
substrato. A maior desvantagem que fornece um substrato que tambm timo

para outros organismos. Portanto, o risco de contaminao muito maior em

comparao com a semente em serradura.
Tipos de gros de cereal
Podem-se utilizar diferentes tipos de gros de cereal, como sejam trigo, centeio,
milho-mido/mexoeira, arroz ou sorgo/mapira. Primeiro cozer os gros de cereal,
esco-los e depois encher os recipientes e esteriliz-los. O teor de humidade dos gros
de cereal, quando cozidos, deve ser de, aproximadamente, 50%. Se for mais alto, o
desenvolvimento micelial pode ser mais rpido, mas tambm o risco de bactrias que
provocam a `mancha hmida se tornar mais elevado. Se for mais seco que 35%, o
desenvolvimento micelial ser bastante lento.
Frmula de semente em gros de cereal
Os gros de cereal em pequenos recipientes podem ser humedecidos at atingirem um
nvel mais alto do que os gros de cereal acondicionados em sacos de 15 litros. Para
recipientes de 2 litros, usar a seguinte receita: 480 g de centeio, sorgo/mapira ou trigo,
400 ml de gua, 2 g de gesso (45% de humidade).
Preparao de semente em serradura
Substrato para semente em serradura: Serradura 10 kg; CaCO3 147,5 g; Farelo de arroz
1,25 g; Gesso 0,1475g; Ureia 0,5 g; gua 1,5 litros.

Esterilizao
Esterilizar os recipientes de semente numa autoclave. A durao depende da
autoclave, da forma na qual os recipientes de semente esto colocados (juntos ou
dispersos) e do tamanho dos recipientes. Por exemplo, duas horas para recipientes de
500 g; trs at quatro horas para sacos de 3 kg.
Sacudir as garrafas ao tir-las da autoclave ou da panela de presso.
Inoculao
Quando a temperatura na parte central do recipiente tiver baixado at atingir um valor
inferior temperatura limite superior para o desenvolvimento micelial, os recipientes
de semente podem ser inoculados. Usar para cada garrafa, no mnimo, um (no caso de
garrafas de 250 ml) ou dois (no caso de garrafas maiores) dos quadrados de 10 x 10
mm do gar plenamente coberto com a cultura-me.
Incubao
Incubar as garrafas at o miclio se ter desenvolvido de forma a cobrir todo o
substrato. A temperatura deve ser prxima da temperatura tima para se obter um
bom desenvolvimento micelial.

Sacudir uma vez (depois de oito dias) ou duas vezes durante o perodo de incubao
(ou cada trs ou quatro dias) para distribuir uniformemente o miclio e para prevenir
que os grnulos se peguem uns aos outros.
Armazenamento
Guardar a semente no refrigerador (com exceo de certas estirpes de semente de
Pleurotus djamor, que so suscetveis ao frio e, portanto, devem ser armazenadas a
temperaturas superiores a 12 C). Tir-los apenas se for necessrio. A temperatura
superior a 25 C, a semente em gros de cereal pode estragar-se dentro de uma noite.
Preparao da semente final
A escolha dum substrato especfico para semente depende das espcies selecionadas e
do mtodo de cultivo. No quadro seguinte apresentam-se os substratos para semente
usados com maior frequncia.
Espcie
Lentinula edodes
Pleurotus spp.
Auricularia spp

Mtodo de cultivo
Serradura esterilizada em sacos
Subst. Pasteurizados ou esterilizados
Subst. Esterilizado em sacos Serradur

Substrato final para semente

Gros de cereal, serradura
Gros de cereal, serradura ou palha
Serradura

Semente em serradura ou em gros de cereal?

A vantagem da semente em serradura que pode ser guardada a uma temperatura
mais alta, durante mais tempo, antes de se estragar. O material do substrato
tambm mais barato do que o dos gros de cereal. A semente veiculada em serradura
feita tal como se explica na descrio apresentada no captulo sobre substratos
esterilizados, exceto que deve ser esterilizada a 121C sob presso.
Uma vantagem da semente em gros de cereal o seu vigor. Uma desvantagem que
se estraga rapidamente e que contm muitos nutrientes, sendo, portanto, mais
suscetvel contaminao. A semente em gros de cereal no apropriada para
utilizar fora, ao ar livre, visto que ser consumida por roedores. A semente veiculada
em gros de cereal provoca uma subida mais rpida da temperatura no substrato
inoculado, do que a semente em serradura. Isto pode ser desejvel ou no. Os gros
de cereal so tratados tal como foi apresentado anteriormente com respeito
semente me. Podem ser inoculados com uso de semente em gros de cereal ou paus
de madeira.
Armazenamento e pureza
A semente de boa qualidade evidencia um desenvolvimento micelial vigoroso e no
contm outros organismos. Se tiver sido armazenado durante demasiado tempo,
tornar-se- menos vigoroso. Aps um armazenamento prolongado, a semente de
pleurotos tornar-se- muito compacta. Portanto, ser difcil aplic-lo uniformemente
durante a inoculao.

Inoculao de sacos esterilizados

O substrato deve ser inoculado logo que tenha arrefecido at a valores abaixo de 30
C. Usam-se quantidades relativamente grandes de se- mente: entre 7 a 10%. Contudo,
se se obtiverem os mesmos resultados com uso de percentagens mais reduzidas, no
preciso continuar a aplicar as ditas percentagens.
A inoculao realiza-se levantando os tampes de algodo dos sacos que contm o
substrato (quer dizer, abrindo os sacos) e metendo nestes uma pequena quantidade
de semente. Como neste momento h uma maior probabilidade de se efetuar uma
contaminao, os sacos devem ser mantidos abertos o mais curto tempo possvel!
Inoculao em camadas.
Durante o processo de inoculao, devem-se tomar as seguintes medidas para
controlar a contaminao do substrato:

Vestir roupa limpa.

Colocar os sacos quentes num recinto especial com lmpadas UV.
Deixar que arrefeam sem ventilao, ou ventilar com ar filtrado.
Efetuar a inoculao no dia seguinte (no esquecer apagar a lmpada UV).
Manter, tanto o substrato como os recipientes de semente, numa posio
horizontal para prevenir que esporos caiam no seu interior.
Utilizar uma chama, perto das bocas das garrafas com semente e dos sacos de
plstico, para manter o ambiente mais ou menos estril.
A inoculao deve ter lugar de noite, quando h menos contaminao no ar.
Limpar com uso de produtos qumicos (lcool).

Fazendo uma fumigao/nebulizao com H2O2 obtm-se um recinto limpo para

inoculao e, para alm disso, constitui um tratamento sem consequncias nocivas
para o meio ambiente, visto os seus produtos finais serem oxignio e gua.

Colonizao micelial
Durante a fase da colonizao micelial, o miclio desenvolve-se atravs do substrato. O
perodo da colonizao micelial diferente para cada espcie e depende do tamanho
do saco, da quantidade de semente, da estirpe usada e da temperatura.
Quando inoculados, dever-se-o colocar os sacos em prateleiras dentro dos recintos
de incubao. Dependendo da estirpe e da temperatura, o miclio colonizar o
substrato dentro de duas ou trs semanas e, logo, comear a formar pequenos
corpos de frutificao. Como consequncia, dever-se-o mudar as condies no
recinto de produo ou dever-se-o deslocar os sacos do recinto de incubao para o
recinto de produo. Em seguida, remover os tampes de algodo e (parte de) o
plstico e manter uma humidade alta: entre 90 a 95%. Contudo, se a humidade
relativa for bastante baixa, no se deve cortar e remover muito plstico, para que o
substrato no seque. Quando os cogumelos minsculos tiverem atingido um tamanho

de 1 cm, deve-se diminuir ligeiramente a humidade, quer dizer at 85%, ventilando ar

fresco atravs do recinto.

Frutificao/produo
Aplicam-se vrias tcnicas para encher a sala de cogumelos e preparar os sacos para a
frutificao. Uma prtica comum construir armaes, de bambu ou de madeira, e
empilhar nelas os sacos para formar uma parede de sacos de plstico.

Abertura dos sacos

Deve-se abrir os sacos logo que o miclio tenha coberto completamente o substrato.
Remover os tampes de algodo e cortar (parcialmente) o plstico da parte de cima do
saco. Ter cuidado para no cortar demasiadamente profundo, seno danificar-se- o
miclio. Se se quiser obter cogumelos pequenos, dever-se- expor uma superfcie
maior ao ar aberto. Observao: isto far com que o substrato seque mais
rapidamente. Dura de trs a quatro dias, aps a abertura dos sacos, para os
botes/cogumelos primordiais se formarem.

Pendurar os sacos
Outro mtodo cortar cada saco e pendur-lo do teto.

Temperatura
A temperatura ambiente deve corresponder bem estirpe do cogumelo escolhida. Se
a temperatura na sala de cogumelos for demasiadamente alta para a estirpe escolhida,
ser necessrio que a sala seja fumigada frequentemente. Abrir portas e janelas, de
noite, tambm ajuda a manter uma temperatura baixa.

Arejamento/ventilao
A sala de cogumelos deve dispor de orifcios de ventilao que tambm podem
fornecer luz.

Luz
Os pleurotos so muito suscetveis a uma insuficincia de arejamento e luz. A luz
necessria (cor e intensidade) depende das estirpes usadas. Alguns produtores seguem

a regra prtica que se deve ter suficiente luz para poder ler um jornal em qualquer
ponto do recinto de produo. Quando os pequenos cogumelos surgirem, a sua forma
revelar se recebem, ou no, luz e arejamento suficientes. Se os caules forem
compridos e os chapus pequenos, sinal de no se terem cumprido as necessidades
de arejamento e luz. Na ausncia completa de luz, os pleurotos no formaro chapus,
mas formam apenas ps (caules de cogumelo) desenvolvendo-se numa estrutura
similar ao coral.

Humidade
muito importante, para todos os tipos de cogumelo, que se mantenha um controlo
adequado da humidade durante a produo. Deve-se manter uma humidade alta
pulverizando gua vrias vezes por dia. Contudo, no se deve pulverizar gua
diretamente nos cogumelos prontos para serem colhidos. Se ficarem demasiadamente
molhados, o seu perodo de armazenamento (prazo de validade) reduzir-se- de forma
drstica.

Colheita
Os cogumelos esto prontos para serem colhidos dentro de cinco dias (se a
temperatura for de 15 at 20 C) ou aps dois at trs dias (a temperaturas mais altas).
O segundo fluxo aparecer aps um segundo perodo de cinco a nove dias. Existe tanta
variabilidade entre as estirpes e os substratos usados que se torna difcil dar uma
indicao dos perodos de frutificao. Tipicamente, dura uma semana,
aproximadamente, antes que se formem novos primrdios, mas isto depende muito
das condies climticas locais e do controlo climatolgico nos recintos de produo.
A colheita efetua-se puxando ou retorcendo, suavemente, os cogumelos do substrato.
No se deve retirar quase nenhum substrato.
A colheita pode continuar enquanto o miclio se mantenha firme e de cor branca. Em
total, podem-se colher trs ou quatro fluxos. Quando o substrato se tornar mole e
perder a cor, est na altura de remov-lo da sala.
A produo de cogumelos varia em funo dos fatores biolgicos, condies
ambientais e pragas e doenas presentes durante o cultivo. O rendimento duma
produo comercial de, aproximadamente, 20% do peso do substrato hmido de
pleurotos frescos.
Manuseamento dos produtos
Para evitar uma deteriorao rpida, os cogumelos frescos devem ser comercializados
imediatamente aps a sua colheita. Se isto no for possvel, devem-se secar os
cogumelos numa unidade simples de secagem, para serem comercializados mais tarde.

Produo de shiitake
O cultivo de shiitake em sacos de plstico, esterilizados, est a ganhar, rapidamente,
popularidade. Em comparao com o cultivo em toros de madeira, os cogumelos em
sacos podem ser colhidos mais cedo e fornecem um rendimento mais alto. Contudo, o
enchimento e a esterilizao dos sacos um trabalho intensivo e que custa energia. As
vantagens principais do cultivo de shiitake em sacos so as seguintes:
Podem-se utilizar muitos tipos de resduos orgnicos.
O perodo total de produo de 6 meses, enquanto que no cultivo em toros de
madeira de 4 a 6 anos.
Se o substrato tiver sido comprimido e se tiver usado apenas uma pequena quantidade
de semente, o perodo de incubao de trs a quatro meses.

Preparao do substrato
As formulaes do substrato que se usam de forma mais comum so:

Serradura, 3 a 4% farelo de arroz, 1% de farinha de milho ou farelo de trigo, 1%

de CaCO3.
Serradura, 10 a 25% de resduos de milho, 1 a 2% de CaCO3.

No momento da preparao, o teor de humidade situa-se, geralmente, entre 55-65%

do substrato (aplicar o teste de espremer) e aumenta durante a incubao.
Alguns relatrios indicam que uma alta capacidade de reteno de gua do substrato,
combinada com um arejamento adequado, dar origem a melhores resultados. Foi
constatado que se produziram rendimentos substancialmente mais altos quando se
misturaram folhas (de ch) com o substrato supramencionado, descrito com respeito
do cultivo de pleurotos.
Se o substrato estiver demasiadamente hmido, o fluxo de ar ser obstrudo e nem
sequer um perodo prolongado de colonizao micelial far com que se produza um
substrato de alta qualidade. Se se acumular gua nos fundos dos sacos, com certeza
que o substrato est demasiadamente hmido.

Colonizao e desenvolvimento micelial

Leva entre um a quatro meses para o miclio colonizar o substrato e amadurecer,
dependendo do tipo e da quantidade de semente.
Para a frutificao necessrio que se fornea alguma luz, no mnimo durante a fase
final da colonizao micelial. Produtores que tm recintos de colonizao micelial que
esto completamente escuros devero iluminar os recintos com uso dum ciclo de

dia/luz ao final da colonizao micelial. Podem-se evitar problemas se se contar

sempre com alguma luz durante todas as fases de crescimento.
Todas as estirpes mostram um desenvolvimento micelial timo a 25C. A temperatura
no interior dos sacos geralmente superior em alguns graus (podendo mesmo ter 10
graus a mais) temperatura ambiente. Se se colocarem muitos sacos no mesmo
recinto, pode ser necessrio proceder a um arrefecimento considervel.

Fases de desenvolvimento
Podem-se distinguir cinco fases diferentes de desenvolvimento micelial para todas as
estirpes de shiitake.
A primeira fase a colonizao micelial normal que tem lugar em todos os fungos.
Quando o substrato se tornou branco, ainda no est pronto para a frutificao, visto
que primeiro tem que amadurecer.
As cinco fases supramencionadas so as seguintes:
1. Colonizao micelial: a semente d origem a hifas brancas, que produzem
enzimas para decompor substncias complexas, como sejam celulose, lignina e
hemicelulose, em componentes mais pequenos. Estes fragmentos sero
consumidos durante as fases posteriores do desenvolvimento micelial. Quando
o substrato completo est colonizado, inicia-se a fase seguinte.
2. Formao de revestimento micelial: desenvolve-se uma camada micelial
branca, grossa, na superfcie do substrato. Isto tem lugar de duas a quatro
semanas aps a inoculao. Se o nvel de CO2 for al- to, a camada ser mais
grossa.
3. Formao de inchaos miceliais na superfcie da maioria das estirpes formamse, geralmente, inchaos ou conjuntos de miclio. Durante uma fase posterior,
estes inchaos podem tornar-se em primrdios, mas a maioria deles caiem. A
formao de inchaos estimulada por temperaturas variveis e um nvel alto
de CO2. Se se formarem muitos inchaos, reduza o nvel de CO2 fazendo cortes
no plstico. Os inchaos podem tornar-se problemticos durante uma fase
posterior do cultivo, visto que podem ser facilmente contaminados por bolores
verdes.
4. Fase de pigmentao: quando se tiverem formado os inchaos, dever-se-
proporcionar algum arejamento. O miclio tornar-se- castanho-avermelhado.

Contudo, se se retirarem todos os tampes de algodo, o substrato pode secar

demasiadamente.
5. Fase de endurecimento do revestimento: Remover o plstico quando os sacos
apresentarem, parcialmente, uma cor castanha (entre um tero metade). O
lado exterior do substrato (revestimento) endurece gradualmente, enquanto o
interior deve ficar mais mole e mais hmido. O teor de humidade do interior do
substrato (parte central) pode atingir valores altos, como seja 80%. Se o lado
exterior estiver relativamente hmido, os contaminantes tero um acesso fcil
ao substrato. importante ajustar as condies atmosfricas para se obter um
revestimento micelial da espessura apropriada.

Frutificao
Os mesmos fatores que estimulam a frutificao no cultivo de shiitake em toros de
madeira so usados para manipular os fluxos no cultivo em sacos de plstico.
Estes so os seguintes:

Flutuao de temperatura
Humidade alta
Demolha
Remoo de CO2
Choques fsicos

Se o plstico for removido demasiadamente cedo ou tarde, isto afetar a produo. A

ocorrncia de corpos de frutificao deformados, durante o primeiro fluxo, sinal de
uma colonizao micelial demasiadamente curta ou de um nvel de CO2
demasiadamente alto, durante a incubao. As estirpes diferem quanto taxa do seu
desenvolvimento micelial. Enquanto um perodo de 60 dias suficiente para uma certa
estirpe amadurecer, uma outra estirpe produziria muitos cogumelos deformados com
o mesmo perodo de amadurecimento. Se as temperaturas forem bastante baixas e se
se tiver usado uma estirpe apropriada, poder-se-o produzir cogumelos donko de alta
qualidade. Se tambm a humidade for relativamente baixa (60 at 70%), podem
aparecer rachas nos chapus da qualidade mais cara do Extremo Oriente, o chamado
cogumelo do inverno floriforme.

Fase/ atividade
Incubao
Induo dos corpos
de frutificao
Colheita

Dias
30-120

Temperatura (C)
20-30

Intensidade da luz (Lux)

Zero

Humidade relativa
65-70%

2-4

10-20

1 500-1000

85-95%

7-14

12-18

1 500-1000

60-80%

Recuperao
7-21
Induo dos corpos
de frutificao para 2-4
o segundo fluxo

20-30

Zero

65-70%

10-20

500-1000

85-95%

Quando o substrato inoculado apenas no topo, a maior parte dos cogumelos emerge
da parte superior (ver a Figura 28). Caso a semente tenha sido bem misturada com o
substrato, os cogumelos shiitake surgiro de todos os lados.

Colheita
Pegar os cogumelos pelos seus ps (caules) e tir-los cuidadosamente do substrato.
No os arrancar da superfcie, seno soltar-se- demasiado substrato. Colher os
cogumelos, conforme a qualidade requerida pelos compradores. No regar as
cicatrizes restantes, durante trs ou quatro dias. O crescimento de miclio branco nas
cicatrizes sinal de recuperao. Cogumelos completamente abertos tm um valor
muito inferior na sia, enquanto os compradores em Europa so menos crticos. A
produo normal rende entre 15 a 35% do peso do substrato molhado.

Pragas e doenas
Bolores verdes
Os bolores verdes so os contaminantes mais comuns no momento de inoculao.
Tambm se desenvolvem se houver qualquer racha nos sacos. Entre os fluxos, o
substrato deve ser mantido seco. Se as condies forem hmidas, estimulam a
contaminao e, visto esta atrair moscas, a contaminao difunde-se ainda mais.O
miclio de shiitake forma, normalmente, uma crosta abaixo da colnia de
Trichoderma. Recomenda-se borrifar os bolores verdes aps a colheita com gua
abundante. Contudo, se o substrato estiver demasiadamente mole (por motivo de um
teor de humidade excessiva), o bloco ser danificado e, portanto, ser mais difcil
obter um segundo fluxo de boa qualidade.
Mosquitos dos cogumelos
Os mosquitos dos cogumelos so atrados pelo cheiro do miclio. Podem aparecer em
lotes de sacos velhos. As moscas em si no danificam os cogumelos, mas pem ovos
entre as lamelas e no miclio. As larvas sairo dos ovos e estragaro a cultura. A nica
soluo para resolver este problema remover, de forma consistente, os sacos velhos
e contaminados e limpar os recintos.
caros
Os caros podem entrar nos sacos de incubao (se se utilizarem sacos com tampes
de algodo) e contaminar o substrato. Contudo, os sacos de plstico formam,

geralmente, um obstculo adequado contra insetos, para que este mtodo de

acondicionamento do substrato muito apropriado para pases com uma presso de
infestao/infeo elevada.