XII Congreso de Neurociencia

XII CONGRESO
DE LA
SOCIEDAD ESPAOLA DE NEUROCIENCIA

PONENCIAS Y COMUNICACIONES
Valencia, ESPAA
5-9 SEPTIEMBRE, 2007
Editado por: Publicacions de la Universitat de Valncia

Diseo de la cubierta: Celso Hernndez de la Figuera Gmez
Maquetacin: Celso Hernndez de la Figuera Gmez
ISBN: 978-84-370-6868-8
Depsito legal:
Impresin: Imprenta Palacios, Sueca
NDICE
Carta de presentacin del comit..................................5

Comit organizador y cientfico......................................6
Actividades...........................................................................7
Programa cientfico...........................................................10
Conferencias......................................................................15
Desglose del programa por das....................................53
ndice de autores............................................................ 177
carta de presentacin
Estimados amigos y compaeros

Es para nosotros, los miembros del Comit Organizador un placer el poder organizar el XII
Congreso de nuestra Sociedad en Valencia. Intentaremos poner los medios y el ambiente
adecuado para que la reunin sea un xito, pero para ello ser necesaria e imprescindible la
presencia de todos vosotros. Las ganas de aprender y divertiros sern vuestras.
Este ao hemos querido aadir a nuestras jornadas tradicionales de Pster, Simposium y
Conferencias, una jornada preliminar de Workshop sobre algunas de las herramientas ms
fundamentales en neurobiologa. Esperemos que el programa que hemos preparado haya sido
del inters de todos.
Este ao Valencia, como todos conoceris, ha sido el centro de numerosos eventos internacionales, entre ellos ha destacado la Americas Cup, lo que ha servido para potenciar las
infraestructuras y modernizar nuestra Ciudad. Este evento termin en julio, as que en septiembre podremos disfrutar de las modernas instalaciones realizadas, desde el nuevo Puerto
hasta el Palau de les Arts.
Entre los esfuerzos que nuestro Comit ha realizado, se encuentra la celebracin de la Cena
de Clausura en el espectacular anillo perimetral de LHemisfric, situado en nuestra conocida
Ciudad de las Artes y las Ciencias.
Esperamos que disfrutis de Valencia.
Un saludo.
Comit Organizador.
Comit organizador
Presidente: Jos Manuel Garca Verdugo
Vicepresidente: Francisco Jos Martnez Guijarro
Tesorero: Enrique Lanuza Navarro
Secretario: Juan Jos Canales Conejero
Vocales:
Vicente Felipo Orts
Berta Gonzlez De Mingo (*)
Fernando Martnez-Garca
Juan Ncher Rosell
Francisco Olucha Bordonau
Jordi Prez Tur
(*) Representante de la Junta Directiva de la SENC en el comit organizador
Comit cientfico
Presidente: Carlos Lpez Garca
Vocales:
Josefina Cano Garca
Javier Cudeiro Mazaira
Alberto Ferrs Gomero
Luis Miguel Garca Segura
Rosario Luquin Piudo
Rafael Maldonado Lpez
Oscar Marn Parra
Elena Vecino Cordero
Javier Yajeya Prez
AUDITORIO I
AUDITORIO II
AUDITORIO III A
AUDITORIO III B
FEST-INA. Acto social organizado por el Instituto de Neurociencias de Alicante (CSIC-UMH) (Saln Multiusos II)
19:30 - 20:30
aprox.
VIERNES 7
Conferencia Plenaria Dr. Tamas Freund

Endocannabinoid signaling in the cerebral cortex
Psteres. Sesin 1 (Hall)
17:00 - 18:30
18:30 - 19:30
Simposio 1: Perspectivas moleculares y Simposio 2: Regulacin del tr- Simposio 3: Anlisis funcional de la Simposio 4: Modulacin no invasiva
celulares del desarrollo neuronal
fico de los receptores de gluta- corteza en barriles representacio- de redes cerebrales: de la bsica a
mato
nes de estmulos complejos
la clnica
15:00 - 17:00
Acto Inaugural
Reunin de Club: P. Ramn y Cajal
AUDITORIO III B
Almuerzo (Hall)
Conferencia Inaugural: Dr. Francesc Artigas Serotonina : Falsas Impresiones y

Verdaderas Depresiones
13:00 - 14:00
AUDITORIO III A
ENTREGA DE DOCUMENTACIONES
AUDITORIO II
14:00 - 15:00
Presentacin histrica de la SENC

Dr. Fernando Reinos; De la primera
Reunin Espaola de Neurobilogos
(1980) a la Sociedad Espaola de NeuroCiencia (2007)
AUDITORIO I
12:30 - 13:00
12:00 - 12:30
08:00 - 11:30
08:00 - 12:00
JUEVES 6
jueves
6
AUDITORIO II
AUDITORIO III A
AUDITORIO III B
Simposio 8: Modelos animales para el Simposio 5:Oscilaciones y fun- Simposio 7: Dyrk1A un gen dosis- Simposio 6: Las neuronas hipotalaestudio de enfermedades neurosenso- cin cerebral : el bueno, el malo, sensibles candidato para el retra- micas Kiss-1 y la reproduccin
riales
y el patolgico
so mental
AUDITORIO I
09:00 - 11:00
Pausa Caf (Hall)
VIERNES 7
11:00 - 11:30
Comunicaciones Orales
(Desarrollo) 4A
(Desarrollo y Anatoma) 3A
11:30 - 13:00
(Patologa) 2A
Almuerzo (Hall)
(Biologa Celular) 1A
13:00 - 14:30
16:00 - 18:00
Conferencia Plenaria: Dr. Daniel Choquet New funtions for receptor surface trafficking in controling synaptic
transmission
18:15 - 19:15
Asamblea Senc
14:30 - 16:00
19:15
viernes
7
AUDITORIO II
Cena de Gala (LHemisfric)
(Fisiologa) 3B
* REUNIN DE CLUB GANGLIOS BASALES - SALA DE COMISIONES 1 - DE 09:00 A 17:00
22:00
Conferencia Plenaria Dr. Washington

Buo Nuevos golpes para un viejo ritmo
18:15 - 19:15
(Farmacologa) 2B
14:30 - 16:30
(Bioqumica) 1B
Almuerzo (Hall)
13:00 - 14:30
16:00 - 18:30
11:30 - 13:00
Simposio 11: Aproximaciones

computacionales a la funcin
cortical; de la percepcin a la
accin
AUDITORIO III A
Pausa Caf (Hall)
Simposio 10: Anlisis estructural y fun- Simposio 12: Iluminando los

cional de la sinaptogenesis
mecanismos de receptores y
canales inicos
AUDITORIO I
11:00 - 11:30
09:00 - 11:00
SBADO 8
( Fisiologa) 4B
Simposio 9: Funciones distributivas

de los ganglios basales
AUDITORIO III B
sabado
8
miercoles 5

4 WORKSHOPS.......................................................................................................168
Salas del Centro de Investigacin Prncipe Felipe (Ciudad de las Artes
y las Ciencias)

Protemica, genmica y bioinformtica
Neurofisiologa y biofsica
Neurociencia del comportamiento

Tcnicas avanzadas de Microscopia
jueves 6
08:00 - 11:30 h Reunin de Clubes:

Reunin de Club P. Ramn y Cajal (Audiorio III A).
12:00 - 12:30 h Acto Inaugural (Auditorio I)
12:30 - 13:00 h

Presentacin histrica de la SENC.........................................................................15

DE LA PRIMERA REUNIN ESPAOLA DE NEUROBILOGOS
(1980) A LA SOCIEDAD ESPAOLA DE NEUROCIENCIA
Reinoso-Surez, Fernando; Ex-Presidente de la SENC (Auditorio I)
13:00 - 14:00 h Conferencia Inaugural................................................................................................15

SEROTONINA: FALSAS IMPRESIONES Y VERDADERAS DEPRESIONES

Artigas, Francesc; Departamento de Neuroqumica y Neurofarmacologa,
IIBB-CSIC (IDIBAPS), Barcelona (Auditorio I)
14:00 h Almuerzo
15:00 - 17:00 h Simposio 1: Regulacin del trfico de los receptores de glutamato...............21

J Lerma / C. Mulle (Auditorio II)

Trafficking and sorting of non-conventional NMDARs?; I Perez- Otao,

Ph. D.
PKC mediated regulation of membrane kainate receptors; J Lerma
Role of neuronal calcium sensor proteins and calcineurin in the regulation of function and trafficking of kainate receptors; C. Mulle
Disruption of mGluR7a-PDZ interaction triggers absence-like epileptic
seizures; Fagni, L
15:00 - 17:00 h Simposio 2: Perspectivas moleculares y celulares del desarrollo neuronal......... 23

E. Soriano (Auditorio I)
10
Asymmetric centrosome function drives spindle orientation in drosophila neural stem cells; E. Soriano
Vias de sealizacin asociadas a morfogenos y guia axonal; P. Bovolenta
Receptores de gua axonal, protenas SNARE y exocitosis asimtrica en

el cono de crecimiento; T. Cotrufo
Localizacin polarizada de receptores y canales inicos durante el desarrollo axonal; J. J Garrido
15:00 - 17:00 h Simposio 3: Anlisis funcional de la corteza en barriles:

representaciones de estmulos complejos......................................25

Miguel Maravall/Daniel Shulz (Auditorio III A)
Mapas somatosensoriales y aprendizaje asociativo; A. Gruart

Adaptation and context-dependent velocity coding in the whisker system; M. Maravall
Spatially coherent and temporally correlated stimulations modulate
neuronal responses of the barrel cortex; V. Jacob
Electrophysiological correlates of texture representation in the whisker system; J. P. Vargas.
15:00 - 17:00 h Simposio 4: Modulacin no invasiva de redes cerebrales: de la bsica

a la clnica...............................................................................................28

A. Valero-Cabre (Auditorio III B)
Aplicaciones de la Estimulacin Magntica Transcraneal (EMT) en estudios de fisiologa cortical en sistemas motores en humanos; J. VallsSol
Modulacin de actividad cortico-talmica mediante Estimulacin Magntica Transcraneal repetitiva (EMTr) en la corteza visual del gato anestesiado; C. Rivadulla
Correlatos metablicos, conductuales y efectos teraputicos de la Estimulacin Magntica Transcraneal (EMT) en redes cerebrales visuoespaciales de animales y humanos; A. Valero-Cabr
Aplicaciones de la Estimulacin Magntica Transcraneal en el tratamiento de lesiones cerebrales focales en humanos; A. Pascual-Leone
17:00 - 18:30 h Psteres. Sesin 1 (Hall)............................................................................................31
18:30 - 19:30 h Conferencia Plenaria..................................................................................................16
ENDOCANNABINOID SIGNALING IN THE CEREBRAL CORTEX

Freund, Tamas; Institute of Experimental Medicine, Hungarian Academy

of Sciences, Budapest, Hungary (Auditorio I)
19:30 - 20:30 h FEST-INA
Acto social organizado por el Instituto de Neurociencias de Alicante

(CSIC-UMH) (Saln Multiusos II)
11
viernes 7
9:00 - 11:00 h Simposio 5: Oscilaciones y funcin cerebral: el bueno, el malo

y el patolgico.......................................................................................55

L. . Menndez de la Prida (Auditorio II)

Mecanismos de control de la actividad cortical y epilepsia; M. V. Snchez-Vives

Synchronous oscillations induced by hippocampal disinhibition; R. Miles
Oscilaciones de alta frecuencia en el ncleo subtalmico en la enfermedad de Parkinson; G. Foffani
Oscilaciones rpidas y ultrarrpidas (>400 Hz) en el hipocampo normal
y epilptico; L. Menndez de la Prida
9:00 - 11:00 h

Simposio 6: Las neuronas hipotalmicas KiSS-1 y la reproduccin.................57

M. Tena-Sempere (Auditorio III B)
The KiSS-1/GPR54 system: contribution to human reproductive physiology and pathology; N. de Roux

Influence of kisspeptins in the neuroendocrine control of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis; C. Dieguez

KiSS-1 neurons as conduits for puberty onset and metabolic regulation
of fertility; M. Tena-Sempere

KiSS-1 neurons as sensors of environmental cues to drive seasonal reproduction; V. Simonneaux
9:00 - 11:00 h Simposio 7: Dyrk1A un gen dosis-sensible candidato

para el retraso mental.........................................................................58

M. Dierssen (Auditorio III A)

Protective effect of catechins on brain alterations in murine models

overexpressing Dyrk1A; J. M. Delabar
Role of Mnb/Dyrk1A in the regulation of neural progenitor cell proliferation and neurogenesis; F. J. Tejedor
Genetic dissection of Down syndrome phenotypes in the mouse;
Y. Herault
Dyrk1A: a dosage sensitive gene with roles in Down syndrome and
Alzheimers disease; M. Dierssen
9:00 - 11:00 h Simposio 8: Modelos animales para el estudio de enfermedades

neurosensoriales;..................................................................................60

I. Varela, P. de la Villa Polo (Auditorio I)
12
Modelos animales genticamente modificados de enfermedades neurosensoriales; M. Arbores

Modelos animales de albinismo: una aproximacin valida para el estudio
del desarrollo de la retina de mamferos; Ll. Montoliu
Estudio neurofuncional no invasivo de modelos animales de sordera;
J. Contreras
Tcnicas de imagen en pequeos animales de laboratorio; J. J. Vaquero
11:00 - 11:30 h Caf (Hall)

13:00 - 14:30 h Almuerzo (Hall)
16:00 - 18:00 h Comunicaciones Orales (Auditorio I, II, III A Y III B).......................................103
18:15 - 19:15 h Conferencia Plenaria..................................................................................................17
NEW FUNCTIONS FOR RECEPTOR SURFACE TRAFFICKING
IN CONTROLLING SYNAPTIC TRANSMISSION

Choquet, Daniel; Physiologie Cellulaire de la synapse, Institut Franois

Magendie, UMR 5091 CNRS-Universit de Bordeaux, France (Auditorio I)
19:15 h Asamblea SENC
SABADO 8
9:00 - 17:00 h
Reunin de Club Ganglios Basales (Sala comisiones I)
9:00 - 11:00 h

Simposio 9: Funciones distributivas de los ganglios basales............................113

M. C. Rodrguez-Oroz / J. Obeso (Auditorio III B)
Organizacin anatmico-funcional de los ganglios basales: Circuitos paralelos; M. T. Herrero.

Effects of the modulation of the different territories of the basal ganglia:
pathological implications; L. Tremblay
Participacin del ncleo subtalmico en aspectos motores y no motores de la conducta humana; M. C. Rodrguez-Oroz
Tratamiento de la hipocinesia a la hipercinesia: Modulacin diferencial
de los ganglios basales; J. Obeso
9:00 - 11:00 h

Simposio 10: Anlisis estructural y funcional de la sinaptognesis................114

A. Acebes (Auditorio I)
Nmero de sinapsis y modulacin de la percepcin olfativa en Drosophila; A. Acebes
Synaptic changes related to long-term memory in insects; J. M. Devaud
Anlisis estructural de la incorporacin de nuevas neuronas en el cerebro adulto; J. R. Alonso
Mecanismos de sealizacin en diferenciacin sinptica mediados por
neurexinas; F. Gmez Sholl
13
9:00 - 11:00 h Simposio 11: Aproximaciones computacionales a la funcin cortical

de la percepcin a la accin...........................................................117

A. Compte / G. Deco (Auditorio III A)
How premotor neurons drive wrist movements: a view from dynamic
neural network models; M. Maier
Cortical mechanisms for the rapid segmentation and classification of
complex visual stimuli; P. Verschure
Neural and computational mechanisms underlying decision-making;
G. Deco
Mechanisms underlying the correlation between working memory capacity and attentional filtering; A. Compte
9:00 - 11:00 h

Simposio 12: Iluminando los mecanismos de receptores y canales inicos......

C. Solsona / P. Bregestowski (Auditorio II)
Lateral Trafficking of NMDA receptor subunits; L. Groc
Novel fluorescent sensors allowing non-invasive monitoring of intracellular CL-IN living cells; P. Bregestovski
The traffic of KCNQ2 channels and its regulation by
CA2+CALMODULIN; A. Villaroel
Photoswitchable glutamate receptors and their application to the remote control of neuronal activity; P. Gorostiza
11:00 - 11:30 h Caf (Hall)

11:30 - 13:00 h Psteres. Sesin 4 (Hall)..........................................................................................120
13:00 - 14:30 h Almuerzo (Hall)
14:30 - 16:00 h Psteres. Sesin 5 (Hall)..........................................................................................140
16:00 - 18:00 h Comunicaciones Orales (Auditorio I, II, III A y III B).......................................160
18:15 - 19:15 h Conferencia Plenaria Elio Garca-Austt.............................................................18
NUEVOS GOLPES PARA UN VIEJO RITMO

Buo, Washington; Instituto Cajal, CSIC, Madrid (Auditorio I)
22:00 h Cena de gala (LHemisfric)
14
JUEVES 6
12:30-13:00 h Presentacin histrica de la SENC (Auditorio I)

DE LA PRIMERA REUNIN ESPAOLA DE NEUROBILOGOS (1980) A LA
SOCIEDAD ESPAOLA DE NEUROCIENCIA
Reinoso-Surez, Fernando
Ex-Presidente de la SENC.
Pretendo rememorar los antecedentes, el ambiente, las personas y los hechos que llevaron al
nacimiento de la Sociedad Espaola de NeuroCiencia. Describo cmo y porqu en 1979 el grupo
de neurocientficos que enseaba de forma multidisciplinar la asignatura de Neurobiologa en la Universidad Autnoma de Madrid convoc la primera de las Reuniones Espaolas de Neurobilogos.
El principal objetivo era promocionar la investigacin neurocientfica en Espaa. Para ello se consideraron requisitos imprescindibles: el conocimiento mutuo y colaboracin de los diferentes grupos
de neurocientficos que trabajaban en Espaa, y la organizacin de actividades de formacin slida y
moderna para los jvenes investigadores. Tras relatar los resultados y circunstancias de las primeras
Reuniones en los aos 1980 y 1981, planteo el impacto que tuvo el VI Congreso Europeo de Neurociencia celebrado en Torremolinos en 1982 y la decisin en la Reunin de 1983 de crear la Sociedad
Espaola de Neurociencia. Expongo los trabajos de la heterognea Comisin Gestora, la elaboracin
de los Estatutos, la seleccin de los primeros Socios y el nacimiento de la Sociedad en 1985. Describo
los componentes y trabajos de las primeras Juntas Directivas y las incidencias de los primeros Congresos hasta la consolidacin de la SENC en los mbitos cientficos nacionales e internacionales. Hago
un recorrido por el desarrollo de la Sociedad, su crecimiento en cantidad y calidad y una apuesta de
futuro. Apuesta que se apoya en los jvenes a los que pido trabajo bien acabado, fidelidad a los hechos,
dedicacin y entusiasmo; a todos pido unidad y colaboracin.Termino haciendo unas reflexiones sobre
alguno de los principales logros neurocientficos en los ltimos aos y sobre retos de la Neurociencia
en un futuro inmediato
13:00- 14:00 h Conferencia Inaugural: (Auditorio I)

SEROTONINA: FALSAS IMPRESIONES Y VERDADERAS DEPRESIONES
Artigas, Francesc.
Departamento de Neuroqumica y Neurofarmacologa, IIBB-CSIC (IDIBAPS), Barcelona.
La serotonina es uno de los neuorotransmisores filogenticamente ms antiguos y juega mltiples

roles en el SNC, desde el neurodesarrollo hasta el control de los estados de nimo y de procesos cognitivos. La neurotransmisin serotoninrgica est implicada en la fisiopatologa y tratamiento de enfermedades psiquitricas graves como depresin y esquizofrenia. El correcto tratamiento de la depresin
constituye un reto sanitario de primer orden dada su creciente incidencia en los pases desarrollados
y la reducida eficacia de los frmacos utilizados. Los estudios realizados han permitido identificar una
15
serie de mecanismos adaptativos en neuronas serotoninrgicas responsables del retraso y accin limitada de dichos frmacos1. El uso de terapias experimentales mediante antagonistas 5-HT1A abre nuevas
perspectivas para el desarrollo de frmacos antidepresivos ms rpidos y eficaces que los actuales2.
Por otra parte, el sistema serotoninrgico es tambin diana de frmacos usados en el tratamiento
de la esquizofrenia y otos estados psicticos. Agonistas de receptores 5-HT2A son alucingenos, mientras que los frmacos antipsicticos actuales son antagonistas de dicho receptor, actuando tambin
como antagonistas de receptores dopamina D2 y agonistas de receptores 5-HT1A. Los estudios realizados en los ltimos aos permitido identificar las bases celulares y circuitos cerebrales implicados
en la accin de dichos frmacos con un nfasis especial en el estudio de la neurotransmisin serotoninrgica en corteza prefrontal3, 4.
Referencias:
1. Artigas y cols. Trends Neurocsi 1996; 19:378-383
2. Prez y cols. Lancet 1997;349: 1594-1597
3. Celada y cols. J Neurosci 2001; 21: 9917-9929
4. Daz-Mataix et al. , J Neurosci 2005 ; 25: 10831-10843
18:30-19:30 h Conferencia Plenaria (Auditorio I)

ENDOCANNABINOID SIGNALING IN THE CEREBRAL CORTEX
Freund,Tamas
Institute of Experimental Medicine, Hungarian Academy of Sciences, Budapest, Hungary.
Endocannabinoids are thought to be retrograde mediators in several forms of synaptic plasticity.

Depolarization of hippocampal pyramidal cells, or a rise in intracellular calcium evokes a CB1 cannabinoid receptor-mediated short-term depression of GABA release from afferent inhibitory terminals
(depolarization-induced suppression of inhibition; DSI). CB1 receptors are indeed present on axon
terminals of CCK-containing GABAergic interneurons, and these receptors mediate both endo- and
exogenous cannabinoid actions on cortical network oscillations and associated cognitive functions. In
recent studies, diacylglycerol lipase alpha (DGL-), the synthesizing enzyme of the endocannabinoid
2-AG, was shown to be present in dendritic spines of pyramidal cells, whereas boutons forming these
contacts were equipped with presynaptic CB1 receptors, confirming that 2-AG produced by DGL- in
spines may be involved in retrograde signaling at glutamatergic synapses.
We demonstrated the presence of the molecular machinery required for a nitric oxide-mediated
retrograde control of GABA release at basket cell synapses. Neuronal NO synthase (nNOS) was found
postsynaptically in pyramidal cell bodies within the GABAergic synaptic active zones, accompanied by
presynaptic soluble guanylyl cyclase (sGC) in GABAergic terminals. NO donors selectively elevate immunoreactive cGMP levels in CB1-expressing basket terminals. CB1-dependent DSI has been blocked
by inhibitors of NOS and sGC, as well as by NO scavengers, suggesting that NO and endocannabinoids
may cooperate under some circumstances to modulate GABA release from interneuron terminals.
Such a cooperation of gaseous and lipophilic substances represents a novel way of communication
between neurons, allowing activity-dependent and target-selective modulation of synaptic inputs.
16
VIERNES 7
18:15 a 19:15 h Conferencia Plenaria: (Auditorio I)

NEW FUNCTIONS FOR RECEPTOR SURFACE TRAFFICKING IN CONTROLLING SYNAPTIC TRANSMISSION
Choquet, Daniel.
Physiologie Cellulaire de la synapse, Institut Franois Magendie, UMR 5091 CNRS-Universit de Bordeaux, France.
Receptors for neurotransmitters are most often concentrated at synapses, in front of transmitter release sites. In the last two decades, cellular, molecular and proteomics studies have established
that this is likely due to their stabilization by an array of interacting scaffolding elements, including
intracellular and extracellular matrix proteins as well as adhesion molecules. This classic static image of the synapse has been complemented over the last 10 years by a more dynamic view of synaptic
components. Work by a number of laboratories has demonstrated that receptors are not static but
constantly traffic in and out of synapses. Initial studies starting at the turn of the century have mainly
concentrated on the processes of endo and exocytosis and have demonstrated that most receptors,
including the archetypical AMPA subtype of ionotropic glutamate receptors, undergo constitutive recycling at rather high rates and established that the residency time of receptors at the neuronal surface
is more in the order of tens of minutes and not days as initially thought. Recycling of AMPARs has
been shown to be regulated by neuronal activity and this has been proposed to be at the basis of most
post-synaptic forms of synaptic plasticity.
In 2001, we proposed that receptors could utilize an alternative and complementary pathway of
trafficking by the means of diffusion at the neuronal surface. Since then, developing and using a variety
of single molecule and single particle imaging approaches, we have established that most receptors for
neurotransmitters diffuse at high rates by random Brownian motion in the neuronal membrane. We
found that a large proportion of receptors are mobile both outside and inside synapses and that they
constantly exchange between these membrane subdomains, residing often only a few seconds in the
synapse.We have proposed (Choquet and Triller, Nat Rev Neuro 2003;Triller and Choquet,TINS 2005)
that receptors are in a dynamic equilibrium between the different subcellular compartments (synaptic,
extrasynaptic and intracellular), that the set point of this equilibrium determines receptor numbers at
synapse, and that changes in this equilibrium could be at the basis of processes of synaptic plasticity.
I will review recent results from our laboratory that 1) identify a series of molecules, including
Stargazin, PSD-95 and cadherins, as key determinants of AMPAR and NMDAR stabilization at synapses
and show how these molecules regulate AMPAR surface trafficking 2) demonstrate the role of neuronal activity in regulating receptor diffusion in and out synapses, 3) uncover a new unexpected role of
receptor diffusion in shaping fast synaptic transmission
17
SABADO 8
18:15 a 19:15 h Conferencia Plenaria: (Auditorio I)

nuevos golpes para un viejo ritmo
Buo, Washington
Instituto Cajal, CSIC, Madrid
El viejo ritmo: los comienzos con el grupo de Elio Garca-Austt; el ritmo theta hipocmpico y los
mecanismos de su generacin; el marcapasos septal; el reset del rimo theta y sus posibles consecuencias funcionales; el ritmo como posible regulador de la secuencia de movimientos.
Los nuevos golpes: presentar resultados de proyectos recientes relacionados con los mecanismos,
sitios de expresin y posibles funciones de distintas formas de plasticidad que evidencian la importancia
de la contribucin postsinptica a la plasticidad sinptica. Regulacin de la propagacin dendro-somtica
de potenciales sinpticos por conductancias dendrticas. modulacin de la plasticidad sinptica por conductancias de potasio activadas por calcio. regulacin de la ventana temporal de la spike timing dependent plasticity (stpd), una forma hebbiana de potenciacin a largo plazo (ltp). Dependencia de la stpd de
la forma de onda del potencial sinptico. modelos no hebbianas de la ltp, contribucin de los reservorios
de calcio intracelulares. LTPs que no requieren activacin de receptores nmda ni actividad pre-postsinptica. ltp simultnea de componentes ampa y nmda dependiente de la insercin de receptores ampa
y de cambios en las propiedades biofsicas de los receptores nmda, respectivamente. De lo anterior
podemos deducir que la sinapsis propone y la neurona dispone. Finalmente presentar un anlisis de los
componentes pre- y postsinpticos en la conversin de sinapsis silentes en funcionales y su implicacin
en la ltp. Esa conversin presinptica requiere de factores postsinpticos y seales retrgradas. De lo
anterior podemos concluir que la neurona dispone la forma de la propuesta sinptica.
Los mecanismos, las causas, formas y sitios de expresin de la ltp (ltps), propuesta como base
celular de fenmenos cognitivos, son infinitamente ms diversos de lo que previamente se ha considerado.
18
Jueves dia 6
JUEVES 6 - SIMPOSIA
15:00 a 17:00 Simposio 1: Regulacin del trafico de los receptores de glutamato

J. Lerma / C. Mulle (Auditorio II)
TRAFFICKING AND SORTING OF NON-CONVENTIONAL NMDARS
Prez Otao, I.
Neurobiologa Celular, Departamento de Neurociencias, Centro de Investigacin Mdica Aplicada, Universidad de Navarra, 31008 Pamplona
Glutamatergic synapse maturation involves as a critical step the replacement of developmentally-expressed N-methyl-D-aspartate receptors (NMDARs) with mature forms which differ in
subunit composition, electrophysiological properties, and propensity to elicit synaptic plasticity. However, the mechanisms underlying the removal and replacement of synaptic NMDARs
are poorly understood. Here we show that NMDARs containing the non-conventional NR3A
subunit are less tightly bound to postsynaptic compartments and undergo rapid endocytosis
from the dendritic surface. Endocytic removal is regulated by the intracellular adaptor PACSIN1/syndapin1, which directly and selectively binds the carboxy-terminal domain of NR3A
through its NPF motifs and assembles a complex of proteins including dynamin and clathrin.
Interaction with PACSIN1 facilitates endocytosis but also seems to modulate the postendocytic sorting of NR3A-containing NMDAR subtypes between degradative/recycling pathways.
Endocytosis of NR3A by PACSIN1 is activity-dependent, and disruption of PACSIN1 function
causes NR3A accumulation at synaptic sites. Together, these findings reveal a novel activity-dependent mechanism involved in the synaptic regulation of NMDARs during development, and
identify a brain-specific endocytic adaptor that confers spatiotemporal and subunit specificity
to NMDAR endocytosis. Potential implications of regulated steps of NMDAR trafficking for
synapse formation and elimination will be discussed.
FUNDING: Marie Curie IRG, NARSAD Foundation, Hereditary Disease Foundation, Ministerio Espaol de Educacin y Ciencia.
PKC MEDIATED REGULATION OF MEMBRANE KAINATE RECEPTORS

Lerma, J.
Instituto de Neurociencias de Alicante, CSIC-UMH
Glutamate receptors constitute a complex signalling system at most of the excitatory synapses in the brain. Of the known ionotropic glutamate receptors, kainate receptors (KARs) are
ubiquitous in the CNS and are present at both sides of the synapse. Pre- and postsynaptic KARs
regulate both transmission of information and excitability in a synapse-specific manner. Proteins
interacting with KARs subunits are being identified and functional studies have evidenced the
existence of a dual signalling system. Their involvement in synaptic plasticity is now clear and
they play a fundamental role in epilepsy through the strategic control of network excitability.
In KARs, signalling may occur through ion flux and by activation of G-proteins. The latter was
first observed in the hippocampus and later confirmed in other preparations. In cultured dorsal
root ganglion cells, activation of KARs produced the release of Ca2+ from intracellular stores in
a G-protein dependent manner and a concomitant activation of PKC.This non-canonical signalling is independent of ion channel activity and relies on an ionotropic subunit, GluR5. Recent
data from our lab indicate the existence of a mechanism of KARs auto-regulation involving the
interplay of these two types of signaling, in which PKC is a key player. Indeed, our results reveal
that the non canonical signaling capacity of KARs conveys the receptor with a fine mechanism
to sense afferent activity. Such a mechanism may represent an active way to limit overactivation
thorough the KAR system by the rapid regulation of the number of KARs in the cell membrane.
In addition, the mechanisms that regulate surface expression and endocytosis of KARs are
largely undetermined. We have found critical players in the endocytosis of KARs that specifi-
21
SIMPOSIA - JUEVES 6
cally exert their effects via KA2 receptor subunit, providing a mechanism for both rapid and
chronic changes in the number of synaptic kainate receptors.
ROLE OF NEURONAL CALCIUM SENSOR PROTEINS AND CALCINEURIN IN THE REGULATION OF THE FUNCTION AND TRAFFICKING OF KAINATE RECEPTORS.
Mulle, C.
Synapse Cell Physiology laboratory, CNRS, University of Bordeaux, Bordeaux France.
Kainate receptors form a family of ionotropic glutamate receptors that appear to play
a special role in the regulation of the activity of synaptic networks. These functions require
the proper subcellular localization of kainate receptors in specific functional domains of
the neuron, necessitating complex cellular and molecular trafficking events. Our comprehension of these mechanisms is just starting to emerge. Many kainate receptor-interacting
proteins have been identified in recent studies. Some of these proteins have been implicated in the trafficking, synaptic localization and modulation of the properties of kainate
receptors. We have recently shown that the two splice variants GluR6a and GluR6b can
co-assemble into the same heteromeric complex in native and recombinant receptors,
bringing into close proximity different sets of interacting cytosolic proteins (Coussen et
al., 2005). The set of proteins identified by a proteomic approach to interact with GluR6a/
GluR6b includes profillin II which may participate in cytoskeletal organization. GluR6b also
interacts with a group of proteins including calcineurin, calmodulin,VILIP-1 and VILIP-3 that
are involved in the regulation of receptors and ion channels by Ca2+. We have characterized further the mode of interaction of GluR6 with these interactors. We will also present
recent data showing how these interactions impact on the regulated trafficking and function of kainate receptors in heterologous expression systems and in neurons.
DISRUPTION OF mGluR7a-PDZ INTERACTION TRIGGERS ABSENCE-LIKE EPILEPTIC SEIZURES

Fagni, L., Bertaso,F., de Bock, F., Bockaert, J., Lerner-Natoli, M.
Institute of Functional Genomics, Montpellier, France
The aim of our study was to determine the neuro-physiological role of mGluR7-associated PDZ proteins, in vivo. To this end we designed a dominant-negative TAT peptide
to compete with the endogenous C-terminal LVI motif of mGluR7a. Disruption of the
mGluR7a-PDZ-domain protein complex caused absence seizures in both rats and mice.
The nature of the seizure was objectivated by EEG recordings showing characteristics
epileptic discharges (6-7 Hz) in thalamic nuclei and cortex, but not hippocampus, and concomitant with behavioural arrest of the animal. This was obtained by either systemic or
local (thalamic) application of the mimetic peptide. Two hours after systemic injection of
the TAT mimetic peptide we observed a significant increase in the intensity of c-Fos immunolabelling, specifically in brain regions known to be involved in absence epilepsy (thalamic
nuclei and somatosensory cortex). These studies provide the first animal model with pure
absence epilepsy induced by disruption of a mGluR7 PDZ interaction.
22
JUEVES 6 - SIMPOSIA
15:00 a 17:00 Simposio 2: Perspectivas moleculares y celulares del desarrollo neuronal

E. Soriano (Auditorio I)
ASYMMETRIC CENTROSOME FUNCTION DRIVES SPINDLE ORIENTATION IN DROSOPHILA NEURAL STEM CELLS.
Rebollo, E.
Parc Cientific de Barcelona. Institut de Recerca Biomdica. Joseph Samitier 1-5. 08028 Barcelona.
rebollo@irbbarcelona. org
Like the stem cells in other higher eukaryotes, Drosophila neural stem cells (NBs) divide
asymmetrically to generate a large self-renewing NBs and a smaller differentiating ganglion
mother cell (GMC). This process requires the localization at the apical cortex of the Par complex, which includes Bazooka (Baz), Par-6, and atypical protein kinase C (aPKC). This complex
drives the basal localization of the adaptor proteins Miranda and Partner of Numb (Pon) which,
in turn, mediate the accumulation of cell fate determinants such as Numb, Prospero, and Brat
at the basal cortex of the NB. Consequently, upon cell division, the determinants end up mostly
within the small GMC that buds off the basal side of the NB, resulting in the unequal developmental fate of the two daughters. To ensure that division occurs along this apical-basal polarity
axis, spindle orientation must be tightly controlled. The apical complex formed by Pins, Gi and
Mud regulates spindle orientation mediating the interaction of Mud with the apical centrosome.
However, it is unclear how the system can discriminate between the two centrosomes of the
NB so that only engages in this interaction. To study this key process, we have recorded Drosophila larval NBs engineered to express fluorescent reporters for microtubules, pericentriolar
material (PCM), and centrioles.We have found that early in the cell cycle, the two centrosomes
become unequal: one organizes an aster that stays near the apical cortex for most of the cell
cycle, while the other loses PCM and microtubule-organizing activity, and moves extensively
throughout the cell until shortly before mitosis when, located near the basal cortex, it recruits
PCM and organizes the second mitotic aster. Upon division, the apical centrosome remains
in the stem cell, while the other goes into the differentiating daughter. We have observed
that apical aster maintenance requires the function of Pins, whose loss of function has been
shown to induce neuroblastomas in Drosophila. These results reveal that i) spindle orientation
in Drosophila larval NBs is determined very early in the cell cycle, ii) is mediated by asymmetric
centrosome function and iii) may contribute to cell homeostasis by preventing uncontrolled
proliferation of the NBs.
VIAS DE SEALIZACION ASOCIADAS A MORFOGENOS Y GUIA

AXONAL.
Bovolenta, P.
Departamento de Neurobiologa Celular, Molecular y del Desarrollo, Instituto Cajal, CSIC, Dr. Arce 37,
Madrid 28002, Espaa.
La formacin de las conexiones nerviosas depende de la competencia del cono de crecimiento a recibir e integrar informacin proporcionada por varios mecanismos de sealizacin
organizados espacialmente y temporalmente a lo largo de su trayectoria. Por muchas neuronas,
este proceso es mediado por un numero limitado de molculas que pertenecen a familias de
receptores y ligandos conservados a lo largo de la escala filogentica. Estos incluyen las Ephrin/
Eph; Netrins/DCC-Unc5; Slits/Robo and Semaphorins/Plexin-Neuropilin. Adems de estas familias de molculas, en los ltimos aos se ha demostrado que las vas de sealizacin mediadas
por Shh, Bmp, Wnt y FGF, mas bien conocidas por su actividad en especificacin tisular, son
capaces de proporcionar sealizar al cono de crecimiento, proporcionando gua axonal.
23
SIMPOSIA - JUEVES 6
Como ejemplo de esta idea enseare datos de nuestro laboratorio que demuestran
que la sealizacin de Shh, Wnt y Bmp es importante para el correcto establecimiento de
las vas visuales y del cuerpo calloso en vertebrados.
RECEPTORES DE GUA AXONAL Y PROTENAS SNARE EN EL

CONO DE CRECIMIENTO
Cotrufo,T., Prez-Brangul,F., Muhaisen,A., Soriano, E.
La gua de los axones en desarrollo y de las neuronas migrantes puede depender del
control preciso del reciclaje del plasmalemma en regiones especficas del cono de crecimiento. Aqu mostramos que el receptor de Netrina-1 llamado Deleted in Colorectar
Cancer (DCC) forma un complejo a nivel de protena con la t-SNARE Syntaxina-1, tanto in
vivo como in vitro. Esta interaccin depende de Netrina-1 y requiere dominios especficos
de Syntaxina 1 y DCC. Tambin mostramos que el corte proteolitico de Syntaxina-1 por
la accin de la Toxina Botulnica C1, impide la quimioatraccin de los axones mediada por
Netrina-1 y la migracin de las neuronas en cultivos neuronales. Adems, interfiriendo con
las funciones de Syntaxina-1 mediante una construccion dominante negativa para Syntaxina 1 o con RNA de interferencia, se interrumpe la migracin dependiente de Netrina-1
y la gua axonal in vitro, y en la mdula espinal de pollo, in vivo. Estos datos indican que se
requiere la interaccin entre Syntaxina 1 y DCC para la gua neuronal mediada por Netrina-1, subrayando de este modo una relacin directa entre los mecanismos de sealizacin
asociados con los factores de gua axonal y la regulacin de la exocitosis en el cono de
crecimiento.
LOCALIZACIN POLARIZADA DE RECEPTORES Y CANALES INICOS DURANTE EL DESARROLLO AXONAL

Garrido, J. J.
Instituto Cajal, Consejo Superior de Investigaciones Cientficas.
Av. Doctor Arce, 37. Madrid 28002 jjgarrido@cajal. csic. es
El desarrollo neuronal comienza con la diferenciacin de dos compartimentos, el axn
y compartimento somatodendrtico. Adems de una diferente morfologa, cada compartimento se caracteriza por la localizacin de diferentes receptores y canales inicos en su
membrana. La especificacin y elongacin del axn determina el inicio de esta polaridad.
Este hecho est regulado por la actividad de PI3-quinasa (1). PI3-quinasa modula tanto la
dinmica del citoesqueleto de actina y microtbulos, a travs de GSK3, JNK2, Rac1 o cdc42,
como la localizacin polarizada de complejos de protenas en la neurita que ser el axn
(Par3/6, PKC,APC, -catenina, etc. ). Una vez especificado el axn, es necesario transportar
hacia l los receptores, canales inicos y dems protenas de membrana. La participacin
de los mecanismos de transporte, tanto de kinesinas como de protenas adaptadoras relacionadas con diferentes compartimentos subcelulares juega un papel importante, si bien
se sabe muy poco de su relacin con la localizacin axonal de protenas. Recientemente se
ha descrito que la kinesina 1 se localiza en el cono de crecimiento del futuro axn (2). A
pesar de la abundante informacin sobre mecanismos de localizacin somatodendrtica y la
identificacin de seales de anclaje de receptores y canales (p. ej. : motivos PDZ), en el caso
del axn la informacin es muy escasa. Inicialmente se describieron motivos aminoacdicos
que regulan la exclusin del axn para algunos receptores mGluR o motivos en la regin extracelular de protenas como el APP. Estudios posteriores han mostrado que la localizacin
axonal polarizada de una protena de membrana depende de mecanismos de endocitosis en
el soma y las dendritas, y de seales que permiten el anclaje en determinadas regiones del
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JUEVES 6 - SIMPOSIA
axn. Este es el caso del canal de sodio dependiente de voltaje, VAMP2 o NgCAM (3-6). Estas
protenas son enviadas tanto a la membrana somatodendrtica como axonal y contienen motivos
di-leucina o YXX, que permiten su interaccin con la maquinaria endoctica, dando lugar a su
eliminacin somatodendrtica.
Tras la formacin del axn, comienza a formarse el segmento inicial del axn, responsable
de la generacin del potencial de accin. Esta regin acta adems como barrera de difusin
y selecciona que protenas van a formar parte del axn (7). Esta regin contiene microtbulos
ms estables que permiten el anclaje y localizacin de una subunidad de kinesinas (KIF5) (8).
Entre las protenas concentradas o especficas del segmento inicial del axn destacan la IVespectrina, ankirinaG, canales de sodio (Nav1. 2 o Nav1. 6), canales de potasio (KCNQ2/3 o
Kv1. 1) o receptores de GABA tipo A. La localizacin y concentracin de estas protenas en
el segmento inicial del axn depende de la ankirina G (9). La seal responsable del anclaje a la
ankirina G y la localizacin en el segmento inicial del axn ha sido descrita en los canales de
sodio (6,10) y posteriormente confirmada en canales de potasio (11). Este motivo est relacionado con epilepsias infantiles, insuficiencia cardiaca (Sndrome de Brugada) y alteraciones en
la concentracin de receptores de neurotransmisores en el segmento inicial del axn ha sido
descrita en modelos de esquizofrenia. A pesar de la importancia del segmento inicial del axn
en la localizacin axonal de protenas, y por tanto en la funcin neuronal, an no conocemos
bien los mecanismos implicados en su formacin.
Referencias
1. Shi et al. (2003). Cell. 112(1):63-75.
2. Jacobson et al. (2006). Neuron. 49(6):797-804.
3. Garrido et al. (2001). EMBO J. 20(21):5950-61.
4. Sampo et al. (2003). Neuron. 37(4):611-24.
5. Wisco et al. (2003). J Cell Biol. 162(7):1317-28.
6. Fache et al. (2004). J Cell Biol. 166(4):571-8.
7. Nakada et al. (2003). Nat Cell Biol. 5(7):626-32.
8. Nakata and Hirokawa (2003). J Cell Biol. 162(6):1045-55.
9. Ango et al. (2004). Cell. 119(2):257-72.
10. Garrido et al. (2003). Science. 300(5628):2091-4.
11. Pan et al. (2006). J. Neurosci. 26(10):2599-613.
15:00 a 17:00 h Simposio 3: Anlisis funcional de la corteza en barriles: representaciones de

estmulos complejos Miguel Maravall Daniel Shulz (Auditorio III A)
MAPAS SOMATOSENSORIALES Y APRENDIZAJE ASOCIATIVO
Gruart-Mass, A.
Divisin de Neurociencias, Universidad Pablo de Olavide 41013-Sevilla
La corteza somatosensorial primaria contiene una representacin topogrfica de la superficie corporal, as que su estimulacin puede ser sustituida por (o sustituir a) la estimulacin
directa de los receptores cutneos. Para comprobar esta hiptesis, se prepararon conejos
para el condicionamiento clsico del reflejo corneal, con un paradigma de traza. Los animales
recibieron como estmulo condicionado un tren de pulsos en: i) el parche de vibrisas; ii) la
corteza somatosensorial de las vibrisas; o iii) la corteza somatosensorial de la pata trasera
contralateral. En todos los casos, el estmulo incondicionado fue un soplo de aire en la crnea
aplicado 250 ms despus del tren de pulsos. En los tres grupos, los animales mostraron curvas
de aprendizaje similares, aunque aquellos animales a los que se les estimul el SNC aprendieron
un ms rpidamente. En experimentos sucesivos, se entrenaron conejos con el mismo paradigma de condicionamiento, presentando idnticos estmulos condicionados de forma central
25
SIMPOSIA - JUEVES 6
o perifrica durante seis sesiones de condicionamiento, tras las cuales se intercambi el

sitio de presentacin del estmulo durante cinco das. Los animales entrenados no pudieron
discriminar entre los estmulos perifricos y los estmulos presentados directamente en la
corteza somatosensorial. El anlisis de las propiedades cinemticas de las respuestas condicionadas mostr que stas no variaron con el cambio de diana de estmulo condicionado.
Se sugiere que en la corteza somatosensorial se reproduce un percepto de la superficie
corporal, de modo que el sistema intelectivo no distingue entre un estmulo, de idnticas
caractersticas, presentado de forma central o perifrica.
ADAPTATION AND CONTEXT-DEPENDENT VELOCITY CODING

IN THE WHISKER SYSTEM
Maravall-Rodrguez, M.
Instituto de Neurociencias de Alicante, UMH-CSIC
Las neuronas de la corteza en barriles de la rata adaptan a la estimulacin dinmica de
vibrisas. Esta adaptacin implica un ajuste de las relaciones estmulo-respuesta (curvas de
sintona): las neuronas ajustan su ganancia a la distribucin actual de estmulos, es decir, al
contexto sensorial. Este ajuste implica que la respuesta a una determinada textura puede
ser invariante frente a factores espreos como la amplitud del movimiento de vibrisas del
animal. En otros sistemas con adaptacin similar existe abundante informacin sobre los
mecanismos subyacentes. En la corteza en barriles, la adaptacin a estmulos repetidos
depende de la depresin sinptica talamocortical, pero se desconocen las bases de la adaptacin a estmulos complejos. Hemos examinado dos aspectos del proceso. Primero, verificamos si las propiedades intrnsecas de neuronas corticales generan adaptacin y cambios
en las relaciones estmulo-respuesta. Para ello realizamos registros patch de clula entera
en rodajas, inyectando corrientes fluctuantes cuya distribucin estadstica variaba generando un contexto cambiante. Las neuronas adaptan su tasa de disparo y ajustan su ganancia al
recibir estmulos netamente despolarizantes, como sucede in vivo. Diferentes propiedades
intrnsecas (hiperpolarizacin lenta, inactivacin lenta de corrientes de sodio) contribuyen
de forma parcialmente redundante al comportamiento. Segundo, medimos la adaptacin a
estmulos complejos en la va somatosensorial in vivo. En el ncleo ventral posterior medio
del tlamo, las neuronas muestran gran diversidad en la adaptacin de su tasa de disparo y
en la modulacin de su ganancia; por el contrario, en el ganglio del trigmino las neuronas
no adaptan ni modulan su sensibilidad.
Referencias

26
Maravall M., Petersen R. S., Fairhall A. L., Arabzadeh E., Diamond M. E., Shifts in coding properties
and maintenance of information transmission during adaptation in barrel cortex, PLoS Biol. 5:
e19 (2007). doi:10. 1371/journal. pbio. 0050019.
JUEVES 6 - SIMPOSIA
SPATIALLY COHERENT AND TEMPORALLY CORRELATED STIMULATIONS MODULATE NEURONAL RESPONSES OF THE BARREL CORTEX.
Jacob,V., le Cam, J., Shulz, D. E.
Unit des Neurosciences intgratives et computationnelles, CNRS, 1 avenue de la Terrasse, 91190 Gif
sur Yvette, France.
Rats localize objects and discriminate textures by scanning the objects surface with their
facial vibrissae. The exploratory movements of the vibrissae generate spatio-temporally complex sequences of tactile contacts.The neural responses of the somatosensory system to these
tactile scenes have not yet been explored. Here, we delivered in a controlled manner biologically inspired complex tactile stimuli to the rats facial whiskers using a new 5 by 5 matrix of
stimulation composed of 25 independent piezoelectric actuators adapted to the 5 rows and
the 5 caudal arcs of the whisker pad. We used the stimulator to build spatio-temporal receptive fields (ST-RF) using sparse noise stimulation and forward correlation techniques. Most
units showed multivibrissal ST-RFs with different degrees of asymmetry and elongation. We
have further tested tactile scenes composed of sequences of locally invariant stimulations (i. e.
a rostro-caudal deflection for each whisker) that differed in their multivibrissal saptiotemporal
pattern. The patterns corresponded to a wave of contacts that would be generated by a bar
moving at a constant speed (1. 25 m/s) in 8 different directions across the mystacial pad. We
calculated direction-tuning curves defined only by the multivibrissal component of the movement. We observed in 75% (n=65) of the neurons a significant direction anisotropy indicating
that the system extracts collective properties of the stimulus and globally integrates a tactile
scene, probably through the implication of lateral cortical connections. This may represent an
adaptation of the barrel system for the detection of natural tactile scenes during discrimination
tasks in the everyday life
ELECTROPHYSIOLOGICAL CORRELATE OF TEXTURE REPRESENTATION IN THE WHISKER SYSTEM

Vargas, J. P.
Cognitive Neuroscience Sector. SISSA
During the last few years, a considerable advance has been made in identifying the coding
characteristics of tactile stimuli by the somatosensory cortex of the rats. In this sense, different
surfaces induce whisker shaft vibrations with distinct profiles that produce a distinct cortical
response profile. Nevertheless there is a lack of studies on freely moving rats using naturalistic stimuli. Also, recent studies in primates have shown that somatosensory cortex seems
involved in the transient storage of information during working-memory tasks. These studies
suggest that the trace during working memory could be stored in the sensory cortex, probably by the same neuronal populations that process the sensory signal during training. Here we
present the neuronal activity in somatosensory cortex of freely moving rats while performing a working-memory task by discriminating textures. Multi-neuron spiking responses were
recorded by using multitetrodes microdrives implanted on somatosensory cortex of freely
moving rats while discriminating the textures.Whisker movements were tracked by using highspeed cameras. Neuronal activity in somatosensory cortex during whisker contact with the
textures and during the delay between the contact with the sample texture and the matched
ones were characterized. The neuronal response activity for each texture was characterized in
somatosensory cortex and the activity of the units was analyzed in order to find the trace of
the texture/s memory/ies during the delay period of the task.
27
SIMPOSIA - JUEVES 6
15:00 a 17:00 h Simposio 4: Modulacin no invasiva de redes cerebrales: de la bsica a la

clnica; A.Valero-Cabre (Auditorio III B)
APLICACIONES DE LA ESTIMULACIN MAGNTICA TRANSCRANEAL EN ESTUDIOS DE FISIOLOGA CORTICAL EN SISTEMAS
MOTORES EN HUMANOS.
Valls-Sol, J.
Hospital Clinic de Barcelona
La estimulacin magntica transcraneal (EMT) constituye una herramienta neurofisiolgica de gran valor. Ha venido a rellenar uno de los ms importantes huecos en la metodologia neurofisiolgica utilizada para la caracterizacin de las disfunciones motoras. Aparte
de la gran cantidad de estudios fisiolgicos que ha permitido, al tratarse de un mtodo
no invasivo y no doloroso permite su aplicabilidad clnica para la evaluacin de lesiones
neurolgicas. Aunque desde el punto de vista clnico la indicacin que puede parecer ms
clara para efectuar exmenes neurofisiolgicos mediante EMT es la presencia de signos de
piramidalismo, no debe verse a la EMT como solamente un mtodos para objetivar disfunciones piramidales sin tambin como un mtodo que permite la medicin de cambios de
excitabilidad intracortical, intra- e inter-hemisfricos a travs del registro de los potenciales
evocados motores (PEM) inducidos en varios msculos del organismo. La Tabla muestra un
resumen de las medidas que se pueden efectuar con EMT.
Tabla: Tcnicas neurofisiolgicas basadas en la estimulacin cortical magntica
Tcnica
Dato
Umbral motor en reposo
Nivel de excitabilidad basal
Umbral motor durante contraccin
Nivel de excitabilidad durante contraccin
Estimulacin focal mltiples puntos
Mapas de representacin cortical
Estimulacin cortical y espinal
Tiempo de conduccin motora central
Facilitacin por contraccin muscular
Energizacin de la corteza motora
Facilitacin por intensidad de estmulo
Reclutamiento unidades motoras funcionales
Perodo de silencio contralateral
Funcin inhibitoria cortical
Perodo de silencio ipsilateral
Inhibicin transcallosa (GABAB)
Estimulacin pareada 2-3 ms
Inhibicin crtico-cortical (GABAA)
Estimulacin pareada 11-15 ms
Facilitacin crtico-cortical
Estimulacin focal bi-hemisfrica
Inhibicin interhemisfrica
Modulacin de reflejos segmentarios
Efecto de TMS sobre interneuronas
Modulacin PEM por estmulos sensoriales
Integracin sensitivo-motora
Sin duda, la tcnica ms utilizada en la prctica clnica es el estudio del tiempo de

conduccin motora central a partir de la EMT cortical y espinal o calculado a travs de la
onda F. Para las extremidades superiores se registra el PEM de los msculos de la mano
a la estimulacin cortical y cervical. Para las extremidades inferiores se puede utilizar el
msculo tibial anterior o el extensor propio de los dedos. Los resultados varian segn si se
efecta la medicin en completo reposo o durante un pequeo grado de contraccin. En
nuestro laboratorio, el lmite mximo del tiempo de conduccin central es de 9. 5 ms para
las extremidades superiores y de 19 ms para las inferiores.
Los umbrales motores (sean en reposo o durante contraccin muscular) pueden ser
de utilidad clnica para determinar el grado de excitabilidad cortical. Sin embargo, la variabi-
28
JUEVES 6 - SIMPOSIA
lidad interindividual es tan grande que el dato solamente ser til cuando se comparan grupos
de sujetos. El nivel de excitabilidad corticoespinal puede medirse usarse la tcnica de triple
estimulacin: Para registros en la eminencia tenar, la tcnica consiste en aplicar EMT seguida de
un estmulo elctrico en el nervio mediano en la mueca y otro estmulo elctrico en el punto
de Erb. Los axones de las motoneuronas activadas por la EMT van a colisionar con la descarga
antidrmica producida por el estmulo en la mueca y aquellos axones en los que no se haya
producido la colisin van a ser colisionados por la descarga eferente producida por el estmulo
en el punto de Erb. Por lo tanto, la amplitud del potencial generado en la eminencia tenar por
la estimulacin elctrica en el punt de Erb reflejar la cantidad de motoneuronas en las que la
EMT ha producido realmente despolarizacin.
La configuracin del mapa de representacin cortical de los msculos en los que se registra
el PEM puede indicar cambios plsticos cerebrales, por ejemplo en el caso de la amputacin
de miembros, donde se observan cambios significativos en la representacin cortical de los
msculos proximales a la lesin.
La facilitacin del PEM por contraccin voluntaria o por aumento de la intensidad del
estmulo indica el reclutamiento de un nmero mayor de neuronas a nivel cortical, sea por
sumacin temporal o espacial. La disociacin entre ambos tipos de facilitacin puede indicar
alteraciones en uno de los procesos, tipicamente en la facilitacin por contraccin muscular
voluntaria, que indicaria la energizacin de la corteza motora primaria.
El perodo de silencio contralateral e ipsilateral se obtienen cuando el sujeto mantiene una
contraccin muscular voluntaria y se aplica EMT focal unilateral. En la mano contralateral se
obtiene un silencio que interrumpe la actividad electromiogrfica durante unos 150 ms. La parte
inicial de dicho perodo de silencio es posiblemente consecuencia de fenmenos a nivel espinal,
en parte atribuibles a la induccin de inhibicin por despolarizacin post-PEM. En la parte final,
la excitabilidad a nivel espinal est ya recuperada y el silencio es atribuible a inhibicin cortical.
El perodo d silencio ipsilateral es de origen no aclarado, participando posiblemente circuitos
inhibitorios transcallosos y a otros niveles ms caudales.
La aplicacin de pares de estmulos ligados temporalmente permite observar efectos inhibitorios y excitatorios de estmulos de baja intensidad. Si el intervalo entre estmulos es de
corta duracin (1 a 5 ms), el efecto es inhibitorio, mientras que si es mayor de 10 ms, el efecto
es facilitador. Se asume que los efectos son intracorticales ya que el potencial condicionante
(el primero del par de estmulos) es de intensidad suficientemente baja como para no producir
potenciales de accin en la via crtico-espinal.
Un estmulo focal unihemisfrico es inhibidor para la via motora contralateral (inhibicin
interhemisfrica). Este efecto se observa al usar una estimulacin focal unilateral y analizar el
PEM obtenido por la EMT aplicada al hemisferio contralateral con un intervalo de 7-10 ms.
La EMT produce cambios de excitabilidad en interneuronas espinales que pueden ser analizados mediante el estudio de reflejos segmentarios. El reverso tambin es verdad: es decir, la
estimulacin de nervios perifricos produce cambios en la amplitud de los PEM inducidos por
EMT aplicada a partir de unos 20 ms despus del estmulo elctrico en el nervio perifrico.
Todas las tcnicas mencionadas tienen aplicabilidad clnica en el estudio de afecciones neurolgicas. El experto en EMT debe seleccionar la tcnica adecuada para cada caso a fin de obtener la informacin precisa. Estudios con EMT repetitiva tienen todava poca aplicabilidad clnica
pero permiten conocer cada vez con ms profundidad aspectos fisiolgicos esenciales no solo
motores sin tambin de otras reas corticales al producir cambios focales controlados de la
excitabilidad neuronal.
29
SIMPOSIA - JUEVES 6
MODULACIN DE LA ACTIVIDAD CORTICO-TALMICA MEDIANTE ESTIMULACIN MAGNTICA TRANSCRANEAL REPETITIVA (EMTR) EN LA CORTEZA VISUAL DEL GATO ANESTESIADO
Rivadulla, C., de Labra,C., Espinosa, N., Mario, J., Cudeiro, J.
Neurocom, Universidad de A Corua.
La EMTr es una tcnica que permite modificar la actividad de la corteza cerebral de
forma no invasiva, evocando tanto excitacin como inhibicin segn el ajuste de los parmetros de estimulacin. Aunque las aplicaciones de la EMTr han crecido de manera sustancial durante la ltima dcada, su utilizacin como herramienta en modelos animales ha
sido, hasta el momento, bastante limitada, a pesar de que presenta ventajas obvias para
determinado tipo de experimentos.
En nuestro laboratorio utilizamos la EMTr, combinada con tcnicas electrofisiolgicas,
para estudiar el papel que juegan las conexiones cortico-talmicas en el procesamiento de
la informacin sensorial visual. Para ello aplicamos EMTr en la corteza visual primaria de
nuestro modelo experimental (gato anestesiado y paralizado) a la vez que registramos la
actividad de neuronas individuales en el ncleo geniculado lateral. Observando cmo se
modifican las respuestas de las neuronas talmicas frente a los diferentes estmulos visuales,
en las diferentes condiciones experimentales, podemos profundizar en la funcin de las
aferencias corticales.
Nuestros resultados subrayan la importancia y diversidad de funciones de estas aferencias, ya que afectan tanto a la estructura espacio-temporal del campo receptor de las
clulas del tlamo variando su latencia de respuesta y su extensin, como a otras caractersticas de la respuesta de la clula como la duracin de la misma o el nmero de potenciales de accin en modo tnico (relacionados con el anlisis fino de la imagen) . Estos
resultados nos permiten profundizar sobre la fisiologa de las aferencias cortico-talmicas y
confirman el potencial de la EMTr como una tcnica de gran utilidad en la experimentacin
electrofisiolgica.
Financiado por: MEC BFU2005-00502
Correlatos metablicos, conductuales y efectos teraputicos de la Estimulacin Magntica Transcraneal (EMT) en redes cerebrales visuo-espaciales de animales y humanos;
A.Valero-Cabr
Boston University School of Medicine
Aplicaciones de la Estimulacin Magntica Transcraneal en el tratamiento de lesiones cerebrales focales

en humanos
A. Pascual-Leone
Beth Israel Medical Center Harvard
30
JUEVES 6 - POSTERES HALL

17:00 a 18:30 h en la sala Hall (nmero: 1, sesin: 1)
Sinaptognesis durante la formacin de

los glomrulos en el bulbo olfativo del
ratn
FUNCIONES DE IGF-I EN LA MIGRACION Y DIFERENCIACIN
Blanchart Aguado, A. ; Romaguera, M. ; Garca-Verdugo J. M. ; de

Carlos J. A. y Laura Lpez-Mascaraque
Instituto Cajal (CSIC), Madrid, Centro de Investigacin Prncipe Felipe, Universidad de Valencia, Instituto Cavanilles, Valencia
Hurtado Chong, A. ;Yusta-Boyo, M. J. *, Vergao-vera, E. +, De Pablo,

F. *,Vicario-abejn, C. +
+Instituto Cajal, CSIC, Madrid; *Centro de Investigaciones Biolgicas, CSIC, Madrid
La formacin de sinpsis durante el desarrollo del cerebro es vital

para el funcionamiento normal del sistema nervioso central. Durante el
desarrollo, la formacin de los glomrulos olfativos tiene lugar en ratn
durante los das embrionarios 14 a 16 (E14-E16), simultneamente a la
entrada en el bulbo olfativo (BO) de los axones procedentes del epitelio
olfativo. En este trabajo se analiza la correlacin entre la formacin de los
glomrulos olfativos con la generacin de sinapsis a lo largo de los ejes
dorso-ventral y latero-medial del bulbo olfativo en las etapas de desarrollo E13 y E16. Mediante immunocitoqumica para el anticuerpo SV-2 y microscopa electrnica, hemos determinado que el inicio de este proceso
tiene lugar de un modo gradual y coetneo con la entrada de la aferencia
sensorial al BO. Encontramos un gradiente espacio-temporal dado que la
aparicin de nuevas sinpsis es mayor en reas ventro-mediales del BO,
estando localizadas en las capas de nervios olfativos y plexiforme externa. A nivel de ultraestructura, observamos que en E13 slo se observan
uniones electrodensas. En E14 hay sinapsis unidireccionales, aumentando
el nmero vesculas en E15. En E16 las sinapsis ya son bidireccionales.
Concluimos que la sinaptognesis en BO muestra un gradiente espaciotemporal (medio-lateral y ventro-dorsal) coincidente con la entrada de
los axones sensoriales procedentes del epitelio olfativo y la formacin de
los glomrulos. (Financiado con los proyectos BFU 2006-01898-MEC y
Consorcio OLFACTOSENSE, Comunidad Autnoma de Madrid, Ref. PSEM-0255-2006)
IGF-I es un factor trfico de la familia de la insulina que, en cerebro,

se expresa abundantemente en la zona subventricular (ZSV) y en el bulbo
olfatorio (BO) 1,2. En este estudio analizamos la influencia del IGF-I en la
estructuracin del BO y exploramos posibles mecanismos implicados en
el fenotipo observado. Se realizaron inmunotinciones y contajes en secciones de BO de ratones knock out (KO) y silvestre para IGF-I a distintas edades embrionarias y postnatales. A pesar de que las diferentes capas
del BO estn presentes en el ratn KO, stas mostraron alteraciones en
la organizacin y disposicin de las neuronas mitrales e interneuronas. En
la capa periglomerular del ratn KO, se observ una notable disminucin
de clulas DCX+, gabargicas y dopaminrgicas probablemente debido a
la acumulacin de neuroblastos en la zona subependimal (ZSE). Asimismo,
hubo una disminucin del 80% de clulas Dab1+, protena adaptadora de
la ruta de sealizacin de relina, en la capa plexiforme externa. Anlisis
por Western blot de extractos de BO embrionarios, mostraron una
disminucin en los niveles de fosforilacin de DabY232. Adems se realizaron cultivos de rodajas de BO embrionario para estudiar la influencia
del IGF-I en la migracin celular. Nuestros resultados sugieren que el
IGF-I es necesario para la correcta migracin de neuroblastos y la formacin de las capas del BO. Los cambios hallados en la ruta de la relina
en el ratn KO, apuntan hacia sta va de sealizacin como un posible
mecanismo subyacente a las alteraciones encontradas.
1. J Neurosci. (2003) 23(3):895-906.
2. Endocr Rev. (2005)26(7):916-43
17:00 a 18:30 en la sala Hall (nmero: 2, sesin: 1)
ESTUDIO EXPERIMENTAL DE LOS TERRITORIOS

PRESUNTIVOS DEL TELENCFALO Y DE LA MIGRACIN NEURONAL PALIO-SUBPALIAL EN EL EMBRIN DE POLLO.
Activated EGFR signaling induces proliferation, survival, and migration and blocks neuronal differentiation in postnatal
neural stem cells.
Pombero A. y Salvador Martnez.

Instituto de Neurociencias de Alicante, UMH-CSIC, Universidad
Miguel Hernndez, Campus de San Juan, N-332, Km 87, 03550 San
Juan de Alicante, Espaa.
Ayuso Sacido, A. 1,4, Capilla-Golzalez,V. 4, Kratovac, S. 1, ORourke,

D. M3, Roy NS2, Garcia-Verdugo JM4, and Boockvar JA1
1. Neurosurgical Laboratory for Translational Stem Cell Research,
Department of Neurosurgery, Weill Cornell Medical College of
Cornell University, New York, NY.; 2. Department of Neurology and
Neuroscience, Weill Cornell Medical College of Cornell University,
New York, NY.; 3. Department of Neurological Surgery, University
of Pennsylvania School of Medicine, Philadelphia, PA; 4. Centro de
Investigacion Principe Felipe, Madrid, Spain; Corresponding author
Diversos estudios basados en anlisis comparativo de la expresin

de genes han establecido la homologa del telencfalo en vertebrados
(Puelles, 2000). Sin embargo, se necesita un estudio prospectivo que demuestre experimentalmente las relaciones anatmicas en el territorio
presuntivo del telencfalo para comprender los cambios morfogenticos
de su desarrollo. Estudios previos de fate map han sido realizados en estadio de placa neural (Cobos et al., 2001) o no muestran suficiente informacin anatmica (Smith-Fernandez et al., 1998). Hemos realizado un fate
map del telencfalo en el tubo neural del embrin de pollo y estudiado
las migraciones celulares telenceflicas durante el desarrollo embrionario,
usando trasplantes codorniz-pollo. Los trasplantes rostro-mediales originaron el subpalio. La regin media y dorsal form estructuras como el
palio lateral y el palio dorsal y caudal a ellas, el territorio presuntivo del
palio medial y la fimbria del hipocampo. Los trasplantes postero-laterales
muestran territorios positivos en la amgdala. Caudal al palio medial y al
subpalio encontramos el territorio presuntivo de pretlamo. El estudio de
los trasplantes de la regin ms lateral y ventral de la vescula telenceflica, revel los primordios del rea entopeduncular, el rea preptica y la
retina, formando dominios longitudinales. Estudiamos tambin las migraciones celulares tangenciales dorso-ventrales que se producan desde el
bulbo olfatorio hacia el tubrculo olfatorio y el rea preptica, y desde el
septum hacia el rea preptica. Estas migraciones comienzan en el estado
HH24 y observamos que la mayora de las clulas migradas son positivas
para MAP-2 y Reelina, marcadores neuronales.
Glioblastoma multiforme (GBM) and anaplastic astrocytoma (AA)

are the primary brain tumors in adults. Amplification of epidermal growth
factor receptor (EGFR) is detected in 55% GBMs and 16% of AAs, and it
is often associated with structural alterations. The most common mutant
is EGFRvIII or EGFR. EGFR and EGFR signaling have been extensively
studied using GBM cell lines and murine fibroblasts. Current evidences
suggests that brain tumors might be derived from the transformation of
undifferentiated stem/precursor cells located in the germinal regions of
the developing brain, in the early postnatal CNS or in the neurogenesic
regions of the adult brain. However, how the overexpression of wildtype (WT) EGFR or EGFR modulates or changes the behavior of neural stem/progenitor cells remains unclear. In the present work we found
that activated EGFR signaling induced proliferation and survival, increased
chemotaxis and blocked neuronal differentiation in post natal NSCs. Understanding the basic biology of NSCs may offer insight into the deregulated mechanisms of brain tumor stem cells (TSCs).
31
POSTERES HALL - JUEVES 6
La expresin de Dlx4 durante el desarrollo embrionario sugiere su participacin

en la diferenciacin terminal de neuronas
corticales.
ESPECIFICACIN EMBRIONARIA DE LAS POBLACIONES NEURONALES DE LA PLACA BASAL MESENCEFLICA
Antonio Fernndez Prez, Beatriz Prez-Villamil, Rosario Moratalla

y Mario Vallejo.
Instituto de Investigaciones Biomdicas Alberto Sols CSIC/UAM.
C/ Arturo Duperier 4, 28029. Madrid.
Los genes de la familia Distal-less (Dlx1-Dlx6) codifican factores de
transcripcin de tipo homeodominio esenciales para el desarrollo embrionario. Muchos de ellos juegan un papel importante durante la diferenciacin
neuronal del SNC, pero para algunos no se ha documentado claramente su
expresin a nivel neural. Con el fin de identificar nuevos miembros de esta
familia en el SNC, analizamos su expresin en lneas celulares derivadas de
corteza embrionaria de rata e identificamos un cDNA parcial correspondiente a Dlx4. Tras obtener el cDNA completo mediante 3 RACE y PCR a
partir de ADN genmico, confirmamos su expresin embrionaria mediante
RT-PCR e hibridacin in situ, preferentemente en el cerebro anterior en estadios coincidentes con la neurognesis. Comprobamos que en embriones
de 14 das de gestacin, Dlx4 se localiza en el citoplasma de los precursores
neuroepiteliales telenceflicos.A los 17 das, Dlx4 se localiza en el citoplasma
de las clulas de las zonas ventricular y subventricular de la corteza cerebral
y eminencia ganglinica, mientras que en las neuronas de la zona marginal
cortical exhibe una localizacin nuclear. No obstante, las neuronas que estn
en proceso de migracin radial o tangencial no expresan Dlx4. Por ltimo,
utilizando cultivos primarios de clulas precursoras de la corteza cerebral
de embriones de 14 das de gestacin, comprobamos que la expresin de
Dlx4 se incrementa de manera muy significativa en neuronas diferenciadas
tras el tratamiento con BDNF. Nuestros datos sugieren un posible papel de
Dlx4 en el proceso de diferenciacin terminal de neuronas corticales.
Financiado por el Ministerio de Educacin y Ciencia.

Alteracin de la neurognesis postnatal
en ratones hyh con mutacin para alfaSNAP asociada a alteraciones en el desarrollo de la zona ventricular e hidrocefalia
Antonio J Jimnez (1), Patricia Rivera (1), Mario Soriano-Navarro
(2), Jos Manuel Garca-Verdugo (2), Jos Manuel Prez-Fgares (1)
(1) Departamento de Biologa Celular, Gentica y Fisiologa. Facultad de Ciencias, Universidad de Mlaga; (2) Laboratorio de Morfologa Celular. Unidad Mixta CIPF-UVEG. 46013 Valencia, Spain.
Los ratones mutantes hyh muestran bajos niveles de RNAm funcional para la protena alfa-SNAP de unin al factor NSF soluble, codificada
por el gen Napa, que interviene en el trfico vesicular. Estos ratones presentan una hidrocefalia congnita que comienza con un desprendimiento
del neuroepitelio durante el desarrollo. La hidrocefalia progresa postnatalmente y se caracteriza por la carencia de epndimo en la mayor parte
de la superficie ventricular, incluyendo los ventrculos laterales.
Se ha estudiado la neurognesis que aparece asociada a los ventrculos laterales en ratones normales e hidroceflicos desde 20 a 70 das
de edad. Se han empleado: (i) tcnicas inmunocitoqumicas para detectar PCNA, PSA-NCAM, tubulina-betaIII y GFAP; (ii) marcajes celulares
mediante bromodesoxiuridina (BrdU) a microcopa ptica; (iii) marcajes
con timidina tritiada a microscopa ptica y electrnica de transmisin; y
(iv) microscopa electrnica de barrido. Los resultados muestran, en los
animales hidroceflicos, una notable disminucin de clulas en divisin en
las superficies ventriculares que cubren el cuerpo estriado y el cuerpo
calloso. Los marcajes celulares y los estudios ultraestructurales ponen de
manifiesto la desorganizacin de la zona subventricular. La ausencia de
clulas ependimarias provoca que los nichos aparezcan desorganizados,
encontrndose solamente acmulos de clulas tipo C que estn expuestas directamente al lquido cefalorraqudeo. En los animales mutantes hidroceflicos las cadenas de clulas en migracin estn prcticamente ausentes, y las escasas clulas que incorporaron BrdU no estaban asociadas
a clulas marcadas con GFAP (clulas B) que delimiten una ruta.
Financiado por: FIS-PI030756, FIS-PI060423 y Servicio Andaluz de Salud
32
A. Prez-Balaguer, E. Puelles y S. Martnez

Instituto de Neurociencias de Alicante, UMH-CSIC. Carretera de
Valencia (N-332). Campus de San Juan. Alicante, 03550.
En el presente trabajo hemos analizado el papel que juega Sonic Hedgehog en la especificacin embrionaria de las poblaciones basales en el
mesencfalo de ratn. Para ello hemos utilizado como modelo un ratn
mutante en el que se pierde la expresin de Shh en el dominio de expresin del gen Engrailed 1. Es decir, en el mesencfalo caudal y en el
rombencfalo rostral, a ambos lados del istmo. Analizando el fenotipo
de este mutante, hemos estudiado el papel de Shh en el desarrollo normal y en la especificacin de las poblaciones basales del mesencfalo. En
este mutante hemos detectado una prdida del territorio mesenceflico.
Esta prdida no parece ser debida a un proceso de apoptosis, pudiendo
deberse a un cambio en la diferenciacin temprana del territorio, ya que
s se observa una reduccin clara en la proliferacin celular del rea en
cuestin. Mediante el uso de distintos marcadores hemos observado que
los ncleos motores a ambos lados del istmo (oculomotor y troclear)
desaparecen completamente en el mutante. El rea tegmental ventral y la
sustancia negra se encuentran ampliamente reducidas y en el rombencfalo rostral detectamos una desaparicin de los ncleos del rafe. Curiosamente, el ncleo rojo no est ausente sino que se encuentra extendido
hacia posiciones ms ventrales. Con este estudio queda patente el papel
esencial de Shh tanto en la induccin como en la diferenciacin y mantenimiento del tubo neural basal.
Trabajo financiado por MEC BFU2005-09085. TV3 Marat 062232
(A. P. B. ) y Programa Ramn y Cajal (E. P. ). LSHG-CT-2004-512003-EU

Exploring a role for Zic2 as a general determinant of laterality at the midline
Augusto Escalante Rodrguez; Eloisa Herrera
Instituto de Neurociencias de Alicante, CSIC-UMH. Spain
The transcription factor Zic2 is known to be necessary and sufficient
to control axonal laterality at the optic chiasm midline by specifying the
retinal ipsilateral projection (Herrera et al., 2003; Lee et al., submitted).
We have utilized the formation of the vertebrate spinal cord as a model
to test a possible role for Zic2 as a general determinant of axonal laterality in other bilateral systems.
First, we have confirmed the previously reported expression of Zic2
in the dorsal spinal cord at early stages. This early expresin of Zic2 has
been associated to its role in the closure of the neural tube (Nagai et al.,
1997, Nagai et al., 2000). Second, we have detected a later non-reported
expression of Zic2, dorsal to the ventricular zone that form two bilateral
patches at both sides of the midline. These patches expand during the
following days, concomitantly to the appareance of two more ventral and
bilateral Zic2-positive populations. Double labeling experiments combining anti-Zic2 with anti-aNeu antibodies indicate that later expressing-Zic2
cells are postmitotic neurons.
The anatomical distribution of the dorsal group of Zic2 positive neurons resembles the prospective location of Clarkes nucleus, a column of
cells that projects ipsilaterally to the cerebellum. Zic2-expressing cells are
innervated by parvalbumin-positive fibers, the most abundant afferences
to the Clarkes column (Clough et al., 2005). Our observations suggest
that at least part of the Zic2 positive cells, must be neurons that have to
avoid the crossing of the midline, which imply a posible role for Zic2 in
the determination of ipsilaterality in those spinal cord neurons.

Cux2 controls proliferation of SVZ neuronal precursors and dendritic differentiation of upper layer neurons
B. Cubelos, A. sebastian, S. Kim, JM. Redondo, C.Walsh and M. Nieto
CNIC, Madrid (Spain); CNB, Madrid (Spain); Harvard Medical
School, Boston (USA)
Upper layer neurons are an evolutionarily addition to the cerebral
cortex. During development, upper layer neurons are born from intermediate precursors in the subventricular zone (SVZ) and their elaborate dendritic morphology facilitates formation of complex circuitry that ultimately
manifests as higher cognitive abilities. Little is known about proliferation
of SVZ precursors and upper layer neuron differentiation, including dendrite formation, but these processes may underlie the appearance and expansion of upper cortical layers during evolution. The homeobox protein
Cux-2 is expressed by upper layer neurons and SVZ precursors during
mouse development. Analysis of Cux-2-/- mice shows that Cux-2 controls
cell-cycle exit of SVZ precursors and final number of upper layer neurons.
In upper layer neurons, Cux-2 regulates dendritic morphology and spine
number, a role conserved with its Drosophila counterpart Cut. Cux-2 thus
couples cell cycle exit and the acquisition of upper layer phenotypes during development, and may have participated in cortical evolution.

Organizacin de la gla radial en el subpalium caudal del embrin de pollo
Carmen M Trujillo, Ana Delgado, Antonia Alonso.
1 Dpto. de Microbiologa y Biologa Celular, Facultad de Biologa,
Universidad de la La Laguna.
El papel de las clulas de glia radial como guas de la migracin neuronal en el cerebro embrionario hace relevante el estudio de su distribucin,
ya que, estas clulas indican la relacin entre el origen y el destino de
aquellas que migran a travs de sus prolongaciones. Los datos hasta ahora
obtenidos sobre las rutas de migracin que atraviesan el subpalium caudal,
revelan que muchas de las agrupaciones de esta zona reciben clulas de
orgenes distintos. En un trabajo previo, hemos demostrado que la eminencia talmica (Emt) contribuye a la formacin de algunas de estas agrupaciones, tales como el ncleo medial del lecho de la stria terminalis (BSTm),
el ncleo de la banda diagonal de Broca (BDB) y el rea entopeduncular
anterior (AEP). En posicin algo ms caudal, el rea preptica anterior
(POA) parece recibir clulas de los ventrculos laterales aparte de las que
recibe del tercer ventrculo, segn han observado algunos autores. Este
origen mltiple se ha relacionado con su heterogeneidad funcional, ya que
esta rea est implicada en la regulacin de muchas funciones homeostticas y sexuales del adulto. En este estudio, examinamos la distribucin de
la glia radial en las distintas reas mencionadas con la idea de identificar
la zona ventricular correspondiente a cada una de ellas. Para ello usamos
el colorante lipoflico DiI inyectado en el ventrculo cerebral de la regin
estudiada, as como marcadores inmunohistoqumicos de gla radial.

Zic2 acts as a transcriptional regulator
for EphB1 to mediate axonal divergence at
the optic chiasm midline
Cristina Garca-Frigola1, Ramee Lee2, Maria Isabel Carreres1, Celia Vegar1, Carol Mason2 and Elosa Herrera1
1Instituto de Neurociencias de Alicante (Universidad Miguel Hernndez-CSIC), Campus de San Juan. Apt 18, San Juan de Alicante,
Alicante. 03550 (Spain) 2Departments of Pathology and Cell Biology, Center for Neurobiology and Behavior, Columbia University
College of Physicians and Surgeons, 630 W. 168th Street, New York,
NY 10032 (USA)
Axons of retinal ganglion cells (RGCs) make a divergent choice at
the optic chiasm to cross or avoid the midline in order to project to ipsilateral and contralateral targets, thereby establishing the binocular visual
pathway. The zinc finger transcription factor Zic2 and a specific member
of the Eph family of receptor tyrosine kinases EphB1, are both essential
for proper development of the ipsilateral projection at the optic chiasm
midline. Here, we show that these two molecules are co-expressed in the
same retinal ganglion cells during the same developmental period. Functional experiments in vitro and in vivo demonstrate that Zic2 is sufficient
to change the behavior of RGC axons from crossed to uncrossed through
rapid activation of EphB1 protein into the growth cones.Thus, our results
indicate that Zic2 is not only necessary but also sufficient to trigger a
change in pathfinding and reveal a tight link between a transcription factor
and the expression of a guidance receptor protein essential for defining
axonal laterality at the mammalian midline

Attachment, proliferation and differentiation of Schwann cells onto synthetic
polymeric substrates in vitro.
C. Martnez Ramos1,2, D. M. Garca Cruz3, M. Salmern Snchez2,3, M. A. Garca Esparza1 , X. Navarro4, J. L. Gmez Ribelles2,3,
J. M. Garca Verdugo2, M. Monlen Pradas2,3 , J. A. Barcia2 and J. M.
Soria1,2
(1) Fundacin Hospital General Universitario de Valencia, Tres Cruces s/n, 46014 Valencia, Spain; (2) Centro de Investigacin Prncipe
Felipe, Autopista del Saler 16, 46013 Valencia, Spain; (3) Centro de
Biomateriales, Universidad Politcnica de Valencia, PO Box 22012,
Valencia, Spain; (4) Department of Cell Biology, Physiology and Immunology, Universidad A. Barcelona, Spain
Schwann glial cells play important roles in the central nervous system.
They are known to scaffold axons and furthermore to secrete trophic
factors which induce neurite and axon growth. In neural tissue engineering applications when these cells are seeded into structures aimed at
aiding nerve regeneration the results are ostensibly improved; moreover,
implanted structures get better integrated when seeded with these cells,
with scar formation reduced to a minimum.These facts stress the interest
in identifying synthetic biomaterials for Schwann cell culture and co-culture. In the present study polymeric substrates with different chemical
composition and hydrophilicities were prepared. Samples of polyacrylamide, poly(methyl acrylate), chitosan and copolymers of ethyl acrylate
(EA) and hydroxyethyl acrylate (HEA) in different ratios were tested in
vitro as culture substrates and compared for their impact on the expansion and differentiation of Schwann cells. Schwann cells were isolated from
adult mouse sciatic nerves. After purification and isolation of Schwann
cells, they were cultured onto polymeric substrates. Immunocytochemical staining assay for specific glial markers was applied for a quantitative
analysis and to determine the correct differentiation of the cultured glial
cells on the different materials. The results identify poly(methyl acrylate)
and chitosan as substrate materials optimally sustaining Schwann cell attachment, proliferation and differentiation.Additionally, the P(EA-co-HEA)
copolymer series, with hydrophobic and hydrophilic units in varying proportions, presents a synergistic effect leading to a maximal biological efficiency at a composition ratio of 10% hydrophilic (HEA) units (see Figures
1 and 2). The results show that Schwann cell adhesion and proliferation is
strongly influenced by the substrates surface chemistry.

Distribucin de anosmina-1 durante el desarrollo pre y postnatal de la rata
Diego Clemente Lpez; 1Esteban PF, 2del Valle I, 2Silva A, 1de Castro F
1 Lab. Neurobiologa del Desarrollo. GNDe. Hospital Nacional de
Parapljicos. Toledo. Espaa; 2 Lab. Gentica del Cncer y de las
Clulas Progenitoras del Cncer. CIB, CSIC, Madrid, Espaa
El sndrome de Kallmann es un trastorno genticamente heterogneo producido durante el desarrollo y que cursa con anosmia e hipogonadismo hipogonadotrpico debida a fallos en la organognesis del
sistema olfativo y en la migracin de las clulas productoras de GnRH,
respectivamente. El gen implicado en la variante hereditaria de este sndrome es KAL1, el cual codifica para la protena de la matriz extracelular
33
Anosmina-1. Existen varios datos in vitro sobre el papel que ejerce la

Anosmina-1 en fenmenos de adhesin celular, crecimiento de neuritas y
gua y ramificacin axonal. Adems, recientemente hemos demostrado in
vitro un importante papel modulador ejercido por la Anosmina-1 sobre la
migracin de los precursores de oligodendrocitos de ratn. Sin embargo,
los datos in vivo sobre la distribucin o propiedades de la Anosmina-1
durante el desarrollo embrionario y postembrionario de mamferos son
escasos y parciales en cuanto a las etapas del desarrollo o a las regiones del sistema nervioso analizadas. En este trabajo hemos realizado una
completa descripcin del patrn de expresin de Anosmina-1 durante el
desarrollo embrionario (E14, E16, E18), as como en la etapa perinatal (P0P1) y en las primeras fases del desarrollo postnatal (P5, P15), a lo largo de
todo el eje rostro-caudal del encfalo. Para ello, hemos realizado tcnicas
de inmunohistoqumica utilizando un nuevo anticuerpo, aphA1, generado
en nuestros laboratorios a partir de Anosmina-1 humana
Financiado con fondos del Ministerio de Sanidad y Consumo (PI20042591), Ministerio de Educacin y Ciencia (SAF2006-28387E y SAF00604826), Consejera de Sanidad de Castilla-La Mancha (ICS06024/00) y
Consejera de Educacin y Ciencia de Castilla-La Mancha (PAI-0050-7177
y PAI07-0049-6090).

Implicacin de la protena MAP1B en el desarrollo de espinas dendrticas
Elena Tortosa Binacua; C. Gonzlez, J. Avila y M. Prez
Centro de Biologa Molecular Severo Ochoa. CSIC-Universidad
Autnoma de Madrid
Map1B aparece tempranamente durante el desarrollo del sistema
nervioso. Su expresin decae en la edad adulta, aunque permanece en
algunas regiones con elevada plasticidad, como el hipocampo. En los ltimos aos nuestro grupo se ha centrado en el anlisis de las consecuencias de la prdida de funcin de la protena MAP1B mediante el estudio
de un ratn hipomorfo para dicha protena. Se ha visto que Map1B est
implicada en la migracin neuronal y en el crecimiento del cono axonal.
Map1B no slo interacciona con microtbulos, sino que tambin puede
hacerlo con microfilamentos de actina. En estudios previos se ha observado que neuronas que carecen de Map1B muestran una disminucin en
la actividad de Rac1-GTP debido a una inhibicin de Tiam1 (GEF de Rac1).
Debido a la relacin vista entre Map1B y Rac1, y a la que existe entre esta
ltima y la dinmica de los microfilamentos de actina, decidimos estudiar
el efecto de la prdida de funcin de Map1B en el desarrollo de espinas
dendrticas, ricas en actina. Para ello se realizaron cultivos de hipocampo
y se analizaron el nmero, forma y tamao de las espinas. Resultados
preliminares en cultivos de neuronas de hipocampo de ratones Map1B-/muestran un menor nmero de espinas y con una morfologa distinta a las
del ratn silvestre. Adems, se postula una posible relacin entre Map1B
y otro intercambiador de nucletidos de Rac1 localizado especficamente
en espinas, la kalirina.

Implicacin del receptor Megalina en laatraccin por Sonic hedgehog de los precursors
de oligodendrocitos durante el desarrollo
de Castro, F. 1, Merchn, P. 1, Cases, O. 2, Larrouy, P. 2, Chandellier, J.
2, y Kozyraki, R. 2
1. Lab. Neurobiologa del Desarrollo. GNDe. Hospital Nacional de
Parapljicos. Toledo. Espaa; 2. INSERM-U538. Fac. Med. Saint Antoine. Univ. Pierre et Marie Curie. 75012 Paris. Francia
Sonic hedgehog (Shh) es un potente morfgeno que durante el desarrollo temprano del SNC interviene en la regionalizacin, ventralizacin del
tubo neural, especificacin de diversos tipos celulares, proliferacin celular
y orientacin del crecimiento de axonal. Estudios preliminares de nuestro
grupo mostraron que Shh es quimioatrayente para los precursores de oligodendrocitos (POs) del nervio ptico. Este efecto se bloquea completamente con el anticuerpo de Shh (5E1), pero no en presencia del bloqueante
de Ptc, ciclopamina, lo que sugiere que otros receptores pudieran estar
involucrados en el control de la migracin de los POs. Megalina (o Lrp2)
es un receptor multiligando perteneciente a la familia de las lipoprotenas
de baja densidad (LDLR). Otros miembros de esta familia interactan con
34
morfgenos (ej. : Lrp5-Wnt) y se ha demostrado in vitro que Shh es un

ligando de Megalina. La inactivacin de Megalina conduce a la holoprosencefalia, patologa observada, tambin, en ausencia de actividad de Shh. El
mutante nulo para Megalina presenta una prdida de expresin de Shh en
el telencfalo y, consecuentemente, prdida de interneuronas y oligodendrocitos. En este trabajo estudiamos la relacin entre Megalina y Shh en
el desarrollo. Mostramos la expresin temprana de Megalina en diversos
dominios oligodendrogliognicos, en ntima relacin con la expresin de
Shh y, ms tarde (E16,5), en el nervio ptico. Los ensayos quimiotcticos
muestran que la inhibicin de Megalina y/o de RAP reduce la atraccin que
ejerce Shh sobre los POs del nervio ptico. Concluimos que Megalina es
esencial para la migracin de los POs mediada por Shh.
Financiado con fondos del Ministerio de Sanidad y Consumo (PI20042571), Ministerio de Educacin y Ciencia (SAF2006-28387E), Fundacin
Mutua Madrilea Aseguradora.

Influencia inhibitoria del ncleo Espinal
sobre la actividad de las neuronas del
ncleo Principal en el Complejo Sensorial
del Trigmino de la rata
Abel Snchez Jimnez; Fivos Panetsos Petrova; Angel Moreno Cela
Centro de Nerocomputacion y Neurorobotica, Universidad Complutense de Madrid
El Complejo Sensorial del Trigmino, primera estacin de relevo de
la informacin somestsica de las vibrisas, est dividido en los ncleo
Principal (Pr5) y Espinal (Sp5), este segundo dividido a su vez en tres
subncleos: Oral (Sp5o), Interpolar (Sp5i) y Caudal (Sp5c). Los cuatro
ncleos estn interconectados por una extensa red de fibras internucleares que, posiblemente, modula la informacin recibida por las vibrisas en
cada uno de ellos. En el presente trabajo hemos estudiado la influencia
del Sp5 sobre las respuestas de las neuronas asociadas a vibrisa del Pr5 de
la rata mediante registros extracelulares en Pr5 utilizando el paradigma
de pares de estmulos, condicionante y test. Los condicionantes fueron
estmulos elctricos en los ncleos Sp5o, Sp5i y Sp5c con intensidades de
100 y 200 y 300 A que precedan 10, 20, 50 y 100 ms a los tests (pulsos
de aire de 100 ms de duracin proporcionados en la parte distal de la
vibrisa que ms excitaba la neurona en observacin). Se ha comprobado
un comportamiento inhibitorio general del Sp5 sobre Pr5 aunque bien
diferenciado entre los tres subncleos. Dichos fenmenos alcanzaron sus
niveles mximos con 200 A, 10 ms antes del estmulo perifrico: 40, 25
y 25% de los casos en las latencias de las neuronas para Sp5o, Sp5i y Sp5c
y 94, 92 y 50% de los casos en el nmero de espigas provocadas por los
estmulos de aire respectivamente.
Trabajo financiado por la UE (IST-01-7-1B-34893) e IBERDROLA

Recuperacin de la habilidad motora mediante trasplantes de tejido fetal cortical o amigdalino en ratas adultas con lesin de la corteza frontal
Adelaida Sanchez Riolobos; M. Heredia, A. S. Riolobos,V. Gmez-Bautista, A. J. de la Fuente, J. M. Criado, J.Torres, J. Herrero-Turrin, J.Yajeya
Departamento de Fisiologa y Farmacologa. Facultad de Medicina.
Instituto de Neurociencias de Castilla y Len. Universidad de Salamanca. Espaa
Lesiones en reas especficas de la corteza frontal de la rata producen alteraciones en la habilidad motora de los miembros anteriores. Se ha
demostrado, en animales adultos, la recuperacin funcional de estas alteraciones mediante trasplantes de tejido cortical embrionario. En este estudio, hemos investigado los mecanismos involucrados en la recuperacin,
utilizando distintos tipos de trasplante y aplicando mtodos conductuales,
electrofisiolgicos, de expresin gnica e inmunocitoqumicos. Todos los
experimentos se realizaron de acuerdo con la Normativa Espaola y Europea sobre Experimentacin Animal. Los animales se condicionaron en un
test de habilidad motora fina y se determin su mano preferente. Despus,
se lesionaron por aspiracin de la corteza motora contralateral a su mano
preferente y se comprob la efectividad de la lesin en el test conductual.

Solo los animales con lesiones efectivas fueron trasplantados. Posteriormente, a un grupo de animales se trasplant tejido cortical frontal de embriones de 16 das (E16), en la cavidad producida por la lesin; a un segundo
grupo, tejido fetal amigdalino (E15); y al tercer grupo, nervio citico de rata
adulta.Transcurridos tres meses, tanto los animales con trasplantes corticales como amigdalinos presentaron una mejora en el dficit motor producido por la lesin cuando fueron obligados a utilizar su mano preferente. Por
el contrario, los animales con trasplantes de nervio citico no presentaron
mejora significativa. Las neuronas del trasplante presentaron conexiones
excitatorias glutamatrgicas y diferentes tipos de descarga cuando eran
despolarizadas. Los trasplantes expresaron receptores glutamatrgicos y
neuronas inmunorreactivas para colina acetil transferasa y GABA.

PREPARACION PARA EL ESTUDIO IN VITRO DE LAS
INTERACCIONES ENTRE NEURONAS DEL TRIGMINO Y CLULAS EPITELIALES DE LA CRNEA.
Adolfo Aracil (1), Ana Snchez (2), Carlos Belmonte (1), Juana Gallar
(1)
1. - Instituto de Neurociencias, UMH-CSIC; 2. - Instituto de Biologa
y Gentica Molecular, Universidad de Valladolid-CSIC
Objetivo: Desarrollar una preparacin para estudiar, a nivel celular, las
interacciones entre las neuronas del ganglio trigmino (NGT) y las clulas
epiteliales de la crnea (CEC). Mtodos: Se cultivaron clulas inmortalizadas de epitelio corneal humano (Araki-Sasaki, et al., 1995), en placas
de 24 pocillos, hasta alcanzar confluencia. En el centro de cada pocillo
se realiz, tocando la monocapa con la punta de una pipeta, una lesin
circular de 1 mm de dimetro. La lesin se fotografi inmediatamente
despus y cada 12 hr, midindose en las fotografas el rea lesionada. Las
CEC fueron cultivadas: 1. -En medio sin suero bovino fetal (FBS), (control
negativo); 2. - En presencia de FBS (control positivo); y 3. - en medio sin
FBS, pero en co-cultivo con neuronas disociadas del trigmino, plantadas sobre membranas Costar Transwell. Las NGT provenan de ratones
machos adultos de las cepas C57BL/6, CGRP-KO (Salmon, et al., 1999) y
Tac-1 KO (Zimmer, et al., 1998). Resultados: Las lesiones realizadas en los
controles positivos curaron completamente en 48 hr., mientras que en los
controles negativos, el rea de lesin no cambi durante el mismo periodo de tiempo. El co-cultivo de CEC con NGT indujo la cicatrizacin de las
lesiones. Este efecto se obtuvo con neuronas de todas las cepas de ratn
examinadas. Conclusiones: Esta preparacin permite estudiar in vitro las
interacciones entre las neuronas del trigmino y las clulas del epitelio
corneal, as como la influencia de diferentes neuropptidos sensoriales en
la cicatrizacin epitelial de la crnea.
Financiado por SAF2005-07277 (JG) y BFU2005-08741 (CB), MEC.
En los ejemplares cclopes hemos encontrado una considerable reduccin del marcaje, aunque el mRNA sigue presente en la lnea media
ventral del prosencfalo, tegmentum, alrededor del hipotlamo, ncleo
supraptico, istmo, zona anterior del techo ptico y en la zona de unin
de los dos ojos. Hemos detectado la presencia de la protena en la lnea
media ventral del prosencfalo, istmo, regin anterior del techo ptico y
en la zona de fusin de ambos ojos.
El descenso en la expresin de wnt-1 inducida por el etanol se puede
relacionar con la disminucin de la neurognesis descrita previamente
por Rubert et al (2006). Consideramos la presencia de la Wnt-1 en la
zona de unin de los dos ojos como un fenmeno de plasticidad neural.

Expresin de los factores de transcripcin
CREB y c-Fos en el cerebro de casos terminales de Enfermedad de Creutzfeldt-Jakob
A. Rodrguez, I. Ferrer
Institut de Neuropatologia, Servei Anatomia Patolgica, IDIBELLHospital Universitari de Bellvitge, Universitat de Barcelona, Feixa
Llarga sn, 08907 Hospitalet de Llobregat, Spain
Las Encefalopatas Espongiformes Transmisibles (EETs) son un grupo
de enfermedades neurodegenerativas humanas y animales que, segn la
hipotesis ms aceptada estn causadas por una protena infecciosa denominada prin. La enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (ECJ) es la TSE humana
mayoritaria, a pesar de tener una incidencia baja (1-2 casos/ milln de
habitantes y ao). La ECJ puede presentarse de forma hereditaria, yatrognica y espordica. Neuropatolgicamente, la ECJ se caracteriza por prdida neuronal, espongiosis y gliosis reactiva. Clnicamente, provoca ataxia,
mioclonas y demencia.
Las MAPKs regulan diversas funciones celulares a travs de la activacin de factores de transcripcin que modulan la expresin gnica.
Los factores de transcripcin de la familia CREB y c-Fos participan en los
fenmenos de muerte-supervivencia celular y pueden estar vinculadas a
la muerte neuronal que se produce en algunas enfermedades neurodegenrativas.
La expresin y localizacin de los factores de transcripcin CREB1,
CREB2 y c-Fos, as como los niveles de las MAPKs/ERK (ERK-1 y ERK-2)
y p38, han sido examinados en la corteza frontal de once casos con ECJ
y en cinco controles. Se han observado niveles de expresin preservados
de ERK-1-P, ERK-2-P y p38-P. Paralelamente, se han encontrado niveles
reducidos de CREB, CREB-P, c-Fos y c-Fos-P por SDS-PAGE y Western
blotting y una disminucin en el nmero de ncleos reactivos por inmunohistoqumica. Esto indica una disiminucin de las respuestas mediadas
por CREB y c-Fos, en contraste con una preservacin de las kinasas, lo
cual podra favorecer la muerte celular en estados terminales de ECJ.

PATRN DE DISTRIBUCIN DE WNT-1 EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL DEL PEZ CEBRA EN CONDICIONES NORMALES Y EN CICLOPIA INDUCIDA
POR ETANOL.
Adrin Santos Ledo; Arenzana J, Snchez-Gonzlez R, Porteros A,

Aijn J y Arvalo R
Dpto Biologa Celular y Patologa. Universidad de Salamanca. Instituto de Neurociencias de Castilla y Len
Alejandro Prez-Villegas, Maria V. Sanchez-Vives y Albert Compte

Instituto de Neurociencias de Alicante, Universidad Miguel Hernndez-CSIC, 03550 Sant Joan dAlacant; Institut dInvestigacions Biomdiques August Pi i Sunyer (IDIBAPS), 08036 Barcelona
Durante el desarrollo, el gen wnt-1 es esencial para el proceso de

regionalizacin del sistema nervioso central (SNC), expresndose principalmente en regiones caudales. Adems, se considera que es un regulador
positivo de la mitosis en el SNC (Amoyel et al., 2005).
Hemos analizado la expresin y distribucin de wnt-1 en embriones
de pez cebra (Danio rerio) de la estirpe AB de 5 das postfecundacin en
animales control y en ejemplares cclopes obtenidos tras la exposicin a
1. 5% de etanol en la etapa de gstrula.
En condiciones normales, por hibridacin in situ hemos detectado
mRNA en la lnea media ventral del rombencfalo, pretectum, tegmentum, ncleo supraptico, alrededor del hipotlamo, istmo, cerebelo, techo
ptico, telencfalo y en la capa plexiforme interna. Sin embargo, por inmunohistoqumica slo hemos detectado la protena Wnt-1 en lnea media
ventral del prosencfalo, istmo y techo ptico.
La actividad coordinada de poblaciones de neuronas en las redes corticales subyace a gran parte de las capacidades computacionales del cerebro.
En gran medida, esta actividad de la red depende de la conectividad sinptica que intercomunica a las neuronas en la red, pero tambin las propiedades intrnsecas de pequeas poblaciones pueden tener un impacto decisivo en la dinmica de la red cortical. En esta comunicacin ponemos este
hecho de manifiesto, centrndonos en la actividad oscilatoria lenta que se
observa en rodajas de hurn in vitro [1]. Hemos modelado esta actividad
por medio de un modelo biofsico de red cortical [2] y aqu exploramos
cmo afecta a la actividad de la red la modulacin de algunas corrientes
inicas de las neuronas en la red. Nuestras simulaciones demuestran que
manipulaciones moderadas de los parmetros de las corrientes de potasio
dependientes de sodio y de calcio en una pequea fraccin de neuronas de
la red afectan notablemente la frecuencia de las oscilaciones y la duracin
Impacto de las corrientes inicas en la actividad emergente de la red cortical durante las oscilaciones lentas
35
de los estados activados en toda la poblacin neuronal, respectivamente.

Adems, estas modificaciones tambin modulan aspectos tan aparentemente ligados a la intercomunicacin entre neuronas como la sincrona en
las transiciones entre estados activados y silentes de distintas neuronas en
la red. Concluimos, por lo tanto, que es difcil la diseccin inequvoca entre
mecanismos intrnsecos y mecanismos reticulares para la generacin de
actividad neuronal en redes recurrentes de la corteza cerebral, y aspectos
poblacionales como la sincrona de activacin neuronal pueden tener su
origen en mecanismos de ndole intrnseca.
Financiacin: MEC.
[1] Nat Neurosci. 2000; 3(10):1027-34. [2] J Neurophysiol. 2003; 89(5):270725.

ESTUDIO DE LA FUNCIN DE LOS RECEPTORES
D1 DOPAMINRGICOS EN LA CORTEZA PREFRONTAL DURANTE EL PROCESO DE ENVEJECIMIENTO:
EFECTOS DEL ENRIQUECIMIENTO AMBIENTAL Y
LA RESTRICCIN CALRICA
Alberto del Arco Gonzlez; Segovia G, Garrido P, de Blas M, Mora F
Departamento de Fisiologa, Facultad de Medicina, Universidad
Complutense de Madrid
El objetivo de este estudio fue investigar si el enriquecimiento ambiental y la restriccin calrica modifican los efectos de la estimulacin de
receptores dopaminrgicos D1 en la corteza prefrontal (CPF) sobre las
concentraciones extracelulares de acetilcolina y corticosterona, y sobre
la actividad motora a lo largo del proceso normal de envejecimiento. Se
utilizaron ratas Wistar macho (3 meses de edad) que se mantuvieron
en tres condiciones experimentales, control, enriquecimiento ambiental
(10-12 animales en jaulas de 120x100x60 con tuberas, juguetes y ruedas
de ejercicio) y restriccin calrica (40%), hasta que alcanzaron 6, 15 y 24
meses de edad. La concentracin de acetilcolina y corticosterona en la
CPF se evalu mediante microdilisis, HPLC y RIA. La actividad motora se
evalu en actmetros acoplados al sistema de microdilisis. La perfusin
del agonista D1 SKF38393 (50M) en la CPF increment significativamente las concentraciones de acetilcolina y la actividad motora, aunque no las
concentraciones corticales de corticosterona, en los animales de 6 meses
de los tres grupos experimentales. Hubo una reduccin significativa de
los incrementos de acetilcolina y de actividad motora a lo largo de la
edad en animales controles y mantenidos en restriccin calrica, pero
no en animales mantenidos en enriquecimiento. La memoria de trabajo
(laberinto en T) fue menor en animales envejecidos de los tres grupos experimentales. Estos resultados sugieren que el envejecimiento reduce la
funcin de los receptores D1 en la CPF y que este efecto se ve modificado por el enriquecimiento ambiental, pero no por la restriccin calrica.
SAF2003-0448, SAF2006-01554, CAM2006-921069

Expresin de la forma fosforilada de la
protena inhibidora del factor de transcripcin NF-B (pIB) en la corteza cerebral humana normal y de pacientes epilpticos
M. C. Inda, L. Blzquez, D. Snchez, J. DeFelipe y A. Muoz
Dpto. Biologa Celular, Fac. Biologa, Universidad Complutense, Madrid. instituto Cajal, CSIC, Madrid.
La activacin constitutiva del factor nuclear B (NF-B) en neuronas
coordina la expresin de genes necesarios para proteger a las neuronas
de muerte por apoptosis. Estudios previos en neuronas hipocampales de
roedores han mostrado la presencia de diversas molculas implicadas en
la activacin de NF-B como pIB, P65 e IKK en el segmento inicial
del axn (AIS). El AIS es un importante punto de control de la excitabilidad y la generacin de potenciales de accin de las clulas piramidales de la corteza cerebral y se encuentra bajo el control inhibitorio de
las interneuronas en candelabro, cuyos terminales axonales establecen
sinapsis GABArgicas con el AIS. En este trabajo mostramos, mediante
tcnicas inmunocitoqumicas la acumulacin de pIB en el AIS de neuronas neocorticales e hipocampales humanas. La formacin hipocampal
de pacientes con epilepsia farmacorresistente del lbulo temporal se ca-
36
racteriza por alteraciones en la densidad de la inervacin GABArgica de

los AIS de las neuronas principales del asta de Amn y del giro dentado.
Las neuronas que sobreviven en el hipocampo esclertico, incluyendo
aquellas que carecen de contactos GABArgicos en el AIS como las que
se encuentran hiperinervadas, expresan pIB en el AIS. Estos resultados
indican que la expresin de pIB en el AIS es probablemente una caracterstica general de la corteza cerebral que parece ser independiente de
la inervacin sinptica y del grado de actividad.

Traduccin local y sndrome de Down: alteracin en el transporte dendrtico de
mensajeros implicados en dendritognesis
Alexandra Alves-Sampaio y Mara Luz Montesinos
Departamento de Fisiologa Mdica y Biofsica. Facultad de Medicina. Universidad de Sevilla
El transporte de mRNAs a las dendritas y su traduccin local en
respuesta a actividad sinptica es un proceso clave para la dendritognesis, la correcta formacin de las sinapsis y los procesos de plasticidad
sinptica que constituyen la base de la memoria y el aprendizaje en el
individuo adulto.
En general, el retraso mental est relacionado con anomalas en la
morfologa de las espinas dendrticas, compartimiento celular en el que
ocurre el proceso de traduccin local.
En el sndrome de Down las dendritas son ms cortas, con un nmero menor de espinas, que adems son ms largas y finas. Estas anomalas
tambin estn presentes en los ratones modelo del sndrome de Down
Ts65Dn y Ts1Cje. Estos ratones son parcialmente trismicos para el cromosoma 16, que contiene la mayora de los genes ortlogos a los del
cromosoma humano 21 (HSA21).
Nuestra hiptesis de trabajo es que la sobre-expresin de genes
del HSA21 podra interferir con la traduccin local en el sndrome de
Down.
Resultados preliminares muestran que al menos dos de los genes que
estn en trisoma codifican mRNAs dendrticos cuyos niveles de expresin en las dendritas de los ratones trismicos son anormalmente elevados. Estos genes participan en el proceso de dendritognesis, control
del nmero de espinas dendrticas y eleccin del partner sinptico, por lo
que podran tener relevancia en la fisiopatologa neuronal del sndrome
de Down.

Cambios en la expresin y funcionalidad
del receptor CB1 en la corteza prefrontal
de rata bulbectomizada inducidos por la
administracin crnica de fluoxetina
Alvaro Diaz Martinez; A Rodrguez-Gaztelumendi, E Marrn, M L
Rojo, M J Castillo, E M Valdizn, A Pazos
Departmento de Fisiologa y Farmacologa, Universidad de Cantabria, Santander, Cantabria
La implicacin del sistema endocannabinoide en los trastornos neuropsiquitricos, como la depresin, ha despertado el inters por el estudio
de los receptores cannabinoides. Entre los modelos preclnicos de depresin, la bulbectoma olfatoria (OBX) induce unas alteraciones neuroqumicas y conductuales similares a las observadas en enfermos deprimidos.
Sin embargo, lo ms singular es su respuesta a los antidepresivos con un
patrn temporal idntico a lo observado en clnica. Hasta en momento, no
hay estudios sobre la sealizacin cannabinoide y su modulacin por antidepresivos en este modelo animal de depresin. Hemos analizado tanto
la expresin (densidad de receptores) como la funcionalidad (activacin
de protenas G e inhibicin de adenilil ciclasa) de los receptors CB1 en
corteza prefrontal de ratas bulbectomizadas y el efecto de la administracin crnica de fluoxetina (10 mg/kg, 14 das). El antidepresivo induce una
up-regulation de receptores CB1 (densidad) asociado a un incremento
en la estimulacin de la fijacin de [35S]GTPS por el agonista selectivo
WIN55. 212. La administracin crnica del antidepresivo revierte la hiperactividad en el open-field caracterstica del sndrome OBX. Este cambio
conductual va acompaado de una reversin de la hiperfuncionalidad de

los receptores CB1 para activar protenas G. Adems, la fluoxetina aumenta la eficacia de los agonistas CB1 para inhibir la actividad adenilil ciclasa
inducida por forskolina. Los cambios en la expresin y funcionalidad de la
rata OBX son similares a los descritos en deprimidos suicidas. Por otra
parte, nuestros resultados corroboran la importancia de la actividad adenilil ciclasa en la acciones de los antidepresivos.
Financiado por Instituto de salud Carlos III (Red Investigacin de
Enfermedades Mentales, REMTAP), Fundacin Mutua Madrilea y Plan
Nacional de Drogas (2006).

Fenotipo depresivo de ratones heterocigticos para el transportador vesicular del
glutamato 1 (VGLUT1) sometidos a estrs
crnico suave.
Alvaro Garcia Garcia; Natalia Elizalde, M. Javier Ramrez, Joaqun
Del Rio & Rosa M.Tordera.
Departamento de Farmacologa. Universidad de Navarra
El transportador vesicular de glutamato 1 (VGLUT1) es la isoforma
predominante de las terminales glutamatrgicas del hipocampo y la corteza. Numerosos estudios relacionan variaciones en la transmisin glutamatrgica con enfermedades neuropsiquitricas. Apoyando esta hiptesis,
los ratones heterocigticos VGLUT1+/-, con una dismucin del 50% en
este transportador, presentan un perfil neuroqumico y conductual depresivo. Aqu hemos estudiado la susceptibilidad de estos ratones al estrs crnico suave (ECS) y la respuesta al tratamiento antidepresivo.
Ratones macho heterocigticos y salvajes (WT) (C57BL/6) fueron
expuestos a ECS durante 6 semanas. Semanalmente se valor la anhedonia y al finalizar el ECS la conducta depresiva, ansiosa y el aprendizaje.
Adems se determinaron los niveles de glutamato y GABA y la expresin
de la proteina VGLUT1.
Los ratones VGLUT1+/- sometidos a ECS mostraron una mayor
vulnerabilidad a la conducta anhednica, y depresiva en el test de Porsolt en comparacin con los WT. Estos efectos fueron revertidos por
el tratamiento crnico con imipramina (5 mg/kg i. p., 4 semanas). Ambos
genotipos mostraron ansiedad en el test del laberinto elevado y deficit
de memoria en el reconocimiento de objetos. Tambin, presentaron un
aumento significativo de glutamato en el hipocampo y en la corteza frontal. Los ratones WT presentaron una disminucin significativa de GABA,
comparable a la ya presentada por los ratones control VGLUT1+/-. Finalmente, los ratones estresados VGLUT1+/- mostraron una disminucin en
la expresin de este transportador.
En resumen, los ratones VGLUT1+/- presentaron una mayor vulnerabilidad al ECS. Estos resultados apoyan la validez de este modelo transgnico de depresin.
Financiado por proyecto Europeo (LSHM-CT-2004-503474).

Los implantes estriatales de clulas de
cuerpo carotdeo promueven la generacin de nuevas neuronas en el bulbo olfatorio de ratas adultas lesionadas con
6-OHDA
tereologa en el camino rostral migratorio (RMS). El nmero de nuevas

neuronas maduras (BrdU/NeuN-ir) se estudi en el OB.
Resultados: Las clulas de CC implantadas sobreviven y expresan
tirosina hidroxilasa, factor neurotrfico derivado de la gla (GDNF) y
factor de crecimiento epidrmico (EGF), pero no el factor neurotrfico
derivado de cerebro (BDNF). La posible hipoxia creada en el implante
promueve la expresin del factor de crecimiento del endotelio vascular
(VEGF) y la mitosis de las clulas glmicas. El nmero de clulas BrdU-ir
en el RMS disminuy en las ratas lesionadas con 6-OHDA mientras que
aument igualmente en los animales implantados (vehculo y CC). nicamente en las ratas implantadas con CC aument el nmero de nuevas
neuronas en el OB.
Conclusiones: Aunque el implante de CC no aumenta la proliferacin
de las clulas progenitoras neurales en el sistema SVZ/OB, el nmero
de nuevas neuronas en el OB es mayor en los animales implantados. Los
factores trficos liberados por las clulas glmicas implantadas podran
favorecer la diferenciacin y/o supervivencia de las nuevas clulas en el
sistema SVZ/OB.

EL SUSTRATO NEURAL DEL REFUERZO DE LAS FEROMONAS SEXUALES: EVIDENCIA ANATMICA,
HISTOQUMICA Y FARMACOLGICA
Amparo Novejarque Gadea; Carmen Agustn-Pavn (1), Fernando
Martnez-Garca (2), Enrique Lanuza-Navarro (1).
Universitat de Valncia, Facultat de Biologia, Dept. Biologia Cellular
(1) y Dept. Biologia Funcional i Antropologa Fsica (2)
En ratones, las feromonas sexuales masculinas son reforzantes para las
hembras. Contrariamente a otros reforzantes naturales, el refuerzo de las
feromonas es independiente de la va tegmento-estriatal dopaminrgica.
Para aclarar qu vas nerviosas son responsables de este refuerzo hemos:
1) estudiado las conexiones eferentes del cortex vomeronasal amigdalino
sobre el estriado ventral; 2) analizado la neuroqumica del estriado ventral
en busca de marcadores especficos de la proyeccin vomeronasal; y 3)
comprobado el efecto de frmacos relacionados con estos marcadores en
el refuerzo de las feromonas sexuales en hembras de ratn.
Nuestros resultados indican que la amgdala cortical posteromedial
y el rea amigdalo-hipocmpica, que conjuntamente forman el cortex vomeronasal de los mamferos, proyectan de forma masiva a una zona del
estriado ventral que comprende algunos puentes celulares del estriado
ventral y los islotes de Calleja mediales, incluido el islote magno. Los islotes de Calleja muestran, entre otros marcadores neuroqumicos, una
densa inervacin NADPH-diaforasa, probablemente de origen local. Por
su parte, el L-NAME, un frmaco inhibidor de la sintasa del NO, inyectado
intraperitonealmente a dosis que no deterioran el comportamiento de
las hembras, elimina su preferencia por la viruta ensuciada por machos
frente a la ensuciada por otras hembras. Conjuntamente, estos tres tipos
de evidencia dibujan una va anatmica muy especfica para el refuerzo
inducido por feromonas sexuales. Esta va conecta el cortex vomeronasal
amigdalino con los islotes de Calleja y es modulada por una inervacin
local nitrirgica.
Financiado por MEC, FEDER (BFU2004-04272/BFI) y Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha (PAC-05-007-2).
Amaya Izal Azcrate; Silvia Belzunegui, Waldy San Sebastin, Pablo

Garrido-Gil, Marianne Vzquez-Claverie, Berta Lpez, Irene Marcilla,
M Rosario Luquin
Laboratorio de Terapia Regenerativa. Neurociencias. Centro de Investigacin Mdica Aplicada (CIMA)-Universidad de Navarra
LA ADMINISTRACIN DE REMIFENTANILO Y LA
INCISIN QUIRRGICA INCREMENTAN LA EXPRESIN DE PRODINORFINA EN LA MDULA ESPINAL,
EN UN MODELO DE DOLOR POSTOPERATORIO EN
EL RATN
Antecedentes: La disminucin de dopamina reduce la proliferacin

celular en el sistema zona subventricular/bulbo olfatorio (SVZ/OB) mientras que los factores trficos inducen neurognesis.
Objetivo: Investigar si los implantes intraestriatales de cuerpo carotdeo (CC) promueven la generacin y diferenciacin de clulas progenitoras neurales en ratas hemiparkinsonianas.
Metodologa: Se inyect BrdU durante 24 das a: ratas intactas, lesionadas con 6-OHDA y lesionadas e implantadas con vehculo o clulas
de CC. Las clulas BrdU-inmunorreactivas (ir) se cuantificaron por es-
Ana Campillo Ajenjo; Cabaero D., Garca-Nogales P., Romero A.,

Puig MM.
Unitat de Recerca en Anestesiologia, IMIM; Ctedra de Dolor UABIMAS-MENARINI; Hospital del Mar, Barcelona
Objetivo. Estudiar los mecanismos implicados en la sensibilizacin
nociceptiva inducida por los opioides y la ciruga, en un modelo de dolor
postoperatorio en ratn. Nuestra hiptesis postula que la hiperalgesia
(H) y alodinia (A) inducidas por la incisin quirrgica o la administracin
37
de remifentanilo aumentan la expresin del gen de la prodinorfina en la

mdula espinal (ME) y el ganglio de la raz dorsal (GRD).
Mtodo. Ratones CD1 recibieron remifentanilo va subcutnea (20,
40, 80, 100 ug/Kg) o fueron sometidos a una incisin plantar, en ambos
casos bajo anestesia con sevoflurano (30 min). En el postoperatorio (4
horas, 2, 4 y 7 das) se evaluaron la hiperalgesia trmica (Plantar Test) y la
alodinia mecnica (Von Frey), y se cuantific el ARNm de la prodinorfina
mediante PCR a tiempo real en la ME y el GRD.
Resultados. El remifentanilo produjo un efecto pronociceptivo dosis-dependiente con DE50 de 51 5g/Kg y 38 3g/Kg para la H y A,
respectivamente (p<0. 001). En la ME, tanto el remifentanilo (80 g/L)
como la incisin ocasionaron aumentos significativos (p<0. 05) del ARNm
de la prodinorfina que fueron mximos entre las 4 horas y 2 das. No se
observaron cambios en el GRD.
Conclusin. El remifentanilo induce H/A dosis-dependiente. El aumento del ARNm de la prodinorfina (ME) inducido por el remifentanilo o
la incisin, correlaciona con el mximo efecto pronociceptivo observado
despus de cada tratamiento. Los resultados sugieren la implicacin de la
dinorfina en los fenmenos de sensibilizacin nociceptiva observados en
este modelo experimental.
Parcialmente financiado por el FIS (PI466104746) y una beca *FPU
(AP2006-4718)
Celerier E, et al. Anesthesiology. 2006; 104(3):546-555.

Evidencias anatmicas y caracterizacin
neuroqumica de la ruta ponto-septal a
travs del ncleo incertus en la rata
Ana Cervera Ferri (1) Teruel-Marti,V (1). ; Nuez, A. (2);Valverde-Navarro, A. A. (1); (1); Ruiz-Torner, A. (1)
(1) Dpto. Anatoma y Embiologa Humana, Fac. de Medicina, Universidad de Valencia; (2)Dpto. Morfologa, Fac. de Medicina, Universidad Autnoma de Madrid
La actividad theta hipocmpica (HPC) constituye una base funcional
de la integracin sensoriomotriz y las funciones mnemnicas. El septum
medial-banda diagonal (SM/BD) ocupa un papel crtico como marcapasos
de la oscilacin. Ciertas estructuras troncoenceflicas originan la activacin del ritmo. De stas, el ncleo reticularis pontis oralis (RPO) es el
ms potente activador de la ritmicidad. La ruta multisinptica clsica entre
RPO y SM/BD se ha considerado a travs de los ncleos supramamilar
(SUM) y posterior hipotalmico (PH). El ncleo incertus (NI) presenta
como prinicipales eferencias SM/BD, SUM, PH y el ncleo mediano del rafe
(MR), ste ltimo desincronizador hipocmpico. Recientemente, nuestro
grupo demostr que la estimulacin del NI generaba HPC. Adems, se
comprob que la estimulacin de RPO induca una activacin ortodrmica en neuronas del NI y que tras la supresin del NI, la estimulacin
de RPO no induca HPC. Dichos resultados apuntaban a la existencia
de una ruta RPO-NI-SM/BD, contraria a lo descrito en la literatura. En el
presente estudio, la inyeccin de trazador retrgrado en NI revel somas
marcados en RPO. La inyeccin conjunta de trazadores retrgrados en
SM/BD y antergrados en RPO permiti observar fibras con aspecto de
terminales sobre neuronas del NI marcadas retrgradamente. Los resultados demuestran la existencia de una va RPO-NI-SM/BD implicada en la
activacin del HPC. La naturaleza neuroqumica de dicha va se estudi
mediante deteccin inmunocitoqumica de acetilcolintransferasa (ChAT),
calbindina (CB), calretinina (CR), parvalbmina (PV) y transportador vesicular de glutamato (VGLUT2).

GSK-3b sensibiliza las neuronas frente a
la muerte inducida por H2O2 y kainato mediante la inhibicin del factor de transcripcin Nrf2, regulador central de la repuesta antioxidante celular
Ana Isabel Rojo Sanshs; Antonio Cuadrado
Instituto de Investigaciones Biomdicas Alberto Sols UAM-CSIC
y Departamento de Bioqumica, Facultad de Medicina, Universidad
Autnoma de Madrid. Arzobispo Morcillo 4, 28029 Madrid
La exposicin a agentes oxidantes activa una va neuroprotectora
representada por la fosfadilinositol 3 kinasa (PI3K) y Akt, y enciende una
respuesta antioxidante que est mediada por el factor de transcripcin
Nrf2 (Nuclear Factor E2-related Factor 2). Sin embargo, el resultado final
del dao oxidativo es la muerte neuronal. En este estudio pretendemos
caracterizar el mecanismo molecular responsable de la disminucin de
las defensas antioxidantes en neuronas sometidas a agentes oxidantes.
El perxido de hidrgeno en neuroblastos (clulas N2A) y el kainato
en hipocampo de ratn, produjo una rpida activacin de Akt, inhibicin
de GSK-3b y localizacin de Nrf2 en el ncleo. Sin embargo, a las 4 h,
cuando Akt est inactiva y GSK-3b est activa, Nrf2 fue fundamentalmente citoslico. GSK-3b indujo la localizacin de Nrf2 en el citosol de
neuroblastos N2A y de neuronas de hipocampo de ratones transgnicos que sobreexpresan esta quinasa. Consistente con estos resultados,
GSK-3b inhibi la capacidad transcripcional de Nrf2 en una construccin
reportera de luciferasa que porta tres copias en tndem del elemento
de respuesta antioxidante (ARE). Asimismo, GSK-3b atenu la induccin
de este reportador por sulforafano, que es inductor bien establecido de
Nrf2. Finalmente, GSK-3b sensibiliz a los neuroblastos frente al estrs
oxidativo y la muerte celular inducida por perxido de hidrgeno. Este
trabajo muestra a GSK-3b como un elemento clave en la inhibicin de la
defensa antioxidante bajo condiciones propias de enfermedades neurodegenerativas y del envejecimiento.

EL ETANOL INDUCE DAO INFLAMATORIO EN CEREBRO A TRAVS DEL RECLUTAMIENTO Y ENDOCITOSIS DE LOS RECEPTORES TLR4 e IL-1RI EN LIPID
RAFTS CAVEOLAE.
Ana Maria Blanco Sanchez; Consuelo Guerri Sirera
Laboratorio de Patologa Celular, Centro de Investigacin Prncipe
Felipe (CIPF), Valencia, Espaa.
Las clulas gliales y los receptores Toll-like (TLRs) estn involucrados
en la patognesis de numerosas enfermedades neurodegenerativas. Hemos
demostrado que el etanol es capaz de activar la sealizacin de los receptores TLR4/IL-1RI, conllevando a la liberacin de mediadores inflamatorios y
dao por neuroinflamacin (1,2). Proponemos que el etanol podra activar
a estos receptores facilitando su reclutamiento en los lipid rafts (LR) (3)
(microdominios de membrana implicados en transduccin de seales y endocitosis), y promoviendo su internalizacin por endocitosis y sealizacin
intracelular. Se usaron astrocitos en cultivo primario tratados con LPS (50
ng/ml), IL-1b (10 ng/ml) y EtOH (10 y 50 mM) durante 5, 10, 15, 30 y 60
min. Posteriormente, se aislaron LR mediante centrifugacin diferencial de
gradientes de sucrosa, analizando la expresin de flotilina-1 y caveolina-1
(marcadores de LR), as como de TLR4, IL-1RI, MyD88, IRAK y P-ERK mediante inmunotransferencia. Para estudiar la internalizacin de IL-1RI, los
astrocitos se marcaron con toxina colrica B (CT-B)-Alexa 488 (marcador
de LR) e IL-1RI-TRITC, analizndose mediante microscopa confocal. Nuestros resultados muestran que el tratamiento con EtOH, LPS o IL-1b, induce
una traslocacin de TLR4/IL-1RI en LR, activando su sealizacin intracelular (IRAK y P-ERK). Adems, tanto IL-1b como EtOH, inducen una internalizacin y endocitosis caveolar de IL-1RI, generando endosomas aberrantes
de gran tamao. En conclusin, uno de los mecanismos implicados en la
neuroinflamacin inducida por el etanol, sera a travs del reclutamiento y
activacin de TLR4/IL-1RI en LR caveolae, promoviendo un aumento en su
sealizacin a travs de la endocitosis mediada por caveolas.
(1) Brain Pathol. (2004)14, 365-371. (2) J. Immunol. (2005) 175, 6893-6899.
(3) Frontiers in Biosciences. (2007) 12, 2616-2630.
38

Efecto de la inyeccin intgranigral del

activador tisular del plasmingeno en
las neuronas dopaminrgicas
Clozapina aumenta la transmisin dopaminrgica en corteza prefrontal por un mecanismo independiente de receptores 5-HT2A
Ana Mara Espinosa Oliva; Ruth Fernndez Villarn, Sandro Arguelles Castilla, Roco Martnez de Pablos, Alberto Machado de la Quintana y Josefina Cano Garca
Departamento de Bioqumica, Bromatologa,Toxicologa y Medicina
Legal. Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla. Espaa.
Anala Bortolozzi Biassoni; L Daz-Mataix, C Scorza#, J. Gringich*,

F Artigas
Departmento de Neuroqumica y Neurofarmacologa, IIBB-CSIC
(IDIBAPS), Barcelona, Spain. *Department of Psychiatry, Columbia
Univ., NY, USA. #Direccin actual: Instituto de Investigaciones Biolgicas Clemente Estable, Montevideo, Uruguay.
La tromboembolia es la tercera causa de muerte y la primera causa de

incapacidad en el adulto. A pesar del considerable esfuerzo, muchos de los
tratamientos han fallado y, hasta la fecha la nica terapia para estos pacientes es la trombolisis usando el activador tisular del plasmingeno (tPA). Sin
embargo existen limitaciones, incluyendo una estrecha ventana terapetica
y un alto riesgo de hemorragias. El tPA es una de las dos serina proteasas
que activan al plasmingeno pasndolo a plasmina, lo que conduce a la
digestin de la fibrina. Se ha demostrado que el tPA no slo est presente
en el compartimento vascular sino tambin en el cerebro, neuronas, glia y
clulas endoteliales. El tPA est implicado en mecanismos de proteccin,
de plasticidad neuronal y aprendizaje y de neurotoxicidad, ya que exacerba
la muerte neuronal despus de un accidente cerebro vascular. Entender
los mecanismos moleculares que conducen a la neurotoxicidad del tPA es
necesario para evaluar el potencial de esta proteasa en el tratamiento de
enfermedades neurolgicas. Nosotros hemos inyectado 3, 6 9 ug de tPA
en sustancia negra. La dosis de trabajo utilizada ha sido 6 ug de tPA, con la
que hemos estudiado el efecto en las neuronas dopaminrgicas y glia usando inmunocitoqumica e hibridacin in situ. As mismo hemos estudiado el
efecto del tPA en los niveles totales y fosforilados de JNK, p38, ERK, Akt,
GSK-3B y CREB.Todos estos resultados demuestran una degeneracin de
las neuronas dopaminrgicas tras la inyeccin de tPA.
Buisson et al 1998; Lebeurrier et al 2004; Rogove and Tsirka 1998;
Vasalli et al 1991;

Alteraciones en los niveles del receptor
EphA4 y de los transportadores vesiculares de glutamato VGLUT1 y VGLUT2 a edades
muy tempranas en dos modelos animales de
Enfermedad de Alzheimer (EA)
Ana Mara Simn; A. Ricobaraza, L. Escribano, D. Frechilla, J. Del Ro,
R. Lpez de Maturana
rea de Neurociencias, CIMA Universidad de Navarra, Pamplona
La EA es una demencia con prdida progresiva de memoria, donde
concurren alteraciones en la funcin sinptica en estados tempranos.
Nuestro objetivo fue detectar modificaciones en procesos de plasticidad
sinptica en dos ratones transgnicos que sobreexpresan la APP humana
mutada:Tg2576 y hAPPswe/ind (con las mutaciones sueca y sueca+indiana,
respectivamente). Concretamente, analizamos los niveles de transportadores vesiculares de glutamato VGLUT1 y VGLUT2, responsables de la liberacin de glutamato al espacio intersinptico, y de receptores de efrinas
EphA4, implicados en la remodelacin de espinas dendrticas y terminales
axnicos y en el establecimiento de LTP. Determinamos los niveles de
RNA y protena de estas molculas en diferentes regiones de hipocampo
mediante RT-PCR cuantitativa tras microdiseccin lser y Western blot
en animales de 2 a 8 meses. Estos resultados se correlacionaron con dficits cognitivos en el test de reconocimiento de objetos. Observamos una
disminucin progresiva del receptor EphA4 a nivel de RNA y protena
desde estados muy tempranos. Adems, encontramos alterados los niveles de transcritos de VGLUT1 y VGLUT2, aunque la direccin y magnitud
del cambio dependi de la naturaleza del transportador y de la regin
hipocmpica en la que se expresa. Aunque los cambios observados en los
niveles de expresin del receptor EphA4 y de los VGLUTs coinciden temporalmente, no podemos establecer una conexin directa entre ambos.
Sin embargo, ambas alteraciones evidencian de nuevo que la disfuncin
sinptica glutamatrgica y anomalas en la remodelacin estructural de
componentes sinpticos forman parte de la fisiopatologa temprana de
EA. (Financiado por UTE proyecto FIMA, GN 13029)
Los frmacos antipsicticos atpicos (FAA) actan principalmente

como antagonistas del receptor 5-HT2A. Estos frmacos mejoraran la
sintomatologa negativa y cognitiva en pacientes esquizofrnicos aumentando la liberacin cortical de dopamina (DA). Datos previos indican la
participacin del receptor 5-HT1A en este efecto (Daz-Mataix et al.,
2005). Dada la alta co-expresin (80%) de los receptores 5-HT1A y 5HT2A en corteza prefrontal medial (CPFm) (Amargs-Bosch, et al., 2004),
hemos examinado si la liberacin cortical de DA producida por clozapina
(prototipo de FAA) depende del bloqueo del receptor 5-HT2A y/o la
activacin del receptor 5-HT1A.
Se realizaron experimentos de microdilisis en ratas y ratones. La aplicacin local de clozapina increment los niveles de DA en CPFm en ratas
control y en ratas pretratadas con EEDQ+WAY100635 (para inactivar
receptores acoplados a protenas G protegiendo receptores 5-HT1A).
Por el contrario, este efecto no se observ en ratas pretratadas con
EEDQ+ritanserina (proteccin del receptor 5-HT2A/2C). La co-perfusin
de clozapina revirti el efecto del agonista 5-HT2A/2C, DOI, sobre la liberacin prefrontal de DA en ratas control, pero no en ratas pretratadas
con EEDQ+ritanserina. Adems, la infusin local de DOI increment los
niveles de DA y 5-HT en CPFm de ratones controles (WT) y genticamente anulados del receptor 5-HT1A (KO). Este efecto fue revertido
por clozapina solo en ratones WT. Asimismo, clozapina increment la liberacin prefrontal de DA en ratones control y 5-HT2A KO, pero no en
5-HT1A KO.
Estos resultados indican que clozapina modula los niveles corticales
de DA por un mecanismo independiente del receptor 5-HT2A y dependiente del receptor 5-HT1A.
Daz Mataix et al. (2005). J Neurosci 25:10831-43. Amargs-Bosch et
al. (2004. Cereb Cortex14 :281-299.

Adaptacin de las respuestas y su dependencia contextual en la va somatosensorial de la rata
A. Alenda, M. R. Bale, R. S. Petersen, M. Maravall
Instituto de Neurociencias de Alicante, UMH-CSIC,San Juan de Alicante, Alicante; Faculty of Life Sciences, University of Manchester,
Manchester M60 1QD, Reino Unido
Las neuronas de la corteza en barriles muestran adaptacin de su
respuesta a estmulos repetitivos. Previamente hemos descrito que la
adaptacin en la corteza en barriles est asociada con una dependencia
contextual de la representacin del movimiento de las vibrisas. En las
neuronas corticales que adaptan se produce una modulacin de la funcin
de sintonizacin que predice la respuesta neuronal a las fluctuaciones del
estmulo. La funcin modula su sensibilidad en proporcin a los cambios
de escala de la distribucin estadstica de estmulos. Esta modulacin permite a las neuronas mantener la informacin que sus respuestas contienen acerca de las caractersticas relevantes del estmulo.
Este estudio se centra en la adaptacin a lo largo de la va somatosensorial. La adaptacin y la modulacin contextual de la sensibilidad, se
generan a nivel cortical o estn presentes ya en estados subcorticales?
Registramos respuestas unitarias de neuronas en ratas anestesiadas a estmulos de ruido blanco cuya distribucin estadstica variaba en el tiempo.
Caracterizamos la adaptacin mediante anlisis de correlacin inversa
entre los potenciales de accin y los estmulos que los generan. Primero,
llevamos a cabo registros unitarios en el ncleo ventral posteromedial
del tlamo (VPM), en donde las neuronas mostraron gran diversidad en
la adaptacin de su tasa de disparo y en las variaciones de sus curvas de
39
sintona. Segundo, realizamos registros en el ganglio del trigmino, en donde las neuronas no mostraron adaptacin. Ninguna neurona subcortical
modul su sensibilidad en proporcin a la distribucin de estmulos, al
contrario que las corticales.
Financiacin: HFSP (proyecto RG0043/2004-C), Ministerio de Educacin y Ciencia (proyecto BFU2006-04791/BFI), EC Marie Curie International Reintegration Grant (MIRG-CT-2004-511273), Royal Society Joint
Project Grant, Royal Society Research Grant

Lesiones quirrgicas alteran la actividad
elctrica y la respuesta farmacolgica de
los receptores sensoriales de fro en la
crnea.
A Parra-Martn, Quirce-Vzquez, C Belmonte,T Donovan-Rodrguez.
Instituto de Neurociencias de Alicante, UMH CSIC, Alicante, Espaa.
El propsito de nuestro trabajo es caracterizar la actividad de los
receptores sensoriales de fro tras una lesin quirrgica.
Se estudi la actividad de receptores corneales de fro tras realizar
dos tipos de lesin quirrgica: trpano y microqueratomo. Se registraron
los impulsos nerviosos de las terminales (INTs) 3-10 das tras la lesin en
la crnea aislada in vitro. Las crneas se colocaron en una cmara de registro perfundida con solucin fisiolgica a 35C y se emple un dispositivo Peltier para la estimulacin trmica de las terminales. Los receptores
de fro se identificaron por su actividad espontnea (AS), incrementada
con el fro y silenciada transitoriamente con el calor. Los frmacos se
administraron en el bao.
Los INTs registrados cerca de los dos tipos de lesin mostraron una
AS significativamente aumentada, umbrales de fro menores y frecuencias
evocadas por fro aumentadas en comparacin con las crneas intactas. La
aplicacin de lidocana elimin la actividad elctrica en las crneas intactas
y normaliz la AS en las lesionadas. Fenitona y carbamazepina redujeron
de forma dosis-dependiente la AS en las crneas intactas y lesionadas.
Se ha documentado la actividad elctrica anormal en los nervios
daados debido a la expresin alterada de canales de sodio. Nuestros
resultados indican que las terminales de fro daadas mantienen su actividad caracterstica pero con frecuencias ms altas. Esto puede ser la consecuencia de una expresin aumentada de canales de sodio. Por lo tanto,
bloqueadores de canales de sodio podran representar un tratamiento
novedoso para sensaciones anormales tras una lesin corneal.

Modulacin de las cascadas de sealizacin de PI3K/Akt/GSK-3 y ERK durante la
tolerancia y abstinencia a delta9-tetrahidrocannabinol
Andres Ozaita Mintegui; Emma Puighermanal, Rafael Maldonado,
Andres Ozaita
Laboratori de Neurofarmacologia, Departament de Cincies Experimentals i de la Salut, Universitat Pompeu Fabra, Barcelona
Los compuestos cannabinoides ejercen sus efectos farmacolgicos a
travs de la activacin del sistema endocannabinoide. Mediante el uso de
anticuerpos fosforilacin-especficos, hemos descrito recientemente que
una administracin aguda de delta9-tetrahidrocannabinol (THC) activa la
va de fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3K)/ protena quinasa B (PKB/Akt)/ glicgeno sintasa quinasa (GSK-3) en el cerebro de ratn. Por otro lado, las
quinasas activadas por mitgenos (MAPK/ERK) tambin se modulan tras la
exposicin aguda a cannabinoides. El objetivo de este estudio fue investigar
como estas vas intracelulares se regulan tras un tratamiento crnico de
THC (20 mg/kg, i. p., 5 das, dos veces al da) y durante el sndrome de
abstinencia desencadenado con rimonabant en ratones dependientes de
THC. La administracin crnica de THC disminuy la fosforilacin de GSK3, mientras que no se observaron cambios en la fosforilacin de Akt en
comparacin con la modulacin producida tras THC agudo en hipocampo
y cerebelo. Este resultado sugiere la posibilidad de que la fosforilacin de
GSK-3 inducida por THC pueda depender de otras quinasas con distinta
modulacin por THC. Por otro lado, durante la abstinencia a cannabinoides
no se detectaron cambios en la actividad de Akt/GSK-3, mientras que s au-
40
ment la activacin de la cascada de ERK1/2.Todo ello conduce a la idea de

que los mecanismos moleculares responsables de los fenmenos de tolerancia y abstinencia a cannabinoides son especficos de cada rea cerebral, y
que la modulacin de GSK-3 por THC, adems de depender de su principal
modulador Akt, depende tambin de la actividad de otras quinasas.

Acetilacin cromatnica en procesos de
aprendizajey memoria: Posible papel teraputico en enfermedades neurodegenerativas.
ngela Fontn Lozano; Carrin Rodrguez AM,
Universidad Pablo de Olavide, Sevilla
Las enfermedades neurodegenerativas asociadas al sistema nervioso
central a menudo suelen estar asociadas con defectos de aprendizaje y
memoria, y eventualmente conducen a la demencia. Un aspecto importante en la investigacin preclnica es la exploracin de estrategias para
reestablecer el aprendizaje y el acceso a memorias a largo plazo. Por ello,
la investigacin en protocolos que mejoren los procesos de aprendizaje y
memoria tienen gran relevancia para establecer terapias paliativas de las
deficiencias cognitivas que se dan en las demencias.
Los procesos de aprendizaje y memoria requieren de la expresin
de nuevas protenas, muchas de ellas codificadas por los llamados genes
tempranos (IEGs). La acetilacin de histonas favorece la descondensacin
de la cromatina, y con ello facilita la expresin de nuevas molculas. El
tratamiento sistmico con inhibidores de histonas desacetilasas (HDAC)
mejora el aprendizaje y la consolidacin de memorias en ratones adultos
sanos as como la expresin de IEGs relacionados con estos procesos.
Adems, la administracin sistmica de inhibidores de HDAC son capaces
de revertir las deficiencias cognitivas que se generan en modelos murinos
de neurodegeneracin y envejecimiento prematuro.
Estos datos sugieren que el tratamiento con inhibidores de HDAC,
puede ser una terapia para paliar los problemas cognitivos colaterales a
las enfermedades neurodegenerativas y las demencias.

Participacin de los receptores 5-HT1A en
la liberacin cortical de dopamina y serotonina inducida por el bloqueo NMDA en
el ratn. Correlacin con la actividad locomotora.
Anna Casta Forn; C Scorza2, A Bortolozzi1, F Artigas1
1. Departmento de Neuroqumica y Neurofarmacologa, Instituto
de Investigaciones Biomdicas de Barcelona, CSIC, IDIBAPS. Rosell
161, 08036 Barcelona. Phone: (+) 34 93 3638300, ext. 354. Fax: (+)
34 93 3638301; 2. Laboratorio de Biologa Celular. IIB Clemente
Estable. Montevideo, Uruguay.
Estudios previos han demostrado que los receptores 5-HT1A modulan la actividad de las neuronas dopaminrgicas del rea tegmental ventral
y serotoninrgicas del ncleo dorsal del rafe as como la liberacin de dopamina (DA) y serotonina (5-HT) en la corteza prefrontal medial (CPFm).
Adems, los antipsicticos atpicos aumentan la liberacin de DA en CPF
por activacin de receptores 5-HT1A corticales, lo que contribuye a la
mejora del dficit cognitivo en pacientes esquizofrnicos.
En este estudio evaluamos si los receptores 5-HT1A modulan la liberacin prefrontal de DA y 5-HT en un modelo farmacolgico de esquizofrenia en ratn, inducido por el bloqueo de receptores NMDA mediante
el antagonista no competitivo MK-801. La administracin sistmica de MK801 (0. 125, 0. 25 y 0. 5 mg/kg) aument los niveles extracelulares de 5-HT
de manera similar en ratones controles (WT) y genticamente nulos del
receptor 5-HT1A (KO). No obstante, en ausencia del receptor 5-HT1A el
aumento de la liberacin prefrontal de DA que induce MK-801 se vio modificado. Dicho efecto no se tradujo en una diferente activacin locomotora
entre los ratones WT y KO. Finalmente, la administracin local de MK-801
(30, 100, 300 mM) en la CPFm no increment los niveles prefrontales de
DA y 5-HT ni la actividad locomotora en ninguno de los dos genotipos.
Estos resultados indican que los receptores 5-HT1A modulan diferencialmente la liberacin prefrontal de DA y 5-HT tras el bloqueo de los
receptores NMDA y que dicho efecto tiene lugar fuera de la CPFm.

Presencia de desmina oxidada y nitrada en
las miopatas miofibrilares
Anna Janu, Maria Antonia Odena, Eliandre Oliveira, Montse Oliv,
Isidre Ferrer
Institut de Neuropatologia, Servei Anatomia Patolgica, IDIBELLHospital Universitari de Bellvitge, Hospitalet de Llobregat (AJ, MO,
IF); Plataforma de Protemica, Parc Cientfic de Barcelona (MAO,
EO); Universitat de Barcelona (MAO, EO, IF); Hospitalet de Llobregat (IF); Barcelona, Spain.
La acumulacin de protenas con cambios post-translacionales como la
fosforilacin, la glicosidacin, la oxidacin y la nitracin, es una caracterstica
comn en las enfermedades degenerativas con agregados anormales de
protenas. Las miopatas miofibrilares, incluyendo las miotilinopatas y las
desminopatas, estn caracterizadas por la acumulacin focal e intracitoplasmtica de protenas en forma de agregados insolubles en las clulas
musculares. Bsicamente, estas acumulaciones son de miotilina en las miotilinopatas y de desmina en las desminopatas, adems de muchas otras protenas. Usando distintas tcnicas como la inmunohistoqumica, el western
blott de geles mono- y bi-dimensionales, la digestin de protenas en gel y
la espectrometra de masas se ha demostrado que la desmina es la principal
diana de oxidacin y nitracin en ambos subtipos de miopatas miofibrilares. Ya que las protenas oxidadas y nitradas pueden tener efectos txicos
y alterar el funcionamiento del sistema ubiquitina-proteosoma, estas modificaciones de la desmina pueden ser consideradas como un elemento
adicional implicado en la patognesis de las miopatas miofibrilares.

-synuclein lipoxidada, nitrada y fosforilada en demencia con cuerpos de Lewy
con amgdala predominante.
Anna Martnez Casals; Esther Dalf, Gerard Muntan, Isidre Ferrer.
Institut de Neuropatologia, Servei Anatomia Patolgica, IDIBELLHospital Universitari de Bellvitge; Facultad de Medicina, Universitat
de Barcelona; Hospitalet de Llobregat.
La demencia con cuerpos de Lewy (DCL) est clasificada como una
sinucleopata caracterizada por la presencia de inclusiones neuronales intracitoplasmticas (cuerpos de Lewy) formadas por agregados proteicos,
principalmente por alfa sinuclena y ubiquitina. Clnicamente se manifiesta con alteraciones de la capacidad cognoscitiva, alucinaciones visuales y
signos motores tpicos del parkinson. Las regiones afectadas por muerte
neuronal son las mismas que en la enfermedad de Parkinson: sustancia
negra, ncleos basales de Meynert, amgdala y adems se encuentra lesionado el neocrtex cerebral. En la DCL se pueden encontrar o no placas
seniles, DCL forma pura (DCLp), o bien presentar patologa de Alzheimer
(AD) asociada conocida como DCL forma comn (DCLc). Han sido descritos casos de AD con elevada predominancia de cuerpos de Lewy en
la amgdala, definiendo una nueva forma de sinucleopata (AD amg pred
DCL). Con el objetivo de caracterizar alfa sinuclena en AD amg pred
DCL, se han hecho estudios immunohistoqumicos, microscopa confocal, anlisis de solubilidad y de agregacin de la alfa sinuclena, as como
los cambios postranslacionales de oxidacin, fosforilacin y nitracin en
controles, DCLc y AD amg pred DCL. Los resultados muestran que las
modificaciones de alfa sinuclena (fosforilacin, nitracin) y su anormal
solubilidad son parecidos en los casos de DCLc y AD amg pred DCL,
sugiriendo una vulnerabilidad de sinuclena en la amgdala.

LA GLUCOSA COMO FACTOR POTENCIADOR DE
LA MUERTE EN UN MODELO IN VITRO DE ISQUEMIA TRANSITORIA
Anna Serra, Anna M Planas,Toms Santaluca
Departamento de isquemia cerebral y neurodegeneracin, IIBBCSIC/IDIBAPS, Barcelona.
Introduccin: El tratamiento ms eficaz de la isquemia cerebral es
la reperfusin. El papel que juega la glucosa durante la reperfusin no se
conoce muy bien. En este trabajo estudiamos in vitro la muerte inducida

por isquemia y si la presencia de glucosa en la fase posterior afecta la
viabilidad celular.
Mtodos: Cultivos de neuroblastoma humano (SH-SY5Y) diferenciados con cido retinoico privados de oxgeno y glucosa (OGD) o solamente de oxgeno (anoxia) 15h, seguidas de reoxigenacin en presencia o
ausencia de glucosa. Se realiz recuento de ncleos (yoduro de propidio)
y citometra de flujo, determin el contenido en ATP, y analizaron vas de
muerte.
Resultados: La OGD (pero no la anoxia) reduce los niveles de ATP y
causa muerte. En la posterior reoxigenacin los niveles de ATP se recuperan ms rpidamente en presencia de glucosa, hecho que coincide con un
aumento significativo de la mortalidad. sta se puede reducir en ausencia
de glucosa o presencia de Citocalasina B. La OGD provoca liberacin al
citoplasma de protenas mitocondriales, como AIF y citocromo c, lo que
sugiere alteracin mitocondrial, aunque la activacin de caspasa-3 y protelisis de espectrina por va de caspasas no parecen relevantes, mientras
que s se activa la va de la calpana.
Conclusin: La OGD provoca alteraciones mitocondriales y activacin de proteasas dependientes de calcio. La presencia de glucosa despus de OGD acelera el proceso de muerte celular.
Agradecimientos: Beca predoctoral de la Generalitat de Catalunya (
A. S. ); Contrato de investigador Ramn y Cajal y proyecto SAF200505793-C02-02 (T. S. )

Modulacin bidireccional del canal inico TRPM8 por frmacos y temperatura
Annika Malkia; Rodolfo Madrid, Victor Meseguer, Carlos Belmonte,
Flix Viana
Instituto de Neurociencias de Alicante, Universidad Miguel Hernndez-CSIC. San Juan de Alicante, Espaa
TRPM8 es un canal catinico no selectivo de la familia de canales TRP
que es activado por voltaje, fro y mentol. Estas propiedades y su expresin restringida a un subgrupo de neuronas sensoriales han hecho de este
canal el principal candidato molecular para la deteccin del fro inocuo.
Recientemente se ha demostrado que la activacin de TRPM8 por fro y
mentol resulta del desplazamiento de su curva de activacin por voltaje,
permitiendo que el canal se abra a potenciales de membrana fisiolgicos.
Sin embargo se sabe poco acerca los mecanismos de accin de los inhibidores de TRPM8 y del efecto de estos moduladores sobre las respuestas
a fro de las neuronas sensoriales. En este trabajo, usando herramientas
electrofisiolgicas y de imagen de calcio en clulas HEK transfectadas
con TRPM8 y en neuronas sensoriales en cultivo, mostramos que los
inhibidores BCTC, SKF96365 y 1,10-fenantrolina, desplazan la curva de
activacin del canal por potencial en el sentido opuesto al fro y el mentol,
reduciendo su actividad a potenciales fisiolgicos. Esta modulacin bidireccional resulta en un cambio en el umbral de temperatura de las clulas
que expresan el canal, revelando una importante flexibilidad en la curva
temperatura-respuesta de TRPM8 y los termorreceptores de fro.
Financiacin: Proyectos SAF2004-01011 y BFU2005-08741 del MEC,
Fundacin Marcelino Botn, Generalitat Valenciana, MAE/AECI, Fundacin
Osk Huttunen, y la Academia de Finlandia (#107866).

El efecto hiperdpsico de la oxitocina y la
disponibilidad de sodio en la dieta
Antonio Bernal; Javier Maha; Amadeo Puerto
Departamento de Psicologa, Universidad de Jan; Psicobiologa,
Universidad de Granada
Adems de sus funciones reproductoras dimrficas, la neurohormona oxitocina (OT) ha sido relacionada con procesos fisiolgicos tales
como la regulacin de sodio corporal (natriuresis). En este contexto, el
objetivo del presente estudio ha consistido en examinar el efecto de la
administracin subcutnea de OT sobre el comportamiento hidromineral
de los animales. As, se ha podido comprobar en ratas Wistar que la OT
incrementa la ingesta de agua y la excrecin de orina en animales privados
de comida, pero no en animales mantenidos ad lib con una dieta standard.
41
Este efecto hiperdpsico de la OT en animales privados de comida va

siempre precedido de un aumento en la excrecin de sodio. Ms an,
este incremento en la ingesta de agua generado por la OT tambin se
produce en animales mantenidos con dietas hiposdicas. En conjunto, estos resultados sugieren que los efectos de la OT sobre la ingesta de agua
dependen de la presencia/ausencia de sodio en la dieta y tambin que la
accin natriurtica de esta neurohormona puede constituir el mecanismo
determinante de la polidipsia que se observa en los animales privados de
comida.

Reorganizacin del ncleo ambiguo tras
una seccin del nervio larngeo recurrente en la rata.
Pascual-Font, A. ; Maranillo, E. ; Merchn, A;Vzquez,T. ; Saudo, J. R. ;
Valderrama-Canales,
Departamento de Anatoma y Embiologa Humana; Universidad
En las lesiones de los nervios de la laringe es imprescindible conocer la reorganizacin morfofuncional de las neuronas que la inervan para
plantearse con xito tcnicas clnicas de reinervacin funcional y/o transplantes ortotpicos. Debido a la escasa presencia de este tipo de estudios
en la biblografa consultada, nuestro estudio evalua, en ratas adultas, la
organizacin de las motoneuronas larngeas en el ncleo ambiguo tras
seccin/regeneracin del nervio larngeo recurrente (NLR), trazando con
dextranaminas biotinadas de 3kd, mtodo pionero en este modelo. El
grupo control consta de catorce animales, y los ocho grupos experimentales, en los que el tiempo de reinervacin tras la lesin era de 28, 42
das, 2, 3, 4, 5 y 6 meses, constan de ocho animales cada uno. En el grupo
control se traza el NLR intacto, y en los grupos experimentales se traza
el NLR lesionado mediante seccin total, una vez transcurrido el tiempo
predeterminado. El trazado se restaura a partir del da 42. El nmero de
neuronas marcadas en el grupo control fue 143 38; tras la regeneracin
el nmero est marcadamente reducido (28 das: 1. 25 3. 54; 42 das: 61.
5 60. 05; 2 meses: 30 33; 3 meses: 44. 13 58. 43; 4 meses: 65. 89
58. 70; 5 meses: 74. 88 68. 67; 6 meses: 47. 75 52. 60). Por tanto, los
resultados muestran que la regeneracin funcional en el ncleo ambiguo
ocurre a partir del da 42 despus de la lesin.

Mecanismos de inhibicin del nAChR, trasplantado a ovocitos de Xenopus, por lidocana
Armando Alberola Die; Estela Gonzlez, Isabel Ivorra & Andrs
Morales
Depto. Fisiologa, Gentica y Microbiologa. Universidad de Alicante.
La lidocana es un anestsico local que bloquea canales de sodio,
pero tambin tiene efectos inhibidores sobre receptores de acetilcolina
(nAChRs). El objetivo de este trabajo fue determinar los mecanismos
que subyacen las acciones de lidocana en nAChRs trasplantados a ovocitos de Xenopus. Para ello, registramos corrientes de membrana evocadas por ACh (IACh), en presencia y ausencia de lidocana. La lidocana
bloque la IACh de forma reversible y dependiente de concentracin.
A bajas concentraciones de lidocana, la inhibicin de IACh se produjo
slo a potenciales negativos, y de forma no competitiva, lo que sugiere
un mecanismo de bloqueo a canal abierto. A concentraciones de lidocana ms altas (superiores a 70 M, la IC50), los nAChRs se bloquearon a potenciales positivos y negativos, aument la desensibilizacin de
la IACh y la curva concentracin ACh-amplitud IACh se desplaz hacia
la derecha, indicando un mecanismo de bloqueo adicional, aparentemente competitivo. La coaplicacin de lidocana (20 M) con edrofonio (3
M) o BW284c51 (0,5 M), bloqueantes del nAChR que tambin poseen
grupos amonio cargados positivamente, result en efectos inhibitorios
sinrgicos sobre IACh, indicando que estas molculas presentan lugares
de unin diferentes dentro del canal. Para determinar el lugar de unin
de la lidocana dentro del canal inico se estim la fraccin de voltaje
que experimenta la lidocana en el sitio de bloqueo (delta) a partir de la
ecuacin de Woodhull.
Financiado parcialmente por la DGICY, proyecto BFU2006-04781
42

Modulacin diferencial sobre la sincronizacin de neuronas corticales inducida
por el prosencfalo basal y la regin peribraquial del tronco enceflico.
Arturo Escalada Massanes; Nelson Espinosa, Jorge Mario y Javier
Cudeiro
Grupo de Neurociencia y Control Motor (NEUROcom), Universidad de A Corua.
La actividad cortical est regulada por sistemas ascendentes localizados en el tronco del encfalo y en el prosencfalo basal. La estimulacin
de estos sistemas activa el EEG y elimina las oscilaciones lentas inducidas
por el sueo o la anestesia. Las neuronas de la regin peribraquial (PBR)
poseen terminales colinrgicas/nitrrgicas que conectan con neuronas de
proyeccin del tlamo que, a su vez, envan axones glutamatrgicos a la
corteza. Las clulas del prosencfalo basal (PB) envan conexiones colinrgicas/nitrgicas y GABArgicas a la corteza. Hemos estudiado, en el
gato anestesiado, los patrones de sincronizacin entre neuronas corticales bajo diferentes niveles de activacin (inducida por microestimulacin
elctrica) del PBR y el PB. Se realizaron registros extracelulares simultneos en la corteza visual primaria mediante un multielectrodo. Mediante
estimulacin visual se determin la selectividad a la orientacin de las
neuronas.
Se calcul, para pares de clulas, el espectro de frecuencias, la correlacin cruzada y la correlacin en funcin del tiempo. La estimulacin en
el PBR provoc una de-sincronizacin larga e intensa (hasta 100 seg) entre pares de neuronas, seguida de una re-sincronizacin lenta y continua
(75-100 seg). La estimulacin en el PB provoc, en la mayora de los casos,
una de-sincronizacin corta (hasta 10 seg) seguida de una re-sincronizacin rpida. La de-sincronizacin fue mayor entre clulas con selectividades a la orientacin ortogonales. Asimismo, estas clulas mostraron una
re-sincronizacin ms lenta (75-125 seg).
Estos resultados revelan diferencias especficas en la arquitectura
funcional y los mecanismos de modulacin cortical mediados por el PBR
y el PB.
MEC-BFU2005-00502

Canales de leak (K2P) modulados por axotoma en neuronas sensoriales
Astrid Tulleuda Martnez; Miguel Morales, Xavier Gasull
Lab. Neurofisiologa. Facultad de Medicina, Universidad de Barcelona- IDIBAPS, Barcelona.
Las lesiones en los axones perifricos sensibilizan las neuronas sensoriales nociceptivas produciendo hiperexcitabilidad, actividad ectpica
espontnea y alteraciones en la percepcin del dolor, lo que contribuye a
la aparicin de hiperalgesia, alodinia y dolor neuroptico. Los canales de
potasio de la familia K2P o de leak son clave en la regulacin del potencial
de membrana en reposo y la excitabilidad celular. En las neuronas de los
ganglios de la raz dorsal (DRG), TREK-2 y TRESK son responsables del
95% de las corrientes de potasio de leak. Nuestros estudios mediante
real-time PCR muestran una disminucin del 53% en la expresin de
TRESK en las neuronas lesionadas (L4 y L5) tras 3-4 semanas post-axotoma unilateral del nervio citico de rata. No se observaron cambios
significativos para los canales TREK-1, -2, TRAAK y TASK-1, mientras que
se observ una sobrexpresin del canal de calcio tipo L del 500% (control positivo). Registros electrofisiolgicos en neuronas DRG de pequeo
tamao (nociceptivas) mostraron un aumento de excitabilidad y en la resistencia de entrada tras axotoma. Experimentos preliminares muestran
una correlacin entre la disminucin en la expresin de los canales y las
corrientes totales de leak. Estos resultados sugieren que la disminucin
en las corrientes de K+ de leak podra contribuir de manera importante
a la generacin de hiperexcitabilidad neuronal tras lesin de sus axones
perifricos.
BFU2005-01572

ZD7288 INHIBE LA CORRIENTE T DE CALCIO EN LAS
CLULAS PIRAMIDALES DEL HIPOCAMPO DE RATA.
Asuncin Colino Matilla; J. L. Snchez-Alonso, J.V. Halliwell
Dept. Fisiologa, Fac. Medicina, UCM, Ciudad Universitaria, 28040
Madrid
La corriente H juega un papel fundamental sobre el potencial, la conductancia y la constante de longitud de la membrana neuronal en reposo.
Por otra parte, esta corriente interviene en la generacin y regulacin
de la actividad marcapasos encargada de generar la actividad rtmica de
las neuronas espontneas. Los estudios de la importancia fisiolgica y
patofisiolgica de la corriente H han aumentado en la ltima dcada, utilizndose en dichos trabajos el bloqueante ZD7288. Nosotros hemos
investigado los efectos no-especficos del compuesto ZD7288 sobre los
canales tipo T de calcio en las clulas piramidales de la regin CA1 del
hipocampo, mediante la tcnica de registro de patch-clamp en fijacin
de voltaje. ZD7288 inhibe la corriente T de calcio en presencia de TTX,
Nifedipina, TEA, 4-AP, CsCl y BaCl2, dicha inhibicin es dosis- y actividaddependiente. Adems, ZD7288 altera el curso temporal de la recuperacin de la inactivacin de la corriente T y desplaza la curva de inactivacin
en sentido hiperpolarizante. Estos resultados indican que este bloqueante
presenta efectos no-especficos sobre los canales de calcio de bajo umbral aparte de los descritos sobre la corriente H.

EFECTO DE UNA LESIN SELECTIVA COLINRGICA
EN RATAS SOMETIDAS A SEPARACIN MATERNA
Brbara Aisa Vega; F. J. Gil-Bea, B. Marcos, R. Tordera, J. Del Ro, M. J.
Ramrez.
Departamento de Farmacologa, Facultad de Medicina, Universidad
de Navarra, 31008 Pamplona, Espaa
La separacin maternal (SM) durante el periodo post-natal provoca
una serie de profundos cambios que interfieren con la maduracin normal del cerebro. Estos animales al llegar a adultos tienen una respuesta
alterada al estrs mediada por el eje hipotlamo-pituitario-adrenal (HPA),
as como alteraciones conductuales, por lo que la SM se puede considerar como un modelo de depresin y ansiedad. Teniendo en cuenta el
clsicamente aceptado papel de la acetilcolina en los procesos cognitivos
y la denominada hiptesis colinrgica de la demencia, en este trabajo se
estudi la influencia de la SM en la vulnerabilidad del sistema colinrgico.
No se encontraron diferencias en los marcadores colinrgicos acetilcolinesterasa (AChE) y colinacetiltranferasa (ChAT) medidos en la corteza
frontal e hipocampo de los grupos control y SM. Una lesin selectiva
colinrgica inducida por la administracin de 192-IgG-saporina indujo un
descenso significativo de estos marcadores colinrgicos, los cuales fueron
significativamente mayores en los animales SM. En la prueba del laberinto
acutico de Morris, los animales SM + lesin mostraron un dficit cognitivo, significativamente mayor que el inducido por la sola lesin colinrgica.
Estos resultados sugieren que situaciones de estrs en pocas tempranas
de la vida, provocan una mayor vulnerabilidad de las neuronas colinrgicas
y la posible implicacin del estrs en la etiologa de sndromes como la
enfermedad de Alzheimer, que cursan con alteraciones cognitivas asociadas a una hipofuncin colinrgica.
Financiado por proyecto Europeo (LSHM-CT-2004-503474).
mos dos casos afectados por atrofia multisistemica (MSA)(3) combinada

con enfermedad de Alzheimer (AD). Numerosas inclusiones neuronales
y gliales de sinucleina fueron encontradas en el tronco, amgdala e hipocampo de los dos casos. Inclusiones positivas para tau fosforilada (NFTs)
se encontraron distribuidas muy abundantemente (de forma difusa) en
el caso 1 (estadio VI de Braak), mientras slo moderadamente en el caso
2 (estadio III de Braak). Aunque las patologas de alpha-sinucleina y tau
aparecieron al mismo tiempo en el hipocampo y en la corteza entorinal,
slamente en pocas neuronas las inclusiones de las dos protenas fueron
encontradas conjuntamente. La imunoreactivitad para p62, una protena
relacionada con el sistema ubiquitina-protesoma(4), fue demostrada en la
mayor parte de NFTs, pero slo en una pequea proporcin de inclusiones neuronales de sinucleina. Adems, UBB+1, una forma mutada de ubiquitina y un marcador de disfuncin proteosomal(5), fue encontrado en
la mayor parte de los NFTs, mientras la co-existencia de alpha-sinucleina
con UBB+1 fue observada slamente en unas pocas neuronas.
Estos hechos demuestran que 1) alpha-sinucleina y tau fosforilada
se expresan conjuntamente en algunas regiones del cerebro en casos de
MSA y AD, 2) que la va de degradacin proteosomal es diferente entre
las neuronas que tienen inclusiones de alpha-sinucleina y las que muestran
la presencia de tau fosforilada.
1. Arch. Neurol. 61, 398 (2004). 2. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 62, 389
(2003). 3. Curr. Opin. Neurol. 18, 357 (2005). 4. Mol. Cell Biol. 24, 8055
(2004). 5. Neurobiol. Aging 27, 515 (2006).

RELACIN ENTRE LOS RECEPTORES 5-HT6 Y LA
FUNCIN DEL EJE HIPOTLAMO-HIPOFISIARIOADRENAL: IMPLICACIONES COGNITIVAS Y BIOQUMICAS
Beatriz Marcos Alvarez; Brbara Aisa Vega; Mara Javier Ramrez Gil
Departamento de Farmacologa. Facultad de Medicina. Universidad
de Navarra. Pamplona. Navarra. Espaa
Los antagonistas del receptor 5-HT6 han demostrado ser capaces de
mejorar los procesos de aprendizaje y memoria en diferentes modelos
animales. Se conoce tambin que en los trastornos psiquitricos relacionados con situaciones de estrs, asociados a alteraciones en la funcin
del eje hipotlamo-hipofisiario-adrenal (HPA), aparecen importantes trastornos de memoria. En este trabajo se han estudiado las interacciones
funcionales entre los receptores 5-HT6 y el eje HPA. SB-271046, un antagonista selectivo del receptor 5-HT6, revirti completamente los trastornos cognitivos asociados a una alteracin de la respuesta del eje HPA en
un modelo animal de separacin materna (SM) en rata. La expresin del
receptor 5-HT6 en el hipocampo y en la corteza frontal de los animales
SM fue similar a la de los animales controles, aunque el incremento en los
niveles de serotonina (5-HT) en respuesta a un estrs agudo fue superior
en la corteza frontal de los animales SM. La expresin del ARNm del
receptor 5-HT6 aument significativamente en el hipocampo en una situacin de adrenalectoma. El tratamiento subcrnico con SB-271046 no
modific los niveles del ARNm de CRF en el hipotlamo, pero increment significativamente la densidad de los receptores de glucocorticoides en
el hipocampo comparada con la de los controles. En cambio, en la corteza
frontal, el tratamiento con SB-271046, produjo un descenso significativo
en la densidad de los receptores de glucocorticoides. Estos resultados
pudieran ser de inters en el tratamiento de las alteraciones cognitivas y
conductuales asociadas a una respuesta alterada al estrs.
Financiado por proyecto Europeo (LSHM-CT-2004-503474)

Imunoreactivitad para ubiquitina mutada
y p62 en casos conjuntos de atrofia multisistemica y enfermedad de Alzheimer
Beatrice Terni; Maria Jesus Rey; Susana Boluda; Benjamin TorrejonEscribano; Maria Pujol Sabate; Matil Calopa; Fred W van Leeuwen;
Isidro Ferrer
Instituto de Neuropatologia, Facultad de Medicina, IDIBELL-Hospital Universitario de Bellvitge, Universitad de Barcelona
Estudios recientes han demostrado la co-existencia de sinucleina y
tau en diferentes enfermedades neurodegenerativas(1, 2). Aqu describi-
43

ALTERACIN DE LA MIELINIZACIN EN RATONES
CARENTES DEL RECEPTOR DEL CIDO LISOFOSFATDICO LPA1.
Garca-Daz B. (1); Matas-Rico, E. (1); Riquelme R (2); Varela-Nieto
I (2); Jimnez A. J. (3); Chun J (4); Leyva L. (1); Fernndez O (1); Rodrguez de Fonseca, F. (1); Estivill-Torrs, G. (1).
(1) Fundacin IMABIS, Unidad de Investigacin, Hospital Universitario Carlos Haya, Mlaga. (2) Instituto de Investigaciones Biomdicas
Alberto Sols, (CSIC-UAM), Madrid. (3) Departamento de Biologa
Celular, Gentica y Fisiologa, Universidad de Mlaga. (4) The Scripps
Research Institute, La Jolla, California.
El cido lisofosfatdico (LPA) es un fosfolpido endgeno que acta en
mltiples procesos a travs de receptores especficos (LPA1-5) acoplados
a protenas-G. Su va de sealizacin est presente en el sistema nervioso
central a travs de, fundamentalmente, su receptor LPA1. Nuestro grupo
de investigacin ha demostrado que los ratones maLPA1-null, desarrollados
en nuestro laboratorio, carentes del receptor LPA1, presentan disminucin
de precursores neurales y alteraciones de maduracin, tanto durante el
desarrollo cortical, como en el hipocampo y zona subventricular adultas. La
caracterizacin se ha extendido al estudio de la glia mielinizante, que expresa especficamente LPA1 y de manera correlacionada a la mielinizacin,
lo que convierte al animal en un modelo interesante para el estudio de
patologas desmielinizantes. En ausencia de LPA1 los animales muestran dficit cortical de mielina demostrada, principalmente, por la disminucin de
expresin de MBP y PLP, tanto por inmunocitoqumica como por westernblot. La alteracin de la mielina ha quedado confirmada por los estudios de
microscopa electrnica as como por los anlisis de espectroscopia por
resonancia magntica que han demostrado un patrn de colina afectado.
Adems, se ha realizado conteo de la poblacin oligodendrocitaria por estereologa, mostrndose una reduccin claramente significativa en ausencia
del receptor LPA1. Los resultados demuestran que la ausencia de dicho
receptor altera la produccin de oligodendrocitos en el animal, adems de
generar un patrn deficitario en la propia formacin de mielina. En este
sentido, tambin se han realizado estudios que han mostrado alteraciones
en el transporte intracelular de la protena PLP de la mielina.

CoCl2 induce la muerte de neuronas corticales de rata por activacin de la va intrnseca de la apoptosis.
Lpez-Hernndez, B., Posadas, I. and Cea,V.
Unidad Asociada Neurodeath CSIC-UCLM. Facultad de Medicina
de Albacete, Universidad de Castilla-La Mancha. Avd. De Almansa,
14. 02006. Albacete
El Cobalto mimetiza el efecto de la hipoxia en modelos animales
(1)favoreciendo la estabilizacin del factor de transcripcin HIF-1alfa travs de la inhibicin de las enzimas prolilhidroxilasa (PHD) (2).
El objetivo del presente trabajo fue el estudio del papel de HIF-1alfa
en el mecanismo de muerte neuronal inducido por cobalto.
Se cultivaron neuronas corticales de rata y se trataron con CoCl2
200mM en presencia o ausencia de inhibidores farmacolgicos. La viabilidad celular se determin por ensayo MTT. La actividad caspasa-3 se cuantific en lisados celulares y mediante western blot se analiz la expresin
de HIF-1a. Adems, se midieron los niveles de NOx (nitritos ms nitratos)
para determinar la produccin de xido ntrico (NO).
El tratamiento con CoCl2 provoc una disminucin tiempo-dependiente de la viabilidad celular. Mediante la tcnica western blot, se observ
que el CoCl2 indujo la estabilizacin de HIF-1a y su translocacin al ncleo. Adems, se observ un aumento de actividad caspasa-3 en el lisado
de las clulas tratadas con CoCl2 200 M, acompaado de un aumento
en la produccin de NOx, que fue reducido de forma concentracin dependiente por el inhibidor farmacolgico de la NOS inducible (iNOS)
1400-W. Por ltimo, observamos que la administracin de MnTBAP, un
compuesto que mimetiza la accin de la superoxido dismutasa, disminuy
la muerte inducida por CoCl2.
Nuestros resultados sugieren que CoCl2 es capaz de inducir muerte neuronal por apoptosis con activacin de caspasa-3, estabilizacin de
44
HIF-1alfa, sobreproduccin de NO procedente de la iNOS y aumento de

especies reactivas del oxgeno (EROS).
(1)Lei, X., et al.Am J Physiol Heart Circ Physiol. 287, H2369-H2375. (2004).
(2)Lee, J-W., et al. Experimental and Molecular Medicine. 1, 1-12. (2004)

Sntesis qumica de derivados glicolipdicos con elevada actividad antitumoral en
el sistema nervioso central
Beatriz Valle Argos; Gmez-Nicola D, Nieto-Sampedro M
Instituto Cajal. Hospital Nacional de Parapljicos
Los tumores del sistema nervioso central constituyen el 2,3% de
las muertes causadas por cncer; no son de los tumores ms frecuentes
pero su morbilidad y mortalidad es altamente significativa. El ganglisido
9-O-Ac GD1b o neurostatina, presente en el cerebro de mamferos, es
un potente inhibidor de la proliferacin de astroblastos, as como de lneas celulares tumorales del sistema nervioso central, convirtindose en
buen candidato para el tratamiento de este tipo de tumores. Debido a
su dificultad de obtencin, se sintetiz qumicamente, junto con otros
compuestos glicosilados, mediante acetilaciones y butirilaciones de GD1b
y GT1b, buscando un producto estable y con alta actividad antitumoral en el sistema nervioso central. Los compuestos obtenidos inhibieron
drsticamente la proliferacin de lneas celulares tumorales (astrocitoma
humano tipo III U373 MG), destacando la accin de GD1b butirilado en
el cido silico terminal (9-O-But GD1b)(ID50= 0. 83M) y GT1b tres
veces acetilado en sus silicos terminales (Tri-(9-O-Ac) GT1b)(ID50= 0.
31M). Estos resultados se corroboraron mediante xenotransplantes de
glioma de rata (C6-GFP) en ratones nude, donde el crecimiento tumoral disminuy al tratarse con muy bajas concentraciones de gangliosidos
semi-sinteticos (0. 04mg/Kg de peso). Los nuevos ganglisidos 9-O-But
GD1b y Tri(9-O-Ac) GT1b surgen como nuevas herramientas teraputicas en el tratamiento de tumores del sistema nervioso central, con una
actividad antitumoral superior a la de la propia neurostatina.

DESINHIBICIN NEURONAL EN EL NCLEO CAUDAL DEL TRIGMINO EN UN MODELO DE DOLOR
CRNICO
Beatriz Yasmina Martn Martnez; Eduardo Malmierca, Carlos
Avendao y ngel Nez
Departamento de Anatoma, Histologa y Neurociencia. Facultad de
Medicina. Universidad Autnoma de Madrid
El sndrome de dolor facial contina suponiendo un reto teraputico en nuestros das. Las propiedades electrofisiolgicas de las neuronas
trigeminales estn poco establecidas y tampoco se conoce bien cul es
el comportamiento neuronal en situaciones de dolor. Hemos utilizado un
modelo animal de constriccin crnica del nervio infraorbitario (CCIIoN) de la rata y se han realizado registros uni y multiunitarios en la
divisin caudal del ncleo espinal del trigmino, en ratas anestesiadas
con uretano. Tras comprobar comportamiento de dolor ante estmulos
inocuos, comparamos la respuesta a estmulos tctiles desde la zona de
vibrisas y a elctricos en la corteza SI con ratas control. No encontramos
diferencias en la respuesta a estmulos tctiles ni crticofugales. Sin embargo, la estimulacin con pares de pulsos mostr una desinhibicin en
las ratas que presentanban dolor para los estmulos tctiles. Los pares de
pulsos en la va corticofugal no fueron alterados significativamente. Los
resultados muestran un aumento de la excitabilidad de las neuronas trigeminales en presencia de dolor crnico. Esta observacin, podra explicar
la alodinia presente en las ratas con CCI-IoN y, en caso de neuralgia del
trigmino, la presencia de puntos gatillo cuyo estmulo desencadena un
paroxismo de dolor.
Financiado por la Fundacin Alfonso Martn Escudero y por el Ministerio de Ciencia y Tecnologa (BFU2005-07486).

Los receptores dopaminrgicos D4 bloquean el efecto de la morfina sobre la

expresin de encefalina y dinorfina en el
caudado putamen de rata
LA ACTIVACIN CRNICA DE LA VIA NO/GMPC/

PKG INHIBE CORRIENTES DE FUGA DE K+ E INDUCE UN INCREMENTO PERSISTENTE EN LA EXCITABILIDAD DE MOTONEURONAS LESIONADAS(1)
Beln Gago Caldern; 2 Kjell Fuxe, 2 Stefan Bren, 1 Juan Jos

Valderrama, 1 Adelaida de la Calle, 1 Alicia Rivera
1. Dpto. Biologa Celular, Universidad de Mlaga. 2. Dpto. Neurociencias, Istituto Karolinska (Suecia)
Bernardo Moreno Lpez; Federico Portillo, Laura Gmez, Fernando

Montero, Sergey Kasparov, David Gonzlez-Forero
rea de Fisiologa, Facultad de Medicina, Universidad de Cdiz, Cdiz. Dpt of Physiology, University of Bristol, BS8 1TD, Bristol UK
La encefalina y la dinorfina son pptidos opioides endgenos que en el

sistema nervioso central participan en la modulacin del comportamiento afectivo y del desarrollo de la dependencia a morfina. La exposicin
continua a morfina, a travs de la activacin de receptores opioides tipo
mu, modifica la expresin de ambos pptidos en el caudado putamen. La
dopamina, a travs de su unin a los receptores dopaminrgicos D1 y D2,
tambin regula la expresin de dinorfina y encefalina, pero no se conoce
qu papel pueden tener los receptores D4. Los receptores opioides tipo
mu y dopaminrgicos D4 se expresan en las neuronas estriatopalidales y
estriatonigrales del caudado putamen, coexistiendo en el compartimento
estriosomal. En este trabajo hemos analizado si la activacin aguda de
ambos tipos de receptores regula la expresin de encefalina y dinorfina.
Para ello se han realizado tratamientos agudos con el agonista de los
receptores D4 PD168,077 y/o morfina. Mediante tcnicas de hibridacin
in situ y anlisis de imagen se han determinado cambios en la expresin
del ARNm para estos pptidos. La morfina produce una disminucin de la
expresin de encefalina y dinorfina, mientras que PD168,077 slo reduce
la de encefalina. La co-administracin de ambos frmacos no modifica o
incrementa los niveles de expresin de ambos pptidos. Estos resultados
sugieren que los receptores D4 pueden estar implicados en la regulacin
de los efectos que se producen tras el condumo agudo de morfina. Financiado por BFU2005-06615 y CTS-0161.
El conocimiento de los mecanismos que potencian la vulnerabilidad

neuronal al dao excitotxico es de gran inters teraputico. Nuestra
hiptesis de trabajo es que la produccin crnica de xido ntrico (NO)
podra aumentar la excitabilidad en neuronas lesionadas mediante la inhibicin de corrientes de fuga de K+. La lesin por aplastamiento del nervio
XII en ratas adultas indujo la expresin de novo de la NO sintasa neuronal (nNOS) y una reduccin paralela en los umbrales de reclutamiento en
las motoneuronas lesionadas, un efecto prevenido por la administracin
crnica de inhibidores de la va NO/GMPc. Estos cambios en reclutamiento fueron persistentes y contribuyeron a mantener un elevado nivel de
actividad elctrica basal en el ncleo lesionado que revirti lentamente
(2-3 hrs) tras la administracin de inhibidores de la nNOS. Estudios in vitro mostraron que la activacin farmacolgica de forma crnica (>4 hrs),
pero no aguda (10-15 min) de la va NO/GMPc promovi un aumento
en la excitabilidad intrnseca en las motoneuronas del ncleo hipogloso
independiente de actividad sinptica. Este efecto result de la supresin
de corrientes de K+ tipo TASK a travs de un mecanismo dependiente
de proteina kinasa G (PKG). Finalmente, proporcionamos evidencia de la
activacin y operacin de esta misma va en motoneuronas lesionadas. En
conclusin, la activacin crnica de la va NO/GMPc/PKG a travs de su
accin inhibidora sobre corrientes TASK incrementa la excitabilidad neuronal, y esto podra aumentar la susceptibilidad a la muerte celular tras
el dao traumtico, isqumico o en el curso de diversas enfermedades
neurodegenetrativas.
(1) David Gonzlez-Forero, Federico Portillo, Laura Gmez, Fernando Montero, Sergey Kasparov and Bernardo Moreno-Lpez. Inhibition
of resting potassium conductances by long-term activation of the NO/
cGMP/PKG pathway: a new mechanism regulating neuronal excitability. J
Neuroci (en prensa)
Financiacin: MCYT (BFI2001-3186); MEC (SAF2005-00585); Consejera de Innovacin, Ciencia y Empresa de la Junta de Andaluca (CTS-844)

Papel neuroprotector de antagonistas
del receptor de angiotensina tipo 1 en modelos animales de parkinsonismo.
Beln Joglar Santos; Pablo Rey, Ana Lpez-Real, Ana Isabel Rodrguez-Prez, Jannette Rodrguez-Pallares, Jos Luis Labandeira-Garca
Departamento de Ciencias Morfolxicas. Facultade de Medicina.
Universidade de Santiago de Compostela
La angiotensina II (AII) activa (va receptores tipo 1, AT1) el complejo
NADPH oxidasa, que constituye la mayor fuente celular de in superxido tras la mitocondria. El in superxido tiene un papel relevante
en la patognesis de diversas enfermedades cardiovasculares y en otros
cambios degenerativos asociados con el envejecimiento. Dado que hay
un sistema renina-angiotensina local e independiente en el cerebro y que
el estrs oxidativo es un factor clave en, al menos, el progreso de la enfermedad de Parkinson, hemos investigado los efectos de la AII y de los
antagonistas de receptores AT1 en un modelo de parkinsonismo inducido
por 6-hidroxidopamina. La inyeccin intraventricular de 6-hidroxidopamina en ratas indujo una reduccin bilateral tanto del nmero de neuronas dopaminrgicas como de sus terminales estriatales. La inyeccin
intraventricular de AII no produjo por s sola ningn efecto significativo.
Sin embargo, la AII increment el efecto txico de la 6-hidroxidopamina.
En ratas tratadas con ZD7155, antagonista de receptores AT1, y despus
con 6-hidroxidopamina (con o sin administracin de AII exgena) se
redujo de forma significativa el estrs oxidativo (peroxidacin lipdica y
oxidacin proteica) y la degeneracin dopaminrgica inducidos por 6hidroxidopamina en el estriado y mesencfalo ventral. La degeneracin
dopaminrgica tambin fue reducida por el inhibidor de la activacin del
complejo NADPH oxidasa, apocinina. La AII, a travs de los receptores
AT1, podra jugar un papel potenciador del dao oxidativo en las neuronas dopaminrgicas y el tratamiento con antagonistas AT1 podra reducir
la progresin de la enfermedad de Parkinson.

EFECTOS TRFICOS COMPLEMENTARIOS DE BDNF
Y NT-3 EN LAS PROPIEDADES DE DISPARO DE MOTONEURONAS AXOTOMIZADAS DEL NCLEO MOTOR OCULAR EXTERNO EN GATO
C. J. Morado Daz, M. A. Davis-Lpez de Carrizosa, A. M. Pastor y R.
R. de la Cruz
Departamento de Fisiologa y Zoologa, Universidad de Sevilla, Espaa.
Se estudiaron las propiedades de disparo de las motoneuronas del
Ncleo Motor Ocular Externo (NMOE) tratadas con factor neurotrfico
derivado de cerebro (BDNF) y/o neurotrofina 3 (NT-3). Se emplearon
gatos adultos preparados para el registro extracelular crnico de las motoneuronas y de los movimientos oculares. Tras varias sesiones control,
se axotomiz el VI par craneal en su extremo ms cercano al msculo
recto externo. El extremo del nervio se introdujo en una cmara para
la administracin de 10 l de BDNF, NT-3 o la mezcla de ambas a una
concentracin de 10-16 g/l en das alternos, durante 4 semanas. La poblacin de motoneuronas registradas se compar posteriormente con las
registradas en animales no axotomizados y animales en los que se inyect
una solucin salina. Las motoneuronas axotomizadas dispararon a menor
frecuencia que las controles y mostraron una reduccin significativa de
los parmetros relacionados con el movimiento ocular (sensibilidad a la
posicin y a la velocidad). La administracin de BDNF previno la prdida de la tasa tnica de disparo relacionada con las fijaciones oculares,
mientras que NT-3 mantuvo el disparo relacionado con los movimientos
sacdicos. La mezcla de ambas neurotrofinas previno los efectos de la
axotoma en las propiedades de descarga de las motoneuronas, presentando stas valores similares a las clulas control. Por tanto, ambas neu-
45
rotrofinas poseen una accin complementaria, sugiriendo que sus efectos

son mediados por aferencias sinpticas diferentes. La administracin simultnea de las dos neurotrofinas produjo tambin efectos sinrgicos en
el soporte trfico de las motoneuronas.

Papel de la sealizacin presinptica de
TrkB en la sinaptognesis GABArgica y sus
mecanismos moleculares.
Carlos Snchez-Huertas & Beatriz Rico.
Instituto de Neurociencias de Alicante, CSIC-Universidad Miguel
Hernndez, 03550 Sant Joan dAlacant, Espaa.
Las neurotrofinas son una familia de factores de crecimiento, que
participan en procesos de plasticidad neuronal, sinaptognesis y potenciacin de las sinapsis, entre otros. Una de las cuatro neurotrofinas caracterizadas en mamfero es el BDNF (brain derived neurotrophic factor),
que interacciona con la clula mayoritariamente a travs de un receptor
tirosina quinasa transmembrana denominado TrkB (tropomyosin-related
kinase B). Estudios previos han demostrado que la va de sealizacin
BDNF-TrkB modula diferentes aspectos de la formacin, maduracin y
estabilizacin de la sinapsis, tanto glutamatrgica como GABArgica.
Nuestro estudio pretende abordar dos aspectos poco conocidos de
la regulacin de BDNF sobre la sinapsis GABArgica: la importancia del
componente presinptico en dicha regulacin y los mecanismos moleculares mediadores de este fenmeno. Para ello usaremos tcnicas in vivo
e in vitro con ratones knock-out condicionales especficos de trkB en
interneuronas (presinapsis) y ratones salvajes.
Los resultados obtenidos in vivo demuestran que la cantidad total
de protena GAD65 est reducida en ausencia de TrkB en interneuronas. Consistentemente, nuestros estudios in vitro en cultivos corticales
muestran una reduccin significativa de la densidad de clusters sinpticos
inhibitorios a 10DIV. Paralelamente, en cultivos corticales silvestres, hemos confirmado un aumento de protena GAD65 en respuesta a BDNF,
dicho incremento se bloquea en presencia del inhibidor de Trk K252a y
del inhibidor de la transcripcin ActinomicinaD, y parece estar mediado
por las vas de la MAPK y de la AKT.

Clulas estromales de tejido adiposo como
minibombas biolgicas para la secrecin
de sustancias neuroactivas
Nuria Cobacho, Maria Jos Casarejos, Mari Angeles Mena, Matilde Serrano, Rafael Gonzalo-Gobernado, Silvia Baena y Carlos Luis Pano
Servicio de Neurobiologa-Investigacin, Hospital Ramn y Cajal,
Madrid
Los cultivos de clulas obtenidas de la fraccin vsculo-estromal del
tejido adiposo, conocidas como ADSCs, poseen gran capacidad proliferativa y multipotencialidad diferenciativa. Adems presentan caractersticas
de clulas neurales y secretoras. Tras implantarlas intratecalmente sobreviven largos periodos integradas en las meninges. Este estudio pretende
valorar la posibilidad de utilizar las ADSCs para la liberacin de sustancias
neuroactivas al SNC. En ADSCs procedentes de panculo inguinal de rata
se transfectaron mediante vectores retrovirales los genes de las enzimas
tirosina hidroxilasa (TH) y/o GTP ciclohidrolasa 1 (CGH1), bajo control
del promotor de CMV. Se obtuvo expresin estable de las enzimas en el
60-95% de las ADSCs. Las clulas se expandieron y congelaron hasta su
utilizacin. Mediante HPLC-ED se midi el contenido de L-DOPA intracelular y el liberado al medio de cultivo. Las ADSCs no producan L-DOPA
espontneamente. Los cultivos de ADSCs que expresaban slo TH o
GCH1 tampoco presentaban niveles valorables de L-DOPA, mientras que
los que contenan una mezcla al 50% de ambos cultivos (TH + GCH1) y
los de clulas doblemente transfectadas (TH-GCH1) tenan un contenido
intracelular, respectivamente, de 837 30 ng y de 809 97 ng de L-DOPA
/milln de clulas y haban liberado al medio 12209 456 ng y 8900 473
ng/milln de clulas en 20 horas. Estos resultados sugieren que slo las
ADSCs GCH1+ producen (y liberan) el cofactor BH4, imprescindible para
el funcionamiento de la TH, y que las ADSCs TH+ producen y secretan
L-DOPA cuando hay BH4 intracelularmente o en el medio.
46

Pushing the envelope of real-time technology in Neuroscience
Carlos Muiz Solaz; Rafael Levi, Francisco B. Rodrguez, Pablo Varona
Grupo de Neurocomputacin Biolgica. Escuela Politcnica Superior. Universidad Autnoma de Madrid
Real time (RT) technology is largely undeveloped in the life sciences.
This technology has an enormous potential to build activity-dependent stimulus-response loops to interact with living systems below the
millisecond time scale. Establishing these loops can be an essential step
towards understanding the dynamics of many biological processes and
can bridge between traditionally disparate levels of analysis. So far, RT
technology has been partially exploited in form of the dynamic clamp in
electrophysiological preparations at the cellular and circuit levels. The dynamic clamp uses RT technology to introduce artificial membrane or synaptic conductances into biological neurons and to create hybrid circuits
of real and electronic neurons. We have generalized the principles used
in the dynamic-clamp to develop new protocols of RT event-dependent
control, stimulation, and recording with applications in a broad spectrum
of biomedical research. Here we introduce a multipurpose software platform to control bi-directional interactions among RT agents. Living RT
agents are: membranes, cells, synapses, neurons, neural networks, nerves,
tissues, organs, limbs, whole animals, etc. Artificial RT agents are: computer software (including subcellular, cellular or system models and online
time series analysis), electronic devices, artificial neurons and neural circuits, sensors, microinjectors, motors, lasers, two-photon microscopes,
cameras, EEG and FMRI setups, etc. This user-friendly and customizable
software provides its own data monitor and analysis tools and is freely
distributed. The RT software platform can link electrophysiology, imaging,
sensory stimulation and behavioural response monitoring to allow the
implementation of novel realistic stimulation protocols in neurophysiology, behavioural science and psychophysics.

Increased IgG permeability of blood-brain barrier on the hippocampus of a murine
model of senescence
Carme Pelegr (a), Anna Maria Canudas (b), Jaume del Valle (a), Antoni Camins (b), Merc Palls (b) and Jordi Vilaplana (a)
(a) Departament de Fisiologia, Facultat de Farmcia, Universitat
de Barcelona, Av. Joan XXIII s/n., 08028 Barcelona. (b) Unitat de
Farmacologia i Farmacognsia, Facultat de Farmcia, Universitat de
Barcelona, Av. Joan XXIII s/n., 08028 Barcelona.
SAMP8 mice show several indicative characteristics of accelerated
aging and have been used to study the physiological and physiopathological processes that take place during senescence. SAMP8 mice is characterized by an early onset of deficits in learning and memory for aversive
and appetitive training. Pharmacological studies have found that they have
a cholinergic deficit in the hippocampus. Moreover, these mice overproduce amyloid precursor protein and immunocytochemical studies have
shown an age-related increase in A-like deposits in the hippocampus.
It has also been observed that the accelerated ageing of SAMP8 animals
is connected to a decreased efficiency of the systems utilizing reactive
oxygen species in tissues. There is some controversy about the presence
of a functional blood-brain barrier (BBB) disturbance on these animals,
which could be related to the oxidative stress or the amyloidosis present
in their brain. In order to elucidate BBB status in the hippocampus of
SAMP8 mice, in this study we have determined the extravasation from
brain microvessels of endogenous IgG in aged SAMP8 mice and in a genetically related control strain SAMR1. Immunohistochemistry, confocal
microscopy and an imaging methodology designed to quantify IgG extravasation have been used. The choroid plexus was analyzed as a control
for positive extravasation and, as expected, high IgG immunoreactivity
was observed at this region in both SAMP8 and SAMR1 mice strains.
We have found significantly higher levels of IgG extravasation in the hippocampus of aged SAMP8 mice compared to SAMR1 mice, indicating an
increased permeability of BBB in senescence-accelerated mice.

Farmacologa del refuerzo inducido por
feromonas sexuales de macho en hembras
de ratn
Carmen Agustn Pavn; Joana Martnez Rics,
Fernando Martnez-Garca, Enrique Lanuza
Universitat de Valncia, Facultat de Biologia, Dept. Biologia Cellular
y Dept. de Biologia Funcional
Las feromonas sexuales masculinas atraen a las hembras de ratn.
Estos estmulos no slo son explorados intensa y preferentemente por
las hembras sino que inducen preferencia condicionada de lugar (PCL)
(Martnez-Rics et al, 2007). Estos resultados nos han permitido utilizar
las feromonas sexuales para el estudio del refuerzo. En concreto, estamos analizando el efecto de inyecciones sistmicas de diversos frmacos
sobre los comportamientos citados, para intentar desentraar la base
neuroqumica del refuerzo inducido por feromonas. Recientemente hemos demostrado que los agonistas dopaminrgicos, principalmente a
travs del receptor D1, inhiben la atraccin innata por feromonas de
macho, mientras que los antagonistas no afectan al refuerzo de feromonas
(Agustn-Pavn et al, 2007). Los efectos de frmacos opioidrgicos son
anlogos: un antagonista genrico (naloxona) no afect ni a la atraccin
innata ni a la adquisicin de PLC, mientras que un agonista de los receptores (fentanilo) elimin la preferencia innata por feromonas de macho.
Los mismos frmacos produjeron un efecto opuesto sobre el consumo
preferente de una solucin azucarada. Esto sugiere que estmulos qumicos (sacarosa y feromonas sexuales) detectados por distintos sistemas
sensoriales, utilizan diferentes mecanismos neurobiolgicos para ejercer
su efecto reforzante. En el contexto de los datos anatmicos y neuroqumicos disponibles, nuestros resultados sugieren que el refuerzo inducido
por feromonas es independiente de la va tegmento-estriatal dopaminrgica y que en el mismo juega un papel clave la amgdala y sus proyecciones
al estriado ventral. Financiado por MEC, FEDER (BFU2004-04272/BFI) y
Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha (PAC-05-007-2).

UTILIZACIN DE SCAFFOLDS POLIMRICOS BASADOS EN ETIL ACRILATO PARA LA SUPERVIVENCIA Y
DIFERENCIACIN DE PROGENITORES NEURALES
IN VIVO
Carmen Bellver Estells; Cristina Martnez-Ramos(1,2), Ulises
Gomez-Pinedo(2,4), Jos Manuel Garca Verdugo(2), Juan Antonio Barcia(,2), Manuel Monlen Pradas(2) y Jos Miguel Soria(1,2)
(1) Fundacin Hospital General Univ. de Valencia, Tres Cruces s/n,
46014 Valencia, Espaa. (2) Centro de Investigacin Prncipe Felipe,
Autopista del Saler 16, 46013 Valencia, Espaa. (3) Centro de Biomateriales, Universidad Politc. Valencia, AP. 22012, Valencia, Espaa
(4) (4)CIATEJ- CONACYT. Av Normalistas 800, CP 44270, Guadalajara Mxico
Biomateriales polimricos basados en polietil acrilato (PEA) han demostrado in vitro su potencial viabilidad como substrato scaffold para
el cultivo de progenitores neurales permitiendo una adecuada adhesin,
proliferacin y diferenciacin hacia clulas neurales (Soria et al, 2006,
2007). Con el fin de evaluar in vivo el potencial de este biomaterial como
scaffold para la supervivencia y diferenciacin de progenitores neurales,
biomateriales basados en PEA y con canales de 90mm fueron implantados
en dos nichos neurognicos de ratas Wistar adultas en concreto: la Zona
Subventriculas (ZSV) y el Giro Dentado del Hipocampo (GD). Tras diversos periodos de tiempo, el tejido cerebral fue tratado mediante tcnicas
de inmunocitoqumica para marcadores especficos de neuronas maduras
(NeuN), neuronas inmaduras (Tuj1, DCX), astrocitos (GFAP), microgla
(CD11) y clulas endoteliales (CD31). Mediante microscopa confocal,
se muestra la inmunoreactividad positiva para los distintos marcadores
utilizados, y la colonizacin del biomaterial por clulas neurales tras el
implante en los nichos neurognicos. Los experimentos realizados muestran despus de un mes, que clulas neurales procedentes del epitelio
proliferativo fueron capaces de sobrevivir colonizar y diferenciar en el interior del scaffold implantado in vivo. Empleando microscopa electrnica,
se mostr una baja actividad fagocitaria as como una escasa actividad de
gliosis. Adems, la presencia de microvasos sanguneos sugiere el comienzo de procesos neoangiognicos.

Estos datos abren una nueva posibilidad para la utilizacin de scaffolds polimricos constituidos por PEA en el Sistema Nervioso Central.

Estudio comparativo de los efectos de la
administracin crnica de donepezilo y
rivastigmina sobre el aprendizaje y la conducta del ratn Ts65Dn, un modelo murino
de sndrome de Down.
Carmen Martnez-Cu; Noem Rueda, Jess Flrez
Departamento de Fisiologa y Farmacologa. Universidad de Cantabria
El ratn Ts65Dn (TS), el modelo animal ms utilizado de sndrome
de Down, es trismico para un segmento del cromosoma 16 homlogo
a la regin crtica de sndrome de Down (SD) del cromosoma 21 humano. Este ratn presenta muchas de las caractersticas fenotpicas de las
personas con SD incluyendo alteraciones conductuales y cognitivas. El
objetivo de este estudio era evaluar la capacidad de dos frmacos que
mejoran el aprendizaje en distintos modelos experimentales, el donepezilo, un inhibidor de la acetilcolinesterasa, y el cardiazol, un antagonista no
competitivo del receptor GABAA, para paliar los dficits cognitivos de
estos ratones. Durante 8 semanas se administraron estos frmacos por
va oral a ratones TS y controles y se realiz una caracterizacin conductual de sus efectos. En primer lugar, se valor la visin, odo, equilibrio,
fuerza y coordinacin motora. Ninguno de los dos tratamientos modific
las habilidades sensorimotoras de los ratones TS o controles. Tambin se
valor la actividad en la jaula habitual y en el campo abierto y la exploracin en la tabla de agujeros. La administracin de estos frmacos no
modific la conducta de los ratones TS o controles en ninguna de estas
pruebas. Por ltimo, se evalu el aprendizaje y memoria de ratones TS y
controles tras ambos tratamientos en el laberinto acutico de Morris. La
administracin de donepezilo no modific las capacidades de aprendizaje
y memoria de los ratones de ambos genotipos. Sin embargo, el tratamiento con cardiazol mejor ligeramente la ejecucin de los ratones TS en el
laberinto acutico.

LA SNTESIS de novo DE XIDO NTRICO DISMINUYE LA DENSIDAD DE BOTONES EXCITADORES
SOBRE MOTONEURONAS ADULTAS
Carmen Rodrguez Sunico; David Gonzlez-Forero, Federico Portillo, Sergey Kasparov, Bernardo Moreno-Lpez
Ciertas enfermedades neurodegenerativas progresan con una reduccin de la densidad sinptica y una expresin de novo de la xido
ntrico (NO) sintasa neuronal (nNOS). En el presente trabajo hemos
investigado una posible relacin causal entre ambos acontecimientos.
La incubacin continuada (4-6h) de rodajas de cerebro de rata (P6-P8)
con un donante de larga vida media de NO (DETA/NO, 1mM), atenu
la amplitud (-65,74%; mediaES; n=19) de la corriente post-sinptica
excitadora evocada, en motoneuronas del ncleo hipogloso (MHs), por
estimulacin elctrica de la formacin reticular ventrolateral. Este efecto
se previno por la co-adicin al medio del inhibidor de la guanilato ciclasa soluble ODQ (10mM; -10,210,4%; n=14). La alteracin funcional fue
acompaada de una prdida de estructuras inmunoreactivas a sinaptofisina en contacto con las MHs (-48,9 1,7%; n=100), que no apareci
co-incubando el tejido con DETA/NO y ODQ el inhibidor selectivo
de la protena kinasa G (PKG) Rp-8-pCPT-cGMPS (10mM). Adems, MHs
de ratas adultas, que normalmente no expresan nNOS, se transfectaron
retrgradamente mediante la inyeccin en la lengua de adenovirus (Ad;
~5x1011 ufp/ml, 300 l/rat). Una semana tras la inyeccin la densidad
de estructuras sinaptofisina-positivas disminuy (-24,52,7%; n=108) en
las MHs transfectadas con Ad-eGFP+Ad-nNOS respecto a sus controles
(Ad-eGFP+Ad-mRFP). Asimismo, la densidad de botones inmunorreactivos a VGLUT2 (excitadores) disminuy en un 34,57,9% (n=44) mientras
47
que la densidad de terminales positivos para VGAT (inhibitorios) no result afectada. Estos resultados sugieren que la expresin de novo de nNOS
es suficiente para inducir la prdida de sinapsis glutamatrgicas sobre las
MHs va GMPc/PKG.

LA ACTIVACION DE LA GUANILATO CICLASA POR
XIDO NITRICO EN LINFOCITOS COMO MARCADOR PERIFRICO DE LA ENCEFALOPATA HEPTICA MNIMA (EHM) EN PACIENTES CIRRTICOS
son dependientes de la activacin de receptores NMDA, del incremento

de la [Ca2+] intracelular y de la activacin de CaMKII postsinptica.
Estos resultados sugieren que una seal retrograda que conecta la
espina postsinptica con el terminal presinptico es responsable de las
modificaciones en las propiedades de liberacin que ocurren durante la
conversin.
Financiado por MEC (PM980113) y MCYT (BFI2002-01107).

Los canales GIRK estn implicados en la inhibicin de la liberacin de glutamato por
receptores GABAB.
Carmina Montoliu Felix; Amparo Urios, Blanca Piedrafita, Juan A.

Del Olmo, Miguel A. Serra, Jos M. Rodrigo y Vicente Felipo
Hospital Clnico Universitario de Valencia. Servicio de Hepatologa.
Centro de Investigacin Prncipe Felipe de Valencia. Laboratorio de
Neurobiologa
Carolina Ladera Rivero; Mara del Carmen Godino*, Rafael Lujn**, Jos Snchez-Prieto*
*Departamento de Bioqumica, Facultad de Veterinaria. Universidad
Complutense. Madrid. **Centro de Investigaciones Biomdicas, Facultad de Medicina, Universidad de Castilla-La Mancha. Albacete
La escala psicomtrica de encefalopata heptica (PHES) ha sido

validada para el diagnstico de la encefalopata heptica mnima (EHM),
estando disponibles las tablas de normalidad para la poblacin espaola
(http://www. redeh. org). Por otro lado, la determinacin de la frecuencia
crtica de parpadeo (FCP) podra ser til en el diagnstico de la EHM
(1,2). Las alteraciones en el metabolismo del GMPc podran estar implicadas en las alteraciones neurofisiolgicas de los pacientes cirrticos (3).
Objetivo: Evaluar si hay correlacin entre las alteraciones en diferentes parmetros implicados en la modulacin de los niveles de GMPc y la
presencia de EHM en pacientes con enfermedad heptica.
Resultados: Pacientes con EHM presentaban mayores niveles de activacin de guanilato ciclasa (GC) por NO en linfocitos y de GMPc en
plasma y FCP ms baja que pacientes sin EHM. Los niveles de amonio,
metabolitos del xido ntrico y pptido atrial natriurtico (ANP) estaban
aumentados en pacientes con respecto a controles, sin diferencias entre
pacientes con y sin EHM.
Conclusiones: La alteracin en la activacin de la GC por NO en
linfocitos se correlaciona con los resultados de PHES, FCP y niveles de
amonio. La alteracin en la modulacin de la GC por NO en cerebro
podra jugar un papel en la patogenia de la EHM. La activacin de la GC
por NO en linfocitos podra ser til como marcador perifrico de la
presencia de la EHM.
1. Journal of Molecular Medicine 85:233-241 (2007). 2. Hepatology.
Red Nacional de Investigacin en Encefalopata Heptica 45:879-885
(2007). 3. Liver International. 25: 787-795 (2005).
Los receptores GABAB inhiben canales de Ca2+ presinpticos y activan canales de K+ postsinpticos del tipo GIRK. Los canales GIRK tambin son presinpticos, por lo que la modulacin de estos canales podra
tambin mediar las acciones presinpticas de los receptores GABAB. En
terminales sinpticos de corteza cerebral de rata liberacin de glutamato
inducida por la despolarizacin con 30 mM KCl, se redujo en un 22. 82.
8% tras la activacin de los receptores GABAB con baclofen. Esta inhibicin fue insensible al bloqueante de canales de GIRK (tertiapina-Q), pero
se ocluy con el bloqueante de canales de Ca2+ w-conotoxina-GVIA, lo
que sugiere un mecanismo compatible con la inhibicin de los canales de
Ca2+ del tipo N. En cambio, la liberacin de glutamato inducida por 10
mM KCl, fue ms sensible a la inhibicin (35. 03. 0%) por baclofen. Adems, esta inhibicin se anul completamente con tertiapina-Q, y se ocluy
con el bloqueante de los canales de Ca2+ del tipo P/Q w-agatoxina-IVA,
lo que sugiere una reduccin en la actividad de los canales de Ca2+ del
tipo P/Q como consecuencia de la activacin de canales GIRK. Mediante
experimentos de inmunocitoqumica y de imagen de Ca2+ de terminales
individuales queremos averiguar si estos dos mecanismos de sealizacin
se expresan en subpoblaciones distintas de botones sinpticos.
Financiado por Ministerio de Educacin y Ciencia BFU2004-01375/
BFI

La conversin postsinptica de sinapsis silentes en funcionales modifica las propiedades de liberacin de neurotransmisor.
Carolina Cabezas Fernndez; David Fernndez de Sevilla, Washington Buo
Instituto Cajal, CSIC
Uno de los mecanismos responsables de la potenciacin a largo plazo (LTP) es la conversin de sinapsis silentes en funcionales. Las sinapsis
silentes y funcionales de las Colaterales de Schaffer (CS), adems de las
diferencias postsinpticas, presentan diferentes propiedades de liberacin,
ya que la probabilidad de liberacin y la potencia sinptica son mayores
en las sinapsis funcionales que en las silentes. Adems las sinapsis funcionales presentan mecanismos de plasticidad a corto plazo, ausentes en las
silentes. Una consecuencia de estos resultados es que la conversin de
las sinapsis silentes en funcionales debe ir acompaada de modificaciones
a nivel presinptico.
Utilizando estimulacin mnima en rodajas de hipocampo de rata,
investigamos las modificaciones presinpticas asociadas a la insercin postsinptica de receptores AMPA en las sinpsis silentes durante la LTP. Con la
LTP: aparecen corrientes mediadas por receptores AMPA; aumentan significativamente los parmetros de liberacin de neurotransmisor; las sinapsis funcionales recientemente creadas adquieren plasticidad a corto plazo;
y estas nuevas sinapsis funcionales adquieren sensibilidad a CCh. Los
mecanismos responsables de la induccin del fenmeno de conversin
48

Alteraciones de marcadores sinpticos en
la corteza cingulada anterior en muestras postmortem de pacientes con trastornos psiquitricos.
Catalina Sueiro Lpez; Dopeso-Reyes, I. G. ; Talln, R. ; Caruncho,
H. J.
Grupo de Investigacin Biofarma. rea de Biologa Celular. Universidad de Santiago de Compostela.
La corteza cingulada anterior (ACC) es una regin que se ha demostrado sufre importantes alteraciones en trastornos psiquitricos. Adems
de alteraciones celulares, existen evidencias de cambios en el circuito
sinptico de esta rea sobre todo en esquizofrenia.
Con el fin de cuantificar la expresin de terminales GABArgicos
y glutamatrgicos en las capas I y II del ACC hemos empleado tcnicas
inmunohistoqumicas en muestras post-mortem de esquizofrenia (SZ),
trastorno bipolar (BP) y depresin mayor (MDD) procedentes de la
Stanley Foundation Neuropathology Consortium. En ellas se observa
una importante disminucin en el nmero de terminales inmunorreactivos a sinaptofisina en las capas I y II en SZ (sobre un 25-30%), pero no
observamos diferencias significativas en BP y MDD. La densidad de terminales glutamatrgicos disminuye en ambas capas en todos los trastornos
psiquitricos estudiados (sobre un 50%), mientras que no parecen existir
diferencias significativas en la densidad de terminales GABArgicos en
ninguno de los casos.
Nuestros datos indican que, en una regin cortical directamente implicada en la cognicin como el ACC, el dficit inicialmente observado en
el nmero de terminales sinpticos en esquizofrenia y otros trastornos
se debe principalmente a la disminucin de terminales glutamatrgicos. Y

que ello podra contribuir a las alteraciones funcionales caractersticas de
este tipo de trastornos.
Ministerio de Educacin y Ciencia (SAF 2004-00951) y Xunta de Galicia (PGIDIT05PXIC20303PN).

Comunicacin neurona-astrocito mediada por endocannabinoides
Alfonso Araque Almendros; Marta Navarrete Llins
Instituto Cajal (CSIC)
La seal de Ca2 + astrocitaria es fundamental en el intercambio de
informacin entre astrocitos y neuronas. Los receptores de cannabinoides
son claves en la fisiologa cerebral, pero su expresin y funcin en astrocitos in situ es desconocida. Hemos investigado la expresin de receptores
de cannnabinoides por astrocitos y su participacin en la comunicacin
astrocito-neurona. Utilizando tcnicas electrofisiolgicas y de imagen de
Ca2+ en rodajas de hipocampo de ratn, hemos encontrado que:
1. Los astrocitos in situ expresan receptores funcionales de cannabinoides de tipo CB1.
2. Los receptores CB1 en astrocitos son activados por endocannabinoides liberados por neuronas piramidales, generando aumentos de
Ca2+ intracelular mediados por activacin de PLC y liberacin de Ca2+
de los reservorios intracelulares.
3. El aumento de Ca2+ astrocitario inducido por endocannabinoides
estimula la liberacin de glutamato por astrocitos y genera corrientes
lentas de entrada dependientes de receptores de NMDA en neuronas
piramidales adyacentes.
4. Nuestros resultados muestran una nueva forma de comunicacin
entre neuronas y astrocitos mediada por endocannabinoides.

Neuroproteccin por noradrenalina a
travs de la induccin de MCP-1 en astrocitos
Jose Luis Muoz Madrigal; Alessandra Spagnolo. Beatriz Gmez
Prez-Nievas. Douglas Feinstein. Juan Carlos Leza
University of Illinois at Chicago; Universidad Complutense de Madrid. Facultad de Medicina.
La prdida de neuronas noradrenrgicas caracterstica de ciertas
enfermedades neurodegenerativas puede contribuir a cambios de las
propiedades inmunolgicas del cerebro, facilitando el establecimiento de
procesos inflamatorios crnicos. En nuestros estudios previos observamos como la noradrenalina puede proteger a las neuronas frente al dao
causado por la exposicin a beta amiloide in vitro e in vivo. Con el fin de
analizar los mecanismos implicados en dicha proteccin, investigamos los
efectos de noradrenalina en cultivos primarios de astrocitos. El tratamiento con noradrenalina caus una induccin de MCP-1 (CCL2) detectada
por PCR, actividad del promotor y ELISA. El MCP-1 producido por astrocitos protegi a neuronas corticales frente al dao causado por beta
amiloide, glutamato o NMDA. El tratamiento de neuronas con MCP-1
recombinante inhibi la expresin la subunidad 1 del receptor NMDA
(NMDAR1). Esto datos sugieren que algunos de los efectos neuroprotectores de noradrenalina pueden deberse a la induccin de MCP-1 en glia y
la consiguiente inhibicin de procesos excitotxicos.

COMUNICACIN ENTRE ASTROCITOS Y NEURONAS EN TEJIDO CEREBRAL HUMANO
ha sido documentada en cerebro de rata y ratn,. Hemos investigado si

esta comunicacin ocurre en cerebro humano, utilizando tcnicas electrofisiolgicas y de imagen de calcio en rodajas de tejido cerebral (hipocampo y corteza mesial) de pacientes epilpticos.
Hemos encontrado:
1) Los astrocitos presentan una excitabilidad intrnseca basada en
oscilaciones espontneas de calcio que no dependen de la actividad elctrica neuronal, ya que su frecuencia (1. 50. 1 min-1) es insensible a tetrodotoxina.
2) Los astrocitos responden con aumentos de calcio a la aplicacin
localizada de glutamato y ATP, generando ondas de calcio astrocitarias
que se propagan radialmente (distancias: glutamato, 143 42 m; ATP, >
450 m) a 33 4 y 29 2 m/s, respectivamente.
3) Estas ondas de calcio pueden generar aumentos de calcio en neuronas.
4) Las neuronas presentan corrientes lentas de entrada (SICs), de
baja amplitud (55. 612. 8 pA) y lento curso temporal (activacin: 6. 91.
7 ms y desactivacin: 69. 06. 2 ms).
5) Las ondas de calcio generadas por ATP provocan la sincronizacin
y el aumento de frecuencia de SICs.
6) Las SICs, tanto espontneas como generadas por ATP son bloqueadas por AP5, antagonista de receptores NMDA, sin afectar a los aumentos de calcio astrocitarios.
Por tanto, existe comunicacin bidireccional entre astrocitos y neuronas en tejido cerebral humano.
Financiado por FIS (PI060349) a RGS, MEC (BFU2004-0448) y CAM
(200620M083) a AA.

Regulacion de canales de Calcio dependientes de voltaje por PKC-epsilon en astrocitos
Burgos, M; Pastor, MD, Gonzlez, JC, Hernndez-Guijo, JM, Tranque,
P and Calvo S.
reas de Fisiologa1 y Farmacologa2. Facultad de Medicina y Centro
Regional de Investigaciones Biomdicas. Universidad de Castilla- La
Mancha, Albacete. 3Departamento de Farmacologa y Teraputica,
Facultad de Medicina, Universidad Autnoma de Madrid. Madrid
Las variaciones en la concentracin de calcio intracelular constituyen una seal reguladora esencial de las funciones astrocitarias. Diversas
patologas del sistema nervioso central se acompaan de una reaccin
glial (astrogliosis) que se caracteriza por una hipertrofia y elongacin de
ramificaciones celulares. Estos astrocitos reactivos presentan asimismo
un mayor nmero de canales de calcio dependientes de voltaje (CCVD),
y se ha comprobado en diversos modelos de astrogliosis que su inhibicin mediante bloqueantes especficos es capaz de frenar la reaccin
glial. Recientemente hemos descrito que la expresin de la proteina quinasa C pslon (PKCe) media una transformacin morfolgica similar a
la astrogliosis inducida por agentes proinflamatorios. Experimentos de
RT-PCR cuantitativa indicaron que la sobreexpresin de PKCe aumenta
notablemente los niveles de mRNA de dos subunidades a1 de canales de
calcio, CaV1. 2 y CaV2. 1. Esta sobreexpresin del mensajero fue seguida
de incremento en la cantidad total de protena como nos indicaron los
anlisis por Western blot e Inmunofluorescencia. Adems, estos canales
son funcionales, ya que experimentos de patch-clamp nos demuestran
que la corriente de calcio aumenta como consecuencia de la activacin
de PKCe. En conjunto, proponemos que la activacin astrocitaria inducida
por PKCe implica la sobreexpresin de las subunidades de calcio CaV1. 2
y CaV2. 1 conjuntamente con el desarrollo de una morfologa estrellada.
Estas seales pueden tener un papel central en la inflamacin asociada a
patologas en el sistema nervioso central.
Marta Navarrete Llins; G. Perea (1), J. Pastor (2), R. Garca de Sola

(2) y A. Araque (1)
(1)Instituto Cajal, CSIC, Madrid. . (2)Unidad de Epilepsia. Hospital
de La Princesa, Madrid.
Recientes evidencias demuestran la existencia de comunicacin bidireccional entre astrocitos y neuronas. Los astrocitos responden con
variaciones de calcio a la actividad sinptica y liberan distintos gliotransmisores que modulan la actividad neuronal y sinptica. Esta comunicacin
49
LA SOBREXPRESIN DE RHOE INDUCE RESPUESTA INFLAMATORIA EN ASTROCITOS.
Astrocitos reactivos en cultivo
Rosa M. Guasch, Ana M. Blanco, Amparo Prez-Arag, Rebeca Miambres, Raquel Talens-Visconti, Blanca Peris y Consuelo Guerri.
Laboratorio de Patologa Celular. Centro de Investigacin Prncipe
Felipe. c/EP Autopista del Saler 16-3. 46013-Valencia, Spain
La activacin de clulas gliales y la inflamacin estn implicadas en la
patognesis de algunas enfermedades neurodegenerativas. Los receptores TLR/IL-1RI juegan un papel crucial en el sistema inmune innato como
una primera lnea de defensa contra los patgenos. La activacin de estos
receptores causa una estimulacin de IRAK y de la va de MAPKs, lo que
conduce a la activacin de los factores de transcripcin NF-kB y AP-1, y
a la induccin de citoquinas y mediadores inflamatorios que causan dao
neural.
Puesto que parece que las protenas Rho participan en la respuesta
inflamatoria en astrocitos, en los que se observa una prdida de fibras de
estrs, y la protena RhoE/Rnd3 desorganiza el citoesqueleto de actina,
el objetivo de este trabajo ha sido estudiar el papel de RhoE en este
proceso.
Nuestros resultados demuestran que astrocitos primarios de rata,
transfectados con un plsmido que expresa la protena RhoE, presentan
un aumento en la expresin de ROCK-I, junto a una disminucin en los
niveles de MLCPp, RhoA y Rac. Adems, la sobrexpresin de RhoE, no
slo desorganiza el citoesqueleto de actina en astrocitos, sino que estimula la va de sealizacin IRAK/ERK/NF-kB asociada con la respuesta
inflamatoria en stas clulas. Estos resultados ayudan a esclarecer el mecanismo molecular implicado en la respuesta inflamatoria de astrocitos.

La neuronas y los astrocitos cultivados
de ratones SAMP8 presentan caractersticas neurodegenerativas y de senescencia.
Silvia Garca Matas; Javier Gutirrez-Cuesta2, Raquel Rubio-Acero1,
Cristina Dez-Vives1, Ana Coto-Montes3, Antoni Camins2, Merc Pallas2,
Coral Sanfeliu1, Rosa Cristfol1
1. Departamento de Isquemia Cerebral y Neurodegeneracin,
Instituto de Investigaciones Biomdicas de Barcelona (IIBB), CSICIDIBAPS, Barcelona. 2. Unidad de Farmacologa y Farmacognosia,
Facultad de Farmacia e Instituto de Biomedicina, Universidad de
Barcelona, Barcelona. 3. Departmento de Morfologa y Biologa
Celular, Facultad de Medicina, Universidad de Oviedo
Los ratones de las cepas SAMP8 y SAMR1 han estado seleccionados
fenotpicamente por sus caractersticas de envejecimiento precoz y de resistencia al envejecimiento precoz, respectivamente. Los ratones SAMP8
tienen un periodo de vida ms corto que los SAMR1, y presentan deficiencias de memoria y aprendizaje. Hemos caracterizado las neuronas y
los astrocitos en cultivos obtenidos de corteza cerebral de ambas cepas.
Las neuronas de los ratones SAMP8 son ms sensibles a un dao oxidativo agudo que los SAMR1 y presentan una disminucin del potencial de
membrana mitocondrial, siendo los complejos mitocondriales III, IV y V los
ms afectados. Los astrocitos SAMP8 sufren estrs oxidativo indicado por
la mayor generacin de radical superxido, lipoperoxidacin y presencia
de carbonilos que los SAMR1, aunque las alteraciones mitocondriales son
menores que en las neuronas. Adems, presentan una capacidad menor
de captar glutamato extracelular que los astrocitos SAMR1. En cocultivos
de neuronas y astrocitos, los astrocitos SAMP8 han demostrado menor
soporte a la longevidad de las neuronas que los SAMR1. Los astrocitos
SAMP8 tambin presentan un incremento de la protena tau fosforilada
y de GSK3 activada y una disminucin de la protena relacionada con
la longevidad la sirtuina Sirt1. Estos cultivos con caractersticas de neurodegeneracin y senescencia son un sistema experimental idneo para
analizar las causas del envejecimiento prematuro en los ratones SAMP8 y
para desarrollar nuevas estrategias teraputicas para retrasar los procesos neurodegenerativos asociados al envejecimiento.
Subvencionado por FIS2003-0467 y SAF2006-13092-C02-02.
50
Wolfgang Pita Thomas; Manuel Nieto Diaz, Diego Gmez Nicola,

Manuel Nieto Sampedro
Instituto Cajal. Hospital Nacional de Parapljicos de Toledo
Despus de una lesin en el SNC, los diferentes tipos celulares implicados sufren diversos cambios. Los astrocitos, en particular, aumentan en
nmero y pasan a un estado reactivo, caracterizado por cambios morfolgicos y funcionales reconocibles por la expresin de ciertos marcadores.
Las consecuencias de estos cambios pueden ser beneficiosas, como la
secrecin de factores trficos que aumenta la supervivencia neuronal, o
deletreos como la produccin de proteoglicanos inhibidores de la regeneracin axonal (CSPG). El objetivo de este trabajo es el desarrollo de un
modelo in vitro de astrocito reactivo y estudiar las seales que producen
dicha reactividad. Como criterios de reactividad escogimos, el cambio
morfolgico, el aumento de proliferacin, el aumento de expresin de
GFAP y de PMP/IMP (CSPG), y por ltimo la permisividad al crecimiento
de neuritas de neuronas corticales. Utilizando estos criterios de reactividad hemos examinado el efecto que, sobre diversos tipos gliales, tienen
molculas asociadas a reactividad o capaces de provocarla, como son extractos de tejido de cerebro normal y lesionado, el EGF, la neuraminidasa,
lipopolisacrido bacteriano (LPS) e interleuquina 15.
Los autores agradecen el apoyo econmico de la CICYT (SAF200611224) y de las consejeras de Educacin y de Sanidad de Castilla-La Mancha. WPT disfruta de una beca predoctoral del plan nacional de FPI.

Acumulacin de iones zinc en un tipo de astrocitos presentes en el rea CA1 del hipocampo del conejo
Xavier Ponsoda, Gregori Alonso-Llos, Irene Nebot, Asuncin Molow
ny y Carlos Lopez Garcia
Neurobiologia Cellular, Dpt. Biologia Cellular, Facultat de C. Biolgiques, Universitat de Valncia
El rea CA1 del hipocampo, ultima estacin en la va trisinptica hipocmpica, muestra especiales caractersticas anatmicas y funcionales,
(algunas de difcil explicacin, ej., muerte retardada tras isquemia). En la
CA1 hay un tipo especial de astrocitos capaces de acumular iones zinc.
Aparecen tras el desarrollo postnatal y carga de zinc de las sinapsis zincrgicas del estrato radiado de CA1; sin embargo otras reas zinc positivas
no poseen este tipo de astrocitos.
Tras la aplicacin de tcnicas histoqumicas para deteccin del zinc
(autometalografa), el zinc acumulado aparece como grandes depsitos
dispersos por el citoplasma de estas clulas, frecuentemente ubicadas en
las cercanas de vasos sanguneos; el doble marcaje con GFAP confirma la
naturaleza astroglial de las mismas. En el microscopio electrnico, dichos
depsitos aparecen como agupaciones arracimadas de finas partculas,
frecuentemente encerradas en cisternas membranosas o bien adheridas
a membranas y complejos membranosos.
Utilizando rebanadas de tejido levemente fijado es posible la inyeccin intracelular de lucifer yellow y biocitina en astrocitos del estrato
radiado de CA1. Tras el revelado histoqumico de la biocitina y el procesado para microscopa electrnica es posible observar la ultraestructura
diferencial de sus prolongaciones citoplsmicas.
Los cultivos primarios de clulas hipocmpicas disociadas muestran
una gran diversidad con numerosos astrocitos que progresivamente se
hacen mas abundantes en sucesivos pases. En estos cultivos celulares de
astrocitos es posible simular el proceso de acumulacin y carga de zinc
tras la adicin de zinc exgeno. La trayectoria de carga y acumulacin
del mismo es posible seguirla con tcnicas citoqumicas para microscopa
electrnica.

Organizacin funcional del componente
ventral tuberomamilar en Nutricin y regulacin hdrica
Javier Maha Rodrguez, Bernal Antonio; Puerto, Amadeo
Universidad de Granada Psicobiologa Facultad de Psicologa
Lesiones individuales de los ncleos tuberomamilares ventrales caudal (E1) o rostral (E2) provocan hiperfagia y polidipsia en las ratas Wistar.
El objetivo de este estudio ha consistido en comparar el carcter funcional aditivo (con estructuras independientes) o nico/no sumativo (con estructuras integradas) de las lesiones individuales o combinadas de los ncleos E1 y E2 tanto en la ingesta de comida como en la regulacin hdrica.
Los resultados obtenidos demuestran que las lesiones E1+E2 generan una
respuesta hiperfgica inmediata, potente y permanente significativamente
superior a la observada en los grupos con lesiones individuales (E1 o E2)
durante la totalidad de la fase experimental (22 das). Asimismo, al final
de este periodo (das 17/22), las lesiones combinadas inducen una mayor
ganancia en el peso corporal que los grupos con lesiones individuales.
Igualmente, y como ya se haba descrito en estudios previos, las lesiones
de los subncleos tuberomamilares ventrales provocaron un incremento
en la ingesta de agua, pero en este caso, el comportamiento polidpsico
de los grupos con lesiones individuales no difiere del observado en el
grupo tuberomamilar E1+E2. Estos resultados han sido analizados en el
contexto de los sistemas hipotalmicos implicados en la regulacin hdrica y nutritiva
18:30 a 19:30 (Auditorio I)

Conferencia Plenaria Dr. T. Freund Endocannabinoid signaling in the cerebral
cortex
19:30 a 20:30 (Saln Multiusos II)
FEST-INA. Acto social organizador por Instituto de Neurociencias de Alicante (CSICUMH)
51
Viernes dia 7
VIERNES 7 - SIMPOSIA
9:00 a 11:00 h Simposio 5: Oscilaciones y funcin cerebral: el bueno, el malo y el patolgico; L.

Menndez de la Prida. (Auditorio II)
MECANISMOS DE CONTROL DE LA ACTIVIDAD CORTICAL Y EPILEPSIA
Snchez-Vives, M.V.
Instituto de Neurociencias de Alicante, Universidad Miguel Hernndez-CSIC, San Juan de Alicante,
Spain.
La red neuronal de la corteza cerebral genera actividad rtmica lenta (<1Hz) como resultado
de su conectividad recurrente (Steriade et al, J Neurosci 13:3252,1993). En la corteza cerebral
in situ la actividad generada por la corteza se sincroniza y propaga a travs de largas distancias
como resultado de la conectividad interrea y horizontal as como de la integridad del circuito
tlamocortical. Sin embargo, cuando las diferentes reas de la corteza se mantienen in vitro, las
propiedades de la actividad emergente puede variar entre reas. En este caso, el patrn de esta
actividad rtmica y sus propiedades (e.g. duracin de las oscilaciones, frecuencia o velocidad de
propagacin) reflejan la estructura funcional de la red subyacente en cada rea cortical.
En esta charla presentar diversos mecanismos celulares y de red que participan en la
definicin de la actividad emergente cortical (e.g. inhibicin, corrientes de hiperpolarizacin
lentas, longitud de la conectividad horizontal). Estos estudios sugieren que algunas propiedades
de la actividad oscilatoria de distintas reas corticales puede actuar como un marcador de la
tendencia epileptognica de las mismas.
Subvencionado por MEC BFU2005-00041/BFI.
SYNCHRONOUS OSCILLATIONS INDUCED BY HIPPOCAMPAL DISINHIBITION

Miles, R., Cohen, I., 1, Huberfeld, G., 1, Menendez de la prida, L.,1,2, Wittner, L.1,3
1: Inserm U739 Univ Paris VI, France, 2: Hospital Ramon y Cajal Madrid,
Budapest, Hungary.
3: Institute for Psychology,
When GABAA receptor mediated synaptic inhibition is suppressed, synchronous events of

duration several 10s of ms are initiated in the CA3 region of hippocampal slices at intervals
of several s. These events are thought to depend on recurrent synaptic connexions between
CA3 pyramidal cells together with the intrinsic burst firing properties of these cells. The simple nature of the elements and mechanisms involved in generation of this rhythmic population
activity has let us study (1) how rhythmic population events emerge, (2) mechanisms to initiate
a burst at a precise moment, and (3) factors that result in a pacemaker region (CA3a) within
a recurrently connected CA3 network. GABAB mediated synaptic events are involved in both
the emergence and the precise timing of burst initiation. Fully synchronous population bursts
emerge from asynchronous population firing via an increasingly coherent pattern of partially
synchronous firing imposed by GABAB dependent synaptic inhibition. GABAB inhibitory signals
also compete with excitatory synaptic signals to define a threshold population firing frequency
which governs the timing of population bursts. Finally, bursts are invariably initiated in the
CA3a region by a build-up of population firing. The pacemaker role of this region results from
an enhanced cellular excitability and a greater recurrent connectivity than the CA3b and c
follower regions.
55
SIMPOSIA - VIERNES 7
OSCILACIONES DE ALTA FRECUENCIA EN EL NCLEO SUBTALMICO EN LA ENFERMEDAD DE PARKINSON.

Foffani, G.
Fundacin del Hospital Nacional de Parapljicos,Toledo.
La estimulacin cerebral profunda es una terapia eficaz para el tratamiento sintomtico
de trastornos del movimiento como la enfermedad de Parkinson, pero las bases neurofisiolgicas de su eficacia clnica no estn claras. Los electrodos para la estimulacin cerebral
profunda tambin representan una oportunidad nica para registrar potenciales de campo
local (o sea, actividad EEG de profundidad) desde los ganglios basales humanos. Estudios
sobre estos potenciales de campo local han desvelado la presencia de ritmos mltiples
en los ganglios basales humanos y en particular en el ncleo subtalmico modulados
separadamente por la dopamina y por el movimiento. Estos ritmos, y en particular las
oscilaciones de alta frecuencia, proporcionan informacin valiosa para clarificar el rol del
ncleo subtalmico en la fisiopatologa de la enfermedad de Parkinson y para dilucidar los
mecanismos de accin de la estimulacin cerebral profunda.
OSCILACIONES RPIDAS Y ULTRARRPIDAS (>400 HZ) EN EL

HIPOCAMPO NORMAL Y EPILPTICO.
Menendez de la Prida, L.
Hospital Ramn y Cajal, Madrid
Los ripples son oscilaciones de campo (100-30 Hz) asociadas con las ondas agudas
registradas en el hipocampo normal durante inmovilidad conductual y sueo lento. En ratas
y pacientes epilpticos, se ha descrito recientemente la existencia de una oscilacin ms
rpida (200-600 Hz) llamada fast ripple. Sin embargo, se desconocen los mecanismos de
estas oscilaciones rpidas y ultrarrpidas. Datos recientes de nuestro laboratorio sugieren
que los ritmos ultrarrpidos emergen en la regin CA3 del hipocampo epilptico a partir
de una desorganizacin del patrn del ritmo rpido ocasionado por un disparo neuronal
impreciso. Las clulas piramidales de CA3 disparan rfagas irregulares debido a las fluctuaciones del potencial de membrana causas por una intensa actividad sinptica en la regin
CA3 esclertica. Una menor interaccin efptica debido a la muerte neuronal, unida a la
reduccin de la precisin de disparo, actan para sincronizar dbilmente el disparo neuronal y las oscilaciones de campo. Como consecuencia, la sincronizacin espacial disminuye
resultando en la desorganizacin de los ripples que degeneran en fast ripples. Mejorando
farmacolgicamente la precisin de disparo en el hipocampo epilptico, se consigue reducir
las oscilaciones ultrarrpidas y restaurar las oscilaciones rpidas. Por lo tanto, los ritmos
ultrarrpidos del hipocampo epilptico reflejan una desincronizacin patolgica del patrn
normal del ritmo rpido.
56
9:00 a 11:00 Simposio 6: Las neuronas hipotalmicas KiSS-1 y la reproduccin; M. Tena-Sempere (Auditorio III B)
THE KISS-1/GPR54 SYSTEM: CONTRIBUTION TO HUMAN REPRODUCTIVE PHYSIOLOGY AND PATHOLOGY
de Roux, N.
Avenir Team Genetics and physiology of the pubertal onset. Robert Debr Hospital. Paris. France.
Candidate gene approach is a powerful strategy to understand molecular mechanisms of
genetic diseases. It has been used to initiate genetic studies of isolated gonadotropic deficiency by the characterization of GnRH receptor mutations in familial cases. It quickly became
evident that other major genes had to be described since 50% of isolated hypogonadotropic
hypogonadism familial cases were not linked to GnRH receptor defect. A genomic mapping
from informative familial cases has demonstrated that one of these genes encoded for GPR54,
a G-protein coupled receptor described as the receptor of kisspeptins. Physiological studies
have then shown that physiological roles of GPR54/Kisspeptin are highly conserved between
species. It has emerged from these studies that kisspeptin activation of GPR54 plays a major
role during foetal life, in the pubertal resurgence of the gonadotropic axis activation and it is
one of the most potent neuroendocrine activators of this axis in adulthood. Detailed phenotypic characterization of GPR54 mutated patients has shown that GPR54/Kisspeptin system
must be considered as a quantitative modulator of the gonadotropic axis. The characterization
of Kisspeptin physiological role in reproduction has given new insights in endocrine related
cancers such as breast cancer. It is now evident that kisspeptins and GPR54 are unexpected
new pharmacological targets for novel therapeutic approaches in reproduction
INFLUENCE OF KISSPEPTINS IN THE NEUROENDOCRINE CONTROL

OF THE HYPOTHALAMIC-PITUITARY-GONADAL AXIS.
Dieguez, C.
Dpt of Physiology. Faculty of Medicine. University of Santiago de Compostela. (SPAIN).
The ability of kisspeptins, ligands of the G protein-coupled receptor 54, to potently elicit
LH secretion is now undisputed. This effect have been reported following the administration
of these peptide through different routes and in different species including humans. We have
recently provide an integral analysis of the effects of systemic (iv) injection of kisspeptin-10
upon dynamic LH secretion, over a range of doses, at different functional states of the gonadotropic axis, and after repeated administration of the peptide, in conscious animals. In addition,
we will show the first comparative evaluation of the dynamic LH responses to iv administration of kisspeptin-10 and kisspeptin-52/metastin, which were moderately higher for the latter.
Overall, our results demonstrate that, even at very low doses, peripheral delivery of kisspeptin
is able to evoke unambiguous LH responses, and that replacement with exogenous pulses of
kisspeptin is sufficient to rescue defective LH secretion in undernutrition. In addition, our data
show that short-term, repetitive iv injection of kisspeptin promotes a sustained trend of LH
pulses, without decrement in the amplitude and duration of the hormone bursts, neither inducing down-regulation of hypothalamic GnRH release nor desensitization of GnRH responses at
the pituitary level. These observations are strikingly similar to those very recently reported by
others (Plant et a) after repeated iv administration kisspeptin-10 in juvenile monkeys.Aside from
potential physiologic relevance, these current results may contribute to set the basis for the rational use of kisspeptin analogs in the pharmacological manipulation of the gonadotropic axis
57
KiSS-1 neurons as conduits for puberty onset and metabolic regulation of

fertility; M. Tena-Sempere
KiSS-1 neurons as sensors of environmental cues to

drive seasonal reproduction.
Simonneaux,V.
In seasonal species, photoperiod (i.e. daylength) tightly regulates reproduction to ensure
that birth occurs at the most favorable time of year. In mammals, a distinct photoneuroendocrine circuit controls this process via the pineal hormone melatonin.This hormone is responsible for the seasonal regulation of reproduction, but the anatomical substrate and the cellular
mechanism through which melatonin modulates sexual activity is far from understood. The
Syrian hamster is widely used to explore the photoneuroendocrine system, because it is a
seasonal model in which sexual activity is promoted by long summer days (LD) and inhibited
by short winter days (SD). Recent evidences indicate that the products of the KiSS-1 gene,
kisspeptins, and their specific receptor GPR54, represent potent stimulators of the sexual
axis. We have shown that melatonin impacts on KiSS-1 expression to control reproduction
in the Syrian hamster. In this species, KiSS-1 is expressed in the antero-ventral-periventricular
and arcuate nuclei of the hypothalamus at significantly higher levels in hamsters kept in LD
as compared to SD. In the arcuate nucleus, the downregulation of KiSS-1 expression in SD
appears to be mediated by melatonin and not by secondary changes in gonadal hormones.
Remarkably, a chronic administration of kisspeptin restores testicular activity in SD hamsters,
despite persisting photoinhibitory conditions. Overall, these findings are consistent with a
role of KiSS-1/ GPR54 in the seasonal control of reproduction. We propose that the photoperiod, via melatonin, modulates KiSS-1 neurons to drive the reproductive axis.
9:00 a 11:00 Simposio 7: Dyrk1A un gen dosis-sensibles candidato para el retraso menta; M. Dierssen (Auditorio III A)
PROTECTIVE EFFECT OF CATECHINS ON BRAIN ALTERATIONS
IN MURINE MODELS OVEREXPRESSING DYRK1A
Guedj, F., 1., Chabert, C.,1 Sebrie, C., 2 Arbones, M., 3 Ledru, A., 1 Paly, E., 1 Gillet.,
B., 2 Delabar, J.M. 1.
1. EA 3508, Univ. Paris-Diderot, Paris, France
2. RMN Biologique, ICSN, Gif sur Yvette, France
3. Genetics and Diseases, GRC, Barcelona, Spain
A transgenic mouse containing a 500kb human YAC clone (152F7) (Smith et al. ) was
constructed to model the overexpression of genes from the Down syndrome chromosomal region-1 on HSA21. This model presents two interesting phenotypic modifications: a
learning and motor impairment and a volumic increase of some parts of the brain with a
more pronounced effect on the thalamic-hypothalamic region as evidenced through MRI
experiments. The transgenomic fragment contains five genes among which is dyrk1a, a
serine threonine kinase, ortholog of drosophila minibrain. QPCR experiments have shown
that the transgene is present in one copy and induces a 1.5 increase of the expression level
of dyrk1a in the cerebrum. Crossing of tg152F7 with dyrk1a (+/-) heterozygote produces
four genotypes (wt, tg, (+/-), tg (+/-)), analysis of which shows that the brain phenotypes
are strongly correlated to dyrk1a gene copy number and to dyrk1a expression level. As a
consequence any drug acting upon dyrk1a level or dyrk1a activity should also act upon the
phenotype. This kinase has been shown to be strongly inhibited in vitro by epigallocatechin
gallate (EGCG) a major component of green tea (Bain et al).We have studied the effect of
58
a PGT diet on the brain volumic increase of YAC transgenic animals as compared to wild type:
green tea administered orally during gestation and postnatally can reverse volumic and cognitive phenotypic changes induced by dyrk1a overexpression.
ROLES OF MNB/DYRK1A IN THE REGULATION OF NEURAL PROGENITOR CELL PROLIFERATION AND NEUROGENESIS
Tejedor-Rescalvo, F.J., Hammerle,B., Colonques,J., Ceron,J., Bieri, G.
Instituto de Neurociencias, CSIC-UMH. Alicante, Spain.
Cell proliferation, cell specification, and differentiation must be precisely coupled in space
and time during development to ensure the proper formation of the right number and wide
cell diversity of the brain. Altering or uncoupling these processes even in a single cell population
or brain region will primarily result in unbalancing cell numbers between cell populations and
might subsequently alter connectivity and cause malfunctioning of the brain leading to neuropathologies and mental disorders.
We are studying the involvement of the Down syndrome candidate gene Mnb/Dyrk1A on
these processes. Mnb/Dyrk1A encodes a new family of protein-kinases that are highly conserved
throughout evolution from flies to humans both at the molecular and gene structure level. This
supports the use of diverse experimental models (Drosophila, chick and mouse embryos) to
study the function of Mnb/Dyrk1A.
We have found that in early vertebrate brain development Mnb/Dyrk1A appears to regulate
proliferation as a determinant of the transition from proliferative to neurogenic cell divisions of
neural progenitor cells.This role has been genetically demonstrated in the larval brain proliferation centers of Drosophila, which present high similarities with vertebrate CNS neuroepithelia.
In intermediate developmental stages, Mnb/Dyrk1A is involved in the regulation of neurogenesis
and possibly, early differentiation steps.
We will present insights into the cellular and molecular mechanisms underlying these functions.
GENETIC DISSECTION OF DOWN SYNDROME PHENOTYPES IN THE

MOUSE
Herault,Y.
Institut de Transgenose, IEM UMR6218, CNRS Uni. Orleans, 3B rue de la Frollerie, 45071 Orleans
cedex 2, France.Tel/Fax +33238 25 79 30, herault@cnrs-orleans.fr
Down syndrome is a complex human disease that occurs in 1/750 live births, inducing a
large variety of complex and variable phenotypes including mental retardation, facial dysmorphology, heart defect, limb features and a variety of additional although less frequent alterations.
Thus modelling Down Syndrome (DS) in the mice represents a big challenge with the aim to
pinpoint the genes that are inducing the DS phenotypes and to undertake new therapeutic
approach to improve the condition of human patient. By its essence DS is a contiguous gene
syndrome with genes sensitive to genetic dosage that could alter either the development or
the function of a particular cell type. Somehow the first effect is a direct consequence of the
presence in 3 copies of some genes located on chromosome 21 which should induce to some
extent a secondary series of event, perturbing others disomic genes.
In order to go further in the genetic analysis of the DS, several mouse models were developed in the last years. The detailed analysis of this models stress out how the genetics of DS
is complex, certainly involving major dosage sensitive genes, that should interact or not with
other trisomic genes, depending upon the allelic contribution or the increased occurrence of
small effects. In this talk we will review the current hypothesis on DS genetic, the recent development of new models and the way forward a more complete view of the DS phenotype/genotype relationship using the mouse as a model system.
59
DYRK1A: A DOSAGE SENSITIVE GENE WITH ROLES IN DOWN

SYNDROME AND ALZHEIMERS DISEASE
Martnez-de Lagrn, m., Arqu,G., Dierssen, M.
Genes and Disease Program, Genomic Regulation Center, Barcelona Biomedical Research Park,
08003 Barcelona, Spain
DYRKs (dual-specificity tyrosine-regulated kinases) are an emerging family of evolutionarily
conserved dual-specificity kinases that play key roles in cell proliferation, survival, and development.The research in the last years suggests a relevant conserved function during neuronal development, related to proliferation and/or differentiation for DYRK1A. It is expressed in neural
progenitor cells and has been proposed to participate in the signaling mechanisms that regulate dendrite differentiation. In Drosophila, disruption of the homolog minibrain gene results
in flies with reduced neuroblast proliferation, decreased numbers of central brain neurons and
learning/memory deficits. Knockout DYRK1A mice are embryonic lethal, and heterozygotes
show decreased viability and region-specific reductions in brain size. In humans, DYRK1A has
been proposed to be involved in the neurodevelopmental alterations associated with Down
syndrome. However, it also may participate in Alzheimers disease-related pathology in Down
syndrome. Dyrk1A phosphorylates the human microtubule-associated protein tau at Thr212
in vitro, a residue that is phosphorylated in fetal tau and hyper-phosphorylated in Alzheimer
disease (AD) and tauopathies, including Pick disease (PiD). Furthermore, phosphorylation of
Thr212 primes tau for phosphorylation by glycogen synthase kinase 3 (GSK-3). The large
number of protein interaction and putative substrates described for DYRK1A suggest multiple
pathways and functions to be involved in its developmental function.
9:00 a 11:00 Simposio 8: Modelos animales para el estudio de enfermedades neurosensoriales. (Auditorio I)
Varela-Nieto
En la ltima dcada, la disponibilidad de modelos animales de enfermedades neurosensoriales ha crecido exponencialmente (vase por ejemplo http://jaxmice.jax.org/). Disponemos
ahora de un considerable nmero de modelos mridos de alteraciones visuales, auditivas,
olfatorias y somatosensoriales. El desarrollo de nuevos modelos basados en el conocimiento
de los genes involucrados en cada dficit neurosensorial, el estudio del mecanismo fisiopatolgico que produce la disfuncin sensorial y la caracterizacin fenotpica del grado de afectacin
en dichos modelos animales, representan conjuntamente uno de los principales retos para el
avance en el conocimiento de las enfermedades sensoriales que afectan a los seres humanos.
Existen diversas aproximaciones experimentales que permiten determinar el estado
neurofuncional de los sistemas sensoriales de los animales de experimentacin de forma
rpida, reproducible, cuantitativa y no invasiva, preservando la vida del animal explorado.
El uso de tcnicas de diagnstico experimental para explorar aspectos concretos del funcionamiento de los sistemas sensoriales permite determinar con precisin, entre otras, las
capacidades sensoriales auditivas, visuales y olfativas del animal.
Con la colaboracin de investigadores espaoles expertos en modelos animales genticamente determinados y en la caracterizacin fenotpica de dichos modelos, se propone el
presente simposio que pretende mostrar a la comunidad neurocientfica algunos modelos
de enfermedad sensorial y cmo puede llevarse a cabo de manera eficaz su estudio funcional. Las consecuencias de dichos estudios son de gran importancia para la translacin de
los conocimientos adquiridos en modelos animales a la comprensin de las enfermedades
neurosensoriales que afectan a los humanos.
- Modelos animales genticamente modificados de enfermedades neurosensoriales; M. Arbores
60
MODELOS ANIMALES DE ALBINISMO: UNA APROXIMACIN VLIDA

PARA EL ESTUDIO DEL DESARROLLO DE LA RETINA DE MAMFEROS
Montoliu, L.
Centro Nacional de Biotecnologa (CNB-CSIC), Campus de Cantoblanco, C/Darwin 3, 28049 Madrid
El albinismo es un sndrome gentico caracterizado por la hipopigmentacin y por la presencia de alteraciones visuales, pero tambin, en algunos casos, auditivas. Existen varios tipos de albinismo, cada uno de ellos asociado a mutaciones en genes especficos. El albinismo
oculocutneo de tipo I (OCAI) se asocia a mutaciones en el gen de la tirosinasa que pueden
inhabilitar totalmente el gen (OCA1A) o permitir la expresin limitada del mismo (OCA1B).
Hemos generado diversos ratones transgnicos para el estudio de OCA1. Los invididuos albinos OCA1 presentan una severa limitacin visual, causada por dficits de fotorreceptores bastones, desarrollo anmalo de la retina y prdida de conexiones nerviosas ipsilaterales entre las
clulas ganglionares de la retina y el ncleo geniculado lateral. Todas estas alteraciones pueden
corregirse con transgenes funcionales de la tirosinasa. La utilizacin de transgenes completos,
o carentes de alguna zona reguladora, o el uso de transgenes inducibles del gen de la tirosinasa
ha permitido dilucidar el papel relevante de este gen durante el desarrollo de la retina de mamferos. Recientemente, hemos generado otro modelo experimental con ratones transgnicos
que expresan la tirosina hidroxilasa bajo el control del gen de la tirosinasa, lo que permite la
produccin de intermediarios de la va de sntesis de melanina (derivados de la L-DOPA) pero
no la aparicin de pigmento. En estos ratones tambin logramos la correccin de las alteraciones visuales, lo cual sugiere que no es la ausencia de melanina sino el dficit de productos
intermediarios la causa de las alteraciones neurosensoriales asociadas al albinismo.
ESTUDIO NEUROFUNCIONAL NO INVASIVO DE MODELOS ANIMALES DE SORDERA

Contreras, J.
La prdida de audicin constituye una de las deficiencias sensoriales invalidantes ms frecuentes en el mundo desarrollado. La etiologa de la sordera es muy amplia, y comprende problemas
genticos, ambientales, txicos, etc. Destaca por su importancia en la especie humana la hipoacusia por envejecimiento o presbiacusia. Esta constituye una de las enfermedades crnicas que con
ms frecuencia afecta a la salud de los ancianos, suponiendo un grave problema de salud pblica
en la sociedad actual. Existe por tanto un creciente inters, con muchas lneas de investigacin
abiertas, para conocer mejor cmo se producen las diferentes sorderas, y se han desarrollado
numerosos modelos animales para estudiar las diferentes modalidades de alteracin auditiva.
Una alternativa a los mtodos ms invasivos, tanto tradicionales como actuales, son los
abordajes no invasivos. En la actualidad existen diversas herramientas que permiten realizar un
examen de las capacidades sensoriales de los animales de experimentacin de forma rpida,
objetiva y no invasiva. Entre ellas, el diagnstico electrofisiolgico permite evaluar detalladamente aspectos concretos del funcionamiento del sistema nervioso y determinar con bastante
precisin si el animal conserva sus capacidades sensoriales auditivas, con las ventajas que analizaremos en relacin a la utilizacin de mtodos no invasivos.
Nuestro grupo est utilizando en la actualidad el enfoque neurofuncional no invasivo para
estudiar diferentes modelos de sordera en animales de experimentacin mediante la determinacin de los potenciales evocados auditivos de tronco cerebral (PEATC, o en ingls Auditory
Brainstem Response, ABR) y la utilizacin de tcnicas de imagen mdica como la resonancia
magntica (RMN). Este anlisis permite conocer el estado funcional de la audicin siendo de
utilidad, adems de para analizar modelos establecidos de patologa auditiva, para la caracterizacin fenotpica de modelos genticos murinos. Se presentarn los resultados obtenidos en
diferentes modelos animales de sordera.
- Tcnicas de imagen en pequeos animales de laboratorio; J.J.Vaquero
61
POSTERES HALL -VIERNES 7
Clulas de origen de las proyecciones serotoninrgicas y catecolaminrgicas a la

mdula espinal en la lamprea de mar, Petromyzon marinus
Distribucin de la inmunorreactividad al
pptido similar a la hormona liberadora
de la hormona del crecimiento (GHRH-like)
en el sistema nervioso central del pez cebra adulto (Danio rerio).
Antn Barreiro Iglesias, Verona Villar-Cervio, Ramn Anadn, M

Celina Rodicio
rea de Biologa Celular, Departamento de Biologa Celular y Ecologa, Facultad de Biologa, Universidad de Santiago de Compostela,
Espaa
La lamprea de mar pertenece a los vertebrados ms primitivos, los
Agnatos, por lo que el estudio de sus sistemas monoaminrgicos es importante para determinar como han variado stos durante la evolucin.
Mediante la aplicacin de trazadores (dextranaminas biotiniladas y neurobiotina) en la mdula espinal rostral y su combinacin con inmunofluorescencia contra serotonina, dopamina y tirosina hidroxilasa, se ha determinado qu ncleos monoaminrgicos de la lamprea proyectan a la mdula
espinal. Dos ncleos rombenceflicos (ncleo stmico y ncleo rombenceflico caudal) presentan clulas serotonrgicas con proyecciones espinales. Asimismo, los ncleos dienceflicos paratubercular y mamilar, y
el ncleo rombenceflico caudal muestran clulas dopaminrgicas con
proyecciones espinales. Las clulas dopaminrgicas de proyeccin espinal
de los ncleos mamilar y rombenceflico caudal contactan con el lquido
cefalorraqudeo (clulas CSF-contactantes). En el ncleo mamilar no se
han encontrado clulas positivas a tirosina hidroxilasa que proyecten a
la mdula espinal. El presente estudio ha revelado tambin que esos ncleos de proyeccin espinal adquieren su organizacin definitiva durante
la etapa larvaria. Las proyecciones espinales serotoninrgicas descritas
en el presente trabajo son semejantes a las encontradas en otros grupos de vertebrados, mostrando un alto grado de conservacin. Tambin
est conservada la proyeccin espinal dopaminrgica desde el tubrculo
posterior, aunque parece mucho ms escasa en lamprea. Por el contrario,
ncleos catecolaminrgicos de proyeccin espinal stmicos, pontinos y/o
del tracto solitario semejantes a los descritos en otros vertebrados (mamferos, anfibios), no han sido observados en la lamprea, sugiriendo que
han aparecido mas tardamente en la filogenia.

Localizacin inmunohistoqumica de los
sistemas orexinrgicos en el sistema nervioso central de los anfibios urodelos
Antonio Manuel Castro Castro(1), Manuela Becerra(2), Mara

Jess Manso(1), Nancy M. Sherwood(3), Ramn Anadn(2).
1. Departamento de Biologa Celular y Molecular, Facultad de Ciencias, Universidad de A Corua, 15071-A Corua, Espaa.; 2. Departamento de Biologa Celular y Ecologa, Universidad de Santiago de
Compostela, 15782-Santiago de Compostela, Espaa.; 3. Departamento de Biologa, Universidad de Victoria, Victoria, Canada V8W
3N5.
En el presente estudio se ha estudiado la distribucin inmunohistoqumica del pptido similar a la hormona liberadora de la hormona del
crecimiento (GHRH-like) en el sistema nervioso central del pez cebra
(Danio rerio). Para ello se han empleado anticuerpos policlonales desarrollados contra los pptidos GHRH-like de salmn (sGHRH-like-1)
y carpa (cGHRH-like). Ambos antisueros revelaron neuronas inmunorreactivas a GHRH-like (GHRH-ir) en el ncleo preptico parvocelular
posterior (ocasionales con anti-sGHRH, y escasas con anti-cGHRH), rgano pineal (numerosas con cGHRH-ir), y asociadas al ncleo gustatorio
secundario (porcin ventral) del istmo (fuertemente teidas con ambos
antisueros). Por el contrario, clulas del ganglio del nervio terminal, ncleo del receso posterior, y rea reticular del cerebro caudal fueron slo
cGHRH-ir, mientras que neuronas magnocelulares del ncleo lateral del
tber fueron exclusivamente sGHRH-ir. La neurohipfisis contena fibras
tanto sGHRH-ir como cGHRH-ir de origen hipotalmico, apareciendo
asimismo numerosas clulas cGHRH-ir en la adenohipfisis. Ambos anticuerpos revelaron numerosas fibras GHRH-ir originadas, en su mayora,
de la poblacin GHRH-ir asociada al ncleo gustatorio secundario, extendindose por el rea ventral del telencfalo, ncleos preglomerulares,
toro lateral y ncleo difuso hipotalmico, habnula, toro semicircular, y a
lo largo del funculo dorsolateral de la mdula espinal. Estos resultados
sugieren que, en conjunto, los dos anticuerpos usados pueden estar revelando la expresin diferencial de los pptidos GHRH-like 1 y 2 secuenciados en el pez cebra, as como la implicacin de estos pptidos tanto en
funciones neuroendocrinas como neuromoduladoras.
Entidad financiadora: Ministerio de Educacin y Ciencia (BFU200405287/BFI).
Domnguez L., Morona R., Moreno N., Muoz M., Gonzlez A., Lpez
J.M.
Dpto. de Biologa Celular, Fac. de Biologa, Univ. Complutense de
Madrid.
Actividad proliferativa en el telencfalo

embrionario del lagarto Gallotia galloti
Mediante la aplicacin de tcnicas inmunohistoqumicas se analiz

la distribucin en el SNC de los anfibios urodelos Pleurodeles waltl y
Ambystoma tigrinum de las orexinas A y B, dos neuropptidos implicados
en la regulacin de la ingesta y el control del ciclo vigilia-sueo, entre
otras importantes funciones. La poblacin de clulas orexinrgicas ms
numerosa se observ en el ncleo supraquiasmtico, aunque tambin se
detect una poblacin menor en el hipotlamo ventral y algunas clulas
en la parte caudal del rea preptica. Se encontr tambin un extenso patrn de fibras inmunorreactivas situado principalmente en el estriado, la
amgdala, el rea preptica, el hipotlamo ventral y la hipfisis, as como en
el tlamo dorsal, el techo ptico y la regin stmica. Mucho ms reducida
es la presencia de fibras en el bulbo olfativo, el palio, el septo, el tlamo
ventral y los ncleos del tracto solitario y reticular inferior del rombencfalo, as como en la mdula espinal. Adems se analiz mediante doble
inmunohistofluorescencia la posibilidad de colocalizacin entre las clulas
orexinrgicas y las que expresan la enzima tirosina hidroxilasa, marcador
de los neuronas catecolaminrgicas, encontrndose una estrecha codistribucin en el ncleo supraquiasmtico pero en ningn caso coexpresin
entre ambos tipos de marcadores. La similitud entre este patrn de distribucin en urodelos con el de otras clases de vertebrados es muy elevada,
especialmente con la presencia de clulas orexinrgicas en el hipotlamo,
y apunta al hecho de que este sistema neuropeptidrgico sea uno de los
ms conservados a lo largo de la evolucin. (BFI2006-01014/BFU).
Diversas investigaciones en las que se han empleado marcadores moleculares de proliferacin, han demostrado que la actividad proliferativa
del epndimo telenceflico de reptiles contina en la vida adulta. Se ha
visto adems que esta actividad vara entre distintas reas y se ha comprobado que las clulas generadas son neuronas. Las evidencias hasta ahora disponibles sealan las clulas de gla radial, que en el caso de reptiles
perduran en la fase adulta, son las clulas que dan lugar a estas neuronas.
Partiendo de estos datos, es lgico pensar que los precursores neuronales en el cerebro embrionario de estos animales tambin sean clulas
de gla radial. De hecho, la funcin de estas clulas como progenitoras de
neuronas ya se ha demostrado en la corteza de ratn. En este trabajo
estudiamos como se distribuye la actividad proliferativa en el telencfalo
embrionario del lagarto a lo largo de varios estadios y relacionamos esta
distribucin con el patrn de la glia radial en las distintas reas.
62
Elena Mara Darias Prez, Antonia Alonso Fuentes, Carmen Damas, Fernando Delgado, Ana Delgado, Carmen M Trujillo Trujillo.
Dpto. Microbiol. and Cel. Biol., Facultad de Biologa, Universidad de
La Laguna. 38200 La Laguna, Tenerife, Espaa
VIERNES 7 - POSTERES HALL

Organizacin segmentaria de los ncleos
serotoninrgicos de la formacin reticular de la pintarroja (elasmobranquio)
Ivan Manuel Carrera de Figueiredo(1), Pilar Molist(2), Susana
Ferreiro-Galve(1), Ramn Anadn(1), Isabel Rodrguez-Moldes(1)
1. Departamento de Biologa Celular y Ecologa, Universitdad de
Santiago de Compostela, 15782-Santiago de Compostela, Espaa;
2. Departamento de Biologa Funcional y de Ciencias de la Salud,
Universidad de Vigo, 36200-Vigo, Espaa
El plan bsico del desarrollo enceflico en vertebrados sigue una organizacin segmentaria a lo largo del eje antero-posterior, posibilitando
la comparacin de territorios entre grupos de vertebrados. Las subdivisiones segmentarias del rombencfalo, rombmeros (rh), guardan una
directa relacin topogrfica con los nervios craneales y sus ncleos motores. Para investigar la posible organizacin segmentaria de los ncleos
serotoninrgicos del rombencfalo de tiburones, hemos comparado su
posicin con la de los ncleos motores en embriones y adultos de la
pintarroja, Scyliorhinus canicula, utilizando tcnicas de doble marcaje con
anticuerpos anti-serotonina (5-HT) y anti-colina acetiltransferasa (ChAT).
Nuestros resultados indican que ncleos serotoninrgicos homlogos a
los grupos rafeales (mediales) y reticulares (laterales) de amniotas aparecen tempranamente durante el desarrollo. Adems, el lmite rostral de la
formacin reticular superior en pintarroja (rafe linearis, anterioris y reticular B9) coincide con el lmite rombo-mesenceflico. El nivel del ncleo
motor del trigmino (Vm) y su raz, que en la pintarroja definen el lmite
entre rh2 y rh3 (Kuratani y Horigome, Zool Sci, 17 (2000) 893-909), coincide con el nivel caudal del ncleo reticular pontis oralis y el nivel rostral
del ncleo rafe dorsalis. La regin comprendida entre el nivel caudal de
Vm y el nivel rostral de la raz motora del nervio facial carece de somas
serotoninrgicos, correspondiendo a rh3 y rh4. Estos resultados indican
que durante su desarrollo y estadios maduros, los ncleos serotoninrgicos de la formacin reticular en tiburones se organizan siguiendo un
patrn segmentario similar al observado en amniotas.
Kuratani y Horigome, Zool Sci, 17 (2000) 893-909

Distribucin del dipptido carnosina y dipptidos relacionados, anserina y homocarnosina, en el telencfalo del pez seo
primitivo Polypterus senegalus.
Ivn Lamas Criado(1), Ramn Anadn(2), Sofa M Daz-Regueira(1)
1. Dpto. Biologa Celular y Molecular. Universidad de A Corua.;
2. Dpto. Biologa Celular y Ecologa. Universidad de Santiago de
Compostela.
La distribucin celular del dipptido carnosina (beta-alanil-L- histidina) y los dipptidos relacionados anserina y homocarnosina fueron estudiados por mtodos bioqumicos e inmunohistoqumicos en cerebros
de mamferos y otros vertebrados tetrpodos. Estudios en mamferos
han mostrado la presencia de estos dipptidos principalmente en clulas
gliales, y en neuronas su localizacin est restringida a neuronas receptoras olfativas y algunas poblaciones de supuestas neuronas migradoras
y neuroblastos. Estos resultados sugieren que la carnosina y sus dipptidos relacionados podran desempear funciones neuromoduladoras. Este
estudio de la distribucin en el cerebro del pez Polypterus, se realiz
por mtodos inmunohistoqumicos, utilizando un anticuerpo policlonal
contra la carnosina, donado por el Dr. F. L. Margolis. Los datos obtenidos
muestran que la carnosina y/o dipptidos relacionados, estn presentes
en clulas y fibras de diferentes zonas del telencfalo de este pez seo
primitivo. Dentro de los bulbos olfatorios, la carnosina est presente en
clulas de la capa celular interna y externa, as como en fibras del estrato
fibroso olfatorio, y en la capa de los glomrulos olfatorios. En los lbulos
hemisfricos telenceflicos, la distribucin est restringida a las principales divisiones del palio: P1-d, P1-v, P2 y P3. La distribucin tpicamente
neuronal de la carnosina observada en Polypterus es similar a la encontrada recientemente en un telesteo avanzado (Chelon labrosus; Lamas
et al., Brain Res. 2007, 1149:87-100), lo que en conjunto sugiere que, a
diferencia del patrn glial de carnosina observado mayoritariamente en
tetrpodos, el patrn neuronal de distribucin de carnosina es comn a

las lneas de peces seos.
Lamas et al., Brain Res. 2007, 1149:87-100

Distribucin de la hormona liberadora de
tirotropina (TRH) en el sistema nervioso
central de los anfibios urodelos
Domnguez Berzosa L., Morona R., Moreno N., Muoz M., Gonzlez A., Lpez J.M.
Dpto. de Biologa Celular, Fac. de Biologa, Univ. Complutense de
Madrid.
En el presente trabajo se estudi mediante tcnicas inmunohistoqumicas la distribucin de la hormona liberadora de tirotropina (TRH), as
como su posible colocalizacin con la enzima tirosina hidroxilasa (TH) en
el sistema nerviosa central de los anfibios urodelos Ambystoma tigrinum,
Ambystoma mexicanum y Pleurodeles waltl. En todos los ejemplares de
las tres especies se encontr un patrn de distribucin de este neuropptido muy homogneo. Las poblaciones celulares inmunorreactivas para
TRH ms numerosas se situaron en el rea preptica y el hipotlamo ventral. Sin embargo se detectaron algunas particularidades interespecficas,
como son la presencia de clulas TRH+ en el tlamo ventral y el techo
ptico, exclusivamente en las especies del gnero Ambystoma. El patrn
de fibras inmunorreactivas para TRH fue tambin muy constante en todos
los urodelos analizados, localizndose principalmente en las regiones septales, estriatales y amigdalinas, rea preptica, hipotlamo ventral, tlamo
e hipfisis y, en menor cantidad, en el techo ptico, tegmento mesenceflico, rombencfalo y mdula espinal. Por otra parte, los experimentos de
doble inmunohistofluorescencia para TRH y TH revelaron un amplio rango de codistribucin entre ambos tipos de poblaciones en el rea preptica aunque sin existencia de colocalizacin. Los resultados obtenidos en
este estudio ponen de manifiesto que el patrn de distribucin de la TRH
en el encfalo de los anfibios urodelos es claramente comparable con el
de otros grupos de vertebrados amniotas y anamniotas, siendo la presencia de poblaciones TRH+ en el hipotlamo el rasgo ms conservado en
todas las especies de vertebrados estudiadas. (BFI2006-01014/BFU).

ORIGEN MULTIPLE DE LA AMGDALA MEDIAL Y
EXTENDIDA EN EL PALIO VENTRAL Y LAS REAS
SUBPALIALES PEDUNCULAR ANTERIOR Y PREPTICA COMISURAL
Loreta Medina Hernndez, Margarita Garca-Lpez, Antonio Abelln, Isabel Legaz
Dept. Medicina Experimental, Facultat de Medicina, Institut de Recerca Biomdica de LLeida (IRBLLEIDA), Universitat de Lleida
La amgdala medial controla reflejos instintivos bsicos como la reproduccin y la defensa, por medio de proyecciones directas e indirectas
(a travs del ncleo de la estria terminal) al hipotlamo medial. Se ha
sugerido que las proyecciones de la amgdala medial al hipotlamo muestran una organizacin de tipo estriato-palidal similar a la de los ganglios
basales, siendo la amigdala medial el componente estriatal y el ncleo
de la estria terminal (BST) el componente palidal (Swanson, 2000). Nosotros hemos querido comprobar si esto es cierto, mediante el estudio
del origen embriolgico de la amgdala medial y la parte relacionada del
BST. Esto lo hemos realizado mediante el estudio de genes reguladores
que muestran patrones de expresin restringidos en el subpalio telenceflico, como Dlx5, Nkx2.1, Lhx6, Lhx7/8, Lhx9, Shh y Gbx1. Nuestros datos indican que la amgdala medial tiene un origen mltiple, presentando
componentes que proceden del palio ventral, del subpalio y de fuera del
telencfalo. La contribucin subpalial es la mas importante, e incluye derivados del rea peduncular anterior y de una nueva subdivisin llamada
rea preptica comisural, relacionada con la comisura anterior y caracterizada por expresin de Shh. Sin embargo, la amgdala medial no incluye
ninguna parte de origen estriatal. Por otro lado, el BST tiene tambin un
origen mltiple, y parece existir una correlacin funcional entre partes de
la amgdala medial y del BST con el mismo origen. Nuestro estudio pro-
63
porciona una base embriolgica y molecular para ayudar a comprender la

compleja organizacin de la amgdala medial y extendida.
Subvencionado por MEC-FEDER (proyecto BFU2006-14804-C0202)
Swanson LW (2000) Cerebral hemisphere regulation of motivated
behavior. Brain Res 886:113164.
nacin de la retina se extiende del centro a la periferia y la organizacin

del sistema GABArgico a lo largo de este eje recapitula lo observado
en el eje vtreo-escleral en la retina central en estadios ms tempranos.
Concluimos que en la retina de tiburones el GABA es sintetizado por
la GAD antes de la sinaptognesis, sugiriendo un papel neurotrfico del
GABA, adems de su papel como neurotransmisor clsico.
PROLIFERACIN Y DIFERENCIACIN CELULAR EN

EL ENCFALO DE UN TELESTEO AVANZADO, EL
MGIL (Chelon labrosus)
M Mercedes Arochena Gmez(1), Ramn Anadn(2), Sofa M.
Daz Regueira(1)
1.Dpto. Biologa Celular y Molecular. Universidad de A Corua.;
2.Dpto. Biologa Celular y Ecologa. Universidad de Santiago de
Compostela.
Los peces presentan un enorme potencial para producir nuevas clulas en el cerebro adulto, aunque se sabe poco de la regulacin de la
proliferacin celular y del destino de las clulas recin generadas. Mediante marcaje pulso-caza con 5-bromo-2-deoxiuridina (BrdU), anlogo de
la timidina que se incorpora al ADN durante la fase S del ciclo celular, y
empleando tcnicas inmunohistoqumicas con anticuerpos monoclonales
contra la BrdU hemos identificado clulas postmitticas en el encfalo de
juveniles del mgil (Chelon labrosus). Para caracterizar las nuevas clulas
formadas, hemos combinado la inmunofluorescencia anti-BrdU con inmunomarcaje contra la protena cida fibrilar glial (GFAP), una protena de
los filamentos intermedios especfica de astrocitos y gla radial madura de
mgil (Arochena et al., 2004, J. Comp. Neurol. 469:413-36) y la calretinina
(CR), una protena ligante de calcio de 29kD expresada en mgil por
diversas subpoblaciones de neuronas (Daz-Regueira and Anadn, 2000,
J. Comp. Neurol. 426:81-105). Nuestros resultados revelan clulas que
expresan BrdU/GFAP (clulas gliales), sobre todo en el quiasma ptico,
tegmento, rea postrema y mdula espinal. Por otro lado, hemos encontrado un nmero considerablemente superior de clulas postmitticas
con marcaje BrdU/CR (neuronas), que se distribuyen ms ampliamente
que las gliales, sobre todo en el telencfalo ventral, regin supraquiasmtica, toro semicircular, techo ptico, cerebelo, fascculo longitudinal
medial y mdula espinal. Nuestros resultados indican que la proliferacin
postembrionaria en el cerebro de mgil da origen tanto a clulas gliales
como neuronas, contribuyendo al progresivo incremento en el nmero
de clulas de algunas regiones enceflicas.

Estudio inmunohistoqumico del sistema
GABArgico de la retina madura y en desarrollo de dos elasmobranquios
Susana Ferreiro Galve, Eva Candal, Ivn Carrera, Ramn Anadn,
Isabel Rodrguez-Moldes
Departamento de Bioloxa Celular e Ecoloxa. Facultade de Bioloxa. Universidade de Santiago de Compostela
Hemos estudiado el sistema GABArgico en la retina madura y en
desarrollo de elasmobranquios mediante tcnicas inmunohistoqumicas.
Anticuerpos anti-GABA (cido gamma-amino butrico) y anti-GAD (cido glutmico descarboxilasa) revelaron el mismo patrn de inmunorreactividad y organizacin del sistema GABArgico en las dos especies de
tiburones analizadas (Scyliorhinus canicula y Haploblepharus fuscus). La
inmunorreactividad a GAD/GABA se observa ya en la retina sin laminar
de embriones del estadio 26. La laminacin retiniana comienza en la regin central del estadio 30. En este estadio, las clulas gabargicas se distribuyen principalmente en la retina externa (futuras clulas horizontales
gabargicas) e interna (futuras clulas amacrinas y ganglionares gabargicas), y las primeras fibras inmunorreactivas cursan por las incipientes
capas plexiforme interna (IPL) y de las fibras pticas (OFL), y tambin se
observan en el tallo ptico. En el estadio 32, la capa plexiforme externa
aparece en la regin central, completando la laminacin de la retina. A
partir de este estadio, observamos inmunorreactividad a GAD/GABA
en subpoblaciones de clulas amacrinas, horizontales y ganglionares, as
como en fibras en la IPL, OFL y nervio ptico. Hasta la eclosin, la lami-
64
Caracterizacin de neuronas nitrrgicas

y colinrgicas en los sistemas quimiosensoriales olfatorio y gustatorio de la carpa dorada (Carassius auratus)
S. P. Gaytn Gua, R.M. Girldez, y R. Psaro.
Departamento de Fisiologa y Zoologa, Facultad de Biologa, Universidad de Sevilla. Avda. Reina Mercedes, 6, 41012-Sevilla
Acetilcolina y xido ntrico estn relacionados con la integracin
sensorimotora central. Este trabajo pretende cartografar las neuronas
colinrgicas y nitrrgicas relacionadas con los sistemas quimiosensoriales
olfatorio y gustatorio en Carassius auratus. Los cerebros se procesaron
por mtodos histoqumicos modificados de Karnovsky y Roots (1964;
J. Histochem. Cytochem. 12, 219-221) para acetilcolinesterasa (AChE) y
Sims et al. (1974; J. Histochem. Cytochem., 22, 7-19) para NADPH-diaforasa (NADPHd). Para inmunohistoqumica de colina-acetiltransferasa
(ChAT) se utiliz anticuerpos policlonales de cabra anti-ChAT (1:50
AB144P Chemicon) y secundarios de ratn (1:1.000 biotin-SP-conjugated-(H+L)-705-065-003 JacksonIR). Para xido-ntrico-sintasa neuronal
(nNOS) se utiliz anticuerpos policlonales de conejo anti-nNOS (1:3.000
AB5380 Chemicon) y secundarios de ratn (1:2.000 biotin-SP-conjugated-(H+L)-211-065-109 JacksonIR). Se detectaron neuronas positivas
para AChE, NADPHd, ChAT y nNOS: i) En bulbos olfatorios positivas
para AChE, NADPHd y fibras y varicosidades en passant ChAT- positivas.
ii) En regin preptica parvocelular, tlamo dorsal y centro gustatorio primario positivas para todas las tcnicas, con alto grado de co-localizacin.
iii) En complejo gustatorio visceral secundario, alta densidad de neuronas
positivas para AChE, NADPHd, ChAT, nNOS y escasa co-localizacin. iv)
En regin preptica magnocelular neuronas NADPHd-positivas. v) En
tlamo ventral, hipotlamo y ncleo difuso del toro lateral neuronas positivas para AChE, NADPHd, nNOS y fibras y varicosidades en passant
ChAT-positivas. vi) En ncleos del rafe mesenceflico y rombenceflico
slo se encontr actividad nitrrgica. Se concluye que la red nitrrgica y
colinrgica no es totalmente coincidente; sin embargo, la densa co-localizacin demostrada se implica estructuras relacionadas con el procesamiento quimiosensorial olfatorio y gustatorio en la carpa dorada, con su
correlato fisiolgico correspondiente.
Financiado por P.A.I.-FS/FN/ARM.

Distribucin de calbindina D-28K y calretinina en la retina de anfibios anuros y urodelos: colocalizacin con acetilcolintransferasa y tiroxina hidroxilasa
Morona Arribas R., Moreno N., Domnguez L., Muoz M., Lpez
J.M., Gonzlez A.
Dpto. de Biologa Celular. Fac. de Biologa. Univ. Complutense de
Madrid.
La localizacin especfica de calbindina (CB) y la calretinina (CR) ha
servido para caracterizar subpoblaciones de los diferentes tipos neuronales en la retina. As, en todos los anfibios se ha encontrado CB en los conos, en una reducida poblacin de clulas bipolares, en clulas amacrinas
en la capa nuclear interna (INL) y en neuronas de diferentes tamaos en
la capa ganglionar (GCL); excepto en Pleurodeles waltl. La CR est totalmente ausente de la capa de fotorreceptores; en la INL muchas clulas
bipolares contienen CR as como en clulas amacrinas y un numerosas
neuronas de diferentes tamaos de la GCL. El trazado retrogrado desde
el nervio ptico combinado con inmunohistoqumica demuestra que la

mayora de las neuronas de la GCL son clulas ganglionare. Mediante doble inmunofluorescencia encontramos clulas amadrinas que contienen
CB y CR en todas las especies y tambin clulas ganglionares en la GCL,
excepto en Xenopus laevis y Pleurodeles waltl. La doble inmunohistoqumica para acetilcolintransferasa (ChAT) y tirosina hidroxilasa (TH) muestra que las clulas amacrinas ChAT+ son CR+ , pero slo una proporcin
de las clulas amacrinas CB+ contiene ChAT. En anuros hay clulas amacrinas dopaminrgicas (TH+) que poseen CB mientras que en urodelos
slo existe colocalizacin de CR y TH. Nuestros resultados muestran
caractersticas comunes a todos los anfibios y a otros vertebrados en
la distribucin de estas protenas en la retina y ciertas peculiaridades en
cuanto a su colocalizacin con otros transmisores que aun deben ser
contrastadas en otros vertebrados. (BFI2006-01014/BFU).
nivel caudal). Nuevos elementos CR-ir se aprecian a las 60 hpf en regiones

supra- y post-comisurales del rea ventral telenceflica. En la fase larvaria,
de 72 hpf a 29 das post-fertilizacin (dpf), se produce un incremento de
la CR-ir en las poblaciones ya descritas, apareciendo en esta etapa CR-ir
en el epndimo telenceflico. El patrn descrito se mantiene bsicamente
en la etapa juvenil (30-50 dpf) aunque se aprecia un incremento de la
CR-ir tanto cualitativa como cuantitivamente con respecto a etapas anteriores, si bien aparece por primera vez CR-ir en el ncleo central del rea
ventral telenceflica. Estos resultados revelan la existencia de un gradiente antero-posterior de la expresin de la CR paralelo a la ontogenia, este
hecho podra evidenciar la implicacin de la CR en el procesamiento-integracin de seales qumicas.
Financiado por el MEC (BFU2004-05287/BFI).
ESTUDIO INMUNOHISTOQUMICO DE LA DISTRIBUCIN DE LAS PROTENAS LIGANTES DE CALCIO

CALBINDINA Y CALRETININA EN EL TELENCFALO
DE Polypterus senegalus.
Los ligandos de los receptores de imidazolinas I2, 2-BFI y BU224, inducen efectos opuestos sobre los agregados del receptor
pro-apopttico Fas y la fosforilacin del
acoplador FADD en cerebro de rata.
Patricia Graa Carams, Julin Yez

Dpto. Biologa Celular y Molecular. Universidad de A Corua.
Independientemente de su posible implicacin funcional, las protenas ligantes de calcio han sido frecuentemente utilizadas como marcadores para caracterizar regiones enceflicas en diferentes especies. En
este estudio, hemos analizado con tcnicas inmunohistoqumicas la distribucin de la calretinina y la calbindina para un mejor conocimiento
de la neuroqumica del telencfalo de Polypterus, un representante actual del primitivo grupo de los Cladistia. El telencfalo de esta especie
es una estructura relativamente amplia y alargada, presentando regiones
evaginadas y evertidas. Numerosas clulas de las capas celulares internas
y externas del bulbo olfativo presentan inmunorreactividad frente a la
calretinina as como numerosas fibras del nervio olfativo y los glomrulos. En los lbulos telenceflicos se encuentran algunas clulas calretinina positivas en la regin ventral de P1 as como en Vn/Vd dorsal, Vs, Vp,
regiones profundas del subpalio, en las porciones dorsocaudales de Vv,
regin preptica y ncleo entopeduncular ventral. El subpalio presenta
mayor cantidad de fibras calretinina inmunorreactivas que el palio, donde
se distribuyen desde el tracto palial hacia P1-d. La inmunorreaccin a la
calbindina marca algunas clulas gliales as como neuronas dispersas del
bulbo olfativo, palio y Vd. Asimismo, se observan abundantes neuronas
calbindina positivas en la regin retrobulbar, Vn, Vs, Vp, regin dorsal de
Vv/Vc, rea preptica y ncleo supraquiasmtico. Tambin se observan
fibras calbindina positivas en los principales tractos telenceflicos. Los
resultados muestran codistribucin de clulas con ambas protenas en
numerosas regiones telenceflicas, siendo su distribucin general, especialmente en regiones ventrales y preptica, similar a la encontrada en
otras especies filogenticamente prximas.

Desarrollo de las poblaciones inmunorreactivas a la calretinina en el sistema
olfativo y telencfalo del pez cebra (Danio
rerio)
MARA JESS MANSO REVILLA, Gayoso Babo, J.A., Castro Castro, A.M
Departamento de Biologa Celular y Molecular. Facultad de Ciencias. Universidad de A Corua.
El presente estudio describe por primera vez la distribucin de la inmunorreactividad a la calretinina (CR-ir) en el sistema olfatorio y telencfalo del pez cebra durante el desarrollo embrionario y postembrionario.
Para ello se ha aplicado la tcnica inmunohistoqumica de la peroxidasaantiperoxidasa. La especificidad del anticuerpo empleado ha sido testada
mediante Western-blotting, revelando la existencia de una banda proteica
de 29 kDa. La primera evidencia de estructuras CR-ir se observ en la
placoda olfativa de embriones de 24 horas post-fertilizacin (hpf), que
se mantiene e intensifica a lo largo del desarrollo. En embriones ms
desarrollados (48 hpf) la CR-ir se extiende a niveles telenceflicos, en el
palio (porciones medial y lateral) y en el subpalio (porciones laterales a
Celia Garau, Antoni Miralles, Susana Esteban, Jess A. Garca-Sevilla.

Laboratorio de Neurofarmacologa, IUNICS, Universidad de las Islas Baleares, 07122 Palma de Mallorca.
Los receptores de imidazolinas I2 estn involucrados en mecanismos
de neuroproteccin (e.g. prevencin de neurotoxicidad inducida por glutamato y efecto protector sobre motoneuronas; Casasnovas et al., 2000,
Br. J. Pharmacol. 130: 1767-1776). En la induccin de apoptosis el receptor
Fas se acopla con su transductor FADD para activar caspasas efectoras.
La fosforilacin de FADD (p-Ser191/194) se ha asociado con acciones no
apoptticas tales como el crecimiento y la diferenciacin celular. El propsito de este trabajo piloto fue estudiar los efectos de la administracin
aguda de dos ligandos I2-selectivos, 2-BFI (2-benzofuranil-imidazolina, 10
mg/kg, i.p., 2h) y BU 224 (2-(4,5-dihidroimidazol-2-il)quinolina, 10 mg/kg,
i.p., 2h), sobre las inmunodensidades de Fas (protena monomrica, glicosilada y formas agregadas), FADD total y p-FADD (Ser194) en corteza
cerebral de rata. Comparado con el vehculo, 2-BFI indujo un incremento
de los agregados de Fas (51%, p<0.001, n=7) sin alterar el contenido de
las formas monomrica y glicosilada del receptor. 2-BFI tambin aument
la densidad de p-FADD (40%, p<0.05, n=7) sin modificar FADD total. En
marcado contraste, BU224 disminuy los agregados de Fas (15%, p<0.05,
n=7), sin efectos sobre sus formas monomrica y glicosilada, as como el
contenido de p-FADD (43%, p<0.01, n=7) pero no de FADD total. Estos
resultados sugieren que el 2-BFI (agonista I2 putativo) podra activar la va
de sealizacin de Fas (las formas agregadas son las relevantes para iniciar
la sealizacin) y al mismo tiempo desencadenar efectos no apoptticos
mediados por la fosforilacin de FADD en cerebro. Por contra, BU224 (antagonista I2 putativo) inducira acciones contrarias. SAF2004-03685 (MEC)
PRIB-2004-10147 (Govern Balear) y RETICS RD06/001/003 (MSC).

Sistema talamocortical de la matriz talamica: ramificacin y compartimentacin
laminar en los axones del nucleo posterior del ratn.
Porrero Calzado C, Rubio-Garrido P, Clasc F
Dpto. Anatoma, Histologa y Neurociencia, Fac. Medicina, Universidad Autnoma de Madrid (UAM)
Una masiva poblacin de neuronas talamocorticales (matriz talmica, tipo-M) terminan densa y selectivamente sobre los penachos apicales
de las clulas piramidales en la capa I de la corteza cerebral (Jones EG,
2001. Trends Neurosci 24:595-601). Las neuronas tipo-M son diferentes
de las neuronas de tipo Core que inervan selectivamente la capa IV de
la corteza. Sus axones suelen ramificarse en mltiples areas por lo que, en
conjunto, constituyen un sistema muy convergente y divergente. Las neuronas tipo-M estn presentes en proporciones variables en los distintos
ncleos talmicos. En el tlamo de roedores el ncleo Posterior (Po), que
vehicula informacin espinal y trigeminal, est formado casi exclusivamente por neuronas de tipo-M. Sin embargo, la organizacin anatmica de
65
sus conexiones talamocorticales se conoce de modo muy fragmentario.

En el presente estudio, buscamos precisar la organizacin anatmica de
los axones talamocorticales del ncleo Po en el ratn combinando diversas tcnicas de trazado axonal. Nuestros resultados preliminares indican
que pequeos grupos neuronales de Po inervan extensas regiones del
hemisferio cerebral. Los axones arborizan densa y restringidamente en
las capas Ia, Va y/o IIIb de las distintas reas, pero nunca en las capas IV o
VI. Adems, la distribucin tangencial y laminar y el grado de ramificacin
son diferentes en las neuronas situadas en distintas porciones de Po. El
presente estudio define con precisin las vias talamocorticlas de Po en el
ratn y aporta un modelo relevante para estudios del desarrollo del sistema talamocortical en animales normales y modificados genticamente.

Una buena aposicin de los muones medulares favorece cierto grado de recuperacin funcional y de regeneracin axonal
tras una lesin completa de la mdula espinal.
C. Muoz Quiles, M. B. Llamus, F. F. Santos-Benito y A. Ramn-Cueto
Laboratorio de Regeneracin Neural, Instituto de Biomedicina de
Valencia, Consejo Superior de Investigaciones Cientficas, Valencia,
Espaa.
La lesin completa de la mdula espinal es el modelo ms fiable para
estudiar la regeneracin axonal en animales experimentales. Este tipo de
lesin va precedido por una laminectoma mltiple por lo que cualquier
movimiento de la columna vertebral puede aumentar la distancia entre
los muones medulares. En este estudio hemos diseado un mtodo para
fijar la columna vertebral en ratas parapljicas mediante la utilizacin de
puentes fabricados con cemento dental. Este material result ser inocuo
y no ocasion ningn signo de inflamacin.
Mediante el test de la rampa inclinada, llevado a cabo semanalmente
durante 8 meses tras la ciruga, observamos diferencias significativas en
la recuperacin funcional de ratas con fijacin de la columna en comparacin con ratas sin estabilizacin. Nuestra tcnica de fijacin tambin
promovi una disminucin significativa de la distancia entre los muones medulares. La recuperacin funcional observada en estos animales se
correlaciona con la distancia que hay entre los muones, de forma que
una mayor recuperacin se corresponde con una menor distancia entre
muones. Para cuantificar la tasa de regeneracin axonal espontnea utilizamos como trazador un cctel de HRP y HRP-WGA que inyectamos
0,5 cm caudalmente a la lesin. Mediante esta tcnica se demostr regeneracin axonal espontnea de neuronas del locus coeruleus y del rafe.
Adems el grado de regeneracin espontnea correlaciona con la recuperacin funcional observada. Por lo tanto, tras una lesin completa de la
mdula espinal es posible un cierto grado de recuperacin funcional e histolgica si se favorece una buena aproximacin de los muones. National
Institutes of Health (NIH; 1R01NS054159-01) y Fundacin Investigacin
en Regeneracin del Sistema Nervioso.

Efecto de los anlogos de las benzotropinas sobre la recada inducida por estrs
utilizando un modelo de CPP con cocana
Velzquez-Snchez C.(1), Ferragud A.(1), Prez-Villalba A., Cambn-Bonet N., Canales J.J.(1)
1. Laboratorio de Biopsicologa y Neurociencia Comparada, Instituto Cavanilles, Universidad de Valencia, Polgono de la Coma s/n,
Paterna, 46980 Valencia, Espaa
La adiccin a la cocana es un fenmeno de gran importancia clnica
y social, especialmente en Espaa que est a la cabeza en su consumo en
el contexto de la UE. Hasta ahora no se han llevado a cabo estudios que
evalen la eficacia de los anlogos de las benztropinas en la prevencin de
recadas. Esta nueva clase de frmacos, diseados y sintetizados recientemente (1), poseen un potencial teraputico importante. Esto es debido
a una alta afinidad por el transportador de dopamina (DAT), que es una
de las dianas ms prometedoras para el tratamiento de la adiccin a los
estimulantes, y a una pauta de accin farmacolgica larga y duradera (2,3).
66
Nuestro laboratorio, mediante un modelo de recada inducido por estrs

(4), ha estudiado los efectos de estos frmacos utilizando condicionamiento de preferencia de lugar (CPP) en ratones.
(1) Agoston GE et al. (1997) J Med Chem 40:4329-4339
(2) Raje S et al. (2005) Pharmacol Res 22(4):603-612
(3) Desai RI et al. (2005) J Neurosci 25(8):1889-1893
(4) Wang B et al.(2000) Neuroreport 21;11(12):2781-4

ACUMULACIN Y FOSFORILACIN DE NEUROFILAMENTOS EN MOTONEURONAS AXOTOMIZADAS
POR AVULSIN DE RACES ESPINALES
Clara Penas Perez, Joaquim Fors, Ivan Robert, Caty Casas, Xavier
Navarro
Grupo de Neuroplasticidad y Regeneracin. Instituto de Neurociencias. Universitat Autnoma de Barcelona.
En las lesiones por avulsin de races espinales, la axotoma proximal
induce la muerte retrgrada de motoneuronas, aunque los mecanismos
desencadenantes an no son completamente conocidos. En este trabajo
hemos empleado un modelo de avulsin extravertebral de las races L4 y
L5 unilaterales en la rata. Los resultados electrofisiolgicos muestran una
denervacin completa de msculos tibial anterior y gastrocnemio, y denervacin parcial de msculos plantares. Los potenciales de accin de nervios
sensoriales no estn completamente abolidos, reflejando la avulsin preganglionar. El recuento de motoneuronas en secciones transversas, teidas
con violeta de cresilo, a nivel L4-L5 mostr una prdida neuronal de 40%
a las 2 semanas, 77% a las 3 y 87% a las 4 semanas. En las motoneuronas
axotomizadas, los neurofilamentos de cadena pesada muestran un aumento de expresin y una anmala presencia de neurofilamentos fosforilados
(RT97+) en el soma neuronal. La proporcin de neuronas del asta ventral
marcadas positivamente para RT97 es del 78% a las 2, 60% a las 3 y 50%
a las 4 semanas. Por el contrario, no se observan alteraciones en el lado
contralateral a la lesin. La alteraciones en la estructura y composicin
del citoesqueleto neuronal pueden estar relacionadas con la capacidad de
supervivencia de las motoneuronas axotomizadas.

Efecto de la lesin del locus coeruleus
en las discinesias inducidas por levodopa
y en la respuesta cognitiva en ratas hemiparkinsonizadas
V. Prez(1), A. Rubio(1), E.Aguilar(2), M. Barbanoj(1), C. Marin(2), J.
Kulisevsky(1)
1. Laboratori de Neuropsicologia, Institut de Recerca de lHospital
de la Sta. Creu i de St. Pau, Barcelona.; 2. Laboratori de Neurologia
Experimental, Institut dInvestigacions Biomdiques August Pi i Sunyer (IDIBAPS), Barcelona.
La enfermedad de Parkinson (EP) es una enfermedad motora, cognitiva y conductual, caracterizada por la degeneracin progresiva de las
neuronas dopaminrgicas nigrales y de otros ncleos cerebrales, como
el locus coeruleus (LC), de naturaleza noradrenrgica. La degeneracin
del LC podra influenciar tanto las alteraciones motoras inducidas por la
administracin crnica de L-DOPA, tales como las discinesias, como el
rendimiento cognitivo.
OBJETIVO: Investigar si la lesin noradrenrgica modula las discinesias inducidas por L-DOPA y modifica la respuesta cognitiva en un
modelo experimental de EP.
METODOLOGIA: Se utilizaron 2 grupos de ratas Sprague-Dawley a
los que se les practic: 1) lesin unilateral del haz nigroestriatal mediante 6-hidroxidopamina (6-OHDA, 8 mg); o 2) lesin combinada de la va
nigroestriatal con 6-OHDA y de las proyecciones noradrenrgicas del
LC mediante la toxina DSP-4 (50 mg/kg, ip) 7 das previos a la lesin con
6-OHDA. Los animales se trataron con L-DOPA (12 mg/kg ip, durante
22 das). Se valoraron 3 subtipos de dicinesias: axiales, orofaciales y de la
extremidad. El estudio de los trastornos cognitivos se realiz evaluando
la memoria de trabajo en el laberinto radial de 8 brazos, valorando el
tiempo de ejecucin y el nmero de errores.

RESULTADOS: La lesin del LC no modific de forma significativa las
discinesias inducidas por L-DOPA ni afect la memoria de trabajo en las
ratas lesionadas con 6-OHDA.
CONCLUSIONES: La lesin noradrenrgica adicional no modifica las
discinesias ni el rendimiento de la memoria de trabajo observado tras el
tratamiento con L-DOPA en el modelo de la rata hemiparkinsoniana.
conflicto. Al comparar el grupo de pacientes con los controles, la activacin en los pacientes corresponda al ncleo lenticular (putamen y globo
plido). Estos resultados demuestran activacin frontal en los controles
que est significativamente disminuida en pacientes con EP, con alteracin de los circuitos frontobasales de la resolucin de conflicto en los
pacientes con EP.
NEURONAL ACTIVITY AND SENSITIVITY TO ANTIDEPRESSANT DRUGS IN THE DORSAL RAPHE NUCLEUS IN A RAT MODEL OF PARKINSONS DISEASE
EXPRESIN DIFERENCIAL DEL ARNm DE LAS NUEVE ISOFORMAS DE ADENILATO CICLASA EN CEREBRO DE RATA Y DE RATN
C. Miguelez, L. Grandoso, L. Ugedo

Dept. Pharmacology, Faculty of Medicine and Odontology, University of the Basque Country, 48940 Leioa, Vizcaya, Spain.
Cristina Sanabra Palau, Elisabeth Reyes-Irisarri, Roco Martn, Guadalupe Mengod

Departament de Neuroquimica, Institut dInvestigacions Biomdiques de Barcelona, CSIC-IDIBAPS. Rossell 161, Barcelona 08036
Depression is present in 46% of Parkinsons disease patients. The

dorsal raphe nucleus is one of the principal serotonin outflow systems
and plays an important role in the etiopathology of depression.Therefore,
the aim of this study was to evaluate the possible changes in this nucleus
in an animal model of Parkinsons disease. To determine them, extracellular recording techniques were carried out in sham and 6-OHDA lesion
animals. The electrophysiological properties on the serotonergic neurons
were studied as well as the possible changes in their response to antidepressants. The firing rate in the sham and lesion animals was similar
(1.450.10 Hz y 1.470.07 Hz, respectively).The sensibility to the selective serotonin reuptake inhibitor, fluoxetine, was not modified between the
lesion and the sham group (ED50=1.430.37 g/kg and 1.100.21 g/kg,
respectively). However, when a noradrenaline reuptake inhibitor, reboxetine, was administered, the lesion group showed higher sensibility than
the sham one (ED50=5.511.23 mg/kg and 10.750.78 mg/kg, respectively). Nevertheless, the sensibility to the a2-adrenoceptor agonist, clonidine,
was not modified by the dopaminergic degeneration (ED50=16.359.26
g/kg and 17.973.30 g/kg, lesion and sham group respectively). These
results suggest that the degeneration of the nigrostriatal pathway is related to a higher sensibility to noradrenaline selective reuptake inhibitors
and a1 mechanism is likely to be involved in such effect.
Supported by UPV/EHU 9/UPV /00026-327-13590/2001 and SAF
2006-12340. CM has a grant from the Basque Government.

Resolucin de conflicto en pacientes con
enfermedad de Parkinson (EP). Estudio por
Resonancia Magntica funcional
Cristina Nombela Otero, Ros-Bernal F (1), Bustillo PJ (3), Gonzlez-Rivero F (2), Ruiz E (3), Cano F (3), Garca-Medina V (3) y Herrero
MT (1)
1 Laboratorio NECEX-Neurociencia Experimental y Clnica. Dpto.
Anatoma Humana y Psicobiologa. (1)Facultad de Medicina. Universidad de Murcia.; (2) TransdatiX. Software S.L., Madrid.; (3) Servicio
de Radiodiagnstico. Hospital Universitario Reina Sofa. Murcia.
De 17.4% a 31.5% de los pacientes con EP presentan demencia, generalmente de tipo subcortical (Aarsland et al., 2005 Mov Disord. 20:125563). Las alteraciones cognitivas en los pacientes parkinsonianos debutan
con sndrome disejecutivo y dificultades secundarias en el procesamiento
mnemnico y visoespacial (Zgaljardic et al., 2003). La deplecin dopaminrgica en el parkinsonismo no solo afecta a la va nigroestriada sino tambin a la mesocorticolmbica alterando los circuitos de conexin cortical
y las funciones atencionales y secundarias a conflicto que dependen de
estos circuitos.
En el presente estudio se ha includo una muestra de 9 pacientes parkinsonianos y 9 controles (sexo y edad similares: 60.38,56.54). Fueron
sometidos a Resonancia Magntica funcional (Siemens 1.5T, Symphony)
realizando el test Stroop (versiones clsica y emocional): el paciente contaba con un teclado de 3 teclas compatible y vea las palabras a travs de
un juego de espejos. Al comparar la activacin de los sujetos control con
la de los pacientes, las reas de Brodman activadas en los controles correspondan a A6, A8, A9, A10 y A46 (giros orbitofrontal, frontal superior
y medial izquierdos) de acuerdo con la teora de Egner y Hirsch (2005,
Neuroimage 24:539-47) relativa a las reas implicadas en resolucin de
El AMPc juega un papel muy importante como mensajero secundario

regulando los efectos de las seales extracelulares en distintos tejidos. A
nivel cerebral, el AMPc est implicado en funciones sensitivas, plasticidad
sinptica, aprendizaje y memoria. Los niveles intracelulares de AMPc estn
regulados en parte por las Adenilato Ciclasas (AC), enzimas que lo sintetizan, desempeando un papel clave en la neurotransmisin del SNC. Hasta
la actualidad se han clonado e identificado nueve isoformas distintas acopladas a membrana. La distribucin diferencial de cada una de las ACs en
tejidos y la diversidad de sus caractersticas reguladoras hacen pensar en
que ejercen funciones moduladoras que no son redundantes.
En este trabajo describimos experimentos realizados utilizando la
hibridacin in situ con oligonucletidos marcados radiactivamente con el
fin de analizar la expresin regional del ARNm que codifica para cada una
de las isoformas de AC. Nuestro estudio revela una distribucin diferencial del ARNm de las nueve isoformas en cerebro de rata. Las formas ms
abundantes son la AC1, AC5 y AC9. La AC4 no se expresa en cerebro. Todas las AC se expresan en cerebelo y de manera diferencial en las distintas
subreas del hipocampo excepto la AC7, que est totalmente ausente.
Esta distribucin se compar con la del cerebro de ratn. En general
se observ una expresin muy similar entre ambas especies en todas las
reas analizadas.
Estos resultados nos permitirn estudiar en el futuro la implicacin
del AMPc en procesos neuroinflamatorios que tienen lugar en reas especficas del cerebro de roedor. SAF2006-01243

INCREMENTO DE LESIN OXIDATIVA Y DE ESTRS
DE RETCULO ENDOPLASMTICO EN LA ESCLEROSIS LATERAL AMIOTRFICA ESPORDICA
Daniel Cacabelos Barral, Ekaterina Ilieva, Ester Dalf, Mariona
Jov, Alba Naud, Isidre Ferrer,Victria Ayala, Reinald Pamplona, Manuel
Portero-Otn.
Departament Cincies Mdiques Bsiques, Facultat de Medicina,
Universitat de Lleida. IRBLleida.
En la Esclerosis Lateral Amiotrfica (ELA) se produce la muerte masiva, selectiva y progresiva de motoneuronas. En este estudio se demuestra
que la lesin oxidativa proteica es uno de los factores determinantes en el
proceso fisiopatolgico de su forma espordica. Se han analizado mediante espectrometra de masas y western blot vas especficas de oxidacin
proteica en 1) un modelo de cultivo organotpico de mdula espinal bajo
excitotoxicidad crnica y en 2) muestras de corteza cerebral y mdula
espinal de pacientes con ELA. Tambin se ha estudiado la expresin de
marcadores de estrs de retculo endoplasmtico y de protenas ubiquitinadas, as como la de complejos respiratorios mitocondriales implicados
en la produccin de radicales libres.
Los resultados demuestran un incremento significativo de la lesin
proteica asociada a cambios en la composicin de cidos grasos. Adems,
se constatan incrementos en el contenido del complejo III, en el grado
de ubiquitinizacin y en la expresin de marcadores de estrs de retculo.
Los mismos resultados se han obtenido en en el paradigma de excitotoxicidad, de forma especialmente evidente en poblaciones gliales.
Como conclusin, sugerimos que en la forma espordica de la ELA
existe un incremento de estrs oxidativo y de retculo asociado a cam-
67
bios en la composicin de cidos grasos que podran contribuir a la activacin de vas de muerte neuronal.

La huntingtina mutada altera el transporte post-Golgi
Daniel del Toro Ruiz, Francisco Lzaro-Diguez, Gustavo Egea, Josep Maria Canals, Jordi Alberch
Departament de Biologia Cellular i Anatomia Patolgica, Facultat
de Medicina. IDIBAPS, Universitat de Barcelona.
La protena huntingtina est implicada en la regulacin de mltiples
procesos como transcripcin, apoptosis y trfico intracelular. Recientemente hemos demostrado que la huntingtina participa en el trfico postGolgi. Para conocer el mecanismo por el que la huntingtina regula dicho
trfico, en el presente trabajo se ha estudiado la estructura y dinmica
del citoesqueleto as como la localizacin y funcin de diversas protenas
implicadas en el trfico post-Golgi en clulas estriatales knock-in para la
huntingtina wild-type (7Q) y mutada (111Q). Nuestros resultados muestran alteraciones en el citoesqueleto de actina en las clulas mutantes
respecto las wild-type lo que coincide con una desorganizacin del aparato de Golgi en las clulas mutadas observada por microscopia electrnica.
Esto puede afectar la funcionalidad del sistema de Golgi dificultando la
salida de protenas. Adems, la microscopa confocal muestra una mayor
retencin de AP-1 en el aparato de Golgi as como un menor nmero de
vesculas AP1 positivas en las clulas mutadas respecto a las wild-type. La
localizacin de protenas implicadas en el trfico post-Golgi como Rab8,
Optineurin y cortactin se encuentra alterada en las clulas mutadas respecto a las clulas wild-type.
En conclusin, la huntingtina mutada afecta al citoesqueleto de actina as como la localizacin de diversas protenas reguladoras del trfico
intracelular provocando una alteracin de la salida regulada del aparato
de Golgi.

LOS PROGENITORES DE nEURONAS GABAergicAS DEL CEREBELO adQUIEREN EL FENOTIPO DE
NEURONAS gRANULARES EN AUSENCIA DEL FACTOR DE TRANSCRIPCIN Ptf1a

ACTIVACIN DEL SISTEMA ENDOCANNABINOIDE
DESPUS DE UNA LESIN MEDULAR EN RATA
Daniel Garca Ovejero, Stefania Petrosino, Angel Arvalo-Martn,Tiziana Bisogno, Fabian Docagne, Carlos Hagen-Lapido, Carmen Guaza,
Vincenzo Di Marzo, Eduardo Molina-Holgado
Laboratorio de Neuroinflamacin, Hospital Nacional de Parapljicos, Toledo, Espaa; Endocannabinoid Research Group, Institute of
Biomolecular Chemistry, C.N.R., Pozzuoli (NA), Italy; Department
of Pharmaceutical Sciences, University of Salerno, Fisciano, Italy; Laboratorio de Neuroinmunologa, Instituto Cajal, Madrid, Espaa.
Una gran parte de las lesiones medulares se produce por contusin o
compresin transitoria de la mdula espinal. Los endocannabinoides son
lpidos de estructura variada que pertenecen a un sistema de sealizacin
endgeno descrito en los ltimos aos y formado por diversos ligandos,
receptores, transportadores y enzimas biosintticas y degradativas. Algunos de estos compuestos son neuroprotectores e inmunomoduladores
en diversas lesiones del sistema nervioso y su produccin se activa bajo
demanda despus del dao neural. En este trabajo estudiamos la modulacin del sistema cannabinoide endgeno despus de una lesin medular
por contusin. Para ello, hemos sometido a ratas macho adultas a una
laminectoma de la octava vrtebra torcica y a una contusin moderada
de la mdula espinal, sacrificndolas a distintos tiempos despus de la lesin (de 1 a 28 das). Utilizando Espectrometra de masas/Cromatografa
lquida por dilucin de istopos (LC-APCI-MS), encontramos aumentos
significativos de la concentracin de anandamida y 2-araquidonilglicerol
en la mdula lesionada. Tambin observamos un notable aumento de la
palmitoil-etanolamida, compuesto anti-inflamatorio semejante a la anandamida cuya actividad no es mediada por receptores cannabinoides. Adems, hemos estudiado la expresin de los receptores cannabinoides CB1
y CB2, enzimas formadoras de anandamida (NAPE-PLD) y 2-araquidonilglicerol (DGL alfa) y la enzima degradativa de la anandamida (FAAH)
por PCR cuantitativa. Nuestros resultados muestran que una contusin
en la mdula espinal activa el sistema endocannabinoide de la rata, subrayndolo como posible diana de estudio en la patologa o el tratamiento
teraputico de la lesin medular.
Subvencionado por el FIS (04/2120), Consejera de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha (06054-00), Epitech, S.r.l.
Marta Pascual 1, Ibane Abasolo2, Ana Mingorance-Le Meur1, Albert

Martnez1, Jos A. Del Rio1, Christopher V. E. Wright 3, Francisco X.
Real2 and Eduardo Soriano1
1 Institut de Recerca Biomdica, Parc Cientfic de Barcelona, y
Department de Biologia Cel.lular, Universitat de Barcelona, Josep
Samitier 1-5, E-08028-Barcelona, 2 Institut Municipal dInvestigaci
Mdica y Universitat Pompeu Fabra, Dr. Aiguader 80, E-08003-Barcelona; 3Vanderbilt Developmental Biology Program, Department
of Cell and Developmental Biology, Vanderbilt University, Nashville,
TN 37232-2175
Los mecanismos mediante los cuales los diferentes tipos de neuronas

se generan y especifican son cruciales para el correcto desarrollo del sistema nervioso. En este trabajo mostramos que el factor de transcripcin
pancretico Ptf1a es imprescindible para la formacin y la supervivencia
de las neuronas GABArgicas cerebelares (neuronas de Purkinje e interneuronas). Estudios de linaje neuronal nos han permitido demostrar
que los progenitores del clulas GABArgicas en la zona ventricular del
cerebelo que normalmente generan neuronas de Purkinje e interneuronas, en ausencia de Ptf1a dan lugar a neuronas de fenotipo granular. Estos
progenitores migran de forma aberrante hasta la capa granular externa,
y expresan marcadores tpicos de neuronas granulares, como Math1, Reelina o Zic1/2. Adems, estas clulas presentan una ultraestructura caracterstica de neuronas granulares, indicando que los progenitores de la
zona ventricular adoptan un fenotipo de neuronas granulares.Todos estos
datos indican que, durante el desarrollo temprano del cerebelo, Ptf1a es
imprescindible para la correcta especificacin y produccin de neuronas
de Purkinje e interneuronas. Adems, Ptf1a es necesario para la supresin
del programa de especificacin de las neuronas granulares en los precursores de la zona ventricular
En este trabajo nos hemos planteado averiguar si hay diferencias en

el nmero de neuronas noradrenrgicas del locus ceruleus del perro,
considerado un modelo natural de la Enfermedad de Alzheimer, y si este
vara con la edad. Para cuantificar esas neuronas hemos utilizado tcnicas
estereolgicas (Schmitz y Hof, 2005, Neuroscience, 130 813-31). Las neuronas noradrenrgicas se visualizaron mediante inmunohistoqumica con
un anticuerpo frente a Tirosina Hidroxilasa. Se observ que los perros
de morfotipo grande presentaban un 17 % ms de neuronas que los de
morfotipo pequeo. Por otro lado, los perros viejos de morfotipo grande
presentaban un 20 % menos de neuronas que los jvenes del mismo
morfotipo. Mientras que esta diferencia no se produca entre los animales
de morfotipo pequeo. Nuestros resultados sugieren que el nmero de
neuronas se relaciona con el tamao del animal, mientras que su densidad
de empaquetamiento parece ser constante. Adems, parece que durante
el envejecimiento normal se produce una disminucin de su nmero. Este
proceso se manifiesta despus de los 13 aos en los perros de morfotipo
grande pero no antes de los 11 aos en los perros de morfotipo pequeo.
Teniendo en cuenta la diferencia de esperanza de vida entre los perros
grandes y pequeos y ajustando la edad de ambos morfotipos a aos
68
Respuesta del Sistema Noradrenrgico al

envejecimiento cerebral en el perro.
Daniel Insua Rodrguez(1), M. Sarasa(3), V. Bernedo(2), G. Santamarina(2), M. Suarez(2) y P. Pesini(1).
(1) Departamento de Anatoma; (2) Departamento de Ciencias
Clnicas Veterinarias, Facultad de Veterinaria, Universidad de Santiago de Compostela, Espaa.; (3) Departamento de Anatoma, Embriologa y Gentica, Facultad de Veterinaria, Universidad de Zaragoza, Espaa.

fisiolgicos nuestros resultados sugieren que esa prdida de neuronas
no es lineal a lo largo de la edad de los animales, sino que comienza en
torno a los 65 aos fisiolgicos. Esto es congruente con lo descrito por
algunos autores en la especie humana (Vijayashankar y Brody, 1979, J.
Neuropathol. Exp. Neurol., 38:490-497).
CONCLUSIN: El efecto pronociceptivo del remifentanilo o la ciruga est asociado a una disminucin del ARNm del ROD en el GRD, pero
no en la ME. El estudio sugiere que la down-regulation del ROD participa
en la HA inducida por el remifentanilo y la ciruga.
Parcialmente financiado por FIS (PI466104746)

EFECTO DE LAS HORMONAS SEXUALES EN LA
PROLIFERACIN NEURAL DE LA CORRIENTE MIGRATORIA ROSTRAL DEL RATN ADULTO
Bcl-x(L) protege de la toxicidad mediada

por la sobrecarga de calcio en clulas de
neuroblastoma humano
Daniel Tornero Prieto,Valentn Cea
Unidad Asociada Neurodeath. Dpto. Ciencias Mdicas. Universidad
de Castilla-La Mancha. Albacete.
El calcio es el segundo mensajero ms importante dentro de las clulas y es capaz de inducir la muerte de las clulas en respuesta a determinados estmulos patolgicos ocmo la isquemia. Tambin se han descrito alteraciones en la homeostasis del calcio en algunas enfermedades
neurodegenerativas. Tras la isquemia, muchas neuronas se ven expuestas
a una estimulacin exagerada con glutamato, generando una anormal entrada de calcio al citoplasma. La mitocondria acta como sensor de los
niveles de este catin y responde con la liberacin de sustancias desde el
espacio intermembranal que van a dirigir la muerte de la clula tanto por
apoptosis como por necrosis. Las protenas de la familia de Bcl-2 son capaces de modular la permeabilizacin de las membranas mitocondriales.
En este trabajo, hemos utilizado un modelo de clulas de neuroblastoma
humano para estudiar los procesos que tienen lugar en la mitocondria
tras el tratamiento con ionomicina (2M) y la forma en la que estos son
regulados por un miembro anti-apopttico de esta familia. A travs de
tcnicas fluorimtricas y electrofisiolgicas se han estudiado procesos
como la prdida del potencial mitocondrial y la permeabilizacin de la
membrana interna de esta organela. Los resultados obtenidos, indican que
la exposicin de la mitocondria a elevadas concentraciones de calcio da
lugar a la prdida del potencial mitocondrial y a una permeabilizacin de
su membrana interna, y que Bcl-xL inhibe hasta en un 80% ambos procesos, disminuyendo la muerte celular asociada.
Trabajo financiado, en parte, por la Fundacin La Caixa, el Fondo
de Investigaciones Sanitarias y la Junta de Comunidades de Castilla-La
Mancha.

EL REMIFENTANILO Y LA CIRUGA DISMINUYEN
LOS NIVELES DE ARNm DE LOS RECEPTORES OPIOIDES DELTA, EN UN MODELO DE DOLOR POSTOPERATORIO EN EL RATN
David Cabaero Ferri, Garca-Nogales P, Clrier E, Campillo-Ajenjo
A, Romero A., Puig MM.
Unitat de Recerca en Anestesiologia, IMIM. Ctedra de Dolor UABIMAS-MENARINI. Hospital del Mar, Barcelona
OBJETIVO: La administracin de remifentanilo incrementa la hiperalgesia y alodinia (HA) postoperatorias por activacin de los receptores
opioides-mu (ROM). Nuestro objetivo ha sido determinar cambios en la
expresin de ROM y delta (ROD), inducidos por la ciruga o la administracin de remifentanilo.
MTODOS: Bajo anestesia con sevoflurano, ratones CD1 fueron
sometidos a una incisin plantar o recibieron remifentanilo subcutneo
(0,04 mg/Kg). Posteriormente fueron sacrificados a las 4 horas y 2, 4 y 7
das. Los niveles de ARNm (PCR-tiempo real) y protena (western blot)
de ROM y ROD se evaluaron en mdula espinal (ME) y ganglio de la raz
dorsal (GRD).
RESULTADOS: En condiciones basales, los niveles de ARNm de ROD
en GRD y ME fueron 5,80,93 y 11,783,38 veces superiores a los de
ROM (p<0,01). En el GRD la ciruga provoc una reduccin del ARNm
del ROD, a los 2 (-56%) y a los 4 das (-73%) (p<0,001). El remifentanilo
disminuy los niveles de ROD, a las 4 horas (-36%) y los 2 das (-47%)
(p<0,01). En ambos casos los niveles se recuperaron el da 7. No se observaron cambios en el ARNm del ROM o en las protenas de ambos
receptores. En ME tampoco se observaron cambios significativos.
Daz Lpez D., Weruaga E., Valero J., Baltans F.C., Recio J.S., Alonso
J.R.
Laboratorio de Plasticidad Neuronal y Neurorreparacin. Instituto
de Neurociencias de Castilla y Len. Universidad de Salamanca.
Salamanca.
Una de las regiones del sistema nervioso central de los mamferos
adultos con proliferacin neural persistente es la zona subventricular
(ZSV). Las clulas generadas migran tangencialmente a lo largo de la corriente migratoria rostral (CMR) hasta alcanzar el bulbo olfatorio (BO),
donde se distribuyen radialmente. La incorporacin de estas nuevas neuronas al BO es de gran importancia para la discriminacin olfatoria.
Hemos analizado el efecto de diferentes estadios hormonales fisiolgicos del ratn en la proliferacin neural en las regiones anteriores. Para
ello utilizamos tres grupos experimentales: machos, hembras sincronizadas en estro y hembras preadas. Las zonas estudiadas fueron la ZSV y la
CMR en toda su extensin.
Los grupos de hembras presentaron un porcentaje de clulas proliferativas mayor que los machos, en toda la CMR. Este valor fue determinado segn ncleos positivos al antgeno nuclear de clulas proliferativas
frente al total. El anlisis realizado con el marcador especfico para astrocitos protena cida fibrilar glial o con -tubulina III indica que estas
clulas proliferativas son mayoritariamente neuroblastos. La densidad de
fibras serotonrgicas tambin fue superior en todas las hembras en la
CMR. Con la tcnica TUNEL se observaron nicamente diferencias en
apoptosis en la ZSV, siendo superior en los machos.
As pues, probablemente los estrgenos aumenten la proliferacin
neural en la CMR a travs de la serotonina y podran ejercer un efecto
neuroprotector en la ZSV.
Trabajo financiado por: DGI (SAF2006-05705), Ministerio de Sanidad
y Consumo (PNSD), Junta de Castilla y Len, Federacin de Cajas de
Ahorro de Castilla y Len.

El anlisis de los ganglios de la raz dorsal con la tcnica de microarray revela
un patrn especfico de mRNAs relacionados con el dolor neuroptico que se encuadran diferencialmente regulados en
el desarrollo postnatal.
David Vega Avelaira, Andrew Moss, Sandrine Granton, Ramine
Hosseini, Jaqueta Meredith-Middleton y Maria Fitzgerald
University College of London, UK
El dolor neuroptico, causado por lesiones en el nervio o secundarias
de otras enfermedades, aparece tanto en adultos como en infantes si
bien se desconoce su evolucin durante el desarrollo postnatal. Las ratas
neonatas no desarrollan alodinia mecnica tras la lesin del nervio y se
recuperan ms rpidamente que los adultos del dao en la mdula espinal. Las diferencias en comportamiento entre los adultos y los neonatos
sugieren que existen diferentes mecanismos implicados en la respuesta a
los estmulos nocivos. As, decidimos utilizar la tecnologa de microarrays
de Affymetrix como tcnica de escrutinio de genes para comparar la
regulacin gnica en los ganglios de la raz dorsal en ratas jvenes y adultas despus de lesionar un nervio perifrico. Se recogieron los ganglios
L4 y L5 de la raz dorsal de ratas adultas y de ratas de 10 das tras ser
operados con el modelo de dolor neuroptico denominado spare nerve
injury.
Para discernir aquellos genes asociados con dolor neuroptico proseguimos un escrutinio de genes utilizando un test limma con el progra-
69
ma R, de tal manera que se obtuvieron tres listas: genes especficos del

adulto (1), del joven (2) y aquellos genes que fueron regulados postnatalmente y a su vez asociados con dolor neuroptico (3).
Finalmente, Se validaron los genes de dichas listas mediante PCR
cuantitativa. Este nuevo acercamiento para el escrutinio nos ha permitido indagar en los cambios producidos en dolor neuroptico durante el
desarrollo postnatal mediante la comparacin entre animales jvenes y
adultos despus de daar el nervio.

Interaccin de los receptores dopaminrgicos D4 y mu opioides en el estriado y sustancia negra durante el consumo crnico de morfina
Diana Surez Boomgaard(1), Kjell Fuxe(2), Mara Dolores ReinaSnchez(1), Beln Gago(1), Juan Jos Valderrama(1), Adelaida de la
Calle(1), Alicia Rivera (1)
1 Dpto. Biologa Celular, Universidad de Mlaga; 2 Dpto. Neurociencias, Instituto Karolinska (Suecia)
Pese a que la morfina es un potente analgsico, su uso para fines
teraputicos se ve reducido debido a los cambios neuroadaptativosque
ocurren a corto y largo plazo como resultado de su consumo. Estos cambios conducen al desarrollo de tolerancia, dependencia y adiccin. Debido
a que la morfina activa las vas mesolmbica y nigroestriatal, los receptores
dopaminrgicos son cruciales mediando las acciones producidas por esta
droga. Estudios previos del grupo de investigacin han demostrado la
colocalizacin de los receptores D4 y mu opioides en el estriado y su interaccin en la fase inicial del consumo a morfina. El objetivo del presente
trabajo es estudiar la interaccin de los receptores D4 y mu opioides
durante el consumo crnico de morfina, utilizando tcnicas inmunocitoqumicas y de anlisis de imagen para evaluar cambios en la expresin de
tiroxina hidroxilasa (TH), receptores mu opioide (MOR) y los factores de
transcripcin c-Fos, Fos B-delta Fos B y CREB en el estriado y sustancia
negra. Los resultados obtenidos demuestran que la activacin del receptor D4 con el agonista especfico PD168,077 bloquea parcialmente los
cambios que el tratamiento crnico con morfina produce sobre la expresin de TH, MOR, Fos B-delta Fos B y CREB. Por el contrario, PD168,077
no modifica las propiedades analgsicas de la morfina. Estos resultados
sugieren que el receptor D4 puede participar en los procesos que ocurren durante el desarrollo de la adiccin a morfina.
Financiado por BFU2005-06615 y CTS-0161.

Respuesta de las neuronas del ncleo cuneado de ratas anestesiadas a la estimulacin natural, pero controlada, de su campo receptor con soplos de aire a presin.
Diego Alonso Pablos, Patricia Rodrguez Castro,Vanesa Domnguez,
Jos Antonio Lamas
Laboratorio de Neurociencia. Departamento de Biologa Funcional,
Facultad de Biologa, Universidad de Vigo.
La actividad electrofisiolgica de las neuronas de los Ncleos de las
Columnas Dorsales (NCD) ha sido estudiada en gatos anestesiados pero
menos en la rata. Uno de los principales problemas a la hora de estudiar
el sistema somatosensorial es estandarizar el sistema de estimulacin.
En general los estmulos (soplos, golpes, presin) se aplican manualmente con poca o nula repetibilidad (Snchez et al., 2006, Neuroscience
141:487-500).
En este trabajo estudiamos el patrn de respuesta de las clulas del
ncleo cuneado (NC) de ratas adultas anestesiadas, a la aplicacin de soplos de duracin, intensidad y frecuencia controladas. El aire a presin de
una botella se hizo pasar a travs de unas vlvulas electrnicas controladas por un programa informtico (RSC-200, Biologic) desde el ordenador
de registro (Spike2). Este sistema permiti generar 4 estmulos de forma
independiente combinarlos de forma flexible y repetible. La posicin de
los cuatro tubos sobre el campo receptor se modific manualmente.
Los registros extracelulares preliminares muestran que 22 de las 45
clulas registradas responden a los soplos aplicados. De las clulas que
70
responden, el 54% (12/22) lo hacen con una rfaga de potenciales de accin y adaptan fuertemente. Un 41% (9/22) disparan una rfaga inicial, pero
mantienen un cierto nivel de respuesta durante todo el estmulo.Tan solo 1
clula (4.5%) no mostr ningn signo de adaptacin en respuesta a pulsos
de 1 segundo de duracin. La latencia inicial de la respuesta fue de 43 ms
mientras que la latencia al punto de mxima respuesta fue de 53 ms (n=15).
El sistema de estimulacin desarrollado permitir en un futuro estudiar la
respuesta de las neuronas somatosensoriales con estmulos estndar.
Financiado por MEC (BFU2005-03494) y Xunta de Galicia (PGIDIT06PXIC310095PN).

Transplantes de clulas madre embrionarias como terapia celular en un modelo de
ELA
Diego Pastor Campos, Maria del Carmen Viso Leon, Salvador Martinez Perez
Instituto de Neurociencias
La posibilidad de generar neuronas funcionales a partir de clulas
embrionarias (CME) ha sido demostrada, in vitro, en algunos trabajos
recientes. Ahora bien el hecho de poder utilizar este descubrimiento para
teraputica humana es todava una posibilidad que ha de demostrarse.
El desarrollo de estrategias de terapia celular con fines regenerativos
en enfermedades degenerativas de motoneuronas, como la ELA, ha visto
recientemente datos muy prometedores. Se han producido motoneuronas in vitro a partir de clulas madre embrionarias de ratn; adems
estas clulas han sido capaces de regenerar axones motores e inervar
msculos una vez trasplantadas a la mdula (Wichterle y col. 2002; Miles
y col., 2004). Esto nos presenta la posibilidad de regenerar motoneuronas
a partir de CME, por lo tanto recuperar la funcin motora perdida.
Tambin se ha observado neuroproteccin y recuperacin funcional
tras el transplante de clulas madre hematopoyticas en modelos animales de degeneracin de motoneuronas (Cabanes et. al 2007).Hemos
observado tras analizar 21 ratones con degeneracin de motoneuronas
(mdf) transplantados con CME una mejora de su funcin motora. La permanencia de las CME durante el primer mes del transplante se ha comprobado mediante cortes histolgicos y marcadores especficos. Estamos
analizando los mecanismos causales de la mejora motora, que si bien no
parecen debidos a una recuperacin neural, podran ser producidos por
secrecin de factores neurotrficos a partir de las CME o su diferenciacin como clulas gla.
Financiado por:Myelina ELA Fundation 2006-2007; Catedra ELA
(Fundacin Digenes, UMH, Ayuntamiento de Elche); GV 05/080;
RD06/0010/0023; DFU2005-09085

Funcin de la Apolipoprotena D en la regeneracin de nervios perifricos. Un estudio
en ratones modificados genticamente.
D. Snchez Romero1, S. do Carmo2, E. Martnez Pinilla3, A. Navarro
Incio3, J.Tolivia Fernndez3, E. Rassart2 y M. D. Ganfornina1.
1. Instituto de Biologa y Gentica Molecular-Departamento de Bioqumica y Biologa Molecular y Fisiologa, Universidad de ValladolidCSIC, Valladolid; 2. Dpartement des Sciences Biologiques, Universit du Qubec, Montral, Canada; 3. Departamento de Morfologa
y Biologa celular. Universidad de Oviedo. Asturias.
Apolipoprotena D (ApoD), un miembro de la familia de las lipocalinas, responde a la lesin de los nervios perifricos y ante variadas
enfermedades desmielinizantes con un aumento en su expresin y secrecin al medio extracelular. Hemos realizado un estudio electrofisiolgico
del nervio citico en ratones knockout de ApoD, donde se observa una
menor velocidad de conduccin del componente motor del nervio citico. Estos resultados sugieren una alteracin de la mielina en ausencia de
ApoD, lo que a su vez puede implicar a esta lipocalina en los procesos de
regeneracin ante la lesin en axones mielinizados. El efecto neuroprotector de ApoD ha sido demostrado en organismos modelo sometidos
a estrs oxidativo experimental (Sanchez et al., 2006, Current Biology,
16:680-687; Ganfornina et al., 2007, enviado).

Presentamos aqu un estudio del proceso de degeneracin y regeneracin del nervio citico en un modelo de lesin mediante pinzamiento
en ratones ApoD-KO, ratones transgnicos de sobre-expresin de ApoD
en neuronas, y controles silvestres. En este modelo hemos analizado la
funcin del nervio lesionado a nivel de organismo completo (pruebas
comportamentales motoras y sensoriales); a nivel electrofisiolgico (registros de potencial de accin compuesto motor); y a nivel tisular-celular
(morfometra, histoqumica, e inmunohistoqumica con marcadores de
mielina, clulas de Schwann reactivas a la lesin, y regeneracin axonal).
Asimismo, se tomaron muestras de RNA de segmentos distales-proximales a la lesin. El anlisis de expresin de genes implicados en la regeneracin nerviosa en nuestras condiciones experimentales puede relacionar
estos genes con las redes de sealizacin de ApoD.
drives clathrin-mediated endocytosis. Internalized Tac-NR3A accumulates

in recycling endosomes but seems to be excluded from late endosomes.
Using deletion/mutagenesis studies, we identified a membrane proximal
tyrosine-based signal (YWL) which is sufficient and necessary for NR3A
internalization. This motif is conserved in NR3A and NR3B subunits. Further, we found that the adaptor protein PACSIN1, apart from modulating endocytosis, modifies the sorting or kinetics of NR3A accumulation
into recycling compartments through motifs independent of the YWL
endocytic signal. Current studies are directed to define the underlying
endocytic mechanisms and understand the role of PACSIN1 on NR3A
receptor recycling and sorting.
Funding: Marie Curie IRG, NARSAD and Hereditary Disease Foundation (to I.P.O.).
Clonaje y expresin funcional de una nueva isoforma de la subunidad delta del canal epitelial de sodio en cerebros humanos y de mono
Domingo David Afonso Orama(1), Ignacio Cruz-Muros(1),
Teresa Girldez(2), Vctor Garca-Marn(3), Toms Gonzlez-Hernndez(1) y Diego lvarez de la Rosa(2)
(1) Departamento de Anatoma, Facultad de Medicina, Universidad
de La Laguna, La Laguna, Tenerife, Espaa. (2) Unidad de Farmacologa, Universidad de La Laguna, La Laguna, Tenerife, Espaa. (3)
Servicio de Neurociruga, Hospital Universitario de Canarias, Tenerife, Espaa
Influencia de los factores presentes en el

Liquido Cefalorraqudeo de los pacientes
de Esclerosis Mltiple sobre el citoesqueleto neuronal.
El canal epitelial de sodio (ENaC) es un miembro de la familia de

canales de sodio independientes de voltaje sensibles a amiloride (ENaC/
DEG). Las subunidades alfa, beta y gamma se expresan abundantemente
en diversos tejidos epiteliales, donde han sido bien caracterizadas. Una
subunidad delta ha sido descrita tambin en el sistema nervioso central, aunque sus patrones histolgicos de distribucin son desconocidos.
Nosotros hemos aislado una nueva isoforma delta (delta2) de cerebro
humano y estudiado el patrn de expresin tanto de la isoforma conocida
(delta1) como de la nueva (delta2) en el telencfalo humano y de mono.
ENaC delta2 se produce por una combinacin de inicios de transcripcin
alternativos, un cambio de marco de lectura en el exn 3 y un splicing
alternativo del exn 4, y forma un canal funcional de sodio sensible a amiloride cuando se coexpresa con las subunidades ENaC accesorias beta y
gamma. Comparndolo con el canal ENaC (alfabetagamma), la interaccin
entre delta2, beta y gamma es funcionalmente ineficiente. Ambas isoformas delta (delta1 y delta2) de ENaC se expresan ampliamente en clulas
piramidales de la corteza cerebral de humano y mono, y en diferentes
poblaciones neuronales de ncleos telenceflicos subcorticales. La utilizacin de tcnicas de doble marcaje muestra un bajo nivel de colocalizacin
entre ambas isoformas (5-8%), sugiriendo una funcin especfica para cada
una de ellas.

Molecular pathways for NR3A internalization
Edouard SAINT-MICHEL, I. Lpez-Garcia and I. Prez-Otao
Laboratorio de Neurobiologa Celular, Departamento de Neurociencias, Centro de Investigacin Mdica Aplicada (CIMA), Universidad de Navarra, Pamplona.
NR3A subunits are non-conventional members of the NMDA receptor (NMDAR) subunit family and have the potential to modulate NMDARdependent synaptic plasticity by altering both the calcium permeability
and magnesium sensitivity of the receptor complexes. We have recently
shown that their functional expression is regulated by endocytosis and
reported a role for the multifunctional adaptor PACSIN1 in facilitating
NR3A endocytosis in neurons. However, the molecular signals which mediate the endocytosis of NR3A-containing NMDARs remain unclear.
To map potential endocytic signals in NR3A, we fused different fragments of the NR3A intracellular carboxy-terminal domain to the interleukin 2 receptor (Tac) and assessed their endocytic abilities. We found
that the NR3A C-terminus contains an autonomous endocytic signal that
BELTRAN BELEA E., Lafuente E.M, Hernndez, A., Casanova, B.,

Coret, F., Bosca, I., Burgal, M.
Laboratorio de Esclerosis Mltiple. Centro de Investigacin Prncipe Flipe, Valencia (Espaa). Servicio de Neurologa del Hospital
Universitario La Fe, Valencia (Espaa). Servicio de Neurologa del
Hospital Clnico Universitario, Valencia (Espaa).
La discapacidad permanente que aparece en la Esclerosis Mltiple
(EM) depende del grado de afectacin neuroaxonal, y es en este sentido
donde el concepto de neuroproteccin adquiere relevancia. En la actualidad, nicamente la capacidad de remielinizacin de una placa de EM se
ha podido establecer como factor de neuroproteccin. La remielinizacin
efectiva necesita de la integridad funcional del axn, la cual est determinada por la estructura del neurofilamento (NF), que depende de la
fosforilacin de la subunidades que lo forman. El objetivo de este trabajo
consiste en determinar la presencia de factores existentes en el LCR que
condicionan la destruccin-reparacin axonal. Para ello, se han utilizado
muestras de LCR de controles y de pacientes de EM de las diversas formas clnicas, analizando su efecto sobre cultivos primarios de neuronas
granulares de cerebelo, no mielinizadas, mediante tcnicas inmucitoqumicas y de Microcopa Confocal. Los resultados indican que factores presentes en el LCR de los paciente de EM inducen una disminucin en la
densidad intracelular de la subnunidad ligera del neurofilamento (NFL),
as como una variacin en el estado de fosforilacin de las subunidades
media (M) y pesada (H) del neurofilamento. Puesto que el NF es el resultado de un equilibrio dinmico entre las subunidades pesada, media y
ligera, y para ensamblarse correctamente y ser funcionalemente eficaz
necesita que las subunidades H y M que formarn el NF al ensamblarse
sobre la L estn correctamente fosforiladas, las alteraciones observadas
pueden influir en la desorganizacin del entramado del citoesqueleto, y
en la alteracin axonal observada en EM.

SUSTRATOS DERIVADOS DEL QUITOSANO PERMITEN LA ADHESIN Y CRECIMIENTO DE CLULAS
PROMOTORAS DE LA REGENERACIN AXONAL
Eduardo Martn Lpez, Manuel Nieto Daz1,2 y Manuel Nieto
Sampedro1,2
1. Grupo de Plasticidad Neural. Instituto Cajal (CSIC) Madrid. 2.
Unidad de Neurologa Experimental. Hospital Nacional de Parapljicos (SESCAM) Toledo
Una estrategia prometedora en la reparacin de lesiones medulares
es la utilizacin de sustratos que promuevan el crecimiento axonal o la
adhesin de clulas promotoras del mismo. En este trabajo hemos ensayado la proliferacin y supervivencia en combinaciones de biomateriales
derivados de Quitosano (Cheng et al., 2003), Gelatina (Cheng et al., 2003,
Biomaterials 24:2871-80; Huang et al. 2005, Biomaterials. 26:7616-27) y
Polilisina (PLL) (Mingyu et al., 2004. J. Biomaterials Appl. 19:59-75) durante
24 y 96 horas, de neuronas embrionarias (E17) de corteza e hipocampo,
astrocitos postnatales, gla envolvente de bulbo olfatorio (GEBO) y clu-
71
las transformadas C6 y PC12. No se observaron diferencias significativas

entre diferentes sustratos en la supervivencia de las neuronas, aunque en
la mezcla de quitosano/gelatina mostr mayor emisin neurtica. La GEBO
aument significativamente su tasa de proliferacin en quitosano/gelatina
con respecto al resto de biomateriales a las 96 horas, observndose un
comportamiento similar en los cultivos de clulas C6. Los astrocitos proliferaron en quitosano y quitosano/PLL a las 24 horas, aunque en todos
los casos la proliferacin se redujo a las 96 horas. La lnea celular PC12
prolifer bien sobre sustratos que contenan PLL a las 24 horas, pero no a
las 96 horas. Independientemente de las diferencias observadas, en todos
los experimentos la tasa de proliferacin/supervivencia de las distintas clulas fue menor que la observada en cultivos sobre PLL sola. En conjunto,
nuestros resultados sealan a la combinacin quitosano/gelatina como el
sustrato ms idneo para ser utilizado como sustrato-puente en lesiones
medulares, al ser fcilmente moldeables y permitir la adhesin de clulas
promotoras del crecimiento axonal.

Los agonistas cannabinoides regulan la
diferenciacin celular de progenitores
de oligodendrocitos
Oscar Gmez, Guillermina Almazn, Angel Arvalo-Martn, Daniel Garca-Ovejero, Ana Rubio, Eduardo Molina-Holgado.
Hospital Nacional de Parapljicos de Toledo
En nuestro laboratorio se ha demostrado la existencia de receptores
de cannabinoides tipo 1 (CB1) oligodendrocitos in vivo e in vitro, estas
clulas tambin expresan el receptor tipo 2 (CB2). Las alteraciones de la
mielina en las que estn implicados los oligodendrocitos son de las patologas ms importantes que afectan al sistema nervioso central. Sin embargo, existen progenitores de oligodendrocitos en el Sistema Nervioso
Central que son reclutados a las zonas desmielinizadas tanto en modelos
experimentales de desmielinzacin como en esclerosis mltiple. La activacin de los receptores CBs in vitro induce la supervivencia de progenitores de oligodendrocitos y ejercen un efecto positivo sobre la remielinzacin en ratones infectados con el virus de Theiler, usado como modelo
de Esclerosis Mltiple. Teniendo en cuenta todos estos datos, el objetivo
del presente estudio fue determinar si los agonistas de cannabinoides
ejercen acciones pro-diferenciadoras en progenitores de oligodendrocitos in vitro. Para ello, los progenitores de oligodendrocitos se purificaron
a partir de cultivos de cerebro de rata neonatal a los que se les retiraron
los factores de crecimiento para inducir la diferenciacin. El tratamiento
con cannabinoides aceler la maduracin de oligodendrocitos hacia un
fenotipo MBP positivo.Adems los patrones morfolgicos de estas clulas
corresponden a estadios ms maduros en los que la arborizacin est
muy desarrollada. El tratamiento con antagonistas cannabinoides tuvo un
efecto opuesto. Todos estos resultados indican un papel fundamental del
sistema endocannabinoide en la diferenciacin de los progenitores de
oligodendrocitos y la maduracin

Estudio de un modelo animal triple transgnico deficiente en la protena tau y que
sobrexpresa GSK3-
Elena Gmez de Barreda Santiago, Jess vila y Mar Prez
Centro de Biologa Molecular Severo Ochoa, CSIC/Universidad
Autnoma de Madrid
Las tauopatas son enfermedades neurodegenerativas que se caracterizan por la presencia en el cerebro de acmulos de la protena tau hiperfosforilada. Una de las kinasas responsables de esa hiperfosforilacin de
tau es GSK-3.Trabajos previos de nuestro grupo observaron dficit cognitivo y muerte neuronal en ratones VLW/Tet/GSK3-, que sobrexpresaban GSK3- y la protena tau humana con tres mutaciones presentes en
un tipo de tauopata, la demencia frontotemporal asociada al cromosoma
17 (FTDP-17) (Lucas et al., 2001, EMBO J 20:27-39). Con el fin de estudiar
el papel de tau en la patologa de este ratn, se han generado ratones
triple transgnicos deficientes en la protena tau y que sobrexpresan la
enzima GSK-3. Estos ratones triple transgnicos Tau-/- /Tet/ GSK3-
se obtuvieron a partir del cruce de ratones Tau-/- con ratones tTA y
BiTetO. Se ha caracterizado el patrn de expresin de los transgenes en
72
los cerebros y en los de sus correspondientes controles Wt, Tau-/- y Tet/

GSK3- mediante western-blot e inmunohistoqumica con anticuerpos
frente a tau, GSK3-, -galactosidasa, etc. Asimismo, se pretende estudiar
la posible muerte neuronal, mediante marcadores como GFAP o caspasa3 activada. Resultados preliminares confirmaron un aumento de gliosis
reactiva en los ratones Tau-/- /Tet/GSK3-. Adems, los resultados hasta
ahora obtenidos con un test de comportamiento parecen indicar un dficit cognitivo en estos ratones. Estos datos preliminares nos sugieren
la posible implicacin de otras protenas, diferentes de tau, susceptibles
de fosforilacin por GSK-3, como la -catenina, tambin implicada en
procesos de supervivencia celular.

El sildenafilo previene los dficits neuroqumicos producidos por la 3,4 metilendioximetanfetamina (MDMA, xtasis)
Elena Puerta Ruiz de Aza, Beatriz Goi, Berta Lasheras, Norberto
Aguirre
Departamento de Farmacologa. Universidad de Navarra. Pamplona. Espaa
INTRODUCCIN: La 3,4 metilendioximetanfetamina (MDMA, xtasis) se consume con frecuencia junto con otras sustancias cuyas consecuencias ignoramos. Una de las combinaciones ms novedosas es la
compuesta por Viagra y MDMA (sxtasis). Si bien, no conocemos los
mecanismos por los que la MDMA lesiona las terminales serotonrgicas, el transportador de 5-HT juega un papel primordial. HIPTESIS: Los
inhibidores de la PDE5 incrementan los niveles de GMPc y por tanto la
actividad de la PKG. Como la PKG aumenta la actividad del transportador
de 5-HT, la combinacin Viagra+MDMA podra ser incluso ms txico
que la propia MDMA. MTODOS: La MDMA (3x 5mg/kg i.p., cada 2h) se
administr a ratas Wistar (290-340g) 30 min despus de la administracin
del sildenafilo (1,5 mg/kg p.o.). En paralelo, se administr intraestriatalmente KT5823 (2 nmol), Wortmanina (1 nmol) y 5-hidroxidecanoico (40
nmol) inhibidores selectivos de la PKG, PI3K y de los canales mitoKATP
respectivamente, antes de la combinacin sildenafilo/MDMA. Para ello se
implantaron cnulas (C315 G Plastics 1) mediante ciruga estereotxica.
Siete das despus se cuantificaron las concentraciones de 5-HT mediante
HPLC-ED. RESULTADOS: El tratamiento con sildenafilo (1,5 mg/kg p.o)
revirti completamente la prdida de 5-HT causada por la MDMA. Este
efecto neuroprotector fue anulado por KT5823, Wortmanina o 5-hidroxidecanoico. CONCLUSIONES: Nuestros resultados sugieren que la
fosforilacin de la Akt, la activacin de la PKG y la apertura de los canales
mitoKATP juegan un papel fundamental en el efecto protector del sildenafilo frente a los dficits serotonrgicos producidos por la MDMA.

CAMBIOS MOLECULARES Y FUNCIONALES EN EL
OJO Y LA RETINA DE UN MODELO DE GLAUCOMA
EXPERIMENTAL EN MINICERDOS
E. Vecino Cordero1, A. Bayon2, M. Hernndez1, M. Galds1, S. Pinar1, R.M. Almela2, A. Cozzi2, D. Rodriguez3
1. Dpto. Biologa Celular, Facultad de Medicina Universidad del Pas
Vasco; 2. Dpto. Ciruga y Medicina Animal. Universidad de Murcia.
Murcia; 3. Dpto. Bioqumica, Universidad de Salamanca.
OBJETIVO: Identificar los cambios moleculares y funcionales en el
ojo y retina durante la evolucin del aumento de la presin intraocular
(PIO) en el minicerdo.
MTODOS: Los ojos de 8 minicerdos han sido estudiados. Los ojos
izquierdos fueron operados cauterizando 3 venas epiesclerales con el
fin de incrementar la PIO mientras que los derechos se utilizaron como
controles. Se han estudiado y comparado mediante tonometra, retinografa, angiografa, paquimetra y electrofisiologa durante 8 meses tras
la operacin. Al final del estudio, los animales fueron eutanatizados, sus
retinas fijadas con paraformaldehdo y procesadas para la identificacin
de marcadores especficos para los distintos tipos celulares.
RESULTADOS: La elevacin de la PIO fue efectiva desde el mismo
da de la operacin y se mantuvo elevada durante la duracin del estudio
(n=5). El grosor corneal de los distintos animales fue similar. La elevacin

de la PIO indujo un ligero estrechamiento del anillo venoso, Las ondas a y
b del ERG disminuyeron en la amplitud (p<0.05). Se detect una disminucin en el nmero de clulas ganglionares, un aument de la expresin de
marcadores gliales as como de conexiones entre las clulas amacrinas.
CONCLUSIONES: Existe una correlacin entre los cambios vasculares y moleculares en periodos largos de elevacin de la PIO, de forma
similar a lo que sucede en el glaucoma.
Financiacin: ONCE, Fundaluce, Fundacin Americana contra el Glaucoma, MCYT (BFI2003-07177), UPV (00077.327-15350/2003).

Augmentation controls the fast rebound
from depression at a central synapse
Elizabeth Garca Prez, John Wesseling
Depto. Neurociencias, Centro de Investigacin Mdica Aplicada.
Universidad de Navarra
Short-term plasticity occurs at almost all types of central chemical synapses, and includes both positive and negative components i.e.
short-term enhancement and depression but the principles governing
how these interact, and what this implies for biological computation, are
largely unknown. This report shows that a little studied type of enhancement, termed augmentation, can operate independently of concurrent
depression, including at short times after the readily releasable pool has
been exhausted when it contains only recently recruited vesicles. Augmentation can potentiate exocytosis dramatically under these conditions,
up to four-fold in this study, and, in marked contrast to classic results
derived under reduced probability of release conditions, it can be driven
to a saturating level which occludes facilitation. Because of concurrent
pool depletion, augmentation does not typically enhance synaptic strength, however, but instead (1) causes single responses to rebound from
depression more quickly than RRP replenishment, and (2) accelerates the
subsequent emergence of depression, thereby resolving discrepancies in
recent timing estimates of synapse recovery. Thus, augmentation provides an instrument by which an initial burst of spikes can accelerate the
timing of release events during subsequent bursts, even for bursts which
are initiated after several seconds of rest. In contrast, no role was found
either for gradual vesicle priming, or for fast refilling of a highly releasable
kinetic subdivision of the readily releasable pool. In sum, augmentation
has key computational properties at depressing synapses during phasic
use, which are orthogonal to recovery mechanisms, such as pool refilling,
which restore full functionality.
estudio. El tamao del soma de las neuronas en los islotes de la capa II

de la corteza entorrinal disminuye en la enfermedad de Alzheimer, existiendo gran variabilidad en el tamao, y mostrando una morfologa ms
elptica que en el envejecimiento normal. En conclusin, la enfermedad
de Alzheimer evidencia cambios cuantitativos de la corteza entorrinal y
soma neuronal de los islotes de la capa II.

Mecanismo presinptico y especificidad de
la modulacin por serotonina de las respuestas sinpticas excitadoras producidas por fibras callosas sobre neuronas
piramidales corticales en el ratn.
Emilio Geijo-Barrientos, Jos A.Troca-Marn
Instituto de Neurociencias de Alicante, Universidad Miguel Hernndez - CSIC. San Juan, Alicante. Espaa.
Las fibras del cuerpo calloso forman sinapsis excitadoras sobre las
neuronas corticales contralaterales; las EPSCs evocadas por estas fibras
son moduladas por serotonina (5-HT). Hemos estudiado la especificidad
y los mecanismos de esta modulacin en una preparacin de rodajas
coronales (300 mm de grosor) de corteza cingular anterior de ratn en
la que se conservan las fibras callosas. Las neuronas piramidales se registraron mediante whole cell patch-clamp y se identificaron visualmente y
mediante tincin con biocitina. Las EPSCs callosas se activaron estimulando el cuerpo calloso en el lado contralateral y se registraron a -70 mV en
presencia de 5mM bicuculina. En las neuronas en las que la 5-HT (40 mM)
modific la amplitud de las EPSCs callosas observamos que: i) la aplicacin local de glutamato produce una corriente de entrada cuya amplitud
no se modific por 40 mM 5-HT; ii) durante el cambio de amplitud de las
EPSCs callosas inducido por 5-HT se modific el coeficiente de variacin
de la amplitud de dichas EPSCs; iii) la relacin de las amplitudes de pulsos
pareados (separados por 50 ms) se modific durante la accin de la 5-HT.
Por otra parte, no se observ correlacin entre el efecto de 40 mM 5HT sobre EPSCs callosas y EPSCs de origen intracortical registradas en la
misma neurona. Estos resultados muestran que la 5-HT modula las EPSC
evocadas por fibras callosas fundamentalmente mediante mecanismos
presinpticos y que esta modulacin difiere entre las diversas entradas
excitadoras de las neuronas corticales.
Financiacin: PI052561 (Instituto de Salud Carlos III).

EVALUACIN CUANTITATIVA DE LA CORTEZA ENTORRINAL EN LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER
Artacho-Prula E., Insausti A.M., Arroyo-Jimnez M.M., Marcos Rabal P., Mohedano-Moriano A., Cebada-Snchez S., Pro-Sistiaga P., Martnez-Ruiz J., Insausti R.
Laboratorio de Neuroanatoma Humana, Universidad de Castilla-La
Mancha, y Centro Regional de Investigaciones Biomdicas (CRIB).
Facultad de Medicina. Albacete.
La corteza entorrinal, situada a nivel del lbulo temporal medial rostral, est implicada en el procesamiento de la memoria. Nuestro propsito ha sido cuantificar el tamao y morfologa de la corteza entorrinal
en el envejecimiento normal y en la enfermedad de Alzheimer. Hemos
realizado un exhaustivo seccionamiento del lbulo temporal medial perpendicular a la lnea intercomisural con delimitacin citoarquitectnica de
la corteza entorrinal sobre cortes teidos con tionina del material sistemticamente seleccionado para el estudio cuantitativo. Usando el sistema
de estereologa CAST-Grid y software de cuantificacin morfomtrica
se determin el volumen de la corteza entorrinal as como parmetros
de tamao y forma. Las neuronas que constituyen los islotes de la capa
II de la corteza entorrinal fueron estudiadas cuantitativamente siguiendo
una seleccin sistemtica de las regiones de anlisis procedindose a la
obtencin de parmetros uni-, bi- y tri-dimensionales del soma neuronal
as como diferentes factores forma. Los resultados muestran un descenso
significativo del volumen de la corteza entorrinal en la enfermedad de
Alzheimer; sin embargo, el resto de parmetros de tamao y forma de la
corteza entorrinal no muestra cambios significativos entre los grupos de
Expresin de PSA-NCAM en la corteza prefrontal humana

Emilio Varea Lopez, Ramn Guirado, Esther Castillo-Gmez, Mara ngeles Gmez-Climent, Jos Miguel Blasco-Ibez, Carlos Crespo,
Francisco Jos Martnez-Guijarro, Juan Ncher
Unidad de Neurobiologa y Programa de Neurociencias Basicas y
Aplicadas. Departamento de Biologa Celular. Universitat de Valncia. Dr. Moliner 50, Burjassot 46100.
El cortex prefrontal de roedores adultos mantiene la capacidad de
remodelado neuronal. Estudios de neuroimagen en humanos han revelado que la estructura y funcin de esta zona se encuentra afectada en diversas patologas psiquitricas. Sin embargo, los mecanismos celulares que
controlan o participan en esta plasticidad todava no han sido elucidados.
La forma polisializada de la molcula de adhesin neuronal celular (PSANCAM) podra mediar estos cambios estructurales a travs de sus propiedades antiadhesivas. PSA-NCAM participa en el crecimiento neurtico
y en la synaptogenesis. Adems se producen cambios en su expresin en
paralelo al remodelado neuronal en diversas regiones del cerebro adulto.
La presencia de PSA-NCAM ha sido demostrada en el hipocampo y en
la corteza temporal del cerebro de humanos adultos, pero todava no ha
sido descrita su expresin en la corteza prefrontal. Utilizando tinciones
inmunohistoqumicas en cortes histolgicos de la parte rostromedial del
giro frontal superior humano se ha observado que PSA-NCAM se expresa en el neuropilo, mostrando un patrn laminado. Adems, se observa la
presencia de una subpoblacin de neuronas maduras, que no expresan
doblecortina y que presentan expresin de PSA-NCAM. Utilizando inmunohistoqumica doble se ha observado que la mayora de estas clulas
73
son interneuronas que expresan calbindina. La expresin de PSA-NCAM

en la corteza prefrontal humana es similar a la observada en roedores.
Dado que esta molcula ha sido relacionada con el remodelado neuronal
observable en modelos experimentales de depresin, puede inferirse su
papel en la plasticidad estructural de la corteza prefrontal de pacientes
con este desorden.

Cyclic Nucleotide Phosphodiesterase mRNAs distribution in mouse brain.
Emily Johansson, Eli Reyes-Irisarri, Roco Martn and Guadalupe
Mengod
Departament of Neurochemistry, Institut dInvestigacions, Biomdiques de Barcelona (CSIC-IDIBAPS), c/Rossell 161, 6, 08036
Barcelona
cAMP plays a significant role as second messenger in signal-transduction pathways, controlling multiple cellular processes in the brain. There
are eleven families of phosphodiesterases (PDE) that regulate cellular levels of cyclic nucleotides by controlling the degradation rates of cAMP or
cGMP. cAMP is involved in many inflammatory responses. PDE4 inhibitor
treatments exhibit profound antiinflammatory effects both in vivo and in
vitro. Thus, the knowledge of the expression sites of different PDE genes
in brain is of special importance for future studies on development of
specific inhibitors.
We are focusing our interest on the development of mouse models
for neuroinflammation and for multiple sclerosis. With this aim we have
first examined the distribution of mRNA coding for different cyclic nucleotide phosphodiesterases (PDE4A, PDE4B, PDE4C, PDE4D, PDE7A,
PDE7B, PDE8, PDE10A) in C57BL6 mouse brain by in situ hybridization
histochemistry and found that their neuroanatomical distribution coincides
with previous data obtained in our laboratory in rat brain.The hybridization
levels of PDE7B and PDE10A mRNA are highest in striatum. The different
hippocampal fields and cerebellum show strong hybridization for all PDEs
with one exception, PDE4C mRNA, which shows very weak expression.
High hybridization levels are also detected for PDE4A, PDE4B, and PDE4D
mRNAs in piriform cortex and for PDE7B in olfactory tubercle.
Knowledge about PDE expression in mouse brain will allow us to
study their regulation of the expression in brain in different animal models of neuroinflammation of both wildtype and knockout mice. Financed
by SAF2006-01243.

Fuentes de inhibicin para el colculo inferior de la rata: Proyeccin del ncleo
parolivar superior

El FGL, un pptido sinttico mimtico de la
molcula de adhesin celular neural, previene el dficit cognitivo inducido por estrs crnico y asociado al envejecimiento
Erika Borcel, Laura Prez-lvarez, Ana Isabel Herrero,Thomas Brionne, Elisabeth Bock, Carmen Sandi, Csar Venero.
Facultad Psicologa de la UNED, Madrid, Espaa. Ecole Polytechnique Fdral de Lausanne, Lausanne, Switzerland
La exposicin continuada a situaciones estresantes puede producir
un deterioro cognitivo relacionado con un dao neural en el hipocampo.
Entre los posibles mecanismos a travs de los cuales se puede producir
dicho dao neuronal se encuentra la molcula de adhesin celular neural
(NCAM; Sandi, 2004, Nat.Rev.Neurosci 5, 917-30;Venero et al., 2006, Eur.
J Neurosci 23, 1585-15), una molcula fundamental en procesos de plasticidad sinptica y de supervivencia neuronal.
En este trabajo investigamos si la exposicin de ratas Wistar macho
de 12 meses a un estrs crnico mltiple e impredecible acelera el deterioro cognitivo asociado al envejecimiento, a los 18 meses de edad. Asimismo, estudiamos el posible efecto neuroprotector del FGL, un pptido
sinttico mimtico de NCAM que, in vitro, es capaz de estimular el crecimiento de dendritas, la formacin de sinapsis y la supervivencia neuronal
(Cambon et al., 2004, J.Neurosci. 24, 4197-204). Los resultados indican
que el estrs crnico deteriorael aprendizaje y memoria espacial (laberinto acutico de Morris). Adems, los animales estresados mostraron
una prdida de neuronas granulares hipocampales, y una menor tasa de
supervivencia de clulas nuevas en el giro dentado en comparacin con
los animales no estresados. La administracin subcutnea del pptido FGL
durante el estrs previno tanto el deterioro cognitivo como el descenso
de la tasa de supervivencia de clulas nuevas inducido por estrs.
Estos resultados sugieren que el desarrollo de frmacos que mimetizan funciones de NCAM podra tener aplicabilidad teraputica para prevenir o atenuar el impacto cognitivo y neural de la exposicin crnica a
situaciones estresantes.

La hemotoxicidad como factor significativo en el desarrollo y mantenimiento de
co-activacon en el miembro inferior durante la locomocin: Un nuevo modelo
funcional de espasticidad medular.
Mara-Auxiliadora Aparicio, Albert S. Berrebi, Enrique Saldaa
Gonzlez Valdizn E., vila Martn G., Gmez Soriano J. and Taylor J.S.
Grupo de Funcin Sensitivomotora, Unidad de Neurologa Experimental, Finca La Peraleda s/n, Hospital Nacional de Parapljicos,
FUHNPAIN, CSIC, SESCAM, 45071 Toledo.
El ncleo parolivar superior (NPS) es un destacado componente del

complejo olivar superior de los roedores. En la rata todas sus neuronas
(unas 2600) son GABArgicas e inervan al colculo inferior (CI), y esto
lo convierte en una de las principales fuentes de inhibicin para el CI.
Para caracterizar la proyeccin del NPS al CI de la rata, hemos empleado
tcnicas de trazado antergrado.
El NPS inerva densamente todo el CI ipsolateral (ncleo central, corteza dorsal y corteza externa) y, a travs de la comisura del CI, dbilmente la corteza dorsal contralateral. Los axones del NPS son relativamente
gruesos (> 1,5 m) y ascienden por la parte medial del lemnisco lateral.
Sus ramas terminales forman dos plexos laminares en el CI ipsolateral: un
plexo medial, que recorre el ncleo central y la corteza dorsal en paralelo
a las lminas fibrodendrticas del CI, y uno lateral, situado en la corteza
externa, ms o menos paralelo a la superficie del CI. La proyeccin al
CI ipsolateral es topogrfica. Las neuronas mediales del NPS inervan la
regin ventromedial del ncleo central y la corteza dorsal, y la regin
ventrolateral de la corteza externa. Las neuronas progresivamente ms
laterales del NPS inervan regiones ms dorsolaterales del ncleo central
y la corteza dorsal, y regiones ms dorsomediales de la corteza externa.
Esta topografa es similar a la descrita para las proyecciones intracoliculares y corticocoliculares de la rata
(Saldaa y Merchn, 2005, en The Inferior Colliculus de Winer y
Schreiner [eds.]. Springer-Verlag, pp. 155-181).
Hasta la fecha el estudio de los mecanismos de espasticidad despus

de una lesin medular (LM) se ha limitado a los reflejos miotticos (Taylor et al., 2003 Eur. J. Neurosci. 11:363-8), los espasmos (Bennett et. al.,
2004, J. Neurophysiol. 91:2247-58) o los reflejos H (Kakinohana et al., 2006,
Neuroscience 141:1569-83). Sin embargo la co-activacin de msculos antagonistas despus de LM (Kaegi et al., 2002, Eur. J. Neurosci. 16:249-58)
durante la marcha puede aportar ms informacin sobre mecanismos clnicamente relevantes. La hemotoxicidad asociada a la hemorragia de la
LM nunca ha sido investigada como factor activo para el desarrollo de
co-activacin (c.f. Vierck and Light, 1999 Pain 83:447-57). Aqu presentamos el efecto de la hemotoxicidad sobre la actividad de los antagonistas
distales (Tibialis Anterior y Gastrocnemius Medialis) y proximales (Vastus
Lateralis y Bceps Femoris) durante la locomocin utilizando tcnicas de
electromiografa, hasta las 4 semanas tras la LM en el nivel T8 por hemiseccin, contusin severa o hemotoxicidad. Se han medido valores de integral, duracin y porcentaje de solapamiento de los antagonistas. Los datos
sugieren que la hemotoxicidad es un factor importante en el desarrollo y
mantenimiento crnico de la co-activacin, con valores superiores al de lesin convencional (hemiseccin o contusin). Adems la presencia de una
hemorragia puede interrumpir mecanismos endgenos responsables de la
recuperacin de los extensores como GM. En conclusin, el control de los
factores excitotxicos asociados con la LM es imprescindible para promover la recuperacin funcional y disminuir el desarrollo de la espasticidad
74

medular. Apoyo financiero del Dr.Taylor del SESCAM y de la Consejera de
Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla La Mancha. Becario: EGV
(JI03002R1); Equipamiento (EQ02015), Proyecto (0-4043-00).

Anlisis de la expresin de protenas Ga
en los rganos receptores olfatorios de
Drosophila melanogaster
Esther Alcorta Azcue,Tamara Boto y Carolina Gmez-Daz
Universidad de Oviedo
La transduccin olfatoria se desencadena por la unin de molculas
de olor a receptores acoplados a protenas G heterotrimricas. Nuestro objetivo a largo plazo es determinar para la olfaccin en Drosophila
cules son las variantes de protenas G asociadas a distintos tipos de
respuesta neuronal.
En este trabajo, se han analizado 5 genes que codifican para el fragmento G.alfa en Drosophila (Gi, Go, Gq, Gs y Gf), asociadas a distintas
cascadas de transduccin. Se ha comprobado la expresin de estas 5
protenas y sus transcritos en los rganos receptores olfatorios de Drosophila melanogaster (terceros segmentos antenales y palpos maxilares)
comparada con otros tejidos, por RT-PCR. Se ha encontrado expresin
diferencial dependiendo del transcrito. Aunque todas las protenas G.alfa
se expresan en cabeza y antena, no se ha conseguido ver expresin de Gf
ni de Gi en palpo maxilar. Adems, no parece haber expresin del transcrito Gq-RD ni en antena ni en palpo; ni del transcrito Go-RA en palpo,
aunque s se detecta en tercer segmento antenal.
Esta expresin diferencial de las distintas isoformas de G.alfa, unida a
las diferencias que aparecen en la secuencia de los distintos mRNAs en las
zonas reguladoras no codificantes, sugiere que existe una especializacin
en el papel de las protenas G en la recepcin olfatoria de Drosophila melanogaster. Este tema ser abordado ms en profundidad posteriormente
mediante tcnicas inmunohistoqumicas, as como pruebas de comportamiento olfatorio y electrofisiolgicas en individuos genticamente modificados para los genes codificantes de estas protenas.

Neuronas de proyeccin cortical noradrenrgicas y no-noradrenrgicas del Locus Coeruleus de la rata son susceptibles
de activacin por Hipocretina/Orexina
del Cid-Pellitero E., Garzn M.
Dpto. Anatoma, Histologa y Neurociencia, Facultad de Medicina,
Universidad Autnoma de Madrid
La narcolepsia es un trastorno del ciclo vigilia-sueo asociado a
hipofuncin de los pptidos hipotalmicos denominados Hipocretinas/
Orexinas(Hcrt/Ox). Las neuronas Hcrt/Ox del hipotlamo proyectan a
numerosas estructuras implicadas en el favorecimiento de la vigilia y la
activacin cortical, tales como el locus coeruleus (LC). Hemos estudiado
la distribucin de Hcrt/Ox en el LC de la rata, y la inervacin Hcrt/Ox de
neuronas del LC que proyectan a corteza cerebral. El trazador retrgrado
Fluorogold (FG) fue inyectado unilateralmente en la corteza frontal de 18
ratas y se detect la inmunorreactividad frente a Hcrt/Ox y/o FG en el
LC. Adems, se examin la naturaleza noradrenrgica o no-noradrenrgica de las neuronas del LC que proyectan a corteza cerebral mediante
deteccin inmunofluorescente doble de FG y tirosina-hidroxilasa (TH;
enzima de sntesis catecolaminrgica). El FG rellen somas neuronales y
ramificaciones dendrticas del LC ipsilateral (85.7%9.9%) y contralateral
(14.3%9.9%). El LC present intensa inmunorreactividad Hcrt/Ox, localizada en axones muy varicosos. Los axones Hcrt/Ox del LC mostraron
aposiciones cercanas con neuronas retrgradamente marcadas con FG.
Adems, los experimentos de inmunofluorescencia prueban que la mayora de neuronas marcadas retrgradamente con FG no expresan TH
(ipsilateral: 70.3%12.0%; contralateral: 73.0%12.3%). Estos resultados
indican que las neuronas Hcrt/Ox inervan intensamente el LC, y que la
accin vigilantgena de Hcrt/Ox podra deberse, en parte, a su influencia
excitadora sobre la actividad de neuronas del LC (noradrenrgicas y nonoradrenrgicas) que proyectan a corteza cerebral. La ausencia de esta
influencia en los pacientes con narcolepsia, podra contribuir a la aparicin de hipersomnolencia. Financiacin: BFU 2006-07430/BFI

Modulacin dopaminrgica de la expresin de PSA-NCAM, una molcula relacionada con la plasticidad estructural neuronal, en la corteza prefrontal medial.
Castillo Gmez E., Gmez-Climent M. A., Guirado R., Varea E., Blasco-Ibez J.M., Crespo C., Martnez-Guijarro F.J. & Ncher J.
Unidad de Neurobiologa, Departamento de Biologa Celular, Universitat de Valncia, Dr. Moliner, 50, Burjassot-46100, Valencia.
La dopamina (DA) est implicada en la patofisiologa de la depresin. Adems, la reduccin de los niveles de DA y el antagonismo de sus
receptores induce sntomas depresivos, mientras que el agonismo tiene
efectos antidepresivos. La hiptesis neuroplstica sugiere que alteraciones en la neuroplasticidad estructural podran participar en la etiologa
de la depresin. La corteza prefrontal medial (CPFm) est afectada por
este trastorno y presenta una intensa expresin de PSA-NCAM, una molcula relacionada con la plasticidad estructural neuronal que se expresa principalmente en interneuronas. Se estudi la relacin entre fibras
dopaminrgicas y neuronas que expresaban PSA-NCAM en la CPFm y
tambin si dichas neuronas co-expresaban el receptor D2. Con el fin de
evaluar los efectos de la DA sobre la neuroplasticidad estructural, sinapsis
y neurotransmisin inhibitoria en la CPFm, se analiz la expresin de
PSA-NCAM, sinaptofisina y GAD67 tras: a) deplecin cortical de DA con
6-OHDA, b) antagonismo del receptor D2 con haloperidol, y c) agonismo del receptor D2 con PPHT. Muchas fibras dopaminrgicas estaban
en estrecha relacin con neuronas PSA-NCAM inmunoreactivas. Estas
fibras presentaban puncta con expresin de sinaptofisina. La mayora de
las citadas neuronas co-expresaban el receptor D2. La expresin de PSANCAM, sinaptofisina y GAD67 en la CPFm disminuy con la 6-OHDA
y el haloperidol y aument con el PPHT. Nuestros resultados apoyan la
hiptesis neuroplstica sugiriendo que la DA, actuando a travs de receptores D2, podra modular la neuroplasticidad estructural y tambin la
conectividad, especialmente en la neurotransmisin inhibitoria.
Agradecimientos: MEC FPU AP2006-01953 y AP2005-4672

Alteracin de los niveles de expresin de
Prohibitin y ATP-sintasa en la sustancia
negra y corteza frontal en la enfermedad
de Parkinson
E. Prez Gracia, E. Dalf, M. Barrachina, I. Ferrer
Instituto de Neuropatologa. IDIBELL-Hospital de Bellvitge, Facultad
de Medicina, Universitat de Barcelona.
La Enfermedad de Parkinson (EP) es una enfermedad neurodegenerativa que consiste en la prdida de neuronas dopaminrgicas en la sustancia negra y la presencia intraneuronal de agregados de protenas llamados cuerpos de Lewy. Asimismo, la Demencia con cuerpos de Lewy, forma
pura (DCLp), se caracteriza por la extensin al neocrtex de la presencia
de estos agregados. Hay evidencias de que un mal funcionamiento mitocondrial sumado a otros factores puede ser relevante en el desarrollo
de estas enfermedades. Los niveles de dos protenas mitocondriales: la
prohibitina (chaperona mitocondrial) y ATP-sintasa- fueron examinados
mediante Western Blot, en la substancia negra (SN) y en la corteza frontal (CF) de EP, DCLp, Alzheimer espordico temprano (estadios IIA/B) y
avanzado (estadios V/VI C) y nueve controles.Se ha observado una disminucin en los niveles de expresin de ambas protenas en sustancia negra
en casos de EP respecto a los casos control. En cambio, se ha hallado un
aumento de la expresin de dichas protenas en corteza frontal de EP.
En CF de DCLp se ha observado un incremento de prohibitina, pero no
de los niveles de ATP-sintasa . En CF de los casos de Alzheimer, tanto
temprano como avanzado, no se ha observado cambios de expresin de
ninguna de las dos protenas. Estos resultados indican unas modificaciones
de la expresin de protenas mitocondriales que son especficas de la EP y
que aparecen en corteza frontal en estadios en los cuales aun no hay presencia de cuerpos de Lewy. Se acenta as, la presencia de modificaciones
mitocondriales antes de la aparicin de las caractersticas histolgicas de
la enfermedad de Parkinson.
75
ALTERACIN EN LA SENSIBILIZACIN MOTORA

INDUCIDA POR DROGAS DE ABUSO EN RATONES
CARENTES DEL RECEPTOR NK1
APOPTOSIS INDUCIDA POR ROTURAS EN EL ADN

EN CULTIVOS PRIMARIOS DE NEURONAS: EFECTO
PROTECTOR DE LA ALBMINA
Fadwa El Banoua, Eva del Rio, Carmen de Felipe

Instituto de Neurociencias, Universidad Miguel Hernandez-CSIC.
Apartado Correos 18, 03550 Sant Joan dAlacant. Alicante.
Baltans F.C.,Weruaga E.,Valero J., Airado C., Recio J.S., Alonso J.R.
Laboratorio de Plasticidad Neuronal y Neurorreparacin. Instituto
de Neurociencias de Castilla y Len. Universidad de Salamanca.
Salamanca.
La sensibilizacin motora es producida por muchas drogas de abuso, especialmente si son administradas a dosis altas y/o con incrementos
progresivos e intermitentes, y est caracterizada por la persistencia. Se
ha demostrado que existen diferencias individuales en la susceptibilidad
a sensibilizar a drogas, lo que podra considerarse una posible susceptibilidad para el consumo compulsivo. Trabajos previos del grupo han demostrado que el neuropptido sustancia P (SP) est implicado en los
efectos recompensantes y otras acciones de las drogas de abuso (Murtra
et al., 2000, Nature 405:180-3). El objetivo de este estudio es investigar
las variaciones interindividuales en la sensibilizacin motora inducida por
morfina y anfetamina en ratones knockout del receptor NK1, para posteriormente estudiar las posibles diferencias en la autoadministracin de
las drogas y establecer una correlacin de vulnerabilidad entre ambos
parmetros.
Tras la sensibilizacin de acuerdo con Ripley et al. (2002, Neuropharmacology. 43:1258-68), los animales se clasificaron en dos grupos:
sensibilizadores y no sensibilizadores. Nuestros resultados indican que el
porcentaje de ratones mutantes NK1-/- que desarrollan sensibilizacin es
significativamente menor que el de los silvestres, tanto en el caso del tratamiento con morfina como con anfetamina, lo cual indica que la sustancia
P, a travs de su receptor NK1, puede desempear un papel relevante en
la adquisicin de respuestas adaptativas tras la administracin repetida a
estas drogas. Adems sugieren que las variaciones interindividuales en la
expresin de la sensibilizacin en ambos genotipos se podran correlacionar con la vulnerabilidad individual a desarrollar una conducta adictiva y/o
una propensin a las recadas.
La apoptosis es un conjunto de eventos que desencadenan la muerte

de la clula de manera controlada. Este proceso puede desarrollarse a
travs de distintas rutas de sealizacin celular, relacionadas o no entre
s. Una de estas vas conduce a la fragmentacin del ADN provocando as
la muerte celular.
Nuestro estudio pretende analizar qu ruta de sealizacin induce
la apoptosis en cultivos primarios de neuronas. Adems, estudiamos el
posible efecto neuroprotector de la albmina frente a este mecanismo
apopttico. Para ello realizamos cultivos primarios de neuronas obtenidas
de embriones de rata (E17.5). Uno de los grupos experimentales fue cultivado en medio DMEM y otro grupo en medio DMEM + Albmina (2%
v/v). Ambos grupos experimentales fueron analizados a 1h, 6h, 12h, 24h,
72h y 100h de cultivo.
Los resultados demuestran que en estadios previos a la aparicin de
los cuerpos apoptticos (visualizados mediante la tcnica de TUNEL) se
detectan marcadores implicados en la sealizacin de roturas del ADN
(H2AX y pATM). Adems, demostramos que en todos los estadios analizados el nmero de neuronas que expresan H2AX, pATM y TUNEL es
menor en aquellos cultivos que contienen Albmina. As pues, la apoptosis
de estas neuronas viene precedida de roturas en la estructura de su ADN.
Adems, la albmina ejerce un mecanismo neuroprotector frente a este
mecanismo apopttico.
Este trabajo ha sido financiado por: DGI (SAF2006-05705), Ministerio de Sanidad y Consumo (PNSD), Junta de Castilla y Len, y Federacin
de Cajas de Ahorro de Castilla y Len.
EL XIDO NTRICO DE ORIGEN ENDOTELIAL RALENTIZA EL CRECIMIENTO AXONAL Y LA RECUPERACIN DE LA FUNCIN NEUROMUSCULAR TRAS
LA LESIN DE UN NERVIO
ANLISIS BIOINFORMTICO DE LA FILOGENIA DE

LA FAMILIA LGI
Federico Portillo Pacheco, Carmen R. Sunico, David Gonzlez-Forero, Sergey Kasparov, Bernardo Moreno-Lpez
La lesin de un nervio provoca sobreexpresin de la xido ntrico
(NO) sintasa neuronal (nNOS) en los conos de crecimiento, de NOS
inducible (iNOS) en macrfagos y de NOS endotelial (eNOS) en los vasa
nervorum. En este trabajo estudiamos la implicacin de las distintas isoformas de NO sintetizado en el crecimiento axonal y re-inervacin muscular
tras la lesin unilateral por aplastamiento del nervio hipogloso en ratas
adultas. El potencial de accin muscular compuesto (PAMC) evocado por
estimulacin elctrica del nervio desapareci tras la lesin y permaneci
as al menos durante una semana. Sin embargo, en animales tratados con
el inhibidor de amplio espectro de la NOS, L-NAME (90mg/kg/da), el
inhibidor especfico de la eNOS, L-NIO (20mg/kg/da) se observ cierta
recuperacin en el PAMC, no as con el esteroismero D-NAME, el inhibidor especfico de la nNOS (7-nitroindazol, 30mg/kg/da) de la iNOS
(aminoguanidina, 100mg/kg/da). Adems el nmero de axones motores
que recorrieron 10 mm durante 48h aument significativamente tras el
tratamiento con L-NAME L-NIO, pero no con 7-nitroindazol aminoguanidina, respecto a los animales tratados con vehculo. La inyeccin
intraneural de un adenovirus con capacidad para expresar el dominante
negativo de la eNOS indujo una aceleracin del crecimiento axonal y de
la recuperacin del PAMC, respecto a los tratados con adenovirus-eGFP.
Estos datos sugieren que el NO de origen endotelial ralentiza la recuperacin funcional de la unin neuromuscular por una disminucin en la
tasa de crecimiento axonal tras la lesin de un nervio.
Financiacin: MCYT (BFI2001-3186); MEC (SAF2005-00585); Consejera de Innovacin, Ciencia y Empresa de la Junta de Andaluca (CTS844)
76
Cardona Serrate F, Herranz-Prez V, Snchez-Mut JV, Prez-Tur J

Unidad de Gentica Molecular. Instituto de Biomedicina de Valencia
(C.S.I.C.)
El gen LGI1 (Leucine-rich Glioma Inactivated 1) humano fue identificado inicialmente como un gen supresor de tumores de glioma (1).
Posteriormente se demostr que mutaciones en este gen son causantes
de una epilepsia de tipo idioptico, la ADLTE (epilepsia lateral autosmica
dominante) (2).
La protena LGI1 es una protena de secrecin que se une a la superficie celular (3). En la regin N terminal est formada por 3 repeticiones
de dominios ricos en leucina (LRR) (1) flanqueados por dos dominios ricos en cistena, caracterstico de dominios extracelulares de protenas de
membrana o de protenas solubles (4). En la regin C terminal presenta 7
repeticiones del dominio EPTP (5), necesarias para la correcta secrecin
de LGI1 (3).
La familia LGI est formada por 4 protenas (LGI1 a LGI4), agrupadas
en base a la caracterstica comn de poseer la estructura anteriormente
descrita para LGI1. En el presente trabajo se estudia la filogenia de la familia mediante herramientas bioinformticas, as como su relacin con otras
protenas evolutivamente cercanas. Con este propsito se han utilizado
tres aproximaciones diferentes segn la zona de LGI que se utilice en los
alineamientos: la regin N-terminal, la C-terminal o la protena completa.
1. Chernova et al, 1998, 17:2873-81
2. Morante-Redolat et al., 2002. Hum Mol Genet 11:1119-28
3. Sirerol-Piquer et al., 2006, Hum Mol Genet 15:3436-45
4. Buchanan & Gay, 1996, Prog Biophys Mol Biol 65:1-44
5. Staub et al., 2002, Trends Biochem Sci 27:441-4

Efecto del antioxidante CR-6 en la isquemia/reperfusin cerebral.
Fernando J. Prez-Asensio(1), ngel Messeguer(2), ngel Chamorro(3), Anna M. Planas(1)
1 Departamento de Isquemia Cerebral y Neurodegeneracin, Instituto de Investigaciones Biomdicas de Barcelona (IIBB)-Consejo Superior de Investigaciones Cientficas (CSIC), Institut dInvestigacions
Biomdiques August Pi i Sunyer (IDIBAPS), Barcelona; 2 Departamento de Qumica Orgnica Biolgica, Instituto de Investigaciones
Qumicas y Ambientales de Barcelona (IIQAB)- Consejo Superior
de Investigaciones Cientficas (CSIC), Barcelona; 3 Unidad de Ictus,
Servicio de Neurologa, Hospital Clnic, IDIBAPS, Barcelona.
INTRODUCCIN:Varios agentes son neuroprotectores frente a la
isquemia cerebral en animales de experimentacin a pesar de que todos los ensayos clnicos realizados hasta el momento han fracasado (1).
Actualmente el nico tratamiento efectivo para el ictus isqumico es la
trombolisis (2). En este trabajo se estudia la posible utilidad de potenciar
el beneficio de la reperfusin con un agente antioxidante anlogo del
a-tocoferol, CR-6 (3,4-dihidro-6-hidroxi-7-metoxi-2,2-dimetil-1(2H)-benzopirano), en virtud de su capacidad de secuestrar NO y peroxinitrito, y
para prevenir efectos negativos del estrs oxidativo (3,4).
MTODOS: Se administr CR-6 (100mg/Kg p.o.) o vehculo

durante la reperfusin a ratas SD sometidas a isquemia cerebral
focal de 90 min de duracin. Se monitorizaron la PCC, PAS y temperatura corporal y a las 24h se evalu la afectacin neurolgica
y el volumen de infarto.
RESULTADOS: La administracin de 2 dosis de CR-6 (30 min y 6,5
h de reperfusin) reduce el tamao del infarto (60%) y el dficit neurolgico. Sin embargo, una nica administracin de CR-6 (30 min) no ejerci proteccin. Actualmente estamos realizando estudios para elucidar la
efectividad real del tratamiento y el mecanismo subyacente, y para descartar la posible influencia de errores tipo I y II en nuestros resultados.
CONCLUSIN: El CR-6 es un antioxidante con potencial efecto beneficioso en la isquemia/reperfusin cerebral.
Agradecimientos: Contrato Juan de la Cierva de FPA, y CICYT
(SAF2005-05793-CO2-01).
1. Sacco. Lancet. 2007;369:331-41.
2. Davalos. Cerebrovasc Dis. 2005;20 S2:135-9.
3. Montoliu et al. Biochem Pharmacol 1999;58:255-261.
4. Sanvicens et al. J Neurochem 2006 ;98 :735-747.

REGULACIN DE LA ACTIVIDAD BASAL DE LAS
MOTONEURONAS DEL NCLEO HIPOGLOSO POR
XIDO NTRICO Y ROCK EN LA RATA ADULTA.
Fernando Montero Gutirrez, Federico Portillo, David GonzlezForero, Bernardo Moreno-Lpez
rea de Fisiologa, Facultad de Medicina, Universidad de Cdiz, Cdiz
El uso de sistemas in vitro ha demostrado que el gas xido ntrico
(NO) regula la excitabilidad de motoneuronas por mecanismos a corto y
largo plazo (Gonzalez-Forero et al., 2007, J Neurosci. 27:6302-12.). El mecanismo a largo plazo, segn hemos demostrado en nuestro laboratorio
est mediado por Rho kinasa (ROCK). Sin embargo, no existen datos demostrativos sobre el papel de estas dos molculas en motoneuronas adultas in vivo. Estudios histolgicos demuestran terminaciones nitrrgicas
sobre las motoneuronas del ncleo hipogloso que poseen guanilato ciclasa
soluble, la principal diana del NO, lo cual sugiere una accin antergrada
del NO sintetizado en terminales sinpticos sobre las propiedades elctricas de las motoneuronas. Utilizando pipetas multibarriladas se realizaron
registros unitarios de motoneuronas del ncleo hipogloso en ratas adultas
descerebradas, vagotomizadas y ventiladas artificialmente y se inyectaron
microiontoforeticamente diversos frmacos. El inhibidor de amplio espectro de la NO sintasa (NOS), L-NAME (50 mM, pH 6,5) disminuy el
nmero de potenciales de accin por bin (4 s) proporcionalmente a la corriente inyectada (n=7). Se observ una reduccin del 31,53,0% (90 nA),
significativamente distinta a la obtenida para D-NAME (13,81,0%; n=8).

Por el contrario, la administracin de un inhibidor especfico de ROCK
(Y27632; 100 mM, pH 8,0) result en un aumento de la tasa de disparo
de las motoneuronas que alcanz un 38,97,6% (100 nA; n=10) que fue
significativa con respecto a la obtenida con el vehculo (18,08,8%; n=4).
Estos datos sugieren que el NO y ROCK endgenos estn regulando de
forma opuesta la actividad basal de estas motoneuronas.

Efecto del tratamiento contingente y no
contingente de nicotina sobre el consumo de alcohol.
Aln Farias F., Lpez-Moreno JA, Gmez-Heras R, Gonzlez-Cuevas
G, Moreno Sanz G, Crespo I, Navarro M
Universidad Complutense
Alcohol y tabaco seran las drogas de uso ms extendido. Numerosos
estudios encuentran una alta correlacin entre el consumo de alcohol y
tabaco pero los mecanismos que median esta relacin an no se conocen con detalle. La complejidad del fenmeno en el medio social nos ha
llevado a utilizar un modelo animal para tratar de aislar el factor contingencia y su contribucin al abuso de ambas.
Ratas wistar previamente acostumbradas a beber alcohol fueron asignadas aleatoriamente a cuatro grupos y sometidas a fases consecutivas
de abstinencia forzada del alcohol (fase 1) seguidas de recadas (fase 2).
Un grupo recibi inyecciones diarias de nicotina durante ambas fases;
otro solamente durante las abstinencias (con salino en las recadas); un
tercero, slo durante las recadas (salino en abstinencias); y un cuarto
recibi slo salino.
Las distintas dosis de nicotina administradas durante la fase 1 aumentaron el consumo de alcohol. La nicotina administrada en la fase 2, o
recada, aument el consumo de alcohol en los que s la haban recibido
en la fase 1 pero no lo hizo en los que recibieron salino. Los sucesivos
ciclos de abstinencia forzada y recada aumentaron el consumo de alcohol
independientemente de la otra droga. La dosis de nicotina administrada
no tuvo efecto sobre la cantidad de alcohol consumida.
La nicotina tiene efectos diferentes sobre el consumo de alcohol
segn sea administrada de manera contingente o no contingente con ste.
Este efecto podra contribuir a explicar la disparidad de resultados en los
experimentos que exploran la interaccin entre ambas.

ESTUDIO MEDIANTE IMAGEN DE LA DEGENERACION NIGRO-ESTRIATAL EN EL MODELO DEL
MONO MPTP
Blesa de los Mozos FJ, Alvarez-Erviti L, Collantes M, Benitez-Temino
B, Quincoces G, Ecay M, Iglesias E, de Bernardo S, Adnez R, Peuelas
I, Mart-Climent JM, Arbizu J, Richter, JA, Zubieta JL, Rodrguez-Oroz
MC, Obeso JA
CIMA-Universidad de Navarra, Neurociencias, Laboratorio Trastornos del Movimiento, Pamplona. Navarra; Unidad de Investigacin
MicroPET y Servicio de Medicina Nuclear, CIMA-Clnica Universitaria de Navarra, Pamplona, Navarra; Servicio de Radiodiagnostico,
Clinica Universitaria de Navarra, Pamplona, Navarra.
Los modelos de lesin nigroestriatal con 6-hidroxidopamina en rata
y el de intoxicacin por MPTP en el mono son los mas utilizados para
el estudio experimental de la Enfermedad de Parkinson(EP). En general
ninguno de los dos remeda el carcter lentamente progresivo de la EP. Se
ha estudiado el dficit dopaminrgico progresivo en el modelo de mono
MPTP mediante la administracin repetida de bajas dosis del txico y la
utilizacin de la tomografa por emisin de positrones (PET) empleando
un ligando de alta afinidad por los transportadores vesiculares de monoaminas (11C-DTBZ) y otro que estima la capacidad de sntesis y de
almacenamiento de monoaminas del sistema (18F-DOPA).
En 12 monos se administraron dosis repetidas de MPTP (0.5 mg/kg)
con el fin de obtener un modelo progresivo. Se dividieron los animales
de acuerdo con la intensidad del cuadro parkinsoniano en: grave, leve y
77
asintomtico, evaluado mediante la escala de Kurlan y test motores. Se

incluyeron 4 animales controles sanos. La captacion de 18FDOPA y 11CDTBZ muestra un grado de deplecin dopaminrgica similar con ambos
radiotrazadores tanto en animales con parkinsonismo grave como leve,
que fue de mas de un 90 % en los graves y mas de un 70% en los leves. Una
captacin menor del 60-70% se correlacion con el estado asintomtico.
Estos resultados sugieren que los estudios con microPET permiten
establecer un modelo de degeneracin dopaminergica progresivo en monos intoxicados con MPTP. Este modelo permitir realizar estudios de
mecanismos compensatorios o de neuroproteccin.

NEUROPROTECCIN DE LA RETINOPATA INDUCIDA POR ETANOL MEDIANTE EL ANTIOXIDANTE
EBSELEN EN RATAS.
Romero Gomez FJ, Johnsen-Soriano S, Sancho-Tello M, Bosch-Morell
F, Diaz-Llopis M, Navea A.
Fundacin Oftalmolgica del Mediterrneo y Universidad CeuCardenal Herrera.
OBJETIVO: Estudiar los cambios bioqumicos y funcionales que aparecen en la retina tras la administracin crnica de etanol en ratas adultas,
y la capacidad neuroprotectora del antioxidante ebselen.
MTODOS: Se utilizaron ratas macho Sprague-Dawley, que fueron
alimentadas con una dieta lquida con etanol, mientras el grupo control
recibi una dieta isocalrica libre de etanol. Algunas de las ratas controles
y expuestas al etanol recibieron diariamente, junto con la dieta lquida, el
antioxidante ebselen durante todo el tratamiento. Despus de seis semanas dicho tratamiento, se realizaron electrorretinogramas (ERG) a todas
las ratas, se sacrificaron, se extrajeron los ojos y se homogenizaron sin
cristalino. Se determinaron parmetros relevantes en la modulacin del
estrs oxidativo, tales como el contenido de glutation y de malondialdehdo como antioxidante intracelular y producto de la peroxidacin de
lpidos, respectivamente.
RESULTADOS: La onda b del ERG mostr una disminucin significativa en el grupo etanol. La concentracin de malondialdehdo en la retina
fue significativamente mayor, mientras que el contenido de glutation fue
significativamente menor en el grupo alimentado con etanol. Los animales
que recibieron ebselen junto con el etanol, mostraron unos valores de
malondialdehdo, glutation y amplitud de la onda b del ERG similares a
los del grupo control.
CONCLUSIN: Estos resultados indican que la ingesta crnica de
etanol como nico factor etiolgico, altera el estado redox de la retina as
como su funcin (ERG), descartando la influencia del estado nutricional.
Por otra parte, el ebselen restableci las alteraciones inducidas por etanol
en la retina, mostrando as su papel neuroprotector.

LA ACTIVIDAD BUTIRILCOLINESTERASA AUMENTA Y LA CANTIDAD DE DE mRNA PERMANECE INALTERADA EN CEREBROS DE RATONES CON SENECTUD ACELERADA (SAMP8)
F.J. Fernndez-Gmez(1), E. Muoz-Delgado(2), M.F. Montenegro(2), F.J. Campoy, C.J.Vidal(2), J. Jordn(1).
1. Grupo de Neurofarmacologa, Departamento de Ciencias Mdicas, Facultad de Medicina, Universidad de Castilla la Mancha, Albacete, Spain; 2. Departamento de Bioqumica y Biologa Molecular-A,
Edificio de Veterinaria, Universidad de Murcia, Murcia, Spain.
Los ratones con propensin a senectud acelerada (SAMP) constituyen un modelo de envejecimiento. A diferencia de los ratones resistentes a la senectud (SAMR1), los propensos (SAMP8) presentan deterioro
cognitivo (Tomobe et al., 2005, Physiol. Behav. 84:505-10). Los cambios en
la acetilcolina liberada y en receptores muscarnicos (Okuma & Nomura, 1998, Jpn. J. Pharmacol. 78:399-404) en cerebros SAMP8 confirman la
relacin del sistema colinrgico con el deterioro cognitivo. Se ignora si
las colinesterasas (ChEs) contribuyen al fallo colinrgico. Para averiguarlo,
estudiamos las ChEs en cerebros SAMR1 y SAMP8 de seis meses. La
actividad acetilcolinesterasa (AChE) se mantuvo y la butirilcolinesterasa
(BuChE) subi al doble (p<0.03) en cerebros SAMP8. La actividad BuChE
78
aument por igual en la fraccin extrada con sales y en la soluble con

detergente. En los anlisis de sedimentacin, no hubo diferencias entre
cerebros SAMR1 y SAMP8 en la distribucin molecular de AChE y BuChE.
La valoracin de mRNAs, por Real-time PCR revel la misma cantidad de
transcritos AChE-T, AChE-H, AChE-R, PRiMA y BuChE en ambas cepas.
Pese a que la mayor actividad BuChE en cerebros SAMP8 sugiere mayor
permeabilidad de la barrera hematoenceflica con infiltracin del plasma
sanguneo en cerebro, la presencia de AChE y BuChE en plasma (GarcaAylln et al., 1999, Neurosci. Lett. 265:211-4) y la falta de cambios en las
ChEs solubles en cerebros SAMP8 descartan esa posibilidad. El incremento en actividad BuChE y en la cantidad de las molculas destinadas a
la secrecin en cerebros SAM puede reducir la disponibilidad de ACh y
contribuir a la disfuncin del sistema colinrgico y al dficit cognitivo.
Corresponding authors: Jordan@uclm.es; cevidal@um.es

Efecto de relaxina 3 sobre el septum medial y el ritmo theta hipocmpico
Francisco Olucha-Bordonau, Sherie Ma, ngel Nez-Molina, Andrew Gundlach
Dep. Anatoma, F. Medicina, Univ. Valencia; Howard Florey Institut,
Univ. Melbourne, Australia; Dep. Anatoma, Histologa y Neurociencia, F. Medicina, Univ. Autnoma de Madrid
Las proyecciones ascendentes al telencfalo se suponen responsables
de la regulacin del nivel de conciencia. Un posible componente de este
sistema es el ncleo incertus (NI) en el tegmento pontino, cuya estimulacin genera ritmo theta en el hipocampo(1). Las neuronas del NI
contienen el pptido relaxina-3 que colocaliza con GABA(2). El NI proyecta al septum medial (SM), regulando la generacin del ritmo theta(3).
El presente trabajo plantea si la relaxina-3 est presente en los terminales
del NI en el SM y si es capaz de generar ritmo theta. La inyeccin de fluorogold (retrgrado) en hipocampo y miniruby (antergrado) en NI combinado con la deteccin por immunofluorescencia de relaxina-3 ha permitido observar que relaxina-3 colocaliza con algunos de los terminales
marcados anterogradamente con miniruby, en algunos casos en contacto
con somas marcados con fluorogold. Adems, se han realizado registros
unitarios en el hipocampo y SM en ratas anestesiadas con uretano (1,6
g/Kg). La inyeccin de relaxina-3 (su pptido quimrico R3/I5, 200 ng/ml)
en SM provoca la aparicin de ritmo theta hipocmpico y un aumento de
la actividad espontnea de las neuronas del SM y del hipocampo durante
ms de 20 min. Estos efectos no fueron antagonizados por la aplicacin
previa de atropina, antagonista de los receptores muscarnicos.
Estos datos permiten concluir que el NI modula el ritmo theta hipocmpico a travs de proyecciones sobre neuronas del SM mediadas por relaxina-3.
Financiacin BFU 2006-07430 FIS-061816
1. Olucha-Bordonau et al., 2003, J Comp Neurol. 464:62-97; 2. Ma et al., 2007, Neuroscience 144:165-190; 3. Nunez et al., 2006, Eur J Neurosci 23: 2731-8

REGULACIN DE LA RESPUESTA INFLAMATORIA
MEDIADA POR GLUCOCORTICOIDES EN EL MODELO MPTP.
Ros Bernal F. (1), Parnaudeau S. (2), Herrero M.T.(1), Hunot S. (3),
Hirsch E. (3),Tronche F. (2) & Vyas S. (2)
(1) Neurociencia Clnica y Experimental. Facultad de Medicina. Universidad de Murcia; (2) CNRS UMR 7148, Collge de France, 11
Place Marcelin Berthelot, Paris 75005, France; (3) INSERM, UMR679,
Experimental Neurology and Therapeutics, Hopital de la Salpetriere, Universite Pierre & Marie Curie - Paris 6, Paris, France
La patognesis de la enfermedad de Parkinson (EP) es desconocida pero evidencias experimentales indican que la microglia est asociada con neurodegeneracin en modelos animales y en pacientes parkinsonianos. Se desconoce si los cambios inflamatorios son deletreos
o neuroprotectores en la degeneracin neuronal dopaminrgica en la
Sustancia Negra (SN). Los receptores de glucocorticoides (GR) activados
por glucocorticoides circulantes regulan la respuesta inflamatoria1, pero
su accin precisa sobre el SNC no est bien caracterizada. En nuestro

estudio analizamos el papel de GR en el modelo MPTP de la EP usando
lneas murinas en las cuales el GR est especficamente inactivado bien
en macrfagos/microglia (GRlysCre) bien en neuronas dopaminrgicas
(GRDATCre). Se inyectaron ratones GRlysCre and GRDATCre (3-4 meses de edad), controles y mutantes, con MPTP (20mg/kg i.p) que fueron
sacrificados a las 24 hrs, 7 das y 21 das. El anlisis postmortem revel:
i) incremento significativo de muerte neuronal dopaminrgica en ratones
mutantes GRlysCre comparados con controles sin diferencia significativa
entre GRDATCre mutantes y controles; ii) disminucin significativa en la
actividad del transportador de dopamina estriatal en mutantes GRlysCre
respecto a controles tras 21 das; iii) incremento de clulas GFAP+ en la
SN de mutantes GRlysCre comparado con controles. Los resultados en
la expresin de citoquinas por Q-PCR en SN y estriado indican que la
expresin de TNF-a est significativamente elevada en SN de mutantes
GRlysCre comparado con controles tras 24hrs. Estos resultados indican
que los GR en microglia protegen a las neuronas dopaminrgicas de la SN
frente a la intoxicacin con MPTP.
1 Goulding, 2004, Curr. Op. Pharmacol. 4:629-36.

Fragmentos de tau y expresin de proteasas en enfermedad de granos argirfilos
Gabriel Santpere, Berta Puig, Isidre Ferrer
Institut de Neuropatologia, Hospital Universitari de Bellvitge
La enfermedad de los granos argirfilos (EGA) es una taupatia caracterizada por la acumulacin de protena tau hiperfosforilada en los
procesos neuronales (granos argirfilos) y en la oligodendrogla. Estas inclusiones estn compuestas por las isoformas 4R hiperfosforiladas de tau,
que poseen cuatro dominios de unin a la tubulina. Cuando se estudia el
patrn de bandas de tau por Western Blot de la fraccin sarcosil-insoluble
enriquecida en tau hiperfosforilada, se observa un doblete de 64 y 68KDa
caracterstico de las taupatas 4R. Por debajo de este doblete, tambin
aparecen otras bandas que se han relacionado con fragmentos truncados
de tau. El propsito de este trabajo es realizar una descripcin exhaustiva
del patrn de bandas de tau en la enfermedad de granos argirfilos y compararlo con los patrones de bandas completos de otras taupatas como
la enfermedad de Alzheimer. Adems, se ha estudiado mediante immunohistoqumica y Western blot la asociacin de diversas proteasas capaces
de fragmentar la proteina tau, como trombina, caspasas y calpainas, con
las inclusiones de tau as como sus niveles de expresin en hipocampo de
pacientes de EGA comparados con controles de la misma edad.

Fosforilacin de tau y -sinuclena en
fracciones sinpticas
Gerard Muntan Medina, Dalf E, Martinez A, Ferrer I.
Hospital Universitari de Bellvitge. Universitat de Barcelona
La fosforilacin de tau y de -sinuclena son sucesos cruciales en el

desarrollo de la enfermedad de Alzheimer (EA) y de las -sinucleinopatias
(enfermedad de Parkinson, EP y la demencia con cuerpos de Lewy, DCL),
respectivamente.
En este estudio se ha examinado la presencia de tau y -sinuclena
fosforilados, mediante subfraccionamiento de la muestra, en la corteza
frontal de pacientes con distinto estadio de EA, EP, DCL forma pura y
comn y pacientes control.
Se ha observado fosforilacin de tau en posicin Ser-396 en fracciones enriquecidas con sinapsis, en la corteza frontal de pacientes con EA y
EP en distintos estadios, as cmo en pacientes con DCL. Tambin se han
observado niveles incrementados de sinuclena fosforilada y agregada en
dichas fracciones, en la corteza frontal de pacientes con EP, DCL y estadios avanzados de EA. En fracciones en los que se observa un incremento
de -sinuclena fosforilada, sta se corresponde con un descenso en los
niveles de expresin de -sinuclena no modificada.
Estos resultados indican una temprana fosforilacin tanto de sinucleina cmo de tau en regiones no afectadas en ambos grupos de
enfermedades y sugieren a las sinapsis como dianas tempranas para la
fosforilacin de ambas protenas.
Adems, estas observaciones apoyan un solapamiento entre la EA y
las sinucleinopatas.

ANXIETY-RELATED AREAS SHOW CHANGES IN
BRAIN ACTIVITY AFTER LONG-TERM TREATMENT
WITH OXYTOCIN
Gloria Lana Prez, Conejo N.M., Gonzlez-Pardo H., Arias J.L.
Laboratorio de Neurociencias, Facultad de Pscicologa, Universidad
de Oviedo. Plaza Feijoo, s/n E-33003, Oviedo, Espaa.
The hypothalamic neuropeptide oxytocin (OT) seems to play an important modulatory role in the ethological responses to fear. The aim of
our study was to evaluate possible functional changes in different brain
areas related with anxiety after OT administration. For this purpose, we
essentially followed the model by Petersson (1996) to evaluate the effects
of long-term administration of OT. Male Wistar rats were injected subcutaneously with OT (1, 2 and 4 mg/kg) or saline during five consecutive
days. On day 6, animals were tested in the elevated plus maze and the
open field test for anxiety-like behaviour. We measured changes in brain
energy metabolism using cytochrome oxidase (CO) histochemistry, an
index of neuronal activity. Results showed significant increases in locomotor activity and rearing behaviour in rats treated with 2 and 4 mg/kg
of OT as compared to the rest of groups. Furthermore, CO activity was
significantly increased in anxiety-related areas (paraventricular nucleus of
the hypothalamus, several thalamic nuclei, bed nucleus of the stria teminalis) in proportion with the OT dose. Conversely, CO activity significantly
decreased in the amygdaloid complex with increasing OT doses. Our findings suggest a complex action of OT in fear and anxiety responses.
This study was supported by grant SEJ2004-07445 (Ministerio de
Educacin y Ciencia, Spain) to JLA.
Petersson, M., Alster, P., Lundeberg, T., Uvns-Moberg, K. (1996). Oxytocin increases nociceptive thresholds in long-term perspective in female
and male rats. Neuroscience Letters, 212, 87-90

ACTIVACIN DEL CANAL TRPC5 POR ESTIMULACIN OSMTICA
Sergio Soriano beda, Carlos Belmonte, Flix Viana, Ana Gomis
Universidad Miguel Hernndez-CSIC, Instituto de Neurociencias de
Alicante. Unidad de Transduccin Sensorial y Nocicepcin.
Los canales TRPCs (canonical transient receptor potential) comprenden una familia de canales catinicos no selectivos cuya activacin
esta ligada a la estimulacin de protenas G acopladas a receptores de
membrana. Los canales TRPC se expresan en el sistema nervioso, forman
canales permeables a calcio en sistemas de expresin heterlogos y se
activan por agonistas que inducen liberacin del calcio intracelular. Sin
embargo, sus mecanismos fisiolgicos de activacin y/o regulacin no se
conocen con exactitud. Nosotros hemos estudiado el canal TRPC5 utilizando tcnicas de imagen de calcio y registros electrofisiolgicos.
La aplicacin de una solucin hiposmtica (210 mOsm), que produce un estiramiento de la membrana plasmtica, induce un aumento de
la concentracin intracelular de calcio en clulas HEK 293 transfectadas con TRPC5. Dicho estmulo tambin activa una corriente con doble
rectificacin caracterstica del canal TRPC5. La activacin de TRPC5 se
potencia cuando se co-expresa con el receptor de histamina tipo 1 (H1),
un receptor acoplado a protenas G, siendo esta respuesta dependiente
del calcio extracelular. La reduccin de los niveles de PIP2 mediante la
activacin de la 5 fosfatasa IV, inhibe el aumento del calcio intracelular en
respuesta al estmulo hiposmtico.
Estos datos muestran al canal TRPC5 como un sensor osmtico cuya
funcin se potencia por la presencia de receptores de membrana y est
modulado por los niveles de PIP2. Dado que este canal se expresa en
neuronas sensoriales, su activacin podra jugar un papel importante en la
transduccin de seales mecnicas.
Trabajo financiado por el MEC (BFU2005-03986 y SAF2004-01011).
79
Las neuronas del estrato lacunoso hipocmpico que proyectan a subculo
Restriccin calrica y envejecimiento: estudio de la interaccin glutamato-dopamina en el ncleo accumbens
Gregori Alonso i Llos, Asuncin Molowny, Pablo Dolz, Xavier Ponsoda y Carlos Lopez-Garcia
Neurobiologa Celular, F. Biologa, Univ. Valencia
El estrato lacunoso hipocmpico, ocupado por dendritas apicales de
neuronas piramidales de igual modo que la capa I (molecular) de corteza con la cual se contina, posee una escasa poblacin de neuronas
(aproximadamente 8 por mm3). Tales neuronas muestran seis arquetipos
distintos segn su morfologa dendrosomtica: 1-bipolares horizontales,
2-bipolares verticales, 3-multipolares polimorfas, 4-estrellado-globosas, 5triangulares-piriformes y 6-sarmentosas.
Tras la inyeccin de un marcador retrgrado (200 a 500 nl de DiI
disuelto en DMSO) en subculo de conejos jvenes de 1 mes de vida
aprox. (6-7 mm postbregma, 3-4 lateral y 3-5 mm profundidad) y 3 a 4 das
de supervivencia se observaron somas marcados en el estrato lacunoso
y capa molecular de FD.
La posterior inyeccin intracelular de lucifer yellow y biocitina (en
rebanadas levemente fijadas) en los somas marcados por transporte retrgrado, ha permitido determinar su arquetipo somatodendrtico (son
neuronas de tipos 1-bipolares, 3-multipolares-polimorfas, 4-estrelladoglobosas y 5-triangulares-piriformes).
Las proyecciones desde neuronas piramidales de CA1 hacia subculo
son conocidas desde antiguo (Hjorth-Simonsen, 1972) y la proyeccin de
neuronas subiculares hacia CA1 en conejo (Berger, 1980). Probablemente
estas neuronas participen en procesos de control feed-forward de la proyeccin hipocampo subicular (principal va de salida de informacin desde
el hipocampo) (no todas las marcadas retrgradamente son gabargicas).

Propiedades emergentes de las neuronas
subiculares en la codificacin del espacio.
Jorge Brotons Mas, Maria V. Snchez-Vives
Instituto de Neurociencias de Alicante, Universidad Miguel Hernndez-CSIC, San Juan de Alicante, Espaa.
Desde el descubrimiento de las clulas de lugar (place cells) en el
hipocampo (OKeefe & Dostrovsky, Brain Research 34:171,1971) han
sido muchos los estudios orientados a entender como stas codifican la
informacin espacial. Sin embargo, el papel de las subestructuras del complejo hipocampal -ej subiculum o corteza entorrinal- en la representacin
espacial a menudo ha sido ignorado. El descubrimiento de las clulas en
rejilla en corteza entorrinal (Hafting et al, Nature 436: 801,2005) o los
modelos sobre el rol de las neuronas subiculares (Barry et al. Rev Neurosci, 17:71,2006) ilustran la necesidad de conocer mejor el papel de las
estructuras parahipocampales en la codificacin espacial, lo que ha constituido el objetivo de este estudio. Registramos neuronas (n=129 clulas de
lugar) de ratas crnicamente implantadas con tetrodos en el subculum
mientras exploraban libremente en arenas cuadradas de 3 tamaos (50 x
50cm; 100 x 100 cm; 150 x 150 cm). Las unidades fueron clasificadas en
dos categoras. Las escaladoras (54%) tienen campos receptivos estables en localizacin, forma y tamao en arenas de diferente tamao. Las
restantes neuronas fueron no escaladoras o remapeadoreas. De stas,
el 26% fueron remapeadoras con tamaos relativos estables pero no as
su localizacin y forma y el 16% fueron sensibles a la arena presentando
disparo en arenas especficas pero no en todas. El 4% restante fueron
malas escaladoras, estables en forma y localizacin pero no el tamao.
Finalmente, identificamos neuronas subiculares con caractersticas similares a las clulas entorrinales en rejilla, y unidades que codifican la
direccin de la cabeza del animal.
Subvencionado por PRESENCCIA(EU-FET27731)
80
Segovia G., del Arco A., De Blas M., Garrido P., Mora F.
El objetivo del presente trabajo fue estudiar el efecto de la restriccin calrica (RC) y del envejecimiento sobre la respuesta del neurotransmisor dopamina y de la actividad motora a la perfusin local del
agonista glutamatrgico AMPA en el ncleo accumbens (ACC). Se utilizaron ratas Wistar macho adultas (3 meses de edad), que se mantuvieron
en condiciones control o de RC (40%) hasta los 6, 15 y 24 meses de edad.
La concentracin extracelular de dopamina en ACC se evalu mediante
microdilisis y HPLC-EC. La actividad motora se evalu mediante actmetros acoplados al sistema de microdilisis. La perfusin de AMPA(100mM)
increment la concentracin extracelular de dopamina en el ACC de animales control de todos los grupos de edad, siendo ste aumento mayor
en el grupo de 15 meses. La coperfusin de AMPA+NMDA(10mM) no
modific significativamente los incrementos de dopamina producidos por
AMPA. En los animales mantenidos en RC los incrementos de dopamina
no fueron significativamente diferentes de los obtenidos en animales control. La perfusin de AMPA produjo un aumento en la actividad motora
de los animales de todos los grupos experimentales que no fue modificado por la perfusin de AMPA+NMDA. La actividad motora espontnea (open-field) fue mayor en animales mantenidos en RC de todos
los grupos de edad. Los niveles de BDNF (ELISA) en el hipocampo de
los animales mantenidos en RC fue mayor que en animales control. Los
resultados sugieren que la RC no modifica la interaccin glutamato-dopamina en el ACC a lo largo de la edad. SAF2003-0448, SAF2006-01554,
CAM2006-921069.

El antagonista del receptor cannabinoide
CB1 rimonabant reduce el comportamiento impulsivo inducido por cocana
Gustavo Gonzalez Cuevas(1), Harinder Aujla (2) Jos Antonio Lpez-Moreno (1), Friedbert Weiss (2), Miguel Navarro (1)
1) Laboratorio de Psicobiologa, Universidad Complutense de Madrid, Madrid, Espaa. 2) Molecular and Integrative Neurosciences
Department (MIND). The Scripss Research Institute. La Jolla, CA,
Estados Unidos.
El descontrol de los impulsos juega un papel importante en el inicio,
mantenimiento y recada de los trastornos adictivos. Sin embargo, actualmente, nuestro conocimiento sobre los determinantes neuro-comportamentales de los diversos comportamientos impulsivos es escaso. El objetivo del presente experimento fue estudiar los efectos del bloqueo del
sistema cannabinoide a travs del antagonista del receptor cannabinoide
CB1 SR 141716 (SR), igualmente conocido como rimonabant, sobre el
comportamiento impulsivo inducido por cocana en la tarea denominada
Differential Reinforcement of Low rates of responding (DRL), la cual mide
accin impulsiva (o desinhibicin comportamental) por respuestas diferidas. Ratas Wistar macho fueron entrenadas a presionar una palanca
por agua en un programa de reforzamiento DRL 40 segundos. Una vez
alcanzada una lnea base se trat a las ratas con SR (0.3-3 mg/kg, i.p.),
cocana (5-15 mg/kg; i.p.) o cocana (15 mg/kg; i.p.) con un pretratamiento de SR (1 mg/kg; i.p.). Mientras cocana, de manera dosis-dependiente,
increment la accin impulsiva, con significativamente menores IRTs y refuerzos conseguidos, SR, por el contrario, redujo, de manera dosis-dependiente, el nmero de respuestas prematuras. Adems, SR en combinacin
con cocana fue capaz de reducir el incremento en impulsividad inducido
por cocana. En conclusin, estos resultados sugieren que el bloqueo del
sistema cannabinoide podra ser una herramienta teraputica prometedora en la reduccin de la desinhibicin comportamental y el tratamiento
de la adiccin a cocana.

INTERACCIN Y REGULACION DE LOS CANALES
DE POTASIO GIRK EN EL CEREBELO DEL RATN
Aguado C(a), Ciruela, F(b), Cabaero MJ (a),Watanabe M (c),Wickman
K (d), Lujn Miras R (a)
a. Depto Ciencias Mdicas, Universidad de Castilla-La Mancha,
Albacete b. Dept Bioqumica i Biologia Molecular, Universitat de
Barcelona, Barcelona c. Dept Anatomy, Hokkaido University School
of Medicine, Sapporo, Japan d. Dept Pharmacology, University of
Minnesota, Minneapolis, USA.
Los canales de corrientes rectificadoras de entrada de potasio activados por protenas G, denominados canales GIRK o Kir3, regulan la
actividad neuronal tras ser activados por receptores metabotrpicos.
Se han identificado cuatro genes que codifican para cuatro subunidades
(GIRK1-4), las cuales forman canales homotetramricos o heterotetramricos. GIRK1, GIRK2 y GIRK3 presentan una alta expresin en el
sistema nervioso, mientras que GIRK4 abunda mayoritariamente en el
corazn. En el presente estudio hemos utilizado tcnicas bioqumicas e
immunohistoqumicas a nivel de microscopa ptica y electrnica para
analizar la interaccin y regulacin de las diferentes subunidades en el cerebelo de ratones silvestres y knockout para las subunidades GIRK. En el
cerebelo de ratones silvestres, experimentos de co-inmunoprecipitacin
demostraron que las subunidades GIRK1, GIRK2 y GIRK3 interaccionan
entre s. Adems, mediante el uso de tcnicas de western blot e inmunohistoqumica hemos puesto de manifiesto que la falta del gen que codifica
para una subunidad GIRK especfica, reduce de manera significativa la
expresin de las otras subunidades. Mediante estudios de microscopa
electrnica se detect que la immunoreactividad para GIRK1 en los ratones knockout para GIRK2 o para GIRK3 se redujo significativamente
en la membrana plasmtica, acumulndose en membranas internas, supuestamente retculo endoplsmico. Sin embargo, en los ratones doble
knockout GIRK2/GIRK3, la immunoreactividad para GIRK1 se acumul
en el citoplasma de las neuronas cerebelosas, a nivel del retculo endoplsmico. Estos datos sugieren que una proporcin significativa de las tres
subunidades GIRK co-ensamblan en el cerebelo formando canales heterotetramricos.
Financiacin: Ministerio de Educacin y Ciencia (BFU-2006-01896)

EFECTOS DE ESTMULOS VISUALES ESTRUCTURADOS ALTERNOS SOBRE LA AMPLITUD Y LATENCIA
DE LA ONDA P100 EN HUMANOS
Rafael Mancebo Azor, Jose Antonio Saez Moreno; Giuseppe Musumeci; Inmaculada Dominguez Hidalgo; Jose Manuel Rodriguez Ferrer
Instituto de Neurociencias. Universidad de Granada. Servicios de
Neurofisiologia clinica y oftalmologia. Hospital Clinico de San Cecilio. Granada
El registro de potenciales evocados visuales (PEV) es un mtodo
habitual en la exploracin clnica electrofisiolgica del sistema visual en
humanos. El presente estudio ha analizado la modificacin de los PEV
mediante la presentacin de estmulos visuales estructurados (damero
de cuadrados blancos y negros), con diferentes tamaos de cuadrados
(3.75, 7.5, 15, 30, 60, 120 y 240 minutos de arco). Se registr la onda P100
(con estimulacin binocular y monocular derecha) en Oz con referencia a
Fz, a un grupo de 12 voluntarios sanos (6 hombres y 6 mujeres), con una
edad media (eem) de 19.250.13 aos. El estmulo se present en un
monitor de 24x32 cm, colocado a una distancia de 114.5 cm (11.8x15.6
grados de ngulo visual). Los resultados muestran que la amplitud de la
onda P100 alcanza un valor mximo con dameros de 15 min de tamao
del cuadrado, tanto en la estimulacin binocular como monocular derecha (mediaeem de 15.461.48 y 9.920.85 V, respectivamente). Esta
amplitud decrece tanto para cuadrados de mayor como de menor tamao. La latencia muestra valores mnimos para el damero de cuadrados
de 120 min de tamao (110.831.08 y 113.711.13 ms para estimulacin binocular y monocular derecha, respectivamente) y mximos con el
de 3.75 min (135.091.63 ms y 136.38 ms para estimulacin binocular
y monocular derecha, respectivamente). Los resultados obtenidos con
los distintos estmulos presentados reflejan la participacin de grupos
neuronales que difieren, posiblemente, en nmero de neuronas, nivel de

activacin y otras propiedades como el tamao de sus campos receptivos
y dimetro de sus axones.

Transmisin sinptica y plasticidad en diferentes estados de activacin cortical
Ramn Reig Garca, Maria V. Snchez-Vives
Instituto de Neurociencias de Alicante, Universidad Miguel Hernndez-CSIC, San Juan de Alicante, Spain.
La corteza cerebral est permanentemente activa bien sea por activacin de origen extracortical o por generacin de actividad espontnea
en la propia red. Un ejemplo de este tipo de actividad espontnea son las
oscilaciones lentas (<1Hz) de la corteza cerebral, las cuales se caracterizan por periodos regulares y alternos de actividad (up states) e inactividad (down). Recientemente hemos mostrado cmo la existencia de actividad en la red disminuye la depresin sinptica a corto plazo (Reig et al.,
2006, Cerebral Cortex 16:688). En este trabajo hemos estudiado cmo
la existencia de actividad rtmica influye en otros tipos de plasticidad sinptica a corto plazo como la facilitacin sinptica por pulsos pareados y
fenmenos de potenciacin sinptica por estimulacin repetida. Tambin,
hemos estudiado el efecto de los up y down states en la transmisin
sinptica. Este estudio se ha realizado en preparaciones in vivo e in vitro,
con potenciales sinpticos evocados tanto con estmulo elctrico como
con estimulacin sensorial, en corteza visual y somatosensorial.
Los resultados muestran: 1) Mayor facilitacin por pulsos pareados y
potenciacin sinptica cuando la red cortical est activa que cuando est
silente, 2) La amplitud de las respuestas evocadas es mayor en estados de
activacin cortical.
Estos resultados, junto con los del estudio anterior, sugieren que la
transmisin sinptica en una red cortical activa y especialmente durante
los up states es ms segura y eficiente debido a que muestran mayor amplitud, mayor tendencia a la facilitacin y menor tendencia a la depresin
sinptica a corto plazo.
Subvencin MECBFU2005-00041/BFI

EFECTOS DEL TRATAMIENTO CRNICO CON
FLUOXETINA SOBRE LA DENSIDAD DE ESPINAS EN
LA CORTEZA SOMATOSENSORIAL DE RATA ADULTA
Guirado Guilln R., Castillo-Gmez E., Gmez-Climent M.A., Varea
E., Blasco-Ibaez J.M., Crespo C., Martinez-Guijarro F.J. y Ncher J.
Unidad de Neurobiologa. Departamento de Biologa Celular, Universitat de Valncia, Dr. Moliner 50, 46100 Burjassot, Espaa
Se ha propuesto que cambios en la plasticidad neuronal pueden estar
implicados en la etiologa de la depresin, y que estos cambios pueden
ser revertidos mediante tratamiento con antidepresivos. En modelos
animales de depresin se han observado cambios estructurales (remodelado de dendritas y espinas) en ciertas regiones del SNC, como el
hipocampo, la amgdala o la corteza prefrontal medial. Sin embargo, no se
ha estudiado apenas si esta plasticidad estructural puede existir en otras
reas. Por ello, tras 14 das de tratamiento con fluoxetina (un inhibidor
selectivo de la recaptacin de serotonina), hemos analizado la densidad
de espinas en dendritas apicales de neuronas piramidales de las capas III
y V de la corteza somatosensorial de ratas adultas, utilizando el mtodo
de Golgi. En esta regin cortical previos resultados de nuestro laboratorio muestran un aumento en la expresin de PSA-NCAM, una molcula
implicada en plasticidad estructural neuronal. El tratamiento crnico con
fluoxetina aumenta significativamente la densidad de espinas en la corteza
somatosensorial. Estos cambios en la estructura neuronal podran estar
relacionados con el retraso y la agitacin en la actividad psicomotora que
forman parte de la sintomatologa de la depresin.
Agradecimientos: MEC FPU AP2005-4672 y AP2006-01953
81
Estudio de las redes de activacin de Apolipoprotena D en cultivos celulares sometidos a estrs oxidativo
Las neuronas estriatales TH-positivas que

aparecen despus de la denervacin dopaminrgica son neuronas de proyeccin reguladas por dopamina
R. Bajo Gaeras, D. Snchez y M. D. Ganfornina

Instituto de Biologa y Gentica Molecular-Departamento de Bioqumica y Biologa Molecular y Fisiologa, Universidad de ValladolidCSIC, Valladolid, Espaa
Apolipoprotena D (ApoD) es una protena secretada de la familia de
las lipocalinas que une pequeos ligandos hidrofbicos. Nuestro inters se
centra en el sistema nervioso, donde la expresin aumenta durante el envejecimiento y en enfermedades neurodegenerativas. ApoD ejerce un papel neuroprotector en organismos modelo sometidos a estrs oxidativo.
Para caracterizar los mecanismos moleculares de la funcin de ApoD
estamos utilizando cultivos celulares de una lnea de astrocitoma humano.
Usamos paraquat (PQ), un agente que genera especies reactivas de oxgeno, como paradigma de estrs oxidativo. El tratamiento con PQ aumenta
la expresin de ApoD en las clulas que van a sufrir apoptosis.
Estamos estudiando las rutas de sealizacin que responden a situaciones de estrs e inflamacin y regulan el balance proliferacin-muerte.
Una de estas redes de sealizacin, la de las MAP kinasas, se activa en las
mismas condiciones que ApoD. Estamos usando inhibidores que bloquean
la activacin de p38, MEK y JNK, para estudiar los cambios de expresin
de ApoD. Se han escogido estos inhibidores ya que se han descrito en el
promotor de ApoD secuencias de reconocimiento para algunos factores
de trascripcin regulados por esta red de sealizacin.
La disminucin de la expresin de ApoD cuando se usa un inhibidor
de JNK en los primeros experimentos indica una posible activacin de
ApoD por esta va apopttica.

Mecanismos implicados en las preferencias
espaciales inducidas por estimulacion electrica del complejo parabraquial lateral
Raquel Garca Prez, Maria J. Simon, Amadeo Puerto
Universidad de Granada. Area de Psicobiologia
El Complejo Parabraquial Lateral ha sido implicado en el establecimiento de diversos aprendizajes de ndole vscero-gustativo, tanto de
carcter aversivo como apetitivo. En efecto, hasta el momento, su participacin en procesos de tipo reforzante ha sido restringida casi exclusivamente a estmulos de carcter gustativo. Este estudio pretende examinar
la especificidad de este efecto recompensante en otras situaciones estimulares, por ejemplo de ndole espacial (Simn, Tesis Doctoral, 2003),
examinando los potenciales mecanismos sinpticos implicados. As, en
una primera fase de este estudio, el efecto de la estimulacin elctrica
del NPBL fue examinado en ratas Wistar, utilizando una tarea de condicionamiento de preferencia por el lugar de tipo concurrente (CPP), un
procedimiento habitual en el estudio de comportamientos de carcter
reforzante o aversivo. Una vez establecido el efecto reforzante o aversivo
de la estimulacin elctrica del NPBL, se ha examinado la implicacin
de los mecanismos opiceos en este efecto recompensante mediante la
administracin de naloxona (4 mg/Kg). Los resultados obtenidos demuestran que la administracin de este antagonista opiceo bloquea el efecto
reforzante de la estimulacin, impidiendo la adquisicin de las preferencias por el lugar cuando este aprendizaje se produce en un contexto
(laberinto) nuevo, pero no cuando se administra en el laberinto donde
originalmente adquirieron las preferencias, ya que en este ltimo caso los
lugares reforzados son perfectamente recordados.
Simn, M.J. (2003). Efectos comportamentales de la activacin del complejo parabraquial troncoenceflico: Relevancia del subncleo lateral externo en el aprendizaje
espacial y gustativo inducido por estimulacin elctrica o administracin enteral de
nutrientes. Tesis Doctoral.
82
Sanja Darmopil, Muetn-Gmez VC y Moratalla R

Estudios inmunocitoqumicos recientes demuestran que la denervacin dopaminrgica induce la aparicin de neuronas que expresan la
enzima tirosina hidroxilasa (TH) en el estriado de roedores y esto mismo
tambin se ha observado en los ncleos caudado y putamen en monos y
en pacientes parkinsonianos. Sin embargo se desconoce el fenotipo molecular de estas neuronas inmunoreactivas a la TH (TH-ir), su funcin, as
como la regulacin de su expresin. En el presente trabajo estudiamos la
cintica de aparicin de estas neuronas en el estriado de ratones tras la
lesin con 6-OHDA y determinamos su fenotipo molecular en ratones
hemiparkinsonianos tratados con L-DOPA.As, demostramos la presencia
de estas neuronas TH-ir a los tres das de la lesin. La ausencia de incorporacin de BrdU administrada 24 y 48 horas tras la lesin evidencia que
estas neuronas no son clulas generadas de novo. El nmero de neuronas
TH-ir decreci significativamente, 1 y a 2 semanas despus de la lesin.
Sin embargo, el tratamiento crnico con L-DOPA increment tanto el
nmero de neuronas TH-ir, como la intensidad de su marcaje. En cuanto a
su fenotipo molecular hemos demostrado que la mayora de estas neuronas colocalizan con dinorfina encefalina, evidenciando que son neuronas
de proyeccin de las vas directa e indirecta respectivamente. Aunque
expresan la decarboxilasa de aminocidos aromticos, enzima necesaria
para la sntesis de dopamina, no expresan el trasportador de dopamina.
Finalmente, estas neuronas estriatales son functionalmente activas ya que
expresan FosB en respuesta al tratamiento con L-DOPA.
Financiado por MEC, MSC, PNSD.

Distinto efecto de BDNF y GDNF en la supervivencia de las motoneuronas oculomotoras tras la enucleacin postnatal.
S. Morcuende Fernndez, B. Bentez-Temio, M.L. Pecero, A.M. Pastor y R.R. de la Cruz.
Dpto. Fisiologa y Zoologa, Universidad de Sevilla
Las motoneuronas del sistema oculomotor dependen de su diana
para su supervivencia durante el periodo postnatal temprano, debido en
parte al aporte trfico que reciben de ella. Se sabe que los factores neurotrficos estimulan la supervivencia de las motoneuronas tras la lesin. En
este estudio se realiz la enucleacin unilateral en ratas Wistar postnatales (P0), y en el sitio de la lesin se coloc espuma de gelatina impregnada
con solucin salina, BDNF (5 g; provista por Regeneron Pharmaceutical)
o GDNF (5 g; provista por Amgen Inc.). Tras 10 das de vida, se evalu la
supervivencia de las motoneuronas que inervaban los msculos extraoculares extirpados, cuyos somas se localizaron en los ncleos motor ocular
comn (III), troclear (IV) y motor ocular externo (VI). Para ello realizamos
inmunocitoqumica frente a NeuN y colina-acetil-transferasa (ChAT), y
tincin de Nissl. Inicialmente las motoneuronas privadas de sus msculos
diana presentaron un porcentaje de supervivencia de un 35.54%. Tras la
administracin de BDNF se observ un incremento en la supervivencia
de las motoneuronas hasta un 73.74%. Cuando la neurotrofina aplicada
fue GDNF el nmero de motoneuronas que sobrevivieron fue de un
95.04%. Estos resultados muestran el diferente efecto que tienen distintas
neurotrofinas en prevenir la muerte de las motoneuronas oculares tras
la lesin postnatal. As, mientras que la administracin exgena de BDNF
produce un aumento significativo en la supervivencia, el rescate que sigue
a la administracin de GDNF provoca una eliminacin casi completa de la
muerte neuronal provocada por la enucleacin.
Financiado por: MCYT (BFU2006-08414/BFI); Fundacin Eugenio Rodrguez Pascual.

Efectos de Tbr1 durante la formacin de

neuronas y gla y la maduracin neuronal
Early chicken thalamic regionalization

based on gene expression patterns.
Mndez Gmez HR, Abad JL, de Pablo F,Vicario-Abejn C.

Instituto Cajal (CSIC), Centro de Investigaciones Biolgicas (CSIC),
Genetrix S.L.
Ferran JL(1), Hidalgo-Snchez M(2), Snchez-Arrones L(1), Sandoval

JE(1), Bardet SM(1), Martinez-de-la-Torre M(1), Puelles L(1).
(1) Department of Human Anatomy, School of Medicine, University
of Murcia. Spain. (2) Department of Cellular Biology, University of
Extremadura. Badajoz. Spain.
Tbr1 es un factor de transcripcin implicado en el desarrollo de la

corteza cerebral y el bulbo olfatorio (BO). El ratn mutante para Tbr1
presenta alteraciones en la organizacin laminar de la corteza y una prdida de la mayora de las neuronas glutamatrgicas de proyeccin del
BO1,2. Sin embargo, se desconoce an qu papel especfico juega Tbr1 en
el desarrollo de la corteza y en esta prdida de neuronas de proyeccin
del BO.
Para intentar averiguarlo, usamos un sistema de transduccin retroviral (Retrofect, Genetrix S.L.) para sobreexpresar la protena humana
Tbr1. Con un vector control y otro que contiene Tbr1, infectamos clulas
madre neurales obtenidas de BO (CMNBO)3 de embriones de ratn
de E13.5. Tras 4 das en diferenciacin, se observ que las clulas que
sobreexpresaron Tbr1 adquirieron, preferencialmente, un fenotipo neuronal (clulas TuJ1) en vez de astroglial (clulas GFAP). A los 6 das de
diferenciacin, tambin encontramos un mayor nmero de oligodendrocitos (clulas O4) en las clulas que sobreexpresaban Tbr1. A los 15-17
das en diferenciacin, se sigui observando un significativo mayor nmero de neuronas TuJ1 y, en los primeros cultivos analizados, se encontr
tambin un mayor nmero de neuronas glutamatrgicas en las clulas que
sobreexpresaron Tbr1. No hemos observado efectos en la proliferacin
de las CMNBO.
Estos resultados sugieren que Tbr1 est jugando un papel importante
en los primeros estados de la diferenciacin de CMNBO a neuronas,
oligodendrocitos y astrocitos. Asimismo, Tbr1 podra promover, especficamente, la formacin y maduracin de neuronas glutamatrgicas en
el BO.
1 Bulfone A. 1998. 2 Hevner RF. 2001. 3 Otaegi G. 2006.
Diencephalic regionalization results from temporal and spatial molecular specification processes involved in locus-specific networked gene
activities in every differentiated part acquired through ontogeny.With the
aim to understand in the future the complex relations between patterns,
signals and cis-regulatory networks involved in thalamic specification, we
decided at first to obtain a complex picture about several combined gene
expression patterns. We compared Pax6, Pax7, Pax3, Six3, Lim1, Meis1,
Dbx1, Tcf4, Lunatic Fringe, Shh, Nkx2.2, Zic1 mRNA expression and
PAX7, PAX3 inmunohistochemistry during early chicken development
(HH12-HH28). Our molecular data suggest that cephalic and caudal thalamic boundaries are established around HH13-HH14 (by comparison
of Pax6, Pax3, Meis1, Lunatic Fringe, Pax7 and Shh). From HH17 onward
additional markers recognize the same boundaries and new thalamic molecular subregions start to appear. Selective Nkx2.2, Six3 and Lim1 expression, combined with Tcf4, Pax6, Zic1 and Gbx2 signals, defines a rostral
domain caudal to the zona limitans core. Other markers such as Dbx1
and Zic1 are gradientally distributed and may relate to a possible source
of secreted signals that would be important in thalamic regionalization.
These patterns represent a preliminary scaffold that should facilitate
suitable experimental approaches to resolve functional relations involved
in thalamic formation and regionalization.
Supported by MEC grants BF1 2002-3886 and BFU2005-09378C02-01, and CIBERER network to LP. (J.L.F. is a CIBERER postdoctoral
researcher in the L.P. lab., L.S.A. is a predoctoral FPI fellow, Bardet S. is a
predoctoral FPI fellow, and J.E.S. is a predoctoral fellow).
ANLISIS DE LA ACCIN MORFOGENTICA DE

FGF8 EN EL ORGANIZADOR STMICO
Neural differentiation of progenitor

cells onto different polymeric substrates
in vitro
Crespo-Enrquez I, Martnez S, Echevarra D.

Instituto de Neurociencias de Alicante UMH-CSIC. Apto. de correos 18. San Juan de Alicante.
Durante desarrollo temprano del sistema nervioso central de vertebrados (neurulacin) existen ciertas regiones del mismo que son capaces
de inducir diferentes poblaciones neurales en sus territorios vecinos. Estos centros de sealizacin, se conocen como organizadores secundarios
y secretan al medio extracelular molculas con capacidad morfogentica.
Entre los distintos morfgenos, Fgf8 se expresa en los tres potenciales
organizadores secundarios del eje A-P. El cmo y de qu manera acta
sobre el neuroepitelio sigue sin estar completamente resuelto.
En el presente trabajo, analizamos los mecanismos celulares y moleculares de la actividad de Fgf8 en el Organizador stmico (IsO) sobre la
regionalizacin de mesencfalo caudal y rombencfalo rostral. Estudios
indirectos en la expresin gnica y mutaciones condicionales de Fgf8 y
otros genes moduladores, indican que Fgf8 actuara dependiente de su
dosis y evidencia el fenmeno gradiental de actuacin planar La utilizacin de explantes de tubo neural de embriones de ratn de 9.5 das de
gestacin, nos permite realizar aproximaciones experimentales en ratn
de un modo ms sencillo y fiable. Con estas herramientas pretendemos
disecar a nivel celular la accin de Fgf8 en el IsO en la formacin y mantenimiento de lmites y gradientes moleculares.
*Financiado por: MEC BFU2005-09085, FPI BES-2006-12420 (I.C.E.),
y Programa Ramn y Cajal 2004 (D.E.)
Soria JM (1,2), Martnez Ramos C (1,2), Bahamonde O (1), Lainez S

(2), Sancho-Bielsa F (2), Garca Esparza MA (1), Planeis R (2), Garca
Verdugo JM (2), Monlen Pradas M (2,3), Barcia JA (2).
(1) Fundacin Hospital General Universitario de Valencia, Tres Cruces s/n, 46014 Valencia, Spain. (2) Centro de Investigacin Prncipe
Felipe,. Autopista del Saler 16, 46013 Valencia, Spain. (3) Centro de
Biomateriales, Universidad Politcnica de Valencia, PO Box 22012,
Valencia, Spain
A series of polymeric biomaterials including, poly(methyl acrylate)
(PMA), chitosan (CHT), poly(ethyl acrylate) (PEA), poly(hydroxyethyl
acrylate) (PHEA), and a series of random copolymers containing ethyl
acrylate, hydroxyethyl acrylate and methyl acrylate monomneric and units
were tested in vitro as culture substrates and compared for their impact
on the differentiation of neural stem cells obtained from the subventricular zone (SVZ) of postnatal rats. Immunocytochemical staining assay
for specific markers and scanning electron microscopy techniques were
applied in order to perform a quantitative analysis to determine the adhesion and neuronal differentiation of the cultured neural stem cells on
to the different biomaterials. Action potential properties and membrane
excitability of differentiated neural stem cells were investigated by patchclamp recording. The results strongly suggest that cell attachment and
neuronal differentiation is influenced by the substrates surface chemistry,
and that biomaterials based on PEA and PHEA in a narrow composition
window are suitable substrates to promote cell attachment and differentiation of adult neural stem cells into functional neurons and glia
Rodrguez Hernndez et al., Biophysical Journal. 2007 Apr 7
Soria et al. J Biomed Mater Res A. 2007 May 4
Soria et al., J Biomed Mater Res A. Dec 1;79(3):495-502 (2006)
83

Regulacin de la expresin de BMP7 por
BDNF y su funcin en la formacin de la
corteza cerebral
Ortega JA, Alcntara S.
Departamento de Patologa i Teraputica Experimental, Facultad de
Medicina. Universidad de Barcelona
Durante el desarrollo de la corteza cerebral el factor neurotrfico
derivado de cerebro (BDNF) est implicado en procesos como la sinaptognesis, crecimiento axnico, arborizacin dendrtica, migracin y
maduracin de interneuronas entre otros. Los niveles de BDNF aumentan en respuesta a actividad, por lo que podra actuar como un sensor
molecular coordinando la maduracin de diferentes sistemas durante el
desarrollo cortical. Niveles anormalmente elevados de BDNF se han relacionado con algunas condiciones neuropatolgicas infantiles como el
autismo y la epilepsia.
Nuestro objetivo es identificar genes potencialmente regulados por
BDNF que pudieran estar implicados en la formacin y maduracin de
la corteza cerebral. Para ello, hemos analizado el patrn de expresin
gnica diferencial entre cortezas cerebrales de ratn a E18 que haban
sido inyectadas a E14 con BDNF o vehculo. Utilizamos un microarray
con 837 genes incluyendo protenas secretables, receptores, factores de
transcripcin, y protenas de citoesqueleto. Con esta aproximacin hemos identificado una coleccin de genes regulados diferencialmente por
BDNF, entre los que se encuentra la protena secretable BMP7.
Nuestros datos muestran que BMP7 est sobrexpresado en meninge respecto a corteza, por lo que podra estar generando un gradiente
radial de concentracin y actuar como molcula seal en procesos de
migracin y organizacin de la corteza cerebral. Adems, BDNF induce
un aumento local en la expresin de BMP7 en la corteza, tanto a nivel de
mRNA como de protena. Por ltimo, presentaremos evidencias sobre el
papel de BMP7 en el control de la maduracin glial.
Tsai (2005)Medical Hypotheses 65,79-82
Scharfman (2005)Epilepsy Currents 5,83-88
Fukumitsu et al.(2006)J.Neurosci. 26,13218-13230
Aguado et al. (2003)Development 130,1267-1280
Gorski et al. (2003)J.Neurosci. 23,6856-6865

Efectos de GABA y receptores de GABA en la
diferenciacin de neuronas dopaminrgicas a partir de clulas precursoras.
Parga Martn JA; Rodrguez-Pallares J, Joglar B, Rey P, Guerra MJ,
Labandeira-Garca JL.
Estudios previos muestran que los neurotransmisores controlan la
neurognesis en el SNC y se ha relacionado la sealizacin mediada por
el cido g-amino butrico (GABA) con la regulacin de prcticamente todas las fases clave del desarrollo. La generacin de neuronas dopaminrgicas a partir de clulas troncales/precursoras para terapia celular en la
enfermedad de Parkinson es actualmente un tema de gran inters en este
campo. Sin embargo no haban sido estudiados los posibles efectos del
GABA sobre la generacin de neuronas dopaminrgicas. En este trabajo
se observ que las clulas dopaminrgicas contienen receptores GABAA
y GABAB. El tratamiento con GABA no provoc cambios significativos
en la generacin de clulas dopaminrgicas a partir de precursores mesenceflicos. Sin embargo, el tratamiento con bicuculina, antagonista de
receptores GABAA, provoc un aumento significativo en el nmero de
clulas dopaminrgicas, mientras que el tratamiento con antagonistas de
receptores GABAB produjo su reduccin. Estudios sobre supervivencia y
proliferacin sealaron que las diferencias en la generacin de neuronas
dopaminrgicas anteriormente mencionadas eran debidas al aumento o
disminucin en la diferenciacin de precursores mesenceflicos hacia el
fenotipo dopaminrgico. Los resultados sugieren que estos efectos son
provocados a travs de receptores de GABA localizados en los precursores dopaminrgicos, y no son consecuencia indirecta de efectos en las
poblaciones celulares serotoninrgicas o gliales. La administracin de an-
84
tagonistas de receptores GABAA en el medio de diferenciacin podra

ayudar a obtener un mayor nmero de neuronas dopaminrgicas para su
uso en terapia celular para la enfermedad de Parkinson.

Diseccin molecular de la funcin de
beta-neurexinas en el ensamblaje de terminales presinpticos mediante el empleo de
sistemas lentivirales.
Pez Gmez JA, Muoz Bravo JL, Gmez Scholl F
Dpto. Fisiologa Mdica y Biofsica, F. Medicina, Universidad de Sevilla.
Las neurexinas pertenecen a una amplia familia de protenas de membrana con cientos de isoformas relacionadas con la diferenciacin sinptica. Las neurexinas son receptores axonales de las neuroliguinas, protenas
de membrana postsinptica que median la formacin de sinapsis. Se ha
propuesto que la unin trans-sinptica de isoformas concretas de neurexinas con isoformas de neuroliguinas pueden sealizar la formacin de
sinapsis gabargicas o glutamatrgicas. Sin embargo, la ruta molecular por
la que neurexinas regula el ensamblaje de los terminales presinpticos no
se conoce completamente.
Usando una combinacin de tcnicas de biologa molecular, celular
y de imagen estamos estudiando la ruta de sealizacin que regula el
ensamblaje de terminales mediados por beta-neurexinas. Neuroliguina-1
(a,b), una isoforma de neuroliguina que se une solamente a beta-neurexinas, induce la formacin de sinapsis glutamatrgicas. Hemos diseado sistemas lentivirales especficos de neuronas que nos permiten la diseccin
funcional de beta-neurexinas durante la sinaptognesis. La insercin de un
promotor neuronal en el genoma viral dirige la expresin de isoformas de
beta-neurexinas en neuronas durante la fase de ensamblaje presinptico.
Se presentan resultados en los que la estructura y funcin de los terminales presinpticos se analizan por tcnicas de imagen.

La sealizacin mediada por CXCL12/CXCR4
controla la entrada de las interneuronas
GABArgicas en la placa cortical y determina su distribucin laminar y regional
Snchez Alcaiz JA, Lpez-Bendito G, Pla R, Borrell V, Pic E, Valdeolmillos M, Marn O
Instituto de Neurociencias de Alicante, CSIC & Universidad Miguel
Hernndez, 03550 Sant Joan dAlacant
El funcionamiento de la corteza cerebral requiere del ensamblaje
coordinado de las neuronas de proyeccin glutamatrgicas y las interneuronas GABArgicas. Estudios previos han demostrado que las neuronas
de proyeccin y las interneuronas que nacen sincrnicamente ocupan las
mismas capas corticales, pero los mecanismos que controlan este proceso son todava desconocidos. En este estudio hemos empleado videomicroscopa en tiempo real y manipulaciones de rodajas en cultivo para
estudiar el comportamiento de las interneuronas despus de su llegada a
la corteza. Nuestros experimentos muestran que las interneuronas evitan
la entrada en la placa cortical (CP) durante un periodo de aproximadamente 48 horas tras su llegada a la corteza, tiempo que aprovechan para
dispersarse tangencialmente a travs de la zona marginal (MZ) y la zona
subventricular (SVZ). La ausencia de interneuronas en la CP durante este
periodo no est regulada por la existencia de molculas repulsivas en esa
zona, sino por la presencia de molculas altamente permisivas en la MZ y
SVZ. Hemos identificado la quimioquina CXCL12 y su receptor CXCR4
como componentes necesarios en este proceso. La perturbacin de esta
va de sealizacin provoca la entrada prematura de las interneuronas en
la CP, lo que produce defectos en su laminacin y dispersin regional en la
corteza a largo plazo. Estos resultados sugieren que la regulacin de la invasin de la CP por las interneuronas GABArgicas es un evento esencial
en el desarrollo cortical, puesto que influye de manera determinante en el
ensamblaje coordinado de neuronas glutamatrgicas y GABArgicas.

pIkBa es esencial para la formacin del

axn y del segmento inicial del axn.
PATRONES DE EXPRESIN DE LOS GENES MEIS EN

EL DESARROLLO DEL ODO INTERNO DE AVES
Sanchez-Ponce D (1),Tapia M (1), del Puerto A. (1), Garca-Maurio M

(1), Muoz A (2), Garrido JJ (1).
(1) Instituto Cajal, CSIC, Av. Doctor Arce, 37. Madrid 28002. (2)
Departamento de Biologa Celular, Universidad Complutense de
Madrid. Madrid 28040
Luis Oscar Snchez Guardado; Jose Luis Ferran 2, Luis Puelles 2 ,

Luca Rodrguez-gallardo 1 y Matas Hidalgo-snchez 1, *.
1 Dpto Ciencias Morfolgicas y Biologa Celular y Animal. Universidad de Extremadura. Badajoz. 2 Dpto Anatoma Humana y Psicobiologa. Universidad de Murcia. Murcia.
La funcionalidad neuronal depende de una estrecha relacin entre la

diferenciacin morfolgica y funcional de las neuronas. El primer paso es
la diferenciacin de un axn para establecer un dominio somatodendrtico y un dominio axonal. La maduracin de cada uno de estos dominios
genera subdominios como las espinas dendrticas y el segmento inicial
del axn, responsables de recibir la informacin y generar el potencial
de accin, respectivamente. Los mecanismos intracelulares asociados con
la formacin del axn an no son bien conocidos, si bien se sabe que la
actividad de PI3-quinasa es necesaria para formar el axn, regulando la
actividad de otras vas de sealizacin. Adems de PI3-quinasa, se han
descrito otras protenas cuya actividad es necesaria para formar un axn,
como GSK3 y JNK. En el presente trabajo, identificamos una nueva protena implicada en la formacin del axn en neuronas de hipocampo en
cultivo, IkBa, ms conocida por su funcin en la regulacin de la actividad
de NFkB. En secciones de cerebro la forma fosforilada de IkBa se localiza
en el segmento inicial del axn. En neuronas de hipocampo en cultivo,
pIkBa se polariza al axn desde el inicio de la formacin del axn y posteriormente se concentra en el segmento inicial del axn (AIS). La inhibicin farmacolgica de esta fosforilacin impide la formacin del axn y
cuando la inhibicin se produce tras la formacin del axn, el segmento
inicial del axn no se forma correctamente.
El odo interno de vertebrados en un complejo rgano sensorial con

funciones vestibulares y auditivas, el cual deriva de las placodas ticas,
porciones engrosadas del ectodermo ceflico que sufren importantes
cambios morfogenticos para dar lugar al odo interno del adulto. Durante el desarrollo embrionarios los neuroblastos se desprenden del epitelio
tico para formar el ganglio acstico-vestibular, el cual inerva a los diferentes elementos sensoriales. La especificacin del epitelio tico, tanto en
la formacin de elementos sensoriales y no sensoriales como de la regin
proneural, parece estar regulada por la expresin asimtrica de diversas
familias de genes, proporcionando una identidad posicional durante el
desarrollo de esta compleja estructura tridimensional. En el presente trabajo, describimos los patrones de expresin espacio-temporal de los factores de transcripcin Meis en el desarrollo embrionario del odo interno
de aves desde el estadio 18 al 34 de Hamburger y Hamilton. Durante
el periodo analizado, la expresin de Meis 1 y Meis 2 se observa en los
canales semicirculares y en una reducida porcin de la pared medial del
conducto endolinftico. Meis 1 presenta adems una expresin muy dbil
en la cresta de cada canal semicircular y en la pared lateral del conducto
coclear, mientras que la expresin de Meis 2 se detecta tambin en clulas
dispersas del ganglio acstico-vestibular. Los niveles altos de expresin de
los genes Meis sugieren un posible papel en el desarrollo de los canales
semicirculares y sus correspondientes elementos sensoriales.

Efecto de la Neurogenina3 sobre la morfologa dendrtica de las neuronas del
hipocampo
Simn Martn J (1), Membrive G (1), Dopazo A (2), Rodrguez-Tbar
A (3), Arvalo MA (1).
1. Instituto Cajal. CSIC; Madrid. 2. CNIC. Madrid; 3. CABIMER. Sevilla.
La sobrexpresin de la Neurogenina 3 (Ngn3), un gen proneural bajo
el control del receptor Notch produce, en las neuronas del hipocampo de
cerebro de ratn, un cambio en la morfologa dendrtica y en las sinapsis
GABArgicas (1). Para estudiar la va de sealizacin que desencadena
la Ngn3, hemos generado un virus Sindbis que expresa la Ngn3 y hemos
infectado con l neuronas de hipocampo en cultivo. Mediante inmunocitoqumica, hemos observado que en neuronas infectadas por el virus,
la Ngn3 se localiza no slo en el ncleo de las neuronas, como era de
esperar por ser un factor de transcripcin, sino tambin en las dendritas
y axones. Esto sugiere la existencia de una nueva funcin para esta protena, que hasta ahora no ha sido descrita. Con el RNA total extrado de
dichas neuronas y de otras infectadas con el mismo virus expresando GFP,
hemos realizado un estudio comparado de la expresin gnica utilizando
microarrays de DNA, resultando que 325 genes modifican sus niveles de
expresin de forma significativa, algunos de los cuales estn relacionados
con los efectos que la Ngn3 produce sobre las neuronas. Uno de ellos
es Fmn1, que codifica para la protena Formina1, la cual, segn estudios
previos, interviene en la nucleacin y polimerizacin de los filamentos de
actina (2). La sobrexpresin de la Formina1 en las neuronas del hipocampo, produce efectos similares a los de la Ngn3, lo cual sugiere que ambas
protenas desempean una funcin en la va de sealizacin conducente
al desarrollo de las dendritas.
(1): Salama-Cohen et al. J Neurochem. 2006, 97:1269-78.
(2): Pruyne et al. Science. 2002, 297: 612-5.

La supresin de la expresin de la subunidad beta1 de guanilato ciclasa soluble
retrasa el desarrollo de las neuronas
granulares en cultivo
M Elena Lpez Jimnez, Jos Snchez-Prieto, Magdalena Torres.
Dpto. Bioqumica. Facultad de Veterinaria. UCM
La va de sealizacin NO/cGMP juega un papel importante en el
desarrollo del SNC en invertebrados regulando procesos como la migracin neuronal, el crecimiento de dendritas y axones y la sinaptognesis.
Rresultados obtenidos con modelos in vitro sugieren que esta va tambin regula diversos procesos relacionados con el desarrollo neuronal en
mamferos, como son: crecimiento axonal y de dendritas y formacin de
las conexiones sinpticas (1,2), aunque su funcin exacta depende del
tipo de neuronas (3). En vertebrados esta va es compleja y est integrada por el producto de numerosos genes, esto hace que los estudios
realizados para conocer el papel de cada una de estas protenas no sean
concluyentes, y a veces los resultados sean contradictorios. En el caso de
la guanilato ciclasa soluble cuando se suprime el gen que codifica para la
subunidad beta1 los animales mueren normalmente antes del nacimiento
o a los pocos das despus de nacer (4), sugiriendo un papel vital de esta
protena, aunque se desconoce si es vital para el correcto desarrollo del
sistema nervioso. La supresin de la exprexin de la subunidad beta 1 de
guanilato ciclasa (mediante el empleo de oligonucletidos antisentido y
de siRNA) en neuronas granulares de cerebelo en cultivo se traduce en
una reduccin de la viabilidad de las mismas. En estas clulas disminuye la
expresin de la protena GAP-43 y se observa un retraso y una disminucin en el crecimiento de neuritas.
Financiado con BFU2006-01012. M.E. Lpez becaria UCM.
1.Polleux et al. (2000). Nature 404:567-573.
2.Nishiyama et al. (2003) Nature 423:990-995.
3.Zhang et al. (2005) J. Neurosci. 25:2761-2770.
4.Friebe et al. (2005) BMC Pharmacology 5(Suppl 1):P18.
85
Deglicosilacin y redistribucin subcelular de VMAT2 en el sistema mesoestriatal de

la rata durante el envejecimiento.
Efecto del tratamiento subcrnico con

corticosterona sobre la actividad noradrenrgica central en rata. Un estudio mediante microdilisis in vivo.
Ignacio de la Cruz Muros; Domingo Afonso-Oramas(1), Pedro

Abreu (2), Manuel Rodrguez, M. Carmen Gonzlez (2) y Toms Gonzlez-Hernndez (1)
(1) Departamento de Anatoma, Facultad de Medicina, Universidad
de La Laguna, 38207 La Laguna, Tenerife, Espaa. (2) Departamento de Fisiologa, Facultad de Medicina, Universidad de La Laguna,
38207 La Laguna, Tenerife, Espaa.
El transportador vesicular de monoaminas tipo 2 (VMAT2) es una
glicoprotena transmembrana responsable del almacenamiento de monoaminas en las vesculas sinpticas del sistema nervioso central. Se ha
demostrado que esta funcin disminuye en el sistema dopaminrgico
mesoestriatal durante el envejecimiento, pero el mecanismo responsable
de este fenmeno es actualmente desconocido. En este trabajo hemos
estudiado posibles cambios en la expresin y distribucin subcelular de
VMAT2 en el sistema mesoestriatal de la rata durante el envejecimiento
(6 meses, 20 meses y 26 meses de edad). Nuestros resultados muestran
que el VMAT2 se expresa constitutivamente en tres formas: una glicosilada (75 KDa), otra parcialmente glicosilada (55 KDa) y otra no glicosilada
(45 KDa). Todas ellas presentes tanto en la membrana plasmtica como
en la fraccin vesicular de sinaptosomas de animales jvenes (6 meses).
En los animales envejecidos (20 y 26 meses), no se encontraron cambios
en los niveles del mensajero (VMAT2mRNA) a nivel mesenceflico, ni
en los niveles totales de la protena en mesencfalo y estriado. Sin embargo, la distribucin subcelular de la protena y su patrn de glicosilacin se encontraron claramente modificados. Las tres formas de VMAT2
virtualmente desaparecieron de la fraccin vesicular, mientras la forma
parcialmente glicosilada (55 KDa) se encontr aumentada en la fraccin
soluble. Estos cambios pueden ser los causantes de la prdida de actividad VMAT2 y contribuir a la mayor susceptibilidad a la degeneracin de
las neuronas dopaminrgicas durante el envejecimiento.

Receptores olfativos secundarios: papel de
los vasos vomeronasales en la captacin
de mediadores qumicos
Salazar I*, Snchez Quinteiro P*, Prieto MD**
* Departamento de Anatoma y Produccin Animal. Unidad de
Anatoma y Embriologa. Facultad de Veterinaria. Lugo. Universidad
de Santiago de Compostela** Departamento de Fisiologa. Facultad de Farmacia. Universidad Complutense de Madrid
La mayora de mamferos terrestres poseen un sistema del olfato
secundario o sistema vomeronasal (SVN), supuestamente especializado
en la deteccin de feromonas. Los receptores vomeronasales se localizan
en el interior del rgano vomeronasal (OVN), en la pared medial de su
conducto (CVn). El CVn est rodeado por tejido blando y todo l envuelto por una lmina sea o cartilaginosa, segn especies.
Hace aos se demostr que en el hamster exista un mecanismo
vasomotor que provocaba succin de sustancias qumicas al interior del
CVn. Con posterioridad se estudi inmunohistoqumicamente la innervacin de los vasos vomeronasales, en ratones y ratas. En las especies
citadas el CVn comunica exclusivamente con la cavidad nasal, a diferencia
de lo que ocurre en otro modelo de organizacin, tpico de carnvoros y
ungulados, en el que el CVn desemboca en el conducto incisivo y, a travs
de l, comunica con las cavidades nasal y oral.
En base a esa diferencia sustancial de comunicacin, se consider de
inters estudiar si los vasos vomeronasales en especies con el segundo
modelo- participaran tambin en un supuesto mecanismo de bomba
fisiolgica. Nuestros estudios en ungulados, oveja y vaca, ponen de manifiesto, por un lado, que los vasos vomeronasales de estas especies poseen
una rica inervacin sensible y autonmica (CGRP, n-NOS y NPY). Por
otro lado, fue posible evaluar en las arterias vomeronasales de la vaca los
efectos funcionales de los neurotrasmisores mediante la utilizacin del
migrafo microvascular. Se confirm el efecto vasoconstrictor y vasodilatador presentes en las fibras perivasculares.
86
Igor Horrillo, Jorge E. Ortega, Leyre Urigen y J. Javier Meana.

Departamento de Farmacologa. Universidad del Pas Vasco/Euskal
Herriko Unibertsitatea. Leioa (Bizkaia).
Se ha sugerido que el estrs crnico induce alteraciones en la sensibilidad de los adrenoceptores alfa-2 a travs de una desregulacin del
eje hipotlamo-hipfiso-suprarrenal. El objetivo de este trabajo fue estudiar la respuesta funcional al agonista de los adrenoceptores alfa-2 clonidina de la concentracin extracelular de noradrenalina (NA) evaluada
mediante microdilisis cerebral en rata despierta tras tratamiento subcrnico con corticosterona (18 mg/kg/da; pellet s.c.; 14 das). El efecto
inhibitorio inducido por la administracin local de clonidina en el locus
coeruleus (LC) o en la corteza prefrontal (CPF) sobre los niveles de NA
fue considerado como indicador de la sensibilidad de los adrenoceptores alfa-2. No hubo diferencias en los niveles basales de NA entre los
grupos control ([NA]LC=1.570.24 nM, [NA]CPF=2.760.56 nM) y tratado ([NA]LC=2.300.36 nM, [NA]PFC=2.990.67 nM). La clonidina en
LC indujo una disminucin de NA tanto en LC (Emaxcontrol= -591%,
n=7; Emaxtratado= -439%, n=9) como en CPF (Emaxcontrol= -5413%,
n=8; Emaxtratado= -49 18%, n=9) sin presentar diferencias significativas
entre grupos control y tratado en ninguna de las reas. La clonidina en
CPF indujo una disminucin de NA en CPF (Emaxcontrol= -4816%, n=6;
Emaxtratado= -5611%, n=8) sin diferencias significativas achacables al
tratamiento. En conclusin, el tratamiento durante 14 das con corticosterona, que ha sido propuesto como modelo subcrnico de regulacin
noradrenrgica, no es capaz de inducir cambios en la sensibilidad de los
adrenoceptores alfa-2 que regulan la liberacin de NA.
MSC (REM-TAP), DPE 06/04, MCyT/MEC (SAF 01/0553, SAF
04/02784) y FEDER.
IH y JEO son becarios del MEC y UPV/EHU, respectivamente.

Plasticidad intermodal somatosensorial
en el colculo superior de la rata adulta
en respuesta a la desaferenciacin retiniana neonatal
Iaki Carril Mundiano; Luis Martinez-Millan
Dpto. Neurociencias de la Facultad de Medicina de la Universidad
del Pais Vasco
En este estudio se ha pretendido demostrar la morfologa y la eficacia de la neurotransmisin glutamatrgica de la conexin somatosensorial
desde la zona de los barrels al colculo superior (CS) y sus cambios tras
la desaferenciacin visual, llevada a cabo en el neonato. Con el trazador
biotin dextranamina inyectado en los barrels corticales y la estimulacin
de esta regin colocando a los animales en ambientes enriquecidos o
administrando agonistas de los receptores dopaminrgicos (con lo que se
desencadena un aumento de los movimientos de las vibrisas) se objetiv
el campo terminal de esta conexin en el estrato gris intermedio, en donde adopta el aspecto de parches, as como la respuesta con la expresin
del gen c-Fos en esta zona colicular, detectada mediante inmunohistoqumia tras las estimulaciones citadas. Despus de la desaferenciacin visual
en el neonato, la conexin desde la zona de barrels asciende al estrato
ptico y al estrato gris superficial en las porciones laterales del CS y se
halla una respuesta de c-Fos en las neuronas de esta zona, indicando la
eficaz neurotransmisin de estas conexiones. De esta forma, parece existir un intento de reclutamiento de neuronas coliculares superficiales en
el CS de los animales sometidos a desaferenciacin visual.

Speed illusions: psychophysics and neuronal responses from MT
EFECTOS DEL HIPOTIROIDISMO ADULTO SOBRE

FUNCIONES DEPENDIENTES DE LA FORMACIN
DEL HIPOCAMPO
Ins Trigo Damas; Ulrich Biber, Uwe Ilg

Hertie Institute for Clinical Brain Research
Our perception of speed is not exclusively determined by the velocity of the stimulus. The waterfall illusion is an example of motion perception without moving stimuli. Here, we focus on the effect of stimulus size
on speed perception. Initially, we tried to document that monkeys share
this illusion with human.
We used a sequential two-alternative forced choice task in which
the monkeys compared the speed of two sequentially displayed motion
stimuli with different sizes.Two saccade targets were shown after the presentation of stimuli; selection of the left target signalled that first stimulus
appeared faster, selection of the right target signalled that second stimulus
appeared faster. We fitted the psychophysical data with a logistic function
using the point of subjective equality of speed (PSE) as a measure of the
illusion changes: if the first stimulus was smaller, the second stimulus has
to be faster (approx. 2 deg/s). If the second stimulus was smaller, the first
stimulus has to be faster.
We also recorded single-unit activity from area MT while the monkey
fixated a stationary target and we measured the individual speed transfer
function with four increasing stimulus sizes for each cell. The neuronal
response to a given velocity did not reveal a systematic influence of stimulus size. We fitted speed tuning transfer functions to our data and
determined the optimal velocity of each neuron for each stimulus size.
This optimal velocity increased with increasing stimulus size. This clearly
indicates that the activity of MT neurons display the speed illusion.

EFECTO DE LAS CONDICIONES DE ILUMINACION
SOBRE EL DESARROLLO POSTNATAL DE LAS CLULAS GANGLIONARES FOTORRECEPTORAS MELANOPSINA POSITIVAS EN LA RETINA DE RATN
Irene Gonzlez Menndez; Jos Manuel Garca Fernndez, Rafael
Cernuda Cernuda
Departamento de Morfologa y Biologa Celular, Facultad de Medicina, Universidad de Oviedo
En la retina se localiza una subpoblacin de clulas ganglionares que
expresan el pigmento fotosensible melanopsina. Estas clulas poseen esta
propiedad desde el nacimiento, y envan la informacin de los ciclos de
luz-oscuridad al ncleo supraquiasmtico y otras reas del cerebro, ajustando el ritmo circadiano endgeno.
Hasta el descubrimiento de estos fotorreceptores de la retina interna se crea que este papel lo ejercan los conos y bastones. Hoy en da
sabemos que ambos sistemas contribuyen a la llamada fotorrecepcin
circadiana.
Nuestra investigacin se ha centrado en el desarrollo postnatal de las
clulas ganglionares que expresan melanopsina, y en cmo se ve afectado
por las variaciones de los ciclos de luz y oscuridad.
Para ello se utilizaron ratones de la cepa Swiss. Los animales fueron
sometidos a distintos ciclos: luz continua, oscuridad continua y ciclos de
luz-oscuridad. Los grupos se mantuvieron en estas condiciones desde su
nacimiento hasta su sacrificio. Se elegieron distintas edades de estudio
para realizar un anlisis completo del desarrollo postnatal: PN 1, PN 5, PN
11 y PN 21. Las muestras tomadas fueron analizadas mediante inmunohistoqumica, usando un anticuerpo policlonal contra melanopsina.
Nuestros resultados indican que existe variacin en la cantidad y
la distribucin en la retina de la protena melanopsina en relacin con la
edad del animal. Adems hemos detectado una variacin de la cantidad de
melanopsina dependiendo de las condiciones de iluminacin en el que ha
permanecido el animal.
Con el fin de conocer si esta variacin en la regulacin de la melanopsina ocurre en otras cepas de ratones, se estudi con los mismos
procedimientos retinas de ratones pigmentados de la cepa C3H+/+. Este
estudio comparativo muestra diferencias significativas entre las dos cepas
en las tres condiciones ambientales
I Fernndez de Lamo; A Montero-Pedrazuela1*, A Gruart2, C Venero3, JM Delgado-Garca2 y A Guadao-Ferraz1

1 Departamento de Endocrinologa Molecular, Instituto de Investigaciones Biomdicas Alberto Sols, Consejo Superior de Investigaciones CientficasUniversidad Autnoma de Madrid, Madrid. 2
Divisin de Neurociencias, Universidad Pablo de Olavide, Sevilla. 3
Departamento de Psicobiologa, Universidad Nacional de Educacin a Distancia, Madrid.
Se sabe que la correcta generacin de nuevas neuronas granulares
en el giro dentado del adulto requiere niveles normales de hormonas tiroideas (HTs). La generacin de nuevas neuronas granulares se considera
un mecanismo de plasticidad neuronal y se ha relacionado con diferentes
tipos de memoria dependiente de la formacin hipocampal. Para investigar la participacin de las HTs en los procesos de aprendizaje y memoria
dependiente del hipocampo en el adulto, hemos explorado la memoria
emocional y declarativa en grupos de animales con distinto estado tiroideo. Se han realizado diferentes tareas de condicionamiento utilizando
3 grupos de ratas Wistar macho adultas: eutiroideas, hipotiroideas (por
tiroidectoma quirrgica) y recuperadas (hipotiroideas tratadas con HTs).
En el condicionamiento al contexto, el grupo hipotiroideo mostr un
aumento del tiempo de inmovilidad con relacin al grupo eutiroideo slo
a las 3 semanas del entrenamiento. En el condicionamiento al sonido, las
ratas hipotiroideas mostraron un aumento del tiempo de inmovilidad 1
y 4 semanas despus del entrenamiento. Estos resultados indican que la
memoria emocional est potenciada por el hipotiroidismo, probablemente por un mecanismo independiente del hipocampo. En el periodo de
adquisicin de un condicionamiento clsico del reflejo parpebral, el grupo
de ratas hipotiroideas obtuvo un 70% menos de respuestas condicionadas
que los animales eutiroideos. El tratamiento hormonal recuper las anomalas debidas al hipotiroidismo en esta prueba de aprendizaje asociativo.
Esto indica que la deficiencia de HTs interfiere con la adquisicin de esta
memoria asociativa dependiente del hipocampo. Actualmente, se estudian
los mecanismos celulares afectados por el hipotiroidismo.

Regulacin del acople a protenas Gi/o de
receptores de galanina y muscarnicos en
reas lmbicas de ratones triple transgnicos 3xTg-AD, modelo de enfermedad de Alzheimer.
Ivn Manuel(1),Toni Caete (2), Frank M. LaFerla(3), Lydia GimnezLlort(2), Rafael Rodrguez-Puertas(1)
(1)Dpto. Farmacologa. Universidad del Pas Vasco, UPV/EHU.
(2)Dpto. Psiquiatra y Medicina Legal, Instituto de Neurociencias,
UAB. (3)Dept. Neurobiology & Behaviour, University of California,
Irvine, USA.
Los ratones triple transgnicos (3xTg-AD) albergan tres genes mutados: -amiloide (APPSwe), presenilina-1 (PS1M146V) y tauP301L. Estos
ratones desarrollan progresivamente A y ovillos neurofibrilares con un
perfil especfico temporal y regional que imita el desarrollo de la enfermedad de Alzheimer (EA) en humanos. En animales 3xTg-AD de 4 meses
aparecen depsitos de A intracelular, no as placas. Aunque en esta etapa
del desarrollo los ratones no presentan deterioro en memoria o aprendizaje segn el test Morris Swim Maze, s parece aumentar su estado de
ansiedad. Estudios previos han demostrado tanto la modulacin de receptores colinrgicos muscarnicos presinpticos, M2 (disminucin) como de
galanina (aumento) en el hipocampo de pacientes con EA. El presente
estudio analiza el acople funcional de la protena G a receptores de galanina, GALR1 y a receptores muscarnicos presinpticos, M2, en reas
lmbicas y relacionadas con el aprendizaje. En el hipotlamo aumenta la
fijacin de GTP?S[35S] en los ratones macho 3xTg-AD en presencia de
galanina, [Tg (55,8010,38) vs WT (22,838,76) t-test p=0,037] mientras
que en amigdala posterior se observa un descenso en el acople funcio-
87
nal de receptores M2 [Tg (25,507,92) vs WT (6014,11) t-test p=0,05.

Esta regulacin neuroqumica en reas lmbicas es coherente con el perfil
ansioso observado en este primer estadio neuropatolgico de la enfermedad (incremento de la conducta de freezing en el campo abierto:
Tg (3814.2) vs WT (9.834.5) t-test p ? 0.08). Estos resultados podran
relacionar la aparicin de A intraneuronal con el control sinptico y el
perfil de ansiedad como primeros indicadores patolgicos.

IMPLICACIN DEL RECEPTOR CB1 DE CANNABINOIDES EN EL CONTROL DE LA PROYECCIN DE
LA CORTEZA INFRALMBICA PREFRONTAL AL NCLEO DEL LECHO DE LA ESTRA TERMINAL
Izaskun Elezgarai1, Nagore Puente1,2, Lma Massi2, Leire Reguero1, Franois Georges2, Olivier J. Manzoni2 and Pedro Grandes1
1Departamento de Neurociencias, Facultad de Medicina y Odontologa, Universidad del Pas Vasco/Euskal Herriko Unibertsitatea, E48940, Leioa, Vizcaya. 2INSERM U862 Equipe Physiopathologie de
la Transmission et de la Plasticit Synaptique, 146 Rue Lo-Saignat,
33077 Burdeos, Francia.
El ncleo del lecho de la estra terminal (BNST) y la corteza prefrontal estn implicados en conductas relacionadas con la recompensa natural,
drogadiccin y stress. Por otra parte, es conocida la participacin del
sistema endocannabinoide en estados conductuales, sin embargo, la localizacin y funcin de los receptores CB1 de cannabinoides (RCB1) en el
BNST no son conocidas. En esta investigacin hemos combinado tcnicas
morfolgicas y electrofisiolgicas in-vivo y ex-vivo con el fin de conocer la
distribucin y funcin de los receptores CB1 en el BNST en relacin con
la proyeccin de la corteza infralmbica prefrontal. Empleamos tcnicas inmunocitoqumicas para microscopa electrnica en el BNST, que demostraron la localizacin de RCB1 en terminales presinpticos. Por medio de
registros in vivo de neuronas del BNST de ratas anestesiadas, observamos
que la activacin de RCB1 ocurra tras una seal excitadora procedente
de la corteza infralmbica. Esta activacin tena como consecuencia la inhibicin presinptica de la transmisin excitadora. Estos hallazgos fueron
ulteriormente confirmados por la localizacin ultraestructural de RCB1
en botones presinpticos de neuronas corticales, identificados con trazadores antergrados inyectados en la corteza infralmbica. En conclusin,
la proyeccin de la corteza infralmbica prefrontal al BNST modulada por
RCB1 presinpticos desempea un papel estratgico en la regulacin de
las vas cerebrales relacionadas con el estrs y la recompensa a drogas.
Agradecimientos: Este trabajo ha sido subvencionado por el Ministerio de Educacin y Ciencia BFU2006-11367/BFI y por el INSERM. La participacin de Izaskun Elezgarai ha sido subvencionada por la UPV/EHU a
travs de la Subvencin General a Grupos Consolidados 9/UPV212.32714442/2002.

EFECTO DE LOS CAMBIOS DE TEMPERATURA AMBIENTAL EN LA PERCEPCIN OLFATIVA DE Drosophila melanogaster: ANLISIS COMPORTAMENTAL Y ELECTROFISIOLGICO
Jacob Rivern Miranda; Fernando Martn y Esther Alcorta
Universidad de Oviedo
Los sistemas sensoriales deben ser capaces de aclimatarse a los cambios ambientales para preservar as la capacidad de obtener del ambiente
informacin relevante para el individuo. En este trabajo se pretende evaluar
el efecto de los cambios de temperatura en la respuesta olfativa de Drosophila melanogaster. La temperatura puede actuar a) cambiando la volatilidad
de los compuestos olorosos del ambiente y b) modificando la biologa interna del individuo, especialmente en organismos poiquilotermos. Nuestro
objetivo a largo plazo es la determinacin de los mecanismos biolgicos
implicados en la olfaccin que se alteran a consecuencia de los cambios de
temperatura ambiental. Inicialmente tratamos de realizar una descripcin
de los cambios de percepcin olfativa causados por distintos tratamientos
trmicos a travs de pruebas de comportamiento en respuesta a distintos compuestos olorosos: etanol, acetona, acetato de etilo y benzaldehdo.
Los resultados indican que el cambio trmico, tanto por aumento como
88
por disminucin de temperatura de unos 9C, induce modificaciones en

la percepcin olfatoria de Drosophila que resultan contrarias en ambos
casos. Basta con 3 horas de tratamiento trmico para poder observar
cambios y el efecto es transitorio, aunque no desaparece inmediatamente.
Para diseccionar el origen de este cambio se ha comenzado un estudio de
funcionamiento de la recepcin olfatoria en individuos tratados, mediante
electroantenogramas (EAG). El calor y el fro causan cambios en sentido
contrario, aumentando y disminuyendo, respectivamente, la amplitud del
EAG.Tambin se aprecian cambios de cintica de la seal.Todo ello sugiere
que las modificaciones se inician ya a nivel perifrico.

Analysis of blood-brain barrier integrity
by quantification of IgG extravasation
Jaume del Valle (a), Carme Pelegr (a), Anna Maria Canudas (b),
Antoni Camins (b), Merc Palls (b) and Jordi Vilaplana (a)
(a)Departament de Fisiologia, Facultat de Farmcia, Universitat de
Barcelona, Av. Joan XXIII s/n., 08028 Barcelona. (b) Unitat de Farmacologia i Farmacognsia, Facultat de Farmcia, Universitat de Barcelona, Av. Joan XXIII s/n., 08028 Barcelona.
The blood-brain barrier (BBB) is the specialized system of capillary endothelial cells that protects the brain from harmful substances in
the blood stream, and supplies the brain with the required nutrients for
proper function. BBB breakdown is theorized to be a key component in
several central nervous system associated pathologies. In order to obtain information about BBB status, the vascular permeability for IgG can
be analysed as this may be increased when a pathological breakdown is
present. IgG and brain vessels can be labelled by immunofluorescence
and we propose here a strategy to quantify IgG extravasation in brain
microvessels. The limits of the brain microvessels and the diffusion limits
of the IgG extravasated around the vessel have been determined.As more
permeability on the BBB generates a higher gradient of IgG on the neuropil, high levels of IgG will extend longer on neuropil from the vessel.
Image treatment and fluorescence analyses of the images are performed
by means of the Image J program (National Institutes of Health, USA).
Three variables were measured from the fluorescence analyses: diameter
of the vessel (VD), extension of IgG extravasation (EE) and relative extension of IgG extravasation (REE). REE was calculated as EE minus VD to
discard possible significant differences on EE due to differences on VD. An
ANOVA using these dependent variables can finally be applied to compare extravasation on different groups of animals. We describe here a novel,
reproducible and reliable method to quantify BBB disruption.

DESTINO DE LAS CLULAS DERIVADAS DE MDULA SEA SANA TRAS SU TRASPLANTE EN UN RATN MUTANTE CON NEURODEGENERACIN
Recio J.S. (1), Weruaga E. (1), Piquer M. (2), Daz D. (1), Valero J. (1),
lvarez-Dolado M. (2), Alonso J.R. (1)
(1) Laboratorio de Plasticidad Neuronal y Neurorreparacin. Instituto de Neurociencias de Castilla y Len. Universidad de Salamanca. Salamanca. (2) Laboratorio de Regeneracin Celular. Centro de
Investigacin Prncipe Felipe. Valencia.
Recientemente se han publicado mltiples estudios sobre la generacin de elementos neurales a partir de clulas de la mdula sea (CMO).
Esto plantea la posibilidad de utilizar CMO como fuente de nuevas clulas
para reparar tejido cerebral daado o restaurar funciones neuronales.
Adicionalmente, se ha sugerido que un microambiente neurodegenerativo podra regular el destino de las CMO. Con este trabajo pretendemos
clarificar si un proceso neurodegenerativo espontneo influye en la llegada y diferenciacin de CMO al cerebro. Adems, estudiaremos cmo diferentes etapas de un proceso neurodegenerativo afectan a este fenmeno.
Para ello empleamos el ratn PCD, que presenta degeneracin selectiva
de poblaciones neuronales especficas a diferentes edades. Estudiamos
el cerebelo y el bulbo olfatorio (BO), donde degeneran las clulas de
Purkinje (a partir de P15) y las clulas mitrales (en torno a P50), respectivamente. El trasplante se realiza intraperitonealmente a P20, previa radiacin de 7,5 Gy, lo que nos permite analizar su efecto en diferentes etapas

del proceso degenerativo: durante el mismo, en el cerebelo, y previo a
ste, en el BO. Utilizamos como donantes animales silvestres machos,
hermanos consanguneos de las hembras mutantes receptoras. Las clulas del donante se identifican mediante FISH de cromosoma Y y tcnicas
inmunohistoqumicas. Los resultados muestran diferencias tanto comportamentales como histolgicas entre los animales PCD trasplantados y los
no tratados, poniendo de manifiesto el efecto del tratamiento.
Estudio financiado por: DGI (SAF2006-05705), Ministerio de Sanidad
y Consumo (PNSD), Junta de Castilla y Len, Federacin de Cajas de
Ahorro de Castilla y Len.
1. lvarez-Dolado M et al. (2003) Nature, 425:968-973.
2. Bae JS et al. (2005) Hum. Gene Ther., 16: 1006-1011.
3. Bae JS et al. (2007) Stem Cells, 25; 1307-1316.
4. Brazelton TR et al. (2000). Science, 290: 1775-1779.
5. Corti S et al. (2002) Exp. Neurol., 177 (2):443-52.
6. Crain BJ, Tran SD y Mezey E (2005) J. Neurol. Sci., 233: 121-123.
7. Long Y y Yang KY (2003) Curr. Mol. Med., 3:719-725.
8. Mezey E et al. (2000) Science, 290: 1779-1782.
9. Mullen RJ, Eicher EM y Sidman RL (1976) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 73: 208-212.
10. Weimann JM et al. (2003) Nat. Cell. Biol., 5 (11):952-4.
11.Vieyra SD et al. (2005) Stem Cells Rev., 1(1):65-9.

Estudio del patrn cinemtico de la marcha de los enfermos de Parkinson (EP) y del
efecto facilitador del movimiento por la
estimulacin sensorial rtmica auditiva,
visual y auditivo-visual.
Javier Cudeiro, Pablo Arias
Los EP presentan una marcha deteriorada (mayor coeficiente de
variacin temporal del ciclo de zancada (CVtemporal), que se asocia al
nmero de cadas, menor amplitud y velocidad). Diversos estudios demuestran que la estimulacin sensorial rtmica mejora la capacidad ambulatoria de los enfermos modificando los patrones del movimiento. Sin
embargo, estos estudios no tienen en cuenta el grado de afectacin de
los pacientes.
En este trabajo analizamos la marcha de los EP en funcin de la severidad de la enfermedad y estudiamos el efecto de la estimulacin sensorial rtmica auditiva, visual y auditivo-visual a una frecuencia igual a la
cadencia de paso de la marcha espontnea. 25 EP y 10 controles tomaron
parte en el estudio. Las variables analizadas fueron: CVtemporal, cadencia
de paso, amplitud de paso, velocidad, y CV de la amplitud de paso (CVamplitud). Los EP presentaron un mayor CVtemporal, menor amplitud de
paso y menor velocidad que los controles. Los EP en fase avanzada (EPIIIIV), adems de presentar las diferencias antes mencionadas, mostraron
un mayor CVamplitud que los controles. Los enfermos con afectacin
leve (EPI-II) no difirieron de los controles en ninguna variable analizada.
La estimulacin auditiva rtmica aument la amplitud de paso y redujo el
CVtemporal en los EPIII-IV.
La utilizacin de la estimulacin sensorial con carcter rehabilitador
debe tener en cuenta el grado de afectacin de los enfermos. La modalidad auditiva (pero no la visual ni la auditivo-visual), ha demostrado ser
efectiva para mejorar la marcha en los EP en fase avanzada.
Xunta de Galicia (PGIDIT06PXIC137004PN)

La estimulacin sensorial rtmica como
una herramienta para facilitar la marcha
de los enfermos de Parkinson. Optimizacin
de las frecuencias de estimulacin.
Pablo Arias Rodriguez; Javier Cudeiro.
En una comunicacin previa hemos demostrado que el uso de la
estimulacin auditiva rtmica a una frecuencia igual a la cadencia de paso
de la marcha espontnea, puede ser utilizada como una herramienta rehabilitadora de la marcha en los Enfermos de Parkinson (EP). De igual
manera, en ese trabajo tambin mostramos que la marcha de los EP en
fases iniciales (fases I y II de Hoehn y Yarh) no difiere de la de los sujetos
control. En esta comunicacin se presentan los resultados de la utilizacin
de diferentes frecuencias de estimulacin de tipo auditivo y visual en un
grupo de 9 EP en fase III y IV Hoehn y Yahr. Los resultados indican que la
estimulacin auditiva rtmica es adecuada para la facilitacin de la marcha
de los EP III-IV, y que las frecuencias de estimulacin que producen este
efecto se circunscriben a un rango que va desde aquella que iguala la
cadencia de paso de la marcha preferida hasta la que iguala la cadencia de
paso a mxima velocidad. Las diferentes frecuencias de estimulacin visual
utilizadas indujeron una modulacin de la cadencia inadecuada a efectos
de rehabilitacin.
La estimulacin sensorial como terapia de apoyo en el parkinson, resulta de utilidad preferentemente cuando se utiliza la va
auditiva, y es necesario realizar un estudio individual para caracterizar la frecuencia ptima de cada paciente.
Xunta de Galicia (PGIDIT06PXIC137004PN)
Efectos de la administracin de clozapina
y haloperidol sobre el incremento de serotonina y glutamato inducido por MK-801
J. Lpez Gil; Z. Babot, P.Vzquez, R. Corts, F. Artigas, A. Adell.
Departamento de Neuroqumica y Neurofarmacologa, Instituto de
Investigaciones Biomdicas de Barcelona, CSIC (IDIBAPS), Barcelona, Spain
Los antagonistas NMDA se utilizan como modelo farmacolgico de
esquizofrenia pues provocan sntomas psicticos y negativos/cognitivos
en individuos sanos y los exacerban en pacientes esquizofrnicos. Asimismo, estos frmacos causan hiperlocomocin y estereotipias que se
asocian con una alteracin de la neurotransmisin glutamatrgica y serotoninrgica. Usando tcnicas de microdilisis intracerebral in vivo hemos
examinado los efectos de dichos antagonistas NMDA en la concentracin
extracelular de serotonina y glutamato en la corteza prefrontal medial
(CPFm). La administracin sistmica (pero no intra-cortical) de MK-801
incrementa la liberacin de 5-HT y glutamato en la CPFm, hecho que
sugiere que los receptores NMDA responsables estn fuera de la CPFm,
probablemente en neuronas GABArgicas que inhiben tnicamente proyecciones glutamatrgicas del tlamo y/o hipocampo hacia la CPFm. Los
incrementos de 5-HT y glutamato extracelulares dependen de impulso
nervioso y de la activacin de receptores AMPA/kainato corticales pues
pueden bloquearse con tetrodotoxina y NBQX, respectivamente. La administracin de clozapina y haloperidol (tanto de forma sistmica como
intra-CPFm) bloquearon el incremento de glutamato inducido por MK801, pero slo la clozapina bloque el incremento de 5-HT. Esto sugiere
que la transmisin serotoninrgica en la CPFm est regulada por mltiples receptores mientras que la transmisin glutamatrgica es fuertemente dependiente de la activacin de los receptores de dopamina D2.
El hecho de que la administracin intracortical de clozapina sea capaz de
prevenir los efectos del MK-801 sobre 5-HT y glutamato sugiere que una
reduccin de la liberacin cortical de ambos neurotransmisores puede
jugar un papel en la accin teraputica de este antipsictico.

Comportamiento del sistema oculomotor
durante la activacin colinrgica del ncleo reticularis pontis caudalis y su implicacin en el sueo REM
J. Mrquez-Ruiz, A. Snchez-Lpez y M. Escudero
Neurociencia y Comportamiento, Fac. de Biologa, Univ. de Sevilla,
Espaa
El comportamiento del sistema oculomotor durante el sueo REM
espontneo se caracteriza por fenmenos tnicos y fsicos, consistentes
en una convergencia y depresin tnicas interrumpidas por brotes de
movimientos oculares rpidos. Aunque se desconoce el origen de stos
89
fenmenos, diversos experimentos de lesin y estimulacin sugieren que

los ncleos reticularis pontis oralis (NRPO) y caudalis (NRPC) son posibles generadores. En el presente trabajo se registr el movimiento de ambos ojos y la actividad de las motoneuronas (Mns) del ncleo del motor
ocular externo (NMOE) tras la inyeccin del agonista colinrgico carbacol en el NRPC. Se prepararon 6 gatos para el registro crnico de sueo
(EMG, EEG y ondas ponto-geniculo-occipitales (PGO)); estimulacin de
ambos nervios del VI par craneal para la activacin antidrmica de las Mns;
bobinas perioculares para la deteccin de la posicin ocular; y, cnulas en
el NRPC para la administracin de drogas. No se observaron fenmenos
de convergencia o depresin tnica de los ojos tras la inyeccin de carbacol en el NRPC. Sin embargo, se indujeron brotes de movimientos oculares rpidos horizontales (4-5 Hz), en direccin contralateral al sitio de
inyeccin. stos brotes aparecieron regularmente (0,4 Hz) incluso cuando
el animal estaba alerta y realizando movimientos sacdicos. Las Mns del
NMOE registradas en el lado inyectado mostraron una inhibicin durante
cada componente del brote y las contralaterales mostraron excitacin. El
patrn de movimientos oculares mostr caractersticas comunes con los
observados durante el REM espontneo, sugiriendo un papel importante
del NRPC en la generacin de los eventos fsicos.
Financiacin: MCYT-BFU2005-01579, Espaa.

PATRN NEUROANATMICO DEL MODELO MURINO DE ENVEJECIMIENTO SAMP8
Martnez-Ruiz J(1), Ikuta I(2), Insausti R(1), Fernndez-Gomez FJ(3),
Galindo MF(3), Jordn J(3), Arroyo-Jimnez, MM(1).
(1) Laboratorio de Neuroanatoma Humana, (3) Grupo de Neurofarmacologa., Facultad de Medicina, Universidad de Castilla la
Mancha Centro Regional de Investigaciones Biomdicas, Avda.
Almansa, 14, 02006, Albacete, Espaa; (2) SUNY Upstate Medical
University. Collage of Medicine. Syracuse. NY, EEUU.
El envejecimiento es un proceso progresivo y universal que se produce a lo largo del tiempo influenciado por la gentica de cada individuo
y el medio ambiente en el que vive. En este proceso, se ha observado
como determinados neurotransmisores y neuromoduladores modifican
su expresin en el sistema nervioso central. La prdida de ciertos neurotransmisores se ha relacionado con alteraciones en el patrn de poblaciones neuronales que afectan, entre otras, a funciones cognitivas como
la memoria y el aprendizaje. En nuestro estudio utilizamos ratones que
sirven como modelo de envejecimiento, SAMP8 (Senescence-Accelerated
Mouse) y SAMR1 (Senescence-Resistant Mouse).
El objetivo de este trabajo es analizar las posibles diferencias anatomo-estructurales haciendo hincapi en determinar si existen diferencias
en el patrn o en la concentracin de una amplia batera de protenas que
podran verse afectadas en las primeras etapas del envejecimiento.
Aunque otros estudios relacionados, han mostrado, mediante anlisis de sedimentacin, que la actividad de la acetil colinesterasa no experimenta ninguna variacin, nos planteamos determinar si en nuestro
modelo se presentan cambios significativos en el patrn de distribucin
inmunocitoqumico de esta enzima. Adems, analizamos pormenorizadamente los cambios en la concentracin de las enzimas de sntesis de serotonina y dopamina; as como de los neuromoduladores somatostatina
y neuropptido Y, centrados en regiones relacionadas con la memoria y
el aprendizaje.
Un mejor conocimiento de las poblaciones neuronales y de sus sistemas de neurotransmisin que se ven afectadas en estadios iniciales del
envejecimiento permitir entender mejor los mecanismos fisiopatolgicos asociados.
Financiacin: Consejera de Sanidad, JCCM (04002-00)
90

Presencia de una barrera de permeabilidad
entre el lquido cefalorraqudeo y el parnquima nervioso en estadios tempranos
del embrin de pollo
Jesus Mateos Grondona; Juan Prez, Carolina Hoyo-Becerra, Antonio Montes, Mara Remedios Merino, Pedro Fernndez-Llebrez, Mara
Dolores Lpez-Avalos
Departamento de Biologa Celular, Gentica y Fisiologa
En el cerebro embrionario de mamferos se ha descrito la presencia de
una barrera entre el lquido cefalorraqudeo y el tejido nervioso que limita
el paso de protenas entre ambos compartimentos. Dicha restriccin sera
debida a la presencia de un tipo especial de uniones intercelulares denominadas strap junctions. El objetivo del presente estudio es comprobar
si existe una barrera similar en el cerebro del embrin de pollo. Para ello
se han utilizado dos diseos experimentales: i) inyeccin intracerebroventricular de peroxidasa en distintas etapas embrionarias, fijacin con aldehdos, revelado de la peroxidasa e inclusin para microscopa electrnica de
transmisin; ii) localizacin inmunocitoqumica de protenas del suero de
pollo en el lquido cefalorraqudeo en distintos estadios embrionarios. Los
cortes semifinos y ultrafinos de cerebros inyectados con peroxidasa en el
lquido cefalorraqudeo muestran que en estadios inferiores a E9 (9 das de
desarrollo embrionario), la localizacin de este marcador estuvo restringida
a la superficie ventricular del neuroepitelio, no llegando a la porcin basolateral del neuroepitelio hasta la etapa E9 y posteriores. Con respecto a la
inmunolocalizacin de las protenas del suero, stas fueron localizadas en
el lquido cefalorraqudeo desde E3 hasta E7, desapareciendo en E9. La ubicacin de dichas protenas estuvo restringida a las cavidades ventriculares
y al interior de los vasos sanguneos, pero nunca aparecieron en el tejido
nervioso. Estos resultados sugieren la presencia de una barrera de permeabilidad para protenas entre el lquido cefalorraqudeo y el parnquima
nervioso en etapas tempranas del desarrollo embrionario del pollo.

Allosteric modulation of presynaptic
alfa7 nicotinic receptors selectivelty increase GABAergic synaptic transmission in
hippocampal neurons
Arnaiz-Cot JJ, Gonzlez JC, Sobrado M, Ganda L, Garca AG and Hernndez-Guijo JM
Departamento de Farmacologa, Facultad de Medicina,Univ. Autonoma de Madrid, Av. Arzobispo Morcillo 4, 28029 Madrid.
The role of postsynaptic nicotinic receptors for acetylcholine (nAChRs) in mediating fast neurotransmission processes in the CNS is controversial. However, a modulatory role for presynaptic nAChRs is gaining
adepts. Here we have used the whole-cell configuration of the patch-clamp
technique to study the modulation of synaptic transmission by an agonist
(choline) and an allosteric modulator (5-OH-indole) of a7 nicotinic acetylcholine receptors (nAChRs), in cultured hippocampal neurons. Choline
increased the amplitude and frequency of spontaneous postsynaptic currents (sPSCs).This effect was markedly enhanced when both, choline and
a 5-OH-indole were applied together; the effect was prevented by the
selective a7 nAChR antagonist methyllycaconitine (MLA). The increment
in the sPSCs evoked by choline activation was suppressed by the GABAA
receptor antagonist bicuculline; on the other hand, the glutamatergic receptor antagonist kinurenic acid did not modify the response.
TTX prevented the choline evoked neurontramiter release. We
found that frequency, amplitude and area of miniature postsynaptic currents (mPSCs) were partially modified when extracellular Ca2+ was
increased or removed. Additionally, the fact that nAChR activation did
not modify the mPSCs suggests the need of depolarization to open voltage-dependent calcium channels. The data preclude the possibility that
calcium influx through the high-calcium-permeability-a7AChRs could be
sufficient to activate neurotransmitter release, even if it is assumed that
a7 receptors were colocalized with the secretory hot spot.
We suggest that GABA release is modulated through presynaptic a7
nAChRs, an important role on regulating hippocampal circuits. Thus, a7
allosteric modulators could potentially have therapeutic implications in
brain disorders.

Funciones Sinpticas de las Protenas Fijadoras de Calcio Frecueninas.
DELAYED ONSET OF A SLOWLY RECOVERING COMPONENT OF SHORT-TERM DEPRESSION DURING EXHAUSTIVE USE AT EXCITATORY CENTRAL SYNAPSES
Jess Romero-Pozuelo1, Jeffrey S. Dason2, Harold L. Atwood2 y

Alberto Ferrs1
1. Instituto Cajal (C.S.I.C.), 28002 Madrid, Espaa; 2. Universidad de
Toronto, Toronto Ontario M5S 1A8, Canada.
Frecuenina (Frq) de Drosophila y su homlogo en mamferos, Neuronal Calcium Sensor 1 (NCS1), son protenas de unin a Ca2+ que se
expresan en el sistema nervioso. En este trabajo se ha identificado un
segundo gen para Frq en Drosophila. Este gen codifica una protena con
un 95% de identidad de secuencia a la Frq descrita originalmente. Ambos
genes (frq1 y frq2) se expresan especficamente en el sistema nervioso
central y en los mismos estadios del desarrollo, sin embargo se diferencian en sus niveles de expresin. Para estudiar las consecuencias del exceso o la falta funcional de Frq1 o Frq2 hemos usado el sistema UAS/Gal4.
Demostramos que la sobreexpresin de Frq1 o Frq2 en motoneuronas
larvarias, incrementa la liberacin de neurotransmisor por sinapsis. Paralelamente, se produce una reduccin en el nmero de botones de tipo
Is. En cuanto a los efectos de la falta de funcin, la expresin en las
mismas motoneuronas de los dominantes negativos (DN) de Frq1 y Frq2
o el tratamiento con los pptidos sintticos de Drosophila FrqDN (o de
mamferos NCS1DN), produce una drstica reduccin en la liberacin
de neurotransmisor por sinapsis as como un incremento del nmero de
botones de tipo Is. La consistencia entre los fenotipos de exceso y falta
de funcin nos permite concluir que las Frqs regulan la liberacin basal de
neurotransmisor as como la formacin de botones de tipo Is. Por ltimo,
los fenotipos celulares observados tienen consecuencias funcionales en
el comportamiento ya que los niveles de Frq1 y Frq2 modulan la actividad
locomotora de adultos.
John Wesseling; Elizabeth Garcia Perez, Joaquin Goi, Donald Lo

Depto. Neurociencias, Centro de Investigacin Mdica Aplicada,
Depto. Matematica y Fsica. Universidad de Navarra. Dept. Neurobiology, Duke University, USA
This study examines a form of short-term depression (STD) at excitatory central synapses that persists for several minutes after induction, and
corresponds to the slowest rate-limiting step in the synaptic vesicle cycle.
After initial depletion of the readily releasable pool (RRP) of synaptic vesicles, extended trains of 20 Hz stimulation drove exocytosis to a maximal
steady state rate of less than 1 quantum per synapse per second - although
substantially higher release rates could be elicited at rested synapses. Induction of STD under these conditions proceeded in two phases. The first
has been attributed to RRP depletion in previous studies; the second is
shown here to reflect a progressive reduction in the overall rate at which
vesicles are readied for release, and is termed supply-rate depression.
Supply-rate depression is identified further with a rate-limiting step in the
synaptic vesicle cycle that emerges during extended episodes of heavy use
to slow the time course of RRP replenishment via conversion from a fast
to a slow vesicle re-supply mechanism, with exponential time constants of
~7 s and ~1 min, respectively. The onset of supply-rate depression occurred with a marked delay of several seconds at Schaffer collateral synapses,
but substantially more quickly at excitatory synapses of the visual cortex.
The delay is not compatible with previous models of STD, but is well fitted
by a novel model presented here. Supply-rate depression may be important for limiting synaptic throughput under conditions of heavy use, and
could thus function as a native anti-epilepsy device.
Las hembras de ratn detectan las feromonas masculinas reforzantes con su rgano vomeronasal
DIFERENCIAS EN EL EFECTO DE FLUOXETINA SOBRE EL SISTEMA ENDOCANNABINOIDE CEREBRAL

EN RATAS ZUCKER OBESAS Y DELGADAS
Joana Martnez Rics (1),Carmen Agustn Pavn (2), Enrique Lanuza (2) & Fernando Martnez-Garca(1)
Departaments de Biologia Funcional (1) i Biologia Cel.lular (2), Fac.
CC. Biolgiques. UNIVERSITAT DE VALNCIA
Zarate J, Churruca I, Echevarra E, Rada D, Casis L, *Lpez De Jess

M, *Senz del Burgo L, *Montaa M, *Salls J
Departamento de Fisiologa, *Departamento de Farmacologa, Facultad de Farmacia, Universidad del Pas Vasco-Euskla Herriko Unibertsitatea, Vitoria-Gasteiz
La viruta ensuciada por machos de ratn contiene feromonas que resultan reforzantes para las hembras (1). Dado que estas feromonas masculinas no son voltiles, deben ser detectadas por el rgano vomeronasal de
las hembras. En este trabajo testamos esta hiptesis analizando el efecto
de lesiones electrolticas del bulbo olfativo accesorio (AOB) de hembras
de ratn, en la atraccin que la viruta de macho ejerce sobre ellas. Para
ello, comparamos el tiempo que las hembras control (operadas sin lesin)
y las hembras lesionadas pasan investigando la viruta de machos intactos
frente a la de machos castrados (Experimento 1). Adems, comprobamos
que la lesin del AOB no afecta a la capacidad de las hembras de detectar
voltiles sintticos (geraniol) ni los derivados de la orina de machos, mediante tests de habituacin-deshabituacin (Experimento 2).
Los anlisis estadsticos demuestran que las hembras control prefieren la viruta ensuciada por machos intactos frente a la ensuciada por
machos castrados, mientras que las lesionadas no. Adems, las hembras
control y las lesionadas detectan igualmente voltiles sintticos y naturales. Por tanto, la ausencia de preferencia hacia las feromonas sexuales de
macho mostrada las hembras lesionadas no puede atribuirse a un dficit
olfativo.
Este trabajo confirma que las feromonas sexuales de macho de ratn,
que no son voltiles y tienen propiedades reforzantes para las hembras,
son detectadas por el rgano vomeronasal.
Financiado por el MEC-FEDER (BFU2004-04272/BFI) y la Junta de
Comunidades de Castilla-La Mancha (PAC-05-007-2)
1.Martnez-Rics et al., 2007, Chemical Senses, 32:139-148
Fluoxetina es un antidepresivo que acta sobre el sistema endocannabinoide, que podra constitur una diana teraputica para el manejo
clnico de la depresin. El objetivo de este trabajo fue describir los efectos
del tratamiento crnico con fluoxetina sobre la expresin regional prosenceflica del receptor CB1 en ratas Zucker obesas y delgadas, mediante
un estudio inmunocitoqumico. Los resultados fueron interpretados con
la ayuda de un equipo computarizado de anlisis de imagen. Las diferencias estadsticas se consideraron en base al test t de Student (p < 0,05). La
administracin crnica de fluoxetina (10 mg/kg/da, 21 das, i.p.) produjo
efectos diferentes sobre la expresin regional del receptor cannabinoide
cerebral CB1 en la rata Zucker obesa, con respecto a lo que ocurra en
la rata Zucker delgada. Concretamente, indujo una reduccin significativa
de la expresin del receptor CB1 en las cortezas frontal y cingulada, el
giro dentado del hipocampo y el ncleo arqueado del hipotlamo, que
no aconteci en la rata Zucker delgada. Estos resultados indican que en
los pacientes depresivos con hiperactividad del eje hipotlamo-hipofisario-suprarrenal podra existir una expresin basal elevada del receptor
cannabinoide CB1, siendo su regulacin a la baja tras el tratamiento crnico con fluoxetina una condicin necesaria para la aparicin de efectos
teraputicos.Todo ello sugiere la posible utilidad del receptor cerebral de
glucocorticoides como diana farmacolgica para el control de los pacientes resistentes a la terapia con frmacos antidepresivos.
Financiado por Proyecto 1/UPV00081.327-E-15320/2003, SAF200402784 (MEC) y por la Diputacin Foral de Alava/ arabazo Foru Aldundia
(DFA/AFA). Agradecemos a Juan Manuel Rodrguez Robledo su colaboracin tcnica.
Guillaume-Gentil et al. Endocrinology. 1990; 126(4):1873-9.
Hill et al. Neuropsychopharmacology. 2006 Dec;31(12):2591-9.
Vinod KY, Hungund BL. Expert Opin Ther Targets. 2006 Apr;10(2):203-10.
91

La toxina- de Clostridium perfringens atraviesa la barrera hematoenceflica en un
modelo de intoxicacin aguda en ratn.
Estudio de su efecto sobre la gla.
Jonatan Dorca1, Alex Soler-Jover1, Michel R.Popoff2, Maryse Gibert2, Josep Saura3, Josep Maria Tusell3, Joan Serratosa3, Mireia Martn-Satu1, Juan Blasi1.
1 Laboratori de Neurobiologia Cellular i Molecular, Departament
de Patologia i Teraputica Experimental, Campus de Bellvitge, Universitat de Barcelona-IDIBELL, Spain. 2 CNR Anarobies, Institut
Pasteur, Paris, France. 3 Departament dIsqumia Cerebral i Neurodegeneraci IIBB-CSIC, IDIBAPS. Barcelona, Spain.
La toxina psilon (toxina-), producida por las cepas B y D de la
especie de bacterias anaerbicas Clostridium perfringens, es la responsable
de una grave enterotoxemia en el ganado. Una de las principales manifestaciones de la enfermedad es una severa afectacin neurolgica que
conduce a la muerte del animal. Tras la intoxicacin aguda del animal se
detecta edema generalizado, un indicador histopatolgico de lesin microvascular.
Hemos producido toxina- y protoxina- recombinantes como
protenas de fusin con la protena verde fluorescente (toxina--GFP y
protoxina--GFP) para estudiar su distribucin mediante microscopa de
fluorescencia.
Utilizando estas herramientas moleculares en un modelo de intoxicacin aguda en ratn, demostramos que la toxina--GFP (pero no la protoxina--GFP) no slo causa edema, sino que atraviesa la barrera hematoenceflica y se acumula en el tejido cerebral. En algunas reas del cerebro,
la toxina--GFP se encuentra unida a las clulas gliales, tanto astrocitos
como microgla. Adems, ensayos de citotoxicidad realizados en cultivos
primarios mixtos de clulas gliales demuestran los efectos citotxicos de
la toxina- tanto en astrocitos como en clulas microgliales.
Con el soporte del MEC (BFU2005-02202) y ISCIII (PI040778 y
PI050658). JD es receptor de una beca IDIBELL.
Los resultados aportados indican una posible utilidad teraputica de

la disminucin de la inflamacin en el tratamiento de dficits cognitivos
en pacientes con encefalopata heptica mnima o manifiesta.
Rodrigo et al. J. Neurochem. 2007; (in press)
Shawcross et al. J Hepatol 2004; 40(2):247-254.
Lim et al. Neurobiol Aging 2001; 22(6):983-991.
Erceg Brain Res. 2005;1036(1-2):115-21.

DEGENERACIN DE CLULAS CILIADAS VESTIBULARES Y AUDITIVAS POR NITRILOS
Jordi Llorens Baucells; Ana Seoane, Christian Chabbert1, Pere Boadas-Vaello, Eduardo Balbuena, Alicia M. Garrido, Nria Dez-Padrisa,
Carla Soler-Martn
Departament de Cincies Fisiolgiques II, Universitat de Barcelona
IDIBELL, Hospitalet de Llobregat, Catalunya. 1 INSERM U-583,
Montpellier, Francia
INFLAMACION Y ENCEFALOPATIA HEPATICA:

EL IBUPROFENO RESTAURA LA CAPACIDAD DE
APRENDIZAJE EN RATAS CON FALLO HEPTICO
CRNICO
Los nitrilos, compuestos con grupos R-CN, estn ampliamente representados en alimentos vegetales y tienen numerosos usos industriales.
El consumo de plantas con alto contenido en nitrilos ha sido asociado a
diversas enfermedades neurolgicas txico-nutricionales, entre las que
se encuentra la neuropata atxica tropical, caracterizada por ataxia y
sordera sensorioneural. Hemos identificado diversos nitrilos que causan
degeneracin de las clulas ciliadas en odo interno: el 3,3-iminodipropionitrilo (IDPN), el cis-crotononitrilo y el alilnitrilo. Este efecto presenta
estrictos requerimientos estructurales y no lo muestran otros nitrilos
similares (1, 2). La degeneracin sensorial se asocia a sordera y a sndromes comportamentales de disfuncin vestibular, como el sndrome
del baile de vals en ratas y ratones. La prdida de clulas sensoriales
muestra un patrn clsico de toxicidad: en la cclea, se observa un
gradiente en direccin basal-apical, junto a una mayor susceptibilidad de
las clulas ciliadas externas, mientras que en el vestbulo se observa un
gradiente crestas-utrculos-sculos junto a una mayor susceptibilidad de
las regiones centrales (apical en las crestas y periestriolar en las mculas).
Esta toxicidad de nitrilos sobre clulas ciliadas aparece tanto en roedores
(rata, ratn y cobayo) como en vertebrados no-mamferos (rana) (3). Los
nitrilos constituyen pues un nuevo grupo de compuestos con toxicidad
auditiva y vestibular de amplio espectro, similar a la de los antibiticos
aminoglicosdicos, con un claro inters como modelos alternativos para
causar degeneracin y disfuncin del odo interno (4).
Financiado por el MEC (BFI2003-01606 y BFU2006-00343/BFI) y el
CNES (Francia).
Regina Rodrigo, Omar Cauli, Blanca Piedrafita, Jordi Boix y Vicente

Felipo
Laboratorio de Neurobiologa, Centro de Investigacion Principe
Felipe, Valencia
(1) Balbuena E, Llorens J. Toxicol. Appl. Pharmacol. 187: 89-100 (2003)

(2) Boadas-Vaello et al. Toxicol. Sci. 88: 456-466 (2005)
(3) Soler-Martn et al. Toxicol. Sci. 96: 123-132 (2007)
(4) Brugeaud et al. J. Neurosci. 27: 3503-3511 (2007)
Una de las alteraciones neurolgicas que se observa en pacientes

con encefalopata heptica mnima o manifiesta es un dficit en la funcin cognitiva. Ratas con fallo heptico crnico por anastomosis porta-cava (PCS) reproducen estas alteraciones. Estas ratas muestran una
disminucin de la capacidad para aprender una tarea de discriminacin
condicional en el laberinto en Y que parece debida a una disminucin
en la funcin de la va glutamato- xido ntrico-cGMP en cerebro. Se ha
propuesto que la inflamacin exacerba las alteraciones neuropsicolgicas inducidas por la hiperamonemia, y que las alteraciones asociadas a
la inflamacin pueden contribuir a las alteraciones cognitivas en encefalopata heptica. El objetivo de este trabajo es evaluar si el tratamiento
con un antiinflamatorio, ibuprofeno, es capaz de restaurar la funcin de
la va glutamato-xido ntrico-cGMP en el crtex cerebral in Vivo y/o la
capacidad de aprendizaje en ratas PCS. Las ratas PCS tienen aumentados
los niveles de IL-6, la actividad de la ciclooxigenasa y la xido ntrico
sintetasa inducible (iNOS) en el crtex cerebral, indicando la presencia
de inflamacin. El tratamiento crnico con ibuprofeno normaliza la actividad ciclooxigenasa y de la iNOS pero no los niveles de IL-6. Adems el
ibuprofeno normaliza la funcin de la va glutamato-xido ntrico-cGMP
en la corteza cerebral In Vivo y restaura completamente la capacidad
para aprender la tarea del laberinto en Y en ratas con fallo heptico. Este
hecho apoya el papel de la inflamacin en las alteraciones cognitivas en
encefalopata heptica.
92

La sobreexpresin de LGI1-mutante no aumenta la susceptibilidad frente a crisis epilpticas
Jordi Prez Tur; Ana Gorostidi-Pagola, Marta Casado Pinna
Unitat de Gentica Molecular. Institut de Biomedicina de ValnciaCSIC. Unidad de Patologa Metablica Experimental. Institut de Biomedicina de Valncia-CSIC
Mutaciones en LGI1 (Leucine-rich Glioma Inactivated-1) son la causa
de la epilepsia parcial conocida como ADLTE (por Autosomal Dominant
Lateral Temporal Epilepsy), un tipo de epilepsia parcial que cursa frecuentemente con crisis de tipo auditivo. Se inicia en etapas juveniles de la vida
de los pacientes y se suele presentar con un fuerte componente familiar.
En 2.002 nuestro grupo describi las primeras mutaciones en LGI1 como
la causa de este sndrome en dos familias de origen espaol. LGI1 no presentaba una estructura tpica de protena transmembrana del tipo de receptores de neurotransmisores o de canales inicos. Esto sugera que el
mecanismo de accin de las mutaciones de LGI1 podra ser distinto al de
las mutaciones que afectaban a aquellos genes. Puesto que la funcin fisiolgica de LGI1 era desconocida, nos propusimos desarrollar un modelo

de sobreexpresin que permitiera conocer los procesos moleculares en
los que LGI1 estuviera implicado. En nuestro laboratorio obtuvimos dos
lneas de animales transgnicos que sobreexpresan una forma mutante de
LGI1 con diferentes niveles y que no presentaban diferencias significativas
respecto a la cepa silvestre, en cuanto a su capacidad cognitiva o motora,
ni en cuanto a su susceptibilidad frente a crisis inducidas por frmacos
(cido kainnico o pentilentetrazol). Por ltimo, cabe destacar que todos
los intentos de obtener una lnea de animales de sobreexpresin de la
forma silvestre han sido infructuosos, lo que sugiere que la expresin de
LGI1 puede ser un proceso regulado de manera muy precisa a nivel de
desarrollo embrionario.

Lithium treatment prevents cell death induced by 3-nitropropionic acid and kainic
acid, implication of calpain/cdk5 pathway.
J. Vilaplana (a), N. Crespo-Biel (b), C. Pelegr (a), A. Camins (b), M.
Palls (b), A.M. Canudas (b).
(a) Departament de Fisiologia. Facultat de Farmcia. Universitat de
Barcelona. (b) Instituto de Biomedicina. Unitat de Farmacologia i
Farmacognsia Facultat de Farmcia. Universitat de Barcelona. Nucli
Universitari de Pedralbes. E-08028 Barcelona. Spain.
Calpains are calcium-dependent neutral proteases and are reported
to modulate a wide variety of intracellular signaling pathways by targeted
cleavage of substrate proteins. Cdk5 is a proline-directed serine/threonine protein kinase that forms an active complex with p35 in differentiated
cells, such as neurons and has been implicated in a variety of neurodegenerative diseases. p35 has been demonstrated to be substrate of calpainmediated cleavage, resulting in p25 formation and the activation of cdk5.
We evaluated the requirement for calpain activation in the death of
cultured hippocampal neurons evoked by two toxins, kainic acid (KA) and
nitropropionic acid (3-NP), that lead to a rise in cytosolic Ca2+ by two
different mechanisms, and the later inhibition by lithium as a new target
of this drug.
First, we measured the calpain activity. Our results revealed calpain
activation in the two models of toxicity. As calpain activation is related
to cdk5 activation we studied cdk5/p25 pathway. Our results by Western
Blot analysis showed that the p25/p35 ratio was increased in cells treated
with KA and 3-NP.
When lithium treatment was studied we observed a neuroprotection
of the cells exposed to KA and 3-NP. The effect of lithium has been seen
in an increase on the cell viability, and a decrease of the calpain activity.
Levels of p25/p35 were reduced when cells were pretreated with lithium,
indicating a reduced activation of cdk5.Then these results support previously described neuroprotective mechanism of lithium and the implication
of calpain/cdk5 pathway in this neuroprotection.
This study has been supported by SAF2005-01604, SAF2005-05179
and SAF2006-13092 from Ministerio de Educacin y Ciencia and PI04300
from Instituto de Salud Carlos III. We thank the Generalitat de Catalunya
for 2005/SGR00893 and the TV3 Marathon (063230).

La estimulacin magntica transcraneal
de la corteza visual primaria (V1) modifica
las caractersticas espacio-temporales de
los campos receptores del ncleo geniculado lateral (NGL) del gato.
Mario, J., Espinosa, N., De Labra, C., Rivadulla, C. y Cudeiro, J.
La fisiologa de las neuronas del NGL depende de las aferencias retinianas y de las conexiones de retroalimentacin provenientes de V1. Estas
ltimas actan sobre las respuestas talmicas al menos de tres formas:
modulan la excitabilidad celular, sincronizan el disparo de grupos de neuronas tlamo-corticales y modifican la respuesta visual ante determinadas
caractersticas del estmulo. Nuestro grupo ha demostrado previamente
que la estimulacin magntica transcraneal (EMT) es eficaz para bloquear
de forma rpida y reversible la actividad cortical y estudiar as el control
que ejerce V1 sobre la actividad del NGL. En este trabajo hemos estudiado los efectos de V1 sobre las caractersticas espacio-temporales de los
campos receptores del NGL en el gato anestesiado, utilizando EMT-1Hz
para bloquear la actividad cortical.
Se realizaron registros extracelulares de neuronas tlamo-corticales
(n=33). El campo receptor se estudi utilizando la tcnica de correlacin
inversa sobre la respuesta a barras blancas y negras presentadas de manera pseudo-aleatoria en distintas posiciones del espacio.
La mayora de las neuronas estudiadas (52%) mostraron un aumento
significativo (p<0,05) en el rea del campo receptor, incremento en la latencia al pico mximo de respuesta y disminucin en su tasa de disparo. El
resto de las clulas present bien el efecto opuesto (30%) o no expres
cambios en sus respuestas (18%).
Estos resultados inciden en el potencial de la EMT como herramienta para el estudio de las conexiones crtico-talmicas y demuestran el
efecto modulador de V1 sobre las propiedades espacio-temporales de la
respuesta visual en el tlamo.
Financiado por MEC-BFU2005-00502.

Efecto del xido ntrico (NO) sobre la respuesta temporal de las neuronas del ncleo geniculado lateral (NGL) y ncleo
perigeniculado (NPG).
Nelson Francisco Espinosa Vergara; Jorge Mario, Artur Escalada,
Carmen de Labra y Javier Cudeiro
Grupo de Neurociencia y Control Motor (NEUROcom), Universidad de A Corua
Tanto la ACh como el NO modulan la transmisin de informacin
en el tlamo visual. Este control se realiza a travs de terminales axnicos
procedentes de la regin peribraquial del tronco enceflico (PBR). Estudios
previos indican un papel facilitador del NO a nivel del NGL y NPG, pero
se desconoce la dinmica y los mecanismos de accin de dicho efecto. En
este trabajo hemos estudiado, mediante registros intracelulares in vivo, los
efectos del NO sobre la dinmica de las sinapsis PBR-NGL y PBR-NPG.
Registramos neuronas en el NGL (n=19) y NPG (n=9) del gato anestesiado, y realizamos microestimulacin elctrica en el PBR (5 pulsos, 100
Hz) y quiasma ptico (1 pulso) secuencialmente. Este protocolo fue repetido tras el bloqueo sistmico de los efectos colinrgicos (atropina i.v.) o
nitrrgicos (7-nitroindazol i.p.).
La estimulacin elctrica en el PBR produjo una secuencia compleja
de efectos sinpticos: potenciales muy rpidos (n=17), seguidos de despolarizacin presumiblemente nicotnica (n=22; latencia media 25ms, duracin media 200ms), e hiperpolarizacin lenta (en NPG; latencia media
300ms, duracin media 500ms). Esta estimulacin origin una disminucin
de la varianza del Vm (n=22; latencia media 25ms) durante 500-600ms,
que disminuy a 300-400ms tras la inyeccin de atropina. Respecto a la
activacin generada por estimulacin del quiasma ptico, la aplicacin de
7-nitroindazol suprimi la facilitacin inducida por estimulacin previa del
tronco observada en la condicin control.
Estos resultados sugieren que el NO est implicado en la modulacin
de los efectos sinpticos de tipo nicotnico inducidos por el PBR sobre
las neuronas talmicas.
MEC-BFU2005-00502

LA DECISIN DEL DISPARO DE CLULAS PIRAMIDALES DURANTE BOMBARDEO SINPTICO PUEDE
SER DENDRTICA Y AN COMPATIBLE CON PROPAGACIN RETRGRADA EN EL TRONCO
Jos Manuel Ibarz del Olmo, Julia Makarova y Oscar Herreras
Dpto. Investigacin, Hospital Ramn y Cajal Instituto Cajal, CSIC,
Madrid.
Anteriormente, utilizamos un modelo piramidal de CA1 calibrado
experimentalmente para realizar un estudio paramtrico y anlisis cruzado de diversas variables, determinando su participacin en la generacin
de espigas dendrticas con impacto en la salida, tras activacin sinptica
sincrnica. Extendemos este estudio a una activacin que simula un bom-
93
bardeo sinptico con entradas excitadoras e inhibidoras en un patrn

temporal y espacial aleatorio o modulado. Al igual que durante activacin
sincrnica, se generan corrientes subumbral y espigas, tanto en ramas
activadas sinpticamente como en otras, cuya integracin local produce diferentes modalidades de activacin del tronco apical con impacto
variable en la salida axnica. En general, las espigas locales no propagan
de forma continua hasta el soma/axn. No obstante, una proporcin variable de los potenciales de accin (PAs) somticos guardan una relacin
temporal precisa con la presencia de espigas dendrticas previas, estableciendo una relacin causal directa entre ambas. La proporcin depende
de la localizacin, nmero y sincronizacin de espigas dendrticas previas,
del patrn temporal y localizacin de las entradas inhibidoras y de la
densidad de canales voltaje-dependientes en el rbol dendrtico. Aunque
el rango fisiolgico de muchas variables hace casi impredecible el resultado de un bombardeo sinptico determinado, este resultado indica que la
pequea inyeccin de corriente al tronco dendrtico causada por espigas
locales puede ser suficiente para causar salida celular. Proponemos que la
decisin final de cada PA saliente puede hacerse en centros dendrticos,
incluso aunque los registros en soma y tronco muestren una propagacin
retrgrada (backpropagation). Financiacin: MCyT-BFU2005/08917,
CAM-S-SEM-0255-2006, CSIC-I3/200620I186.

Los receptores GABAB, adenosina A1 y
mGluR7 inhiben la liberacin de glutamato
preferentemente en terminales con canales de Ca2+ del tipo N.
J. Snchez-Prieto1, D. Bartolom1, M. C. Godino1, R. Martn1, R.
Lujn2, R. Sighemoto3, M.Torres1 , C. Ladera 1.
1 Universidad Complutense de Madrid. Facultad de Veterinaria.
Departamento de Bioqumica. 2 Universidad de Castilla-La Mancha. Facultad de Medicina. Centro de Investigaciones Biomdicas.
Albacete. 3 National Institute for Physiological Sciences. Division of
Cerebral Structure. Myodaiji, Okazaki, Japan.
Los receptores presinpticos de adenosina A1, GABAB, mGluR7, activan protenas G y modulan la liberacin de glutamato por mecanismos
que implican la inhibicin de canales de Ca2+ y de la adenilato ciclasa.
Con imagen de Ca2+ e inmunocitoqumica hemos encontrado que estos
receptores coexisten en una subpoblacin de terminales sinpticos de
corteza cerebral de rata. En estos terminales los tres receptores comparten una va de sealizacin comn como demuestra la oclusin de sus
respuestas cuando los tres receptores se activan simultaneamente. Los
tres receptores coexisten en terminales con canales de Ca2+ del tipo N,
porque w-conotoxina GVIA ocluye en gran medida sus respuestas y porque en los ratones que carecen de canales N (subunidad a1B, Cav 2.2) la
inhibicin por estos receptores est notablemente disminuida y adems
no se observa oclusin cuando los receptores se activan simultaneamente. Estos datos sugieren la existencia de heterogeneidad en los terminales
de corteza cerebral en base a la distribucin de receptores presinticos.
Financiado por Ministerio de Educacin y Ciencia BFU2004-01375/BFI

LA ACTIVACIN DE LOS RECEPTORES 5-HT1A PREVIENE LA ALTERACIN DE LA RESPUESTA DE EVITACIN Y ESCAPE A LARGO PLAZO INDUCIDA POR
EL ESTRS DE INMOVILIZACIN EN RATA AFECTANDO LAS FUNCIONES SEROTONINRGICAS Y
NORADRENRGICAS TRONCOENCEFLICAS
J. Rioja1, L. Santn2, D. Lpez-Barroso2, S. Gonzlez-Barn1, K. Fuxe3
y J.A. Aguirre1
1Departamento de Fisiologa Humana, Facultad de Medicina, 29071
Mlaga. 2Departamento de Psicobiologa, Facultad de Psicologa,
29080 Mlaga. 3Departamento de Neurociencia, Karolinska Institutet, 11417 Stockholm, Suecia
Desde hace ms de tres dcadas se sabe que los animales que son
expuestos a un procedimiento aversivo incontrolable alteran su respuesta
de evitacin y de escape 24 h despus del estrs. El objetivo del presente
94
trabajo ha sido el estudio en rata de los cambios conductuales a largo

plazo inducidos por el estrs agudo de inmovilizacin (3h) y la participacin de los sistemas serotoninrgico y noradrenrgico troncoenceflicos,
as como la modulacin del receptor serotoninrgico 5-HT1A en dichas
condiciones. Se utilizaron ratas macho adultas SD (250+15gr) distribuidas
en cuatro grupos: 1) SALINO, con inyeccin s.c. de suero salino; 2) INMO,
con inyeccin de salino en animales inmovilizados (3h); 3) DPAT, animales que recibieron inyeccin s.c. del agonista serotoninrgico 5-HT11A
8-OH-DPAT (0,3 mg/Kg); 4) DPAT+INMO, animales que recibieron 8OH-DPAT 15 min antes del estrs. A las 24 h se exponen al laberinto
elevado en T, evaluando las respuestas de evitacin pasiva y de escape.
Inmediatamente los animales son anestesiados, perfundidos y los cerebros preparados para la doble inmunohistoqumica de c-Fos y 5-HT y
de TH en los ncleos de los raphes mesenceflicos y del locus coeruleus
respectivamente. En la cuantificacin neuronal se utiliz la estereologa.
Los resultados muestran que se desarrollaron alteraciones a largo plazo
de la respuesta de evitacin y de escape inducidos por estrs asociada a la
inhibicin de las regiones serotoninrgicas y noradrenrgicas estudiadas.
Este efecto fue contrarrestado por el pre-tratamiento con 8-OH-DPAT.
Este trabajo ha sido subvencionado por la DGICYT (PM99-0159)

LA GALANINA AUMENTA EL LIGADO DEL RECEPTOR Y1 DEL NEUROPEPTIDO Y EN LA AMIGDALA :
IMPLICACIONES COMPORTAMENTALES.
Narvez M1, Parrado C2, Puigcerver A3, Fuxe K4, Santn L.J. 3, DazCabiale Z1, Narvez JA1
1Departamento de Fisiologa, 2Departamento de Histologa y Anatoma Patolgica, 3Departamento de Psicobiologa, Universidad de
Mlaga, Espaa 4Department of Neuroscience. Karolinska Institutet,
Stockholm. Sweden
La Galanin 1-29 (GAL) modula al receptor Y1 del Neuropeptido Y
(NPY) de la rata tanto a nivel funcional como a nivel de receptor, en los
ncleos del tracto solitario y arcuato. As GAL disminuy el ligado del
agonista de Y1 en ambas zonas con efectos en control central cardiovascular e ingesta (1, 2).
El objetivo de este estudio ha sido analizar la interaccin de GAL
con el agonista de Y1 en la amigdala y su papel en respuestas exploratorias y de ansiedad, mediante tcnicas de autorradiografa y pruebas de
comportamiento.
En el estudio conductual, se evalu la conducta exploratoria en el
campo abierto despus de la administracin (icv) de GAL (0.3 nmol), del
agonista de Y1 (Leu31-Pro34-NPY; 0.1nmol) y de ambos. En la autorradiografa de analiz el ligado del agonista Y1 [125I]-Leu31-Pro34-PPY (25
pM) en presencia de diferentes dosis de GAL (0.3, 1 y 3nM) y del antagonista de los receptores de GAL M35.
La coadministracin de dosis subumbrales de GAL y del agonista Y1
aument el nmero de entradas, el tiempo y la distancia recorrida en la
regin interior del campo abierto (P<0.05). En la amgdala GAL (1 nM y
3nM) aument el ligado del agonista Y1 (P<0.01), efecto bloqueado en
presencia de M35 (P<0.01).
Estos resultados, demuestran que GAL, en la amigdala, modula los
receptores Y1 que se refleja en un ligero efecto ansioltico, caracterizado
por un aumento de la exploracin de la zona interna del campo abierto.
(Financiacin: BFU2005-02241/SEJ1323).
1. Diaz-Cabiale et al. Eur J Neurosci. 2006 Jul;24(2):499-508.
2. Parrado et al. Neuropharmacology. 2007 Feb;52(2):684-92.

Receptor dopaminrgico D2 vs receptor
cannabinoide CB1 en el consumo y recada
al alcohol en rata
Lopez Moreno, J A; Alen Farias, F; Moreno Sanz, G, Gonzlez Cuevas, G; Crespo galn, I; Navarro, M
Laboratorio de Psicobiologa - Universidad Complutense de Madrid
El receptor de dopamina D2 ha sido uno de los ms estudiados en
el alcoholismo. Sin embargo, estudios ms recientes muestran al receptor

cannabinoide CB1 como un determinante factor regulador en las conductas relacionadas con el alcohol. En el presente trabajo, se investig
principalmente el papel modulador de ambos receptores en la recada y
consumo de alcohol. Para ello usamos ratas Wistar con una consolidada
autoadministracin operante de alcohol.
Con 12 grupos de animales se evaluaron las respuestas para obtener
alcohol tras la exposicin subcrnica a agonistas y antagonistas del receptor D2 (Quinpirole y Raclopride respectivamente); agonistas/antagonistas
del receptor cannabinoide CB1 (WIN 55,212-2 / Rimonabant); y por ltimo la combinacin e interaccin entre los agonistas usados.
Se observ que el agonista cannabinoide WIN potencia la RECADA
al alcohol, y que el agonista dopaminrgico quinpirole no altera la RECADA de alcohol. Sin embargo, Quinpirole decrementa el CONSUMO de
alcohol, mientras que WIN no altera este CONSUMO. Tambin observamos que ambos antagonistas dopaminrgicos/cannabinoides bloquean la
RECADA al alcohol. Por ltimo, verificamos que el tratamiento con el
antagonista dopaminrgico Raclopride, es capaz de revertir el incremento
en la RECADA al alcohol inducida por el agonista cannabinoide WIN.
Estos datos demuestran que la activacin de manera subcrnica (5
das) de los receptores cannabinoides CB1 estn implicados sobre todo en
fenmenos de RECADA al alcohol que los clsicos receptores dopaminrgicos D2. Por otro lado, parece que la activacin/bloqueo de los receptores
D2 estaran ms relacionados con el control del consumo de alcohol.

Estudio comparativo de la expresin y localizacin de la protena prinica celular en el sistema nervioso central de mamferos
Jos Luis Velayos; Francisco Jos Moleres, Ana Irujo, Diego Yllanes,
Beatriz Paternain
Departamento de Anatoma, Facultad de Medicina. Universidad de
Navarra. C/ Irunlarrea, s/n 31008 Pamplona
La protena prinica celular (PrPC) es una glicoprotena de membrana abundante en el sistema nervioso central (SNC). La protena prinica scrapie (PrPSc) es la responsable de las encefalopatas espongiformes
transmisibles (EET) -enfermedades neurodegenerativas que afectan al
hombre y a otros mamferos- si bien necesita de la presencia de PrPC
para su establecimiento y evolucin.
En este trabajo se estudia de modo comparado la expresin y localizacin de PrPC en el SNC de rata, gato, vaca y humano. Adems de una
caracterizacin bioqumica de esta protena, se analizan las poblaciones
celulares que la contienen, con el fin de tratar de comprender la susceptibilidad de ciertos grupos celulares en las EETs.
Hemos observado una disminucin en sentido rostrocaudal de la
cuanta de PrPC en el SNC de las especies estudiadas, tanto en cuanto al
western blot como a la inmunohistoqumica correspondientes. El hecho
de que la presencia de PrPC sea mayor en unas reas enceflicas que en
otras podra significar que la PrPSc puede transmitirse y replicarse ms
intensamente en y a partir de tales zonas. Nuestros datos son congruentes con un posible transporte retrgrado de los priones, apoyan el hecho
de que haya una disminucin de una subpoblacin de clulas GABArgicas en las EET y ayudan a explicar algunos de los mecanismos patognicos
ms controvertidos en las enfermedades provocadas por priones, tales
como la prdida neuronal selectiva de clulas rodeadas por una forma
especializa de matriz extracelular.
Agradecimientos: Ayuda PIUNA 2006-2008 y Ayuda BMH4-CT96856 (EU). FJM tiene una ayuda FPU 2003-5033.
Moleres and Velayos. Brain Res. (2005), 1056:10-21
Velayos et al. Neurologa (2006), 21:421-427

LA POTENCIACIN SINPTICA DURADERA INDUCIDA POR GLICINA ES MEDIADA POR EL TRANSPORTADOR DE GLICINA GLYT1.
Sols, J.M.1, Bustamante, J.2, Igartua, I.1
(1) Servicio de Neurobiologa-Investigacin. Hospital Ramn y Cajal. Madrid. (2) Departamento de Fisiologa. Facultad de Medicina.
Universidad Complutense. Madrid.
Los sntomas de la esquizofrenia son parcialmente revertidos mediante tratamientos con agonistas del lugar de unin de la glicina al receptor
NMDA (NMDA-R). Por otro lado la aplicacin exgena de glicina (0,5-10
mM) provoca una potenciacin duradera de la transmisin glutamatrgica
(LTP-GLY). La caracterizacin de los mecanismos que subyacen a la LTPGLY podra ayudar al desarrollo de nuevas terapias para el tratamiento
de la esquizofrenia. Los experimentos han sido realizados en rodajas de
hipocampo de rata. La perfusin de glicina 1 mM durante 30 minutos,
produce un aumento en los potenciales postsinpticos excitatorios en la
va CA3-CA1 que se mantiene al menos 1 hora tras retirar la glicina del
medio de perfusin. La aplicacin de glicina no modifica sustancialmente
el potencial de fibra poblacional ni la facilitacin por pares de pulsos
homosinpticos. Esta LTP-GLY es independiente tanto de los receptores
de glicina sensibles a estricnina, como de los canales de calcio sensibles a
nifedipina. Curiosamente, la LTP-GLY aumenta en presencia de antagonistas de los receptores NMDA como el AP5 o el MK801. Por el contrario,
la LTP-GLY es parcial o totalmente inhibida por sarcosina o ALX5407,
respectivamente; ambas sustancias son antagonistas del transportador
de glicina GLYT1. Estos resultados indican que para la induccin de la
LTP-GLY se requiere la activacin de GLYT1, un transportador asociado
fsicamente a los NMDA-R. Adems, el hecho de que la inhibicin del
NMDA-R incremente la magnitud de la LTP-GLY, abre la posibilidad de
que este receptor pueda tener una modulacin negativa sobre la actividad
de GLYT1. Financiado por el Proyecto FIS PI051194.

Localizacin citoplsmica de las isoformas de la protena-reloj mPER1 en la retina
neural de ratn
Jos M. Garca-Fernndez, Carmen lvarez-Lpez, Irene GonzlezMenndez, Rafael Cernuda-Cernuda
Departamento de Morfologa y Biologa Celular, Universidad de
Oviedo, 33006 Oviedo, Asturias
Los relojes biolgicos estn basados en lazos de retroalimentacin
en los que la expresin de genes reloj esta suprimida peridicamente por sus productos proteicos. En el ncleo supraquiasmtico (NSQ),
principal marcapasos circadiano de mamferos, el gen Period1 se expresa
rtmicamente y sus protenas se dirigen al ncleo celular para inhibir su
propia transcripcin. Se desconoce an si en relojes perifricos, como
la retina, el mecanismo es similar. Mediante western blot (WB) con anticuerpos contra la protena PER1, hemos detectado 3 isoformas (de 75,
110 y 140 kDa) en extractos de NSQ o de otras partes del cerebro de
ratn, mientras que solamente 2 (de 75 y 110 kDa) en extractos de retina. El inmunomarcaje de la retina demostr que las protenas PER1 se
localizan en el citoplasma de numerosas clulas de la capa ganglionar y en
unas pocas de la nuclear interna. Esta localizacin se observ en todas las
muestras de retina tomadas cada 4 horas tanto durante el ciclo noche/da,
como en los animales en oscuridad constante, ya tuviesen retina normal
(wildtype) o retina degenerada (rd). Por el contrario, la localizacin de
isoformas de PER1 en clulas del NSQ o de otras partes del cerebro
fue siempre nuclear. Por otro lado, la retina no mostr ritmicidad circadiana de PER1, lo que sugiere que estas protenas realizan aqu funciones
diferentes a las establecidas para el NSQ. Dado que las protenas PER2
y PER3 s presentan localizacin nuclear, es muy probable que sean las
responsables de los mecanismos de oscilacin circadiana de las neuronas
reloj retinianas.
95

INFLUENCIA DEL ENVEJECIMIENTO SOBRE LOS NIVELES BASALES DE AMINOCIDOS EN LA CORTEZA PREFRONTAL DE LA RATA.
Martnez Martos, Jos Manuel, Cobo Aceituno, Manuela, Corts
Denia, Pedro, De la Chica Rodrguez, Susana, Prez Miranda, Mara
del Carmen, Arias de Saavedra, Jos Manuel, Ramrez Expsito, Mara
Jess.
Grupo de Investigacin Fisiologa y Patologa Experimental y Clnica CVI-296. Departamento de Ciencias de la Salud, Universidad
de Jan. Campus Universitario Las Lagunillas, 23071, Jan, Espaa.
Telfono y Fax: +34953212600; Correo electrnico: jmmartos@
ujaen.es.
La corteza prefrontal es una de las reas ms relevantes para comprender los procesos normales de envejecimiento cerebral, debido a su
importante papel en los procesos cognitivos, las emociones y la motivacin, y donde la neurotransmisin aminoacidrgica tiene especial importancia. En el presente estudio se han analizado, mediante microdialisis
intracerebral en animales despiertos y actuantes, 1) los niveles basales
de los aminocidos neurotransmisores excitadores asprtico y glutmico,
2) los niveles de ciertos aminocidos precursores de neurotransmisores
(triptfano, tirosina, valina, leucina, isoleucina, taurina, serina y metionina) y 3) los cocientes triptfano/aminocidos neutros (LNAA), tirosina/
LNAA y TSM o relacin entre los niveles de taurina y el producto de los
niveles de metionina y serina, en la corteza prefrontal de ratas jvenes
(3 meses de edad) y viejas (24 meses de edad). Los aminocidos se han
analizado mediante cromatografa HPLC con deteccin por fluorescencia,
utilizando OPA como agente derivatizante. Los resultados muestran un
incremento en los niveles de cido asprtico en los animales viejos, pero
no se detectan cambios en los niveles de glutmico. Igualmente, en los
animales envejecidos se encuentran incrementados los niveles de triptfano, isoleucina y metionina, mientras que los niveles de leucina aparecen
significativamente disminuidos. Por ltimo, los cocientes triptfano/LNAA
y TSM tambin son mayores en los animales envejecidos frente a los jvenes, no apareciendo diferencias significativas en el cociente tirosina/
LNAA. Se concluye que el desequilibrio en los niveles del neurotransmisor excitador asprtico podra ser especialmente responsable de los mecanismos excitotxicos asociados al envejecimiento. Del mismo modo, la
alteracin en los niveles de triptfano y en el cociente triptfano/LNAA
podra indicar una alteracin en la biosntesis de la serotonina, mientras
que la neurotransmisin dopaminrgica/noradrenrgica no estara afectada. Finalmente, el aumento encontrado en los animales envejecidos en
el cociente TSM, que se ha descrito como un marcador del estado de los
aminocidos implicados en los procesos de transmetilacin, tambin indicara la existencia de alteraciones en estas reacciones como consecuencia
del envejecimiento.
Financiado por el Ministerio de Trabajo y Asuntos Sociales, a travs
de la Secretara de Estado de Servicios Sociales, Familias y Discapacidad
(IMSERSO); Expediente 176/06.
Fekkes et al. J Neural Transm, 105, 287-294.
Lieberman (1999) En: The role of protein and amino acids in sustaining and enhancing performance. National Academy Press, Washington, DC. pp. 289-307.
Segovia, G., Mora, F.Brain Res Bull, 65, 11-16.

EFECTOS DE LA EXCENTRICIDAD Y DEL CONTRASTE EN LA DETECCIN DE ESTMULOS VISUALES
EN HUMANOS
Jose Manuel Rodriguez Ferrer; Rafael Mancebo Azor; Inmaculada Dominguez Hidalgo; Jose Antonio Saez Moreno, Giuseppe Musumeci
Instituto de Neurociencias de la Universidad de Granada. Servicios
de Oftalmologa y Neurofisiologa clnica del Hospital Clinico de
San Cecilio de Granada.
El tamao de los campos receptivos de las neuronas visuales aumenta
con su excentricidad, determinando su capacidad de discriminacin. El
presente estudio ha analizado el tiempo de respuesta a la presentacin de
96
estmulos visuales, con diferente excentricidad y contraste. Diecisis voluntarios sanos (5 hombres y 11 mujeres), con una edad media (eem) de
19.250.45 aos, y manteniendo fija la mirada en un punto central de una
pantalla de monitor, deban responder a la presencia de estmulos (crculos grises de 0.5 grados de tamao y 100 ms de duracin) presentados en
ocho posiciones equidistantes (0, 45, 90, 135, 180, 225 y 315 grados). Los
estmulos se presentaron al azar, con distintas excentricidades (2.15, 3.83
y 5.53 grados) y contraste (5, 15 y 80 %) y con el sujeto situado a 114.5
cm de la pantalla. Los resultados muestran que el tiempo de respuesta
aumenta conforme disminuye el contraste para las tres excentricidades
analizadas, obtenindose las mayores diferencias en la excentricidad de
5.53 grados (mediaeem de 147.044.38, 161.824.80 y 195.355.75 ms
para los contrastes de 80, 15 y 5%, respectivamente). Los tiempos de
respuesta para contrastes del 15 y 80% fueron similares en las tres excentricidades. En cambio, para el contraste del 5%, la respuesta se increment
significativamente con la excentricidad mayor (171.965.80, 164.745.21
y 195.355.75 ms para las excentricidades de 2.15, 3.83 y 5.53 grados,
respectivamente). Estos resultados muestran el papel crtico que juega el
contraste en la deteccin de estmulos en la retina central.

Gnesis de fotorreceptores y conectividad
sinptica en la retina perifrica de primates adultos
Jos Martn Nieto (1), Antonia Angulo (2), Gema C. Martnez Navarrete (1) y Nicols Cuenca (1)
(1) Dpto. Fisiologa, Gentica y Microbiologa, Facultad de Ciencias;
(2) Dpto. Interuniversitario de ptica, EU ptica y Optometra.
Universidad de Alicante.
Hemos examinado, mediante microscopa electrnica de transmisin,
la ultraestructura de los fotorreceptores localizados en la retina perifrica adyacente a la ora serrata en monos y humanos adultos, con el objeto
de analizar la posibilidad de neurognesis en este rea de la retina. Asimismo, secciones verticales se sometieron a inmunotinciones simples y
dobles para marcadores especficos de conos y bastones, y se visualizaron
mediante microscopa confocal.
Se observa a lo largo del margen de la retina perifrica un gradiente
de diferenciacin morfolgica de conos y bastones. Estos presentan una
ultraestructura inmadura, con un esbozo de segmentos externos inicialmente alrededor del ncleo que van aumentando de tamao y sufren
evaginacin al acercarse a la retina perifrica laminada. Tambin se observa una gnesis de novo de discos membranosos en la porcin apical de
elipsoides incipientes, junto a la formacin de cilios conectores. Por otra
parte, las sinapsis en cinta observadas en la capa plexiforme externa entre
sus terminales axnicos y las dendritas de clulas horizontales y bipolares
no presentan la tpica estructura en forma de triadas, indicando que se
trata de sinapsis inmaduras. En la capa plexiforme interna nicamente se
observan sinapsis escasas entre amacrinas, bipolares y ganglionares.
El margen de la retina constituye una regin donde tiene lugar neurognesis adulta de fotorreceptores en un gradiente de diferenciacin
espacio-temporal, acompaada del establecimiento de contactos sinpticos correctos en las capas plexiformes. Este proceso podra tener un
papel en el recambio de los circuitos retinianos a lo largo de la vida en
monos y humanos.
Financiacin: MEC BFU2006-00957/BFI, Generalitat Valenciana
GV06/197, ONCE y Fundaluce.

LRRK2, UN MIEMBRO DEL CLADO ANIMAL LRRK
Snchez-Mut, J.V.; Gabaldn,T.; Dopazo, H.; Prez-Tur, J.
Unidad de Gentica Molecular. Instituto de Biomedicina de ValenciaCSIC (Valencia). Unidad de Genmica Comparada y Farmacogenmica. Centro de Investigacin Principe Felipe (Valencia)
La Enfermedad de Parkinson es una enfermedad neurodegenerativa
progresiva que se manifiesta asimtricamente y afecta, principalmente, a
la capacidad motora de los individuos. Es la segunda enfermedad neurodegenerativa ms comn en el mundo occidental y se estima que afecta
alrededor del 2% de los mayores de 65 aos. Etiopatolgicamente se
produce una muerte neuronal en la substantia nigra pars compacta que

provoca una disminucin de la cantidad de dopamina liberada en el estriado, que es la que en ltimo termino provoca los sntomas tpicos de la EP:
temblor de reposo, lentitud de movimientos y rigidez postural.
Aunque ms del 90% de los casos se interpretan como formas espordicas, ha sido el estudio de las formas familiares el que ha permitido
avanzar ms en la compresin de la enfermedad. As, se han conseguido
identificar hasta seis genes con herencia mendeliana que causan EP (sinuclena, parkina, pink1, UCH-L1, DJ-1 y LRRK2).
Nuestro trabajo se centrar en el estudio de LRRK2, ya que sus
mutaciones no solo provocan EP familiar, sino que son responsables de
alrededor de un 2-5% de los casos espordicos, constituyndose en la
causa de EP ms importante identificada hasta el momento. Se ha descrito como una protena multidominio formada por un dominio GTPasa,
un dominio COR, un dominio quinasa, y diferentes tipos de repeticiones,
aunque existe discusin respecto al nmero y naturaleza de las mismas.
Profundizamos en esta ltima cuestin, adems de discutir la importancia funcional de las mutaciones R1398H, Y1699C, Q1919R y P2119L, as
como tambin de la idoneidad o no de la utilizacin de Ecdysozoa como
modelo experimental, basndonos en conservacin de secuencia, relaciones filogenticas e inferencia de la conservacin funcional.

Remodelado de cromatina y mejora cognitiva inducida por enriquecimiento ambiental: papel de la actividad acetil-transferasa de histonas de CBP
Jose Viosca Ros; Petra Gromova, Jose P. Lopez-Atalaya y Angel Barco
Instituto de Neurociencias de Alicante (Universidad Miguel Hernndez-Consejo Superior de Investigaciones Cientficas). Campus
de Sant Joan. Apt. 18. Sant Joan dAlacant. 03550. Alicante, Espaa
Desde la dcada de los 60 son conocidos los cambios generales que
el enriquecimiento de las condiciones de estabulacin produce sobre la
capacidad de aprendizaje en animales de experimentacin. As, diversos
estudios han evidenciado mejoras inducidas por la exposicin a un ambiente enriquecido en formas de aprendizaje y memoria dependientes de
funcin hipocampal que correlacionan con cambios estructurales y fisiolgicos en el hipocampo (aumento en ramificaciones dendrticas y nmero de espinas, estimulacin de neurognesis y aumento de excitabilidad
global en giro dentado). Un fenmeno que podra estar mediando estos
efectos es el remodelado de la cromatina dado su potencial papel como
regulador global de la expresin gnica. Aqu describimos los cambios en
acetilacin de diversas histonas inducidos por la exposicin a un ambiente
enriquecido. Observamos que cambios tempranos y tardos tienen lugar
en diferentes histonas, y que algunas de estas modificaciones no ocurren
en ratones deficientes en CBP (CBP+/-), un co-activador transcripcional
con actividad acetilasa de histonas que ha sido directamente implicado en
procesos cognitivos tanto en ratn como en humanos. Adems, mientras
una exposicin permanente a un ambiente enriquecido mejora el aprendizaje y la retencin de memoria en el laberinto acutico de Morris en
ratones controles, no tiene efecto en ratones CBP +/-. Estos hallazgos
sugieren que la acetilacin de histonas contribuye a la mejora cognitiva
inducida por el enriquecimiento ambiental y apuntan, en particular, a la
actividad HAT de CBP como un mediador molecular de dichos efectos.
Alarcon et al. Neuron 42, 947-959.
van Praag et al. Nat Rev Neurosci 1, 191-198.

NEOANGIOGNESIS Y RED MICROVASCULAR EN
GLIOMAS MALIGNOS INDUCIDOS CON ETILNITROSOUREA.
S. Bulnes Sesma; E.g. Argandoa(2) , O. Leis Esnaola(1), N. Ortuzar
Markes(1), J.v. Lafuente Snchez(1)
1-Laboratorio de Neurociencia Clnica y Experimental (LaNCE).
Departamento de Neurociencias. Universidad del Pas Vasco/Euskal
Herriko Unibertsitatea. 2-Laboratorio de Neurociencia Clnica y
Experimental (LaNCE). Departamento de Enfermera/UPV-EHU.
Introduccin: Los gliomas anaplsicos poseen una angioarquitectura
aberrante dependiente de la capacidad de perfusin sangunea y del proceso de angiognesis. En este trabajo se estudia la adaptacin de la morfologa
vascular en las diferentes zonas del glioma anaplsico. Material y mtodos:
31 gliomas anaplsicos son inducidos en ratas Sprague Dawley mediante
exposicin prenatal a etilnitrosourea. Los gliomas se localizan mediante resonancia magntica nuclear (RMN) en T2 y T1 postcontraste (Gd-DTPA).
30 minutos antes de sacrificar al animal se le inyecta i.v. 1ml Azul de Evans
(AE). Se realiza un estudio histopatolgico, histoquimia para LEA y BchE e
inmunohistoquimia para los anticuerpos frente a: GluT-1, EBA y VEGF165.
Resultados: El tamao medio de los gliomas analizado por RNM es de
900.79332.39mm3, alcanzando los de mayor malignidad 7626.91mm3. Las
imgenes en T2 muestran una seal hiperintensa correspondiente a hemorragias, macroquistes y necrosis. En T1 postcontraste se observa una seal
anular perinecrtica y peritumoral; zonas teidas con AE. La vascularizacin
anrquica se corresponde con diferentes reas del tumor: central con escasos vasos de luces de gran tamao, algunas secciones vasculares coexpresan
GluT-1-VEGF; perifrica de vasos algo dilatados pero similares a los normales coexpresando GluT-1-EBA; borde o perinecrtica con proliferaciones vasculares en forma glomeruloide inmunopositivas para VEGF-GluT-1.
Conclusin: Hay una progresin en la aberracin vascular con alteracin de
la barrera hematoenceflica (BHE) desde el borde neoangiognico hacia el
centro hipxico del tumor. En las regiones perinecrticas existen formaciones vasculares con un aumento de la permeabilidad de la BHE.

CAMBIOS EN LA SENSIBILIDAD DE ADRENOCEPTORES a2A Y RECEPTORES 5-HT1A INDUCIDOS
POR EL TRATAMIENTO CRNICO CON EL AGONISTA CANNABINOIDE CB1/CB2 WIN 55,212-2 EN CEREBRO DE RATA
Susana Esteban Valds; David Moranta, Jess A. Garca-Sevilla.
Laboratorio de Neurofarmacologa, Iunics, Universidad de las Islas Baleares, 07122 Palma de Mallorca.
El tratamiento agudo con cannabinoides aumenta la sntesis cerebral
de NA y disminuye la de DA y 5-HT (1). Se analiz la sensibilidad de los
adrenoceptores a2A y receptores 5-HT1A presinpticos (autorreceptores
y heterorreceptores) que modulan la sntesis de monoaminas cerebrales,
tras administracin crnica del agonista cannabinoide WIN55,212-2 (WIN)
y tras la abstinencia precipitada por rimonabant. Se utiliz la hidroxilacin
de tirosina y triptfano, tras inhibicin de la descarboxilacin por NSD1015,
como ndice de la sntesis de monoaminas en hipocampo, corteza, cerebelo
y estriado de rata in vivo. Tras WIN crnico y abstinencia precipitada por
rimonabant, se observ una prdida general de los efectos inhibitorios de
WIN sobre la sntesis de DA y 5-HT, y del efecto estimulatorio de WIN
sobre la sntesis de NA en corteza. El tratamiento crnico con WIN indujo
una prdida del efecto inhibitorio del agonista del adrenoceptor a2 clonidina (1 mg/kg, 1 h) sobre la sntesis de NA, DA, y 5-HT en todas las regiones
estudiadas de ratas tolerantes y/o abstinentes, as como un incremento
del efecto inhibitorio del agonista 5-HT1A 8-OH-DPAT (0.1 mg/kg, 1 h)
sobre la sntesis de 5-HT, DA y/o NA en cerebelo y estriado. Los datos
sugieren que la exposicin crnica a WIN induce desensibilizacin de los
adrenoceptores a2 e hipersensibilidad de los receptors 5-HT1A (autorreceptores y heterorreceptores) que modulan la sntesis de monoaminas en
cerebro de rata in vivo, probablemente como consecuencia de los cambios
que inducen los cannabinoides sobre los niveles de monoaminas cerebrales.
SAF2004-03685 (MEC) y RETICS RD06/001/003 (MSC).
(1) Moranta et al. Naunyn-Schmiedebergs Arch Pharmacol 369: 516-524 (2004)
97
EL BLOQUEO DE RECEPTORES CANNABINOIDES

CB1 EN EL NCLEO ACCUMBENS ANULA LA EXPRESIN DE LA SENSIBILIZACIN A LA COCANA,
MIENTRAS QUE EL BLOQUEO DE RECEPTORES D3
DE DOPAMINA ANULA LA INDUCCIN
ANALISIS CUALITATIVO Y CUANTITATIVO DEL ORIGEN DE LA INERVACIN GABAERGICA DE LA CAPA

I CORTICAL EN LA RATA.
Susana Mara Ramiro Fuentes.

La administracin repetida de cocana induce sensibilizacin motora
en ratas. A nivel del ncleo accumbens (NA), la cocana induce un aumento de la liberacin de glutamato por medio del bloqueo de la liberacin
de cannabinoides endgenos, y de dopamina que acta sobre receptores
D1 y D2. El objetivo fue discernir si el bloqueo local de receptores cannabinoides CB1 o D3 de dopamina en el ncleo accumbens afecta a la
sensibilizacin a la cocana, y cules son sus efectos bioqumicos en reas
del circuito mesolmbico y nigroestriatal.
La sensibilizacin se bloqueaba slo si se inyectaba el SR141716A
en la fase de expresin, siendo el efecto dependiente de dosis. A nivel
bioqumico, se observ mediante western blotting que la cocana regulaba
al alza la proten-cinasa A en NA, y que dicho efecto era bloqueado por
el antagonista CB1, lo que podra explicar sus efectos motores. Tambin
observamos efectos bioqumicos reactivos en otras reas. El SR141716A
intraaccmbico regulaba a la baja la expresin de tirosina-hidroxilasa en la
corteza prefrontal. Respecto al estudio con el antagonista D3, se observ
por el contrario que la sensibilizacin a cocana se bloqueaba slo si se
inyectaba el GR103691 en la fase de induccin, no en la de expresin.
En resumen, el antagonismo CB1 en NA es capaz de bloquear la sensibilizacin a cocana en su fase de expresin, a travs de una inhibicin
de la regulacin al alza de PKA; mientras que el bloqueo D3 acta en la
fase de induccin. Todo ello indica que los receptores D3 son crticos
para el desarrollo progresivo de la sensibilizacin a cocana, no jugando
un papel importante cuando ya se ha desarrollado la misma. Sin embargo,
los receptores cannabinoides CB1 parecen jugar un rol opuesto a los D3,
actuando slo en la expresin de la sensibilizacin.
Tania Ramos-Moreno y Francisco Clasc

Facultad de Medicina (Universidad Autnoma de Madrid)
Los penachos dendrticos distales de las clulas piramidales se reconocen hoy como un elemento clave del microcircuito cortical. Dichos
penachos se alojan exclusivamente en la capa I de la corteza cerebral y
sobre ellos converge un masivo conjunto de aferentes locales y extrnsecos. Entre estos, destaca el denso plexo de fibras GABAergicas situado
en la zona superficial (subcapa Ia). En el presente estudio hemos buscado
precisar cuantitativamente el origen de este plexo combinando tcnicas
de trazado axonal retrgrado e inmunomarcaje para GABA, somatostatina (SOM), calbindina (CB), calretinina y reelina.
Nuestras observaciones en la corteza motora, somestsica y visual
indican que el origen fundamental (~90%) del plexo GABAergico en cada
punto son las interneuronas situadas bajo ese punto. Estas se localizan
en las capas II-V, y su expresin de SOM indica que se trata de clulas de
Martinotti. Adems, en las capas II-III, pero no en las capas IV-VI, numerosas interneuronas CB+ SOM-, presumiblemente clulas doble bouquet
proyectan tambin a la capa I. Loa axones de una masiva poblacin de
neuronas de la capa VII de una extensa zona cortical converge en cada
punto de la capa I; nuestros datos se trata de una proyeccin casi exclusivamente no-GABArgica. El 10% restante de los axones GABAergicos
que alcanzan la capa I procede de una poblacin de neuronas magnocelulares situadas en el prosencfalo basal en torno al globo palido. En
cambio, ni el claustro ni la zona incerta aportan axones GABArgicos a
la capa I cortical.

EVALUACIN DEL ESTRS OXIDATIVO Y DAO
NEURONAL EN EL HIPOCAMPO OCASIONADO
POR EXPOSICIN A TOLUENO.
Gmez-pinedo U1-3, Feria Velasco, A5, Garca Verdugo Jm3-4
Ciatej A.c. Centro Conacyt, Guadalajara Mxico. Opd Hospital
Civil de Guadalajara, Guadalajara, Mxico. Centro de Investigacin
Prncipe Felipe, Valencia Espaa. Universidad de Valencia, Valencia,
Espaa. Unidad de Morfologa de alta resolucin, Cucba, U de
G. Mexico
La utilizacin de disolventes orgnicos como el tolueno, tiene consecuencias en la salud pblica. Es ampliamente utilizado en procesos industriales y en compuestos de uso domstico (1). Adems, el tolueno es
uno de los principales compuestos utilizados para inhalacin recreativa,
al inhalarse directamente en solucin. El tolueno se absorbe y distribuye
con rapidez en organismos expuestos y manifiesta una larga permanencia en los tejidos ricos en lpidos (2). No existen estudios concluyentes
que determinen el papel del tolueno como un generador de radicales
libres en el sistema nervioso central, los cuales son capaces de llevar a
cabo peroxidaciones en los lpidos de membrana ocasionando desrdenes neurodegenerativos (3-4). Se midieron las concentraciones de los
aldehdos Malondialdehdo (MDA) y 4-Hidroxinonenal (HNE) como indicadores del estrs oxidativo en homogenados de hipocampo de ratas
Sprague-Dawley expuestas en forma crnica por quince semanas intra y
extrauterinamente, a vapores de tolueno a 1200 ppm (15min/3veces/da
exposicin recreativa) y a 200 ppm (8hr/da exposicin laboral). Los resultados presentaron incremento de MDA/HNE en las ratas expuestas
a tolueno a 200 ppm, con respecto al grupo control. En cuanto al dao
neuronal no se encontraron indicios de necrosis en ninguno de los grupos expuestos a tolueno. Adems, hubo una disminucin significativa en la
poblacin neuronal de CA1 y CA3 en las ratas expuestas, siendo la zona
CA1 la ms afectada. Los hallazgos encontrados sugieren que el tolueno
desencadena la formacin de radicales libres provocando peroxidacin lipdica en tejido hipocampal y ocasiona disminucin neuronal en las zonas
CA1 y CA3 del hipocampo.
1) Slomianka L, Rungby J, Edelfors S, Ravn-Jonsen A. Late postnatal growth in the
dentate area of the rat hippocampus compensates for volumetric changes caused by
early postnatal toluene exposure. Toxicology. 1992 Sep;74(2-3):203-8.
98
2) Gospe SM, Zhou SS, Saeed DB, Zeman FJ. Development of a Rat Model of Toluene-Abuse Embryopathy.Pediatric Research. 40(1):82-87, July 1996.
3) Chen HH, Wei CT, Chan MH. Neonatal toluene exposure alters glutamate-induced calcium signaling in developing cerebellar granule neurons. Ann N Y Acad Sci.
2004 Oct;1025:556-60.
4) Gospe SM Jr, Zhou SS. Prenatal exposure to toluene results in abnormal neurogenesis and migration in rat somatosensory cortex. Pediatr Res. 2000 Mar;47(3):362-8.
.
Expresin de NOGO-A y LERN1 en el hipocampo humano durante el envejecimiento normal, en la enfermedad de Alzheimer y en epilepsia
Vanessa Gil; Oriol Nicols1, Franc LLorens5, Jess Urea 2, Javier
Sez-Valero3, Isidro Ferrer4, Eduardo Soriano 2, Lauro Sumoy5, y Jos
Antonio del Ro1
1) Bases Celulares y Moleculares de la Neurodegeneracin y Neuroreparacin, IRB-PCB, Universidad de Barcelona, Josep Samitier
1-5; 08028, Barcelona. 2) Neurobiologa del Desarrollo y la Regeneracin, IRB-PCB, Universidad de Barcelona. 3) Instituto de
Neurociencias de Alicante, Universidad Miguel Hernndez-CSIC.
4)Instituto de Neuropatologa, Facultad de Medicina, IDIBELL-Hospital Universitario de Bellvitge, Universidad de Barcelona. 5) Bioinformatics and Genomic Program, Center for Genomic Regulation
(CRG), UPF, Barcelona
El potencial regenerativo del SNC, a diferencia del SNP, desaparece gradualmente durante el desarrollo coincidiendo con la mielinizacin.
Hasta el momento, se ha descrito la existencia de tres protenas asociadas a la mielina que estaran implicadas en la prdida de plasticidad en
el sistema nervioso adulto y en la inhibicin de la regeneracin axonal
tras lesin. Estas protenas (Nogo-A, MAG y OMgp) actuaran,de forma
independiente, desencadenando la activacin de un complejo receptor
neuronal comn formado por NgR, p75 o TAJ-1/TROY y LERN1. Estudios
recientes sugieren que la expresin de alguna de estas protenas en el
hipocampo (por ej. Nogo-A) puede ser modulada por actividad sinptica o tras lesiones neurales derivadas de ciertas patologas cerebrales
como epilepsia del lbulo temporal, esclerosis mltiple o esquizofrenia.
Sin embargo, hasta ahora no se ha descrito ninguna relacin entre dichas
protenas y la enfermedad de Alzheimer (EA), situacin patolgica en la
cual ocurre una gran prdida celular y una significante reorganizacin
sinptica en reas relacionadas con el aprendizaje y la memoria. En el
presente estudio, se analiza la expresin de Nogo-A en la formacin hipocmpica humana en una situacin de envejecimiento normal y en la EA.
Nuestros resultados indican que Nogo-A se expresa en oligodendrocitos
y neuronas durante el envejecimiento normal, as como tambin en clulas granulares y fibras musgosas del giro dentado. Sorprendentemente, en
la EA, Nogo-A es sobre-expresado por neuronas hipocmpicas y aparece
asociado a depsitos amiloideos en placas seniles. Por otra parte, se ha
observado una regulacin en la expresin de LERN1 en procesos epilpticos. Estos resultados sugieren una posible participacin de las protenas
asociadas a mielina, as como de los componentes del complejo receptor,
en las respuestas asociadas a enfermedades neurodegenerativas y procesos de plasticidad dependientes de actividad.

ROLE OF SONIC HEDGEHOG (SHH)/GLI SIGNALING
DURING MIDBRAIN DEVELOPMENT.
Vernica Alejandra Palma Alvarado; Carmen G. Feijo, Gisela Reinchisi, Pablo Lois, Francisco Araya
Center for Genomics of the Cell and Departament of Biology, Faculty of Sciences, University of Chile, Santiago, Chile.
One central question in our laboratory is the study of the molecular
mechanisms that regulate the growth of the brain. We are interested in
understanding the role of SHH in neural precursor cell behavior. During
late development SHH can act as a mitogen modulating cell proliferation
of diverse dorsal brain structures such as cortex and cerebellum. Another important dorsal structure that develops late is the dorsal derivative
of the midbrain (tectum). Taking advantage of zebrafish developmental

genetics combining a detailed analysis of the different zebrafish Shh and
Gli mutants, with several in vitro approaches, including murine explant
and neurosphere assays in order to examine the behavior of tectal stem
cells, we demonstrate that the SHH-Gli pathway has a role in controlling
stem cell behavior in the developing tectum.We showed recently that Shh
controls neocortical cells with stem cell properties in a concentration
dependent manner in cooperation with EGF signaling, regulating EGFR
expression. Now we show that Shh modulates changes in the responsiveness to EGF signaling, and thereby in cell maduration, depending on
the treshold of EGFR stimulation and/or receptor number in the tectum
as well. We propose that the SHH/Gli pathway controls the number of
cells with stem cell properties and that this role is evolutionarily conserved in the dorsal vertebrate brain. Funding: ICM P06-039F and Fondecyt
1070248.
Dra. Isabel Farias Gomez, Dra Pilar Sanchez

Mapa detallado de la expresin de la familia gnica LGI en cerebro de ratn adulto
Vicente Herranz Prez; Jos Manuel Morante Redolat, Francisco
Olucha Bordonau, Jordi Prez Tur
Unitat de Gentica Molecular, Instituto de Biomedicina de Valencia,
Consejo Superior de Investigaciones Cientficas
Las mutaciones en el gen LGI1 (Leucine-Rich Glioma Inactivated 1)
causan epilepsia lateral temporal autosmica dominante (ADLTE)1. Se ha
descrito por Northern blot que la expresin de dicho gen se restringe a
cerebro y msculo esqueltico2. Su implicacin en la ADLTE est respaldada por el hecho de que LGI1 se expresa predominantemente en reas
del cerebro relacionadas con trastornos epilpticos como el hipocampo3.
Al contrario que en otras epilepsias de origen gentico, LGI1 no codifica
para un canal inico sino para una protena de secrecin. De hecho, mutaciones en LGI1 dan lugar a que la protena no se secrete al medio extracelular4. Posteriormente, se han descrito otros tres genes que comparten
estructura proteica con LGI1, a los que se ha denominado LGI2, LGI3 y
LGI4, formando todos parte de una misma familia gnica5.
Con el objetivo de obtener un mapa detallado de la expresin de la
familia gnica LGI en cerebro de ratn, se sintetizaron dos sondas antisentido de RNA de cada uno de los genes para llevar a cabo un estudio
por medio de hibridacin in situ. Las sondas sentido correspondientes no
revelaron marcaje alguno, mientras que con las dos sondas antisentido,
se obtuvo un marcaje similar para el par de sondas de cada gen. En este
trabajo describimos el patrn de distribucin de la expresin de cada
uno de estos genes.
1. Chernova et al. Oncogene. 17(22):2873-81.
2. Morante-Redolat et al. Hum Mol Genet. 11(9):1119-28.
3. Kalachikov et al. Nat Genet. 30:335-41.
4. Sirerol-Piquer et al. Hum Mol Genet. 15(23):3436-45.
5. Staub et al. Trends Biochem Sci 27:441444.

La exposicin prolongada a dieldrn reduce la funcionalidad del receptor NMDA en
cultivos primarios neuronales
Victor Briz Herrezuelo; Zoila Babot, Mireia Galofr, M.Teresa Vilar
y Cristina Suol
Departmento de Neuroqumica y Neurofarmacologa. Institut
dInvestigacions Biomdiques de Barcelona. Consejo Superior de
Investigaciones Cientficas. CSIC-IDIBAPS. Barcelona. CIBER en Epidemiologa y Salud Pblica (CIBERESP)
El dieldrn es un plaguicida organoclorado persistente que se acumula
en el tejido graso de organismos vivos. Es un antagonista del receptor
GABAA, produciendo convulsiones despus de una exposicin txica
aguda. A pesar de que se conoce que el dieldrn se acumula en el cerebro
humano, se desconocen los efectos en el SNC de la exposicin a largo
plazo a este compuesto. Cultivos primarios de neuronas corticales y de
clulas granulares de cerebelo fueron expuestos aguda (<45 minutos) y
99
prolongadamente (16 DIV) a concentraciones no citotxicas (< 10 M)

de dieldrn. La exposicin aguda a dieldrn no modific la funcionalidad
del receptor NMDA ni la despolarizacin de la membrana celular inducida
por glutamato. La exposicin prolongada a dieldrn disminuy significativamente el incremento de la [Ca2+]i inducido por NMDA y la unin de
[3H]MK-801 al receptor NMDA e increment la despolarizacin causada
por glutamato, pero no por alta [K+] ni por veratridina. El anlisis immunocitoqumico revel un desplazamiento de NR1 del receptor NMDA
desde la membrana celular al citoplasma, sin modificar la expresin total,
determinada por Westernblot. De acuerdo con la funcin disminuida del
receptor NMDA, las neuronas en cultivo expuestas de manera prolongada
a dieldrn fueron resistentes a un estmulo excitotxico, inducido por una
exposicin transitoria a alta [KCl] o a glutamato. En resumen, este estudio
sugiere que la reduccin crnica de la funcin del receptor GABAA inducida por dieldrn disminuye el nmero de receptores funcionales NMDA.
SAF-FEDER 2003-4930, FIS PI061212, y 2005/SGR/00826. *Autores
que contribuyen igualmente al trabajo.

Contribucin de NADPH oxidasa y la activacin microglial en la degeneracin dopaminrgica inducida por 6-OHDA.
Jannette Rodrguez Pallares; Juan Andrs Parga, Ana Muoz, Pablo
Rey, Mara Josefa Guerra, Jose Luis Labandeira-Garca
La muerte celular inducida por la 6-hidroxidopamina (6-OHDA) se
asocia a la produccin de especies oxigenadas reactivas (EOR) derivadas
de su autooxidacin y a un posible efecto directo de la 6-OHDA en la
cadena respiratoria mitocondrial. Sin embargo este proceso no est completamente aclarado. En cultivos primarios de mesencfalo de rata observamos un incremento significativo en la muerte de clulas dopaminrgicas
24 h despus de la administracin de 6-OHDA (40M) y un incremento
en la expresin de subunidades de NADPH, la activacin microglial y la
produccin de superxido/ EOR en clulas dopaminrgicas, que se redujeron tras el tratamiento con el inhibidor de NADPH oxidasa, apocinina.
Bajas dosis de 6-OHDA (10M) no produjeron una prdida significativa de
neuronas dopaminrgicas ni un aumento significativo en la expresin de
subunidades de NADPH, la activacin microglial o la produccin de EOR.
Sin embargo, el tratamiento simultneo con Angiotensina II (activador del
complejo NADPH oxidasa) indujo un aumento significativo en estos parmetros. En ratas, 48 h despus de la inyeccin intraestriatal con 6-OHDA,
no se observ una prdida significativa de neuronas dopaminrgicas, pero
ya se observ incremento en la expresin de ARNm de subunidades de
NADPH y de actividad NADPH oxidasa. Estos resultados sugieren que
adems de las EOR procedentes de la autooxidacin y de posible inhibicin directa de la cadena respiratoria mitocondrial, una rpida activacin
microglial y EOR derivadas de la activacin del complejo NADPH oxidasa
actan sinrgicamente con la 6-OHDA, constituyendo un componente relevante y precoz de la muerte celular inducida por 6-OHDA.

Respuesta inflamatoria inducida por LPS
en ratones que carecen del receptor de
glucocorticoides en microgla.
Carrillo M.A. (1), Herrero M.T.(1), Barcia C. (1), Tronche F. (2) &
Vyas S. (2)
(1) Neurociencia Clnica y Experimental. Facultad de Medicina. Universidad de Murcia. (2) CNRS UMR 7148, Collge de France, 11
Place Marcelin Berthelot, Paris 75005, France.
La reaccin inflamatoria en SNC est caracterizada por activacin de
microglia y astrocitos residentes, e infiltracin de granulocitos y monocitos en el parnquima cerebral, que si no son controlados conducen a
graves daos neuronales. Los glucocorticoides, mediante activacin de su
receptor (GR) suprimen parcialmente la reaccin inflamatoria, sin embargo, altos niveles crnicos de glucocorticoides pueden tener consecuencias perjudiciales en las respuestas inmunes. Para evaluar los mecanismos
moleculares de accin del GR y su funcin durante las respuestas inmu-
100
nes en SNC, se utiliz un modelo animal con el gen de GR inactivado de

forma especfica en macrfagos/microglia (GRlysCre). La expresin del
GR en la microglia de estos ratones (mediante marcaje con GR y F4/80)
disminuye en un 70-80%. Se analiz la respuesta inflamatoria aguda tras
la inyeccin unilateral de LPS en el estriado y encontramos que: i) la necrosis secundaria a la lesin (marcada con anexina V) es mayor en mutantes que en controles; ii) los mutantes, pero no los controles, mostraban
desmielinizacin en el cuerpo calloso, indicando dao axonal; iii) exista
acumulacin significativa de clulas marcadas con Gr-1 en esta rea, indicativo de infiltracin de neutrfilos. Los resultados se compararon con la
proliferacin microglial y astroglial (analizados por BrDU, Iba-1 y GFAP),
y con la expresin de citoquinas pro- y antiinflamatorias mediante QPCR a 6 y 20 horas tras las inyecciones de LPS o salino. En conjunto, estos
resultados indican que el GR es importante en los procesos implicados en
la respuesta inflamatoria que conducen a neurodegeneracin en SNC.
-de Kloet et al. Nat Rev Neurosci 6, 463-75 (2005).
-Charmandari et al. Annu Rev Physiol 67, 259-84 (2005).
-Nadeau & Rivest J Immunol 169, 3370-81 (2002).
-Nadeau & Rivest J Neurosci 23, 5536-44 (2003).
-Tronche et al. Nat Genet 23, 99-103 (1999).

EFECTOS DE LOS CANNABINOIDES SOBRE LA MIGRACIN MICROGLIAL: RELEVANCIA EN LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER.
A.M. Martn Moreno, M.L. de Ceballos.
Grupo de Neurodegeneracin, Instituto Cajal, CSIC, Avda. Doctor
Arce, 37, Madrid 28002
La microgla expresa el receptor CB1, como todas las clulas neurales,
pero adems expresa el receptor CB2, caracterstico del sistema inmune.
Los cannabinoides promueven la migracin microglial, efecto mediado por
receptor CB2 (1). En la enfermedad de Alzheimer (EA), la microgla activada se acumula en las placas seniles, dnde existen depsitos de -amiloide
(A). Hemos estudiado los efectos de los pptidos amiloides, ya que el A
posee propiedades quimiotcticas (2), y de los cannabinoides utilizando
la lnea microglial murina N13. Los cannabinoides WIN 55,212-2 y JWH
133 activaron la migracin, efecto mediado por receptores CB1/CB2 y
CB2 respectivamente. El A fibrilado tambin promovi la migracin, pero
no el A soluble ni el SCR. Los cannabinoides aumentaron el nmero de
clulas que eran atradas por el A inmovilizado sobre nitrocelulosa o
por existente en las placas de secciones de cerebro de pacientes de EA.
Hemos mostrado que el A promueve migracin cuando se aade al cultivo microglial, y en mayor medida cuando se encuentra inmovilizado en la
superficie de la placa o agregado patolgicamente en cerebros de EA. Los
receptores CB1 y CB2 median el efecto de los cannabinoides y favorecen
la quimioatraccin que ejerce el A. La microgla activada en la EA es el
origen de distintas molculas neurotxicas, pero tambin suponen el mecanismo de degradacin del A. Tratamientos que aumenten la migracin
promovida por el A, favoreciendo as su eliminacin, seran importantes
para reducir la neurodegeneracin asociada a la EA.
1. Walter, et al. (2003) J. Neuroscience 23: 1398.
2. Cui, et al. (2002) J. Immunology168 :434.

La respuesta antioxidante de fase II atena
la activacin microglial en respuesta a lipopolisacrido
Nadia Innamorato; Mara L. de Ceballos, ngel J. Garca, Ana I. Rojo
y Antonio Cuadrado
Autnoma de Madrid. Arzobispo Morcillo 4, 28029 Madrid
La neuroinflamacin es un denominador comn en las enfermedades
neurodegenerativas. Se caracteriza fundamentalmente por la activacin
microglial crnica y subsiguiente liberacin de citoquinas pro-inflamatorias y especies reactivas de oxgeno (ROS) que son txicas para las
neuronas. Por tanto, la inhibicin farmacolgica de la activacin microglial

podra tener un efecto teraputico. Las ROS liberadas por la microglia
podran participan en activacin crnica de estas clulas. Por tanto, hemos analizado si el factor de transcripcin Nrf2, regulador central de la
respuesta antioxidante celular, podra intervenir en un feedback negativo de inhibicin microglial. Para estudiar esta posibilidad, comparamos
la respuesta microglial a lipopolisacrido (LPS) en ratones silvestres y
nulos para Nrf2. La respuesta inflamatoria fue significativamente mayor en
los ratones nulos, como se demuestra por mayores niveles de microgla
inmunoreactiva, indicada por el marcador F4/80, y por una mayor liberacin de citoquinas IL-6 y TNFa. Por otra parte, hemos observado que
el sulforafano, un isotiocianato procedente del brcoli, es un excelente
activador de fase II, atraviesa la barrera hematoenceflica e induce en cerebro (hipocampo) la activacin de genes antioxidantes, como hemo oxigenasa-1 (HO-1). Los ratones pre-tratados y mantenidos con tres dosis
semanales de sulforafano (i.p. 1 mg/kg) presentaron una fuerte reduccin
en la respuesta microglial al LPS determinada por una reduccin de F4/80
y una disminucin en la expresin de las citoquinas IL-6 y TNF. Nuestros
resultados identifican al factor de transcripcin Nrf2 como posible diana
teraputica frente a neuroinflamacin.

Efecto de la lesin nigroestriada sobre el
nmero y las caractersticas neuroqumicas de las neuronas dopaminrgicas del
bulbo olfatorio de macaco
Belzunegui Roncal S, San Sebastin W., Garrido-Gil P., Izal-Azcrate
A.,Vzquez-Claverie M., Lpez B., Marcilla I., Lanciego J.L., Luquin M.R
Laboratorio de Terapia Regenerativa y Laboratorio de Neuromorfologa, Centro de Investigacin Mdica Aplicada (CIMA)-Universidad de Navarra.
Antecedentes: La prdida de olfaccin (hiposmia) es un sntoma comn en pacientes con enfermedad de Parkinson (EP) y el bulbo olfatorio
(BO) de estos pacientes contiene un mayor nmero de clulas tirosina
hidroxilasa-inmunorreactivas (TH-ir).
Objetivo: Determinar el impacto de la lesin nigroestriada sobre la
poblacin de clulas TH-ir en el BO de monos.
Metodologa: Seis macacos: 3 intactos y 3 con una administracin crnica de MPTP y sacrificados 35 meses despus de la ltima dosis. Las clulas
TH-ir del BO se cuantificaron por estereologa y se caracterizaron mediante tcnicas de doble-inmunofluorescencia con los siguientes anticuerpos:
decarboxilasa del cido glutmico-67 (GAD67); nuclear neuronal (NeuN);
-III-tubulina (TuJ1); dopa decarboxilasa (DDC); transportador vesicular de
monoaminas-2 (VMAT2) y transportador de dopamina (DAT).
Resultados: En ambos grupos de animales la mayora de las clulas
TH-ir del BO se encontraron en la capa glomerular y adems de TH, coexpresaron GAD67. La mayora tambin expresaron DDC y VMAT2 pero
ninguna expres DAT. Muchas co-expresaron TuJ1 y muy pocas NeuN. El
nmero de clulas TH-ir del BO de monos parkinsonianos aument ms
de un 100% respecto al de monos intactos.
Conclusiones: En ambos grupos de animales las clulas TH-ir presentan caractersticas neuroqumicas similares: expresan GAD67 y los marcadores de neuronas dopaminrgicas funcionantes DDC y VMAT2, pero
no DAT. Muchas de ellas co-expresaron TuJ1 y pocas NeuN, indicando su
estado inmaduro. La lesin nigroestriada provoc un aumento significativo del nmero de neuronas TH-ir del BO. Este aumento podra estar
involucrado en la hiposmia observada en los pacientes con EP.

DISRUPTED SYNAPTIC COMPOSITION AND NMDA
RECEPTOR ENDOCYTIC TRAFFICKING
Sonia Marco; Jess Torres-Peraza, Jordi Alberch and Isabel Prez-Otao
Department of Neurosciences, Center for Applied Medical Research
(CIMA), Medical School and University Clinic, University of Navarra,
Pamplona, Spain, Dept. Biologia Cel.lular i Anatomia Patologica, Facultat de Medicina. IDIBAPS. Universitat de Barcelona, Spain.
linked to alterations in NMDAR function remains unclear. We recently

discovered that the htt-interacting protein PACSIN1/syndapin1 behaves
as an endocytic adaptor for NMDARs by targeting the NMDAR subunit NR3A. Because the interaction of PACSIN1 with htt is repeat-length
dependent and enhanced with mutant htt, we hypothesized that mutant
htt disrupts NMDAR endocytic trafficking by sequestering PACSIN1 into
cellular aggregates, leading to enhanced NMDAR surface expression, synaptic dysfunction and increased excitotoxicity.
Here we show that N-terminal fragments of mutant htt transfected
into striatal neurons sequester PACSIN1 and other endocytic proteins
such as dynamin 1. Sequestration results in significant redistribution of
PACSIN1 and dynamin I from neuronal dendrites to the soma. Defects
in endocytic protein localization are accompanied by accumulation of
NR3A-containing NMDARs at the plasma membrane without concomitant alterations in general endocytic capacity or surface expression of
other glutamate receptors. Consistent with in vitro data, R6/1 mice expressing mutant htt with 115 CAG repeats display progressively reduced
PACSIN1 and increased NR3A levels in the striatum, but not general
alterations in other synaptic proteins. Our current hypothesis is that a
dysfunction in specific pathways of NMDAR endocytic trafficking/sorting
triggered by mutant htt might underlie HD pathology. Further studies are
directed to dissect the trafficking pathways involved, explain the sources
of specificity, and investigate its causative/contributory role to HD neuronal degeneration and synaptic deficits.
Prez-Otao et al., Nature Neuroscience, 9, 611, 2006.
Modregger et al., Hum Mol Genet. 11, 2547, 2002.

Separacin automtica off- y online de estados corticales de activacin en registros intracelulares
Yamina Seamari; Jos A. Narvez1, Francisco J. Vico2, Daniel Lobo2,
Mara V. Snchez-Vives3
1. Dpto. Fisiologa General, Facultad de Medicina. Universidad de
Mlaga, Spain. 2 Dpto. Lenguajes y Ciencias de la Computacin, ETSI
Informtica. Universidad de Mlaga, Spain. 3 Instituto de Neurociencias de Alicante, Universidad Miguel Hernndez-CSIC. San Juan de
Alicante, Spain.
La conectividad recurrente de la red neuronal cortical genera actividad rtmica espontnea. Esta actividad consiste en alternancia entre
estados de activacin (up states) que se alternan con estados silentes
(down states) y ocurre durante el sueo de onda lenta, anestesia, as
como en rodajas de corteza in vitro. Hemos detectado la necesidad de un
procesamiento cuantitativo detallado de este comportamiento mediante
la caracterizacin automtica (computerizada) de la ocurrencia de los
estados up y down. Aqu definimos y analizamos un mtodo que separa
dichos estados en registros intracelulares obtenidos en diferentes reas
corticales en preparaciones in vivo e in vitro. El mtodo se basa en el
cruzamiento de dos medias mviles, de manera que la transicin entre
el rgimen de potencial de membrana de los estados up y down puede
ser anticipada basndose en las dinmicas de voltaje actuales y previas.
El modelo es definido formalmente e implementado en MATLAB. Esta
tcnica se compara con el ms tradicional enfoque basado en histogramas
de potencial de membrana. El mtodo aqu propuesto consigue separar
aquellos datos cuyo comportamiento no es la oscilacin estndar de estados up y down, de manera que compensan posibles artefactos u otras
condiciones que alejan el registro de la oscilacin ptima para el anlisis
por histograma. La aplicabilidad y rendimiento de este mtodo se analiza
tanto en el procesamiento off-line como on-line de los registros. El estudio on-line permite la realizacin de experimentos en los que el inicio
de un estado up o down puede ser empleado para disparar (triggering)
otros eventos.
Recent studies implicate selective alterations in NMDA receptors in

the cell-specific death observed in mouse models of Huntingtons disease (HD) expressing mutated huntingtin (htt). Yet how the mutations are
101

LA ADMINISTRACION INTRACISTERNAL DE GALANINA (1-15) MODULA LOS RECEPTORES 5-HT1A
EN EL HIPOCAMPO Y EN EL NUCLEO DORSAL DEL
RAFE DE LA RATA
Z. Daz-Cabiale1, C Parrado2, C Vela1, H Razani1, M Narvez1, S
Gonzlez Baron1, K Fuxe3 y JA Narvez
1Departamento de Fisiologa, 2Departamento de Histologa y Anatoma Patolgica, Universidad de Mlaga, Espaa 3Department of
Neuroscience. Karolinska Institutet, Stockholm. Sweden.
La Galanina (1-29) (GAL) modula los receptores 5-HT1A de la rata
tanto a nivel funcional como a nivel de receptor (1, 2, 3). As mediante tcnicas de hibridacin in situ se observ que 2 horas tras la microinyeccion
intracerebroventricular (i.c.v.) de GAL (3nmol) la expresin de mRNA
de los receptores 5-HT1A (mRNA 5-HT1A) disminuy en un 33% en
rafe dorsal (DR) sin que se observaran modificaciones en el hipocampo
dorsal (4, 5).
Diferentes trabajos han demostrado que el fragmento N-terminal de
Galanina (1-15) [GAL (1-15)] tiene efectos centrales opuestos a GAL e
interacciona de forma diferencial con otros neurotransmisores y neuropptidos (6).
El objetivo del trabajo ha sido analizar mediante tcnicas de hibridacin in situ si GAL (1-15) (3nmol) i.c.v. modifica el mRNA 5-HT1A a las 2
y a las 5 horas tras su administracin.
As, en el DR GAL (1-15) disminuy el mRNA 5-HT1A en un 33%
y 8% a las 2 y 5 horas respectivamente (p<0.01). Por el contrario en el
hipocampo dorsal, GAL (1-15) aument la expresin de mRNA 5-HT1A,
en un 42% y 48% en giro dentado y rea C1A respectivamente (p<0.001)
a las 2 h tras la administracin del fragmento.
Estos resultados demuestran que GAL (1-15) in vivo modula el
mRNA de los receptores 5-HT1A tanto a nivel presinptico en el DR
como a nivel postsinptico en el hipocampo dorsal sugiriendo un papel
regulador importante de la GAL(1-15) en enfermedades relacionadas con
los transtornos del nimo.
Financiacin: BFU2005-02241 Y SEJ 1323.
1. Misane et al. Eur J Neurosci. 1998,10:1230-40.
2. Fuxe K et al Ann N Y Acad Sci. 1998, 863:274-90.
3. Kehr et al. Neuropsychopharmacology. 2002, 27:341-56.
4. Razani et al. Neuroreport. 2000, 11:3943-8.
5. Razani et al. Neurosci Lett. 2001, 299:145-9.
6. Diaz-Cabiale et al. Neuropeptides. 2005,39:185-90.

Estudio in vivo de la posible inhibicin
del sistema ubiquitina-proteasoma en modelos transgnicos de la enfermedad de
Huntington
Zaira Ortega LLorente; Miguel Daz-Hernndez(1), Nico Dantuma(2), Jos J Lucas(1).
(1)Centro de Biologa Molecular Severo Ochoa, CSIC/UAM,
Madrid, 28049, Spain. (2)Microbiology and Tumor Biology Center,
Karolinska Institutet, Box 280, S-171 77 Estocolmo, Suecia.
Una marca histopatolgica de la enfermedad de Huntington (EH),
y de la mayora de las enfermedades neurodegenerativas, es la presencia
de agregados proteicos intraneuronales detectables con anticuerpos antiubiquitina. Esto, unido a otras evidencias genticas (mutaciones en componentes del sistema Ubiquitina-Proteasoma (SUP) causan formas genticas de Parkinson) sugiere la implicacin del SUP en las enfermedades
neurodegenerativas. Esta hiptesis, en la EH, es motivo de controversia.
Nuestro laboratorio ha realizado distintos experimentos para clarificarla.
Hemos realizado ensayos enzimticos de las actividades del proteasoma
en extractos de cerebro del ratn Tet/HD94 que expresa el exon1 de la
huntingtina con 94 repeticiones de CAG bajo un promotor condicional.
Estos extractos contenan cuerpos de inclusin (CIs) pero no detectamos inhibicin de ninguna de las actividades (1). Posteriormente pusimos
a punto un sistema de purificacin, partiendo de cerebro de ratn, de CIs
(2) y de los filamentos que los componen (3), y realizamos experimen-
102
tos con proteasomas purificados in vitro. Observamos que los filamentos

pero no los CIs inhiban el 26S, y que tena lugar una interaccin directa
entre los filamentos y el 19S (3). Esto sugiere que los filamentos inhibiran
el proteasoma slo cuando no forman parte de los CIs. Los resultados
obtenidos hasta ahora apuntan que la inhibicin podra estar sucediendo
en un nmero limitado de neuronas o ser transitoria. Para aclarar esto,
estamos trabajando en el cruce del ratn Tet/HD94 con un ratn que
expresa la protena GFP unida a una seal de degradacin del proteasoma
(4), que servir de reportero de actividad de este acumulndose cuando
est inhibido.
1. Diaz-Hernandez et al. (2003) J Neurosci 23, 11653-61.
2. Diaz-Hernandez et al. (2006) J Neurochem 98, 1585-96.
3. Diaz-Hernandez et al. (2004) J Neurosci 24, 9361-71.
4. Lindsten, K et al. (2003) Nat Biotechnol 21, 897-902.
VIERNES 7 - COMUNICACIONES ORALES (Auditorio I, II, III A Y III B)

16:00 a 16:15 en la sala Auditorio 1 (sesin: 1A)
SNAP25 REGULA EL RECAMBIO SINAPTICO DE LOS
RECEPTORES DE KAINATO QUE CONTIENEN LA
SUBUNIDAD KA2
Financiado con fondos del Ministerio de Sanidad y Consumo (PI20042591), Ministerio de Educacin y Ciencia (SAF2006-28387E y SAF00604826), Consejera de Sanidad de Castilla-La Mancha (ICS06024/00) y
Consejera de Educacin y Ciencia de Castilla-La Mancha (PAI-0050-7177
y PAI07-0049-6090).
A.V. Paternain, S. Selak, y J. Lerma

Instituto de Neurociencias de Alicante (CSIC-UMH)
Un punto fundamental a la hora de entender la posible funcin de los

receptores de kainato (KARs) en la transmisin y plasticidad sinpticas es
conocer los mecanismos que regulan su trfico y expresin en la membrana plasmtica. Recientes evidencias indican que protenas asociadas
al trfico citoplasmtico pueden interaccionar con los dominios C-terminales de las subunidades GluR5-7 de los KARs regulando su recambio
sinptico. Por ello, nos propusimos estudiar como la subunidad KA2 de
los KARs a travs del dominio C-terminal y su interaccin con diferentes
protenas es capaz de regular de forma fina el trfico de los KARs.
En este estudio hemos encontrado que SNAP25 co-inmunoprecipita
con un complejo de protenas formado por PICK1, GRIP1 y KA2, siendo
esta interaccin dependiente de la actividad de la protena kinasa C. Experimentos de inmunocitoqumica realizados tanto en clulas HEK transfectadas como en neuronas de hipocampo en cultivo, demuestran que
SNAP25 colocaliza con la subunidad KA2. La sobreexpresin de SNAP25
produce un incremento en la internalizacin de los KARs dependiente de
activacin por kainato. As mismo, en rodajas de hipocampo de ratn la
perfusin intracelular a travs de la pipeta de registro de un anticuerpo
monoclonal purificado para SNAP25 y pptidos que bloquean la funcin
de SNAP25, provocan el aumento de los EPSC registrados en neurona
piramidales de CA3, y este incremento es dependiente de la subunidad
KA2.
Estos resultados demuestran que SNAP25 juega un papel fundamental en la endocitosis de los KARs sinpticos a travs de la subunidad
KA2

La Anosmina-1 favorece la adhesin de los
precursores de oligodendrocitos
Bribian Arruego A., Esteban PF., Clemente D.,Thomas,Silva A., SoussiYanicostas N., de Castro F.
1 Lab. Neurobiologa del Desarrollo. GNDe. Hospital Nacional de
Parapljicos. Toledo. Espaa. 2 Institut National de la Sante et de la
Recherche Medicale (INSERM), U711, Paris F-75013, France. 3 Lab.
Gentica del Cncer y de las Clulas Progenitoras del Cncer. CIB,
CSIC, Madrid, Espaa. 4 INSERM U-616, Equipe Avenir, CHU PitieSalpetriere 47 Bd de lHopital, 75651, Paris Cedex 13, France
Durante el desarrollo del sistema nervioso central (SNC), los precursores de oligodendrocitos colonizan el nervio ptico desde el quiasma
a la retina. Estos precursores responden a distintas seales existentes en
esta estructura que dirigen su migracin. Una de ellas es la protena de
matriz extracelular, Anosmina-1. Esta protena tiene conocidos efectos en
distintos eventos del desarrollo del SNC. Participa tanto en migracin
neuronal como en fenmenos de adhesin. En estudios previos, nuestro grupo describi su funcin moduladora sobre el efecto del factor
de crecimiento fibroblstico bsico (FGF-2) va su receptor FGFR1 en
la migracin de precursores de oligodendrocitos (Bribin et al., 2006),
como ocurre en las clulas GnRH (Gonzlez-Martnez., et al., 2004). Ahora describimos una nueva funcin de la Anosmina-1 en la migracin de
precursores de oligodendrocitos. La Anosmina-1 es expresada por los
propios precursores de oligodendrocitos en el mismo periodo de tiempo
en el que estos comienzan a colonizar el nervio ptico. Esta Anosmina-1
endgena participa, directamente, en la adhesin de este tipo celular a los
distintos componentes de la matriz extracelular, incrementndola. Este incremento de adhesin es independiente de la sealizacin FGF-2/FGFR1.
De hecho, la participacin de la Anosmina-1 endgena en la adhesin de
los precursores de oligodendrocitos depende de interacciones homoflicas o de interacciones Anosmina-1/matriz extracelular, tal y como han
demostrado experimentos de bloqueo. Estos datos nos pueden ayudar a
comprender mejor el comportamiento de los precursores de oligodendrocitos durante su migracin.
The PDZ Protein Canoe/AF-6 Functions in

Asymmetric Division of Drosophila Neuroblasts
Stephan Speicher (1), Anja Fischer (2), Juergen Knoblich (2) and Ana
Carmena (1)
1Instituto de Neurociencias de Alicante. CSIC/UMH. Department
of Developmental Neurobiology. Alicante, Spain. 2IMBA-Institute of
Molecular Biotechnology. Vienna. Austria
Asymmetric cell division is a conserved mechanism to generate cell
diversity. Neuroblasts (NBs), the progenitors of the Drosophila central
nervous system, undergo asymmetric cell divisions. In a stem cell-like
fashion, polarized NBs divide to give rise to an apical NB, which keeps
stem cell-like properties, and a basal ganglion mother cell, committed
to differentiate(1). We have analyzed the function of the PDZ protein
Canoe (Cno)/AF-6 during NBs asymmetric cell divisions. Cno/AF-6 is
a cytoplasmic protein normally associated to cellular junctions (2). We
found that Cno colocalizes with apical proteins, such as the PDZ protein
Bazooka (Baz)/Par3 in metaphase NBs. cno loss of function (lof) mutants
showed an altered distribution of cell-fate determinants and randomized
orientation of mitotic spindle in metaphase NBs. Genetic interactions
between Cno and apical proteins supported a function of Cno during
NBs asymmetric cell division. The localization of apical proteins, including
Baz, Inscuteable (Insc) and the heterotrimeric Galphai subunit were not
altered in cno mutants. However, Cno localization was affected in insc lof
and gof mutants, as well as in Galphai gof mutant embryos. In addition, the
localization of the NuMa related protein Mushroom body defect (Mud),
key effector of Galphai for spindle orientation regulation(3), was altered
in cno mutants. These results place Cno downstream to the apical proteins Insc-Galphai and upstream to Mud during the control of spindle
orientation. The size difference between the daughter cells of NBs was
also affected in cno mutants. We are currently investigating physical interactions between Cno and apical proteins.
(1) Betschinger, J., and Knoblich, J.A. (2004). Curr. Biol. 14, R674-R685
(2) Carmena et al., (2006). PLoS ONE 1(1): e66. doi:10.1371/journal.pone.0000066
(3) Bowman et al., (2006). Dev Cell 10, 731-742; Izumi et al., (2006) Nature Cell Biol.
8(6) 586-593; Siller et al., (2006). Nature Cell Biol. 8(6) 594-600.

Modulacin colinrgica del trfico de receptores glutamatrgicos en neuronas piramidales de CA1 de hipocampo.
D. Fernndez de Sevilla, A. Nuez, M. Borde, R. Malinow y W. Buo.
Instituto Cajal, CSIC y Facultad de Medicina, U. A. M, Madrid, Espaa.
Cold Spring Harbor Laboratory, New York, USA.
La potenciacin a largo plazo (LTP) de la transmisin sinptica glutamatrgica en el hipocampo es un modelo universalmente aceptado en
el estudio de ciertos tipos de memoria y aprendizaje. El hipocampo recibe proyecciones colinrgicas que juegan un papel fundamental en estos
procesos cognitivos. Utilizando registros electrofisiolgicos, fluoromtricos de calcio intracelular (Cai2+) e inyecciones in vivo de virus para
expresar subunidades de receptores AMPA, hemos analizado el papel de
la acetilcolina en la regulacin del trfico de receptores glutamatrgicos
en neuronas piramidales de CA1. La aplicacin de acetilcolina indujo un
aumento transitorio de la concentracin de Cai2+ seguido de LTP. Esta
LTP fue mediada por un aumento de los receptores AMPA conteniendo
la subunidad GluR1 (34%) y GluR2 (29 %) en las espinas dendrticas y por
un aumento del componente NMDA que no se debi a la incorporacin
de receptores NMDA ya que se inhibi mediante la superfusin previa
de MK801 (80 M). La LTP de ambos componentes (AMPA y NMDA)
fue independiente de la activacin de receptores de NMDA. Adems el
103
COMUNICACIONES ORALES (Auditorio I, II, III A Y III B) - VIERNES 7
aumento de los niveles de IP3 en una nica neurona piramidal por fotoliberacin de IP3 enjaulado fue capaz de inducir LTP. Finalmente estimulando las neuronas colinrgicas del septum medial pudimos inducir in vivo
un aumento duradero de la transmisin sinptica similar mediado por la
activacin de receptores colinrgicos de tipo muscarnico, lo que sugiri
que esta nueva forma de plasticidad sinptica puede estar presente en
condiciones naturales.
Financiacin: W. Buo y A. Nuez, MCyT (BFU2005-07486). D. Fernndez de Sevilla, contrato MCyT (BFU2005-07486). R. Malinow, NIH.

Modulacin de la dinmica de actina en espinas dendrticas mediada por astrocitos
Maria Calvo Adamuz (1), Xavier Gasull (2) y Miguel Morales (2)
1Unitat de Microscpia Confocal. Serveis Cientificotcnics y 2Laboratorio de Neurofisiologa-Dpto. de Ciencias Fisiolgicas. Facultat
de Medicina-IDIBAPS. Universitat de Barcelona.
Las espinas dendrticas descritas por Cajal en el ao 1899, son protusiones de la membrana postsinptica donde se recibe la mayora de las
aferencias excitadoras del sistema nervioso central. No son estructuras
fijas, su morfologa, estabilidad y densidad est relacionada con procesos de plasticidad sinptica. Subyacente a estos cambios, se encuentra un
citoesqueleto de actina altamente dinmico (Halpain, J Neurosci, 1998;
Matus, Science, 2000; Star, Nat Neurosci, 2000).
Empleando tcnicas de FRAP en neuronas de hipocampo en cultivo transfectadas con actina-GFP, hemos caracterizado la dinmica del
citoesqueleto de actina de las espinas sinpticas. La recuperacin de la
fluorescencia despus del proceso de photobleaching, se ajust a dos
componentes; uno rpido con una tau de 2,64 1,24 s, determinada
por la libre difusin de monmeros actina-GFP y un componente ms
lento con una tau de 21.6 7.32 s gobernado por la velocidad de polimerizacin-despolimerizacin de los filamentos de actina presentes en
la espina. Resultados de nuestro laboratorio muestran que la presencia
de astrocitos en el medio de cultivo tuvo efectos dramticos en la actividad de la actina presente en la espina. En neuronas creciendo sobre
un substrato rico en astrocitos, el 87 17 % del citoesqueleto de actina
presente en la espina se encuentra en equilibrio dinmico. Por el contrario, en neuronas creciendo en ausencia de astrocitos, este porcentaje se
redujo a un 36 8 %. Estos resultados muestran un efecto inesperado
de la interaccin del astrocito modulando la dinmica y la estabilidad de
las espinas dendrticas.

Funcin de la quinasa de adhesin focal
en el cono de crecimiento. Organizando el
citoesqueleto
Mariola Rodrguez Chacn y Beatriz Rico Gozalo
Instituto de Neurociencias UMH CSIC. Campus de San Juan. Sant
Joan dAlacant. Nacional 332. 03550 Alicante, Spain
La especificidad de los circuitos neurales durante el desarrollo se
adquiere mediante la coordinacin de mltiples seales, que guiarn a los
axones primero hasta el rea adecuada y despus hasta su diana celular
para formar las futuras sinapsis. A travs de su cono de crecimiento, los
axones son capaces de detectar cambios el entorno e integrar, en un
rpido movimiento, seales procedentes del ncleo y del medio extracelular. Dicha respueta, requiere una finsima y local regulacin del citoesqueleto, que en vertebrados, se lleva a cabo de forma precisa mediante la
fosforilacin de protenas. Un ejemplo de sealizacin por fosforilacin
en el sistema nervioso es la quinasa de adhesin focal, FAK, que juega un
papel clave en el control de la arborizacin axonal. El objetivo de este
trabajo es el estudio de la funcin de FAK en la dinmica del cono de
crecimiento de neuronas. Nuestros resultados demuestran que la eliminacin especfica-celular del gen de la quinasa de adhesin focal (fak),
produce una dramtica reduccin del rea y nmero de filopodios en
el cono de crecimiento. De acuerdo con esto, los conos carentes de
FAK muestran una prdida de la motilidad del cono de crecimiento. La
distribucin de la actina filamentosa y de los microtbulos en conos mutantes para fak est alterada en comparacin a los conos controles. Estos
resultados nos llevan a concluir que FAK es necesario para la formacin
104
y mantenimiento del cono de crecimiento, participando en la remodelacin local del citoesqueleto.

La actividad del factor de transcripcin
CREB regula la supervivencia y las propiedades electrofisiolgicas de las neuronas de CA1 en el hipocampo.
Mikel Lpez de Armentia, Dragana Jancic, Rafael Lujn, Romn
Olivares, Eric R. Kandel y Angel Barco
Instituto de Neurociencias de Alicante, UMH-CSIC, Alicante; Facultad de Medicina, UCLM, Albacete.;Center for Neurobiology and
Behaviour, CU, New York.
La expresin gnica dependiente de CREB juega un papel crucial en
plasticidad sinptica y supervivencia neuronal. Usando dos cepas de ratones transgnicos en las que se expresa de forma restringida y regulada
una forma constitutivamente activa de CREB (VP16-CREB, ganancia de
funcin) o bien, un mutante negativo dominante de CREB (A-CREB, perdida de funcin) hemos estudiado los efectos de la sobre expresin e
inhibicin de CREB en la excitabilidad y la supervivencia neuronal in vivo.
En ambas cepas, el transgen se expresa selectivamente en neuronas de las
subregiones CA1 y giro dentado del hipocampo. La expresin del transgen en ratones VP16-CREB produce un aumento en la excitabilidad neuronal debido a la inhibicin de los componentes lento y medio de la AHP.
A las tres semanas de expresin del transgen se observa degeneracin
neuronal en CA1 y el giro dentado que estara producida por excitotoxicidad de acuerdo con los marcadores immuno-histolgicos utilizados. En
varios de los individuos se detectaron crisis epilpticas que produjeron
su muerte. En el caso de los ratones A-CREB la expresin del transgen
produce una degeneracin neuronal progresiva en CA1 y en el giro dentado. Sin embargo, los marcadores immuno-histolgicos evidencian una
muerte neuronal apopttica posiblemente producida por falta de factores
trficos. Estos animales no sufren ataques epilpticos y sobreviven normalmente. Nuestros resultados muestran que es necesaria una regulacin
fina de la transcripcin dependiente de CREB para la supervivencia del
organismo ya que una alteracin en dicha va de transcripcin provoca
degeneracin neuronal

TNF-ALFA POTENCIA LA APOPTOSIS DE MOTONEURONAS ESPINALES Y LA ACTIVACIN MICROGLIAL INDUCIDAS POR IFN-GAMMA
M. Mir (1), V.J. Asensio (1), L. Tolosa (1), V. Caraballo (1), M. Gou-Fabregas (2), R. Soler (2), J. Llad (1) y G. Olmos (1)
(1) Grupo de Neurobiologa Celular, IUNICS/Dept. Biologa, Universitat de les Illes Balears. (2) Dept. de Cincies Mediques Bsiques, Lleida.
La respuesta neuroinflamatoria podra estar implicada en la muerte de las motoneuronas que ocurre en la esclerosis lateral amiotrfica
(ELA). Desarrollamos cultivos organotpicos de mdula espinal de embrin de rata (16-17 das) en los que las motoneuronas migran fuera
del contorno de la mdula formando monocapas en presencia de clulas
gliales. La exposicin a la citoquina proinflamatoria IFN-gamma (10 ng/ml;
48 h) produjo muerte apopttica de motoneuronas espinales (anexina
V y caspasa 3 positivas); junto con un incremento en la expresin de la
iNOs en la microgla. En presencia de TNF-alfa (1 10 ng/ml) se potenci
significativamente la expresin de la iNOS inducida por IFN-gamma, lo
que result en un incremento en el porcentaje de motoneuronas apoptticas, que, adems, fueron anti-nitrotirosina positivas. En cultivos puros de
motoneuronas (en ausencia de clulas gliales), no se encontraron efectos
de TNF-alfa e IFN-gamma sobre su viabilidad.
En la lnea de microgla BV-2, IFN-gamma indujo la expresin de la
iNOs a travs de vas de sealizacin que implican a Jak/STAT, MEK/ERK
y NF-kappaB. TNF-alfa potencia la expresin de la iNOs inducida por
IFN-gamma en una va que requiere a los factores de transcripcin STAT
y NF-kappaB, pero independiente de MEK/ERK.

En conclusin, la citoquina proinflamatoria TNF-alfa tiene un efecto
potenciador de la apoptosis inducida por IFN-gamma a travs de un mecanismo que implica a la iNOS y la generacin de radicales libres citotxicos para las motoneuronas espinales.
Financiado por FIS PI041507, FIS PI060680, FIS PI051445, Fundaci
Marat TV3 y Govern Balear (PROGECIB-3A y beca predoctoral L.T.).

El sistema renina-angiotensina cerebral
media la progresin de la degeneracin
dopaminrgica.
Jose Luis Labandeira Garca, Jannette Rodrguez-Pallares, Pablo
Rey, Juan Andrs Parga, Ana Muoz, Mara Jos Guerra
La angiotensina II (AII) juega un papel importante en el inicio y la
progresin de enfermedades vasculares, iniciando y perpetuando la inflamacin y activando el complejo NADPH oxidasa. El cerebro posee
un sistema renina-angiotensina (SRA) local e independiente, y el estrs
oxidativo y la inflamacin son factores claves en la patognesis y progresin de la enfermedad de Parkinson (EP). En ese estudio se muestra la
expresin de receptores de angiotensina tipo 1 (AT1) y tipo 2 (AT2) y de
subunidades de la NADPH oxidasa en neuronas dopaminrgicas, astrocitos y microgla en cultivos primarios mesenceflicos de rata. La neurotoxina dopaminrgica 6-hidroxidopamina (6-OHDA) induce un aumento
significativo en los niveles de AII endgenos y en la actividad del enzima
convertidor de angiotensina (ACE) en clulas en cultivo. El tratamiento
con AII produce un aumento significativo en la muerte de las neuronas
dopaminrgicas inducida por 6-OHDA, adems de un aumento en la generacin de superxido en estas neuronas y en clulas microgliales, en la
expresin de ARNm de NADPH oxidasa y en el nmero de clulas microgliales reactivas. Estos efectos fueron bloqueados tras el tratamiento
con antagonistas AT1, inhibidores del complejo NADPH o la eliminacin
de las clulas gliales. Estos datos sugieren que la AII, va receptores AT1,
aumenta y perpeta el proceso de degeneracin dopaminrgica mediante
la amplificacin de la respuesta inflamatoria glial y los niveles intraneuronales de estrs oxidativo. La manipulacin de los componentes del SRA
cerebral podra reducir la progresin de la EP

Regeneracin axonal en grandes lesiones
de nervio perifrico a travs de una prtesis artificial acelular
Ignacio Alcalde Domnguez, Isabel de la Fuente Ayuso y Manuel
Jos Gayoso Rodrguez
Dpto. de Biologa Celular, Histologa y Farmacologa. Universidad de
Valladolid; Instituto de Neurociencias de Castilla y Len (INCYL).
Universidad de Valladolid.
La seccin de un nervio perifrico ocasiona la prdida de funcionalidad
del rgano denervado. Gracias a las caractersticas regenerativas del sistema nervioso perifrico se puede conseguir la recuperacin funcional mediante la aproximacin quirrgica de los cabos. Cuando la unin no es posible, la terapia habitual es el trasplante autlogo de un segmento de nervio
sensorial. Incluso en el mejor de los casos, la recuperacin funcional no es
satisfactoria. En este estudio evaluamos la utilidad de un modelo de prtesis
artificial acelular que permita la regeneracin de las fibras nerviosas.
Se practicaron lesiones de 3 cm de longitud en el nervio citico de
conejos New Zealand bajo anestesia profunda, y entre los cabos se sutur un tubo de cido poli(L-lctico-co-gliclico) con matriz de alginato.
La prtesis se suplement con Neurregulina como factor de crecimiento.
Tras el periodo de supervivencia los animales se sacrificaron y los nervios
citicos se procesaron para tcnicas inmunohistoqumicas y para el estudio de la ultraestructura.
La Neurregulina provoca una rpida proliferacin de las clulas de
Schwann desde los cabos distal y proximal que colonizan el tubo, se ordenanen tubos endoneurales y potencian el crecimiento axonal a lo largo
del implante. Se han estudiado las relaciones entre el axn y la clula de
Schwann.
Esta estrategia es una alternativa al trasplante autlogo de nervio y

hace innecesario el aporte externo de clulas de Schwann a la prtesis, lo
que evita respuestas no deseadas.
(Este estudio ha sido financiado por una ayuda de investigacin FIS
PI03/1533)
Falls DL, (2003) Exp Cell Res. 284(1): 14-30
Kingham PJ et al. (2006) J Anat. 209: 511-526
Mohanna PN et al. (2003) J Anat. 203: 553-565

Dficit cognitivo y presencia de los productos neurotxicos AICD y Ass*56 en ratones que sobreexpresan la APP humana sin
mutar
L. Schiapparelli, A. M. Simn, L. Escribano, M. Cuadrado, A. PrezMediavilla, D. Frechilla, J. Del Ro
rea de Neurociencias, CIMA, Universidad de Navarra, Pamplona
La enfermedad de Alzheimer (EA) se asocia con niveles anormalmente elevados del pptido A derivado de la APP. Del procesamiento
de esta protena tambin se originan fragmentos correspondientes al extremo carboxilo-teminal de la APP como C83 y C99, por accin de - y
-secretasa respectivamente, y AICD por accin de la -secretasa sobre
los mismos. Se ha sugerido la posible implicacin de C99 y AICD en la
patologa de la EA. En este estudio se analiz la correlacin entre el estado cognitivo y el procesamiento de la APP en ratones que sobreexpresan
la APP humana. Se dispuso de dos lneas de ratones que expresan APP
mutada, Tg2576 (mutacin sueca) y TgSw-Ind (mutacin sueca e indiana),
y de la lnea I5 que sobreexpresa la APP sin mutar. Se encontr que, al
igual que los animales Tg2576 y TgSw-Ind con metabolismo de la APP amiloidognico (C83/C99@0,5), los ratones I5 con un claro procesamiento
no amiloidognico (C83/C99@3,5) manifestaban un dficit cognitivo muy
temprano en los tests de reconocimiento de objetos y laberinto de Morris. En estos animales se detect la presencia del dodecmero A*56,
directamente relacionado con deterioros cognitivos, y elevados niveles
de C83 fosforilado en Thr668 lo que pudiera favorecer su proteolisis.
Posiblemente como consecuencia de ello se encontraron asimismo niveles elevados del fragmento AICD potencialmente neurotxico. Estos
resultados sugieren que el procesamiento no amiloidognico de la APP
puede originar dficits cognitivos que se correlacionan con la presencia
del dodecmero A*56 y de fragmentos AICD. (Financiado por UTE proyecto FIMA, SAF2005-05086, GN13029)
Lahiri DK et al. (2002) Ann N Y Acad Sci, 73:334-339.
Kim HS et al.(2003) FASEB J, 17:1951-1953.
Kim SY et al. (2007) Biochim Biophys Acta (en prensa)

A amiloide y acumulacin de tau fosforilada en neuritas de placas de ratones
dobles transgnicos APPsw/Tauvlw y de Alzheimer
M del Mar Prez Martnez; M. Prez, P.Gmez-Ramos, M.A.Morn, I.
Ferrer y J. vila.
Los ratones dobles transgnicos APPsw/Tauvlw sobreexpresan la
protena APP humana con dos mutaciones de la enfermedad de Alzheimer
familiar (ratn APPsw, linea 2576), y la protena Tau humana con tres mutaciones presentes en demencia frontotemporal asociada al cromosoma
17 (ratn Tauvlw). Se han utilizado los anticuerpos AT-8, 12E8 y fosfo-Ser
262, que reconocen distintos eptopos de Tau fosforilada.Trabajos previos
de nuestro grupo mostraron que los ratones APPsw/Tauvlw tienen un
aumento significativo del eptopo reconocido por 12E8 cuando se comparan con ratones APPsw y ratones Tauvlw, mientras que no se observa
aumento en otros eptopos de tau fosforilada (Perez y col., 2005). Con
microscopas ptica y electrnica se observ que las placas neurticas
de enfermos de Alzheimer se tean con todos los anticuerpos las neuritas positivas de dos tipos: distrficas y no distrficas. De igual forma,
el anticuerpo AT-8 tambin reconoce neuritas positivas de ambos tipos
105
en placas del ratn APPsw/Tauvlw, mientras que el anticuerpo 12E8 slo

reconoce neuritas de tipo no distrfico. Para analizar la posible relacin
del amiloide extracelular con la fosforilacin de Tau en el eptopo 12E8,
se aadi el pptido amiloide A1-42 a cultivos primarios de neuronas de
hipocampo de ratones silvestres y tambin se observ un aumento significativo de tau fosforilada en este eptopo. Se discuten las diferencias de
las placas humanas y de ratn a nivel ptico y ultraestructural, y el posible
papel del pptido amiloide A1-42 extracelular en la fosforilacin de tau
observada en los experimentos en cultivo.
Perez, et al. Neuroscience 130: 239-347 (2005)

Micropartculas biodegradables y biocompatibles para la administracin de GDNF en
el modelo de rata lesionada con 6-OHDA.
M. Aymerich Soer, E. Garbayo, E. Ansorena, J.L. Lanciego, M.J. BlancoPrieto
Laboratorio de Neuromorfologa y Trazadores, rea de Neurociencias, CIMA, Universidad de Navarra; Departamento de Farmacia y
Tecnologa Farmacetica, Universidad de Navarra
Los tratamientos actuales de la enfermedad de Parkinson (EP) van
encaminados a restablecer los niveles de dopamina, pero no son capaces
de frenar el proceso neurodegenerativo que est en marcha. El factor
neurotrfico derivado de las clulas de la gla (GDNF) ejerce un efecto
neuroprotector sobre las neuronas dopaminrgicas de la sustancia negra
tanto in vitro como in vivo y su eficacia se ha testado en varios ensayos
clnicos. Por ello, hoy en da el GDNF es una de las molculas ms prometedoras para el tratamiento de la EP. Sin embargo, son necesarias nuevas
estrategias para la administracin de esta protena directamente en el
estriado durante un periodo prolongado de tiempo. El empleo de micropartculas biodegradables de GDNF permitira una liberacin controlada
de la protena as como su preservacin de la degradacin. El objetivo de
este trabajo consisti en comprobar la eficacia del tratamiento de ratas
lesionadas con 6-OHDA con micropartculas cargadas con GDNF. Para
ello se purific GDNF recombinante de rata, se prepararon partculas
de PLGA cargadas con esta protena y se inyectaron por estereotaxia
en ratas lesionadas con 6-OHDA en el estriado. Tras dos meses de tratamiento se observ una clara mejora en los animales a nivel conductual
con una disminucin de las rotaciones inducidas por anfetamina y un aumento de fibras positivas para la tirosina hidroxilasa en el estriado. Estos
resultados demuestran que el uso de micropartculas biodegradables y
biocompatibles de GDNF podra ser una alternativa segura y eficaz para
el tratamiento de la EP.

PRDIDA NEURONAL TEMPRANA EN LA CORTEZA ENTORRINAL DE UN MODELO TRANSGNICO
PS1XAPP DE LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER
I. Moreno Gonzlez (1), D. Baglietto-Vargas (1), R. Sanchez-Varo
(1), L. Trujillo-Estrada (1), C. Caballero (2), S. Jimnez (2), M. Torres (2),
Z.U. Khan (3), M. Romero-Acebal (4), D. Ruano (2), J. Vitorica (2) y A.
Gutierrez (1).
1Dpto. Biologa Celular, Facultad de Ciencias, Universidad de Mlaga; 2Dpto. Bioqumica, Facultad de Farmacia, Universidad de Sevilla;
3CIMES/Dpto. Medicina, Facultad de Medicina, Universidad de Mlaga; 4Servicio de Neurologa, Hospital Clnico Universitario Virgen
de la Victoria, Mlaga.
La corteza entorrinal se encuentra severamente daada en la patologa degenerativa ms frecuente del sistema nervioso, la enfermedad de
Alzheimer (AD). Los modelos transgnicos muestran algunas de las lesiones histopatolgicas de la AD, como es la deposicin de beta-amiloide
(Abeta), sin embargo, la mayora de ellos no presentan muerte neuronal
hasta estadios muy avanzados. La ausencia de tratamientos efectivos contra esta enfermedad se debe, en parte, a la ausencia de buenos modelos
animales. Nuestro grupo ha descrito recientemente la existencia de una
muerte selectiva temprana de interneuronas SOM/NPY en el hipocampo
106
de un modelo transgnico PS1xAPP. En el presente trabajo describimos

la existencia de una prdida significativa de interneuronas y de neuronas piramidales infragranulares en la corteza entorrinal de este modelo
transgnico a edades tempranas (6 meses), mediante tcnicas inmunohistoqumicas y estereolgicas. Los cambios neuropatolgicos a nivel de
mRNA de diversos marcadores han sido determinados mediante RT-PCR
en muestras de microdiseccin lser. Las causas que determinan este
proceso neurodegenerativo no son conocidas an, sin embargo, en esta
regin cerebral, y asociada a la deposicin de Abeta, existe una respuesta
neuroinflamatoria desde estadios tempranos (4 meses) con activacin
astroglial y microglial. Esta prdida neuronal temprana podra explicar, al
menos en parte, las prdidas de memoria observadas en fases tempranas
de la AD. Finalmente, este modelo transgnico PS1xAPP podra ser una
herramienta muy valiosa para evaluar la eficacia de tratamientos farmacolgicos en estadios tempranos de esta enfermedad.
Financiado por FIS PI060556 (A.G.), FIS PI060567 (J.V.) y Aventis
(A.G. y J.V.)

EFECTO DEL IMPLANTE INTRAESTRIATAL DE
AGREGADOS CELULARES DE CUERPO CAROTDEO
SOBRE LAS NEURONAS DOPAMINRGICAS DEL ESTRIADO
San Sebastin Ramrez W. (1), Guilln J. (1,2), Manrique M. (3),
Belzunegui S. (1), Ciordia E. (2), Izal-Azcrate A. (1), Garrido-Gil P. (1),
Vzquez-Claverie M. (1), Luquin M.R. (1,2)
1Laboratorio de Terapia Regenerativa, 2Servicio de Experimentacin y Produccin Animal, Centro de Investigacin Mdica Aplicada
(CIMA) y 3Departamento de Neurologa y Neurociruga, Clnica
Universitaria de Navarra, Univerisdad de Navarra
Antecedentes: El factor neurotrfico derivado de la gla (GDNF)
incrementa el nmero de clulas tirosina hidroxilasa-inmunorreactivas
(TH-ir) en el estriado de primates no humanos.
Objetivo: Como el cuerpo carotdeo contiene GDNF, estudiamos el
efecto del implante intraestriatal de agregados celulares de cuerpo carotdeo (ACCC) sobre esta poblacin celular.
Metodologa: 15 macacos parkinsonianos; 7 recibieron un implante
unilateral (n=4) o bilateral (n=3) de ACCC, 2 recibieron vehculo y los
6 restantes se sacrificaron 6 (n=3) y 35 meses (n=3) despus del MPTP.
Tres animales se utilizaron como control. Las clulas TH-ir estriatales
se cuantificaron y se caracterizaron con marcadores estriatales (GAD67,
CaBP, CR, PV, nNOS), dopaminrgicos (TH, DDC, VMAT2) y GDNF. El
parkinsonismo se evalu mediante una escala de incapacidad.
Resultados: Slo los animales con implante de ACCC mostraron una
recuperacin motora significativa y mantenida (12 meses). En el estriado anterior, los animales implantados presentaban la mayor densidad de
clulas TH-ir, el grupo intacto mostr la densidad celular ms baja, y los
animales parkinsonianos y con vehculo presentaban un valor similar e
intermedio. En el estriado posterior, slo el implante de ACCC indujo un
aumento significativo de clulas TH-ir comparado con el grupo control.
En los animales implantados, el perfil neuroqumico fue diferente al encontrado en el resto de los grupos y algunas clulas TH-ir co-expresaban
GDNF.
Conclusin: El implante de ACCC induce una recuperacin motora
mantenida acompaada de un aumento del nmero y un perfil neuroqumico diferente de las clulas TH-ir estriatales. Este aumento podra
contribuir a la recuperacin motora de los animales.

La regeneracin de neuronas del ganglio
espiral es una nueva alternativa para las
sorderas neurosensoriales?.
Maria Visitacion Bartolome Pascual
Dpto. Oftalmologia Y Otorrinolaringologia. Facultad De Medicina.
Universidad Complutense De Madrid
La presbiacusia neurosensorial es la degeneracin del receptor auditivo por la perdida de las neuronas del ganglio espiral durante el proceso
de envejecimiento. Esta patologa observada en todos los mamferos in-

cluidos el hombre, se manifiesta por una prdida progresiva de la audicin
asociada a una incapacidad de compresin e interpretacin de determinados sonidos. El envejeciminento y las posible modificaciones genticas
y moleculares que sufren las clulas antes de morir esta siendo motivo
de diferentes estudios multidisciplinares. Respecto a la muerte neuronal,
la implicacin de diferentes factores trficos como neurotrofina-3 (NT-3)
y factor trfico derivado de cerebro (BDNF) han empezado a tener especial relevancia en procesos de regeneracin neuronal en especmenes
adultos. Estudios in vitro de las neuronas de ganglio espiral de animales
postnatales de 3 a 5 dias de edad, han puesto de manifiesto que la presencia en el medio de cultivo de factores trficos como neurotrofina-3
(NT-3) y factor trfico derivado de cerebro (BDNF) favorecen las prolongaciones axones y dendritas neuronales. En el presente estudio se ha
analizado la supervivencia de las neuronas del ganglio espiral durante el
envejecimiento del receptor auditivo en ratas y ratones de diferentes
edades (postnatales, jvenes, adultos y envejecidos). La regeneracin de
neuritas podra depender de los niveles adecuados de factores trficos
(BDNF; NT-3) como sucede en otras reas del sistema nervioso central. La presencia o no de receptores trak-C y trk-B podria determinar
la actividad de dichos factores in vitro sobre las neuronas aisladas del
ganglio espiral y prevenir las causas de la muerte neuronal que conlleva
irremediablemente a la sordera y otras patologas auditivas irreversibles
en Otolaringologa. Agradecimientos: Ministerio de Educacin Y Ciencia
SAF2004-0360-E
16:00 a 16:15 en la sala Auditorio 3A (sesin: 3A)

Migraciones telenceflicas tempranas
convergen en la Corteza Olfativa
Fernando Garca Moreno, Laura Lpez-Mascaraque y Juan A. de
Carlos
Instituto Cajal (CSIC), Avenida del Dr. Arce 37, Madrid, Espaa.
modelo experimental de enfermedades que cursan con disfuncin dopaminrgica. Los estudios previos, basados en inmunohistoqumica frente
a dopamina, indicaban que la inervacin dopaminrgica en el tlamo de
ratas es escasa. En nuestro estudio utilizamos inmunohistoqumica frente
al transportador de dopamina (DAT), que es muy sensible y haba proporcionado la mayora de los datos en primates. Cortes parasagitales de
macacos y ratas adultos fueron procesados en idnticas condiciones con
el fin de obtener datos comparables. El tlamo del mono mostr una
extensa inervacin por axones que expresan DAT que incluy todos sus
ncleos y fue ms densa en el dorsomediano (MD) y ncleos motores
ventrales. Tambin presentaron una rica inervacin los ncleos lateral
de la habnula (Hl), reticular (R) y la zona incerta (ZI). El tlamo de la
rata alberg escasos axones inmunopositivos para DAT, localizados preferentemente en los ncleos paraventricular, MD, ventral medial y ventral
lateral. Hl mostr abundante inervacin seguido del R y la ZI. El estudio
ultraestructural del MD del mono mostr que las interneuronas talmicas
son la principal diana de los axones que expresan DAT. Esto sugiere que la
expansin de la inervacin dopaminrgica en el tlamo de los primates es
paralelo al aumento de la poblacin de interneuronas. Financiado con la
ayuda SAF 2005-05380 del Ministerio de Educacin y Ciencia.
Garca-Cabezas MA et al. (2007) Neuroimage 34: 965-984.
Snchez-Gonzlez MA et al. (2005) J Neurosci 25: 60766083

Control del balance redox y de la neurodegeneracin por la lipocalina
Lazarillo-Apolipoprotena D, un estudio
gentico en Drosophila y en ratn
MD Ganfornina y D Sanchez.
Inst. Biologa y Gentica Molecular, Univ. Valladolid-CSIC, Valladolid,
Espaa
En estadios iniciales del desarrollo telenceflico hemos encontrado

una generacin masiva de poblaciones celulares que se desplazan tangencialmente, utilizando rutas diferentes, para alcanzar sus posiciones
definitivas en la corteza olfativa. Se ha abordado su estudio inyectando
trazadores en diferentes reas proliferativas del telencfalo de embriones
de ratn (E10-E12), posteriormente cultivados in toto durante 24 horas.
As, se han encontrado diversas reas que dan lugar a neuronas tempranas relacionadas con el sistema olfativo: Clulas originadas en la eminencia ganglionar lateral alcanzan la corteza olfativa mediante una migracin
en abanico. Clulas generadas en la porcin ms rostral de la eminencia
ganglionar lateral alcanzan tangencialmente la regin ms rostral del telencfalo, a nivel del rea donde se formar el bulbo olfativo. Poblaciones
neuronales generadas a lo largo de todo el telencfalo dorsal migran hacia la corteza olfativa siguiendo rutas estereotipadas. En el muro medial
del telencfalo rostral se generan poblaciones celulares que migran en
sentidos opuestos, por las reas ventral y dorsal del telencfalo; estas
poblaciones comparten una trayectoria tangencial en sentido caudal a su
llegada a la corteza olfativa. Finalmente, las clulas originadas en la regin
proliferativa del polo rostral telenceflico, a la altura del surco septoeminencial, alcanzan el tubrculo olfativo y se desplazan caudalmente por
la corteza piriforme. Nuestros datos demuestran el origen telenceflico
mltiple de las primeras neuronas olfativas. Cada una de estas poblaciones celulares tempranas coloniza la corteza olfativa con una topografa
precisa, utilizando diferentes rutas de migracin tangencial.
Financiado con los proyectos BFU 2006-01898-MEC y Consorcio
OLFACTOSENSE, Comunidad Autnoma de Madrid, Ref. P-SEM-02552006
La protena Lazarillo (Laz) en insectos y su homlogo en vertebrados,

Apolipoprotena D (ApoD), se expresan en neuronas y gla durante el
desarrollo y el envejecimiento del sistema nervioso (SN), un dominio de
expresin ancestral en la familia de las lipocalinas. En humanos, la expresin de ApoD aumenta en condiciones patolgicas del SN.
Para entender la funcin de Laz/ApoD en el envejecimiento y la degeneracin del SN hemos analizado mutantes de prdida y ganancia de
funcin en dos organismos genticamente manipulables: la mosca Drosophila[1] y el ratn[2]. En ambos organismos la eliminacin de Laz/ApoD
provoca una mayor sensibilidad al estrs oxidativo producido por Paraquat (PQ), acortndose la vida del organismo, aumentando la muerte celular apopttica en el sistema nervioso y provocando defectos en tareas
motoras. De forma simtrica, la sobreexpresin de Laz/ApoD (del gen
nativo o de ApoD humana) hace al organismo ms resistente a la muerte
por PQ y mejora los parmetros de comportamiento motor. Los niveles
de peroxidacin lipdica aumentan en los mutantes nulos y se mantienen
normales en los sobre-expresores incluso tras el tratamiento con PQ.
La vida media se acorta en ausencia de Laz/ApoD y se alarga cuando se
sobre-expresa. Al igual que ocurre en situaciones patolgicas en humanos,
el estrs oxidativo induce la sobre-expresin de Laz/ApoD. Estos resultados demuestran que Laz/ApoD se comporta como un protector frente al
estrs oxidativo mediante el control de la peroxidacin lipdica en el cerebro, y abren posibilidades teraputicas para muchas patologas del SN.
Gran expansin del sistema dopaminrgico

talmico en primates frente a roedores
Patrones de migracin en la encrucijada

diencfalo telenceflica
Miguel ngel Garca-Cabezas, Patricia Martnez-Snchez, Miguel ngel

Snchez-Gonzlez, Miguel Garzn y Carmen Cavada
Departamento de Anatoma, Histologa y Neurociencia, Facultad de
Medicina, Universidad Autnoma de Madrid, 28029 Madrid
Trujillo C.M (1)Alonso Fuentes MA (1), Delgado A (1), Puelles L (2)

1 Dpto. de Microbiologa y Biologa Celular, Facultad de Biologa,
Universidad de la La Laguna. 2 Dpto. de Anatoma Humana y Psicobiologa. Facultad de Medicina, Universidad de Murcia.
La descripcin de un nuevo sistema dopaminrgico en primates, cuya

diana es el tlamo, ha planteado la necesidad de re-examinar la inervacin
dopaminrgica del tlamo de la rata, animal ampliamente utilizado como
Se demuestra experimentalmente, mediante trasplantes pollo/codorniz, la existencia de migraciones tangenciales que atraviesan el lmite
rostral del diencfalo, pasando desde la eminencia talmica (Emt) al te-
[1] D. Snchez et al. (2006) Current Biology, 16:680-687.

[2] MD Ganfornina et al. (2007) Enviado a publicar.
107
lencfalo y se comprueba que la mayoria de estas clulas son neuronas. Se identifican dos rutas de migracin principales: La primera, medial
al fascculo prosenceflico lateral (fpl), da lugar a una columna celular
Tbr1 positiva que se extiende desde la Emt al tracto septo mesenceflico
(tsm) y est formada por el ncleo medial del lecho de la stria terminalis
(BSTm), varios ncleos del septum medial caudal, el ncleo de la banda
diagonal de Broca (BDB) y el rea entopeduncular anterior (AEP). La segunda ruta, lateral al fpl, forma el ncleo caudolateral (nCL) de la amigdala
subpalial. Para demostrar la exclusividad de este patrn, mapeamos las
zonas conlindantes a la Emt y analizamos los patrones de migracin correspondientes. En cerebros con transplantes caudales a la Emt, las clulas
de codorniz no atraviesan el lmite diencfalo/telenceflico. Sin embargo,
en cerebros con transplante en pallium caudal se observaron clulas que
pasaron desde el telencfalo al subpalium y desde ste a la Emt siguiendo
una ruta inversa a la ya mencionada. Estos datos demuestran que el intercambio de clulas entre zonas cerebrales distintas durante el desarrollo
es un fenmeno bastante ms extendido de lo que se crea, resaltan la
complejidad de las rutas de migracin y la necesidad de nuevas investigaciones que establezcan un nexus entre el origen y la especificacin de los
tipos celulares de cada zona.
medial y basolateral, y el ncleo de la stria terminalis. Slo las inyecciones

laterales en el VTA dieron marca retrgrada en ncleos amigdalinos caudales corticales (ACo, CxA), paliales profundos (Bp,ABp). Por el contrario,
el LOT slo estaba marcado tras inyecciones en la VTA medial.
El marcaje antergrado en estas inyecciones indica una conexin recproca, organizada topogrficamente, entre el VTA y el estriado-plido
ventral. El VTA medial proyecta y recibe proyecciones del AcbShM, islotes
de Calleja y tubrculo olfativo mediales. El VTA lateral proyecta al caudado-putamen ventromedial y est interconectado con el AcbC y con manchas del AcbShV, islotes de Calleja y el tubrculo olfativo laterales y con
la amgdala central. Las inyecciones restringidas al SNc dan somas y fibras
en manchas del AcbShV y en amplias zonas del caudado-putamen. Estas
proyecciones se han comprobado mediante inyecciones en el estriado.
Financiado por el MEC/FEDER (BFU2004-04272/BFI), la JC de Castilla-La Mancha (PAC-05-007-2) y el programa FPU (J. M-H, AP2002-3137)
Jose Pablo Rubio Garrido, Flor Perez de Manzo, Francisco Clasc

Departamento de Anatoma, Histologa y Neurociencia. Facultad de
Medicina. Universidad Autnoma de Madrid.
LOS GIROS DE LA CORTEZA CEREBRAL SE FORMAN EN AREAS CON ELEVADA ACTIVIDAD MITOTICA ABVENTRICULAR
Victor Borrell Franco, Miguel ngel Garcia-Cabezas
Facultad de Medicina, Universidad Autnoma de Madrid, 28029
Madrid; Instituto de Neurociencias de Alicante, CSIC Universidad
Miguel Hernndez, Sant Joan dAlacant, 03550 Alicante
El tamao del cerebro ha sufrido una extraordinaria expansin durante la evolucin de los mamferos, lo que parece servir de base para el
aumento de su capacidad intelectual. La mayor parte de esta expansin
se debi a un incremento masivo de la superficie de la corteza, que sin
embargno fue acompaado por un crecimiento proporcional en grosor
sino que evolucion con la aparicin de pliegues en el manto cortical.
Sorprendentemente, los mecanismos de desarrollo que dirigen esta extraordinaria expansin cortical y la formacin de pliegues en mamferos
superiores son completamente desconocidos. Aqu mostramos que la
formacin de grandes giros en la corteza cerebral est marcada por un
incremento dramtico en la proliferacin de los progenitores corticales
de forma rea-especfica. Observamos que las divisiones mitticas en una
regin prospectiva de giro son mucho ms abundantes que en regiones
colindantes prospectivas de surco. Los incrementos en la actividad mittica son ms dramticos en progenitores abventriculares, una gran proporcin de los cuales se dividen en la zona intermedia. Mediante inyecciones locales de retrovirus in vivo hemos seguido el destino de las clulas
nacidas a partir de divisiones abventriculares en la corteza cerebral del
hurn, y hemos encontrado que estas contribuyen especficamente a la
formacin de giros, pero no de los surcos flanqueantes. Por lo tanto la
formacin de giros de la corteza cerebral podra haberse originado durante la evolucin mediante incrementos locales en la proliferacin de
los progenitores combinado con el desplazamiento masivo de estos hacia
posiciones abventriculares.

La capa I de la corteza cerebral es una
puerta de entrada masiva de aferentes talamocorticales
Recientemente se ha denominado matriz talmica (Jones, 2007) a

la poblacin de neuronas talamocorticales cuyos axones inervan selectivamente los penachos dendrticos distales de las neuronas piramidales,
situados en la capa I de la corteza cerebral. Estas neuronas son funcional y
anatmicamente distintas de las que inervan la capa IV. Diversos estudios
sugieren que las neuronas de tipo matriz (Tipo-M) estn presentes en
muchos ncleos talmicos; sin embargo, nunca se ha determinado sistemticamente su localizacin y nmero. Adems, aunque se sabe que los
axones tipo-M alcanzan amplias regiones de la capa I cortical, no se ha
examinado la morfologa de sus arborizaciones axnicas en esta capa. En
el presente estudio hemos examinado sistemticamente en la rata adulta
la organizacin de las vas talamocorticales tipo-M mediante el uso de
trazadores axonales retrgrados y antergrados. Nuestros resultados revelan que las neuronas de tipo-M son una poblacin masiva, presente, con
distinta abundancia, en la mayora de los ncleos talmicos. Por ejemplo
el ncleo Ventromedial contiene solo neuronas de este tipo; en cambio,
otros como el Ventral Posterior carecen de ellas. Algunos ncleos inervan de forma muy divergente una gran extensin del hemisferio. Sobre
pequeas extensiones (~2mm2) de la capa I cortical convergen ~
10.000 axones de tipo-M procedentes de ncleos muy diversos funcionalmente. Nuestros datos proporcionan el primer mapa del nmero y
localizacin global de la poblacin de neuronas talamocorticales de tipo
matriz. Adems, revelan que la inervacin que desde el tlamo alcanza los
penachos dendrticos distales es masiva y extremadamente convergentedivergente.
Jones, EG (2007). The Thalamus, 2 Ed. Cambridge University Press
Development of the layer I-directed (matrix) thalamocortical pathways
Topografa de las interconexiones entre

el rea ventral tegmental y el estriado
ventral en el ratn
Clasca Cabr F, Galazo, MJ, Martnez Cerdeo V, Porrero C

Dept. Anatoma, Histologa y Neurociencia Fac. Medicina, Universidad Autnoma de Madrid
Jos Martnez Hernndez, Enrique Lanuza,

Fernando Martnez-Garca
Universitat de Valncia
Inputs to apical dendritic tufts of pyramidal cells in layer I are crucial

in top-down interactions in the cerebral cortex. A large population of
thalamocortical cells, the matrix (M-type) cells, provides a robust direct input to layer I, that is anatomically and functionally different from
the thalamocortical input to layer VI (Jones EG, Trends Neurosci, 2001,
24:595-601). In rats aged E (embryonic day) 16 to P (postnatal day) 30, we
examined here the time course of axon growth, branching and layer-specific invasion and arborization of M-type axons. Using anterograde techniques, we labeled axons arising from two thalamic nuclei made up mainly
of M-type cells, the Posterior and the Ventromedial. The primary growth
cones of M-type axons rapidly reach the subplate of a given dorsally situated target area. Next, interstitial branches often sprout from these axons
Dcadas de estudio del rea ventral tegmental (VTA) y su proyeccin

dopaminrgica al ncleo accumbens (Acb) no han aclarado su papel en
el refuerzo. En esta comunicacin presentamos un estudio anatmico en
ratones que analiza la topografa de la va tegmento-estriatal y de las
aferencias al VTA. Como en ratas, la mayor parte de las aferencias al VTA
(tronco enceflico, diencfalo y cortex frontal) no parecen mostrar topografa. Algunas estructuras amigdalinas parecen proyectar tambin a todo
el VTA, como la amgdala anterior, las porciones anteriores de la amgdala
108

under more lateral cortical regions, and invade the overlying cortical plate
to become secondary arbors. M-type growth cones pause first in the infragranular layers (E18-E22), and then in layer I (P0-P2), before extending
subpially from P3-P4 onwards. Moreover, retrograde labeling of M-type
cell somata in the thalamus after tracer deposits confined to layer I reveal
that large numbers of axons from multiple nuclei already converge in a
given spot of layer I by P3-P5. Because of such early ingrowth in large
numbers, interactions of M-type axons are may significantly influence the
early development of cortical circuits.
16:00 a 16:15 en la sala Auditorio 3B (sesin: 4A)

Migracin de neuroblastos procedentes
de la RMS sobre monocapas de astrocitos
de distinto origen
Jorge Garca-Marqus, Juan A. de Carlos, Charles A. Greer y Laura
Lpez-Mascaraque
Instituto Cajal (CSIC), Madrid y Yale University, School of Medicine,
New Haven
A partir de precursores multipotenciales localizados en la zona subventricular (SVZ) de los ventrculos laterales se generan neuroblastos que
experimentan una migracin tangencial a travs de la ruta de migracin
rostral (RMS) hasta alcanzar su destino final, el bulbo olfativo. Una vez en
el bulbo olfativo, estos neuroblastos cambian a una migracin radial hasta
llegar a la capa granular o glomerular donde se integran como neuronas.
Debido a su carcter tardo en el desarrollo, la neurogenesis de interneuronas de bulbo olfativo convive estrechamente en todas sus etapas con
la presencia de astrocitos y/o glia radial. De hecho, la RMS es una ruta
rica en protenas de matriz extracelular y que adems esta rodeada por
procesos de glia radial primero y astrocitos despus, cuya relacin con
el proceso migratorio no queda muy clara. Haciendo uso de un modelo
in vitro, este trabajo analiza el comportamiento migratorio de neuroblastos procedentes de explantes de RMS sobre monocapas de astrocitos
de distinto origen: RMS, bulbo olfativo y corteza. Demostramos que la
migracin de neuroblastos es significativamente mayor sobre monocapas
de astrocitos procedentes de RMS y BO que en neuroblastos cultivados
sobre astrocitos de corteza. La caracterizacin del perfil de expresin de
protenas relacionadas con matriz extracelular y adhesin celular, mediante un array focalizado de RT-PCR en tiempo real, sostiene esas diferencias.
La inmunohistoqumica sobre tejido fijado parece tambin confirmar y
sostener la hiptesis de que diferencias en el fenotipo astroglial podra
estar determinando la correcta migracin de estas clulas (Financiado
con los proyectos BFU 2006-01898-MEC y Consorcio OLFACTOSENSE,
Comunidad Autnoma de Madrid, Ref. P-SEM-0255-2006).

Remodelacin del rbol dendrtico de las
motoneuronas del ncleo motor ocular
comn durante el desarrollo postnatal
Livia Carrascal Moreno, Jos Luis Nieto Gonzlez; Blas Torres; Pedro Nez Abades
Dpto Fisiologa y Zoologa. Universidad de Sevilla
En preparaciones agudas se ha demostrado al comparar etapas neonatales y adultas que las motoneuronas (Mns) modifican su rbol dendrtico. El objetivo de este trabajo fue determinar en las Mns del ncleo motor
ocular comn (nMOC) de la rata el proceso de remodelacin del rbol
dendrtico con el desarrollo. Con este fin, se inyectaron intracelularmente
44 Mns con neurobiotina en un periodo entre P1 y P30. Estas Mns se
reconstruyeron y se analizaron con un programa informtico (neurolucida). El rbol dendrtico de las Mns increment su complejidad alcanzando
sus valores mximos alrededor de P10. Posteriormente, la arborizacin se
simplific hasta valores prximos a los obtenidos en las Mns neonatales. En
paralelo, las dendritas crecieron en longitud hasta la etapa madura (>P20),
mostrando en el adulto superficies somato-dendrticas significativamente
mayores que en el recin nacido, pero semejante a las medidas en P10. El
incremento de la superficie de las Mns muestra un curso temporal semejante al obtenido en la disminucin en la resistencia de entrada. Por ltimo,
restringido a los primeros das postnatales se observ acoplamiento entre
Mns. En conclusin, los datos morfomtricos sugieren que la maduracin
del rbol dendrtico de las Mns del nMOC no es un proceso lineal y se
puede dividir en dos fases. Una primera, hasta P10, en la que existe crecimiento en complejidad y superficie, y una segunda >P10 en la que el rbol
dendrtico se remodela por simplificacin y elongacin.
Estudio subvencionado con una ayuda del MEC (BFU 2006-08895).

Dinmica funcional en la migracin de
las interneuronas corticales: Papel de la
sealizacin mediada por RhoA/ROCK en el
proceso de gua y la nucleoquinesis
Francisco Martn (1,3), Manuel Valiente (1,3), Guillermina Lpez Bendito (1), Gbor Szab (2), Fernando Moya (1), Miguel Valdeolmillos
(1,4) y Oscar Marn (1,4)
1Instituto de Neurociencias de Alicante, CSIC & Universidad Miguel
Hernndez, 03550 Sant Joan dAlacant, Spain. 2Institute of Experimental Medicine, 1083 Budapest, Hungary. 3,4Estos autores han
contribuido igualmente a este trabajo.
La migracin neuronal es un proceso esencial en el desarrollo del
sistema nervioso. Durante la corticognesis, las clulas piramidales alcanzan la placa cortical migrando radialmente, mientras que las interneuronas GABArgicas alcanzan su destino a travs de una extensa migracin
tangencial. Actualmente se conocen algunas molculas que guan la migracin tangencial de las interneuronas; sin embargo, todava tenemos un
conocimiento muy limitado de los mecanismos que traducen las seales
extracelulares en la reorganizacin del citoesqueleto necesaria para la gua
direccional. Con este objetivo, hemos realizado un anlisis detallado del
comportamiento dinmico de la migracin de las interneuronas corticales
en rodajas de telencfalo mediante videomicroscopa de alta resolucin.
Nuestras observaciones demuestran que la bifurcacin del proceso
gua juega un papel esencial en el ciclo migratorio de las interneuronas,
ya que la direccin de la migracin parece depender de la seleccin preferente de una rama y no de la direccionalidad del cono de crecimiento.
Adems, el anlisis dinmico de la distribucin intracelular de RhoA en
interneuronas migratorias sugiere mltiples papeles para esta GTPasa durante el ciclo migratorio. Estudios farmacolgicos en rodajas y en
explantes mediante aplicacin crnica de inhibidores, o de forma aguda
mediante su aplicacin selectiva a travs de una micropipeta, indican que
la sealizacin por RhoA/ROCK es importante no slo para la regulacin
de la nucleoquinesis, sino tambin para la formacin y/o mantenimiento
de la bifurcacin del proceso gua, efecto que probablemente se lleva a
cabo a travs de la regulacin de actomiosina.
Financiacin: BFU2005-04773/02393, EURYI e INTERDEVO (EU
STREP 005139).

Delineation of multiple subpallial progenitor domains by the combinatorial expression of transcriptional codes
Ramn Pla, Nuria Flames, Diego M. Gelman, John L. Rubenstein, Luis
Puelles & Oscar Marn
Instituto de Neurociencias de Alicante, C.S.I.C-U.M.H.; Nina Ireland Laboratory of Development Neurobiology, University of California; Departamento de Anatoma Humana y Psicobiologa, Universidad de Murcia
El telencfalo de los mamferos est considerado la estructura biolgica ms compleja. Comprende un gran nmero de distintos tipos neuronales que, coordinadamente, controlan muchos de los aspectos de la cognicin y el comportamiento. El subpallium, por ejemplo, de lugar tanto a
los mltiples tipos de neuronas de los ganglios basales y zonas de la amgdala y septo, como tambin a la mayor parte de las interneuronas corticales en toda su asombrosa diversidad. A pesar del detallado conocimiento
que tenemos en el aspecto molecular, morfolgico y de las propiedades
fisiolgicas de muchas de estas poblaciones neuronales, todava desconocemos los mecanismos que actan en el proceso de su especificacin.
En este estudio hemos analizado los patrones de expresin de un gran
nmero de factores de transcripcin en la zona ventricular del subpallium
durante el desarrollo, generando as un detallado mapa molecular de los
diferentes dominios de progenitores presentes en esta regin. Nuestro
estudio demuestra que el subpallium de los mamferos contiene al menos
109
dieciocho dominios definidos por la expresin de diferentes factores de

transcripcin en una combinacin nica. Adems, mediante experimentos
de microtransplante in-vivo hemos corroborado que regiones del subpallium definidas anatmicamente, como es la eminencia ganglional medial,
pueden, en efecto, ser subdivididas funcionalmente en distintos dominios
de progenitores. Basandonos en estos resultados, proponemos una nueva
forma de designar las diferentes regiones del subpallium.
Flames, N and Marin, O (2005) Neuron 46: 377-381
Pla R et al. (2006) J Neuroci 26:6925-6934
expresin transitoria en formacin reticular (FR) a PD7, mientras que en

estadios posteriores se observa en ncleo facial (NF). La caracterizacin
de esta poblacin Dyrk1A-positiva en la FR, muestra que se trata de
neuronas GABArgicas. A PD14 y en el adulto, Dyrk1A se detecta en motoneuronas del NF. En la ME la expresin de Dyrk1A en motoneuronas
empieza de forma ms temprana en el desarrollo (PD10) y persiste hasta
la etapa adulta. Proponemos que Dyrk1A puede tener un papel en el
desarrollo del sistema motor con consecuencias patolgicas derivadas de
su sobrexpresin. Este trabajo ha sido financiado por la Jerme Lejeune
Foundation, CIBERER, y EU- LSHG-CT-2006-037627.
Ikaros-1 es esencial para el correcto desarrollo de las neuronas encefalinrgicas

estriatales de proyeccin.
Hormonas esteroideas, envejecimiento y microgla: un estudio funcional utilizando

citometra de flujo
Raquel Martn-Ibez (1), Noelia Urbn (1), Empar Crespo (1),

Celia Andreu (2), Solne Sergent-Tanguy (1), Jos Ramn Pineda (1),
Isabel Farias (2), Jordi Alberch (1) y Josep M. Canals (1)
1Departament de Biologia Cellular i Anatomia Patolgica, Facultat de
Medicina, IDIBAPS, Universitat de Barcelona, Barcelona, Espaa; 2Departamento de Biologia Celular, Universidad de Valencia, Burjassot, Espaa.
Amanda Sierra, Andrs C. Gottfried-Blackmore, Karen Bulloch, Bruce

S. McEwen
Rockefeller University, New York, NY, USA; Stony Brook University,
Stony Brook, NY, USA
Los mecanismos implicados en la diferenciacin de precursores neurales presentes en la zona germinal de la eminencia lateral ganglionar
(LGE) hacia los diferentes fenotipos neuronales estriatales maduros son
poco conocidos. En el presente trabajo describimos un nuevo papel del
factor de transcripcin Ikaros en la generacin de neuronas estriatales.
Ikaros-1 es el nico miembro de esta familia de factores de transcripcin
que encontramos expresado especficamente en la zona del manto de
la LGE durante el desarrollo del ncleo estriado desde E14,5 hasta P3.
Nuestros estudios tambin demuestran que durante estadios embrionarios, Ikaros-1 se expresa en neuronas postmitticas inmaduras localizadas
en el margen entre la zona subventricular y la zona del manto de la LGE.
Este factor de transcripcin interviene en la diferenciacin de neuronas
estriatales de generacin tarda, ya que bloquea la proliferacin de los
precursores neurales cuando stos entran en el manto estriatal. Adems,
Ikaros induce la diferenciacin de los precursores hacia un fenotipo neuronal encefalinrgico, ya que todas las clulas Ikaros positivas son neuronas encefalinrgicas en estadios postnatales. Asimismo, hemos observado
que el ratn deficiente de Ikaros presenta una reduccin especfica en el
nmero de sta poblacin neuronal. En conclusin, Ikaros-1 es esencial
para la correcta diferenciacin de precursores neurales presentes en la
zona germinal de la LGE hacia un fenotipo neuronal encefalinrgico durante el desarrollo del ncleo estriado.
(Este proyecto ha sido financiado por proyectos de La Caixa, el Ministerio de Sanidad y Consumo y el Ministerio de Educacin y Ciencia.)

PAPEL DE DYRK1A EN EL DESARROLLO NEUROMOTOR DEL SNC: IMPLICACIONES EN EL SNDROME
DE DOWN
Arqu Fust G. (1), Casanovas A. (2), Dierssen M. (1)
1. Laboratorio de anlisis neuroconductual, Programa Genes y Enfermedad, Centre de Regulaci Genmica, Barcelona, Espaa. 2. Universitat de Lleida, Facultat de Medicina, Departament de Cincies
Mdiques Bsiques, Unitat de Neurobiologia Cellular, Lleida, Espaa
Los dficits motores y el retraso en el desarrollo neuromotor se encuentran entre las alteraciones ms frecuentes en el sndrome de Down
(SD). Dyrk1A, un gen candidato que puede causar algunos de los dficits
neurolgicos asociados al SD, se expresa en el cerebelo y estructuras
funcionalmente relacionadas como los ncleos motores del tronco del
encfalo y la medula espinal (ME). Estudios previos, han demostrado que
la sobrexpresin de Dyrk1A da lugar a un retraso del desarrollo neuromotor, caracterizado la persistencia de patrones locomotores inmaduros,
y retraso en la adquisicin de la marcha. Hemos investigado el patrn de
expresin de Dyrk1A durante el periodo postnatal, en que se produce
el desarrollo neuromotor, y hemos caracterizado el desarrollo motor de
un modelo murino con sobrexpresin de Dyrk1A (TgDyrk1A). Los tests
neurolgicos y conductuales en el TgDyrk1A corroboran la alteracin
motora especfica. El patrn postnatal de expresin de Dyrk1A muestra
110
La microgla, el principal coordinar del sistema immunitario innato

cerebral, inicia y propaga la respuesta inflamatoria inducida por degeneracin neuronal o estmulos patognicos. Aqu proponemos un nuevo
enfoque para cuantificar con precisin las respuestas inflamatorias microgliales. Utilizando ratones transgnicos fms-EGFP hemos purificado microgla viable a partir de cerebros adultos utilizando Fluorescence-Activated Cell Sorting (FACS). Despus, la genmica y protemica microgliales
resultantes de diversas condiciones experimentales aplicadas in vivo, han
sido analizadas cuantitativamente ex vivo. Utilizando este sistema, hemos
mostrado que la microgla adulta es una diana directa de las hormonas
esteroideas y que los glucocorticoides son reguladores ms potentes de
la actividad microglial que otras hormonas esteroideas. La inflamacin
reduce la expresin de los receptores de hormonas esteroideas, lo que
sugiere que una desensibilizacin a las propiedades anti-inflamatorias de
los esteroides endgenos podra ser un prerrequisito para alcanzar /mantener el estado activado. Por ltimo, nuestro sistema de anlisis ex vivo
tambin nos ha ayudado a comprender la dinmica microglial durante el
proceso de envejecimiento. Aunque la microgla senescente produce una
cantidad absoluta mayor de citokinas que la microgla joven en respuesta
a un estmulo inflamatorio, el incremento relativo respecto al nivel basal
permanece constante independientemente de la edad. Por lo tanto, la
maquinaria inflamatoria de la microgla senescente es funcional y permanece ajustada al estado basal. Debido a las propiedades neurotxicas de
muchas citokinas pro-inflamatorias, la activacin crnica de la microgla
senescente puede tener un impacto notable en el proceso de envejecimiento cerebral.
Sierra A et al. (2007) Glia 55:412-424
18:15 a 19:15 en (Auditorio I)

Conferencia Plenaria Dr. D. Choquet New
functions for receptor surface trafficking in controling synaptic transmission
19:15
Asamblea SENC
Sabado dia 8
SABADO 8 - SIMPOSIA
9:00 a 11:00 h Simposio 9:

Funciones ditributivas de los ganglios basales; M.C. RodrguezOroz/J. Obeso (Auditorio III B)
Organizacin anatmico-funcional de los ganglios basales: Circuitos paralelos; M.T. Herrero.
EFFECTS OF THE MODULATION OF THE DIFFERENT TERRITORIES

OF THE BASAL GANGLIA: PATHOLOGICAL IMPLICATIONS
Tremblay, L.
There are growing evidences supporting the implication of the Basal Ganglia in a large
spectrum of behavioral disorders; like obsessive-compulsive disorders (OCD), attention deficit/
hyperactivity disorder (AD/HD) or apathy. However, experimental results from animal models
and specifically on monkey, are required to determine the involvement of specific territories
within the Basal Ganglia. As it was demonstrated that movement disorders could be obtained
by microinjections of bicuculline in the sensorimotor territory of the external Globus Pallidus
(GPe), the purpose of our study was to assess the consequences of such injections in the
associative and limbic GPe. Spontaneous behavior and performances in a simple-choice task
were monitored. Effectively, two types of behavioral disorders were obtained, dependant of the
injection site into the GPe. These behavioral effects shared similar features with AD/HD and
compulsive disorders observed in human. Anatomical study of input and output projections related to the sites which induced the most striking effects was done. The production of AD/HD
was linked to the associative territories of the basal ganglia and the production of compulsive
behavior was linked to the limbic territories. In a last and preliminary study, we showed that the
same approach, applied to the associative and limbic territories of the striatum, induced a larger
spectrum of behavioral disorders, including apathy. In conclusion, our results support the idea
that the associative and limbic territories of the basal ganglia are involved in large spectrum of
behavioral disorders and could be the site for new therapeutic approaches in some psychiatric
disorders
Participacin del ncleo subtalmico en aspectos motores y no motores de la conducta humana.

Rodrguez-Oroz, M.C.
La funcin de los ganglios basales ha sido considerada clsicamente como eminentemente motora. Este hecho ha estado basado en la evidencia clnica de que las enfermedades que
producen lesiones de estas estructuras, cursan principalmente con manifestaciones de tipo
motor (parkinsonismo, corea, hemibalismo, distona). Sin embargo, desde la dcada de los 80,
existe evidencia anatmica de la participacin de los ganglios basales en los circuitos paralelos
que con origen en reas motoras, limbicas, asociativas y oculomotoras hacen sinapsis en estos
ncleos grises y en el tlamo para volver al rea cortical de origen. En los aos siguientes y hasta
la actualidad, se han sucedido una serie trabajos fisiolgicos y funcionales, tanto en rata como
en primate no humano, que avalan la participacin de los ganglios basales en tareas cognitivas,
emocionales y oculomotoras. Ms recientemente, con motivo de la revitalizacin del tratamiento quirrgico en la Enfermedad de Parkinson, se han podido realizar estudios en humanos que
demuestran irrefutablemente este hecho. La colocacin de electrodos de estimulacin crnica
en el ncleo subtalmico en estos pacientes ha permitido obtener datos relevantes al respecto.
Existen diversos trabajos que ponen de manifiesto que los contactos del electrodo situados en
la zona ms dorsal del ncleo (rea motora) son los que de mayor eficacia antiparkinsoniana.
Por otra parte, en los registros neuronales de campo realizados a travs del electrodo implantado en el NST de estos pacientes, la actividad oscilatoria a frecuencia beta, caractersticamente
113
SIMPOSIA - SABADO 8
asociada al estado parkinsoniano, y la actividad a frecuencia gamma alta, registrada cuando

el estado parkinsoniano desaparece como efecto de los frmacos dopaminrgicos, se localizan con mxima potencia en los contactos ubicados en el rea dorsal, motora, del ncleo.
Empleando este mismo mtodo, recientemente se ha descrito que la actividad neuronal
asociada a las disquinesias inducidas por levodopa ocurre a una frecuencia de 4-10 HZ y se
registra fundamentalmente en los contactos ms ventrales dentro del ncleo correspondiente a reas asociativas.
La participacin del NST en funciones lmbicas en el humano se ha estudiado tambin
mediante registro de campo de la actividad neuronal del NST en pacientes con EP y electrodos implantados en el NST a los que se les presentaban estmulos con un contenido
emocional positivo, negativo o neutro. Los estmulos neutros no provocaban cambios en
la actividad del NST mientras que los que evocaban emociones, tanto positivas como negativas, inducan una desincronizacin de la banda alfa registrada en el ncleo. Este cambi
se registr con mxima intensidad, en la mayora de las ocasiones, en los contactos ms
ventrales del electrodo, que coinciden con reas asociativas o lmbicas.
Adems, estudios de tomografa por emisin de positrones (PET) en pacientes tratados
con estimulacin crnica del NST han demostrado un incremento en el consumo de glucosa en corteza cerebral asociativa y lmbica respecto al estado parkinsoniano no tratado.
Si bien no se conoce el mecanismo de accin de la estimulacin crnica y por tanto es
difcil interpretar con exactitud a que se deben los cambios observados en el metabolismo
cerebral, el conocimiento actual de la organizacin del NST sugiere como posible la accin
sobre reas no motoras del ncleo. Este dato es actualmente muy relevante puesto que
entre los efectos secundarios asociados al tratamiento quirrgico en el NST en pacientes
con EP, se han descrito trastornos de conducta como mana, apata, depresin, hiperactividad etc , que con frecuencia se asocian a la estimulacin con los contactos ms ventrales y
mejoran o desaparecen al estimular con contactos ms dorsales.
En la misma lnea pueden interpretarse otros efectos adversos como trastornos en la
motilidad ocular, diplopia etc, que pudieran deberse a la estimulacin en el territorio oculomotor del NST. Es razonable por tanto, pensar que un correcto tratamiento quirrgico
de la EP es aquel que acta sobre el territorio motor respetando las reas no motoras del
NST para evitar efectos adversos indeseables.
Aunque no existen estudios similares en otros ncleos de los ganglios basales en humanos, los datos anatomofisiologicos del primate hacen pensar que en el humano, todos
los ncleos de los ganglios basales estn organizados anatomofuncionalmente en reas
motoras y no motoras (asociativa, lmbica y oculomotora) con relevancia en el control de
aspectos diversos de la conducta y las emociones.
-Tratamiento de la hipocinesia a la hipercinesia: Modulacin diferencial de
los ganglios basales;
J. Obeso.
9:00 a 11:00 Simposio 10: Anlisis estructural y funcional de la sinaptognesis; A. Acebes

(Auditorio I)
NMERO DE SINAPSIS Y MODULACIN DE LA PERCEPCIN OLFATIVA EN DROSOPHILA.
Acebes, A.
Instituto Cajal (CSIC) Avda. Dr. Arce n 37 Madrid 28002
La modificacin del nmero de sinapsis in vivo genera importantes consecuencias fisiolgicas y comportamentales. Un estudio previo empleando mosaicos del gen gigas/TSC2
demostr que el incremento en el nmero de sinapsis sensoriales produca un aumento en
114
SABADO 8 - SIMPOSIA
la percepcin olfativa de Drosophila. En este trabajo se han empleado dos herramientas genticas que permiten variar cuantitativamente el nmero de sinapsis. De este modo, la sobre-expresin del gen de la fosfoinositido-3-kinasa (PI3K) en grupos neuronales especficos produce
un aumento de un 300% en el nmero de sinapsis, mientras que la sobre-expresin del gen de
la glicgeno sintasa kinasa-3 (GSK3) induce una prdida de sinapsis cercana al 70%. Dos lneas
GAL4 de neuronas centrales olfativas: a) interneuronas locales y b) neuronas de proyeccin
han sido cruzadas con lneas UAS que permiten sobre-expresar las protenas PI3K y/o GSK3
exclusivamente en esas neuronas. Morfolgicamente nuestros datos muestran un aumento
(PI3K) o una disminucin (GSK3) en la seal sinptica y nmero de ramificaciones axonales en
ambos tipos neuronales. Los resultados comportamentales muestran diferencias significativas
en curvas dosis-respuesta en a) individuos en los que hay un descenso en el nmero de sinapsis
de las interneuronas locales y b) un aumento del nmero de sinapsis en neuronas de proyeccin. Estos resultados han sido refrendados en experimentos de imaginera cuantitativa que
permiten visualizar la transmisin sinptica in vivo. Adems, se estn analizando los efectos del
cambio del nmero de sinapsis en procesos de habituacin olfativa y en reas posteriores de
integracin de la seal olfativa, como el protocerebro lateral.
SYNAPTIC CHANGES RELATED TO LONG-TERM MEMORY IN INSECTS.

Devaud, J.M.
Research Center on Animal Cognition, CNRS UMR 5169, Paul Sabatier University, 118 Route de Narbonne, 31062 TOULOUSE Cedex 4, FRANCE
Consolidation of memory traces is considered to rely on functional and/or structural synaptic modifications in the neural networks that process the learned stimuli The honeybee
antennal lobe, the first olfatory brain center, is a particularly suitable model for studying such
modifications, since (1) it is involved in the formation of long-tem memory (LTM) of learned
odour-sucrose associations following pavlovian learning, and (2) it is organized in clearly-identified units, the glomeruli. The glomeruli, which house synaptic contacts between several neuron
types involved in odour processing, also recieve convergent input signalling reinforcement. Besides, glomeruli are highly plastic, as shown by previously observed changes in volume and activity
related, respectively, to experience and short/medium term memory. Still, the nature of changes
specifically related to the formation and maintenance of associative LTM are still unknown.
In order to characterize the memory trace of a specific odour-sugar association, we have
compared response patterns and volumes of glomeruli, between bees that had formed LTM
and controls.Anatomical and functional data were collected in separate animals three days after
conditioning, a time corresponding to the late phase of LTM. Our results show for the first time
that associative olfactory late-LTM is associated with changes in the function (modulations of
odour-induced activity) and structure (increased volume) of specific glomeruli only. Besides,
these structural and functional changes are odour-specific, and thus contribute to a stable
memory trace. The significance of these results for understanding the underlying mechanisms
of synaptic pasticity will be discussed
ANLISIS ESTRUCTURAL DE LA INCORPORACIN DE NUEVAS

NEURONAS EN EL CEREBRO ADULTO
Alonso-Pea,J.R., Curto,G.G.,Vidal,M., Bobo,V., Gmez,C.,Valero, J.
Laboratorio de Plasticidad Neuronal y Neurorreparacin. Instituto de Neurociencias de Castilla y Len.
Universidad de Salamanca.
El bulbo olfatorio recibe durante toda la vida adulta, clulas progenitoras procedentes de
la zona subventricular y de la corriente migratoria rostral que se diferencian a interneuronas,
modulando la transmisin olfatoria a nivel bulbar.
115
SIMPOSIA - SABADO 8
Estudiamos la incorporacin de nuevas neuronas al bulbo olfatorio tras la modificacin de la va olfatoria por tres modelos: Reduccin de la estimulacin aferente mediante
deprivacin olfatoria, prdida selectiva de clulas mitrales (ratn pcd), y reduccin de la
expresin de Pax6 que regula procesos de proliferacin, diferenciacin ymigracin celular
mediante el estudio del ratn SeyDey.
Los diferentes modelos experimentales utilizados producen claros efectos en la neuroqumica bulbar, as como reorganizacin de las conexiones sinpticas y modificaciones de
las tasas de proliferacin/migracin/muerte neuronal en el bulbo olfatorio.Algunos de estos
cambios son llamativos, observndose alteraciones en la distribucin final de neuroblastos
migrantes ante la prdida de clulas mitrales, disminucin del nmero de clulas que expresan doblecortina tras deprivacin olfatoria y toda una serie de cambios neuroqumicos
en la red de interneuronas locales tras el descenso del factor de transcripcin Pax6. Estos
resultados indican que la incorporacin y mantenimiento de nuevas neuronas al sistema
olfatorio estn directamente relacionados con el estado estructural y funcional del bulbo
olfatorio, de modo que cambios en los elementos bulbares producen potentes respuestas
adaptativas en la diferenciacin y sinaptologa de las neuronas de nueva formacin.
Subvencionado por DGI (SAF2006-05705), Ministerio de Sanidad y Consumo (PNSD), Junta
de Castilla y Len y Federacin de Cajas de Ahorro de Castilla y Len.
MECANISMOS DE SEALIZACIN EN DIFERENCIACIN SINPTICA MEDIADOS POR NEUREXINAS

Gmez-Scholl, F.
Departamento de Fisiologa Mdica y Biofsica. Facultad de Medicina. Universidad de Sevilla
Las sinapsis son uniones celulares especializadas en transmitir la informacin entre
neuronas. Molculas que median adhesin trans-sinptica pueden regular la sealizacin
bi-direccional a ambos lados de las sinapsis durante la sinaptognesis. Las neurexinas son
miembros de una amplia familia de protenas de adhesin con funcin sinptica. Existen tres
genes de neurexinas que mediante dos promotores alternativos generan las isoformas largas, alfa-neurexinas, y las isoformas cortas, beta-neurexinas. Dichas isoformas se diferencian
en el dominio extracelular, mientras que los dominios transmembrana y citoplsmico son
comunes. Las neurexinas se unen a las neuroliguinas, protenas de membrana postsinptica.
Trabajos previos han demostrado que la unin de neurexinas axonales con neuroliguinas
dendrticas dispara la formacin de sinapsis en los sitios de contacto (1). Recientemente se
han identificado mutaciones en genes de neurexinas y neuroliguinas asociadas a casos de
autismo y retraso mental (2, 3), sugiriendo que defectos en este sistema pueden tener una
relevancia funcional en procesos cognitivos. En la actualidad, estamos estudiando la ruta
sinptica de sealizacin mediada por neurexinas mediante un abordaje de estructura/funcin. Hemos observado que la expresin de neuroliguina-1 en cultivos de neuronas induce
el reclutamiento de beta-neurexinas exgenas y el ensamblaje de terminales glutamatrgicos. La expresin mediante sistemas lentivirales especficos de neuronas de mutantes
de beta-neurexinas indica un papel funcional importante del dominio citoplsmico de la
protena. Asimismo, hemos identificado un procesamiento proteoltico de beta-neurexinas
que podra regular su funcin sinptica. Estos estudios nos conducirn a dilucidar aspectos
importantes del mecanismo de sealizacin que media la diferenciacin sinptica.
Referencias:
1. Dean C, Scholl FG, Choih J, DeMaria S, Berger J, Isacoff E, Scheiffele P. Neurexin mediates the assembly of presynaptic terminals. Nat Neurosci. 2003. 6:708-16.
2. Autism Genome Project Consort. Mapping autism risk loci using genetic linkage and chromosomal
rearrangements. Nat Genet. 2007. 39:319-28.
3. Jamain S, Quach H, Betancur C, Rastam M, Colineaux C, Gillberg IC, Soderstrom H, Giros B, Leboyer M, Gillberg C, Bourgeron T. Mutations of the X-
116
SABADO 8 - SIMPOSIA
9:00 a 11:00
Simposio 11: Aproximaciones computacionales a la funcin cortical: de la

percepcin a la accin A. Compte/G. Deco (Auditorio III A)
How premotor neurons drive wrist movements: a view
from dynamic neural network models.
Grandjean,B., Maier,M.A.
Inserm, U742, Paris, F-75005 France; Universit Pierre et Marie Curie-Paris6, Paris, F-75005 France;
Universit Diderot-Paris7, Paris, F-75013 France.
Dynamic recurrent neural networks composed of units with continuous activation functions provide a powerful tool for simulating the interaction of simultaneously active neuronal populations.We simulated patterns of neural activity observed in monkeys performing a step-tracking task with flexion/extension wrist movements. In terms of connectivity, the model simulates
cortical and rubral neurons, muscle afferents, segmental interneurons and motoneurons. In
terms of activity, the model incorporates the response profiles of four populations of neurons
observed in behaving monkeys. The resulting model generated the appropriate input-output
transforms and developed connection strengths resembling those in physiological pathways.
Artificial lesions in the network highlight the functional implication of identified populations of
units.
In order to augment the biological realism of our model, we explored the use of a hybrid
model that links our neural network, which simulates the central (neural) aspects, to a simplified model of the wrist that simulates the mechanical (peripheral) aspects of the movement
as well as the resulting muscle afferent signals. This hybrid model allows for a more realistic
simulation of the interrelation of sensory signals and central computations. It also highlights
the sensitivity of the solutions with respect to implicitly or explicitly imposed constraints and
hypotheses and provides a new working model of the interactions between multiple neural
populations controlling wrist movements.
-Cortical mechanisms for the rapid segmentation and classification of complex visual stimuli; P.Verschure
NEURAL AND COMPUTATIONAL MECHANISMS UNDERLYING DECISION-MAKING

Deco, G.
Recent single-cell studies in monkeys (Romo et al. 2004, Neuron 41: 165) show that the
activity of neurons in the ventral premotor cortex (VPC) covaries with the animals decisions
in a perceptual comparison task regarding the frequency of vibrotactile events. The firing rate
response of these neurons was dependent only on the frequency differences between the two
applied vibrations, the sign of that difference being the determining factor for correct task performance. We present a biophysically realistic neurodynamical model that can account for the
most relevant characteristics of this decision-making related neural activity. One of the nontrivial predictions of this model is that the Webers law will underlie the perceptual discrimination behaviour. We confirmed this prediction in behavioral tests of vibrotatile discrimination in
humans and propose a computational explanation of perceptual discrimination which accounts
naturally for the emergence of Webers law. We conclude that the neurodynamical mechanisms
and computational principles underlying the decision-making processes in this perceptual discrimination task are consistent with a fluctuation-driven scenario in a multistable regime
117
SIMPOSIA - SABADO 8
MECHANISMS UNDERLYING THE CORRELATION BETWEEN

WORKING MEMORY CAPACITY AND ATTENTIONAL FILTERING
Johansson, P.,1 Edin, F., 1 McNab, F., 1Tegnr, J., 1 Klingberg, T., 1 Compte, A.1,2
Developmental Cognitive Neuroscience, Stockholm Brain Institute, Karolinska Institutet, Stockholm,
Sweden. 2Institut dInvestigacions Biomdiques August Pi i Sunyer (IDIBAPS), 08036 Barcelona
1
Behavioral and neuroimaging studies have shown a correlation between working memory capacity (maximal number of elements that can be stored in working memory) and
the efficacy in filtering out from working memory those items that are behaviorally irrelevant [1,2]. This suggests that working memory and attentional filtering share neuronal
mechanisms, but the precise nature of these mechanisms remains unknown [3]. Here, we
approach this question by means of a computational model, that implements biophysical
network mechanisms in various cortical areas and makes behavioral and neuroimaging
predictions. We model a specific visuo-spatial working memory task that involves distractor filtering, and for which the areas involved in attentional selection have been identified
with fMRI.The areas primarily involved in the task included visual areas, a working memory
storage area (in the intraparietal sulcus), and several control areas. Our model shows how
a network of three interconnected cortical areas can both be used to boost the working
memory capacity of the network, and to filter away distractors, depending on how the
working memory control area is activated. This provides testable mechanistic hypotheses
about how attentional filtering and working memory capacity are interrelated. I will present
examples about how these computational hypotheses can be tested in fMRI experiments.
Funding: Instituto de Salud Carlos III
References
[1] de Fockert JW, Rees G, Frith CD, Lavie N. The role of working memory in visual selective attention. Science 291:1803-6, 2001.
[2] Vogel EK, McCollough AW, Machizawa MG. Neural measures reveal individual differences in controlling access to working memory. Nature 438:500-3, 2005.
[3] Ardid S, Wang X-J, Compte A. An integrated microcircuit model for attentional processing in the
neocortex. J Neurosci in press, 2007.
9:00 a 11:00 Simposio 12: Iluminando los mecanismos de receptores y canales inicos;
C. Solsona/P. Bregestowski (Auditorio II)
LATERAL TRAFFICKING OF NMDA RECEPTOR SUBUNITS.
Groc, L.
Physiologie Cellulaire de la Synapse, UMR 5091 CNRS, Universit Bordeaux 2, Bordeaux, France.
The NR2 subunit composition of NMDA receptors (NMDARs) is thought to play an
important role in NMDAR-dependent signalling. Of particular interest, NMDAR subunit
composition switch during development from a receptor population rich in NR2B subunit at
early stages to a population with increase contribution of NR2A subunits. The mechanisms
by which neurons differentially traffic NR2A- and NR2B-containing NMDARs are however
still unclear. Data investigating the surface trafficking of NR2A and 2B subunit-containing
NMDARs at various stages of synaptic maturation will be presented. Subunit surface trafficking was investigated using both single molecule (organic dye) and single nanoparticle
(Quantum Dot) tracking on hippocampal cultured neurons. Schematically, we unraveled that
the surface mobility of NMDARs depends on the NR2 subunit subtype, NR2A-containing
NMDARs being more stable than NR2B-containing ones. During development, the change
118
SABADO 8 - SIMPOSIA
in the synaptic surface content of NR2A and NR2B subunits was correlated with a change in
the time spent by the subunits within the synapses. Regulators of this dynamic equilibrium will
be discussed. We propose a developmental model in which the regulation of synaptic NMDAR
subtypes is dependent on the synaptic surface stabilization of specific subunits.
-Novel fluorescent sensors allowing non-invasive monitoring of intracellular CL-IN living
cells; P. Bregestovski
-The traffic of KCNQ2 channels and its regulation by CA2+CALMODULIN; A.Villaroel
PHOTOSWITCHABLE GLUTAMATE RECEPTORS AND THEIR APPLICATION TO THE REMOTE CONTROL OF NEURONAL ACTIVITY
Gorostiza,P., Szobota,S., Del Bene,F.,Wyart,C., Fortin,D.L., Kolstad,K.D.,Tulyathan,O.,
Volgraf,M., Numano,R., Aaron,H.L., Scott,E.K., Kramer,R.H., Flannery, J., Baier,H.,
Trauner,D., Isacoff,E.Y.
The ability to stimulate select neurons in isolated tissue and in living animals is important
for investigating their role in circuits and behavior.
We show that the engineered light-gated ionotropic glutamate receptor (LiGluR), when
introduced into neurons, enables remote control of their activity.Trains of action potentials are
optimally evoked and extinguished by 380 nm and 500 nm light, respectively, while intermediate
wavelengths provide graded control over the amplitude of depolarization. Light pulses of 1-5
ms in duration at approximately 380 nm trigger precisely timed action potentials and EPSP-like
responses or can evoke sustained depolarizations that persist for minutes in the dark until
extinguished by a short pulse of approximately 500 nm light.
When introduced into sensory neurons in zebrafish larvae, activation of LiGluR reversibly
blocks the escape response to touch. Our studies show that LiGluR provides robust control
over neuronal activity, enabling the dissection and manipulation of neural circuitry in vivo.
119
POSTERES HALL -SABADO 8
Modulacin de la neurognesis adulta

por p53
DFICIT NEUROGNICO HIPOCAMPAL Y COGNITIVO EN AUSENCIA DEL RECEPTOR DEL CIDO LISOFOSFATDICO LPA1
Sara Garca Gil-Perotin, Patrizia Casaccia-Bonnefil, Jose Manuel

Garcia Verdugo
Laboratorio de Neurobiologia Comparada- ICBIBE- Universidad
de Valencia. Departamento de Neurociencia- University of Medicine and Dentristy of New Jersey (UMDNJ)
Nuestro grupo ha demostrado en estudios previos que la protena
supresora de tumores p53 modula la neurognesis adulta actuando sobre
la proliferacin y diferenciacin de las clulas madre y sus progenitores. En
este trabajo damos un paso ms en la bsqueda de los mecanismos moleculares mediante los cuales p53 ejerce su accin, efectuando un metaanlisis de las bases de datos disponibles en este momento y mediante
el uso de la tcnica de PCR cuantitativa de genes noveles directamente
implicados en los procesos celulares de diferenciacin y proliferacin.
Gil-Perotin et al.2006, Journal of Neuroscience. Meletis et al., 2006,
Development

Estimulacin de la neurognesis mediante
la infusin intracerebroventricular de
LGF (liver growth factor) en ratas lesionadas con 6-hidroxidopamina.
Rafael Gonzalo-Gobernado, Antonio S. Herranz, Diana Reimers,
Juan Jos Daz-Gil** y Eulalia Bazn.
Servicio de Neurobiologa, Hospital Ramn y Cajal, Madrid; **Servicio de Bioqumica Experimental, Hospital Puerta de Hierro, Madrid.
Introduccin: El liver growth factor (LGF) es un factor de proliferacin y regeneracin celular en el hgado que a su vez presenta actividad
biolgica en tejidos extrahepticos. El objetivo de este trabajo ha sido investigar los efectos de la infusin intracerebroventricular del LGF sobre
los precursores neurales de la zona subventricular (SVZ) en el modelo
experimental en rata de enfermedad de Parkinson de lesin con 6-hidroxidopamina (6-OHDA). Resultados: La administracin intraventricular
de LGF increment la expresin del marcador de proliferacin celular
PCNA y la incorporacin de Bromodeoxiuridina (BRDU) a lo largo de la
SVZ, en el estriado y en el septum. Adems se observ que el LGF aument la poblacin de clulas que expresaban nestina (marcador de progenitores celulares) dentro del parnquima estriatal ipsilateral a la infusin del
factor y a su vez muchos de estos progenitores neurales comarcaron con
BRDU. Los animales infundidos con LGF tambin presentaron un significativo incremento en el nmero de neuroblastos, que expresaban doublecortin, los cuales invadieron las regiones dorsal y ventral del parnquima
estriatal mostrando la morfologa caracterstica de clulas en migracin.
Conclusiones: Este estudio demuestra que la infusin intracerebroventricular de LGF estimula la proliferacin de los precursores neurales de
la SVZ de ratas lesionadas con 6-OHDA y la migracin de neuroblastos
dentro del estriado desinervado. FIS 02/0853 y FIS 06/0315
Matas-Rico, E. (1); Garca-Daz B (1); Pedraza C (2); Santn L (2);

Riquelme R (3); Varela-Nieto I (3); Bilbao A (1); Fernndez-Llebrez, P.
(4); Chun J (5); Rodrguez de Fonseca, F. (1); Estivill-Torrs, G. (1).
(1) Fundacin IMABIS, Unidad de Investigacin, Hospital Universitario Carlos Haya, Mlaga. (2) Departamento de Psicobiologa,
Universidad de Mlaga. (3) Instituto de Investigaciones Biomdicas
Alberto Sols, (CSIC-UAM), Madrid. (4) Departamento de Biologa
Celular, Gentica y Fisiologa, Universidad de Mlaga. (5) The Scripps
Research Institute, La Jolla, California.
El cido lisofosfatdico (LPA) es un fosfolpido endgeno que acta en
mltiples procesos a travs de receptores especficos (LPA1-5) acoplados
a protenas-G. Su va de sealizacin est presente en el sistema nervioso
central e involucrada en procesos de neurognesis durante el desarrollo a
travs de, fundamentalmente, el receptor LPA1. Nuestro grupo de investigacin ha demostrado que la ausencia de LPA1 genera in vivo disminucin
de la poblacin proliferativa, acortamiento de ciclo celular y maduracin
temprana de los precursores neurales. En el adulto, los ratones maLPA1null, desarrollados en nuestro laboratorio, carentes del receptor LPA1,
presentan inhibicin de la neurogenesis adulta en la zona subventricular
y en el giro dentado hipocampal. La reduccin de neurognesis hippocampal tiene lugar en condiciones basales y en respuesta al ejercicio y el
enriquecimiento ambiental. Igualmente, la supervivencia de las clulas formadas tambin se reduce significativamente. En ausencia de LPA1 el giro
dentado muestra predominio de clulas bipolares inmaduras, alteraciones
de expresin en doblecortina y disminucin de BDNF. Paralelamente se
efectuaron estudios conductuales que demostraron que, a pesar de que
los animales son capaces de responder en ejecucin de tareas para memoria espacial en el laberinto acutico de Morris, presentan alteraciones
en la extincin. Igualmente se han realizado pruebas de condicionamiento
por miedo que muestran alteraciones en la memoria del contexto, dependiente de hipocampo. Los resultados demuestran que la ausencia de dicho
receptor altera la funcionalidad del hipocampo, impidiendo una respuesta
neurognica adecuada en el giro dentado y generando dficit cognitivo.

La ablacin de la neurognesis hipocmpica adulta no altera la memoria de trabajo
espacial en el laberinto en T
V.Hernndez-Rabaza1,2, M. Llorens-Martn3, Perez-Villalba1,Ulises
Gomez-Pinedo4,L.Dominguez-Escriba2,4,TrejoJL3,J.A. Barcia2,J.J. Canales1.
1-Departamento
de
Biopsicologa
y
Neurociencia
Comparada,Instituto Cavanilles, Universidad de Valencia.2-Unidad
de Neuroregeneracin y Reparacin Neural,Centro de Investigaciones, Prncipe Felipe, Valencia.3-Instituto Cajal,CSIC,Madrid.4Unidad de Morfologa Celular, Centro de Investigaciones, Prncipe
Felipe,Valencia.
La neurognesis adulta esta siendo estudiada en el contexto de la
memoria y el aprendizaje. (1.) Nosotros hemos realizado una serie de experimentos en los que hemos producido una ablacin del giro dentado
(GD) del hipocampo mediante irradiacin, tanto del cerebro completo,
como selectiva del hipocampo. (2.) Dos meses despus de la irradiacin,
los animales fueron testados en un laberinto en T (Match-to-place. MTP)
sensible a lesiones del GD. Los animales realizaron la prueba durante dos
semanas, y fueron testados de nuevo tras una semana de descanso. Los
anlisis estereolgicos realizados mediante inmunohistoqumica con BrdU
y Doblecortina, as como con microscopia electrnica, muestran un descenso significativo de la neurognesis hipocmpica. Los resultados de las
pruebas de comportamiento indicaron que los animales irradiados no
mostraron un dficit en la memoria de trabajo espacial ni en la retencin
a largo plazo de las habilidades adquiridas. Los resultados muestran que la
produccin de nuevas neuronas en el hipocampo adulto no es necesaria
120
SABADO 8 - POSTERES HALL

para la realizacin de la tarea MTP en el laberinto en T. Nuevos trabajos
son necesarios para identificar la funciones mnemnicas de las nuevas clulas producidas en el hipocampo. 1. Benedetta Leuner et al. Hippocampus,
16:216-24 (2006); 2. J.Martin Wojtowick. Hippocampus, 16:261-266 (2006)

Los efectos del ejercicio sobre el aprendizaje espacial y la ansiedad son mediados por IGF1 y la neurognesis hipocampal
adulta.
Jos Luis Trejo, Margarita Prez-Martn, Ignacio Torres-Alemn, Mara LLorens-Martn.
Instituto Cajal; CSIC. Facultad de Ciencias; Universidad de Mlaga
Los mecanismos a travs de los cuales el ejercicio fsico ejerce sus
efectos sobre el cerebro adulto no se conocen completamente, por ejemplo an no se ha implicado inequvocamente la neurognesis hipocampal
adulta en dichos efectos. Hemos intentado averiguar si los efectos del
ejercicio sobre el aprendizaje espacial y la ansiedad requieren variaciones
en la tasa de neurognesis y a travs de qu mecanismo suceden. Para ello,
hemos usado ratones con bajos niveles de factor de crecimiento similar
a la insulina (IGF1) en suero sanguneo (ratones LID), factor necesario
para la estimulacin de la neurognesis por ejercicio. Estos ratones con
bajo IGF1 srico poseen una neurognesis hipocampal muy reducida as
como una capacidad disminuida para el aprendizaje espacial. Mientras este
dficit puede corregirse por la administracin de IGF1 exgeno al tiempo que se normaliza la tasa de neurognesis, el entrenamiento fsico no
corrigi el comportamiento ni la neurognesis. Por su parte, la reduccin
de ansiedad que un ratn normal experimenta tras ejercicio fsico no se
presenta en ratones LID. Para averiguar si los ratones LID eran sensibles
a la estimulacin por ejercicio fsico en algn modo, se comprob que son
capaces de mejorar su puntuacin en el test de natacin forzada tras ejercicio. Por lo tanto, algunos de los efectos beneficiosos del ejercicio en la
funcin cerebral, incluyendo una mejora en la cognicin y una reduccin
de la ansiedad, dependen de los niveles de IGF1 circulantes en sangre y
estn asociados a un incremento de la neurognesis hipocampal.

La hiperhomocisteinemia inhibe la neurognesis en el hipocampo del ratn adulto.
Manuel Carrasco Viuela, Maribel Murillo-Carretero, Carmen Estrada y Carmen Castro.
rea de Fisiologa. Facultad de Medicina. Universidad de Cdiz.
Alteraciones en el metabolismo de la homocistena/folato, causan
disfunciones en el cerebro tanto adulto como en desarrollo. La hiperhomocisteinemia es un factor de riesgo para el desarrollo de enfermedades
neurodegenerativas, especialmente la enfermedad de Alzheimer. La neurognesis en el hipocampo adulto podra desempear un papel importante en la reparacin de lesiones y en funciones de aprendizaje y memoria.
En el presente trabajo estudiamos el efecto de la hiperhomocisteinemia
sobre la neurognesis en el cerebro del ratn adulto. Los animales fueron
implantados con microbombas osmticas que liberaban homocistena o
vehculo de forma contnua durante 15 das. La proliferacin celular se
analiz cuantificando las clulas que incorporaban bromodeoxiuridina
(BrdU) que haba sido administrada durante la segunda semana de tratamiento. Para analizar la supervivencia celular, la BrdU se administr antes
de la implantacin de las microbombas. El fenotipo neuronal se identific
mediante inmunohistoqumica frente a doblecortina. La apoptosis se determin cuantificando el nmero de ncleos picnticos en cortes teidos
con DAPI. En los animales hiperhomocisteinmicos, el nmero de precursores neurales proliferantes en el giro dentado del hipocampo disminuy
aproximadamente un 40% vs control, mientras que en la zona subventricular no se observaron diferencias. El porcentaje de clulas proliferantes
que expresaban doblecortina ( 75%) no vari entre los dos grupos. El
anlisis de la supervivencia celular y de la apoptosis en estas mismas regiones, no present diferencias entre los animales tratados vs controles.
Estos resultados indican que la homocistena inhibe la proliferacin de los
precursores neurales, especficamente en el giro dentado del hipocampo.
Financiado por el Plan Nacional del Ministerio de Educacin y Ciencia
SAF2005/05834

El incremento en el nmero de neuronas
inmaduras en el giro dentado del adulto
correlaciona con menores tiempos de inmovilidad en el test de natacin forzada,
en animales enriquecidos ambientalmente.
Mara V. Llorens-Martn; Noem Rueda; Carmen Martnez-Cu; Ignacio Torres-Alemn; Jess Flrez; Jos Luis Trejo.
Instituto Cajal, CSIC. . Facultad de Medicina, Universidad de Cantabria
Los factores extrnsecos e intrnsecos que regulan la Neurognesis
hipocampal adulta (AHN); la funcin ltima de la AHN en la fisiologa
hipocampal, y su papel en la etiopatognesis de algunas enfermedades
cerebrales no se conoce completamente en la actualidad, y es intenso objeto de estudio. Hemos tratado de profundizar en el conocimiento acerca
de cmo tratamientos que modulan la neurognesis (en este caso el enriquecimiento ambiental) son capaces de modificar el comportamiento
depresivo de los animales. Ratones jvenes C57 hembra que vivieron
2 meses en un ambiente enriquecido presentaron un nmero significativamente ms alto de neuronas inmaduras en diferenciacin. (Doublecortin-positivas, DCX+). Cuanto mayor es el nmero de clulas DCX+,
menor es el tiempo de inmovilidad en el Test de natacin forzada que
tuvo lugar en los animales enriquecidos comparados con los controles
no enriquecidos. El enriquecimiento ambiental, sin embargo, no produjo
ningn incremento en la supervivencia a dos semanas de poblaciones discretas de clulas BrdU+, mientras que el incremento en la supervivencia
de neuronas maduras no correlacion ni con la puntuacin en el test de
Porsolt ni con otros parmetros analizados en el estudio. Este trabajo
muestra que la poblacin de neuronas inmaduras en diferenciacin del
hipocampo adulto es un factor directamente relacionado con los efectos
neuroprotectores frente a estmulos altamente estresantes.

Strong P2X4 purinergic receptor-like immunoreactivity is selectively associated
with degenerating neurons in transgenic animal models of amyotrophic lateral
sclerosis
Anna Casanovas, Sara Hernndez, Olga Tarabal, Jaume Rossell and
Josep E. Esquerda
Unitat de Neurobiologia Cel.lular, Departament de Medicina Experimental, Facultat de Medicina, Universitat de Lleida, IRBLLEIDA.
The distribution of P2X family of ATP receptors was analyzed in a
rat model for amyotrophic lateral sclerosis (ALS) expressing mutated human superoxide dismutase (mSOD1G93A).We showed that strong P2X4
immunoreactivity was selectively associated with degenerating motoneurons (MNs) in spinal cord ventral horn. Degenerating P2X4-positive MNs
did not display apoptotic features such as chromatin condensation, positive TUNEL reaction or active caspase 3 immunostaining. In contrast, these
neurons showed other signs of abnormality, such as loss of the neuronal
marker NeuN and recruitment of microglial cells with neuronophagic
activity. Similar changes were observed in MNs of the cerebral cortex
and brainstem in mSOD1G93A both in rat and mice. In addition P2X4
immunostaining demonstrates the existence of neuronal degeneration
in the locus coeruleus, reticular formation and Purkinje cells of the cerebellar cortex. It is suggested that abnormal trafficking and proteolytic
processing of P2X4 receptor protein may underlie these changes.
121
La asociacin de los receptores de NMDA

a los rafts lipdicos condiciona la neurotoxicidad por NMDA
REGULACIN DE LOS CANALES KCNQ POR Ca++/

CaM
Jovita Ponce Torrent, Natlia Prez de la Ossa, Olivia Hurtado, Antonio Dvalos i Teresa Gasull
Grupo de Neurocincias. Departamento de Neurologa. Fundaci
Institut dInvestigaci en Cincies de la Salut Germans Trias i Pujol,
Badalona. Servicio de Neurologia, Hospital Clinico Universitario,
Santiago de Compostela
La liberacin masiva de glutamato al espacio extracelular que se
produce durante la isquemia cerebral causa muerte neuronal principalmente a travs de la sobreactivacin de los receptores N-metil-D-aspartato (NMDA). Los frmacos inhibidores de la sntesis de colesterol
de la familia de las estatinas protegen frente a este tipo de muerte por
un mecanismo todava desconocido. Dado que los receptores NMDA se
hallan asociados a dominios de membrana ricos en colesterol llamados
rafts lipdicos (RAFTS), el presente trabajo investiga el papel del colesterol y de la asociacin de los receptores de NMDA a los RAFTS en la
neurotoxicidad por NMDA en cultivos primarios de neuronas corticales.
Los cultivos se pretrataron con los inhibidores de la sntesis de colesterol
simvastatina y AY9944 que inhiben el primer y el ltimo paso de la va
de sntesis de colesterol, respectivamente, y con colesterol exgeno. Se
determin muerte neuronal, colesterol celular y niveles de la subunidad 1
del receptor de NMDA (NMDAR1) en los RAFTS. Simvastatina y AY9944
protegieron las neuronas de la neurotoxicidad por NMDA hasta un 70%
y un 54%, respectivamente. Ambos frmacos redujeron el colesterol celular y la asociacin de NMDAR1 a los RAFTS (hasta un 40%) sin que
se observara alteracin en la expresin total de NMDAR1. El colesterol
exgeno aadido a clulas pretratadas con simvastatina revirti parcialmente la neuroproteccin por simvastatina. Estos datos demuestran que
la reduccin de los niveles de colesterol protege frente al dao inducido
por NMDA, posiblemente reduciendo la asociacin de NMDAR1 a los
RAFTS.

Presentacin del Nodo ENAE (Enfermedades Neurolgicas Asociadas a la Edad)
Burguera, J.A.1 y Grupo ENAE
1 I.P. Nodo de Enfermedades Neurolgicas del Banco Nacional de
ADN.
Introduccin: El estudio de las enfermedades neurodegenerativas y
los movimientos anormales tiene una larga tradicin en los hospitales
pblicos de la Comunidad Valenciana. No obstante, el impacto de estos
trabajos y su secuencia temporal se hallan condicionados por elementos
comunes a la investigacin de origen sanitario en nuestro pas: fragmentacin, reducido tamao muestral y limitada temporalidad; entre otros.
Procedimientos: El Nodo de Enfermedades Neurolgicas del Banco
Nacional de ADN formar parte del Banco Nacional de ADN, siendo
el responsable de la puesta a disposicin de muestras de pacientes de
enfermedades neurolgicas en nuestro pas. Asimismo se encargarn de
la toma de muestras, de la inmortalizacin de las muestras, de su conservacin y de su puesta a disposicin de la comunidad cientfica. Poner a disposicin un mnimo de 500 muestras de ADN de calidad contrastada, de
las siguientes enfermedades neurolgicas: Alzheimer, Esquizofrenia, Parkinson, Esclerosis Mltiple, Esclerosis Lateral Amiotrfica (100 muestras)
y distona cervical (100 muestras). Por ltimo, estimular a la comunidad
cientfica en la utilizacin del Banco Nacional de ADN con el objetivo de
lograr conocimiento de alto nivel cientfico en estas enfermedades.
Conclusin: La poblacin cubierta por los Hospitales Pblicos del
rea metropolitana de Valencia, (padrn de 2005) fue de 1.641.364 personas, 36.13% de la poblacin de la C.V. con prevalencias estimadas: hasta
65 aos (IC95%:49.4-85.7) y mayores de 64 (IC95%:686.9794.0). De este
modo, nos moveramos entre unos valores de estimacin de 248 casos a
431 en menores de 65 aos y 2090 a 2599 en mayores de 64 aos.
122
Juan Camilo Gmez-Posada, Paloma Aivar Mateo, Patricia Villac,

Ainhoa Etxeberra, Irene Santana-Castro, Alessandro Alaimo, Rosa Maria Mella, Jos Angel Rodrguez-Alfaro, Pilar Areso, lvaro Villarroel
Unidad de Biofsica CSIC-UPV/EHU, Bilbao
Los canales M/KCNQ son el componente molecular de la corriente M, que acta como freno de la excitabilidad neuronal. Estos canales
cumplen un papel fundamental, tanto, que mutaciones puntuales en ellos
pueden llegar a producir diversas enfermedades humanas como: epilepsia,
sordera o incluso retraso mental. Esto demuestra que los canales KCNQ
cumplen funciones muy especficas que no pueden ser remplazadas por
los dems canales de potasio. Por tanto, es muy importante establecer y
entender el funcionamiento y los sistemas de regulacin que actan sobre
estos canales.
En nuestro laboratorio se ha descrito que la Calmodulina (CaM) participa en la regulacin de los canales KCNQ. Esta molcula se une en la
regin C-terminal del canal, en dos regiones discontinuas que denominamos Hlice A y Hlice B. Una de nuestras hiptesis de trabajo predice que
la CaM se una al canal provocando cambios conformacionales y con esto
enmascara algunas seales de retencin/recuperacin o degradacin, que
permite al canal escapar del Reticulo Endoplasmico.
Mediante ensayos bioqumicos y anlisis de imgenes de microscopia
confocal, hemos determinado que es necesaria que la CaM retenga su
habilidad de unir Ca++ y se produzca la unin Ca++/CaM para conseguir
la salida del canal del RE, y posteriormente continuar su trnsito a la
membrana celular.

CARACTERIZACIN ELECTROFISIOLGICA DE
LAS PROYECCIONES TLAMO-PRELIMBICAS EN EL
RATN Y SU IMPLICACIN EN LA TOMA DE DECISIONES
Juan Carlos Lpez-Ramos, Eleore Lyndell, Ana Rueda, Jos Mara
Delgado-Garca
Divisin de Neurociencias, Universidad Pablo de Olavide, Ctra. de
Utrera, Km. 1, 41013-Sevilla, Espaa
A la corteza prefrontal medial se le atribuyen funciones cognitivas
superiores, como son la atencin selectiva, la motivacin, o la toma de decisiones. Anatmicamente, esta zona se ha identificado en roedores por
sus conexiones recprocas con el ncleo mediodorsal (nMD) del tlamo.
Con el presente estudio se pretendi caracterizar estas proyecciones
mediante tcnicas de electrofisiologa in vivo y estudiar las variaciones
en el potencial de campo evocado en esta corteza prefrontal cuando al
animal experimental se le plantean tareas que implican la toma de decisiones. Para ello, se implantaron electrodos de estimulacin en el nMD y de
registro en el rea prelmbica de la corteza prefrontal medial de ratones
Swiss adultos. Mediante la estimulacin con dobles pulsos en una escala
de intensidades, y con diferentes intervalos inter-estmulo, se indujeron
potenciales de campo en el rea prelmbica que fueron digitalizados para
su posterior anlisis. Se comprob una potenciacin del segundo potencial evocado con respecto al primero con intervalos entre 40-100 ms.
Seguidamente, se aplicaron dobles pulsos en el nMD y se registraron los
potenciales de campo evocados en el rea prelmbica de los animales
durante una prueba de evitacin pasiva, obteniendo como resultado una
disminucin en la amplitud de los campos evocados cuando los animales
inhibieron de forma aprendida su tendencia al escape. Finalmente, y mediante la aplicacin de un tren de alta frecuencia, se indujo potenciacin
a largo plazo en la corteza prelmbica, que alcanz valores hasta un 40%
superiores al potencial basal, y que perdur hasta las 24 horas.

Canales de potasio Kv7/KCNQ en el colculo inferior de cobayas adultos
Study of MU opioid and 5-HT2A receptor

interactions by using the FLP-INTMTREx
HEK293 inducible system
Juan Navarro-Lpez(1), Lydia Jimnez-Daz(2,3), Sandrine M. Granton (2) and Jonathan F. Ashmore(1)
(1)Dpt. of Physiology and UCL EAR Institute, (2)Dpt. of Anatomy &
Developmental Biology, University College London, y (3) Dpto. de
Fisiologa y Farmacologa, Universidad de Salamanca.
Juan F. Lopez-Gimenez and Graeme Milligan

Molecular Pharmacology Group, Division of Biochemistry and Molecular Biology, IBLS, University of Glasgow, Glasgow G12 8QQ,
Scotland, United Kingdom
Las neuronas ubicadas en el colculo inferior (IC) se encuentran en

la va central de informacin ascendente del sistema auditivo. Registros
electrofisiolgicos in vitro obtenidos en animales jvenes sugieren que
los canales de potasio voltaje-dependientes (Kv7/KCNQ) podran explicar los distintos patrones de disparo neuronal observados en este nucleo.
En este trabajo hemos investigado, por una parte, la expresin de genes
KCNQ por medio de RT-qPCR usando primers especficos para cada
subtipo (KCNQ1-5) con el ARN total aislado del IC de cobaya. La especificidad de los productos se determin mediante anlisis de las curvas
de fusin y estudio de sus tamaos por electroforesis. Los resultados
muestran la presencia de los 5 subtipos de KCNQ en IC. Por otra parte,
se realizaron registros electrofisiolgicos en la modalidad de patch-clamp
usando rodajas (300 m de espesor) de tronco del encfalo de cobayas
(200 - 250g) que incluan ambos IC. Las neuronas fueron identificadas mediante el marcaje intracelular con Alexa 488 y su morfologa fue estudiada
usando microscopa confocal. La perfusin de la rodaja con frmacos antagonistas de Kv7 revel un componente de la corriente total de la clula
antagonizado por XE991 (10 M) o linopirdina (10 M). Por otra parte, la
perfusin del agonista de Kv7 retigabina (10 M) modul la frecuencia de
disparo de las neuronas registradas. Por tanto, nuestros resultados indican
la presencia de toda familia de canales KCNQ (Kv7.1-7.5) en las clulas
de IC, que pueden ser necesarios para modular los distintos patrones de
disparo de estas neuronas.
Agradecimientos: Wellcome Trust y EC Marie Curie Fellowship.
Mu opioid (MOR) and serotonin 2A (5-HT2A) are rhodopsin-like

(Class A) G-protein coupled receptors (GPCRs). Both are widely expressed within the CNS where they participate in several neurophysiological
processes. In order to investigate pharmacological interactions between
MOR and 5-HT2A receptors we generated a double-stable Flp-In T-Rex
HEK293 cell line expressing c-myc5-HT2ACFP (cyan fluorescent protein)
receptor in a Tet-on inducible fashion and MORYFP (yellow fluorescent protein) as a permanently expressed receptor. At the cellular level,
MORYFP distributed preferentially at the plasma membrane whereas cmyc5-HT2ACFP displayed an intracellular and vesicular distribution. By
means of fluorescent microscopy in living cells, [35S]GTPgS and radioligand binding assays we investigated the pharmacological interactions
of both receptors, focussing on the internalisation, desensitisation and
down-regulation processes of MORYFP after the induction and activation
of c-myc5-HT2ACFP receptors. The presence and activation of c-myc5HT2ACFP receptors promote the internalisation, desensitisation and
down-regulation of MORPYFP by morphine, distinct to that observed
when MORYFP was expressed without the c-myc5-HT2ACFP receptor. MORYFP internalisation by morphine was abolished by treatment
with either mianserin (5-HT2A receptor antagonist), YM254890 (Gaq/11
coupling inhibitor) or Ro318220 (Protein Kinase C inhibitor), demonstrating the participation of 5-HT2A receptor signalling pathways in this
process. Treatments of cells expressing both receptors with 5-HT resulted in no desensitisation of MORYFP when assessed with DAMGO or
morphine, excluding the possibility of a heterologous desensitisation of
the opioid receptor by the c-myc5-HT2ACFP receptor. In conclusion, this
heterologous system might be a useful experimental model to investigate interactions between 5-HT2A and MOR receptors at the molecular
level.
Estructura espacio-temporal de las respuestas ON/OFF a estmulos tctiles en las

neuronas del tlamo somatosensorial de
la rata.

Prdida de Stem Cells Neurales en el Hipocampo Debido al Envejecimiento
Juan de los Reyes Aguilar Lepe; Mara de la Luz Morales-Botello1,

Guglielmo Foffani1,2
1Hospital Nacional de Parapljicos. Neurofisiologa Experimental
y Anlisis de Seal. Toledo. 2School of Biomedical Engineering, Science and Health Systems, Drexel University. Philadelphia.EE.UU.
Juan Manuel Encinas, Ali Krimmer, Tanya Michurina, Marie Vidal,

Julie Tordo, Alex Koulakov, Grigori Enikolopov
Cold Spring Harbor Laboratory
El complejo ventrobasal del tlamo (cVB) recibe la informacin tctil

de toda la superficie corporal. Para estudiar las respuestas ON/OFF a la
estimulacin tctil de las neuronas del cVB se realizaron experimentos
en 13 ratas anestesiadas. Se obtuvieron registros extracelulares de 39
neuronas tlamo-corticales, de las que 8 neuronas respondieron a las
vibrisas, 16 neuronas respondieron a la pata delantera y 15 neuronas respondieron a la pata trasera. Los resultados fueron: (1) cuando el estmulo
se aplic en el centro del campo receptor principal no se encontraron
diferencias entre la magnitud de la respuesta ON y la respuesta OFF, pero
si existieron diferencias comparando las latencias de las respuestas ON
y OFF. (2) A mayor magnitud de la respuesta ON respecto a la respuesta
OFF, menor latencia mostr la respuesta ON respecto a la OFF. (3) Las
neuronas con respuesta OFF nula o muy pequea, mostraron mayor magnitud en su respuesta ON que en respuesta a un estmulo puntual (1ms),
mientras que las neuronas cuya respuesta OFF fue alta, respondieron con
igual o mayor magnitud al estmulo puntual que durante la respuesta ON.
(4) La respuesta OFF fue de mayor magnitud que la respuesta ON cuando
el estmulo fue aplicado en un campo receptor secundario excitador (periferia excitadora). Estos resultados sugieren que en las neuronas del cVB
de la rata la variabilidad de las respuestas ON/OFF, a estmulos tctiles,
puede corresponderse con una estructura espacio-temporal subyacente.
Fondo de Investigacin Sanitaria del Instituto de Salud Carlos III
(CP05/00311); Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha Consejera
de Educacin y Ciencia (PAI06-0104).
En el giro dentado, los neuroprogenitores quiescentes (QNPs) actan como stem cells neurales capaces de generar nuevas neuronas de
forma constante. Los QNPs se dividen asimtricamente dando lugar a
neuroprecursores amplificadores (ANPs), que proliferan de forma rpidamente de forma simtrica antes de diferenciarse en neuroblastos. Los
neuroblastos maduran morfolgica y electrofisiolgicamente hasta convertirse en clulas granulares integradas en los circuitos del hipocampo.
Este proceso de neurognesis ocurre durante toda la vida adulta del organismo, sin embargo, se reduce drsticamente con el envejecimiento. Se
ha sugerido que el declive de la neurogenesis adulta en el hipocampo se
debe a una prdida de la capacidad proliferativa de los neuroprogenitores
del giro dentado, sin cambios en su nmero o fenotipo. Nuestros estudios apuntan en la direccin opuesta. Utilizando varias lneas de ratones
transgnicos, en los que las clulas madre y los progenitores neurales
del cerebro pueden ser visualizadas y sus propiedades analizados cuantitativamente, demostramos que la capacidad de generacin de nuevas
neuronas se reduce con la edad debido a una prdida continua de QNPs.
De acuerdo a nuestros resultados, los QNPs, las stem cells del sistema
neurognico de giro dentado, entran en el ciclo celular en un momento
determinado, proceden a dividirse un cierto nmero de veces (generando
ANPs) y a continuacin se diferencian lentamente en astrocitos postmitticos. Estos resultados ayudan a comprender el envejecimiento cerebral
y permiten abordar la cuestin de cmo restaurar la neurognesis en el
hipocampo envejecido.
123
Control por voltaje de los receptores acoplados a protenas-G para el cido lisofosfatdico en ovocitos de Xenopus
IDENTIFICIACIN DEL GEN RESPONSABLE DE LA

PARLISIS SUPRANUCLEAR PROGRESIVA FAMILIAR.
1Martnez-Pinna, J,2Gurung, I.S., 1de Juan, E. 1Ivorra, I, 3MahautSmith, M.P. y 1Morales, A.

1Div. de Fisiologa, Universidad de Alicante, Alicante, Espaa. 2Department of Physiology, Development and Neuroscience, University of Cambridge, Reino Unido. 3Department of Cell Physiology
and Pharmacology, University of Leicester, Reino Unido.
Juan Urea Peralta,Vicente Herranz-Prez. Justo Garca de Yebenes,

Jordi Prez-Tur
Unitat de Gentica Molecular,Institut de Biomedicina de ValnciaCSIC Valncia. Servicio de Neurologa, Hospital Ramn y Cajal.
Madrid
Resultados recientes indican que el potencial de membrana puede

modular las vas de sealizacin de los GPCRs. Los ovocitos de Xenopus
expresan endgenamente varios GPCRs incluyendo los receptores para
cido lisofosfatdico (LPA). El potencial de membrana modula la liberacin
de Ca2+ dependiente de InsP3 durante la activacin de GPCRs para LPA.
El objetivo de este trabajo es estudiar esta nueva forma de modulacin y
elucidar la naturaleza del sensor de voltaje.
El registro simultneo electrofisiolgico y de fluorescencia de Ca2+
permiti observar como la liberacin de Ca2+ dependiente de LPA se
potencia por la despolarizacin y se inhibe por la hiperpolarizacin. Adems, la respuesta inicial al LPA se modul por el voltaje de fijacin de la
membrana siendo mayor a -80 mV que a -20 mV, tanto la latencia del aumento de Ca2+ (424s vs. 161s, p<0.05) como el tiempo al pico (656s
vs. 431s, p<0.05). La amplitud de la respuesta al LPA fue mayor a -20
mV que a -80 mV (1787 f/f0 vs. 13110 f/f0, p<0.05). La despolarizacin
aument la liberacin de Ca2+ mediada por LPA en un rango amplio de
concentraciones de agonista. La liberacin de Ca2+ dependiente de voltaje no se observ tras el aumento directo de los niveles de InsP3 o tras
la activacin de las protenas-G en ausencia de agonista, indicando que
el lugar de accin del voltaje es el propio receptor. Esta nueva forma de
modulacin del LPA por voltaje puede tener consecuencias importantes
en la sealizacin de Ca2+ celular. Financiado por GV06/323.

Maduracin de las respuestas a agonistas
glutamatrgicos en neuronas auditivas
de cultivos organotpicos de embriones de
pollo: papel de las aferencias excitadoras.
Juan Ramn Martnez Galn; Carmen Daz y Jose Manuel Juiz
Facultad de Medicina y Centro Regional de Investigacin Biomdica.
Universidad de Castilla-La Mancha. Albacete.
El objetivo de este trabajo consisti en averiguar como afecta la deprivacin excitadora a la actividad de los receptores glutamatrgicos durante el desarrollo embrionario. Para ello hemos utilizado como modelo
de desaferentacin el cultivo organotpico de rombencfalo de embriones de pollo, que carece de aferencias procedentes del nervio auditivo.
Se analiz la funcin de los receptores ionotrpicos de glutamato (iGluR)
y de los receptores metabotrpicos (mGluR) en neuronas auditivas del
ncleo magnocelular (NM) mediante registros pticos de la [Ca2+]i tras
aplicacin de diversos agonistas para receptores de glutamato. Se utilizaron rombencfalos procedentes de embriones de cinco das, mantenidos
en cultivo desde dos (d5+2d) hasta trece das (d5+13d). Los cambios en
la [Ca2+]i fueron comparados con los ocurridos en rodajas controles de
embriones de edades equivalentes.
El curso temporal de las respuestas a kainato en las neuronas en cultivo fue similar al encontrado en neuronas controles, con un mximo en
d5+10 y en d15 respectivamente. Sin embargo, la magnitud de la respuesta fue significativamente menor en los cultivos organotpicos. Por otra
parte, las respuestas a la aplicacin de NMDA fueron mayores en d5+2d
con respecto a los controles (d7), sin mostrar diferencias en periodos
posteriores. Por ltimo, muy complejo y significativamente diferente fue
el patrn de respuestas a t-ACPD entre ambos grupos. Esto indica que
las aferencias no determinan la expresin y el comienzo de actividad de
los iGluR, pero s intervienen en una regulacin ms sutil de la respuesta
final de estos receptores a la estimulacin glutamatrgica. Financiacin:
BFI2003-09147CO2-02 (CICYT) y GC-02-018 (JCCM).
124
La Parlisis Supranuclear Progresiva (PSP) es la segunda causa ms

frecuente de parkinsonismo con una prevalencia aproximada de 6-6,4
enfermos por 100.000. Clnicamente se caracteriza por alteraciones de
la capacidad motriz y el equilibrio as como la aparicin de demencia.
Anatomopatolgicamente, la PSP se caracteriza por la muerte neuronal
asociada a la aparicin de ovillos neurofibrilares en los ganglios basales y
el tallo cerebral.
Tradicionalmente considerada una enfermedad de tipo espordico, se
han descrito varias formas familiares asociadas a mutaciones en la protena tau (MAPT). Igualmente, la posesin de un determinado haplotipo en
este mismo locus supone un aumento en el riesgo de padecer la PSP en
ausencia de antecedentes familiares. En 2005, un trabajo de nuestro grupo
permiti identificar un nuevo locus relacionado con la aparicin de la PSP
con herencia autosmica dominante en una familia de origen espaol.
Este locus se encuentra limitado por los marcadores D1S238 y D1S2823,
una regin de 3 Mb situada en el brazo largo del cromosoma 1 (1q31.1).
En este trabajo presentamos los avances obtenidos en la determinacin
del gen responsable de la enfermedad en esta familia tras la secuenciacin
directa de los genes presentes en el locus anteriormente mencionado.

DISCRIMINACIN, LOCALIZACIN Y CORRELACIN TEMPORAL DE GENERADORES DE ACTIVIDAD ELCTRICA NEURONAL MEDIANTE ANALISIS
DE COMPONENTES INDEPENDIENTES EN EL EEG
Julia Makarova,Valeri A. Makarov y Oscar Herreras
Itto. Cajal, CSIC, Madrid. Dpto. Matemtica Aplicada, UCM, Madrid.
El gran dinamismo y complejidad del cerebro se manifiestan en una
actividad elctrica poblacional (EEG) muy compleja. Para entender su funcionalidad es necesario extraer informacin sobre sus generadores celulares y subcelulares. La propagacin heterognea en el medio extracelular
de los campos elctricos generados por eventos transmembrana de diferente duracin y la cohabitacin de diferentes tipos celulares en el mismo
espacio complican esta tarea. Diversos mtodos terico-experimentales
(anlisis espectral, fuentes de corriente, etc) permiten obtener algunas caractersticas de estos generadores, pero su aplicacin es muy limitada. En
este estudio hemos utilizado el anlisis de componentes independientes y
la transformada wavelet sobre registros realizados en profundidad mediante sondas lineales multielectrodo. El mtodo permite descomponer
el EEG en generadores temporalmente independientes con localizacin
espacio-espectral precisa. La validacin se realiz mediante experimentos
en agar y en cerebro de rata anestesiada, por comparacin con generadores previamente conocidos (mezcla de fuentes en agar y generadores
de ritmo theta hipocmpico en rata, respectivamente). El mtodo nos
ha permitido discriminar eventos elctricos de duraciones determinadas (bandas de frecuencia), sus relaciones temporales y su localizacin
espacial. Como resultado destacable, hemos encontrado una localizacin
espacial diferente para eventos theta, beta y gamma en la CA1 y fascia
dentada. Estos eventos aparecen en las mismas pocas, pero su correlacin temporal fina es mucho ms variable de lo habitualmente reportado.
La extraccin, identificacin y localizacin de generadores concurrentes
del EEG permite leer en tiempo real las complejas relaciones temporales entre la actividad de distintas subpoblaciones o subregiones celulares.
Financiacin: Santander-Complutense-41/06-15058, CSIC-I3/200620I186,
CAM-S-SEM-0255-2006.

Corteza prefrontal humana: expresin celular de receptores de la serotonina y de

la dopamina
EL XIDO NTRICO REGULA LA CONDUCTANCIA

DE CANALES DE FUGA DE K+ EN MOTONEURONAS
MEDIANTE LA VA RhoA-ROCK.
J. de Almeida, G. Mengod
Departamento de Neuroqumica, IIBB (CSIC-IDIBAPS) Rossell
161. Barcelona 08036
Laura Gmez-Prez; David Gonzlez-Forero, Carmen Castro, Bernardo Moreno-Lpez

rea de Fisiologa, Facultad de Medicina, Universidad de Cdiz, Cdiz
La corteza prefrontal (CPF) desempea un papel primordial en funciones cerebrales superiores como la memoria operativa, cognicin y
control de la conducta. Integra informacin procedente de reas corticales primarias y asociativas as como de estructuras subcorticales lmbicas, tales como los ncleos monoaminrgicos (ncleos del rafe y rea
tegmental ventral).
La actividad de la corteza est basada en el funcionamiento de microcircuitos que comprenden las neuronas piramidales de proyeccin e
interneuronas inhibitorias GABArgicas. Las neuronas de la CPF expresan receptores serotoninrgicos (particularmente 5-HT1A y 5-HT2A) y
dopaminrgicos (D1-D5). De esta manera, los sistemas monoaminrgicos del mesencfalo juegan un papel fundamental en la regulacin de la
actividad de las neuronas de la CPF y se encuentran involucrados en la
fisiologa y el tratamiento de enfermedades graves como la esquizofrenia
o depresin entre otras neuropatologas.
El objetivo de nuestro trabajo fue determinar la localizacin del
ARNm de los receptores serotoninrgicos 5-HT1A y 5-HT2A y dopaminrgicos D1, D2, D4 y D5 en los principales tipos neuronales de la CPF
en cerebros de mono y cerebros humanos sanos obtenidos postmortem
utilizando hibridacin in situ doble. Se identificaron dos poblaciones principales de neuronas, glutamatrgicas y GABArgicas, y algunas subpoblaciones de GABArgicas. En general, todos los receptores se expresan
en gran parte de las clulas glutamatrgicas y en un relativamente bajo
porcentaje de interneuronas GABArgicas.
La distribucin celular de estos receptores proporciona datos tiles
en el conocimiento de la fisiologa de la CPF y de los trastornos en los
que se encuentra implicada. (Financiado: La Marat TV3)
La hiperexcitabilidad es un factor de riesgo por el cual ciertas neuronas pueden llegar a ser susceptibles a la muerte por excitotoxicidad en
diversas enfermedades neurodegenerativas. En un trabajo reciente hemos
demostrado que la activacin a largo (>4h), pero no a corto (~10 min)
plazo de la cascada xido ntrico (NO)/GMPc/protena kinasa G (PKG)
induce hiperexcitabilidad en motoneuronas por inhibicin de corrientes
de K+ tipo TASK(1). En este trabajo hemos estudiado el mecanismo de
accin por el cual se produce tal modulacin a largo plazo en motoneuronas. Mediante western blot observamos que la accin crnica de
NO/PKG indujo un aumento en los niveles de fosforilacin del factor
de transcripcin ATF-1 en el ncleo hipogloso de ratas (P6-P8) in vitro.
Este factor regula la expresin de la GTPasa RhoA. En este sentido, se
observ un aumento en los niveles de la protena RhoA y la accin inhibitoria de NO/PKG sobre las conductancias tipo TASK fue dependiente
de la activacin de la va RhoA/ROCK. La accin de la ruta NO-ROCK
no alter los niveles de expresin de canales tipo TASK en las motoneuronas del ncleo hipogloso in vitro. Hemos encontrado evidencias de que
este mecanismo de accin est contribuyendo a la hiperexcitabilidad que
manifiestan motoneuronas adultas en respuesta a la lesin de sus axones.
Dado que los canales tipo TASK se expresan por todo el cerebro, este
mecanismo de larga latencia que regula la excitabilidad neuronal podra
sensibilizar a las neuronas a la muerte inducida por glutamato en condiciones patolgicas. (1). Gonzlez-Forero D. et al. J Neurosci (en prensa).
Financiacin: MCYT (BFI2001-3186); MEC (SAF2005-00585); Consejera
de Innovacin, Ciencia y Empresa de la Junta de Andaluca (CTS-844).

INTERRELACIONES ENTRE EXCITOTOXICIDAD Y
NEUROINFLAMACIN EN ELA
Laia Tolosa, Margalida Mir, Vctor Caraballo, Gabriel Olmos, Jernia
Llad
Grupo de Neurobiologa Celular. IUNICS/Dept. de Biologa, Universitat de les Illes Balears
La esclerosis lateral amiotrfica (ELA) es una enfermedad neurodegenerativa que afecta de forma selectiva a las motoneuronas. Adems
de la excitotoxicidad glutamatrgica, la respuesta neuroinflamatoria est
emergiendo como un factor relevante en la prdida de motoneuronas
que ocurre en la ELA. Tanto en pacientes de ELA como en modelos animales de esta enfermedad, se han descrito niveles circulantes de citoquinas proinflamatorias particularmente elevados, entre ellas el factor de necrosis tumoral-alfa (TNF-alfa). El objetivo de este estudio fue investigar la
posible potenciacin entre la respuesta neuroinflamatoria y la excitotoxicidad glutamatrgica. En cultivos organotpicos de mdula espinal de rata
postnatal de 8 das, tanto la administracin aguda de kainato (100 uM)
como la induccin de la excitotoxicidad crnica mediante la inhibicin del
transporte de glutamato con treohidroaspartato (THA ,100 uM), indujeron la muerte de las motoneuronas as como un aumento de la liberacin
de TNF-alfa. El tratamiento con TNF-alfa (20 ng/ml) no afect a la viabilidad de las motoneuronas espinales despus de 2 semanas; sin embargo su
administracin junto con el inhibidor THA (100 uM, 2 semanas), produjo
una potenciacin de la muerte excitotxica de las motoneuronas. Esta
exacerbacin de la excitotoxicidad glutamatrgica parece estar ligada a
una disminucin en la expresin del transportador de glutamato GLT-1
inducida por niveles elevados de citoquinas proinflamatorias. Finanaciado
por: FIS PI041507 (G.O.); FIS PI060680 (J.L.); Fundaci Marat TV3; Conselleria Economia, Hisenda i Innovaci, Govern Balear (PROGECIB-3A y
beca predoctoral L.T.).
125
RESPUESTAS NOCICEPTIVAS Y PLASTICIDAD ESPINAL EN DOS MODELOS DE DOLOR NEUROPTICO

EXPERIMENTAL
LA COCANA AFECTA A LA PROLIFERACIN CELULAR MIENTRAS QUE LA ADMINISTRACIN DE

MDMA REDUCE LA TASA DE SUPERVIVENCIA
Laura Casals Daz, Meritxell Viv, Xavier Navarro

Grupo de Neuroplasticidad y Regeneracin, Instituto de Neurociencias, Universitat Autnoma de Barcelona
Domnguez-Escrib L.1,2, Hernndez-Rabaza V.3,4, Soriano-Navarro M.1,2, Borreda-Gasc I. 1,2,Gmez U. 1,2, Garca-Verdugo J.M.1,2,
Canales J.J.3
1Unidad de Neurobiologa Comparada, Instituto Cavanilles, Universidad de Valencia, Spain. 2Unidad de Morfologa Celular, Centro
de Investigacin Prncipe Felipe, Valencia, Spain. 3Departamento de
Biopsicologa y Neurobiologia Comparada, Instituto Cavanilles, Universidad de Valencia, Spain. 4Unidad de Reparacin y Regeneracin
Neural Centro de Investigacin Prncipe Felipe, Valencia, Spain
Las lesiones de nervios perifricos inducen cambios plsticos a nivel

de las conexiones espinales y circuitos centrales, que se relacionan en
parte con la aparicin de dolor neuroptico. En este estudio analizamos
la evolucin de dos modelos de lesin del nervio citico en la rata de
distinta severidad: lesin por aplastamiento (crush) del nervio y lesin por
constriccin crnica (CCI). Las respuestas nociceptivas se evaluaron mediante tests de algesimetra mecnica y trmica. Los animales con lesin
por aplastamiento presentaron un umbral de retirada de la pata lesionada
superior que en la contralateral, mientras que los animales CCI presentaron latencias inferiores hasta un mes postlesin. La plasticidad central fue
evaluada mediante marcaje inmunohistoqumico de fibras nociceptivas
C no-peptidrgicas (IB4+) y peptidrgicas (SP+) en secciones lumbares
de la mdula espinal. La lesin por aplastamiento indujo una reduccin
progresiva de las reas de marcaje IB4+ y SP+ en el asta dorsal, ms pronunciada en reas de proyeccin de los nervios tibial y peroneal. Tras la
CCI, el rea IB4+ disminuy a los 7 das postlesin pero recuper niveles
normales dos semanas despus. No se observaron cambios notables en
la inmunoreactividad a SP. En resumen, las respuestas nociceptivas varan
segn la extensin de la lesin nerviosa, y el patrn de inmunoreactividad
de fibras aferentes en la mdula espinal se modifica segn el grado de
dao, mostrando cambios ms leves con lesin parcial que con lesin
completa del nervio citico.

ESTUDIO DEL GROSOR DE CAPA DE FIBRAS NERVIOSAS PERIPAPILARES EN SUJETOS NORMALES E
HIPERTENSOS OCULARES
Figueroa Ortiz L.C., Garca Campos J., Lpez de Cobos M
Centro de Investigaciones Mdico-Sanitarias. Universidad de Mlaga
Los pacientes con Hipertensin Ocular cursan con presiones intraoculares superiores a 21mmHg, pero sin evidencia de excavacin papilar
glaucomatosa o alteraciones en el campo visual. Es necesario una prdida
del 50% de las clulas ganglionares para que el dao glaucomotoso se
haga evidente en la exploracin campimtrica. La Tomografa ptica de
Coherencia es una tcnica que nos permite el anlisis del grosor peripapilar de la capa de fibras del nervio ptico. Hemos estudiado este parmetro en 90 ojos de sujetos normales y 104 ojos de pacientes hipertensos
con grosores corneales superiores e inferiores a 550 micras mediante un
Tomgrafo ptico de Coherencia de la casa Zeiss. En este ltimo grupo
hemos realizado un estudio evolutivo a los 6 meses y al ao. Los valores
obtenidos en sujetos normales fueron de 99,8610,48 micras. En el grupo de hipertensos con grosor corneal > 550 micras de 101,56 10,16
inicialmente, a los 6 meses 101,259,65 y al ao de 100,699,20. En el
de grosor corneal < 550 micras, de 97,9610,62, 97,2910,64 y 93,59
9,44 respectivamente. Hemos encontrado diferencias estadsticamente
significativas entre el grosor de capa de fibras nerviosas inicial y al ao, y
6 meses y un ao con una p< 0,05 en el grupo de hipertensos oculares
con grosor corneal < 550 micras.
126
Estudios anteriores muestran que algunas drogas adictivas, tales

como el alcohol (1), la morfina (2) y la metanfetamina (3) afectan a la neurognesis adulta. Nuestro objetivo fue ampliar este estudio caracterizando el efecto de la cocana y el MDMA ( 3,4-metilenedioximetanfetamina
o xtasis) sobre la neurognesis en el Giro Dentado de la rata adulta.
As vemos que la administracin de cocana disminuye la citognesis en
el Giro Dentado, en cambio no afecta a la supervivencia de las nuevas
clulas ni a su posterior maduracin (4). Sin embargo, el MDMA no altera
la capacidad de proliferacin de las clulas progenitoras pero disminuye
la supervivencia de las clulas hijas nacidas tras el tratamiento aunque no
impide su desarrollo morfolgico normal (5).
(1). Nixon K. & Crews F.T. (2004) J Neurosci. 24(43):9714-22
(2). Eisch A.J. et al. (2000) PNAS. 97(13):7579-84
(3). Teuchert-Noodt G. et al. (2000) J Neural Transm. 107(2):133-43
(4). Domnguez-Escrib L. et al (2006)Eur J Neurosci. Jul;24(2):586-94.
(5). Hernandez-Rabaza V. et al (2006) Neuropharmacology. Oct;51(5):967-73.

HIPERCORTICOSTERONEMIA
AND
CHRONIC
FLUOXETINE TREATMENT ALTER THE EXPRESSION
OF 5-HT1A RECEPTOR AND GIRK CHANNEL mRNAs
Saenz del Burgo, L.1., Corts, R.2, Mengod, G.2, Salls, J.1
1Department of Pharmacology, School of Pharmacy, University of
the Basque Country UPV-EHU, Vitoria-Gasteiz. 2Department of
Neurochemistry, Institut dInvestigacions Biomdiques de Barcelona CSIC-IDIBAPS, Barcelona
Flattening of the diurnal rhythm of glucocorticoid blood levels is associated with major depression. Our hypothesis is that this corticosterone
profile might elicit expression and functional changes in different brain
proteins. Alterations in the expression and function of 5-HT1A receptors
observed in depressed patients have been suggested to play an important
role in the aetiology of this disease. In order to analyze the influence of
flattened corticosterone rhythm and antidepressant treatment on mRNA
expression, we implanted adult rats with slow-release corticosterone
pellets (15-18mg/kg/day, 35days); another group of animals received the
same treatment and, from day 14th on, were additionally treated with
fluoxetine (5mg/kg/day, i.p., 21days). Using in situ hybridization we examined the expression of 5-HT1A receptor mRNA and G protein-activated inwardly rectifying K+ (GIRK) channel subunits. These channels
are regulated by G protein-coupled receptors such as the 5-HT1A and
play an important role in the inhibitory regulation of neuronal excitability.
Preliminary data suggest that chronic corticosterone treatment increases
GIRK2 and GIRK3 mRNA expression in the thalamus and dentate gyrus.
Chronic fluoxetine seems to revert GIRK2 mRNA to control levels in the
thalamus and to further increase GIRK3 mRNA expression in the dentate
gyrus. Our data also indicate that corticosterone reduces 5-HT1A mRNA
levels in the dentate gyrus and that fluoxetine treatment does not revert
this change, but in fact induces a more important decrease in 5-HT1A
expression. These findings suggest that restoration of cortisol rhythms
may be a valuable target for pharmacotherapy in major depression. Work
supported by SAF2004-02784 and SAF2006-10243

Caracterizacin de la subpoblacin neuronal marcada con la lectina Vicia villosa agglutinin en el hipocampo humano
normal y epilptico.
Blazquez-Llorca L, Alonso-Nanclares L y DeFelipe J
Dpto. Neuroanatoma y Biologa Celular. Instituto de Neurobiologa
Ramn y Cajal, CSIC. Avda. Doctor Arce, 37; Madrid -28002
La lectina Vicia villosa agglutinin (VVA) se une a glicoprotenas de la
superficie neuronal reconociendo azcares cuyo residuo terminal es Nacetilgalactosamina (GalNAc). Estudios previos en la corteza cerebral de
mono, rata, ratn y humano han revelado que marca una subpoblacin de
clulas GABArgicas/no-peptidrgicas que frecuentemente son parvoalbmina (PV)-positivas. Por otra parte, la existencia de alteraciones de las
clulas PV-positivas en la corteza epileptognica est ampliamente descrita, pero no as las interneuronas que expresan la lectina VVA. En el presente trabajo se ha estudiado la distribucin y colocalizacin con PV de
la subpoblacin neuronal reconocida por la lectina VVA en el hipocampo
humano normal, procedente de autopsias, y en el hipocampo epilptico
resecado de pacientes con epilepsia del lbulo temporal.
En el hipocampo normal, se ha observado que las interneuronas
marcadas con la lectina VVA se encuentran fundamentalmente en la capa
piramidal del subculo y de los distintos campos amnicos. Su presencia es
menor en la capa granular y molecular del giro dentado. En el hipocampo
esclertico se ha detectado una marcada disminucin de clulas VVA. El
estudio de colocalizacin con PV ha demostrado que dentro de la subpoblacin de clulas VVA-positivas el porcentaje de neuronas que colocaliza
con PV disminuye significativamente en el hipocampo esclertico. Por
otra parte, dentro de la subpoblacin PV-positivas el porcentaje de clulas que son VVA-positivas no vara significativamente entre el hipocampo
normal y epilptico. Estos resultados sugieren que las subpoblaciones PVpositivas/VVA-negativas, PV-positivas/VVA-positivas y PV-negativas/VVApositivas presentan una vulnerabilidad diferencial.

ACTIVACIN MOTORA PRODUCIDA POR LA ADMINISTRACIN INTRATEGMENTAL DE SALSOLINOL:
EFECTO DE LOS ANTAGONISTAS DE LOS RECEPTORES OPIOIDES DE TIPO
Luca Hiplito, Mara Jos Snchez-Cataln, Isabella Zanollini, Ana
Polache y Luis Granero
Departamento de Farmacia y Tecnologa Farmacutica, Universidad
de Valencia
El salsolinol es una tetrahidroisoquinolina (TIQ) resultante de la condensacin no enzimtica entre el acetaldehido (Ach) (principal metabolito del alcohol) y la dopamina (DA). En humanos alcohlicos, as como
en modelos animales de alcoholismo, se han demostrado incrementos
significativos de este compuesto en diversas reas del cerebro implicadas
en los trastornos adictivos. Nuestro grupo de investigacin ha puesto
de manifiesto en trabajos anteriores que la administracin localizada de
salsolinol en el ncleo accumbens (NAc) es capaz de modificar los niveles
de DA, probablemente a travs de un mecanismo que implica la activacin
de receptores opioides. Sin embargo, hasta la fecha no se ha demostrado
taxativamente su mecanismo de accin a nivel del sistema mesocorticolmbico. En el presente trabajo, se analizan los efectos comportamentales de la administracin unilateral en el rea tegmental ventral (VTA) de
diferentes dosis de salsolinol, que abarcan varios rdenes de magnitud
(310-13 a 310-9 moles), as como los efectos que el antagonista de los
receptores opioides tipo , CTOP (310-10 moles) ejerce sobre los cambios comportamentales observados. Los resultados se comparan con los
obtenidos tras la administracin del agonista selectivo de los receptores
, DAMGO (1.310-10 moles). Se analizan las siguiente variables comportamentales: distancia recorrida, giros contralaterales e ipsilaterales y
elevaciones verticales. Nuestros resultados demuestran que el salsolinol
produce un incremento significativo y dosis dependiente de todos los
parmetros analizados, de un modo anlogo al producido por la administracin del agonista DAMGO. La coadministracin del CTOP junto con
salsolinol, da lugar a una atenuacin significativa en los efectos. Nuestros
resultados muestran que las acciones del salsolinol a nivel del VTA, son
compatibles con una interaccin entre el salsolinol y los receptores opioides tipo ubicados en interneuronas gabargicas.

LA HOMOCISTENA INHIBE LA PROLIFERACIN
DE LOS PRECURSORES NEURALES IN VITRO MODULANDO LA VA DE SEALIZACIN DEL FGF.
Luis E. Garca-Rabaneda, Miguel A. Lpez-Toledano, Carmen Estrada, Carmen Castro.
rea de Fisiologa. Facultad de Medicina, Universidad de Cdiz. Cdiz.
Estudios epidemiolgicos han mostrado que los niveles elevados de
homocistena (Hcy) en el plasma constituyen un factor de riesgo independiente para el desarrollo de demencias de tipo neurodegenerativo.
Una de las dianas de accin de la Hcy podra ser la neurognesis, ya que
durante el desarrollo embrionario, la Hcy inhibe la proliferacin de los
precursores de las crestas neurales. Para estudiar si la Hcy ejerce un
efecto sobre los precursores neurales durante el periodo post-embrionario, se aislaron estos precursores de la zona subventricular de ratones postnatales (P7) y se mantuvieron en cultivo como neuroesferas En
presencia de los factores de crecimiento EGF y FGF, la adicin de Hcy al
medio disminuy de forma dosis-dependiente el tamao de las neuroesferas, sin afectar a su nmero. Este efecto no se observ en neuroesferas
mantenidas nicamente con EGF. En cultivos de precursores neurales adheridos sobre un sustrato en presencia de FGF, el tratamiento con Hcy
disminuy la cantidad de clulas proliferantes. En estos cultivos se estudi
la supervivencia celular y se cuantific el nmero de clulas apoptticas,
no encontrndose diferencias significativas en ninguna de las condiciones.
Estos resultados sugirieren que in vitro en presencia de FGF la Hcy inhibe
la proliferacin de los precursores neurales. Adicionalmente, se encontr
que en presencia de FGF la Hcy inhibe la fosforilacin de Erk1/2 y de
CREB, sugiriendo que la inhibicin de la proliferacin observada se debe
a la modulacin de la actividad de alguna de las molculas implicadas en la
va de sealizacin del FGF.

Rosiglitazona previene y revierte el dficit
cognitivo en un modelo animal de enfermedad de Alzheimer (EA): implicacin del receptor de glucocorticoides
L. Escribano Serrano, P. Salazar, A. M. Simn, L. Schiapparelli, R. Lpez de Maturana, J. Del Ro, D. Frechilla
Estudios clnicos preliminares sugieren que Rosiglitazona, agonista
PPAR, mejora el estado cognitivo en pacientes con EA. Sin embargo
el mecanismo por el que resulta efectivo an se desconoce. En este
estudio se analiz el efecto de Rosiglitazona sobre el estado cognitivo
de ratones que sobreexpresan la APP humana con las mutaciones sueca e indiana (TgSw-Ind) y la posible implicacin del receptor de glucocorticoides (GR). Empleando el test de reconocimiento de objetos el
tratamiento con Rosiglitazona no slo previene la aparicin de dficits
cognitivos (4 meses) sino que revierte el deterioro en animales adultos
(9 meses) con patologa ya establecida. La expresin y localizacin de
GR se analiz mediante triple inmunofluorescencia para GR-NeuN-TOPRO3. En ratones TgSw-Ind se observ, a ambas edades, una disminucin
de la inmunorreactividad para GR y de su localizacin nuclear en CA1,
CA3 y GD. Tan slo en animales adultos se observ un aumento de los
niveles plasmticos de corticosterona lo que sugiere que la disminucin
de GR y/o una patologa nuclear es el evento inicial responsable de los
cambios observados como consecuencia de una menor inhibicin de la
retroalimentacin negativa del eje HPA. A las dos edades consideradas
la administracin de Rosiglitazona previno y revirti la disminucin de
marcaje nuclear de GR as como el aumento de los niveles de corticosterona en animales adultos. Estos resultados sugieren que la regulacin
de la expresin de GR y de su adecuada localizacin puede contribuir a
explicar la mejora cognitiva obtenida con Rosiglitazona. (Financiado por
UTE proyecto FIMA, SAF2005-05086)
127

La sonrisa de la Mona Lisa y la estructura
de los campos receptores en el ncleo geniculado lateral del tlamo.
Luis M. Martinez 1, Fritz T. Sommer2 y Judith A. Hirsch3
1Instituto de Neurociencias. CSIC-Universidad Miguel Hernndez. 03550 Sant Joan dAlacant. 2Redwood Center for Theoretical
Neuroscience, University of California Berkeley, Berkeley, CA, USA.
3Dept Biological Sciences, University of Southern California, Los
Angeles, CA, USA.
Los campos receptores (CRs) del tlamo (NGLd) con centro y periferia de simetra circular, concntrica y respuestas antagnicas a estimulacin visual, suelen considerarse una recapitulacin de sus antecedentes
retinianos. Nuestros resultados, sin embargo, muestran que los CRs talmicos presentan ciertas peculiaridades con importantes implicaciones
funcionales.
Registramos intracelularmente 45 clulas tlamicas. Las respuestas
evocadas desde el centro del CR presentan una estructura push-pull
estmulos de luminancia opuesta (blanco/negro) producen respuestas
sinpticas antagnicas (excitacin/inhibicin). La excitacin y la inhibicin,
sin embargo, se modulan de forma diferente ante cambios en el contraste del estmulo, la distancia al area centralis y el curso temporal de
la respuesta. El centro excitador crece con la excentricidad, mientras el
centro inhibidor permanece, en promedio, constante. A altos contrastes,
el centro excitador se reduce, disminuyendo su latencia y curso temporal, mientras el centro inhibidor aumenta su tamao y duracin. Las
respuestas desde la periferia del CR fueron ms variables, asimtricas y
mostraron una mayor latencia y umbral al contraste.
Estas asimetras sinpticas en los CRs talmicos guardan una clara
relacin topolgica con la estructura del mosaico de clulas ganglionares
en la retina y la posicin en el espacio visual. Adems, predicen los sesgos
en la respuesta a estmulos de distintas orientaciones y revelan cmo
estas neuronas adaptan sus respuestas a distintos niveles de iluminacin.
Finalmente, la dinmica espacio-temporal de estos CRs podra explicar
nuestra percepcin de estmulos visuales ambiguos, como por ejemplo
la sonrisa de la Mona Lisa. Financiado por NIHR01EY09593 (JAH), CSIC200620I235 y BFU2006-28429-E/BFI (LMM).

LA TAURINA POTENCIA LOS RECEPTORES NMDA
PRESINPTICOS EN LOS AXONES DE LAS COLATERALES DE SCHAFFER.
Surez, L.M., y Sols, J.M
Servicio de Neurobiologa, Depto. de Investigacin, Hospital Ramn
y Cajal, Madrid.
Trabajos previos en nuestro laboratorio demuestran que la activacin de los receptores NMDA presinpticos aumenta la amplitud del potencial de fibra poblacional en los axones de las colaterales de Schaffer
en rodajas de hipocampo de rata, por un mecanismo independiente del
Ca2+ extracelular. En el presente trabajo, comparamos la farmacologa de
dichos receptores respecto a los NMDA-R postsinpticos. La potenciacin provocada por NMDA en los receptores presinpticos es completamente inhibida por un antagonista de la subunidad NR2A, pero no por un
antagonista de la subunidad NR2B. Un inhibidor de la unin de glicina al
NMDA-R, el cido 7-clorokinurnico, es ms potente frente al NMDA-R
postsinptico que sobre el NMDA-R presinptico. Ambos receptores son
potenciados por glicina y D-serina, pero taurina, un anlogo endgeno de
glicina, nicamente modula la activacin de los receptores presinpticos.
Por otra parte, taurina es capaz de desplazar el efecto inhibidor del 7clorokinurnico a bajas concentraciones del mismo, mientras que glicina
y D-serina lo hacen a altas concentraciones. Curiosamente, el efecto potenciador de taurina sobre los NMDA-R presinpticos se bloquea cuando
se aplica conjuntamente con glicina.
El glutamato liberado sinpticamente mediante un tren de estmulos,
tambin aumenta la amplitud del potencial de fibra poblacional, por un
mecanismo dependiente de los NMDA-R. Este efecto se potencia en presencia de taurina y se bloquea cuando se aplican conjuntamente taurina
y glicina.
128
Estos resultados demuestran que los receptores NMDA presinpticos tienen propiedades nicas que median la facilitacin de la excitabilidad del axn. Financiado por el proyecto FIS PI051194

La sntesis local de protenas controla la
sensibilidad nociceptiva en neuronas sensoriales primarias
Lydia Jimnez Daz1,4, Sandrine M. Granton1,2, Amy S. Fisher1,
J. Lianne Leith3, Laura Berliocchi1,2,5, Anand K. Sivasubramaniam1,
Bridget M. Lumb3 and Stephen P. Hunt 1,2
1Department of Anatomy and Developmental Biology, University
College London, WC1E 6BT, UK; 2London Pain Consortium; 3Department of Physiology, University of Bristol, BS8 1TD, UK; 4Dpto.
Fisiologa y Farmacologa, Facultad Medicina, Instituto Neurociencias
Castilla y Len, Universidad de Salamanca, 37007, Spain; 5IRRCS
C. Mondino, Center of Experimental Neurobiology Mondino-Tor
Vergata, Rome, Italy.
La regulacin local de la traduccin de RNA mensajeros en axones
se ha implicado en procesos de plasticidad neuronal y de sealizacin de
dao axonal hacia el ncleo. Usando inmunohistoqumica en tejido cutneo de rata encontramos una subpoblacin de fibras sensoriales mielinizadas que contienen la quinasa mammalian target of rapamycin (mTOR) y
otros componentes de la maquinaria para la sntesis proteca, incluyendo
la protena de unin al factor de iniciacin de la traduccin eucariotica
4E (4EBP1) y la quinasa p70S6 (p70S6K), ambas dianas de mTOR. Anlisis
electrofisiolgicos y conductuales identificaron especficamente un papel
para la traduccin local -axonal- en el mantenimiento de la sensibilidad
de los nociceptoresA. La rapamicina es un inhibidor de la actividad de
mTOR, que redujo la fosforilacin de 4EBP1 y p70S6K en tejido cutneo.
Estudios electrofisiolgicos mostraron que la inyeccin de rapamicina en
la pata trasera provoca una disminucin local de la respuesta a la estimulacin con calor en las fibrasA pero no en las fibrasC. Adems, la
hiperalgesia mecnica secundaria, mediada por nociceptoresA y que se
desarrolla en tejido intacto alrededor del sitio de inyeccin de capseicina,
tambin se redujo con pre-tratamiento con rapamicina. Igualmente, la rapamicina disminuy la elevada respuesta a la estimulacin mecnica que
se desarrolla en un modelo de dolor neuroptico de seccin parcial del
nervio citico. En resumen, en este estudio mostramos que la sensibilidad
de un grupo de fibras sensoriales se mantiene por sntesis local de protenas y proponemos una nueva ruta para el control del dolor crnico y
agudo. Financiado por Wellcome Trust 065374 y JCI-2005-1775-25 MEC.

La paradoja 5-HT1A: Por qu la serotonina
inhibe y la 8-OH-DPAT activa neuronas piramidales de corteza a travs de receptores
5-HT1A?
Laia Llad, Francesc Artigas, Pau Celada
Departmento de Neuroqumica y Neurofarmacologia, IIBB-CSIC
(IDIBAPS), 08036 Barcelona
Los receptores 5HT1A de corteza prefrontal (CPF) juegan un papel
importante en la mejora cognitiva que producen los frmacos antipsicticos atpicos en pacientes esquizofrnicos. Estos receptores se expresan
en 50-60% de neuronas piramidales y 20-30% de interneuronas GABArgicas de CPF de rata (Santana et al., Cereb Cortex 2004)1. La serotonina
endgena inhibe las neuronas piramidales de CPF va receptores 5-HT1A
(Amargs-Bosch et al., Cereb Cortex 2004) mientras que la administracin sistmica de agonistas 5-HT1A paradjicamente aumenta su actividad (Daz-Mataix et al., Eur Neuropsychopahrmacol 2006).
En este estudio valoramos la posible implicacin de los receptores
5-HT1A de interneuronas GABArgicas en el efecto de 8-OH-DPAT,
agonista prototpico de los receptores 5-HT1A, registrando neuronas piramidales de CPF en condiciones control y tras el bloqueo de los receptores GABAA locales mediante bicuculina, presente en el electrodo de
registro extracelular. 8-OH-DPAT (0.75-80 g/kg i.v.) produjo patrones
de respuesta bifsicos en la situacin control (n = 32). La presencia de bi-

cuculina aument un 43% la frecuencia de descarga basal (n.s.; n = 20) y el
porcentaje de descargas en rfagas (65%, p < =.01, n = 20). La presencia de
bicuculina tambin alter las respuestas frente a 8-OH-DPAT reduciendo
el nmero de inhibiciones y insensibilizando las neuronas frente 8-OHDPAT (p < 0.01; X2). El anlisis del potencial de campo tambin revel
una interaccin entre bicuculina y 8-OH-DPAT. Estos resultados apoyan la
hiptesis de que los receptores 5-HT1A en interneuronas GABArgicas
estn implicados en los efectos de la administracin sistmica de 8-OHDPAT en neuronas piramidales de CPF.

Aprendizaje de orientacin espacial en machos y hembras: metabolismo oxidativo y
expresin de protenas c-Fos.
Magdalena Mndez-Lpez; Marta Mndez, Laudino Lpez, Jorge
L. Arias.
Laboratorio de Psicobiologa, Facultad de Psicologa, Universidad
de Oviedo.
Las diferencias sexuales en el aprendizaje espacial se han relacionado
con cambios en regiones cerebrales que componen el circuito de Papez.
Nuestro objetivo es comparar el metabolismo oxidativo y la inmunoreactividad c-Fos en regiones del hipocampo dorsal, tlamo anterior y cuerpos
mamilares de ratas Wistar jvenes macho y hembra tras el aprendizaje de
memoria de trabajo en el laberinto de Morris. Grupos controles de cada
sexo se emplean para aislar el efecto de la tarea en las medidas obtenidas.
El protocolo de entrenamiento es un emparejamiento a la muestra con
dos ensayos idnticos, muestra y retencin, modificados en los das. Los
resultados conductuales muestran que ambos grupos adquieren la tarea,
aunque los machos alcanzan antes el criterio de aprendizaje, una latencia de retencin significativamente inferior a la muestra (p<0,033) y a la
retencin de la primera sesin de aprendizaje (p=0,005). El metabolismo
oxidativo medido a travs de la actividad citocromo oxidasa (CO) muestra que los machos del grupo aprendizaje mantienen un nivel de actividad
significativamente inferior en regiones del tlamo anterior y ncleo mamilar medial, mientras que en las hembras esta disminucin afecta a CA1 hipocampal. La expresin c-Fos se ve incrementada significativamente en las
hembras principalmente en regiones hipocampales, mientras que en los
machos lo hace en regiones del tlamo anterior. Ambos sexos muestran
un incremento de la actividad c-Fos en el mamilar medial y lateral. Estos
resultados sugieren diferencias sexuales en el funcionamiento cerebral
asociado al aprendizaje espacial. (Realizado con la ayuda SEJ2004-07445
del M.E.C.)

LA PROTENA QUINASA C MODULA LA NEUROTRANSMISION EN LAS SINAPSIS NEUROMUSCULARES POLIINERVADAS DEL NEONATO
M. Santaf Martnez, N Garcia., M.A. Lanuza, and J.Toms
Unitat dHistologia i Neurobiologia (UHN), Facultat de Medicina
i Cincies de la Salut, Universitat Rovira i Virgili, carrer St. Lloren
num 21, 43201-Reus, SPAIN
En el periodo postnatal, en todo el sistema nervioso tiene lugar
una poliinervacin transitoria, competicin entre axones y subsiguiente
eliminacin sinptica. Mediante registros intracelulares convencionales,
estudiamos cmo la actividad de la protena quinasa C (PKC) afecta a
la neurotransmisin en las sinapsis mono- y doblemente-inervadas del
msculo Levator auris longus de ratas neonatas. En las fibras musculares
doblemente inervadas, un segundo potencial evocado (EPP) puede aparecer despus de un primero al aumentar la intensidad del estmulo. A los
terminales nerviosos que generan la menor amplitud de EPP les denominamos axones dbiles y a los terminales que generan los EPP mayores
axones potentes. El bloqueo de PKC con calfosteina C, estaurosporina
o celeritrina incrementa la amplitud de respuesta de los axones dbiles
(~ 80 %), mientras que no se modifica el tamao de los EPP generados
por los potentes. El bloqueo de PKC tambin conduce al reclutamiento
de sinapsis silentes a cuyos axones denominaremos axones reclutados (la
liberacin de acetilcolina estaba impedida antes del bloqueo de su PKC).
As, el nmero medio de los terminales funcionales por sinapsis aumenta
en un ~ 47 % tras el bloqueo de PKC. El conjunto de los resultados obtenidos sugiere que una PKC axonal puede modular la eliminacin sinptica postnatal favoreciendo la desconexin del terminal nervioso de los
axones ms dbiles. Concluimos que un mecanismo mediado por PKC
debe ocupar un lugar esencial en la eliminacin neonatal de las sinapsis
redundantes ya que la silenciacin funcional del axn se puede incluso
revertir bloqueando su PKC.

Regulation of intracellular dopamine D2
receptor trafficking
M.F. Lpez-Aranda, E Blanco-Calvo, JF Lpez-Tllez, M. MasmudiMartn, I Navarro-Lobato, A Gutirrez, ZU Khan
University of Malaga, 29071-Malaga, Spain: 1-Neurobiology Lab.,
CIMES, Faculty of Medicine. 2-Department of Cell Biology,Faculty
of Science.
Treatment of cells expressing D2 receptors with specific drugs upregulates the receptor number at cell surface independent of protein
synthesis, leading to the concept of an intracellular receptor pool. However to date, how this pool operates remains an enigma. Here, we report
that a splice variant of Gai2 protein called sGi2 plays a crucial role in the
maintenance of this D2 receptor pool. Co-expression of sGi2 with D2 in
cells reduced the receptor localization to cell surface by one third. This
effect was associated with specific intracellular protein-protein interaction and D2-sGi2 complex formation. It is suggested that the formation
of this complex serves to prevent D2 receptors from reaching the cell
membrane. Further, a treatment of these cells with agonists increased the
number of cell surface D2 receptors, coinciding with a reduction in these
receptors from intracellular complexes, suggesting that agonist treatment
might have released D2 receptors from the complex, which were then
localized to the cell membrane. Thus, in addition to elucidating how the
intracellular pool of D2 receptor functions, our findings uncover a novel
mechanism in the regulation of cell surface D2 receptor density.
Manuel F. Lpez-Aranda, Maria J. Acevedo, Antonia Gutierrez, Peter
Koulen and Zafar U. Khan (2007) Splice variant of Gai2 protein in the
formation of intracellular dopamine D2 receptor pool. Journal of Cell
Science. Accepted.

The key role of olfactory sensory neurons in the sense of smell: a review
Manuel Zarzo Castell.
Universidad Politcnica de Valencia. Camino de Vera s/n, edificio I-3,
46022 Valencia
Since the 1940s different theories have speculated on the fundamental basis of olfaction. It was basically assumed that odorant molecules
were recognized by selective protein receptors in the nose, triggering
a nervous signal processed by the brain. The discovery of these receptors in the early 1990s (Buck and Axel, 1991) allowed great progress in
understanding the physiological and biochemical principles of mammalian
olfaction. It is now well established that each olfactory sensory neuron
expresses only one member of the olfactory receptor gene family. The
axons of these neurons expressing the same type of receptor converge
to only one of a few of some 2000 glomeruli, forming a highly organized
topographic map on the surface of the olfactory bulb. Experimental studies have reported that a given odorant activates a set of glomeruli, while
different odorants activate overlapping but non-identical patterns of
glomeruli, resulting in a combinatorial coding scheme for odorant recognition. Despite the enormous progress achieved in recent years, details of
odorant-receptor interaction at the molecular level and the mechanisms
of olfactory receptor activation are still poorly understood. Actually, it is
still uncertain how the olfactory system is able to discriminate molecules
with a nearly identical shape, though in some cases very different molecules may produce similar odors. The work presented here highlights
the main outcomes of a paper accepted for publication (Zarzo, 2007) that
reviews the underlying mechanisms involved in the coding of odor character, focusing on the biochemical basis of odorant recognition. Zarzo, M.
(2007) The sense of smell: molecular basis of odorant recognition. Biological Reviews (in press).
129
CAMBIOS EN LOS NIVELES DE EXPRESIN Y EN LA

ACTIVIDAD DEL CANAL ANINICO DEPENDIENTE
DE VOLTAJE (VDAC) EN UN MODELO TRANSGNICO DE ENFERMEDAD DE ALZHEIMER
EFECTOS DE LA ADAPTACIN VESTIBULAR CRNICA SOBRE LAS PROPIEDADES DE DISPARO DE LAS

CLULAS TNICO FSICAS DEL NCLEO INTERSTICIAL DE CAJAL
Marcos Vilario Camen, Cuadrado-Tejedor, D Frechilla., J. Del Ro,

A. Prez-Mediavilla
rea de Neurociencias, CIMA, Universidad de Navarra, Pamplona,
Espaa
M.A. Davis-Lpez de Carrizosa 1,2; P.M. Blzquez 1; A.M. Pastor

2; S.M.
1. Otolaryngology Department, Washington University, St. Louis,
MO, USA 2. Dpto. de Fisiologa y Zoologa, Universidad de Sevilla,
Sevilla, Espaa
En un anlisis protemico realizado en nuestro grupo en hipocampo

de ratones Tg2576, se encontraron diferencias en la expresin de protenas, entre las que se identific la isoforma-1 del canal aninico voltajedependiente (VDAC1).VDAC1 forma parte de un canal mitocondrial, que
participa en el trfico entre la mitocondria y el citoplasma, y se encuentra
implicado de forma activa en procesos como la homeostasis del calcio, el
estrs oxidativo y la apoptosis celular. Basndonos en la relacin existente
entre los niveles elevados del pptido -amiloide (A) y las disfunciones
mitocondriales descritas en la enfermedad de Alzheimer (EA), en el presente estudio, se analiz la expresin y la actividad de la protena VDAC1
en la lnea Tg2576. Esta lnea transgnica sobreexpresa la protena precursora del amiloide humana con la mutacin sueca, y reproduce parte de
las caractersticas clnicas y patolgicas de la EA en humanos. A los dos
meses de edad, a la que estos animales no presentan niveles elevados de
A ni dficit cognitivo, no se han observado cambios en la expresin de
VDAC1 ni en su actividad. Sin embargo a edades ms avanzadas (12-17
meses), en las que existen niveles elevados de A, dficit cognitivo y placas de amiloide, hemos encontrado cambios tanto en su expresin como
en su actividad cuando se comparan con animales control de la misma
edad. Estos resultados indican que, al menos en parte, la toxicidad atribuida a la sobreproduccin de A puede estar mediada por una modificacin
del canal VDAC1. Financiado por UTE-FIMA y GN12496.

PAPEL DEL RECEPTOR CANNABINOIDE CB1 EN LA
VA APOPTTICA EXTRNSECA MEDIADA POR EL
COMPLEJO FAS/FADD EN CEREBRO DE RATN.
M. Alvaro Bartolome, S. Esteban(A), A. Miralles(A), C. Ledent(B), O.
Valverde(C), J.a. Garca-sevilla(A)
(A) Laboratorio de Neurofarmacologa, Iunics, Universidad de las
islas Baleares, 07122 Palma de Mallorca. (B)iribhm B-1070 Bruselas. (C)Grup de recerca de Neurolobiologia del Comportament,
Universitat Pompeu Fabra 08003 Barcelona
Los cannabinoides son capaces tanto de evitar como de inducir
muerte neuronal (1). Se analiz el papel del receptor CB1 en la modulacin de elementos clave de la va del receptor Fas (CD95 o APO-1), agregados y formas glicosiladas, y la protena FADD (Fas-associated protein
with death domain) en cerebro de ratones con deficiencia gentica del
receptor CB1 (CB1 KO), mediante tcnicas inmunolgicas cuantitativas
(Western blot). En los ratones CB1 KO, no se observaron cambios en la
forma nativa de Fas (~35 kDa) en ninguna regin estudiada. Sin embargo,
se observ una disminucin en los agregados (~203/116 kDa) en corteza
cerebral (18 %, p<0,05, n=8) y cerebelo (18 %, p<0,05, n=8) y una reduccin en las formas glicosiladas (~51/48/45 kDa) slo en corteza (9 %,
p<0,05, n=8). Adems, la protena FADD disminuy en la corteza cerebral
(20 % , p<0,05, n=8). Estos resultados podran indicar la existencia de un
tono basal estimulatorio del receptor CB1 sobre la va apopttica extrnseca mediada por el complejo Fas/FADD. Sin embargo, el tratamiento agudo con el agonista cannabinoide WIN 55,212-2 (1 mg/kg, i.p., 1h) produjo
cambios similares a los observados en los ratones CB1 KO (2), redujo la
forma nativa del receptor, agregados y formas glicosiladas (17 %, 14 % y
19 % respectivamente, p<0,05, n=8) en corteza, mientras el antagonista
cannabinoide AM281 (10 mg/kg, i.p., 4 dias, n=9) no indujo cambios en Fas
pero increment FADD (24%, p<0,05, n=9). En conjunto, los resultados
sugieren una regulacin heterloga tras la deleccin del receptor CB1. (1)
Guzman M. et al. Pharmacol Ther. 95: 175-184 (2002); (2) Zimmer A. et al.
PNAS 96: 5780-5785 (1999).
130
El reflejo vestbulo ocular (RVO) genera movientos oculares compensatorios durante movimientos de cabeza. Su entrada sensorial codifica
velocidad de cabeza, que es enviada al SNC a travs de una va directa
que mueve los ojos en velocidad y una va indirecta, donde la seal de
velocidad se integra a una seal de posicin. El aprendizaje motor a largo
plazo modifica la ganancia del RVO (velocidad de ojo/velocidad de cabeza)
pero no la fase, sugiriendo que los cambios de ganancia implican cambios
en la informacin que viaja a travs de ambas vas. Con el fin de evaluar
los cambios que se producen la va indirecta, estudiamos la respuesta
de neuronas en el Ncleo Intersticial de Cajal tras el aprendizaje motor
crnico del RVO. Encontramos diferencias significativas en la sensibilidad
neuronal a la posicin y velocidad ocular de poblaciones tnico fsicas
con direccin preferente de disparo en movimientos oculares haca abajo.
Estos resultados sugieren que el aprendizaje motor produce cambios en
el circuito de integracin del RVO, y que los mecanismos implicados en la
adaptacin haca alta y baja ganancia son diferentes. Adicionalmente, nuestros datos sugieren el aprendizaje no afecta a la eficacia de la integracin,
ya que su constante de tiempo, medida como la sensibilidad a la velocidad
ocular vs. la sensibilidad a la posicin ocular, no cambia.
Blzquez PM, et al. (2003) J. Neurosci. 23: 9742-9751.; Blzquez PM, et al. (2006) J.
Neurophysiol. 95: 1812-1825.

Reconstruction of the nigrostriatal pathway in neuroregenerative strategies
for Parkinsons disease
M. Carmen Flez, Francisco J Sancho-Bielsa, Cristina Martnez, Vronique Benavent, Manuel Salmern, Jos L. Gmez-Ribelles, Mara J
Cataln, Roco Garca-Ramos, Jorge Matas-Guiu, Jos M. Soria, Manuel
Monlen, Jos M. Garca-Verdugo, Juan A. Barcia.
Centro de Investigacin Prncipe Felipe de Valencia. Instituto de
Neurociencias. Hospital Clnico San Carlos. Universidad Complutense. Madrid.
Background: Cell therapy applied to neurologic diseases requires, besides the survival and differentiation of implanted cells, the growth and
functional reconnection of neurites. In the case of Parkinsons disease, this
implies to find an adequate support for the axonal growth from the dopaminergic cells at the substantia nigra compacta (SNc) to the striatum.
Materials and methods: We have developed a method to stereotactically implant a graft bridging the substantia nigra and the striatum. After
in vitro studies for proper biomaterial selection, we used grafts from
peripheral nerve or biomaterials to bridge the gap between the SNc and
the striatum in normal rats, and also in rats subjected to axotomy of the
median forebrain bundle or to the 6-OHDA model.
Results: We have selected the adequate biomaterials (chemical composition, hidrophilia, pore size) to support axonal growth in vitro among
several biocompatible candidates. In vivo, grafts are invaded by TH-positive axons coming from the SNc, which grow up to the striatum.
Discussion: The reconstruction of the nigrostriatal pathway may be
possible with the aid of bridging grafts, and this may have important implications in cell therapy for Parkinsons disease.

Acute treatment with isoflavone-type

phytoestrogens protects against ischemic stroke in rats
Distribucin de los terminales axnicos

de las clulas en candelabro en el telencfalo de ratn
Castello-Ruiz M (1), Torregrosa G (1,2), Burguete MC (2), Salom JB

(1,2), Alborch E(1,2)
(1)Hospital La Fe, Centro de Investigacin. (2)Departamento de
Fisiologa, Universitat de Valncia.
Inda MC.1, DeFelipe J.2, Muoz A.1

1 Universidad Complutense de Madrid. 2 Instituto Cajal (CSIC)
Phytoestrogens are naturally ocurring plant metabolites with estrogen-like structure and/or actions. Since phytoestrogens have been shown
to have beneficial effects on the central nervous system, we assessed
the hypothesis that isoflavone-type phytoestrogens could protect against
ischemic stroke. For this purpose, a transient focal cerebral ischemia (90
min) was induced by middle cerebral artery occlusion (MCAO) following
the intraluminal thread technique in Wistar male rats feed with an isoflavone free-diet. Thirty minutes after reperfusion, rats received an intraperitoneal injection (1 mg Kg-1) of one of the following phytoestrogens: genistein, daidzein and biochanin A. At the same time an Alzet osmotic pump
was placed intraperitoneally to deliver a constant dose (42 mg Kg-1 h-1)
of the same phytoestrogen injected. Cerebro-cortical laser-Doppler flow
(cortical perfusion, CP), arterial blodd pressure, core temperature, PaO2,
PaCO2, pH and glycemia were measured before, during and after MCAO.
Neurological examination and infarct volume measurements were carried
out 3 days after the ischemic insult. Neither pre-ischemic, intra-ischemic
nor post-ischemic CP values were different between control and phytoestrogen-treated rats. Neurological examination revealed an improvement with genistein, daidzein or biochanin A treatments. Our results
also showed a reduction trend of the ischemia-induced cerebral infarct.
Genistein treatment significantly reduced the infarct volume compared
with the control group (157% vs 289%, P< 0.05). Together, these findings indicate that acute treatment with isoflavone-type phytoestrogens
improve stroke outcome after transient focal cerebral ischemia. Partially
supported by grants PI030323 and RD06/0026/0006 (Retics RENEVAS),
from Instituto de Salud Carlos III, Fondo de Investigacin Sanitaria.

Sinergia, redundancia e independencia en
cdigos poblacionales desde el punto de
vista de una neurona receptora.
M.L. Morales Botello1; J. Aguilar1, A. Scaglione2, K. A. Moxon2, G.
Foffani1,2
1 Hospital Nacional de Parapljicos, Finca la Peraleda s/n, 45071
Toledo. 2 School of Biomedical Engineering, Science and Health
Systems, Drexel University, 3141 Chestnut Street, Philadelphia, PA
19104, USA
El problema de cmo las correlaciones en la variabilidad de la actividad neuronal, llamadas noise-correlations, afectan a la computacin
en poblaciones de neuronas, puede estudiarse desde dos perspectivas
metodolgicas fundamentales: el encoding y el decoding. El encoding
consiste en medir directamente la contribucin de informacin de las
noise-correlations en la actividad neuronal. El decoding consiste en evaluar si asumir ausencia de noise-correlations afecta a la habilidad de extraer informacin desde la actividad neuronal. Estas dos perspectivas han
llevado a importantes desacuerdos. Nosotros proponemos una perspectiva conciliadora, que consiste en medir la contribucin de informacin de
las noise-correlations usando decodificadores con significado fisiolgico.
Hemos aplicado esta perspectiva al problema terico de deteccin por
umbral desde el punto de vista de una neurona receptora. Hemos estudiado el problema tanto analticamente, modelando las distribuciones de
probabilidad, cmo numricamente, mediante un modelo computacional
integrate-and-fire. Nuestros resultados muestran que las noise-correlations pueden tanto aumentar (sinergia) como disminuir (redundancia) la
informacin transmitida a neuronas receptoras, dependiendo fundamentalmente de un parmetro: el umbral de la neurona receptoras. Fondo
de Investigacin Sanitaria del Instituto de Salud Carlos III (PI05 2322 y
CP05/00311); Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha Consejera de
Sanidad (06056-00) y Consejera de Educacin y Ciencia (PAI06-0104).
Las clulas en candelabro son el nico tipo de interneuronas de la

corteza cerebral cuyos terminales axnicos (terminales-Ch) forman sinapsis exclusivamente con el segmento inicial del axn (AIS) de las clulas
principales. La existencia de los terminales-Ch se ha descrito previamente en diversas reas telenceflicas del ratn, pero se desconoce su
abundancia relativa y los patrones de distribucin especficos en cada
rea. En este estudio hemos analizado la relacin existente entre los terminales-Ch y los AISs mediante tinciones immunohistoqumicas contra
el transportador de GABA GAT-1 y la forma fosforilada de la protena
inhibidora del factor de transcripcin NF-Ba (pIB). Los resultados
indican la existencia de una robusta inervacin de los AISs por los terminales-Ch en reas paleocorticales (corteza piriforme) y archicorticales
(corteza entorrinal, ectorrinal y campos amnicos del hipocampo). En
la neocorteza, existen importantes diferencias en la distribucin de los
terminales-Ch entre las distintas reas y capas siendo, en general, ms
abundantes en reas asociativas que en eras sensitivas y motoras. En el
complejo claustroamigdalino se identificaron terminales-Ch en estructuras derivadas del pallium ventral y lateral, pero no en los derivados
del subpallium. Estas diferencias indican una importante variabilidad en
la densidad de los contactos GABArgicos inhibitorios sobre el AIS de
las neuronas principales, que podra estar relacionada con los diferentes
atributos funcionales de las distintas regiones analizadas.

LATENCIA DE LA RESPUESTA VISUAL Y MOTORA
EN EL APRENDIZAJE ASOCIATIVO
Mara del Carmen Romero Pita, Adrin Fernndez Castro, Mara
lvarez Bermdez, Rogelio Prez, Francisco Gonzlez
Departmento de Fisiologa, Facultad de Medicina, Universidad de
Santiago de Compostela
Todo aprendizaje implica el establecimiento de relaciones temporales entre un estmulo seal y la respuesta que desencadena. El STS y la
amgdala, claves para el reconocimiento de formas, y los ganglios basales,
implicados en la coordinacin del movimiento, son estructuras tiles para
estudiar este fenmeno en el sistema visual. En este trabajo, se analiz
la respuesta de estas regiones en 2 monos despiertos, entrenados para
realizar una tarea de reconocimiento facial. 316 clulas en el STS, y 130
en la amgdala, resultaron sensibles al estmulo (ANOVA, p<0.05), mientras 46 clulas en el caudado, y 37 en el putamen, mostraron sensibilidad
al movimiento (ANOVA, p<0.05). En las reas visuales, la latencia media
de respuesta fue de 130.2 ms en el STS y 155.3 ms en la amgdala, con
diferencia significativa entre ambas (ANOVA, p<0.05). En los ncleos motores, se calcul el inicio de la respuesta motora, obteniendo tiempos
medios de -135.4 ms en el ncleo caudado y -142.7 ms en el putamen, sin
diferencias significativas(ANOVA, p<0.05). No se observ un incremento
significativo de la respuesta visual frente a las caras recompensadas. Los
datos preliminares confirman que la seal visual es procesada en la corteza (STS) antes de ser enviada a la amgdala, donde tienen lugar anlisis ms
complejos. Adems, por su distancia temporal a los ganglios basales, STS
y amgdala parecen irrelevantes para la decisin motora. Subvencionado
por el MEyC (BFU2004-01839) y FEDER.
131

CAMBIOS MORFOLGICOS Y FUNCIONALES INDUCIDOS POR LA ADMINISTRACIN DE ANTICUERPOS ANTI-GM2 EN EL NERVIO CITICO DE RATAS
Sabat Martnez M.M*, Ortiz N.**, Santaf M.M*., Garcia N.*,
Lanuza M.A.*, Castro A**,Toms J*.
* Unitat dHistologia i Neurobiologia (UHN), Facultat de Medicina
i Cincies de la Salut. Universitat Rovira i Virgili, C/ St Lloren n. 21,
43201 Reus- Tarragona. ** Secci de Neurologia, Hospital Universitari Sant Joan, C/ St. Joan s/n. Reus-Tarragona.
A) Los anticuerpos anti-ganglisido se han implicado en la patognesis de enfermedades neuromusculares. En un estudio previo demostramos que los anticuerpos IgM anti-ganglisido de un paciente con una
polineuropata crnica desmielinizante, que reconocen los ganglisidos
GM2, GD1a-GalNac y GM1b-GalNAc, producen un bloqueo de la neurotransmisin. En ste investigamos los efectos de estas IgM en el nervio
perifrico de rata.
B) Mediante tcnicas de registro electrofisiolgico clsico se hicieron
neurografas motoras en los nervios citicos de ratas adultas inyectados
con: 1) IgM anti-GM2, purificadas del paciente; 2) IgM anti-GM2 ms complemento humano; 3) suero control humano. Se ha encontrado un 14 %
de disminucin en la amplitud de los potenciales de accin compuestos
(CMAPs) del msculo plantar en los nervios inyectados con las IgM del
paciente ms complemento, comparado con los nervios tratados nicamente con las IgM o con suero control (p< 0.05).
C) Por immunohistoqumica se localiz GM2 y se comprob la activacin del complemento humano en nervio perifrico. La activacin de
complemento se da exclusivamente en los nervios citicos inyectados
con las IgM ms complemento humano.
D) Mediante microscopa electrnica se evaluaron cambios ultraestructurales de los nervios perifricos inyectados con los diferentes sueros. En los nervios con anti-GM2 ms complemento humano se detect
signos de destruccin axonal y mielnica.
El conjunto de estos resultados muestra que las IgM anti-ganglisidos
en presencia de complemento (pero no la IgM purificada por si misma)
producen anomalas de la conduccin en los nervios perifricos que pueden estar provocadas por lesin axonal o mielnica.

Aprendizaje asociativo in vivo en ratones
transgnicos APP, PS1 y APP+PS1. Efecto de la
edad.
M.D. Muoz Araujo, J.C. Lpez-Ramos*, J.M. Delgado-Garca*, A.
Gruart*
*Divisin de Neurociencias, Universidad Pablo de Olavide, 41013Sevilla, Espaa. Departamento de Investigacin, Hospital Ramn y
Cajal, 28034-Madrid, Espaa.
Ratones salvajes, transgnicos (APP, PS1) y doble transgnico (APPPS1) fueron estudiados en en dos diferentes periodos de edad (3 y 18
meses). Los ratones transgnicos de ambas edades mostraron una respuesta refleja del cierre del prpado, al igual que los animales controles.
Solamente los animales jvenes fueron capaces de adquirir el condicionamiento clsico de la respuesta de cierre del prpado usando un paradigma de aprendizaje de traza. A pesar de que los animales controles
de 18 meses, al igual que los transgnicos de 18 meses, presentaron una
activacin sinptica normal de las clulas piramidales de CA1, cuando se
estimul la va comisural-colaterales de Schaffer, no mostraron ninguna
potenciacin actividad-dependiente de la va CA3-CA1 a lo largo de las
sesiones de condicionamiento, como as lo hicieron los ratones controles
de 3 meses. Adems, los animales de 18 meses tanto controles como
transgnicos presentaron un dficit de la LTP (potenciacin de larga duracin), in vivo, en la va CA3-CA1. Ambos grupos de animales tambin
presentaron un deficit en la inhibicin prepulso, comparada con la provocada en los animales controles de 3 meses. Salvo para los resultados habidos en los protocolos de inhibicin prepulso, los dficits mencionados
anteriormente no fueron relacionados con la presencia de deposiciones
beta amiliodes. Proponemos que los cambios funcionales que afectan los
procesos de aprendizaje y memoria estn ocasionados por la edad de los
132
animales controles y transgnicos y que las alteraciones estructurales y/o

funcionales no estn directamente relacionadas con las manipulaciones
genticas y/o la presencia de placas amiloides.

CARACTERIZACIN INMUNOHISTOQUMICA DE
LA SVZ DE MACACA FASCICULARIS
Mara Duran-Moreno, Sara Gil-Perotin, Silvia Belzunegui, Rosario
Luquin, Jose Manuel Garcia-Verdugo
Laboratorio Neurobiologa Comparada (ICBIBE)- Universidad de
Valencia- Paterna (Valencia). Laboratorio de Terapia Regenerativa.
Departamento de Neurologa. Centro de Medicina Aplicada a la
Investigacin. Universidad de Navarra (Pamplona). Centro de Investigacin Prncipe Felipe (Valencia)
En las ltimas dcadas la existencia de neurognesis adulta ha sido
demostrada en vertebrados mamferos, incluidos roedores, conejos, vacas, primates y humanos. Uno de los centros de proliferacin ms ampliamente estudiados, origen de estas nuevas neuronas, es la zona subventricular (SVZ), capa que junto con el epndimo tapiza los ventrculos
laterales. Nuestro grupo ha descrito ampliamente la estructura de la SVZ
en roedores y humanos. Pero las muestras humanas son normalmente de
escasa calidad y, por cuestiones ticas slo permiten el estudio morfolgico de la misma. Resultados preliminares nos muestran gran similitud
entre la citoarquitectura de la SVZ en primates del tipo Macaca y en
humanos, aunque importantes diferencias pueden observarse. Dicha regin est constituida por tres capas: una primera capa de ependimocitos
que tapizan los ventrculos laterales (capa ependimaria); una segunda capa
hipocelular formada en su mayora por expansiones astrocitarias (capa
GAP) y una tercera capa compuesta por los cuerpos celulares de los astrocitos (capa astrocitaria). Esta organizacin es muy similar a la que se da
en la SVZ humana. Tambin se encuentran ependimocitos desplazados en
ambas especies. Utilizando como modelo el primate Macaca fascicularis,
en este trabajo pretendemos ampliar nuestro estudio con una caracterizacin inmunohistoqumica de los diferentes tipos celulares que integran
la SVZ, comparndola con lo que ya conocemos en humanos y roedores.
La importancia que ello conlleva es grande ya que podra ser base de
estudios e incluso ensayos clnicos extrapolables a la especie humana para
el tratamiento de enfermedades del sistema nervioso. Sanai et al., 2004;
Doetsch et al., 1997; Quiones-Hinojosa et al., 2006

INFLUENCIA DE LA ADMISTRACIN CRNICA DE
ANTIDEPRESIVOS SOBRE LA VA DE SEALIZACIN DE LA ADENILIL CICLASA
Castro E,Valdizn EM,Vidal R, Marrn E, Pazos A
Dpt. Fisiologa y Farmacologa. Universidad de Cantabria. Santander.
CICYT (SAF04-00941); Fundacin Alicia Koplowitz Foundation e
Instituto de Salud Carlos III (Red de Investigacin en Enfermedades
Mentales, REMTAP)
La administracin aguda de frmacos antidepresivos produce un bloqueo inmediato del sistema de recaptacin de serotonina y/o noradrenalina; sin embargo, a largo plazo, se producen una serie de mecanismos adaptativos que pueden ser responsables de su eficacia antidepresiva. En este
sentido, en estudios previos se ha descrito la existencia de alteraciones
en diversos subtipos de receptores aminrgicos y no aminrgicos como
es el caso del receptor CB1. Adems de los cambios receptoriales, en los
ltimos aos se est comenzando a abordar el efecto de la administracin
de antidepresivos sobre los efectores y segundos mensajeros celulares.
En este trabajo se han evaluado los cambios en la va de sealizacin de
la adenilato ciclasa (AC) mediada por la activacin del receptor CB1 tras
el tratamiento durante 14 das (minibombas osmticas) y 21 das (p.o.)
con fluoxetina (10 mg/kg/da) y venlafaxina (40 mg/kg/da). El tratamiento
con ambos antidepresivos produjo, a los 14 das, un incremento estadsticamente significativo en la eficacia del agonista CB1 WIN55,212-2
para inhibir la acumulacin de AMPc estimulada por forskolina en corteza
frontal de rata (% incremento = 39.3% y 38.8% para fluoxetina y venlafaxina respectivamente, p<0.05) sin cambios en la potencia. Ambos frmacos
produjeron un incremento significativo en la fijacin basal de AMPc. Sin

embargo, tras la administracin oral durante 21 das de venlafaxina, pero
no con fluoxetina, se observ una disminucin de la capacidad inhibitoria
del agonista CB1 sobre la AC estimulada por forskolina (Emaxcontrol=
72.22.1 y Emaxvenlafaxina = 81.22.9, p<0.05), sin modificaciones en
la fijacin basal. Estos resultados sugieren una regulacin diferente del
sistema de transduccin de seal acoplada a la activacin del receptor
CB1 dependiendo del tiempo y va de administracin del frmaco antidepresivo.

Distribucin de las subunidades A2 y A3 de
los canales inicos activados por nucletidos cclicos en el bulbo olfatorio principal de rata
Mara Gutirrez-Mecinas; Carlos Crespo; Jos Miguel Blasco-Ibez; Juan Ncher; Emilio Varea; Francisco Jos Martnez Guijarro
Departamento de Biologa Celular y Parasitologa. Facultad de Biologa. Universidad de Valencia
Los canales inicos activados por unin de nucletidos cclicos
(CNGs) se abren por la unin directa de AMPc o GMPc intracelular y
permiten la entrada, de forma no selectiva, de diferentes cationes monovalentes y algunos divalentes, en particular Ca2+. Estructuralmente, estn
compuestos por cuatro subunidades distintas, habindose caracterizado
hasta el momento seis diferentes agrupadas en dos familias: las subunidades A (CNGAs) y las B (CNGBs). Las CNGAs se conocen tambin como
subunidades principales (CNGA1, CNGA2, CNGA3 y CNGA4) y pueden
formar canales funcionales por s solas (salvo CNGA4), mientras que las
CNGBs se conocen tambin como subunidades moduladoras (CNGB1 y
CNGB3) y no pueden hacerlo. Los CNGs fueron primeramente descritos
en los conos y bastones de la retina (CNGA1 es expresada en bastones
y CNGA3 en conos) y en la mucosa olfatoria de vertebrados (CNGA2 y
CNGA4 son expresadas en las neuronas receptoras olfatorias) donde se
encargan de la transduccin sensorial visual y olfatoria.
En nuestro estudio, demostramos que tanto CNGA2 como CNGA3
se expresan adems en los circuitos neuronales y en algunas clulas gliales
del bulbo olfatorio principal de rata. CNGA2 aparece en clulas principales y en astrocitos. Por su parte, CNGA3 aparece en clulas principales y
en interneuronas, incluyendo poblaciones de clulas periglomerulares, de
granos y de clulas profundas de axn corto. Nuestros resultados indican
la importancia de los nucletidos cclicos y de la va de sealizacin que
implica la activacin de los CNGs en el funcionamiento de los circuitos neuronales de esta regin del cerebro. Financiado por MCYT-FEDER:
BFI2001-3186, BFU2004-00931, BFI2003-01254; programa de becas FPU;
Generalitat Valenciana: GV04A-076, GV04A-134.

Recuperacin de la expresin de marcadores moleculares en retinas de perro con la
mutacin RPE65-/- (Amaurosis Congenita de
Leber),tras terapia gnica con adenovirus.
M. Hernndez1, S.E. Pearce-Kelling2, G.M. Acland2, G. Aguirre3, E.
Vecino1
1Departamento de Biologa Celular, Facultad de Medicina, Universidad del Pas Vasco, Espaa. 2Baker Institute, Universidad de Cornell,
Ithaca, NY, USA. 3Seccin de Oftalmologa, Escuela de Medicina
Veterinaria, Universidad de Pensilvania, Filadelfia, PA, USA.
Objetivo: Caracterizar el grado de recuperacin de la expresin de
marcadores moleculares en la retina en perros con la mutacin RPE65/- antes y despus del tratamiento con terapia gnica que reestablece la
falta de la protena RPE65.
Mtodos: Se analizaron retinas de perro control, afectados (RPE 65
-/- ) a los 5 y 17 meses y tratados con virus adenoasociados (AAV-RPE
65 -/- ). El tratamiento consisti en una inyeccin subretinal a los 5 meses
del vector rAAV cargado con la protena RPE65. Las retinas se analizaron
mediante inmunohistoqumica a los 17 meses de edad utilizando como
marcadores anticuerpos contra molculas presentes en distintos tipos
celulares: Fotorreceptores (M/L y S opsina, arrestina, y rod opsina), con-
tra clulas bipolares y amacrinas (Proteina Kinasa C, Calretinina, GABA,

Tiroxina Hidroxilasa) y contra protenas gliales (GFAP y Vimentina). La localizacin de la protena RPE65 fue marcada con un anticuerpo especfico
contra ella a fin de localizar su restauracin tras el tratamiento.
Resultados: En retinas de perros afectados encontramos una disminucin en la expresin de marcadores para fotorreceptores y clulas
amacrinas, un aumento en la expresin de marcadores gliales y cambios
en procesos sinpticos entre clulas bipolares y amacrinas. Despus de la
terapia gnica, la expresin de los marcadores moleculares se restaura.
Conclusin: La inyeccin subretinal de virus recombinantes adenoasociados con cDNA del gen RPE65, restaura la estructura normal de
fotorreceptores en perros afectados. Agradecimientos : ONCE, Fundaluce, Ministerio de Ciencia y Tecnologa (BFI2003-07177), Universidad del
Pas Vasco (00077.327-15350/2003), Fundacin Gangoiti, NIH EY-113132,
06855,13729.

EFECTO DE LA COMBINACIN DE DOSIS SUBANALGSICAS DE KETAMINA Y MORFINA EN UN
MODELO DE NEUROPATA PERIFRICA INDUCIDA
POR PACLITAXEL.
David Pascual Serrano, Carlos Goicoechea Garca, Elisa Burgos Gila, M.
Isabel Martn Fontelles
U. Rey Juan Carlos. Facultad de Ciencias de la Salud. rea de Farmacologa
Introduccin: El paclitaxel es un agente antineoplsico muy efectivo
en el tratamiento de tumores slidos que produce efectos adversos importantes como neuropata perifrica dolorosa, que obliga al abandono
del tratamiento.
El objetivo de este estudio es comparar el efecto analgsico de la
ketamina y morfina en un modelo animal de neuropata inducida por paclitaxel.
Material y mtodos: El paclitaxel (1 mg/kg) fue administrado por va
intraperitoneal (i.p.) durante cuatro das alternos (1, 3, 5 y 7). Se valor
la hiperalgesia trmica (plantar test) y la alodinia mecnica (filamentos de
von Frey). El efecto de los dos frmacos fue evaluado 21 das despus de
iniciar el tratamiento.
Resultados: El paclitaxel produjo alodinia mecnica (disminucin del
umbral de presin (-70%)) e hiperalgesia trmica (descenso del umbral
trmico (-25%)) en ambas patas. La morfina (1, 2.5 y 5 mg/kg) fue capaz
de reducir la hiperalgesia y la alodinia a las dosis de 2.5 y 5 mg/kg. Este
efecto fue antagonizado por naloxona (1 mg/kg). La ketamina (12.5, 25 y
50 mg/kg) solo fue capaz de reducir la alodinia a las dosis ms altas mientras que la hiperalgesia no se modific. La mezcla de morfina y ketamina a
dosis subanalgsicas (1 y 12.5 mg/kg) fue capaz de revertir la hiperalgesia
trmica mientras que la alodinia no se vio afectada.
Conclusin: Estos resultados sugieren que la combinacin de dosis
subanalgsicas de frmacos que actan en diferentes receptores, podra
ser til en el tratamiento de la neuropata inducida por paclitaxel, reduciendose adems los efectos adversos.

RELACIN ENTRE LOS RECEPTORES 5-HT6 Y LA
FUNCIN DEL EJE HIPOTLAMO-HIPOFISIARIOADRENAL: IMPLICACIONES COGNITIVAS Y BIOQUMICAS
Mara Javier Ramrez Gil, Brbara Aisa Vega; Beatriz Marcos lvarez
Departamento de Farmacologa; Universidad de Navarra. Pamplona, Navarra. Espaa
Los antagonistas del receptor 5-HT6 han demostrado ser capaces de
mejorar los procesos de aprendizaje y memoria en diferentes modelos
animales. Se conoce tambin que en los trastornos psiquitricos relacionados con situaciones de estrs, asociados a alteraciones en la funcin
del eje hipotlamo-hipofisiario-adrenal (HPA), aparecen importantes trastornos de memoria. En este trabajo se han estudiado las interacciones
funcionales entre los receptores 5-HT6 y el eje HPA. SB-271046, un antagonista selectivo del receptor 5-HT6, revirti completamente los trastor-
133
nos cognitivos asociados a una alteracin de la respuesta del eje HPA en

un modelo animal de separacin materna (SM) en rata. La expresin del
receptor 5-HT6 en el hipocampo y en la corteza frontal de los animales
SM fue similar a la de los animales controles, aunque el incremento en los
niveles de serotonina (5-HT) en respuesta a un estrs agudo fue superior
en la corteza frontal de los animales SM. La expresin del ARNm del
receptor 5-HT6 aument significativamente en el hipocampo en una situacin de adrenalectoma. El tratamiento subcrnico con SB-271046 no
modific los niveles del ARNm de CRF en el hipotlamo, pero increment significativamente la densidad de los receptores de glucocorticoides en
el hipocampo comparada con la de los controles. En cambio, en la corteza
frontal, el tratamiento con SB-271046, produjo un descenso significativo
en la densidad de los receptores de glucocorticoides. Estos resultados
pudieran ser de inters en el tratamiento de las alteraciones cognitivas y
conductuales asociadas a una respuesta alterada al estrs. Financiado por
proyecto Europeo (LSHM-CT-2004-503474)

La ketamina incrementa la coherencia de
la actividad oscilatoria de alta frecuencia entre corteza motora y el area subtalmica.
M. J. Nicols Apestegua; M. Prez-Alczar, M. Valencia, M. Alegre,
J. Iriarte, J. Artieda
Laboratorio de Neurofisologa. CIMA y Clnica Universitaria. Universidad de Navarra. Pamplona
Objetivos: Anomalas de la actividad oscilatoria cortical y de los ganglios basales parecen jugar un papel fisiopatolgico en la enfermedad
de Parkinson y en la esquizofrenia. La ketamina se ha empleado como
modelo animal de esquizofrenia en la rata. El objetivo fue estudiar el efecto de ketamina sobre la actividad oscilatoria cortical y subtalmica y la
coherencia entre ambas.
Metodologa: Se estudiaron en 10 ratas Wistar macho (250-300g)
mediante electrodos crnicamente implantados, los potenciales locales
de campo en el rea subtalmica y la actividad electrocorticogrfica del
rea motora. Los electrodos se implantaron mediante estereotaxia. Los
registros se realizaron con la rata despierta y libre y tras la administracin intraperitoneal de distintas dosis de ketamina (10, 25, y 50mg/Kg). La
actividad oscilatoria registrada se analiz mediante transformadas rpidas
de Fourier y anlisis de coherencia. La actividad motora del animal se
cuantific digitalmente mediante registro de vdeo simultneo al registro.
Resultados: La ketamina produjo un aumento de la actividad oscilatoria de alta frecuencia en corteza motora primaria y en rea subtalmica.
Se observ un aumento muy marcado de la coherencia cortico-subtalmica con un pico alrededor de 140 Hz. Esta actividad fue dosis dependiente
y guardaba relacin con los cambios de la actividad motora del animal.
Conclusiones: Estos hallazgos demuestran que la ketamina provoca
anomalas oscilatorias en los ganglios basales, en corteza, y en la sincronizacin entre ambas, sugiriendo una relevancia fisiopatolgica en este
modelo de esquizofrenia.

EXPRESIN DE TRANSPORTADORES DE GLUTAMATO VESICULARES Y DE MEMBRANA PLASMTICA
EN LAS CLULAS CROMAFINES BOVINAS DE LA
MDULA SUPRARRENAL
Ana Mara Olivn Sierra, Roco Prez Rodrguez, Carmen Arce, Mara
Pilar Gonzlez, Mara Jess Oset Gasque.
Departamento de Bioqumica y Biologa Molecular II. Facultad de
Farmacia. UCM.
El glutamato es el principal neurotransmisor excitatorio en el sistema nervioso central. Sin embargo, un exceso de glutamato conduce a la
muerte celular excitotxica que subyace a numerosas enfermedades neurolgicas y neurodegenerativas. Tras su liberacin sinptica, el glutamato
es recaptado por las terminaciones nerviosas por medio de un transportador de membrana plasmtica denominado EAAT3. Tras su entrada
en las terminaciones nerviosas, el glutamato es bombeado dentro de las
134
vesculas sinpticas mediante un transportador vesicular. Recientemente

se ha caracterizado la existencia de tres transportadores vesiculares diferentes (VGLUT1-3) que representan marcadores muy especficos de
las neuronas glutamatrgicas. Las clulas cromafines son un modelo de
clulas neurosecretoras, en las cuales previos estudios de nuestro grupo
han demostrado la presencia y funcionalidad de receptores de glutamato
implicados tanto en la regulacin de la secrecin de catecolaminas como
en la muerte celular (1-2) y la existencia de procesos de liberacin especficos tanto exocitticos como no exocitticos (3). En este trabajo
se ha investigado la presencia de transportadores de membrana y vesiculares especficos, mediante el uso de tcnicas de microscopa confocal,
citometra de flujo y western blot. Encontramos una expresin especfica
de EAAT3, VGLUT1 y VGLUT2 en el 100%, 10-20% y 5-10%, respectivamente, de la poblacin total de clulas cromafines. Todas las protenas
se localizan en la fraccin de membranas, siendo su pm estimado de 70
kda para EAAT3 y 50-65 kda para VGLUTs. Estos interesantes resultados
sugieren nuevas funciones para el glutamato en tejidos neuroendocrinos
perifricos tales como la mdula adrenal.
Financiado por los proyectos SAF-2006-05563 del MEC y Red RETICS-RD06/0026 del Instituto de Salud Carlos III. (1) Gonzlez et al.
Neuroendocrinology 67, 181-189 (1998); (2) Arce et al. J. Neurosci. Res.
75,182-193 (2004);(3) Romero et al. Neuroscience 116, 817-829 (2003)

EVALUACIN DEL PERFIL PLASMTICO DE AMINOCIDOS EN PACIENTES CON DEMENCIA TIPO
ALZHEIMER.
Ramrez Expsito Mara Jess; Cobo Aceituno Manuela*, De la
Chica Rodrguez Susana, Corts Denia Pedro, Prez Miranda Mara
del Carmen*, Arias de Saavedra Jos Manuel*, Martnez Martos Jos
Manuel.
Grupo de Investigacin Fisiologa y Patologa Experimental y Clnica CVI-296. Departamento de Ciencias de la Salud, Universidad de
Jan. *Complejo Hospitalario de Jan.
Diversos aminocidos actan como precursores de importantes
sistemas neurotransmisores tales como las catecolaminas y la serotonina. As, las concentraciones plasmticas de aminocidos pueden ser un
factor regulador de la biosntesis de neurotransmisores a nivel cerebral.
La prevalencia de desrdenes cognitivos incrementa exponencialmente
con la edad, pero se ha estudiado relativamente poco cmo se afecta
el patrn plasmtico de aminocidos y an menos la relacin existente
entre el perfil plasmtico de aminocidos y el estado cognitivo. As, en
el presente estudio se ha analizado el perfil plasmtico de ciertos aminocidos precursores de neurotransmisores (triptfano, tirosina, valina,
leucina, isoleucina, taurina, serina y metionina), as como los cocientes
triptfano/aminocidos neutros (LNAA), tirosina/LNAA y TSM o relacin
entre la taurina plasmtica y el producto de los niveles plasmticos de
serina y metionina) en personas diagnosticadas de demencia tipo Alzheimer (mediante los criterios NINCDS-ADRDA). Tambin se han llevado a
cabo estudios de correlacin entre el perfil plasmtico de aminocidos y
las escalas cognitivas Minimental, Blessed y FAST. Los aminocidos se han
analizado mediante cromatografa HPLC con deteccin por fluorescencia,
utilizando OPA como agente derivatizante. Los resultados muestran un
incremento en los niveles de metionina en los pacientes con DTA as
como en el cociente TSM, mientras que no han aparecido cambios en los
niveles de otros aminocidos ni en los cocientes triptfano/LNAA y tirosina/LNAA. Aparece as una alteracin en los mecanismos de transmetilacin con la DTA que podran estar relacionados con el desequilibrio entre la neurotransmisin serotoninrgica y dopaminrgica/noradrenrgica
que aparece en la DTA. Financiado por el Ministerio de Trabajo y Asuntos
Sociales, a travs de la Secretara de Estado de Servicios Sociales, Familias
y Discapacidad (IMSERSO); Expediente 176/06.

CONSISTENCIA INDIVIDUAL EN LA PREFERENCIA

O AVERSION A DISTINTOS ESTIMULOS GUSTATIVOS TRAS LA ACTIVACION ELECTRICA DEL COMPLEJO PARABRAQUIAL
Bases celulares de la adaptacin auditiva

en el animal despierto
Maria J. Simon, Maria A. Zafra, Filomena Molina y Amadeo Puerto

Psicobiologa. Universidad de Granada, Campus de Cartuja s/n,
Granada 18071 Espaa
La estimulacin elctrica del Complejo Parabraquial (NPB) puede
generar preferencias o aversiones hacia los estmulos gustativos con que
es asociada. As ha sido demostrado a travs de dos tareas diferentes de
aprendizaje discriminativo gustativo de carcter concurrente, en las que,
adems de los propios estmulos gustativos implicados, se ha modificado
tambin la localizacin izquierda/derecha de los sabores estimulados/no
estimulados, as como la disposicin izquierda/derecha de las jaulas de
experimentacin. En efecto, aunque el anlisis global de los resultados no
difiere de los obtenidos por el grupo control y, de hecho, ambos muestran
una distribucin aleatoria, el anlisis individual de los datos pone de manifiesto una correlacin significativa de los resultados intrasujeto obtenidos
por el grupo estimulado, pero no por el grupo control no estimulado.
Estos resultados sugieren que en el rea Parabraquial coexisten subsistemas motivacionales recompensantes y aversivos diferenciados, aunque
muy prximos anatmicamente. Las manifestaciones de preferencias o
aversiones, e incluso la aparicin de animales neutrales podra explicarse
en este contexto y en funcin de la localizacin precisa que ocupa el
electrodo implantado en el ncleo parabraquial de cada uno de los animales, sin relacin, por otra parte, con los parmetros estimulares de las
corrientes elctricas utilizadas.

Dosis intermitentes de etanol durante la
adolescencia producen alteraciones cognitivas y aumento de la preferencia al alcohol en ratas adultas.
M. Pascual y C. Guerri, J. Boix
Centro de Investigacin Prncipe Felipe, Avda. Autopista del Saler
16, 46013-Valencia, Espaa.
Estudios recientes indican que la adolescencia es una fase de maduracin del cerebro en donde tienen lugar importantes cambios estructurales y plsticos en determinadas regiones cerebrales. Hemos analizado
consecuencias neurotxicas, cognitivas y conductuales del consumo intermitente de alcohol en animales adolescentes, y se ha evaluado si los
cambios conductuales observados son permanentes y si hay predisposicin al consumo de alcohol en la fase adulta.
Se utilizaron ratas jvenes (30 das) a las que se les administr 8 dosis
de salino o etanol (3g/kg peso) de forma intermitente durante 2 semanas.
Las pruebas cognitivas (laberinto en Y, reconocimiento de objeto nuevo)
y motoras (rotarod) se realizaron tanto al finalizar el tratamiento (fase
adolescente) como despus de 3 semanas de descanso (fase adulta). En
la fase adulta tambin se realizaron estudios de preferencia y consumo
voluntario al alcohol.
Los animales adolescentes tras finalizar el tratamiento con etanol
mostraron un aumento en la expresin de mediadores inflamatorios en
corteza, hipocampo y cerebelo, y cambios de los niveles de dopamina
en ncleo accumbens. Al mismo tiempo, las ratas adolescentes tratadas
con etanol de forma intermitente mostraron alteraciones de la funcin
motora y cognitiva, efectos que permanecan durante la fase adulta. Los
estudios de preferencia al alcohol mostraron que los animales adultos
tratados con etanol durante la adolescencia presentaban una mayor preferencia por el etanol y una mayor ingesta de alcohol durante la fase de
consumo voluntario. Estos resultados demuestran que dosis intermitentes de alcohol durante la fase adolescente pueden causar alteraciones en
la plasticidad sinptica que afecten los procesos de memoria y aprendizaje
a corto y largo plazo, as como cambios neuroqumicos que participen en
los procesos adictivos.
Arnold MM,Vergara R, Abolafia JA & Sanchez-Vives MV

Instituto de Neurociencias de Alicante, Universidad Miguel Hernndez-Consejo Superior de Investigaciones Cientficas, San Juan de
Alicante, Spain
La adaptacin a estmulos repetidos es frecuente en los sistemas
sensoriales y se puede interpretar como un mecanismo de control de
ganancia que reestablece el rango de la curva estmulo-respuesta. La adaptacin ha sido a menudo caracterizada durante la anestesia, pero en qu
medida la adaptacin prevalece en los estados de alerta? En este estudio
la adaptacin a estmulos repetidos se cuantific en corteza auditiva de
ratas despiertas mediante registro de neuronas aisladas realizados con
tetrodos implantados crnicamente. El curso temporal de dicha adaptacin revela que la respuesta a sonidos a menudo se encuentra influida por
estmulos que ocurrieron hasta varios segundos antes. La adaptacin en
corteza auditiva puede ser el resultado de fenmenos sinpticos y de red
que ocurran en los distintos relevos de la va. Aqu, para determinar en
qu medida participan mecanismos celulares de las neuronas de corteza
auditiva, los protocolos de sonido utilizados en el animal despierto se
simularon mediante la inyeccin intracelular de pulsos cuadrados de corriente de la misma duracin (50 ms) y con los mismos intervalos (50ms8s) pero en rodajas de corteza auditiva in vitro. El resultado obtenido
revela un curso temporal de la adaptacin in vitro prcticamente idntico
al observado en el animal despierto. Una corriente de potasio dependiente de calcio y sensible a apamina, y otra ms lenta dependiente de sodio
subyacen a sta adaptacin. Concluimos que la adaptacin a sonido en
corteza auditiva del animal despierto se origina fundamentalmente en las
corrientes inicas de las neuronas corticales. Financiado por MEC y EU
6thFET project PRESENCCIA.

La regeneracin de neuronas del ganglio
espiral es una nueva alternativa para las
sorderas neurosensoriales?.
Maria Visitacion Bartolome Pascual
Dpto. Oftalmologia y Otorrinolaringologia. Facultad de Medicina.
Universidad Complutense de Madrid
La presbiacusia neurosensorial es la degeneracin del receptor auditivo por la perdida de las neuronas del ganglio espiral durante el proceso
de envejecimiento. Esta patologa observada en todos los mamferos incluidos el hombre, se manifiesta por una prdida progresiva de la audicin
asociada a una incapacidad de compresin e interpretacin de determinados sonidos. El envejeciminento y las posible modificaciones genticas
y moleculares que sufren las clulas antes de morir esta siendo motivo
de diferentes estudios multidisciplinares. Respecto a la muerte neuronal,
la implicacin de diferentes factores trficos como neurotrofina-3 (NT-3)
y factor trfico derivado de cerebro (BDNF) han empezado a tener especial relevancia en procesos de regeneracin neuronal en especmenes
adultos. Estudios in vitro de las neuronas de ganglio espiral de animales
postnatales de 3 a 5 dias de edad, han puesto de manifiesto que la presencia en el medio de cultivo de factores trficos como neurotrofina-3
(NT-3) y factor trfico derivado de cerebro (BDNF) favorecen las prolongaciones axones y dendritas neuronales. En el presente estudio se ha
analizado la supervivencia de las neuronas del ganglio espiral durante el
envejecimiento del receptor auditivo en ratas y ratones de diferentes
edades (postnatales, jvenes, adultos y envejecidos). La regeneracin de
neuritas podra depender de los niveles adecuados de factores trficos
(BDNF; NT-3) como sucede en otras reas del sistema nervioso central. La presencia o no de receptores trak-C y trk-B podria determinar
la actividad de dichos factores in vitro sobre las neuronas aisladas del
ganglio espiral y prevenir las causas de la muerte neuronal que conlleva
irremediablemente a la sordera y otras patologas auditivas irreversibles
en Otolaringologa. Agradecimientos: Ministerio de Educacin Y Ciencia
SAF2004-0360-E
135

EFFECTS OF THE ANDROGEN RECEPTOR ON THE
RAT NITRINERGIC SYSTEM:THE Tfm MODEL
Martini M.*, Di Sante G.*, Garca-Falgueras A., Pinos H., Guillamn
A., Panzica G.C.*, Paloma C.
*Department of Anatomy, Pharmacology and Forensic Medicine,
University of Torino, Italy. Department of Psychobiology, UNED,
Madrid, Spain
The neuronal nitric oxide synthase (nNOS) is involved in the control
of male and female sexual behavior [3] and its distribution in several regions of the limbic-hypothalamic system, as well as its co-existence with
gonadal hormones receptors, suggest that these hormones may play a
significant role in controlling its expression [8]. However, data illustrating
the role of gonadal hormones in controlling the nNOS expression are,
at present, contradictory, even if they strongly suggest an involvement of
testosterone (T) in the regulation of nNOS [2,9]. The action of T may be
mediated through androgen (AR) or, after aromatization to estradiol (E2),
through estrogen receptors [4]. To elucidate the role of AR on nNOS
expression, we compared male and female rats with a non-functional
mutation of AR (Tfm, testicular feminization mutation) to their control
littermates.We investigated some hypothalamic and limbic nuclei involved
in the control of sexual behavior [medial preoptic area (MPA), arcuate
(Arc), ventromedial (VMN) and stria terminalis (BST) nuclei] [1,5-7]. In
BST (posterior) and VMN (ventral) we detected a significant decrease of
nNOS positive elements in Tfm males compared to their littermate. In
addition, we observed a significant increase of nNOS positive elements in
BST (posterior) of Tfm females. No significant changes were observed in
the other nuclei. These data indicate that, contrary to current opinions,
androgens, through the action of AR may have a relevant role in modulation of the nNOS hypothalamic system.[1] Brain Research Bullettin 36
(1995) 1-10. [2] Brain Research 836 (1999) 90-98. [3] Journal of Neurobiology 30 (1996) 480-492. [4] Physiol Behav 83 (2004) 271-277. [5] Brain
Research 862 (2000) 90-102. [6] Physiology and Behavior 24 (1980) 341346. [7] Brain Research 152 (1978) 31-40. [8] Neuroscience 138 (2006)
987-995. [9] PNAS 97 (2000) 3672-3677.

CARACTERIZACIN HISTOPATOLGICA DEL HIPOCAMPO DE UN MODELO TRANSGNICO PS1XAPP
DE LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER
Raquel Mara Snchez Varo, D. Baglietto-Vargas1, I. Moreno-Gonzalez1, L. Trujillo-Estrada1, C. Caballero2, S. Jimenez2, M. Torres2, Z.U.
Khan3, M. Romero-Acebal4, D. Ruano2, J.Vitorica2 y A. Gutierrez1
1-Dpto. Biologa Celular, Facultad de Ciencias, Universidad de Mlaga; 2-Dpto. Bioqumica, Facultad de Farmacia, Universidad de Sevilla;
3-CIMES/Dpto. Medicina, Facultad de Medicina, Universidad de Mlaga; 4-Servicio de Neurologa, Hospital Clnico Universitario Virgen
de la Victoria, Mlaga.
La enfermedad de Alzheimer (AD), principal causa de demencia en el
mundo, es un desorden neurodegenerativo progresivo cuya neuropatologa clsica incluye la deposicin extracelular de beta-amiloide (Abeta),
aparicin de ovillos neurofibrilares intracelulares, degeneracin sinptica
y muerte neuronal. La caracterizacin de modelos transgnicos para la
AD es de suma importancia para el estudio de la progresin patolgica
y la identificacin de dianas teraputicas. El objetivo del presente trabajo
es la caracterizacin celular y molecular del hipocampo de un modelo transgnico PS1M146L x APP751SL. En este modelo la deposicin de
Abeta comienza a edades muy tempranas y aumenta progresivamente
con la edad, mostrando adems una alta heterogeneidad interindividual.
Se observ una activacin glial temprana asociada a la deposicin de Abeta. La microgla produce mediadores inflamatorios que pueden tener acciones neurotxicas o neuroprotectoras. A edades tempranas se detect
la expresin de factores neuroprotectores, mientras que la expresin de
factores citotxicos coincidi con la disminucin de clulas piramidales
a edades avanzadas. En estados tardos se observ Abeta perivascular,
alteraciones en la barrera hematoenceflica, y presencia de linfocitos T
en el parnquima cerebral. Nuestros datos sugieren que en los estados
iniciales de la AD, la neuroinflamacin tendra un papel beneficioso neu-
136
roprotector mientras que en estadios avanzados el proceso inflamatorio

sostenido seria perjudicial produciendo la neurodegeneracin de las clulas piramidales. Finalmente, este modelo de AD podra ser una valiosa
herramienta para determinar la eficacia de tratamientos farmacolgicos
tempranos contra esta enfermedad. Financiado por FIS PI060556 (A.G.),
FIS PI060567 (J.V.) y Aventis (A.G. y J.V.)

Anlisis cuantitativo de marcadores sinpticos en el hipocampo de ratones heterocigotos reeler.
Romay-Talln, R., Dopeso-Reyes, I.G.; Sueiro, C.; Caruncho, H.J.
Grupo de Investigacin Biofarma. rea de Biologa Celular. Universidad de Santiago de Compostela
El ratn heterocigoto reeler (reln +/-) muestra niveles de reelina
inferiores al del ratn salvaje (reln +/+). La reelina es una glicoprotena
de matriz extracelular que participa en la migracin neuronal, sinaptognesis y plasticidad sinptica. En el hipocampo, la reelina se expresa en
subpoblaciones de interneuronas GABArgicas y con un intenso inmunomarcaje difuso (ej. reelina de matriz extracelular), en la capa lacunoso
molecular (LM) y zona distal de la capa molecular del giro dentado (GD).
La disminucin de los niveles de reelina podra afectar principalmente a
estas reas. Para analizar las posibles implicaciones de la reelina en este
rea realizamos un estudio cuantitativo empleando para ello diversos
marcadores neuroqumicos como sinaptofisina (marcador de terminales
sinpticos), GAD65/67 (como marcador de terminales GABArgicos) y
VGLUT2 (como marcador de terminales glutamatrgicos).
En general se observa una disminucin significativa (cerca del 20%)
en la capa del LM del rea CA1 mientras que en el estrato radiado no
hay diferencias significativas pero si una tendencia a cambios compensatorios incrementndose el nmero de terminales. Estos cambios afectan
principalmente a las aferencias glutamatrgicas y en menor medida, a las
GABArgicas.
Estas alteraciones podran sugerir un balance inadecuado de la
inervacin glutamatrgica y GABArgica sobre dendritas apicales de las
clulas piramidales que podra explicar algunos dficits funcionales del
hipocampo observados en estos ratones y/o en esquizofrenia, donde
tambin se observa una disminucin de reelina en el hipocampo. Ministerio de Educacin y Ciencia (SAF 2004-00951) y Xunta de Galicia (PGIDIT05PXIC20303PN).

Genetic Basis of Antisocial Personality Disorder
Rivera-Hernndez Rayito, Bueno-Carrera Ma. Gloria, Snchez Veloz Juan.
Departamento de Psiquiatra de la Universidad de Salamanca, Servicio de Gentica y diagnstico prenatal del Hospital Universitario
de Salamanca.
OBJECTIVE: The author examined the genetic basis of Antisocial
Personality Disorder (ASPD). METHOD: Comparisons were conducted of recent meta-analyses of genome scans of ASPD. RESULTS: Recent
meta-analyses have identified X gene (Xp11.23-11.4) like a consistent site
of linkage. DISCUSSION: The gene X is a region under new selective
pressure and is in a epigenetic situation with respect to X inactivation.
CONCLUSIONS: Epigenetic variation associated with chromosomal
rearrangements that occurred in the hominid lineage and that relates
to the development of social behaviour could account for predisposition
to ASPD and failure to detect such variation by standard linkage approaches.

DEGENERACIN DE LA VA DOPAMINRGICA NIGRO-ESTRIATAL TRAS LA ADMINISTRACIN SISTMICA DE COMPUESTOS INHIBIDORES DEL PROTEOSOMA.
mGluR7 modula la liberacin de glutamato por inhibicin de canales de Ca2+ del

tipo P/Q y por disminucin de los niveles de
AMPc.
Adanez Gurich, R, Alvarez-Erviti L, Blesa FJ, Barroso Chinea P, De

Bernardo S, Bentez-Temino B, Rodriguez-Oroz MC, Obeso JA
CIMA (Centro de Investigacin mdica aplicada)-Universidad de
Navarra. Neurociencias. Pamplona (Navarra)
Ricardo Martn, Magdalena Torres y Jos Snchez-Prieto

Departamento de Bioqumica, Facultad de Veterinaria, Universidad
La enfermedad de Parkinson (EP) es una patologa neurodegenerativa

progresiva causada por la degeneracin de las neuronas dopaminrgicas
de la sustancia negra pars compacta (SNc). Alteraciones de la agregacin
y degradacin parecen muy implicadas en la etiopatogenia del proceso.
Inhibidores proteosmicos (IP) tanto in vitro como tras administracin
intracerebral causan degeneracin de neuronas dopaminrgicas. Recientemente, la administracin subcutnea del inhibidor sinttico (PSI) en la
rata ha producido resultados variables y contradictorios, causando una
elevada polmica en cuanto a la validez del modelo.
Se trataron 6 ratas con 6 dosis de PSI (3 mg/Kg) por va subcutnea
a lo largo de dos semanas, y otros 6 animales con una dosis del inhibidor
MG262 (30 mM/Kg) por va intravenosa. Se evalu la actividad motora de
los animales cada dos semanas hasta el sacrificio 8 semanas despus del
tratamiento. En las ratas tratadas con PSI no se observaron diferencias
en la actividad motora, recuento estereolgico de las neuronas TH+ de
la SNc, o densidad de la inervacin dopaminrgica estriatal, respecto al
grupo control o al tratado con el vehculo. En los animales tratados con
MG262 se ha constatado una disminucin de la poblacin dopaminrgica
del 30 %, una reduccin de la inervacin estriatal del 60 %, y una disminucin de la expresin de TH del 67 % en los somas de la SNc.
Estos resultados sugieren que la inhibicin proteosmica puede ocasionar una lesin de la SNc pero el modelo requiere mayor caracterizacin para resultar til en la investigacin de la EP.

ESTUDIO ELECTROFISIOLGICO DE LA REGULACIN DE LOS RECEPTORES 5-HT4 TRAS LA ADMINISTRACIN CRNICA DE ANTIDEPRESIVOS
Vidal-Casado, R; Castro E, Mostany R, Martn A y Pazos A.
Dept. Fisiologa y Farmacologa, Universidad de Cantabria, Santander.CICYT (BFI01-0592) y CICYT (SAF04-00941); Fundacin Alicia
Koplowitz e Instituto de Salud Carlos III (Red de Investigacin en
Enfermedades Mentales, REMTAP)
Los principales antidepresivos disponibles en la actualidad actan bloqueando el sistema de recaptacin de serotonina y/o noradrenalina; sin
embargo, mientras este bloqueo se produce de forma inmediata, su efecto antidepresivo tarda varias semanas en aparecer. Esto sugiere que son
necesarios cambios adaptativos en la neurotransmisin serotonrgica y/o
noradrenrgica para la aparicin de su efecto. Los receptores 5-HT4 controlan la actividad neuronal de las clulas piramidales del hipocampo. Sin
embargo, la informacin disponible sobre la implicacin de este receptor
en el mecanismo de accin de los antidepresivos es poco concluyente.
Mediante la utilizacin de tcnicas de registro electrofisiolgico in
vitro hemos evaluado el efecto del tratamiento crnico (21 das, p.o.) con
fluoxetina (10mg/kg) y venlafaxina (40mg/kg) sobre la excitabilidad neuronal mediada por el receptor 5-HT4 en rodajas de hipocampo. La aplicacin
local del agonista 5-HT4 zacoprida indujo un incremento, concentracindependiente, en la excitabilidad de las neuronas piramidales del hipocampo. Tras la administracin crnica de ambos antidepresivos se obtuvo una
disminucin significativa del efecto de la zacoprida a la concentracin de
10 M (% red= 46% y 41%, para fluoxetina y venlafaxina respectivamente).
Por otra parte, ambos antidepresivos produjeron una reduccin de la densidad del receptor 5-HT4 en el CA1 marcado con [3H]GR113808.
En conclusin, nuestros resultados demuestran claramente que el
tratamiento, a largo plazo, con ISRS y antidepresivos duales produce una
desensibilizacin funcional de los receptores 5-HT4 en el hipocampo.
Esta desensibilizacin puede ser relevante en el mecanismo de accin
de estos frmacos, contribuyendo, en parte, a su eficacia clnica. Gobbi et
al.,1997, Zahorodna et al., 2002, Bijak et al 2001, Tokarski et al., 1996.
La modulacin de canales de Ca2+ por receptores metabotrpicos

de glutamato tiene un importante papel en el control de la liberacin de
neurotransmisor. Con tcnicas inmunocitoqumicas hemos encontrado
que en los terminales sinpticos de hipocampo de rata adulta, mGluR7
es el receptor del grupo III que tiene una expresin ms abundante. En
esta preparacion, la liberacin de glutamato depende mayoritariamente
de canales de Ca2+ del tipo P/Q, y en menor grado, de canales del tipo N.
Hemos aislado el componente de liberacin asociado a canales P/Q, bien
bloquendo los canales N con w-conotoxina-GVIA, bien disminuyendo la
concentracin de Ca2+ extracelular. En estas condiciones, L-AP4 reduce
la liberacin de glutamato por un mecanismo sensible a toxina pertusis,
pero insensible a inhibidores de PKC y PKA. Adems esta inhibicin de
la liberacin est asociada a una disminucin de la entrada de Ca2+ por
canales P/Q, que tiene lugar en ausencia de cambios detectables en los
niveles de AMPc. Sin embargo, L-AP4 s disminuye los niveles de AMPc
incrementados previamente con el activador de la adenilato ciclasa forskolina y adems, esta respuesta antagoniza la accin facilitadora de la liberacin asociada a la activacin de la PKA.. Por tanto, estos datos permiten
concluir que en los terminales sinpticos mGluR7 inhibe la liberacin por
inhibicin de canales de Ca2+ del tipo P/Q, aunque el aumento de los niveles de AMPc desvela la capacidad del receptor para disminuir el AMPc.

MECANISMOS DE SEALIZACIN DE LA APOPTOSIS INDUCIDA POR CITOQUINAS EN CLULAS CROMAFINES. IMPLICACIN DE nNOS, iNOS y NFkB
R Prez-Rodrguez, AM Olivn-Sierra, C Roncero, MP Gonzlez, MJ
Oset-Gasque
Dpto. Bioqumica y Biologa Molecular II, UCM, Facultad de Farmacia, Madrid, Spain
El xido ntrico (NO) es un mensajero celular, sintetizado a partir de
L-arginina por la xido ntrico sintasa (NOS), con tres isoformas conocidas (nNOS, eNOS, iNOS). Previamente nuestro grupo observ que el
NO, estimulado exgena y endgenamente -por citoquinas o glutamato-,
induca apoptosis en clulas cromafines bovinas (Vicente et al., J. Neurosci.
Res. 84, 78-96, 2006), implicando diferentes isoformas de la NOS: iNOS o
nNOS, respectivamente. Estudiamos aqu la presencia y regulacin especfica de estas isoformas, y su participacin en la apoptosis inducida por
citoquinas en clulas cromafines.
Por RT-PCR mostramos que los nicos mRNAs expresados eran los
de nNOS e iNOS, con diferente regulacin: las citoquinas aumentaron la
expresin del mRNA de iNOS, disminuyendo el de nNOS; la dexametasona aument el mRNA basal de nNOS, y disminuy la induccin por
citoquinas del mRNA de iNOS.
Los EMSA y western blot mostraron que la combinacin IFNg y LPS
induca translocacin al ncleo de NFkB, posiblemente va JAK/STAT, ya
que observamos una fosforilacin y translocacin al ncleo de STAT-3. El
efecto de citoquinas en la expresin de iNOS es dependiente de la translocacin de NFkB, ya que al inhibirla con SN50, no se observ tal efecto.
IFNg indujo la fosforilacin de nNOS, disminuyendo las concentraciones
basales de NO que activan NFkB dmero p50/p65. Nuestros resultados
apoyan la hiptesis de la fosforilacin inactivante de nNOS por citoquinas
va JAK/STAT. Las bajas concentraciones de NO obtenidas permitiran
la activacin de NFkB y el consiguiente incremento en la expresin de
iNOS que generara as altas concentraciones apoptticas- de NO.
Trabajo financiado por los proyectos SAF2006-05563 del Ministerio
de Educacin y Ciencia, (MEC, Spain) y RETICS-RD06/0026 del Ministerio
de Sanidad (Instituto de Salud Carlos III)
137
Autorregulacin dependiente de PKC de

los Receptores de Kainato
CHANGES IN ANXIETY-LIKE BEHAVIOR IN MALE

MICE TREATED WITH BUPROPION ALONE OR COMBINED WITH NICOTINE
Rocio Rivera Barrachina, Jos-Luis Rozas y Juan Lerma

Instituto de Neurociencias de Alicante. CSIC-UMH
Los receptores ionotrpicos de kainato (KAR) poseen una sealizacin no cannica, que involucra la activacin de una protena G. As, la estimulacin de estos receptores produce tanto la apertura de los canales
asociados (corriente de membrana) como la activacin de la fosfolipasa
C y la protena Kinasa C (PKC) a travs de una proteina G sensible a
toxina pertsica. En las neuronas raqudeas, ambos tipos de sealizacin
estn presentes (Rozas et al., 2003). Para determinar si la actividad metabotrpica ejerce alguna accin autorreguladora de los KAR, realizamos
experimentos en neuronas del ganglio raquideo, donde la activacin de
los KARs provoc el decrecimiento paulatino de las respuestas ionotrpicas, fenmeno que involucra la activacin de la PKC. Experimentos
realizados con receptores formados por la subunidad GluR5 demostraron que, tras la aplicacin de kainato, la activacin de la PKC provocaba la
internalizacin de los receptores. Este fenmeno dependi directamente
de la fosforilacin de las Serinas S879 y S885 de la subunidad GluR52b, ya
que la internalizacin desapareci cuando dichas serinas fueron mutadas.
Estos resultados revelan que la capacidad de sealizacin no cannica de
los KARs confiere al receptor un mecanismo de deteccin de la actividad
aferente. Dicho mecanismo representa una cualidad del propio receptor
de limitar su sobre-estimulacin mediante la regulacin del nmero de
KARs en la membrana celular.

reas cerebrales y sntesis de nuevas molculas asociadas a la consolidacin y reconsolidacin de memorias a travs de la
expresin de genes tempranos.
Roco Romero Granados, ngela Fontn Lozano, Jos M Delgado
Garca y ngel M. Carrin Rodrguez
Universidad Pablo de Olavide
La formacin de la memoria a largo plazo (LTM) es un proceso
denominado consolidacin que implica la conversin de una memoria a
corto plazo lbil (STM) en un rastro estable duradero. Est demostrado
que para que se desarrolle este proceso ha de ocurrir una sntesis de
nuevos RNAs y nuevas protenas encaminada a producir cambios en la
eficacia sinptica, los cuales desencadenarn modificaciones persistentes
en el funcionamiento y la arquitectura sinptica.
Adems, Estudios sobre la consolidacin demostraron que si una
LTM consolidada y estable se reactiva, esa LTM puede desaparecer. Esta
evidencia sugiere que las memorias reactivadas se vuelven lbiles y han de
experimentar una nueva ronda de consolidacin, denominado reconsolidacin, para que vuelvan a ser estables y persistentes. As, el almacenamiento de la memoria no ocurre una sola vez, sino que se repite cada vez
que se activan dichas memorias.
En nuestro laboratorio, estamos interesados en la relacin entre la
consolidacin y la reconsolidacin, a nivel molecular. Por ello, estudiamos
cambios en la expresin, mediante RT-PCR semicuantitativa, de genes
tempranos (IEGs) como bdnf, c-fos, y erg-1 en reas cerebrales relacionadas con memoria de reconocimiento de objetos durante procesos de
consolidacin y reconsolidacin. Adems, hemos determinado las ventanas temporales durante las cuales el bloqueo de la sntesis de protenas,
mediante administracin de anisomicina, es eficaz, pudiendo deteriorar la
persistencia de la memoria remota. Esta aproximacin nos dar una vista
general de qu IEGs y qu reas del cerebro estn implicadas en ambos
procesos.
138
Redolat Iborra R, Gmez MC, Carrasco MC

Departamento de Psicobiologa. Facultad de Psicologa, Universitat
de Valncia. Valencia. Spain.
Bupropion, administered alone or combined with nicotine is being
used as a treatment for tobacco dependence, both in adolescents and
adults. Few studies, however, have evaluated the behavioral effects of the
combined administration of these drugs at different ages. Our main aim
was to investigate effects of acute administration of bupropion, alone or
plus nicotine on anxiety-like behavior in mice. Adolescent (35 days of
age) and adult (>65 days of age) male NMRI mice were evaluated in an
elevated plus-maze. Mice received bupropion hydrochloride (40 and 10
mg/kg), nicotine (1 and 0.5 mg/kg), saline or a combination of these treatments. Results indicated that drug treatment significantly influenced the
number of open, closed and total arm entries (p<0.01) in adolescent mice,
whereas in adult mice it influenced both closed and total arm entries
(p<0.05). The percentage of time spent in open arms, a classical parameter of anxiety-like behavior, only reached statistical significance in adolescents (p<0.05). Post-hoc tests indicated than adolescent mice treated
with the combination of nicotine 1 mg/kg + vehicle spent more time in
the open arms than those treated with bupropion 40 mg/kg + nicotine 0.5
mg/kg (p<0.05). Results suggest that effects of the combined treatment
between nicotine and bupropion differ in adolescent and adult mice. In
adolescents, nicotine induced changes in the behavior displayed in open
arms of the plus-maze, which could be interpreted as anxiolytic, whereas
the changes in closed and total arm entries observed in adults could be
reflecting alterations in motor activity. Acknowledgments: Supported by
Plan Nacional de Investigacin Cientfica, Desarrollo e Innovacin Tecnolgica (Spain) and FEDER funds (SEJ2006-12330)

Efecto del pptido FGL en la microanatoma de las clulas piramidales de la corteza cingular de la rata
Ruth Benavides-Piccion, 1Shira Knafo, 2Csar Venero, 3Carmen
Sandi, 1 Javier DeFelipe
1Instituto Cajal, Av. Dr Arce, 37, 28002 Madrid. 2 Departamento
de psicobiologa, Universidad Nacional de Educacin a Distancia,
Ciudad Universitaria S/N, 28040 Madrid. 3 Brain and Mind Institute,
Ecole Polytechnique Fdrale de Lausanne, CH-1015 Lausanne,
Suiza.
FGL es un pptido mimtico de la molcula de adhesin celular neural (NCAM), cuya administracin intracerebroventricular en ratas produce un aumento de la memoria espacial. En este estudio se investig el
posible efecto de este pptido en la microanatoma de las clulas piramidales de la corteza cerebral de la rata, tras una administracin subcutnea
de FGL. Se seleccionaron las clulas piramidales por representar el tipo
neuronal mas abundante y caracterstico de la corteza cerebral. Adems,
sus espinas dendrticas representan el principal sitio postsinptico de sinapsis excitadoras y son elementos clave en la plasticidad sinptica. Tras
la perfusin de los animales, se realizaron inyecciones intracelulares de
Lucifer Yellow en la capa III de la corteza cingular anterior. Encontramos
que las clulas piramidales del grupo control y el grupo tratado con FGL
presentaron un patron similar de arborizacin. Sin embargo, observamos
un incremento en la densidad de espinas en las dendritas basales de las
ratas tratadas, pero no en las dendritas apicales. Estos resultados sugieren
que el pptido FGL induce cambios selectivos en la microanatomia de las
clulas piramidales.

ANLISIS NEUROQUMICO DE LAS POBLACIONES

CELULARES DE LA FORMACIN DEL HIPOCAMPO
HUMANO DURANTE EL DESARROLLO.
Niveles de expresin de los receptores de

adenosina en hipocampo y corteza frontal en la enfermedad de los granos argirfilos.
Cebada Snchez S 1, Garca-Lpez R 1, Martnez-Ruiz J 1, ArroyoJimnez MM 1, Martnez-Marcos A 1, Artacho-Prula E 1, Tramu G 2,

Insausti R 1 y Marcos P 1.
1 Laboratorio de Neuroanatoma Humana, Universidad de CastillaLa Mancha, Centro Regional de Investigaciones Biomdicas (CRIB).
Facultad de Medicina, Albacete. 2 Laboratoire de Neurocytochimie
Fonctionnelle, Universit de Bordeaux I, Francia.
La formacin del hipocampo comprende varias estructuras: el giro
dentado, los campos amnicos CA1, CA2 y CA3, el complejo subicular
y la corteza entorrinal. La integridad morfolgica de esta regin y de
sus conexiones es esencial para el desarrollo adecuado de los procesos de memoria y aprendizaje. Para ello tambin es imprescindible que
sus caractersticas neuroqumicas se desarrollen correctamente. Algunos
neuropptidos actan como neuromoduladores en las sinapsis de las conexiones entre estas reas. Hemos utilizado tcnicas inmunohistoqumicas de doble marcaje para conocer las caractersticas neuroqumicas de
la formacin del hipocampo humano. Los resultados previos indican que
en todas las reas y en todas las edades estudiadas se observan clulas
positivas para somatostatina 28 (SOM), neuropptido Y (NPY) y glutamato descarboxilasa (GAD 67).Virtualmente todas las clulas marcadas con
NPY son tambin positivas para SOM. Adems los resultados del doble
marcaje SOM/GAD 67 apuntan a que se trata de poblaciones celulares
diferentes, siendo muy escasas las clulas que presentan ambas sustancias.
Sin embargo, hemos observado posibles contactos de fibras marcadas
con SOM sobre clulas positivas para GAD 67 en numerosas ocasiones.
Cuando se comparan las distintas edades el patrn de marcaje es similar,
pero se detecta una disminucin generalizada de la densidad del marcaje
para SOM y NPY en el adulto con respecto a las edades perinatales. Estos
resultados sugieren que en la formacin del hipocampo humano el NPY
se encuentra en clulas somatostatinrgicas, que aparentemente no corresponden a clulas GABArgicas. Financiado por JCCM, PAI-05-067.

Papel neuroprotector del receptor m1 a
travs de la activacin de la va antioxidante Nrf2/Hemo oxigenasa-1
Sandra Espada Serrano, Ana I. Rojo, Marta Salinas, Mara Rosa de
Sagarra y Antonio Cuadrado
Autnoma de Madrid. Arzobispo Morcillo 4, 28029 Madrid.
La activacin de receptores colinrgicos, como el muscarnico m1,
podra tener efecto neuroprotector frente a la activacin de la glucgeno
sintasa quinasa 3-b (GSK-3) y el estrs oxidativo que caracterizan la
neurodegeneracin en la enfermedad de Alzheimer. Sin embargo, no se
conocen los mecanismos responsables de la neuroproteccin dirigida por
m1. El factor de transcripcin Nrf2 (Nuclear Factor E2-related Factor 2)
regula la expresin de genes antioxidantes de fase II, como el de la hemo
oxigenasa-1 (HO-1), y contribuye a preservar la homeostasis redox. En
este estudio hemos analizado la relacin entre el receptor muscarnico m1 y la activacin de genes antioxidantes de fase II por el factor de
transcripcin Nrf2. Clulas PC12 infectadas con un vector lentiviral que
expresa m1, presentan un incremento en los niveles de mRNA y protena
de HO-1 en respuesta a carbacol. Mediante la utilizacin de un plsmido
reportador de luciferasa que posee tres elementos de respuesta antioxidante (ARE) hemos observado que la activacin de m1 conduce a la expresin de genes antioxidantes, dependientes de Nrf2, por la va Gaq/fosfolipasa C-b/protena quinasa C-g. Tambin hemos identificado a GSK-3,
que es fosforilada en Ser9 e inactivada por PKC, como un intermediario
importante en este proceso. Estos resultados aportan una conexin molecular entre la activacin del receptor m1 y la proteccin antioxidante
neuronal y sealan a Nrf2 como el mediador clave en este proceso.
Perez S, Barrachina M, Rodriguez A, Martn M, Ferrer I

Instituto de Neuropatologia.Universitat de Barcelona.Hospital Universitario de Bellvitge.
La enfermedad de los granos argirfilos (EGA) es una demencia progresiva de aparicin tarda caracterizada por una afectacin cognitiva y
morfolgicamente por inclusiones granulares argiroflicas con depsitos
de protena tau (4R) en las proyecciones neuronales junto con los coiled
bodiesen los oligodendrocitos Estn especialmente afectadas la corteza
entorrinal, CA1 del hipocampo, amgdala y sistema lmbico. La expresin
de los receptores de adenosina 1, 2a y 2b (A1R, A2aR y A2bR) se han
estudiado en la corteza frontal y el hipocampo en EGA con la intencin
de evaluar la modulacin de los receptores de adenosina en esta enfermedad. Se ha observado un incremento significativo de A1R, pero no de
A2aR y A2bR en hipocampo pero no en la corteza frontal al compararlo
con controles de la misma edad. Estos cambios estn acompaados por
un incremento en los niveles de la adenilato ciclasa (AC), un efector de
los A1R y un incremento del porcentaje de inhibicin de estimulacin por
foskolina en AC por los agonistas A1R cyclohexyladenosina (CHA) y N6cyclopentyladenosine (CPA) en el hipocampo de EGA. Estos resultados
reflejan una sensibilizacin de A1R/AC en el hipocampo en EGA a favor
de la activacin de la va intrnseca, facilitando as la neuroproteccin.
A. Rodrguez et al. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 65 (2006): 964-975; E.
Angulo et al. Brain Pathol. 13 (2003) 440-451; H. Braak, E. Braak, J. Neural
Transm. 105 (1998) 801-819; T. Togo et al. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 61
(2002) 547-556; J. Deckert et al. Neurosci. Lett. 244 (1998) 1-4; M.Yamamoto et al. Biochim. Biophys. Acta 1535 (2000) 60-68.

Modulation of epileptogenic activity by
GABAergic cell brain grafts.
Sandra Vidueira Fernndez, Francisco J. Sancho, Jos M.Gallego,
Laura Ortiz, Ascensin Castillo, Rafael Galiano, Rafael Gutirrez, Mara
Aliaga, Irene Garca-Morales, Jorge Matas-Guiu, Jos M. Soria, Jos M.
Garca-Verdugo, Juan A. Barcia.
Centro de Investigacin Prncipe Felipe de Valencia. Instituto de
Neurociencias, Hospital Clnico San Carlos. Universidad Complutense de Madrid.
Background: Grafting of inhibitory neurotransmitter-producing cells
into the epileptogenic brain areas has been used to control seizure development in experimental models. Here we report the results of gabaergic
cell grafting at the amygdala compared to intracerebral infusion of GABA
at different brain locations in the kindling model of epilepsy.
Material and methods: Fully amygdala kindled rats were implanted
with an intracerebral cannula either at the ipsilateral amygdala or the
dorsomedian (DM) nucleus, connected to a GABA-releasing infusion
pump. Other animals kindled at the pyriform cortex were implanted at
the ipsilateral basolateral amygdala with either gabaergic neurons obtained from embryonic medial ganglionic eminence (MGE) or fibroblasts,
both obtained from transgenic rats expresing green fluorescent protein.
Seizure and neurologic behavior was recorded and inmunohistochemical
and ultrastructural studies were carried out.
Results: Local delivery of GABA at the amygdala raised the seizure
thresholds as compared to controls, while delivery at the DM slightly
improved the seizure generalization. MGE gabaergic cells grafted at the
amygdala achieved focal seizure control several weeks after the implantation. No behavioral side-effects were recorded in either experimental
group.
Discussion: Intracerebral delivery of neurotransmitters may be a useful technique to modulate the epileptogenic activity. This may be done by
local infusion of neurotransmitter-producing cells, which may be considered as a promising strategy to treat drug resistant temporolimbic epilepsy,
provided they do not have teratogenic or other side effects.
139
Caracterizacin de los factores promotores del crecimiento axonal secretados

por las astas de ciervo
Una poblacin celular de la corteza temporal, generada en periodo embrionario,

mantiene un fenotipo neuronal inmaduro
durante el periodo adulto.
Manuel Nieto Daz; Pita Thomas,W. y Nieto Sampedro, M.

Instituto Cajal (CSIC). Unidad de Neurologa Experimental (CSICSESCAM). Hospital Nacional de Parapljicos
La rama del trigmino que inerva las astas de los ciervos experimenta
un proceso de regeneracin y rpido crecimiento anual paralelo al que
presentan las propias astas. Este proceso, nico entre los mamferos, es
una fuente de informacin acerca de posibles factores y mecanismos implicados en la regeneracin y el crecimiento axonal rpido. La inervacin
de las astas discurre por el terciopelo, una forma de piel modificada, propia de las astas. En experimentos previos hemos demostrado que factores secretados por el terciopelo en cultivos organotpicos promueven el
crecimiento neurtico en ganglios raqudeos (DRG) de rata, mientras que
los factores secretados por el mesnquima, el otro tejido en crecimiento
en las astas, son ligeramente inhibitorios. Hasta la fecha, se han descrito
diversos factores neurotrficos en el asta del ciervo, incluyendo NT-3
y NGF. La distribucin de estas molculas en las astas es concordante
con la distribucin de los axones y podran ser responsables, al menos
parcialmente, del crecimiento axonal en las asta. Sin embargo, nuestros
experimentos in vitro muestran que el crecimiento neurtico de DRGs
cultivados con factores secretados por astas es independiente de NGF
y NT-3. En esta contribucin presentamos una caracterizacin preliminar
de las molculas implicadas en el crecimiento neurtico, presentes en medios derivados del terciopelo del asta.

FoxP1 and Dach2 gene expression patterns identify specific domains and nuclei
through ontogenetic development of the
chicken pallium.
J.L.Ferran1, J.E. Sandoval1, M.Martinez-de-la-Torre1, C. Scharff2, and
L. Puelles1
1 Department of Human Anatomy, School of Medicine, University
of Murcia. Spain.. 2 Max Planck Institute for Molecular Genetics,
Berlin, Germany.
During the early steps of regionalization the central nervous system
develops a number of primary subdivisions. The telencephalon becomes
subdivided initially in pallial and subpallial parts. Later on the pallium give
rise to four domains: ventral, lateral, medial and dorsal pallia. In mammals,
the lateral and ventral pallial domains generate cortical and nuclear derivatives, whereas the dorsal and medial pallial domains result structured
essentially in a cortical way. The cortical parts of the ventral and lateral pallial regions form the piriform cortex, which is associated to the
deep claustroamygdaloid nuclear complex. Within this, the avian ventral
pallium contains sensory thalamorecipient nuclei such as VisCo, L field
and BSS.These nuclei are composed of core and shell parts.We examined
by means of in situ hybridization Dach2 and FoxP1 mRNA expression
in the developing chick from early to posthatching stages, to study the
characterization of ventral, lateral and dorsal pallial derivatives, basing our
description in the pallial subdivision model (Puelles et al., 2000).The telencephalic transcripts of Dach2 and FoxP1 start to appear at HH24, HH26,
respectively. Later on, Dach2 is expressed mainly in the ventral pallium,
while FoxP1 predominates in the lateral, dorsal and medial pallia. From
HH36 omwards we found differential core versus shell expression of
both Dach2 (e.g. VisCo positive and VisSh negative) and FoxP1 (e.g. core
high expression and Shell weakly) in the sensory ventropallial nuclei.
Supported by MEC grants BF1 2002-3886 BFU2005-09378-C02-01,
and CIBERER network to LP. (J.L.F. is a CIBERER postdoctoral researcher
and J.E.S. is a predoctoral fellow).
140
Maria Angeles Gomez Climent; Castillo-Gmez E., Guirado R., Varea E., Blasco-Ibez J.M., Crespo C., Martnez-Guijarro F.J. & Ncher J.
Unidad de Neurobiologa y Programa en Neurociencias Basicas y
Aplicadas. Departamento de Biologa Celular, Universitat de Valncia, Dr. Moliner, 50, Burjassot, 46100, Espaa.
En la capa II de la corteza temporal,( piriforme, entorhinal y perirhinal) de ratas adultas, aparece una poblacin de clulas que expresan
marcadores de neuronas inmaduras como la forma polisializada de la
molcula de adhesin celular neural (PSA-NCAM). Consecuentemente
existe controversia en torno a la existencia de neurognesis en esta rea.
Por ello, procedimos a analizar de modo exhaustivo el fenotipo de dichas
clulas. La ausencia de expresin de marcadores de astrocitos, oligodendrocitos y microgla demostr que no eran clulas gliales. La mayora
de estas celulas expresaban marcadores para neuronas inmaduras como
doblecortina, TUC4 y fosfo-CREB. Por contra, muchas de ellas no expresaban marcadores de neuronas maduras (NeuN) y ninguna pudo ser
clasificada como interneurona o neurona principal. Adems la inyeccin
en ratas adultas de 5 BrdU demostr que estas clulas no eran de generacin reciente. Inyecciones de 5BrdU a diferentes tiempos de gestacin
y el posterior anlisis de dichas clulas en la prole adulta, mostr que son
generadas durante la embriognesis, producindose el pico de generacin
en torno a E15. El anlisis de estas clulas mediante microscopia electrnica demostr que no existen aparentemente sinapsis sobre ellas. Este
estudio demuestra que esta poblacin de clulas inmaduras no son de reciente generacin, pero permanecen en un aparente estado de inmadurez
en la vida adulta. Probablemente PSA-NCAM estara actuando como un
elemento aislante e impedira los contactos celulares sobre ellas.
Agradecimientos: MEC FPU AP2005-4672 y AP 2006-01953.

PAPEL DE LAS DIFERENTES ISOFORMAS DEL RECEPTOR DE HORMONA TIROIDEA EN EL DESARROLLO DEL CEREBELO
Grijota Martinez; MC.(1), Morte, B.(1), Scanlan,T.(2)., Bernal, J.(1).
1-Instituto de Investigaciones Biomdicas Alberto Sols CSIC-UAM.
Madrid. Spain. 2-Department of Pharmaceutical Chemistry and
Molecular Pharmacology, University of California, San Francisco,CA
Las hormonas tiroideas ejercen una gran influencia en la migracin
y diferenciacin de las clulas neurales. La falta de hormona tiroidea durante el periodo neonatal causa retraso en la migracin de las clulas
granulares del cerebelo y defectos en la diferenciacin de las clulas de
purkinje. Sus acciones son llevadas a cabo principalmente mediante unin
de T3 a receptores nucleares. Existen dos subtipos de receptor, TRalpha
y TRbeta. En este trabajo hemos analizado la contribucin de ambos en
el desarrollo del cerebelo durante el periodo posnatal. Para ello hemos
comparado el efecto del tratamiento con T3 vs GC-1, un anlogo de HT
con afinidad superior por TRbeta.
Se utilizaron animales control, hipotiroideos tratados con T3, con
GC-1 o sin tratar. Los tratamientos fueron llevados a cabo desde el da
5 posnatal (P5) hasta p27.Se estudi el efecto del tratamiento en peso
corporal, en estructura del cerebelo y en desarrollo de pruebas de coordinacin motora y equilibrio; rotarod y paw-print test.
T3, pero no GC-1, hacen recuperar el peso corporal hasta valores
similares a los controles. El hipotiroidismo induce un retraso en la migracin de las clulas granulares del cerebelo, el cual puede prevenirse
mediante la administracin T3 pero no de GC-1.
El test del rotarod muestra peores resultados en los animales hipotiroideos con respecto a los controles y a los tratados con T3 siendo los
tratados con GC-1 los animales que peor desarrollan esta tarea. Estos
resultados sugieren que el desarrollo del cerebelo est regulado principalmente a travs de TRalpha.

CARACTERIZACIN IN VIVO E IN VITRO DE LAS CLULAS PROGENITORAS DE BASTONES EN LA RETINA ADULTA
El Cortical Hem no determina el destino

de las clulas de Cajal-Retzius
Rosario Snchez-Gonzlez, Adrin Santos-Ledo, Javier Arenzana,

ngel Porteros, Juan Lara, Jos Aijn y Rosario Arvalo
Dpto Biologa Celular y Patologa, Universidad de Salamanca. Instituto de Neurociencias de Castilla y Len
La degeneracin de los fotorreceptores es una causa muy comn
de ceguera en humanos; por ello, se han realizado numerosos estudios
dirigidos tanto a retardar la muerte de conos y bastones, como a intentar
reponer las clulas que ya se han perdido. Recientemente se ha descrito
que el transplante de clulas progenitoras de bastones en una retina en
degeneracin mejora la funcin visual, ya que dichas clulas son capaces
de diferenciarse a bastones maduros y de integrarse en la retina. Por ello,
resulta de especial inters la caracterizacin y aislamiento de progenitores de bastones de retina adulta.
Como animal de experimentacin hemos utilizado el carpn (Carasiuss auratus), porque este animal posee una poblacin de clulas progenitoras de bastones que se mantiene activa y que genera bastones durante toda la vida adulta del individuo. Tras realizar numerosas pruebas con
distintos marcadores de clulas progenitoras, hemos encontrado un marcador exclusivo de clulas progenitoras de bastones en la retina adulta,
que reconoce una protena de la familia de las promininas. La realizacin
de dobles marcajes inmunofluorescentes pone de manifiesto que las clulas positivas a dicha protena se marcan tambin para BrdU, doblecortina
y nestina. Adems, hemos comprobado que estas clulas utilizan a la gla
de Mller como gua para migrar a lo largo de las distintas capas de la
retina. Para la caracterizacin in vivo utilizamos una columna de separacin magntica y el anticuerpo marcado con una esfera de metal, que nos
permite aislar las clulas proliferativas de bastones. Tras sembrarlas en un
medio de cultivo proliferativo obtuvimos neuroesferas primarias.

The role of the transcription factors
FoxD1 and FoxG1 during the development
of the mammalian visual system
Mara Isabel Carreres Snchez; Elosa Herrera
Instituto de Neurocincias de Alicante
FoxD1 and FoxG1 are two transcription factors from the winged-helix family expressed, early in development, in adjacent domains in the retina (FoxD1 in the temporal hemiretina and FoxG1 in the nasal hemiretina),
and in the region of the future optic chiasm (Hatini et al, 1994). In the
chiasm midline, FoxD1 knock-out mice show aberrant axonal projections
(Herrera et al., 2004) and FoxG1 knock-out mice exhibit an increase in
the number of axons that project ipsilaterally (Pratt et al, 2004). Detailed
analyses of these mutants have demonstrated that FoxD1 and FoxG1 play
a dual role in the development of the optic chiasm. First, in the specification of RGCs and second, in the patterning of the ventral diencephalon,
in which the optic chiasm forms (Herrera et al., 2004, Pratt et al., 2004).
In addition, it is known that FoxD1 and FoxG1 are implicated in the establishment of the retinotectal projection in the chick (Yuasa et al., 1996).
To further investigate the role of FoxD1 and FoxG1 in the
control of retinal axon projections along the retinofugal pathway, we have
set up in the lab an innovative technique to perform gene delivery into
mouse embryonic retinas. This method permits the in vivo visualization
of the axonal trajectory of retinal cells, in which ectopic genes have been
introduced. Using this approach we have analyzed the behaviour of axons
from retinal cells that ectopically express FoxD1 or FoxG1 at several
points along the retinofugal pathway, including the optic chiasm and the
final visual targets.
Mara Laura Ceci, Laura Lpez Mascaraque y Juan A. de Carlos

Instituto Cajal (CSIC), Avenida del Dr. Arce 37, Madrid, Espaa.
Las clulas de Cajal-Retzius (CR) murinas se generan en E10-E11 y
colonizan la preplaca en 24 horas. Recientemente hemos descrito que
el Cortical Hem rostral, medial y caudal genera clulas CR que migran
siguiendo rutas muy definidas con orientaciones hacia la corteza rostral,
medial y caudal, respectivamente (Garca-Moreno et al., 2007). En el presente trabajo pretendemos analizar si la correspondencia entre origen
y destino de estas clulas esta codificada en el propio Hem. Para ello
disecamos el Cortical Hem caudal en ratones B6tgN verdes (E11) y lo
trasplantamos en el Hem rostral de ratones B6tgN blancos (E11). Los
embriones trasplantados fueron cultivados in toto durante 24 horas. Con
microscopa de fluorescencia se estudi la ruta de migracin de las clulas
transplantadas y se comprob su expresin de las protenas Calretinina y
Relina. Los resultados obtenidos revelan que las clulas provenientes del
Hem caudal y trasplantadas en el Hem rostral adoptan, sin ninguna excepcin, el comportamiento de las clulas rostrales, migrando tangencial
y subpialmente por su nueva ruta de migracin hacia la corteza cerebral
rostral, expresando Calretinina y Relina. Concluimos que las clulas CR
no parecen haber sido condicionadas por factores que puedan expresarse de manera diferencial en el eje rostro-caudal del Hem, sino que
la direccionalidad de estas rutas podra corresponderse con gradientes
de factores genticos que se expresan en el neuroepitelio cortical. Estos
experimentos se estn llevando a cabo en el mutante Sey con objeto de
analizar posibles alteraciones en las rutas migratorias al faltarles el gen
Pax6. Financiado por el MEC (BFU2006-01898).
Garca-Moreno F., Lpez-Mascaraque L. and De Carlos J.A. 2007. Origins and migratory routes of murine Cajal-Retzius cells. J Comp Neurol. 500: 419-432.

Induccin de la sinaptognesis en neuronas de hipocampo por sobreactivacin de
PI3K
Cristina Carams1, Marta Cantarero1, Angel Acebes2, Alberto Ferrus2,
Xavier Gasull1 y Miguel Morales1
1. Laboratorio de Neurofisiologa. Departamento de Ciencias Fisiolgicas I. IDIBAPS-Facultad de Medicina. Universidad de Barcelona.
2. Departamento de Neurobiologa del Desarrollo. Instituto Cajal
(CSIC). Avda. Dr. Arce n 37, Madrid.
Los niveles de activacin de la fosfoinostido-3-quinasa (PI3K) regulan
el nmero de sinapsis tanto en neuronas de Drosophila como en neuroblastomas humanos (Matinez-Pea, J. Neurosci. (2006) 26:10199-10208).
El objetivo de nuestro estudio ha sido la caracterizacin de los efectos de
la sobreactivacin de PI3K sobre la sinaptognesis y la transmisin sinptica en el sistema nervioso de mamferos. En neuronas de hipocampo de
rata en cultivo tratadas crnicamente con 50 g/ml del pptido activador
de PI3K (740 YP), se observ un aumento de la densidad sinptica de
casi un 100 % durante los das de cultivo 4, 6 y 8. La sobreactivacin de
PI3K ha resultado tambin eficaz en el aumento de la densidad de espinas
dendrticas. As, en neuronas transfectadas con actina-GFP y tratadas crnicamente a partir del da 18 con el pptido 740 YP, la densidad de espinas
aument un 25 y un 30 % en los das 20 y 22 de cultivo, respectivamente.
En estos cultivos, la aplicacin aguda de 5 g/mL de 740 YP aument la
tasa de liberacin espontnea (mEPSCs) en un 20 % y la probabilidad de
liberacin medida con un protocolo de facilitacin por pares de pulsos.
Podemos concluir de stos resultados que la sobreactivacin de la PI3K
es un potente inductor de la sinaptognesis y de la espinognesis en neuronas de mamfero, as como un potenciador de la transmisin sinptica.
- Hatini,V., (1994) Journal of Neurobiology. 25:1293-309

- Yuasa, J (1996). Nature, 382, 632-635.
- Herrera, E (2004). Development, 131, 5727-5739.
- Pratt, T (2004) Development, 131, 3773-3784
141
Neurognesis tras la destruccin parcial

del epndimo del ventrculo lateral de
rata adulta
La administracin aguda de MPTP pero no

la crnica se asocia a un incremento en la
expresin de Cox-2 en las neuronas dopaminrgicas supervivientes de la Sustancia
Negra.
M Carmen Gmez Roldn; Cifuentes M, Capilla-Gonzlez V, Garca-Verdugo JM, Fernndez-Llebrez P, Prez-Martn M

-Departamento de Biologa Celular, Gentica y Fisiologa, Facultad
de Ciencias, Universidad de Mlaga, Espaa. -Laboratorio de Morfologa Celular. Unidad mixta CIPF-UVEG. Valencia, Espaa.
La zona subventricular de la pared estriatal del SNC adulto de roedores es una regin de gran potencial neurognico. El epndimo que tapiza
esta superficie ventricular juega un importante papel en el control de la
neurognesis. Hemos estudiado qu ocurre si eliminamos parte del epitelio ependimario. Mediante una inyeccin intracerebroventricular del enzima neuraminidasa logramos destruir parcialmente el epndimo que tapiza
la pared estriatal del ventrculo inyectado, permaneciendo intacto el del
ventrculo contralateral y del resto de cavidades ventriculares. Este enzima acta escindiendo los residuos de cido silico de las glucoprotenas
de la membrana apical y basolateral y causa daos en cilios y microvellosidades. Las clulas ependimarias afectadas mueren y se desprenden. A las
pocas horas de la inyeccin, macrfagos y neutrfilos procedentes de los
plexos coroideos invaden el ventrculo inyectado. El epndimo eliminado
nunca se regenera y es sustituido por una cicatriz astrocitaria. Algunas
clulas ependimarias de las que permanecen, pierden el contacto con el
ventrculo, alojndose bajo la capa glial y mostrando una cavidad interior
con cilios. Otras muestran alteraciones en el aparato ciliar. En las zonas
sin epndimo ocurre una intensa proliferacin celular hacia la cavidad
ventricular, formndose grandes grupos celulares, visibles tras 12 horas
de la inyeccin. Las nuevas clulas presentan fenotipo neuronal (bIII-tubulina+/PSA-NCAM+). Estos grupos celulares se siguen observando 90
das despus del tratamiento. El anlisis de los bulbos olfatorios muestra
la migracin e incorporacin de nuevas neuronas desde el ventrculo inyectado. Estos resultados demuestran la existencia de neurognesis en
ausencia de epndimo. Financiacin: BFU2006-11754.

El cido lisofosfatdico es un factor regulador de la neurognesis en el bulbo olfatorio de ratones adultos
M Dolores Lpez valos; Leonardo Beccari, Pedro Fernndez-Llebrez
Dpto. Biologa Celular, Gentica y Fisiologa, Facultad de Ciencias,
Universidad de Mlaga
Aunque la neurognesis es un proceso generalizado en el cerebro
embrionario, en el adulto queda restringida a regiones concretas, como
la zona subventricular (ZSV), desde donde los neuroblastos migran rostralmente hasta el bulbo olfatorio (BO) para incorporarse como interneuronas a las capas granular y periglomerular. Debido a la importancia
terapetica de la regeneracin del tejido nervioso, es de gran inters
conocer los factores que controlan la neurognesis. En los ltimos aos
se ha descrito la participacin de un lpido extracelular, el cido lisofosfatdico (LPA), en la neurognesis embrionaria. En embriones el receptor
Lpa1 se expresa en la zona de neurognesis, estimula la mitosis terminal de los precursores neurales, reduce la muerte celular, e induce la
diferenciacin hacia el linaje neuronal. La cepa de ratones mutantes para
el receptor Lpa1 ha sido utilizada para desarrollar el presente trabajo,
cuyo objetivo fue analizar la participacin del LPA en la neurognesis del
BO adulto. Los animales Lpa1-/- mostraron alteraciones morfolgicas y
reduccin del tamao del BO que afectaba a las capas granular y periglomerular. La incorporacin de nuevas neuronas a estas capas estaba reducida, pese a la normal proliferacin de los precursores neurales en la ZSV.
Sin embargo, se detect ms apoptosis en la ruta rostral migratoria y en
la capa granular de los mutantes, lo que podra en parte explicar la menor
neurognesis en el BO. Estos resultados indican que el LPA es un factor
regulador de la neurognesis en adultos, favoreciendo la supervivencia de
los neuroblastos en migracin.
Financiacin: PI-021517; BFI2003-03348
142
Marianne Vazquez Claverie; Pablo Garrido-Gil, Irene Marcilla ,

Waldy San Sebastin, Silvia Belzunegui, Amaya Izal, Berta Lpez, M
Rosario Luquin.
Laboratorio de Terapia Regenerativa. Area de Neurociencias. Centro
de Investigacin Mdica Aplicada (C.I.M.A.). Universidad de Navarra.
Antecedentes: Se ha sugerido que una produccin excesiva de enzimas
proinflamatorias como la ciclooxigenasa tipo-2 (Cox-2) podra contribuir a
la muerte de las neuronas dopaminrgicas en la enfermedad de Parkinson.
Objetivo: Investigar el patrn de distribucin de la Cox-2 en las neuronas dopaminrgicas de la SN y ATV de macacos, su modificacin tras la
administracin aguda y crnica de MPTP y su correlacin con la prdida
dopaminrgica.
Material y mtodos: 5 macacos tratados con 4 dosis de MPTP
(0,25mg/Kg), 5 animales tratados crnicamente con MPTP (0,25-0,6mg/
Kg) y 2 animales intactos. Se procesaron 5-7 secciones que contenan SN
con tcnicas inmunocitoqumicas dobles para Cox-2 y TH. La cuantificacin de las clulas dopaminrgicas de la SNpc y ATV se realiz por estereologa. Se cuantific la intensidad de inmunofluorescencia para Cox-2
mediante densitometra.
Resultados: En los animales agudos, la deplecin dopaminrgica en la
SN y ATV fue de un 49% y 20% respectivamente. En los crnicos aument
a 89% (SN) y 75% (ATV). En el grupo agudo, la expresin de Cox-2 en las
neuronas dopaminrgicas se increment con respecto a los controles en
la SN y ATV, principalmente en la SNventral y la SNlateral (p<0,01). En el
grupo crnico, la expresin de Cox-2 se mantuvo incrementada respecto
al grupo control solamente en el ATV y SNventral (p<0,05).
Conclusin: La reduccin en la expresin de Cox-2 en las neuronas
dopaminrgicas de los animales tratados crnicamente con MPTP con
respecto los agudos indica que este enzima puede estar implicada en la
toxicidad aguda del MPTP.

Trasplantes de medula osea mejoran la
sintomatologa de un modelo animal de
ataxia
M. Piquer (1), J.S. Recio (2), I. Zipancic(1), B. lvarez(1), L. Osuna-Almagro (1), E.Weruaga (2), J.R. Alonso (2), M. lvarez-Dolado (1),
(1) Laboratorio de Regeneracin Celular. Centro de Investigacin
Prncipe Felipe. Valencia. (2) Laboratorio de Plasticidad Neuronal y
Neurorreparacin. Instituto de Neurociencias de Castilla y Len.
Universidad de Salamanca. Salamanca
En los ltimos aos se ha demostrado que clulas derivadas de la mdula sea son capaces de generar diversos tipos celulares, incluido neuronas. Ello sugiere su posible utilizacin en trasplantes para el tratamiento
de mltiples enfermedades neurodegenerativas, entre ellas la ataxia.
El presente trabajo pretende demostrar que el trasplante de mdula
sea puede mejorar la sintomatologa atxica de un modelo animal de
ataxia (ratones PCD) debida a la degeneracin progresiva de varios tipos
neuronales, especialmente neuronas de Purkinje entre los das P15-30
de edad.
Para ello, mdula sea procedente de animales normales es trasplantada en ratones PCD de 7-12 das de edad tras haber sido irradiados con
5.5 Gy. Como grupos control realizamos trasplantes de medula sea a
animales normales y de medula sea PCD a animales atxicos. Al cabo
de 30 das, los 3 grupos experimentales son sometidos a distintos test de
comportamiento para comprobar su capacidad motora: rotarod, campo
abierto, plano inclinado, footprinting y gris-test.
Los resultados muestran un alargamiento en la vida media y una mejora significativa y transitoria durante los 2 primeros meses tras el trasplante. Estos datos sugieren que el trasplante de mdula sea puede ser
una alternativa teraputica para tratar enfermedades neurodegenerativas
como la ataxia.

Distribucin subcelular de la fosfolipasa

C-beta1a y 1b en tejido cerebral de mamferos (rata y humano)
Enriquecimiento ambiental y envejecimiento: estudio de la interaccin glutamatodopamina en el ncleo accumbens
M. Montaa, M. Lpez de Jess, S. Barrondo, L. Echezarra, J. Salls

Departamento de Farmacologa, Facultad de Farmacia (VitoriaGasteiz), Universidad del Pas Vasco
De Blas, M., Garrido, P., Segovia, G., del Arco, A., Mora, F.
La Fosfolipasa C-b1 (PLC-1)es la PLC-(1-4) ms ampliamente distribuida en tejido cerebral humano (1,2). En clulas de origen hematopoytico se ha demostrado la existencia de dos variantes de expresin (PLC1a y PLC-1b), con presencia diferencial a nivel nuclear. Sin embargo, la
presencia y implicacin funcional de cada una de estas variantes en tejido
cerebral no ha sido abordada hasta el momento.As, el objetivo de este estudio fue valorar la distribucin subcelular de las variantes de expresin de
la PLC-b1 en tejido cerebral de mamferos. Para ello, se realizaron ensayos
de western blot en preparaciones de diversas fracciones subcelulares
(P1, P2 y Cyt) a partir de homogenados de corteza e hipocampo de ratas
y muestras de corteza frontal humana. La valoracin de la expresin de
histonas y tubulina demostr el enriquecimiento en membranas nucleares, plasmticas y citosol respectivamente de estas fracciones. En todas
las muestras el anticuerpo anti-PLC-1 reconoci dos bandas de 150 y
140 kDa, correspondientes a las variantes PLC-1a y PLC-1b. Tras el
fraccionamiento el 100% de la inmunoreactividad de la PLC-1 total (a+b)
obtenida en los homogenados fue recuperada en las tres fracciones (P1,
P2, Cyt), representando esta expresin el 251.6, 351.6 y 401.5% sobre
el total obtenido en los homogenados. La correccin de estos valores por
la cantidad de protena total revel una expresin un 75 y 80% mayor en
las fraccines P1 y P2 que en la citoslica en rata y humano, respectivamente. Por otro lado, slo en la fraccin citoslica se observaron diferencias significativas entre ambas variantes, representando la expresin de
la a el 642.5, 540.6, y 652.1% del total de la seal (a+b) en corteza e
hipocampo de rata, y corteza humana respectivamente.
Financiado por SAF2004-02784 (MEC)
El objetivo del presente trabajo fue estudiar el efecto del enriquecimiento ambiental (EA) y del envejecimiento sobre la respuesta del neurotransmisor dopamina y de la actividad motora a la perfusin local del
agonista glutamatrgico AMPA en el ncleo accumbens (ACC). Se utilizaron ratas Wistar macho adultas (3 meses de edad), que se mantuvieron en
condiciones control o de EA (10-12 animales en jaulas de 120x100x60cm
con tuberas, juguetes y ruedas de ejercicio) hasta los 6, 15 y 24 meses
de edad. La concentracin extracelular de dopamina se evalu mediante
microdilisis y HPLC-EC. La actividad motora se evalu mediante actmetros acoplados al sistema de microdilisis. La perfusin de AMPA(100mM)
increment la concentracin extracelular de dopamina en el ACC de
animales control y mantenidos en EA de todos los grupos de edad, siendo ste aumento mayor en el grupo de 15 meses. La coperfusin de
AMPA+NMDA(10mM) potenci los efectos de AMPA en animales de 6
meses pero los redujo en animales de 15 meses en ambos grupos experimentales. El EA no modific estos efectos. Tanto la perfusin de AMPA
como de AMPA+NMDA produjo un aumento en la actividad motora de
los animales de todos los grupos experimentales. La actividad motora
espontnea (open-field) fue menor en animales mantenidos en EA. As
mismo el EA produjo mayores niveles de BDNF (ELISA) en el hipocampo,
pero no en estriado o ACC, con respecto a los animales control. Los resultados sugieren que la interaccin glutamato-dopamina en el ACC vara
con la edad. SAF2003-0448, SAF2006-01554, PR45/05/14199/UCM.
1. Lpez de Jess y col., Neurochemistry Internacional, 49: 72-79 (2006)

2. Ruiz de Aza y col., Journal of Neuroscience Research, 84: 13-26 (2006)
3. Martelli y col., Pharmacology and Therapeutics, 101: 47-64 (2004).

Anlisis de las interacciones entre el receptor IGF-Iy la protena multicargotransportadora de -amiloide LRP2/megalina
Marta Bols, Silvia Fernandez, Luis Miguel Garca-Segura, Ignacio
Torres Alemn
Instituto Cajal, CSIC. Madrid. Espaa.
El factor de crecimiento parecido a la Insulina (IGF-I) es un potente factor neurotfico con acciones pleiotrpicas en el sistema nervioso
central adulto. Trabajos recientes han demostrado que el IGF-I circulante
es responsable del aclaramiento de amiloide (A) del cerebro. El tratamiento con IGF-I reduce la amiloidosis cerebral por medio de la interaccin con su receptor (IGF-IR) y el receptor multicargo transportador
de A conocido como LRP2/megalina localizado en el plexo coroideo. El
presente trabajo se desarroll para estudiar los dominios moleculares
responsables de la interaccin entre el IGF-IR y la megalina utilizando
una versin truncada de sta ltima (mini-megalina) que preserva las
funciones transportadoras de la misma. Mediante la generacin de mutantes con delecciones especficas de los distintos dominios del C-terminal
intracelular de la minimegalina estudiamos las regiones responsables de
su interaccin con IGF-IR en clulas MDCK, una lnea celular que imita
la funcin del epitelio del plexo. Los resultados indican que la interaccin
entre megalina e IGF-IR no involucra a la parte C-terminal de la megalina.
Por otro lado, ni la funcin de transporte por endocitosis, ni la localizacin en membrana plasmtica de la megalina se vio modificada por las mutaciones. Sin embargo, la regulacin por IGF- I si se vio afectada al eliminar
distintos dominios del extremo C-terminal intracelular. Estos resultados
sugieren una interaccin constitutiva entre megalina e IGF-IR que implica
zonas extracelulares o transmembrana de la megalina y una interaccin
regulable por IGF-I que implica a zonas intracelulares de la megalina.
Segovia G,. Neurobiol Aging 26:91-101 (1999)

Mora F, Brain Res Rev (2007) 3-11
Mecanismos de adaptacin y ajuste de ganancia

en neuronas piramidales de la corteza en barriles
Marta Daz-Quesada; Miguel Maravall
Instituto de Neurociencias de Alicante, UMH-CSIC
Las neuronas de la corteza en barriles adaptan a la estimulacin dinmica de vibrisas. Esta adaptacin implica un ajuste de relaciones estmulorespuesta (funciones de sintona), tal que las neuronas ajustan su ganancia
a la distribucin de estmulos [1]. En otros sistemas se han observado
fenmenos similares: por ejemplo, la adaptacin al contraste en el sistema
visual. En esos sistemas la adaptacin con ajuste de ganancia a menudo
depende de propiedades intrnsecas como las corrientes de hiperpolarizacin lenta o la inactivacin de la corriente de sodio [2,3].En la corteza
en barriles, la adaptacin a estmulos repetidos se debe a depresin sinptica [4], pero se desconoce si mecanismos intrnsecos participan en la
adaptacin a estmulos complejos.
Hemos examinado si las propiedades intrnsecas pueden generar
cambios adaptativos en las relaciones estmulo-respuesta de las neuronas
de la corteza en barriles. Para ello realizamos registros de patch de
clula entera en rodajas agudas, inyectando corriente que fluctuaba de
manera aleatoria y cuya distribucin estadstica variaba a su vez, generando un contexto cambiante. Las neuronas adaptaban su tasa de disparo siguiendo los cambios en la distribucin de estmulos y ajustaban su
ganancia al recibir estmulos netamente despolarizantes, como ocurre in
vivo. Usando bloqueantes sinpticos confirmamos que esta adaptacin se
debe a propiedades intrnsecas. A travs de anlisis cuantitativos y farmacolgicos, hemos caracterizado la identidad de las corrientes subyacentes.
Tanto la hiperpolarizacin lenta calcio-dependiente como la inactivacin
de la corriente de sodio contribuyen a esta adaptacin, aunque ninguno
de los dos mecanismos explica por completo este comportamiento.
Financiacin: HFSP (proyecto RG0043/2004-C), Ministerio de Educacin y Ciencia (proyecto BFU2006-04791/BFI), EC Marie Curie International Reintegration Grant (MIRG-CT-2004-511273), Beca predoctoral del
programa I3P del Consejo Superior de Investigaciones Cientficas (CSIC).
[1] M. Maravall, PLoS Biology 2007. [2] M. Sanchez-Vives, The Journal of Neuroscience 200. [3]K.Kim and F.Rieke, J.Neuroscience 2003. [4] S.Chung, Neuron 2002.
143
LA EXPOSICIN PRENATAL A PBDE 99 POTENCIA

LA FUNCIN DE LA VA GLUTAMATO-XIDO NITRICO-cGMP EN CEREBELO IN VIVO Y EN NEURONAS EN CULTIVO
Marta Llansola1, Slaven Erceg1, Pilar Monfort1, Carmina Montoliu2
and Vicente Felipo1
1. Laboratory of Neurobiology, Centro de Investigacion Principe
Felipe, Valencia. 2. Servicio de Hepatologa. Hospital Clnico Universitario. Valencia.
Los difenil teres polibromurados (PBDEs) se utilizan como agentes
ignfugos. En la leche de mujeres lactantes se encuentran cantidades significativas de PBDEs. Los posibles efectos neurotxicos de los PBDEs en el
desarrollo del sistema nervioso no se han estudiado bien. La exposicin
perinatal a PBDEs afecta las funciones cognitivas y motoras pero los mecanismos de estas alteraciones no se conocen bien.
La activacin del receptor NMDA aumenta el calcio intracelular que
se une a calmodulina y activa la xido ntrico sintasa, aumentando la formacin de xido ntrico que activa la guanilato ciclasa aumentando la
formacin de cGMP. Esta va de transduccin de seales est implicada en
procesos de aprendizaje y memoria.
Hemos estudiado si la exposicin prenatal de ratas al PBDE 99 altera la funcin de la va glutamato-xido ntrico-cGMP en cerebelo. Por
microdilisis in vivo en cerebelo observamos que la funcin de esta va
est aumentada en cerebelo in vivo en ratas de 10 semanas expuestas
prenatalmente a PBDE 99. En cultivos de neuronas granulares de cerebelo
de cras prenatalmente expuestas a PBDE 99 tambin se observa potenciacin de la formacin de cGMP inducida por NMDA. En cultivos de
neuronas granulares de cerebelo expuestos in vitro a concentraciones de
PBDE 99 entre 0.1 y 0.3 mM se reproduce la potenciacin de la funcin
de la va glutamato-xido ntrico-cGMP.
Tanto in vivo como en cultivos se observa un aumento del contenido
de calmodulina que debe contribuir al aumento de la funcin de la va.

Cuantificacin celular y volumen de los
ncleos mamilares en un modelo experimental de cirrosis.
Marta Mndez Lpez; Magdalena Mndez-Lpez (1), Laudino Lpez (1), M Angeles Aller (2), Jaime Arias (2) y Jorge L. Arias (1).
(1) Laboratorio de Psicobiologa, Facultad de Psicologa, Universidad de Oviedo. (2) Ctedra de Ciruga I, Facultad de Medicina,
Universidad Complutense de Madrid.
La encefalopata heptica (EH) es un trastorno funcional del sistema
nervioso que se produce como consecuencia del mal funcionamiento del
hgado. La EH tipo C, asociada a la cirrosis, es una de las ms frecuentes.
Se ha visto que el cerebro de los pacientes con EH muestra cambios
morfolgicos caracterizados por la hinchazn de los astrocitos. Nuestro
objetivo es cuantificar, mediante mtodos estereolgicos, el nmero total
de clulas (neuronas, glias y astrocitos GFAP-IR) en los ncleos mamilares
(ncleo mamilar medial, parte medial (MMm) y lateral (MMl), y mamilar
lateral (ML)) y determinar el volumen de estos ncleos en un modelo
experimental de cirrosis por administracin de tioacetamida (TAA) (n=6
ratas) y un grupo control (CO) (n=6 ratas). Los resultados muestran
que no existen diferencias significativas entre los grupos CO y TAA en
el nmero de neuronas y clulas de gla de los ncleos MMm, MMl y ML.
Sin embargo, se encuentra una disminucin de clulas GFAP-IR en los
ncleos MMm (F(1,10)=18.09; p=0.002) y MMl (F(1,10)=24.371; p<0.001)
del grupo TAA, sin decremento en el ncleo LM. Se encuentra mayor
volumen del ncleo MMm en el grupo TAA (F(1,10)=7.932; p=0.018). Los
resultados indican una mayor afectacin de la parte medial de la regin
mamilar. El incremento de volumen de este ncleo y la disminucin de
GFAP-IR pueden deberse a procesos inflamatorios. Estas alteraciones en
los ncleos mamilares mediales podran relacionarse con el deterioro
cognitivo que presentan los pacientes con EH, ya que la regin mamilar
est implicada en procesos de memoria.
Este trabajo se ha realizado con la ayuda MEC SEJ2004-07445.
144

Potenciales evocados por un tono modulado en amplitud mediante un chirp, en rata
despierta. Un nuevo mtodo de rastreo de
las frecuencias de resonancia de la actividad oscilatoria cortical
Marta Prez Alczar; M. Prez-Alczar, M. J. Nicols, M.Valencia, M.
Alegre, J. Iriarte, J. Artieda*
Laboratorio de Neurofisiologa, rea de neurociencias, CIMA, Universidad de Navarra, Pamplona, Espaa.
Objetivos: Los potenciales de estado estable (SSR) son respuestas
oscilatorias generadas por la estimulacin rtmica sensorial, debidas fundamentalmente a fenmenos de sincronizacin a nivel cortical. Nuestro
objetivo fue valorar si los SSR evocados por un tono modulado en amplitud mediante un chirp en rata despierta, son un buen mtodo para
determinar las frecuencias dominantes de las oscilaciones corticales.
Material y mtodo: Se estudiaron en 12 ratas Wistar (250-300g) los
SSR evocados por un tono modulado (5000Hz) en amplitud mediante un
chirp, cuya frecuencia aumentaba linealmente de 1-250Hz. Las respuestas
registradas con electrodos epidurales, implantados crnicamente sobre la
corteza auditiva, se analizaron mediante el promedio de las Transformadas
Tiempo-Frecuencia, la transformada del promedio y la coherencia de fase
intertrial (ITC). El estudio fue realizado con el animal despierto y libre, y
dormido con ketamina/xilacina
Resultados: Se registraron en todos los animales, oscilaciones que
aumentaban de frecuencia en funcin de la frecuencia de estimulacin,
alcanzando los 250 Hz. La respuesta presentaba una menor amplitud a
frecuencias altas. El potencial generado se debe en gran medida a fenmenos de reseteo de fase, especialmente a frecuencias altas. La anestesia
con ketamina/xilacina, provoc un aumento de la amplitud y de la ITC a
frecuencias en torno a los 200Hz., mientras que por debajo de los 100Hz
produjo una disminucin
Conclusiones: Este procedimiento puede ser un buen mtodo de
estudio de la actividad oscilatoria cortical que puede ser utilizado en
animales para estudios farmacolgicos o en modelos de enfermedades
neurodegenerativas.
Artieda J, Clin Neurophysiol 2004; 115:699-709.
Galambos R Proc Natl Acad Sci USA 1981; 78(4): 2643-2647.
Herdman AT, Brain Topogr 2002; 15(2):69-86.
Pantev C, Proc Natl Acad Sci USA 1991; 88(20):8996-9000.

Degeneracin de motoneuronas. Una estrategia teraputica con Eritropoyetina.
Marta Ruiz de la Encarnacin; Macarena Herrera, Carmen de
Felipe, Minerva Gimnez y Ribotta.
Instituto de Neurociencias de Alicante. CSIC-Universidad Miguel
Hernndez
La muerte selectiva de motoneuronas constituye la caracterstica
comn de las enfermedades de motoneuronas como la esclerosis lateral
amiotrfica (ELA). La causa es desconocida y actualmente no existe un
tratamiento eficaz. Para estudiar la degeneracin de motoneuronas hemos
utilizado un modelo animal: el ratn pmn (progressive motor neuronopathy) que presenta una mutacin espontnea del gen Tbce que codifica una
protena chaperona implicada en el ensamblaje de tubulina. La degeneracin de motoneuronas es seguida de la muerte del animal por fallo respiratorio. En este estudio, hemos aplicado al ratn pmn un tratamiento con
Eritropoyetina (Epo), ya descrita como neuroprotectora en lesiones del
SNC, siguiendo dos pautas: una, comenzando antes de manifestarse los
sntomas de la enfermedad y otra, comenzando una vez iniciados stos.
Los animales han sido valorados usando tests comportamentales y la mdula espinal se analiz por inmunohistoqumica. El tratamiento con Epo
(en ambas pautas) aumenta la supervivencia de los animales, previene la
prdida del peso observada en los animales mutantes y mejora la funcin
motora evaluada por grid runway test, neurological severity score (NSS)
y por el test del plano inclinado. La mdula espinal del animal mutante
presenta modificaciones fenotpicas detectadas por inmunohistoqumica
en algunos marcadores como CGRP (calcitonine gene related peptide),

serotonina, tirosina hidroxilasa, o calbindina, los cuales son parcialmente
restablecidos en los animales tratados con Epo. Estos resultados indican
que Epo puede constituir una estrategia teraputica para frenar el proceso degenerativo de motoneuronas.
Financiado por el Ministerio de Ciencia y Tecnologa, Ref. SAF 20020233 y la Fundacin La Caixa, Ref. NE 03/012-00.
CELIK, M; (2002) PNAS, 99, 22582263.
GRUNFELD, J (2006) Exp Neurol., 204, 260-263.
MARTIN, N; (2002) Nat genet., 32, 443-447.
SEONG-HO, K; (2007) Eur J Neurosci, 25, 1923-1930.

EL PEPTIDO -AMILOIDE EST PRESENTE EN LAS
TRES CLULAS DE LA SINAPSIS NEUROMUSCULAR.
SIN EMBARGO EL FRAGMENTO 25-35 APLICADO
EXOGENAMENTE NO MODULA LA LIBERACIN
DE LA ACh
Marta Toms Marginet; N Garcia, MM Santaf, MA Lanuza, J
Toms.
Unitat dHistologia i Neurobiologia (UHN), Facultat de Medicina
i Cincies de la Salut, Universitat Rovira i Virgili, carrer St. Lloren
num 21, 43201-Reus, SPAIN.
Mediante Western-blot se ha detectado b-amiloide en el msculo
Levator Auris Longus de rata adulta y neonata. Este pptido ha sido visualizado por inmunocitoqumica en los tres elementos celulares de la sinapsis neuromuscular: 1) en axones intramusculares y en axones terminales
motores, 2) en las clulas de Schwann terminal y mielinizante y 3) en la
membrana postsinptica de la clula muscular y la regin subsarcolmica.
El pptido 25-35 tiene el dominio funcional del beta-amiloide requerido
para el efecto tanto neurotrfico en tejido normal como neurotxico en
la enfermedad de Alzheimer. Con tcnicas de registro intracelular convencionales, hemos investigado la implicacin funcional de este fragmento
del b-amiloide (0.1-10 M; 0.5-24 horas de incubacin) en la modulacin de la neurotransmisin motora en el adulto y en el neonato. No
detectamos ningn cambio en la neurotransmisin evocada (contenido
cuntico), neurotransmisin espontnea (amplitud y frecuencia de los
potenciales miniatura de placa) ni en el potencial de la membrana de
las fibras musculares. Con los autorreceptores muscarnicos bloqueados
(M1 con pirenzepina, M2 con metoctramina y ambos con atropina) o con
la protena quinasa C bloqueada o potenciada (calfosteina C y un forbol ester, respectivamente) no se revel ningn efecto enmascarado del
pptido amiloideo en la regulacin de la neurotransmisin. Concluimos
que el pptido b-amiloide 25-35 se expresa en uniones neuromusculares
normales pero que no est implicado en la modulacin de la liberacin
de la acetilcolina.

Esquizofrenia
normocognitiva:
subgrupo pronstico?.
un
ML Vargas (1), JC Sanz (2), S Lpez (1), C Jambrina (1), N Garca (1).
1 Complejo Asistencial de Zamora. Servicio de Psiquiatra. 2 Hospital Psiquitrico Provincial de Mrida.
INTRODUCCIN
La esquizofrenia se asocia a disfuncin del sistema dopaminrgico
mesolmbico y a trastornos del neurodesarrollo en reas prefrontales (1).
El rendimiento neurocognitivo es muy variable dentro de la enfermedad
(2). El objetivo es conocer si el pronstico apoya la diferenciacin de un
subgrupo clnico con normal funcionamiento neurocognitivo.
MTODO
Se ha realizado un estudio de cohortes retrospectivo en una muestra
de 30 enfermos esquizofrnicos ambulatorios (63% varones) de Zamora.
En su mayora estaban diagnosticados de esquizofrenia paranoide (53%).
La edad media de la muestra fue de 32,8 aos (DS 7,2). Definimos la
normalidad cognitiva como el rendimiento superior a una puntuacin Z
= -1 simultneamente en tareas de funcin ejecutiva (BADS y WCST),
inteligencia (WAIS-III) y memoria (TAVEC). Se compararon 8 enfermos
esquizofrnicos normocognitivos frente a 22 controles esquizofrnicos
con rendimiento deficitario (Z < -1) en alguna de las pruebas. La variable

de efecto ha sido la puntuacin en la escala de desempeo funcional de
Strauss-Carpenter, computndose el valor promedio obtenido al 1, 2 y
3 aos de seguimiento. Se ha calculado la diferencia de medias con el
estadstico t de student.
RESULTADOS
La diferencia entre ambos grupos es significativa (p= 0,039), con un
tamao del efecto de 0,85.
DISCUSIN
La normalidad cognitiva en la esquizofrenia se asocia a un mejor pronstico a los tres aos de evolucin. Esta diferencia apoya la validez del
estudio especfico de este subgrupo clnico, el cual podra tener correlatos neurobiolgicos diferenciados.
1. Antonova E, Schizophr Res 2004;70(2-3):117-45.
2. Siegel SJ, Am J Psychiatry 2006;163(3):433-41.

Efecto de la administracin del antagonista metabotrpico de glutamato, MPEP,
sobre las disquinesias inducidas por levodopa y la expresin estriatal de Homer 1 a
en ratas lesionadas con 6-OHDA
M. Bonastre, A. Jimnez, C. Marin
Laboratori de Neurologa Experimental, Institut dInvestigacions
Biomdiques August Pi i Sunyer (IDIBAPS), Barcelona.
La hiperactividad glutamatrgica estriatal mediada por los receptores
metabotrpicos y sus vas de sealizacin, se considera que puede ser
crtica en el desarrollo de las disquinesias inducidas por levodopa en la
enfermedad de Parkinson y en el parkinsonismo experimental.
Objetivo: Investigar si la administracin del antagonista metabotrpico del grupo I, el MPEP atena las disquinesias inducidas por levodopa
y modifica la expresin de la protena Homer 1a, la cual participa en los
mecanismos moleculares intracelulares mediados por estos receptores.
Mtodos: Ratas Sprague-Dawley fueron unilateralmente lesionadas
en el haz nigroestriatal con 6-hidroxidopamina (6-OHDA, 8 mg).Tres grupos de animales fueron tratados durante 10 das con: levodopa (12 mg/
kg/da, n=7), levodopa+MPEP (1,5 mg/kg/da, n=7) o suero salino (n=7). Se
evaluaron 3 subtipos de movimientos anormales: disquinesias axiales, de
la extremidad y orolinguales. La expresin estriatal de la protena Homer
1a fue estudiada mediante Western Blot.
Resultados:A lo largo del tratamiento, los animales tratados con levodopa mostraron un incremento significativo de las disquinesias (p<0,01),
particularmente de las axiales (p<0,05) y de las de la extremidad (p<0,01).
En el grupo tratado con levodopa+MPEP el aumento no fue significativo.
La intensidad de las disquinesias fue menor en el grupo levodopa+MPEP.
No se objetivaron diferencias significativas en la expresin estriatal de
Homer 1a entre los dos grupos de tratamiento.
Conclusin: La administracin de MPEP atena la intensidad de las
disquinesias inducidas por levodopa en el modelo de parkinsonismo en
ratas lesionadas con 6-OHDA. Sin embargo, esta atenuacin no se correlaciona con modificaciones en la expresin estriatal de Homer 1a

Regulacin diferencial de la neurotransmisin dopaminrgica en las vas mesocortical y mesolimbica
Merc Masana Nadal; Francesc Artigas, Anala Bortolozzi
Departamento de Neuroqumica y Neurofarmacologa. IIBB-CSICIDIBAPS
La actividad de los sistemas dopaminrgicos (DA) mesocortical y mesolmbico est regulada por el patrn de descarga de las neuronas DA en
forma tnica y fsica, por el autoreceptor de DA D2 y el transportador
de DA (TDA). En corteza prefrontal medial (CPFm) existe una baja densidad del TDA y una posible co-liberacin/captacin de DA por terminales
noradrenrgicos (NA), a diferencia del ncleo accumbens (NAc). Adems,
la presencia del receptor D2 en CPFm como autoreceptor es controvertida. Aqu estudiamos la contribucin del receptor D2 y el papel de las
145
neuronas noradrenrgicas sobre la concentracin extracelular de DA en

CPFm y NAc de rata utilizando tcnicas de microdilisis y estimulacin
elctrica.
La aplicacin local de quinpirol (agonista D2/3) redujo igualmente los
niveles de DA en CPFm y NAc, mientras que 7-OH-DPAT (agonista D3)
produjo una disminucin significativamente mayor en CPFm. La infusin
local de nomifensina (inhibidor del TDA/NA) aument igualmente la concentracin de DA en CPFm y NAc. Sin embargo, en ratas lesionadas con
DSP-4 (toxina NA), nomifensina produjo un menor aumento en CPFm.
Por otra parte, GBR12909 (inhibidor selectivo del TDA) aument DA
ms en NAc que en CPFm. Finalmente, la estimulacin elctrica del locus
coeruleus increment los niveles de DA de forma distinta en CPFm que
en NAc.
Estos resultados sugieren que los autoreceptores D2 y el transportador de DA controlan los niveles de DA de modo diferente en la vas
mesocortical y mesolmbica. Asimismo, los terminales noradrenrgicos
contribuyen en la liberacin y/o recaptacin de DA en la CPFm.

Comportamiento del sistema oculomotor
durante el sueo REM inducido mediante
la activacin colinrgica del ncleo reticularis pontis oralis
J. Mrquez-Ruiz, A Gmez-Tubo y M. Escudero
Neurociencia y Comportamiento, Fac. de Biologa, Univ. de Sevilla,
Espaa.
El comportamiento del sistema oculomotor durante el sueo REM
consiste en una convergencia y depresin mantenida de los ojos interrumpidas por brotes de movimientos oculares rpidos (7-9 Hz). Experimentos de lesin y estimulacin en el tronco del encfalo sugieren que
los ncleos reticularis pontis oralis (NRPO) y caudalis podran ser los
generadores de estos fenmenos. En el presente trabajo se registr el
movimiento de ambos ojos y la actividad de las motoneuronas (Mns) del
ncleo del motor ocular externo (NMOE) tras la inyeccin del agonista
colinrgico carbacol en el NRPO. Se prepararon 6 gatos para el registro
crnico de sueo (EMG, EEG y ondas ponto-geniculo-occipitales (PGO));
estimulacin de ambos nervios del VI par craneal para la activacin antidrmica de las Mns; bobinas perioculares para la deteccin de la posicin
ocular; y, cnulas en el NRPO para la administracin de drogas. La inyeccin de carbacol en el NRPO indujo una rpida convergencia y depresin
tnicas interrumpidas por movimientos oculares rpidos divergentes y
de elevacin. Las Mns del NMOE solo codificaron seal de velocidad del
ojo y mostraron dos patrones de descarga diferentes asociados a los dos
tipos de ondas PGO registradas a nivel del ncleo geniculado lateral. Los
movimientos oculares y el comportamiento de las Mns del NMOE tras
la inyeccin de carbacol en el NRPO fueron muy similares a los observados durante el sueo REM espontneo, mostrando que la activacin del
NRPO es suficiente para reproducir los fenmenos fsicos y tnicos que
afectan al sistema oculomotor durante el sueo REM.
Financiacin: MCYT-BFU2005-01579, Espaa.

Neuronal endpoints in primary neuronal
cultures to evaluate and predict human
acute neurotoxicity
Mireia Galofr Centelles; Daniel Garca1, Zoila Babot1,2, Susana
Iraola1, Olga Collazo1, Nancy Herrera1, Cristina Suol1,2
1Department of Neurochemistry. Institut dInvestigacions Biomdiques de Barcelona. Consejo Superior de Investigaciones
Cientificas,CSIC.Rossello 161.Barcelona. 2CIBER en Epidemiologa
y Salud Pblica (CIBERESP). csenqi@iibb.csic.es
Validated alternative test methods are required for safety toxicology
of drugs and chemicals. Studies have demonstrated that there is ~70%
correlation between in vitro cytotoxic concentracions and in vivo LD50
or human lethal concentracions.We are developing a testing strategy that
could identify both factors to improve the correlation between in vitro
data and human acute toxicity and alerts for the identification of outliers.
146
A set of pharmaceutical, industrial, biocide and drug abuse chemicals

have been tested against GABAA receptor activity, GABA and glutamate transport , acetylcholinaesterase activity and membrane potential in
primary neuronal cultures. GABAA receptor-mediated chloride influx
was inhibited by compounds for which seizures have been observed after severe human poisoning. The potentiation of the GABAA receptor
by 2-propanol and ethanol correlates with the greater CNS depression
produced by 2-propanol. Abuse drugs inhibit [3H]GABA uptake but not
[3H]aspartate uptake. Exposure to organophosphorus compounds for 48
hours resulted in higher inhibition of acetylcholinaesterase activity than
shorter exposure for 30 60 minutes, suggesting that primary cortical
neurons have metabolic capacity. Most neurotoxic compounds altered
membrane potential. Mercuric chloride, pentachlorophenol and sodiul
lauryl sulfate decreased cell viability, however they were more potent at
neuronal endpoints. Acetaminophen and acetylsalicylic acid did not modify any of the endpoints assayed; they do not produce acute neurotoxicity
in humans.
These results show that in vitro evaluation of neural endpoints may
identify compounds that produce acute neurotoxicity in humans, provided that relevant in vitro models for acute neural disfunctions are used.
Financed by EU contract LSHB-CT-2004-512051

EFECTO NEUROPROTECTOR DE LIFEGUARD EN LA
MUERTE INDUCIDA POR FAS A TRAVS DE MICRODOMINIOS DE MEMBRANA
Miriam Fernndez1, Miguel F. Segura2, Joan X. Comella2, Valentn
Cea1
1Unidad Asociada Neurodeath, UCLM-CSIC, Departamento de
Ciencias Mdicas, Universidad de Castilla-La Mancha, Albacete,
Spain and 2Group of Cell Signalling and Apoptosis, Department of
Medical Sciences, University of Lleida-Hospital Arnau de Vilanova,
Lleida, Spain.
El sistema FasL-receptor tiene un papel esencial en regular la muerte
celular durante el desarrollo del sistema nervioso, y ha sido implicado en
enfermedades neurodegenerativas y respuestas inflamatorias en el SNC.
Lifeguard (LFG) es una protena altamente expresada en el hipocampo y
el cerebelo en el adulto, concretamente a nivel postsinptico y dendritas,
y muestra una interesante regulacin ya que aumenta su expresin durante el desarrollo postnatal.
En este estudio hemos investigado el mecanismo de accin de LFG en
la apoptosis inducida por FasL en diferentes poblaciones neuronales. Demostramos que la sobre-expresin de LFG en neuronas corticales reduce
la activacin de la caspasa-8 y protege de la apoptosis inducida por FasL.
Por otro lado, la reduccin de LFG endgeno con RNA de interferencia
incrementa la sensibilidad de las neuronas corticales. Adems, en neuronas
granulares de cerebelo (CGNs) diferenciadas, la proteccin de la apoptosis inducida por FasL es atribuida a LFG, ya que la inhibicin de LFG endgeno sensibiliza las CGNs. Por lo tanto, LGF es un inhibidor endgeno de
la muerte neuronal inducida por FasL y media la resistencia de neuronas
diferenciadas. Adems, hemos detectado LFG en los microdominios de la
membrana denominada lipid rafts, donde podra interaccionar con Fas receptor y regular las vas de sealizacin activadas por FasL.
Estos resultados revelan un posible papel de LFG como modulador
de la sealizacin de Fas y regulador de la supervivencia neuronal en el
sistema nervioso.

NMDA induce cambios en algunos de los
marcadores de la respuesta de las protenas no plegadas en neuronas corticales.
Miram Font-Nieves, Caty Casas, Clara Penas, Monica Guzmn,
Anna M. Planas,Valrie Petegnief
IIBB.CSIC-IDABAPS. Insituto de Neurociencia. UAB
En los ltimos aos, se ha demostrado que el estrs del retculo
endoplsmico (RE) y la subsiguiente respuesta de las protenas no plegadas (unfolded protein response: UPR) estn implicados en enfermedades
neurodegenerativas. Sin embargo, existen todava pocos estudios sobre

los posibles efectos beneficiosos de la modulacin de la UPR. El estrs del
RE participa a la muerte post-isquemica y ocurre tambin tras una lesin
excitotxica. En el presente trabajo, estudiamos cambios en marcadores
de la UPR tras una lesin transitoria con NMDA en cultivos de neuronas
corticales. Hemos estudiado por western blot la fosforilacin de eIF2a, la
expresin de CHOP y de grp78. El NMDA provoca una desfosforilacin
sostenida de eIF2a a 4 y 8hr post-NMDA pero el efecto se normaliza a
18hr. Los inhibidores de la sntasa de oxido ntrico previenen la muerte
inducida por NMDA y revierten la desfosforilacin de eIF2a a partir de
8hr. Resultados preliminares indican que la expresin de grp78 no est
afectada por la lesin, mientras que observamos un aumento de la inmunoreactividad a CHOP a 10hr post-NMDA. Nuestros resultados sugieren
que el NMDA induce una UPR atpica o incompleta en neuronas corticales pero requieren una mejor caracterizacin de la UPR en nuestro
modelo. Experimentos en curso nos permitirn determinar si el mantenimiento de la fosforilacin de eIF2a (mediante un inhibidor de la fosfatasa
de eIF2a) modula la UPR y rescata de la toxicidad de NMDA.
Financiado por fondos del MEC (SAF2005-05793-C01, SAF200608682) y del FIS (FIS05/0271).

Estudio del efecto producido por el trasplante de clulas madre hematopoyticas
procedentes de mdula sea en el cerebro
isqumico de rata adulta
Miriam Romaguera-Ros(1), Melissa Lezameta(2), Clara AlfaroCervell(2), Ulises Gmez-Pinedo(1,3), J.M.Garca-Verdugo(1,2)
(1)Centro de Investigacin Prncipe Felipe, Valencia, Espaa. (2)Universitat de Valncia, Valencia, Espaa. (3)CIATEJ-CONACYT, Guadalajara, Mxico
La isquemia es una enfermedad cerebrovascular que consiste en la
interrupcin del aporte sanguneo a una parte del cerebro, que se traduce en ltimo trmino en dficit neurolgico. La estrategia teraputica
existente para la isquemia cerebral, se limita a frmacos paliativos. Recientemente, se ha despertado inters en otras estrategias para la reparacin de la zona que delimita a la isquemia (rea de penumbra), como
la terapia celular. Entre las alternativas existentes, nos interesa el estudio
de la aplicacin de clulas madre adultas hematopoyticas (CMAH) de
mdula sea (MO), ya que se ha descrito que acuden a tejidos lesionados no hematopoyticos atradas por las quimocinas que all se liberan y
contribuyen a su homeostasis; tambin se ha descrito que las CMAH son
esenciales para que se produzca angiognesis y vasculognesis para la recuperacin de estos tejidos. En este trabajo se realiz isquemia focal (modelo de oclusin intraluminal de la arteria cerebral media) permanente a
ratas Wistar adultas, donde se estudi el efecto del trasplante de CMAH
de la MO, con el apoyo de tcnicas de microscopa confocal y electrnica
de transmisin. Los resultados indican que hay un incremento de la vascularizacin en la zona isqumica y un aumento de clulas inmunopositivas
a marcadores de activacin neurognica en la zona subventricular, como
TUJ-1, PSA-NCAM y GFAP.
Krbling M, N Engl J Med 2003;349:570-82
Rice CM, Lancet 2004;363:193-9.

Neuroprotecciny neuritognesis promovida por agonista del receptor sigma 1 en un
modelo organotpico de lesin medular
Mnica-Sofa Guzmn-Lenis, Xavier Navarro, Caty Casas
Grupo de Neuroplasticidad y Regeneracin, Instituto de Neurociencias, Universitat Autnoma de Barcelona
Los traumatismos medulares disparan una cascada de eventos moleculares, incluyendo la liberacin masiva de glutamato, conocida como
lesin secundaria. Con el fin de rastrear frmacos potencialmente neuroprotectores para las lesiones medulares, hemos establecido y optimizado
un modelo de excitotoxicidad sobre cultivos organotpicos de mdula
espinal de rata. Uno de los agentes analizados ha sido el agonista del
receptor sigma PRE084, que se ha descrito que promueve la superviven-
cia de neuronas corticales in vivo e in vitro. En nuestro modelo, hemos

encontrado que el tratamiento post-lesin con este agonista protege
hasta un 80% de las motoneuronas y que, adems, stas presentan extensiones neurticas mayores que las motoneuronas control. Para evaluar
y cuantificar el efecto neuritognico utilizamos explantes de ganglios de
las races dorsales, que presentaron neuritas de mayor longitud (146%)
cuando se trataban con PRE084. Tanto el efecto neuroprotector como el
neuritognico promovido por el tratamiento con PRE084 son revertidos
por un antagonista del receptor sigma as como por un inhibidor de la
PKC, indicando la va molecular de actuacin. Estos resultados sugieren
que el tratamiento con PRE084 puede ser de utilidad tanto para la neuroproteccin como para la regeneracin del parnquima medular afectado
por un trauma.

Inmunolocalizacin del receptor de estrgeno beta en la va retinofugal del ratn
M Angeles Real Avils; M Carmen Labrador, Jos Carlos Dvila,
Salvador Guirado
Hemos analizado la localizacin del receptor de estrgeno beta (ER)
en el encfalo del ratn mediante tcnicas inmunocitoqumicas usando
un anticuerpo policlonal (ERR/NR3B2, Sigma). Nuestros resultados demuestran la localizacin del ER en diferentes poblaciones neuronales
del encfalo del ratn como ya ha sido descrito (Mitra et al., 2003, Endocrinology 144:2055), y de forma especfica en los axones de las clulas
ganglionares de la retina. No hemos observado diferencias en la inmunotincin entre machos y hembras. Consistente con la inmunolocalizacin
del ER en la va retinofugal, hemos observado, en individuos adultos y
postnatales, axones inmunorreactivos en el quiasma ptico, tracto ptico
y comisura supraptica, y en todas las dianas de los axones retinales. En el
hipotlamo, observamos numerosas fibras inmunorreactivas en el ncleo
supraquiasmtico (ms abundantes en su porcin dorsomedial), y tambin
algunas fibras en el ncleo supraptico. En el tlamo ventral, el ncleo
geniculado ventral presenta numerosos axones inmunorreactivos, especialmente en su porcin magnocelular, donde se observa gran cantidad de
terminales. En el tlamo, observamos fibras inmunorreactivas en la laminilla intergeniculada, en el ncleo geniculado lateral dorsal y en el ncleo
lateral posterior. El ncleo geniculado lateral dorsal posee abundantes
fibras y terminales inmunorreactivos distribuidos homogneamente. En
el pretectum, observamos fibras en varios ncleos, incluyendo la parte
dorsal del pretectal anterior, el ncleo del tracto ptico y los ncleos
pretectal posterior y pretectal medial. Finalmente, observamos abundantes axones inmunorreactivos en las capas superficiales de los colculos
superiores. No hemos observado tincin de somas en ninguna de estas
estructuras visuales.
Financiado por BFU2006-14804-C02-01

Implicacin de las aferencias vagales sensibles a la capsaicina en las aversiones gustativas concurrentes inducidas por la administracin intragstrica de alimentos
Zafra MA, Molina F, Puerto A
Psicobiologa, Universidad de Granada, Granada, Espaa
El procesamiento de la informacin aversiva y reforzante parece
llevarse a cabo en paralelo en el sistema nervioso incluso coincidiendo
anatmicamente en las mismas estructuras cerebrales. Estudios recientes
han demostrado que en el aprendizaje de preferencias gustativas inducidas por la administracin intragstrica de alimentos recompensantes
complejos (predigeridos) estara implicado el eje vagal-parabraquial (1,
3). Sin embargo, la administracin intragstrica de nutrientes no siempre
es percibida como un evento de carcter positivo. De hecho, la administracin intragstrica de alimentos complejos en estado natural (no predigeridos) genera importantes reacciones de aversin. En este estudio
se ha examinado la posibilidad de que las fibras aferentes vagales puedan
procesar en paralelo tanto el componente aversivo como el reforzante
de los nutrientes. Para ello se ha interrumpido el procesamiento sensorial
del nervio vago mediante la aplicacin perineural de capsaicina, una neu-
147
rotoxina que destruye fibras aferentes. Asimismo, se ha utilizado como

prueba comportamental una tarea de aprendizaje concurrente en la que
las aversiones gustativas son inducidas por alimentos naturales administrados intragstricamente. Los resultados obtenidos demuestran que el
bloqueo de las aferencias vagales sensibles a la capsaicina interrumpe el
aprendizaje concurrente. Por el contrario el grupo control constituido
por animales neurolgicamente intactos puede realizar eficazmente esta
misma tarea. Estos datos son compatibles con otros estudios en los que
se han utilizado sustancias nocivas (2) y, en conjunto, sugieren que tanto la
informacin visceral de naturaleza aversiva como la reforzante se procesara a travs de una misma estructura visceral-cerebral, el nervio vago.
central no se observan neuronas NPY. En general, el nmero de clulas en

los primeros estadios postnatales es muy alto, ms numerosas las dbilmente teidas y las intermedias, pero conforme avanza el desarrollo disminuye la poblacin de neuronas NPY, especialmente las de tincin dbil
e intermedia. Se ha descrito que parte de las clulas NPY proceden de la
eminencia ganglinica medial-rea entopeduncular (Legaz, 2006). Desde
P0 se observan algunas fibras positivas y varicosas, sin una orientacin
determinada, as como algunos axones varicosos que se disponen en la
zona ms superficial de la amgdala medial posterior. La densidad de los
axones NPY aumenta en los siguientes estadios postnatales siendo muy
alta en el adulto, a excepcin de la amgdala central que tiene muy pocos
axones NPY positivos.
(1)Zafra MA, Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol,2007.

(2) Zafra MA, Neurobiol Learn Mem 86: 349-352, 2006.
(3) Zafra MA, Brain Res 950: 155-164, 2002.
Isabel Legaz (2006). Tesis Doctoral. Universidad de Murcia.

BFU2006-14804-C02-01
EFECTO DE LA LESIN CON MICROQUERATOMO

SOBRE LA ACTIVIDAD ELCTRICA DE LOS NOCICEPTORES CORNEALES.
Whole genome microarray analysis reveals changes in brain gene expression in

rats with strain behavioral divergences
M Carmen Acosta Boj; C. L. Luna; A. Aracil; V. F. Descalzo; C. Belmonte; J. Gallar

Instituto de Neurociencias de Alicante, Universidad Miguel Hernndez-CSIC; Sant Joan dAlacant.
Escarabajal MD1, Gmez MJ1, de la Torre L1, Morn I2, Torres C1,
Tobea A3, Fernndez-Teruel A3, Horcajadas JA4, Esteban FJ5
1Dept. Psychology, University of Jan. 2Dept. Psychology, University
of Granada. 3Dept. Pharmacology and Psychiatry, Autonomous University of Barcelona. 4IVI-Genomics, Valencia. 5Dept. Experimental
Biology, University of Jan
Objetivos: Estudiar la actividad de la inervacin sensorial corneal tras

la lesin con microqueratomo en ojos de cobaya in vitro, comprobando el
efecto de frmacos que reducen la excitabilidad neuronal. Mtodos: Con
un microqueratomo se realiz un colgajo corneal (4mm-, intraestromal)
en el ojo derecho del animal anestesiado. 1-15 das tras la lesin, los animales fueron sacrificados y los ojos extrados y transferidos a una cmara
con dos compartimentos aislados. En uno, se prefunda la crnea con solucin fisiolgica (32C); en otro, el nervio ptico y los ciliares estaban sumergidos en aceite mineral. Para el registro electrofisiolgico, filamentos
de los ciliares con 1-2 unidades activas, se colocaron sobre electrodos de
Ag-Ag/Cl. El campo receptor (CR) y el umbral mecnico de las unidades
se determinaron con pelos de von Frey. Como estimulacin trmica, se
aument (45C) o disminuy (20C) la temperatura de la solucin que
baaba la crnea. La estimulacin qumica consisti en pulsos de 98%CO2
(30s) sobre el CR. Los frmacos (amitriptilina, carbamacepina, lidocana,
fenitona) se aplicaron colocando un papel absorbente empapado sobre
el CR, durante 10min. Resultados: 1-2 das tras lesin disminuy significativamente el umbral mecnico en los mecano-nociceptores y aument
la respuesta de los polimodales al CO2, revirtiendo a partir de 3-5 das.
Todos los frmacos aplicados redujeron significativamente la respuesta a
CO2 sin afectar su umbral mecnico. Conclusiones: La lesin mecnica
con microqueratomo produce sensibilizacin de los nociceptores corneales 1-2 das tras la lesin. Los frmacos que reducen la excitabilidad
neuronal disminuyen la quimiosensibilidad de stos nociceptores
Financiacin: Fundacin Marcelino Botn, Proyectos GV/2007/030
(M.C.A.) de la G.V.; BFU2005-08741 (C.B.); SAF2005-07277 (J.G.) del
M.E.C.

Inmunorreactividad NPY en la amgdala
del ratn en estadios postnatales y en el
adulto
M Carmen Labrador Spnola; M Angeles Real, Jos Carlos Dvila,
Salvador Guirado
Hemos realizado un estudio inmunohistoqumico de las neuronas y
fibras del complejo amigdalino del ratn que contienen NPY durante el
desarrollo postnatal (desde P0 hasta P14) y en el adulto, utilizando un
anticuerpo policlonal (Sigma, #9528). Durante todo el desarrollo se observan tres tipos de clulas inmunorreactivas para NPY, unas fuertemente
teidas tipo Golgi, otras dbilmente teidas y otro grupo que presenta
una tincin intermedia. Los tres tipos celulares se distribuyen desde P0
hasta el adulto en los siguientes ncleos de la amgdala: lateral, basolateral,
basomedial, cortical, hipocampal, medial, y BST. Las clulas tipo Golgi no
se encuentran ni en la amgdala medial ni en la basomedial. En la amgdala
148
Roman High-Avoidance (RHA) and Low-Avoidance (RLA) rats are

used as an animal model to study the influence of environmental, developmental and hereditary factors on behavior. These sublines of rats were
initially selected and bred for their rapid vs poor acquisition of a two-way
avoidance response. In addition, RLA rats, when compared to RHA rats,
are more emotionally reactive. These differences are a clear indication of
distinct behavioral phenotypes. Previous physiological and molecular studies have revealed neuroendocrine, neurochemical and genetic differences between RHA and RLA strains, pointing to a molecular basis for emotional reactivity. However, a whole genome expression analysis has not yet
been attempted. Thus, we used recent advances in high-throughput microarray technology (http://www.ivi.es/i+d/genomica.htm), and statistical
(http://www-stat.stanford.edu/~tibs/SAM/) and functional analyses (http://
david.abcc.ncifcrf.gov/) in order to understand the molecular mechanisms
underlying the behavioral RHA/RLA differences. The results we obtained
showed 38 up-regulated and 36 down-regulated genes (FDR<0.05; fold
change?2) in the RLA gene expression profile when compared with RHA.
The gene with the highest expression in the RLA strain was prolactin (66
fold change). Multiple biological processes were overrepresented in this
subline, including nervous system development, synaptogenesis, protein
metabolism, cell proliferation, cell communication and signal transduction.
In conclusion, our whole genome screening not only supports previous
results, but also suggests the existence of several molecular processes
underlying the RHA/RLA divergences in emotional behavior.
This research was supported by MCYT, Ministerio de Ciencia y Tecnologia, Spanish grants to C. Torres and M.D. Escarabajal (SEJ2004-03231/
PSIC) and A. Fernndez-Teruel and A. Tobea (SAF2003-03480).

CURSO TEMPORAL DE LOS PATRONES DE DEGENERACIN TERMINAL TRAS LESIN DEL NERVIO
AUDITIVO
M Elena Caminos Benito; Elisabet Garca-Pino, Jose Moncho-Bogani y Jos M. Juiz
Facultad de Medicina y Centro Regional de Investigaciones Biomdicas. Universidad de Castilla-La Mancha. Albacete
Las neuronas auditivas de mamferos tienen diferente sensibilidad a
la prdida de sus aferentes nerviosos en funcin del momento del desarrollo en el que se produzca la deprivacin. En este estudio, hemos
establecido los patrones de degeneracin y supervivencia de las fibras
del nervio auditivo en su entrada a los ncleos cocleares (NC) y de las
propias neuronas de los NC de la rata despus de eliminar bilateralmente

las ccleas. La desaferentacin se ha realizado en dos periodos del desarrollo, antes de que se haya producido el inicio de la audicin y cuando el
sistema auditivo ya es totalmente maduro. El grado de lesin se ha evaluado mediante el registro de potenciales evocados. El establecimiento de
los patrones de degeneracin y supervivencia de los componentes de los
NC se ha realizado mediante la tcnica histoqumica de Fluoro-Jade, junto
con la tcnica de inmunoperoxidasa con anticuerpos contra calretinina.
Encontramos que la cocleotoma bilateral en ratas adultas provoca mayor
degeneracin fibrilar que cuando se hace en animales jvenes y, adems,
los niveles de esa degeneracin se mantienen en el tiempo. En ratas jvenes, la degeneracin fibrilar por cocleotoma bilateral tarda ms tiempo
en empezar y avanza de manera proporcional al tiempo de supervivencia.
Comprobamos que aunque haya numerosas fibras degenerando, los somas de las neuronas de los NC no presentan sntomas de degeneracin
durante y despus de perder sus aferencias excitatorias. Establecemos
aqu un modelo base de otras investigaciones relacionadas con la prdida
de entradas excitatorias a una neurona central.
Financiacin: Ministerio de Educacin y Ciencia (Ref. BFU200613974/BFI). Consejera de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha (Ref. 06009-00).

Estudio autorradiogrfico de la funcionalidad del receptor -opioide en el modelo de dolor neuroptico Spared Nerve
Injury.
M Luisa Rojo Antua; Rodrguez-Gaztelumendi A., Pazos A. Daz A.
Financiado por: Fundacin Alicia Koplowitz, Fundacin de Investigacin Mdica Mutua Madrilea (FMM) y DGICYT SAF2005-06087.
que controla procesos cognitivos, conductuales y afectivos. Se desconoce su localizacin celular en la CPF y existe poca informacin sobre su
funcin en esta regin. La CPF est recprocamente conectada con el
ncleo dorsal del rafe (NDR) y el rea tegmental ventral (ATV), que le
proporcionan, respectivamente, inervacin serotonrgica y dopaminrgica. Hemos analizado la expresin del mRNA del r-5-HT4 en la CPF de
rata mediante hibridacin in situ dual que permite identificar el fenotipo
neuroqumico de las neuronas que lo expresan. El mRNA del r-5-HT4 se
detect casi exclusivamente en neuronas de proyeccin definidas por su
fenotipo glutamatrgico. Mediante microdilisis intracerebral in vivo, se
determin que la aplicacin en CPF de un agonista 5-HT4 (RS67333) no
alter los niveles de serotonina extracelular en esta regin, pero result
en una disminucin notable de los niveles de dopamina. Las neuronas
frontocorticales que proyectan al NDR o al ATV se identificaron mediante la inyeccin en estas reas de un trazador retrgrado. De las neuronas
que proyectan al ATV identificadas, aproximadamente un 15% expresaban
el mRNA del r-5-HT4, mientras que prcticamente ninguna de las neuronas de proyeccin al NDR identificadas expresaba el receptor. Estos
resultados sugieren que los r-5-HT4 frontocorticales pueden modular la
liberacin de dopamina en esta regin y que dicho control podra ejercerse, al menos en parte, en la proyeccin directa al ATV.
Financiacin: Plan Nacional I+D SAF2002-03408, Programa Ramn
y Cajal.

LGI1 codifica para una glicoprotena de secrecin que forma complejos
M.S Sirerol-Piquer, Jose Manuel Morante-Redolar, Anetxu Ayerdi-Izquierdo, Ana Gorostidi-Pogola,Vicente Herranz-Prez y Jordi Prez-Tur
Instituto de Biomedicina de Valncia-CSIC
Dentro del dolor crnico, el de origen neuroptico tiene gran importancia, por sus manifestaciones clnicas y por su resistencia al tratamiento
con distintos analgsicos; entre ellos los frmacos opioides, parecen mostrar una eficacia limitada.
El propsito de este estudio es el de analizar, mediante tcnicas autorradiogrficas, la eficacia en el acoplamiento a protenas G del receptor opioide en muestras titulares de cerebro y mdula de ratas, sometidas al
modelo quirrgico validado de mononeuropata perifrica Spared Nerve
Injury (SNI). Quince das despus de la ciruga se realizaron pruebas
nociceptivas, que nos permitieron comprobar la existencia de alodinia e
hiperalgesia, confirmando as la presencia del sndrome neuroptico. Tras
su sacrificio se obtuvieron criosecciones (20m) que fueron incubadas
con el anlogo del GTP marcado radiactivamente [35S]GTPgS (0.04 nM,
fijacin basal), y en presencia del agonista selectivo de receptores -opioides DAMGO (10 M, fijacin estimulada).
No se observaron diferencias significativas en la actividad basal de
animales neuropticos (NP) con respecto a sus controles (CONP). Sin
embargo al estimular con el agonista DAMGO, encontramos que la eficacia en el acoplamiento a la protena G tiende a ser menor en la corteza
prefrontal, somato-sensorial, cingular y en la sustancia gris periacueductal,
as como una desensibilizacin significativa en el caudado putamen (175%
de estimulacin en NP vs 236% en CONP), reas cerebrales muy implicadas en la modulacin de procesos nociceptivos. Estos hallazgos podran
ayudar a explicar la implicacin del sistema opioide en las manifestaciones sindrmicas del dolor neuroptico, y las acciones analgsicas de los
frmacos opioides.
La Epilepsia Lateral Temporal Autosmica Dominante (ADLTE) es un

tipo de epilepsia parcial del lbulo temporal que se manifiesta con sntomas auditivos. Esta epilepsia est causada por mutaciones en el gen LGI1.
El gen LGI1 codifica para una protena modular compuesta por dominios
ricos en leucinas (LRRs) flanqueados por regiones ricas en cistenas en el
extremo amino-terminal y por repeticiones EPTP en el extremo carboxilo terminal. Para el estudio de la protena nos planteamos averiguar su
localizacin subcelular, as como una caracterizacin fsica y funcional de
la misma. Mientras que LGI1 es una protena de secrecin, sus mutaciones quedan retenidas dentro de la clula, observndose principalmente
en el retculo endoplasmtico (RE). Como la mayora de protenas de
secrecin LGI1 es una glicoprotena, que se encuentra glicosilada en tres
puntos (N192, N277, N422) para su secrecin. Mediante experimentos
de coinmunoprecipitacin existen evidencias de que LGI1 podra estar
formando interacciones consigo misma. Por otra parte, LGI1 es capaz
de unirse a la membrana de PC12 diferenciadas a fenotipo neuronal. Teniendo en cuenta estos resultados y aunque la funcin de LGI1 continua
siendo desconocida, parece indicar que los mecanismos implicados en la
aparicin de la enfermedad son por haploinsuficiencia.
6.
7.
8.
9.
RECEPTORES 5-HT4 DE SEROTONINA EN LA CORTEZA PREFRONTAL: LOCALIZACIN CELULAR E

IMPLICACIN EN LA LIBERACIN DE DOPAMINA Y
SEROTONINA
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Morante-Redolat, J.M., Hum Mol Genet, 11, 1119-28.

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M Teresa Vilar Comas; Ral Peas, Albert Adell, Pablo Vzquez,

Francesc Artigas
Dpto. Neuroqumica y Neurofarmacologa, Institut dInvestigacions
Biomdiques de Barcelona. (CSIC-IDIBAPS)
Los receptores 5-HT4 de serotonina (r-5-HT4) modulan la liberacin de diversos neurotransmisores y estn implicados en aprendizaje y
memoria. Se expresan, entre otras, en la corteza prefrontal (CPF), regin
149

Distribucin de la protena delta-like1
(dlk1) en el cerebro del ratn adulto y su
posible papel en la reproduccin
Nicanor Morales Delgado; Ruiz-Hidalgo MJ (2) , Laborda J (2),
Ruvira MA (2) , Diaz C (1)
(1)Departamento de Ciencias Mdicas, (2)Departamento de Qumica Inorgnica, Orgnica y Bioqumica, Facultad de Medicina y
Centro Regional de Investigacin Biomdica, Universidad de Castilla-La Mancha
El gen con impronta paterna Dlk1, perteneciente a la superfamilia de
factores de crecimiento epidrmico, ha sido implicado en procesos de
proliferacin y diferenciacin celular como, adipognesis o diferenciacin
neuroendocrina. Ratones deficientes en este gen presentan un retraso
del crecimiento embrionario y perinatal, pero ms tarde un incremento
progresivo del tejido adiposo. Debido a su alta expresin en clulas neuroendocrinas, hemos iniciado estudios para explorar la funcin de este
gen en el cerebro de mamferos. Para ello, estamos estudiando la distribucin inmunohistoqumica de dlk1 en el cerebro e hipfisis de ratones
adultos y, su relacin con la expresin de hormonas y pptidos implicados en los ejes hipotlamo-hipfisis-glndulas efectoras. En el hipotlamo
encontramos abundantes neuronas dlk1-inmunopositivas en los ncleos
arqueado, dorsomedial, paraventricular, retro- y supra-quiasmtico, y supraptico mientras que, los ncleos mamilares lateral y medial carecen
de clulas marcadas y el ncleo ventromedial contiene slo unas pocas.
Las reas pretica y entopenducular tambin presentan abundantes clulas marcadas. La mayora de las clulas secretoras de la adenohipfisis
muestran marcaje y pueden observarse adems, fibras inmunopositivas
en la eminencia medial externa e interna y en la neurohipfisis. Asimismo
encontramos clulas marcadas en poblaciones septales y amigdalinas y, en
el rgano subfornical. El marcaje en todas estas reas sugiere un papel de
este gen en el control neuroendocrino y del comportamiento. Resultados
preliminares muestran que ratones deficientes en Dlk1, presentan un
mayor nmero de neuronas inmunopositivas para la hormona liberadora
de gonadotropinas (GnRH) lo que sugiere un papel de este gen en la
reproduccin.
Financiacin: JCCM-PAI06-0066-6930

Expresin de la ceramida kinasa CERKL en
la retina de mamferos
Nicols Cuenca (1), Laura Fernndez Snchez (1), Gemma Marfany (2), Jos Martn Nieto (1) y Roser Gonzlez Duarte (2)
(1) Departamento de Fisiologa, Gentica y Microbiologa, Facultad
de Ciencias, Universidad de Alicante; (2) Departament de Gentica,
Facultat de Biologia, Universitat de Barcelona.
La retinosis pigmentaria (RP) es una patologa muy heterognea a nivel gentico. Se conocen ms de 40 genes/loci que causan la enfermedad.
Despus de una bsqueda exhaustiva con marcadores moleculares en
una familia espaola afecta de RP recesiva identificamos el gen CERKL en
el locus RP26 (2q31.2). Este nuevo gen codifica una protena homloga a
CERK (ceramida kinasa), cuya deficiencia se ha propuesto que incrementa
la sensibilidad de las neuronas retinianas a estmulos apoptticos.
En este trabajo hemos utilizado tcnicas de inmunohistoqumica
para microscopa confocal sobre secciones verticales de retina obtenidas
con criostato. stas se incubaron con anticuerpos policlonales especficos
contra CERKL sintetizados en conejo y anticuerpos secundarios fluorescentes, con el objeto de caracterizar la distribucin de la protena CERKL
en la retina de distintas especies de mamferos.
En la retina de roedores, bovina y humana, CERKL se expresa en
los segmentos externos de conos y bastones. En la retina interna esta
protena se inmunolocaliza en un subtipo especfico de clulas ganglionares cuyas dendritas se estratifican en toda la capa plexiforme interna.
Adicionalmente, existe un subtipo de clulas amacrinas inmunorreactivas
para CERKL. La localizacin intracelular de esta protena es fundamentalmente dendrtica y citoplsmica. Prolongaciones de las clulas de Mller
prximas a la capa limitante interna de la retina tambin se tien con
anticuerpos contra CERKL.
150
CERKL se expresa, as, no slo en fotorreceptores, sino tambin en

clulas amacrinas y ganglionares en todas las especies estudiadas. Esta
protena podra desempear una funcin importante en la fototransduccin y, dado que mutaciones en el gen CERKL conllevan neurodegeneracin retiniana, ejercer efectos neuroprotectores sobre distintos tipos
celulares de la retina de mamferos.
Financiacin: MEC BFU2006-00957/BFI y BFU2006-04562/BMC, Generalitat Valenciana GV06/197, ONCE, Fundaluce, Bidons Egara.

LA ACTIVIDAD MOTORA SE MODULA POR CIRCUITOS NEURONALES DIFERENTES EN RATAS CON
FALLO HEPTICO Y EN RATAS CONTROL.
Nisrin El Mlili; Omar Cauli, Marta Llansola y Vicente Felipo
Centro Investigacin Principe Felipe
Los pacientes con enfermedades hepticas presentan alteraciones
motoras. No se conocen los mecanismos responsables. La enfermedad
heptica podra alterar los circuitos neuronales entre los ganglios basales
y la corteza que modulan la funcin motora. La activacin de receptores
metabotrpicos del glutamato en ncleus accumbens (Nacc) por inyeccin de DHPG activa este circuito induciendo locomocin.
Analizamos por microdilisis in vivo la funcin de los circuitos que
modulan la funcin motora en ratas con fallo heptico por anastomosis
portacava (PCS). Insertamos una cnula en Nacc y sondas de microdilisis
en Nacc, plido ventral (VP), sustancia nigra pars reticulata (SNr), tlamo
medio dorsal (MDT), tlamo medio ventral (MDV) o corteza prefrontal
(PFCx). Inyectamos DHPG en Nacc y analizamos la concentracin extracelular neurotransmisores en estas reas. Los resultados indican que en
ratas control el DHPG induce locomocin activando el circuito neuronal
normal:
Nacc VP MDT PFCx.
En ratas PCS este circuito no se activa. En ratas PCS, la inyeccin del
DHPG activa un circuito alternativo: Nacc SNr VMT PFCx,
que no se activa en ratas control. La inyeccin del DHPG aumenta la
dopamina en Nacc de ratas control pero no en ratas PCS, y el glutamato
en las PCS pero no en las control. El aumento de dopamina activara el
circuito neuronal normal, mientras que el glutamato activara el circuito
alternativo. La identificacin de los mecanismos responsables de la alteracin de la funcin y coordinacin motoras podra permitir el diseo de
tratamientos para mejorar dicha funcin en pacientes con encefalopata
heptica.
Cauli O. (2007) Eur JNeurosci, vol 25, pp 2112-2122,.

Diferencias en la vulnerabilidad del compartimento estriosomal y de la matriz a
los efectos neurotxicos de la MDMA
Noelia Granado1, Isabel Escobedo2, Esther OShea2, M Isabel Colado2, Rosario Moratalla1
1Instituto Cajal, CSIC, 2Dept. Farmacologia, F. Medicina, UCM,
Madrid.
La 3,4-metilenodioximetanfetamina (MDMA, xtasis) es una droga
de abuso muy popular entre la poblacin juvenil. Estudios experimentales han demostrado que, en el ratn, la MDMA se comporta como
una neurotoxina selectiva sobre el sistema dopaminrgico (OShea et al.,
2001). El dao neuronal se manifiesta por una reduccin en la densidad
del transportador de dopamina (DAT) y en la concentracin estriatal del
neurotransmisor (OShea et al., 2001; Escobedo et al., 2005). Una de las
caractersticas del estriado es que est dividido en 2 compartimentos,
estriosomas y matriz, que se diferencian por sus funciones y conexiones
con otros ncleos cerebrales (Moratalla et al., 1992). En este trabajo
hemos estudiado el efecto a largo plazo inducido por MDMA sobre la
inmunoreactividad de la tirosina hidroxilasa (TH) y del DAT en el compartimento estriosomal y en la matriz del estriado de ratn. Los animales
recibieron MDMA (20 mg/kg, i.p.) 3 veces consecutivas con un intervalo
de 3 h y fueron sacrificados 7 das ms tarde. La administracin de MDMA
produjo una significativa disminucin en la inmunreactividad de TH y DAT
en comparacin con la observada en animales inyectados con salino. La

inmunotincin con MOR-1 revel que este efecto fue considerablemente
ms pronunciado en los estrisomas que en la matriz. Estos datos proporcionan la primera evidencia de que los estriosomas y la matriz presentan
diferente vulnerabilidad a la MDMA y de que la neurotoxicidad inducida
por la droga se asocia principalmente con una prdida de fibras dopaminrgicas estriosomales.
Escobedo et al., Br. J. Pharmacol. 144: 231-241, 2005
Moratalla et al., Proc.Natl. Acad. Sci. U. S. A 89: 3859-3863. 1992
OShea et al., Neuropharmacology 40: 65-74, 2001.

Papel de la xido ntrico sintasa endotelial en el efecto protector del cido 3-nitropropinico frente a la neurotoxicidad
producida por la 3,4-metilendioximetanfetamina
Norberto Aguirre Garcia; Fiona Pastor, Beatriz Goi, Berta Lasheras, Elena Puerta
Departamento de Farmacologa. Universidad de Navarra. Pamplona. Espaa
Introduccin:
El cido 3-nitropropinico (3-NP) es una toxina mitocondrial que
produce la degeneracin de las neuronas GABArgicas espinosas del
complejo estriado. Sin embargo, administrado a dosis subtxicas ejerce
un efecto protector en distintos modelos experimentales de citotoxicidad. Objetivo: Estudiar el posible efecto neuroprotector del 3-NP frente
al dao inducido por la MDMA. Mtodos: La MDMA (3x 5mg/kg i.p., cada
2h) se administr a ratas Wistar (290-340g) 24h despus de una inyeccin de 3-NP (20 mg/kg i.p.). Los inhibidores selectivos de la iNOS, SMT
(3 mg/kg), y de la eNOS, L-NIO (10 mg/kg), se administraron i.p. 30 min
antes del 3-NP. En paralelo se administr SNAP (5, 50 o 100 mg/kg i.p.) 24
horas antes de la MDMA. Siete das despus los animales se sacrificaron
y se determinaron las concentraciones centrales de 5-HT por HPLC y la
densidad de su transportador mediante la fijacin de [3H]paroxetina. Resultados: El 3-NP administrado 24h antes de la MDMA previno los dficits
neuroqumicos producidos por sta. El efecto protector del 3-NP fue bloqueado por el L-NIO, inhibidor selectivo de la eNOS, pero no por el SMT,
inhibidor de la iNOS. Por otro lado, la administracin del SNAP, donador
de xido ntrico, tambin previno el dao producido por la MDMA lo que
apoya el papel de la eNOS en el efecto protector del 3-NP. Conclusiones:
Estos resultados sugieren que la eNOS pero no la iNOS juega un papel
fundamental en el efecto protector del 3-NP frente a la MDMA.

Efecto neuroprotector del litio sobre la
degeneracin excitotxica de motoneuronas espinales maduras en cultivos organotpicos de embrin de pollo
Nria Brunet, Victria Ayala, Josep E. Esquerda, Jordi Calder
Dept. de Medicina Experimental, Facultad de Medicina, IRBLLEIDA,
Universidad de Lleida, C/ Montserrat Roig,2, 25008 Lleida
Hemos desarrollado un sistema de cultivo organotpico de mdula
espinal de embrin de pollo en el da embrionario 16 el que con un
soporte trfico adecuado las motoneuronas (MNs) se mantienen viables
ms all de 28 das in vitro (Brunet et al., 2007). A diferencia de los
cultivos primarios de MNs aisladas que no desarrollan vulnerabilidad a
estmulos glutamatrgicos, este sistema de cultivo permite estudiar la degeneracin y muerte de MNs maduras frente a estmulos excitotxicos.
Se han ensayado in vitro diferentes agonistas de receptores de glutamato:
cido glutmico, NMDA y cido kanico (KA). Los tres han inducido una
muerte masiva de las MNs, de una manera dependiente de la dosis y del
tiempo de exposicin a la excitotoxina. De los tres aminocidos excitadores, el KA se ha mostrado el ms potente induciendo neurodegeneracin excitotxica. La muerte excitotxica de las MNs provocada por el
KA parece estar mediada por la activacin de receptores iontropicos
AMPA/KA, ya que ha sido revertida con la administracin de CNQX,
un antagonista competitivo de estos receptores. La aplicacin crnica de
litio in vitro ha protegido a las MNs frente a la excitotoxicidad inducida

por KA. Se ha estudiado la participacin de la va de la de la PI3K/Akt y
de la GSK-3 en la accin neuroprotectora del litio. Mientras el tratamiento con indirubin-3-monoxime (inhibidor de la GSK-3) ha inducido
una respuesta neuroprotectora similar a la de litio, la administracin de
LY294002 (inhibidor de la va PI3K/Akt) ha revertido el efecto neuroprotector del litio.
Brunet N, (2007) J. Comp. Neurol. 501:669-690

Viejos enzimas, nuevas funciones: la isoenzima CPT1c de expresin exclusiva en cerebro presenta una funcin celular distinta a las isoenzimas heptica y muscular
Nria Casals Farr; Adriana Y. Sierra, Esther Gratacs, Patricia Carrasco, Josep Clotet
Facultad de Ciencias de la Salud. Universitat Internacional de Catalunya. Sant Cugat del Valls, Barcelona
La oxidacin celular de los cidos grasos tiene lugar en el interior de
las mitocondrias. Los enzimas carnitina palmitoil transferasa 1 (CPT1) son
los controladores de este proceso regulando la entrada de los aciles-CoA
a la matriz mitocondrial. Hasta hace poco se conocan solo dos enzimas
CPT1, uno de expresin mayoritaria en hgado y pncreas (CPT1a) y
otro de expresin mayoritaria en msculo (CPT1b). Recientemente se
ha descubierto un tercer isoenzima, CPT1c, de expresin exclusiva en
cerebro (1). Sin embargo no se ha podido demostrar su actividad enzimtica y se desconoce cual es su funcin celular. Nuestro grupo de
investigacin ha demostrado que CPT1c no se localiza en la membrana
mitocondrial externa sino en el retculo endoplasmtico de las neuronas, y que el extremo aminoterminal de la protena contiene la seal
de transporte organular especfica. Mediante estudios de transfeccin en
clulas PC-12 y posterior cuantificacion de los diferentes acilescarnitina
mediante HPLC-MS/MS hemos demostrado que el sustrato de CPT1c es
el palmitoil-CoA. Posteriormente, ensayos de actividad CPT1c en microsomas aislados de las clulas transfectadas nos han permitido determinar
que CPT1c tiene una actividad cataltica entre 10-20 veces inferior a la de
los otros dos isoenzimas. Finalmente estudios de oxidacin de palmitato
demuestran que CPT1c no participa en la oxidacin de las grasas y sugiere que CPT1c est regulando la entrada de los aciles-CoA de cadena larga
al interior del retculo endoplasmtico posiblemente para la biosntesis
de esfingolpidos.
1. N Price, (2002) Genomics 80, 433-442.

Levodopa intratecal en dolor neuroptico.
Nuria Cobacho Tom; Carlos Luis Pano
Servicio de Neurobiologa-Investigacin, Hospital Ramn y Cajal,
Madrid
Anteriormente hemos demostrado que la L-DOPA, tanto cuando se
administraba sistmica como intratecalmente, disminua la alodinia plantar al tacto y al fro producida en ratas por la constriccin crnica (CCI)
del nervio citico. El presente trabajo estudia la curva dosis-efecto de
L-DOPA administrada intratecalmente, tanto de manera aguda (por puncin lumbar) como crnica (mediante bomba Alzet liberando L-DOPA a 1
microlitro/hora en L3-L4 a travs de catteres implantados intratecalmente). La inyeccin de 50 nanomoles de L-DOPA produjo una desaparicin
de la alodinia tctil y al fro a los 15 minutos, manteniendo parcialmente la
analgesia a las 3 horas y habiendo desaparecido el efecto a las 24h. Dosis
de 25 nanomoles produjeron una analgesia menos pronunciada y duradera y dosis de 10 nanomoles tan slo reportaron un efecto parcial en los
tests realizados a los 15 minutos de la inyeccin. A pesar del claro efecto
agudo de la L-DOPA inyectada intratecalmente, la administracin crnica
de L-DOPA en dosis de 1, 5 o 40 nanomoles/hora no produjo ninguna disminucin significativa de las alodinias a 1, 3, o 7 das, ni se observ ningn
cambio significativo de la algesia tras la desconexin de la bomba Alzet.
Se realizaron diversos controles para comprobar que el emplazamiento, la
funcionalidad de los catteres y los niveles elevados de L-DOPA en lqui-
151
do cefalorraqudeo se mantenan durante el experimento, por lo que no

podemos demostrar que la administracin continua de L-DOPA a nivel
espinal tenga efectos analgsicos en dolor neuroptico. Se propondrn
posibles explicaciones para esta aparente discrepancia observada.
FIS PI051324

NEUROPROTECCIN DEL FRMACO NUCLEO CMP
FORTE EN CLULAS NERVIOSAS
Ana Martinez y Nuria Durany

Departamento de Biologia Molecular y Celular. Facultad de Ciencias de la Salud. Universidad Internacional de Catalua. Josep Trueta
s/n. 08195 Sant Cugat del Valles (Barcelona)
El Ncleo CMP Forte es un frmaco compuesto por dos nucletidos,
uridina monofosfato (UMP) y citidina monofosfato (CMP). Se administra
en el tratamiento de neuropatas de origen osteoarticular, metablico
o infeccioso. Se ha observado que la administracin de UMP y CMP favorece la regeneracin de los axones y vainas de mielina de las fibras
nerviosas. Sin embargo se desconoce el mecanismo de accin del Ncleo
CMP Forte en la clula.
El objetivo principal de este estudio es conocer el mecanismo de
accin de este frmaco y determinar el posible efecto neuroprotector
del Ncleo CMP Forte en la toxicidad inducida por el glutamato, MPP+,
y NO.
Para los experimentos se han utilizado cultivos celulares de neuroblastomas (SH-SY5Y) y cultivos primarios de neuronas de la corteza cerebral de ratn. La viabilidad celular se determin mediante el mtodo
de MTT.
Los resultados demuestran que la concentracin mxima de Ncleo
CMP Forte, no txica para la clula, es de 1 mg/ml, en cultivos de clulas
SH-SY5Y y cultivos primarios. As mismo hemos observado que 100 mM
glutamato, 40 M MPP+ y 2mM NO inducen aproximadamente un 50%
de toxicidad en clulas SH-SY5Y, mientras que en cultivos primarios de
neuronas corticales, 50 M MPP+, 0.5 mM glutamato y 50 M NO inducen un 50% de neurotoxicidad.
Los resultados obtenidos al cultivar las clulas en presencia del frmaco Ncleo CMP Forte, sugieren que dicho frmaco protege parcialmente de la toxicidad inducida por glutamato, MPP+ y NO.

Las isoformas de la Protena quinasa C en
la modulacin de la liberacin del neurotransmisor a travs de los autoreceptores
muscarnicos en los terminales nerviosos
motores de rata.
Nria Montserrat Besalduch Canes; Marta Toms, Manel M.
Santaf, Mar Sabat, Neus Garcia, Maria Angel Lanuza, Josep Toms.
Unitat dHistologia i Neurobiologia (UHN). Facultat de Medicina
i Cincies de la Salut. Universitat Rovira i Virgili. Sant Lloren 21,
43201 Reus. Spain.
Las protenas quinasas C (PKC) son enzimas esenciales para la transduccin de seales. Previamente demostramos que la modulacin de la
liberacin del transmisor por los autorecetores muscarnicos (mAChRs)
estaba mediada en la unin neuromuscular (NMJ) por PKC activada por
calcio. En el presente estudio investigamos la expresin y localizacin
celular de las isoformas de PKC involucradas en la liberacin de la acetilcolina (ACh) en condiciones control y tras modulacin de los mAChRs.
Hemos realizado anlisis electrofisiolgicos y estudios de expresin de
isoformas de PKC clsicas (cPKC) en msculo esqueltico de ratas adultas. Mediante inmunohistoqumica y utilizando el microscopio confocal,
establecimos la localizacin de estas isoformas en los tres elementos celulares que constituyen la NMJ y tambin identificamos la/s isoforma/s
ligadas a la regulacin efectuada por los mAChR. En el terminal nervioso
detectamos las isoformas PKCa y bI y en la clula postsinptica y en
las clulas de Schwann las PKCa y bII. Atropina, bloqueador inespecfico
de mAChR, aumenta la liberacin de ACh e induce un aumento de las
isoformas PKCalfa, betaI y betaII en la fraccin de membrana sinptica.
Incubaciones con calcio (con y sin estimulacin elctrica) tambin afectan a los niveles de estas isoformas. Este trabajo indica una distribucin
152
selectiva de las isoformas cPKC en tipos celulares especficos en la NMJ

y tambin que las isoformas PKCalfa y/o betaI podran ser los enzimas
ligados al mecanismo muscarnico presinptico de la modulacin de la
liberacin de ACh.
Este trabajo ha sido financiado por: FISS (PI05-0207 y PI05-1599) y
DURSI (2005SGR00337).

ESTUDIO INMUNOHISTOQUMICO DE LOS TRANSPORTADORES DE GLUCOSA EN RESPUESTA A LA
AXOTOMA DEL NERVIO FACIAL
Olga Gmez Roda; Begoa Ballester1, Amparo Romero1, Jos Emilio
Mesonero2, Jos Terrado1
1. Universidad Cardenal Herrera-CEU. 2. Universidad de Zaragoza
GLUT1, GLUT3, GLUT4 y GLUT8 son transportadores de glucosa
expresados en el sistema nervioso central. En este trabajo se estudia, por
inmunohistoqumica, la expresin de estos transportadores en respuesta
a la lesin del nervio facial de ratones adultos, cuya lesin no provoca una
muerte celular masiva y en ratones recin nacidos, en los que la misma
lesin induce la muerte de la mayor parte de las motoneuronas daadas.
Para ello, se realiz la transeccin completa del nervio facial izquierdo en
ratones C57BL/6JOlaHsd adultos y de 3 das de edad. Los animales fueron
sacrificados a los das 1, 3 y 8 posteriores a la lesin, y la expresin de los
transportadores estudiada en el ncleo del nervio facial. Los resultados
indicaron que GLUT1 se expresa en la microvasculatura, GLUT3 en el
neuropilo y GLUT4 y GLUT8 principalmente en el soma de las neuronas
motoras. La lesin del nervio facial no alter apreciablemente la expresin de GLUT1, GLUT3 y GLUT4 ni en ratones adultos ni recin nacidos.
Sin embargo, los niveles de GLUT8 aumentaron en las motoneuronas
faciales al tercer da tras la lesin en los ratones adultos, y sus niveles
se mantuvieron elevados a los 8 das post-lesin. Por el contrario, en los
animales recin nacidos lesionados no se apreci variacin en la inmunoreactividad detectada frente a GLUT8. Estos resultados sugieren que
GLUT8 podra estar implicado en los mecanismos que tras la axotoma
motora de los animales adultos conduce a la recuperacin de las clulas
lesionadas.

Excitotoxic motoneuron disease in chick
embryo evolves with autophagic neurodegeneration and deregulation of neuromuscular innervation
Olga Tarabal, Jordi Calder, Anna Casanovas, Dolors Ciutat, Josep E.
Esquerda
Dept. Medicina Experimental, Facultad de Medicina, IRBLLEIDA,
Universidad de Lleida, C/ Montserrat Roig, 2, 25008 Lleida
In the chick embryo, in ovo application of NMDA from embryonic
day (E) 5 to E9 results in selective damage to spinal cord motoneurons
(MNs) that undergo a long-lasting degenerative process without immediate cell death. This contrasts with a single application of NMDA on E8,
or later, which induces massive necrosis of the whole spinal cord. Chronic
MN degeneration after NMDA implies: transient incompetence to develop programmed cell death; altered protein processing within secretory
pathways; and late activation of autophagy. Chronic NMDA treatment
also results in an enlargement of thapsigargin-sensitive Ca2+ stores. In
particular MN pools, such as sartorius-innervating MNs, the neuropeptide CGRP is accumulated in somas, peripheral axons and neuromuscular
junctions after chronic NMDA treatment, but not in embryos paralyzed
by chronic administration of curare. Intramuscular axonal branching is
also severely altered after NMDA: it usually increases, but in some cases
a marked reduction can also be observed. Moreover, innervated muscle
postsynaptic sites increased by NMDA, but to a lesser extent than by
curare. Since some of these results show interesting homologies with MN
pathology in human sporadic ALS, the model presented here provides a
valuable tool for advancing in the understanding of some cellular and
molecular processes particularly involved in this disease.

PARTICIPACIN DE CONDUCTANCIAS DE GLUTAMATO TIPO NMDA EN LA DEPRESIN DE LEAO

(SPREADING DEPRESSION)
Atrofia hipocmpica, dficit cognitivo y

aumento de sAPP y fragmentos C-terminales (CTF) en ratones que sobreexpresan la
APP humana sin mutaciones asociadas a un
procesamiento amiloidognico
Oscar Herreras Espinosa; Lidia Morales, Julia Makarova, Marta

Gmez
Itto. Cajal, CSIC; C.E.U. San Pablo; CBM-UAM, Madrid.
Las ondas de depresin de Leao (DL) o spreading depression barren la zona de penumbra isqumica causando muerte neuronal tras un
ictus. Su propagacin y la despolarizacin celular asociada son atribuidas
al aumento de potasio y glutamato extracelular, actuando sobre receptores NMDA. Sin embargo, los diseos experimentales previos no tenan
en cuenta la compleja concatenacin de eventos de membrana durante
ondas DL (1,2). Para conocer la contribucin del receptor NMDA a nivel
subcelular hemos realizado experimentos en CA1 de rata anestesiada
con bloqueo local de receptores NMDA inyectando CPP con una micropipeta a distintos tiempos (antes y durante la onda DL), registrando
simultneamente el Vo asociado. El bloqueo regional previo de receptores
NMDA no impide la invasin de la zona tratada por la DL, pero se produce, slo all, un acortamiento de la misma. La duracin tambin es menor
cuando el antagonista se inyecta durante el propio transcurso de la onda.
La morfologa de la onda no se ve afectada en su primera mitad, independientemente del momento del bloqueo farmacolgico. La regin ms susceptible a este bloqueo es el estrato radiado. Estos resultados indican que
el componente NMDA de la conductancia de membrana abierta durante
DL es crtico slo en su fase final. Aunque no descarta su participacin en
la propagacin y fases inicial y principal de la despolarizacin, otras conductancias han de ser cuantitativamente ms relevantes. Estos resultados
ayudan a explicar el escaso xito del bloqueo farmacolgico de receptores NMDA tras ictus en humanos. Financiado por CSIC-I3/200620I186,
CAM-S-SEM-0255-2006.
(1) Canals et al. J. Neurophysiol., 94:943-951, 2005.
(2)Makarova et al., Biophys. J., 92:1-17, 2007.

Los receptores dopaminrgicos D1, pero no
los D5, son crticos para la LTP, el aprendizaje espacial, y la expresin de los genes
zif268 y arc en el hipocampo.
Oskar Ortiz+, Noelia Granado+, Luz M Surez,
Eduardo D Martn, Valentn Cea, Jos M Sols y
Rosario Moratalla.
Instituto Cajal, Consejo Superior de Investigaciones Cientficas,
CSIC, 28002 Madrid, Espaa, Hospital Ramn y Cajal, 28034, Madrid, Espaa y Departamento de Ciencias Mdicas, Universidad de
Castilla-La Mancha, 02006 Albacete, Espaa.
Estudios recientes sugieren que tanto el glutamato como la dopamina son necesarios en la potenciacin a largo plazo (LTP) del hipocampo
y tambin en los procesos de aprendizaje y memoria espacial. Mientras
el papel del glutamato en estos procesos est bien consolidado, la participacin de la dopamina est menos estudiada. En el presente trabajo
hemos utilizado ratones carentes del receptor dopaminrgico D1 (D1/-) para estudiar el papel de este receptor en la LTP, en el aprendizaje y
en la expresin gnica asociada a estos procesos. Nuestros resultados
indican que la magnitud de las dos fases, temprana y tarda de la LTP se
redujo en los ratones D1-/- comparados con los salvajes. La presencia
de SCH23390, antagonista de los receptores D1 y D5, en el medio no
redujo la LTP en los animales D1-/-, evidenciando que los receptores D5
no estn involucrados en este proceso. Adems, la inactivacin de los
receptores D1 (D1-/-) redujo significativamente la potenciacin inducida
por agonistas D1 de las corrientes NMDA, a travs de la activacin de la
PKA. Asimismo, la expresin gnica de zif268 y arc en el rea hippocampal
CA1 se inhibi completamente en ratones D1-/- que adems mostraron
un dficit en el aprendizaje espacial. Estos resultados indican que los receptores D1 pero no los D5 son crticos para el aprendizaje espacial, la
LTP hippocampal y para la induccin de Zif268 y Arc, protenas requeridas
para la transicin de E-LTP a L-LTP y para la consolidacin de la memoria
en mamferos. Financiacin MEC, MSC, PNSD.
Pablo Salazar Colocho; L. Schiapparelli, A. M. Simn, L. Escribano,

M. Cuadrado, A. Prez-Mediavilla, R. Lpez de Maturana, D. Frechilla,
J. Del Ro
La enfermedad de Alzheimer es una patologa neurodegenerativa
asociada a la produccin de niveles elevados de pptido A que cursa
con alteraciones sinpticas e histopatolgicas. Actualmente se debate si el
acmulo de A es responsable de la enfermedad o slo una de sus consecuencias. En este estudio se analiz la posible aparicin de alteraciones
histopatolgicas en ratones que sobreexpresan la APP humana sin mutar
(lnea I5). Se encontr que estos animales presentan una significativa disminucin del espesor de la capas CA1, CA3 y GD, puesto de manifiesto
por tincin de Nissl y marcaje de NeuN, que se acenta con la edad, y
se acompaa de la presencia de clulas TUNEL(+). Asimismo se observ
una marcada disminucin de la inmunorreactividad para MAP2 lo que
reflejara una patologa dendrtica. El anlisis de derivados de la APP se
realiz mediante triple inmunofluorescencia para 6E10-MAP2-TOPRO3 y
CT20-NeuN-TOPRO3 por microscopia confocal. Se encontr un elevado
y difuso marcaje con 6E10 que se circunscribe mayoritariamente al espacio extracelular y que podra corresponder a formas solubles sAPP derivadas del procesamiento no amiloidognico de la APP, y una apreciable
inmunorreactividad al anticuerpo CT20 a nivel intracelular que reflejara
la presencia de fragmentos C-terminales de la APP (CTF). Estas alteraciones se acompaan de un pronunciado dficit cognitivo en los tests de
reconocimiento de objetos y laberinto de Morris. Los hallazgos muestran
que el procesamiento no amiloidognico de la APP provoca alteraciones
histopatolgicas y deterioro cognitivo no asociados con la presencia de
A. (Financiado por UTE proyecto FIMA, SAF2005-05086, GN13029)
Chang, K.A., (2005). J Pharmacol Sci. 97, 461-471.
Kim, H.S., (2003). Faseb J. 17, 1951-1953.
Lahiri, D.K., (2002). Ann N Y Acad Sci. 973, 334-339.

MUERTE CELULAR PROGRESIVA NO APOPTTICA
EN LA SUSTANCIA NEGRA DE MACACOS TRATADOS CRNICAMENTE CON MPTP
Pablo Garrido Gil; Vzquez-Claverie M., San Sebastin W., Belzunegui S., Izal-Azcrate A., Lpez B, Marcilla I., Luquin M.R.
Laboratorio de Terapia Regenerativa. rea de Neurociencias. Centro
de Investigacin Mdica Aplicada (CIMA)-Universidad de Navarra.
Antecedentes. No existe un modelo animal de enfermedad de Parkinson (EP) que haya demostrado degeneracin neuronal dopaminrgica
progresiva.
Objetivo. Determinar si la administracin crnica de MPTP a macacos reproduce la prdida neuronal progresiva por apoptosis.
Material y Mtodos. Diecisis macacos. Tres intactos, cinco tratados
de forma aguda con MPTP y ocho con una administracin crnica. Se
procesaron secciones de Sustancia negra (SN) mediante Fluoro-Jade B
(FJB), TUNEL y dobles inmunofluorescencias de FJB y TUNEL con NeuN,
TH, GFAP y ferritina. El nmero de clulas FJB+ y TUNEL+ se cuantific
manualmente en SN y rea tegmental ventral (ATV).
Resultados. La SN y ATV de los animales intactos present un nmero escaso de clulas FJB+ que aument significativamente tras la administracin aguda y crnica de MPTP. En el grupo agudo algunas de las clulas
FJB+ expresaron TH indicando un origen dopaminrgico. Sin embargo, en
el grupo crnico estas clulas no expresaron ninguno de los marcadores
celulares utilizados. El nmero de clulas TUNEL+ en la SN se increment
significativamente en los animales tratados con MPTP de forma aguda
pero no en el grupo crnico. Un 50% de las clulas TUNEL+ expresaron
ferritina (microgla), un 10% GFAP (astrocitos) y un 40% no co-localiz
con ningn marcador celular.
153
Conclusiones. La administracin crnica de MPTP produce una

muerte neuronal que se mantiene 35 meses despus de haber interrumpido la administracin del txico. Esta muerte celular no es por apoptosis.
La presencia de clulas microgliales en apoptosis indica que la activacin
microglial es un proceso activo.

Evidencia anatmica y fisiolgica de control simultneo del rafe dorsal y rea
tegmental ventral por la corteza prefrontal
Vzquez, P., Celada, P., Corts, R., Artigas, F.
Instituto de Investigaciones Biomedicas de Barcelona
La corteza prefrontal medial (CPFm) proyecta al ncleo dorsal del
rafe (RD) y al rea tegmental ventral (ATV), modulando la actividad de
las neuronas serotoninrgicas y dopaminrgicas. Neuronas de la CPFm
proyectan a ms de una estructura del mesencfalo1 y algunas son estimulables antidrmicamente desde RD y ATV2. Las relaciones anatmicas
y funcionales entre estas tres reas son de inters en enfermedades psiquitricas (depresin, esquizofrenia). Utilizando tcnicas electrofisiolgicas e histolgicas hemos estudiado si existe segregacin de las neuronas
piramidales de CPF que proyectan a RD y ATV.
Para ello, se efectuaron registros extracelulares en la CPFm de ratas
implantadas con electrodos de estimulacin en ATV y RD, estimulndose
secuencialmente ambas reas y registrndose los correspondientes potenciales antidrmicos en neuronas de CPFm. Las latencias fueron de
6.6 3.6 ms (n=25, ATV) y 13.7 4.1 ms (n=23, RD). Se registraron
potenciales antidrmicos desde ambas reas en un 60% de las neuronas
piramidales registradas (n=30). Tambin se aplicaron iontoforticamente
trazadores retrgrados (subunidad B de la toxina colrica, CTB, y fluoro-gold, FG) en RD y ATV. Se detect la presencia de ambos trazadores
en CPFm (n=5 ratas), observndose neuronas doblemente marcadas con
CTB y FG en una proporcin similar a la calculada mediante tcnicas
electrofisiolgicas. En conclusin, una elevada proporcin de neuronas
piramidales de CPFm coproyectan a RD y ATV, sugiriendo un control
simultneo de la actividad de neuronas serotonrgicas y dopaminrgicas
por la CPFm.
1. Thierry et al., 1983, Exp Brain Res 50:275-282
2. Puig et al., 2004, Cereb Cortex 13:870-882

EFERENCIAS CORTICALES DEL LBULO TEMPORAL HACIA LOS GANGLIOS BASALES EN EL PRIMATE (Macaca fascicularis)
Pr-Sistiaga P.1; Mohedano-Moriano A. 1; Martnez-Marcos A. 1;
Arroyo-Jimnez M. M. 1; Marcos P. 1; Artacho-Prula E. 1; Corts F. 2;
Mansilla F. 2; Insausti R. 1
1 Laboratorio de Neuroanatoma Humana, Facultad de Medicina ,
Departamento de Ciencias Mdicas y C.R.I.B. Universidad de Castilla La Mancha, Albacete. 2 Complejo Hospitalario Universitario de
Albacete
Los ganglios basales, aunque primariamente implicados en el control
del movimiento, tambin juegan un papel en la memoria y aprendizaje, especialmente memoria no declarativa, consistente en habilidades motoras.
Aunque se conocen proyecciones desde estructuras lmbicas al estriado,
el origen de las proyecciones lmbico-estriadas en en el primate son mucho menos conocidas.
Para comprender los circuitos neurales subcorticales relacionados
en el procesamiento de memoria declarativa, examinamos las eferencias
corticales del lbulo temporal en cinco primates (Macaca fascicularis).
Se realizaron depsitos del trazador fluorescente Fast Blue (FB) en los
ganglios basales (cabeza del ncleo caudado), analizndose el marcaje
neuronal resultante en la formacin del hipocampo y corteza del lbulo
temporal. Las coordenadas estereotxicas de inyeccin se calcularon con
imgenes de Resonancia Magntica.
Los resultados sugieren la existencia de una preferencia de proyeccin que pudiera constituir un patrn topogrfico en la proyeccin del
154
lbulo temporal hacia los ncleos estriatales. As, inyecciones que se localizaron ms ventralmente mostraron marcaje consistente en la corteza
entorrinal, capas V-VI anteriormente, capa V ms caudalmente, subculo
y alguna neurona aislada en CA1. La regin parahipocmpica presentaba
marcaje denso en la corteza perirrinal (rea 35). Inyecciones ms dorsales slo mostraron marcaje en la corteza de la regin parahipocmpica
extendindose al rea TE (incluyendo labio ventral del surco temporal
superior) rea polisensorial del labio dorsal del surco temporal superior,
zona adyacente de la circunvolucin temporal superior.
Las proyecciones del lbulo temporal medial hacia los ganglios basales, sugieren que stos podran jugar un papel en el procesamiento cortical de la memoria declarativa.
El trabajo ha sido financiado gracias a los proyectos: BFI2003-09581
y BFU2006-12964

MECANISMOS QUE REGULAN LA DENSIDAD EN
MEMBRANA DE LOS CANALES KCNQ NEURONALES
Paloma Aivar Mateo; Ainhoa Etxeberra Larraza, Patricia Villac Lozano, Jose ngel Rodrguez Alfaro, Juan Camilo Gmez Posada, Alessandro Alaimo, Rosa Mella Lpez, lvaro Villarroel.
Unidad de Biofsica Csic-upv/ehu
Los canales KCNQ2/3 que subyacen la corriente M, juegan un papel
crucial en la regulacin de la excitabilidad neural. El funcionamiento correcto de la neurona depender de que la magnitud de la corriente M se
mantenga dentro de los lmites de un rango funcional, ya que descensos
incluso menores del 25% son suficientes para incrementar la excitabilidad
neuronal hasta niveles epilptognicos. Se han descrito diversas mutaciones en estas protenas que provocan una forma de epilepsia conocida
como convulsiones neonatales familiares benignas.
Uno de los factores que determina la magnitud de la corriente es el
nmero de canales inicos insertados en la membrana plasmtica. Esta
densidad depender de la eficiencia de procesos tales como la biosntesis,
el trfico y direccionamiento y la estabilidad de la protena tanto en superficie como durante las etapas intermedias del transporte.
Nuestro laboratorio estudia los mecanismos que regulan la densidad
en membrana de las protenas KCNQ. Hemos identificado dos regiones
que al ser eliminadas conllevan un aumento importante de los canales
KCNQ en la membrana. Nuestro objetivo es caracterizar cada una de
estas regiones para entender como afectan y modulan la densidad en
membrana de los canales KCNQ.

Chronic lithium administration to FTDP17 tau and GSK-3beta overexpressing mice
prevents tau hyperphosphorylation and
neurofibrillary tangle formation, but preformed neurofibrillary tangles do not revert.
Paloma Goi Oliver; Engel T, Lucas JJ, Avila J, Hernandez F.
Centro de Biologia Molecular Severo Ochoa, Universidad Autonoma de Madrid, Madrid, Spain.
Glycogen synthase kinase-3 (GSK-3) has been proposed as the main
kinase able to aberrantly phosphorylate tau in Alzheimers disease (AD)
and related tauopathies, raising the possibility of designing novel therapeutic interventions for AD based on GSK-3 inhibition. Lithium, a widely
used drug for affective disorders, inhibits GSK-3 at therapeutically relevant concentrations. Therefore, it was of great interest to test the possible protective effects of lithium in an AD animal model based on GSK-3
overexpression. We had previously generated a double transgenic model,
overexpressing GSK-3beta in a conditional manner, using the Tet-off system and tau protein carrying a triple FTDP-17 (frontotemporal dementia
and parkinsonism linked to chromosome 17) mutation. This transgenic
line shows tau hyperphosphorylation in hippocampal neurones accompanied by neurofibrillary tangles (NFTs). We used this transgenic model
to address two issues: first, whether chronic lithium treatment is able to
prevent the formation of aberrant tau aggregates that result from the

overexpression of FTDP-17 tau and GSK-3beta; second, whether lithium
is able to change back already formed NFTs in aged animals. Our data
suggest that progression of the tauopathy can be prevented by administration of lithium when the first signs of neuropathology appear. Furthermore, it is still possible to partially reverse tau pathology in advanced
stages of the disease, although NFT-like structures cannot be changed.
The same results were obtained after shut-down of GSK-3beta overexpression, supporting the possibility that GSK-3 inhibition is not sufficient
to reverse NFT-like aggregates
Engel T, (2006) J Neurochem. 99,1445-55.
Engel T., (2006a) J. Neurosci.26, 50835090.
Engel T. (2006b) Aging 27, 12581268.
Lim F., (2001). Mol. Cell Neurosci. 18, 702714.
Lucas J. J., (2001) EMBO J. 20, 2739.

ESTUDIO MORFOLGICO DE LAS CLULAS GANGLIONARES DE LA RETINA DE CERDO
Patricia del Ro Medina; Mara Hernndez2, Agurtzane Rivas1,
Marta Galds1, David Rodriguez2 y Elena Vecino1
1Departamento de Biologa Celular, Facultad de Medicina, Universidad del Pas Vasco. 2Departamento de Bioqumica, Universidad
de Salamanca
Objetivo. Clasificar las clulas ganglionares de la retina (CGR) atendiendo a parmetros morfomtricos as como su localizacin en la retina.
Materiales y mtodos. Para visualizar las clulas se ha utilizado el
marcador lipoflico DiI(1,1-dioctadecil-3,3,3,3-tetrametil-indocarbocianina perclorato) inyectado en el nervio ptico de ojos fijados con paraformaldehdo al 4%. Los ojos y nervios fueron mantenidos en oscuridad
en el mismo fijador a temperatura ambiente de 2 semanas hasta 18 meses. Pasado este tiempo, las retinas fueron extradas de las copas pticas
y montadas en portaobjetos para poder visualizarlas con microscopa
confocal. Se analizaron los siguientes parmetros de cada clula: area y
eje mayor del soma, area del campo dendrtico, nmero de dendritas
primarias y el nivel de estratificacin de estas en la capa plexiforme interna. Posteriormente se realiz un estudio estadstico mediante anlisis
paramtrico multidimensional estableciendo grupos y subgrupos jerrquicos celulares.
Resultados. Se ha observado que tanto el mtodo de trazado, como
el tipo de trazador utilizado, son muy adecuados para este estudio permitiendo la visualizacin de la morfologa celular con mucho detalle. De
una poblacin total de 182 CGRs hemos identificado 4 grupos principales
de clulas monoestratificadas y 2 grupos de clulas biestratificadas. As
como 7 subgrupos atendiendo al tamao de soma y a la extensin de
las dendritas.
Conclusin. Hemos realizado una clasificacin morfolgica de las
CGR del cerdo en estado normal que nos permitir en un futuro compararlas con estados seniles o patolgicos.
Financiacin: ONCE, Fundaluce, Ministerio de Ciencia y Tecnologa
(BFI2003-07177), Universidad del Pas Vasco (00077.327-15350/2003),
Fundacin Gangoiti.

Mecanismo molecular de regulacin por
GSK-3beta del factor de transcripcin Nrf2,
controlador de la respuesta antioxidante neuronal
Patricia Rada Llano; Ana I. Rojo y Antonio Cuadrado
Autnoma de Madrid. Arzobispo Morcillo 4, 28029 Madrid.
GSK-3b es una Ser/Thr quinasa implicada en varios procesos neurodegenerativos. Recientemente, hemos descrito que GSK-3b inhibe la
respuesta neuronal antioxidante al regular la funcin del factor de transcripcin Nrf2 (Nuclear factor E2-related factor 2), que es el controlador
maestro de la expresin de genes antioxidantes de fase II. En este estudio
hemos identificado dos dominios de Nrf2 que son fosforilados por GSK3b. El primer dominio promueve la degradacin de Nrf2 por medio de la
E3 ligasa bTrCP. Esta regulacin proteoltica es diferente de la conocida
hasta ahora que est mediada por Keap1. La fosforilacin del segundo
dominio, que tiene homologa con otros sustratos de GSK-3b, acelera la
salida del ncleo celular. Este trabajo indica que GSK-3b funciona como
un interruptor molecular que apaga la defensa antioxidante celular mediada por Nrf2 y sensibiliza a las neuronas frene a estrs oxidativo.

Estudio del papel de Anosmina-1 en la sealizacin de FGFR1 y de su sobreexpresin en
el desarrollo del SNC
Pedro Felipe Esteban Ruiz; Ana Bribin, Virginia Vila del Sol y Fernando de Castro
Grupo de Neurobiologa del Desarrollo GNDe, Hospital Nacional
de Parapljicos, Toledo, Espaa
El sndrome de Kallmann es un desorden neurolgico que se caracteriza por anosmia (prdida del sentido del olfato) e hipogonadismo
hipogonadotrpico. Los productos del gen KAL1, Anosmina-1, y KAL2, el
receptor FGFR1, son las dos molculas implicadas en la patogenia de esta
enfermedad. Anosmina-1 es una protena secretada asociada a la matriz
extracelular que participa en la migracin, adhesin y diferenciacin de
diferentes tipos celulares del SNC. En una lnea de trabajo desarrollada en
nuestro laboratorio se ha descrito que Anosmina-1 modula negativamente la migracin de precursores de oligodendrocitos (OPCs) mediada por
FGF2/FGFR1, y en membranas de cerebro de rata se ha descrito interaccin directa entre esta protena y el receptor FGFR1. Con el propsito de
profundizar en los mecanismos moleculares implicados en esta interaccin, se estn identificando mediante GST pull-down las regiones concretas de Anosmina-1 que interactan con FGFR1, y estudiando el efecto
de esta interaccin en la activacin del receptor por FGF2. Por ltimo,
para estudiar con ms detalle el papel de Anosmina-1 en el desarrollo del
SNC, se ha generado una lnea transgnica de ratn que sobreexpresa
Anosmina-1 bajo el control del promotor de la b-actina, y en la que estn
siendo analizados los efectos de esta sobreexpresin en la proliferacin,
adhesin, migracin y diferenciacin de diferentes poblaciones de neuronas y de la oligodendrogla durante el desarrollo y en el adulto
Financiado con fondos del Ministerio de Educacin y Ciencia
(SAF2006-28387E), Ministerio de Sanidad y Consumo (PI2004-2591), de
la Consejera de Sanidad de Castilla-La Mancha (ICS06024/00) y de la
Consejera de Educacin y Ciencia de Castilla-La Mancha (PAI07-00496090)

ENRIQUECIMIENTO AMBIENTAL, ENVEJECIMIENTO
Y CORTEZA PREFRONTAL: EFECTOS DEL ESTRS
SOBRE LA LIBERACIN DE DOPAMINA, ACETILCOLINA, GLUTAMATO Y GABA Y SOBRE LA MEMORIA
DE TRABAJO.
Pedro Garrido Vega; del Arco, A., Segovia, G., de Blas, M., Mora, F.
Complutense de Madrid.
El objetivo del presente estudio fue investigar si el enriquecimiento
ambiental modifica los efectos del estrs moderado, durante el envejecimiento, sobre la liberacin de dopamina, acetilcolina, glutamato y GABA
en la corteza prefrontal (CPF), y sobre la memoria de trabajo. Se utilizaron ratas Wistar macho (3 meses de edad) que se mantuvieron en condiciones control (una rata por jaula) o de enriquecimiento ambiental (1012 animales en jaulas de 120x100x60 con tuberas, juguetes y ruedas de
ejercicio) hasta que alcanzaron una edad de 6, 15 24 meses. La memoria
de trabajo se evalu mediante una prueba de alternancia en un laberinto
en forma de T en agua. La concentracin de los neurotransmisores en la
CPF se evalu mediante microdilisis y HPLC.. El estrs (40min de restriccin del movimiento) increment las concentraciones de dopamina y
acetilcolina en la CPF de los animales de 6 meses. El envejecimiento redujo el efecto del estrs sobre la dopamina pero no sobre la acetilcolina
en ambos grupos experimentales. El enriquecimiento ambiental redujo la
liberacin de dopamina y acetilcolina producidas por estrs en los tres
155
grupos de edad. El estrs (10min en un campo abierto) redujo la tasa de

aciertos en el laberinto en T en los tres grupos de edad Esta reduccin
no se vio modificada por el envejecimiento ni por el enriquecimiento
ambiental. Estos resultados sugieren que el enriquecimiento ambiental reduce la reactividad al estrs de los sistemas dopaminrgico y colinrgico
en la CPF. SAF2003-0448, SAF2006-01564, PR45/05/14199/UCM.
Del Arco, A., Behav.Brain Res. 176:267-273 (2007)
Mora, F., , Brain Res Rev (2007)

Expresin de los mRNAs que codifican para
los transportadores vesiculares de glutamato 1 y 2 en las clulas de origen de la va
tlamoestriada en la rata
Barroso-Chinea P, Castle M, Aymerich MS, Lanciego JL.
Laboratorio de Neuromorfologa de Ganglios Basales, rea de
Neurociencias, Centro de Investigacin Mdica Aplicada (CIMA)
Los transportadores vesiculares de glutamato 1 y 2 (VGLUT1 y
VGLUT2) han sido utilizados como marcadores de neuronas glutamatrgicas. Ambas isoformas de VGLUT exhiben una distribucin complementaria en el CNS, con una expresin preponderante de los mRNAs para
VGLUT1 y VGLUT2 en corteza cerebral y en tlamo, respectivamente.
Datos recientes de nuestro grupo indican la existencia de una moderada
expresin del mRNA para VGLUT1 en ncleos ventrales y asociativos
talmicos. Adems, todas las neuronas situadas en los ncleos ventrales
y asociativos talmicos co-expresaban los mRNAs para ambas isoformas
de VGLUT. En un intento de averiguar que tipos de VGLUT usan las neuronas tlamoestriadas, hemos realizado una doble hibridacin in situ para
la deteccin de los mRNAs para VGLUT1 y VGLUT2, combinada con el
trazado retrgrado de toxina clerica (CTB). Nuestros resultados demuestran que VGLUT2 es el nico transportador vesicular de glutamato
usado por las neuronas tlamoestriadas situadas en los ncleos de la lnea
media y en los ncleos intralaminares, mientras que todas las neuronas
que inervan el estriado y que estn situadas en los ncleos ventrales del
tlamo expresan ambos mRNAs de VGLUT. De hecho, los mRNAs que
codifican para ambas isoformas de VGLUT se caracterizan por presentar
una ntida distribucin subcelular complementaria, lo que sugiere que una
sola neurona talmica puede tener diversas maneras para transportar el
glutamato.
Financiado por FIS (PI051037), Plan Nacional de I+D (BFU200606744), CIBERNED (CB06/05/0006), Departamento de Educacin del
Gobierno de Navarra (18/2005); Fundacin de Investigacin Mdica Mutua Madrilea y Proyecto UTE/FIMA.

Las neuronas colinrgicas del telncfalo basal del perro (NCTB) co-expresan
p75NTR, calbindina-D28k y NOS.
Pedro Pesini Ruiz; D. Insua(1), M. Sarasa(3), A. Corredoira(2), G. Santamarina(2), M. Suarez(2)
(1) Departamento de Anatoma, (2) Departamento de Ciencias
Clnicas Veterinarias, Facultad de Veterinaria, Universidad de Santiago de Compostela, Espaa. (3) Departamento de Anatoma, Embriologa y Gentica, Facultad de Veterinaria, Universidad de Zaragoza, Espaa.
Se ha sugerido que determinados cambios fenotpicos de las NCTB
durante el envejecimiento normal podra estar relacionados con su especial vulnerabilidad frente a procesos neurodegenerativos como la enfermedad de Alzheimer (EA). En concreto, se ha demostrado que a partir de
los 65 aos disminuye la expresin de calbindina-D28k y de los receptores (p75NTR y trkA) del factor de crecimiento nervioso (NGF)[1].
En este trabajo nosotros hemos estudiado mediante tcnicas de
doble marcaje inmunohistoqumico la expresin de calbindina-D28k,
p75NTR y xido ntrico sintetasa (NOS) en las NCTB del perro, considerado un modelo natural muy adecuado para la investigacin de la EA.
Nuestros resultados muestran que, al igual que en la especie humana,
la inmensa mayora de las NCTB co-expresan p75NTR (84 % 1.9) y
156
que este porcentaje disminuye ligera (73 % 1.9) pero significativamente

en los animales viejos. Adems, aproximadamente el 74 % de las NCTB
del perro co-expresan calbindina-D28k y este porcentaje tambin disminuye (64 % 1.8) significativamente en los perros viejos. Este ltimo
resultado marca una notable diferencia con los roedores en los que las
NCTB no co-expresan calbindina-D28k [2]. Por otro lado, hemos visto
que, a diferencia de lo que ocurre en primates y roedores, el 90 % de las
NCTB del perro muestran actividad NADPH-d, es decir expresan NOS
[3]. Nuestros resultados ponen de manifiesto que aunque la distribucin
anatmica de las NCTB es similar en primates, carnvoros y roedores, las
caractersticas neuroqumicas de estas neuronas varan sustancialmente
de unas especies a otras.
1 E. J. Mufson. In: Functional Neurobiology of Aging, edited by P. R. Hof and C. V.
Mobbs, London:Academic Press, 2001, p. 243-281.
2 I. Gritti, I. J Comp Neurol. 458 (1):11-31, 2003.
3 L. Menendez,. J Chem.Neuroanat. 31 (3):200-209, 2006.

Dficit de hormonas tiroideas maternas en
el ltimo tercio de gestacin y desarrollo
cortical. Un modelo para el estudio de la
hipotiroxinemia temprana en prematuros
Pere Berbel; Caniela Navarro (1), Eva Aus (1), Ana Erika Rodrguez
(1), Jos Victor Garca-Velasco (1), Rosala Lavado (2), Clara Faura (1) y
Gabriella Morreale de Escobar (2)
(1) Inst. Neurociencias, UMH-CSIC, Alicante, (2) Inst. Invest. Biomdicas A. Sols, CSIC-UAM, Madrid
La hipotiroxinemia transitoria afecta al 35-50% de nios prematuros e incrementa el riesgo de desordenes neurolgicos. Para estudiar
el efecto de las hormonas tiroideas maternas durante el ltimo tercio
de embarazo (periodo equivalente al de la hipotiroxinemia temprana en
prematuros), se tiroidectomizaron ratas preadas a E16 y se implantaron
con bombas subcutneas liberadoras de calcitonina y parathormona. Las
cras se transfirieron a ratas controles nodrizas a P0 y se sacrificaron entre P0 y P40. Se estudiaron cras de ratas controles (C), tiroidectomizadas
a E16 (H16); H16 ms T4 a E17-P0 (H16+T417) y H16 ms T4 a E20-P0
(H16+T420). Todas las madres se inyectaron con BrdU a E17-P0. A P15,
se observ en las cras H16 una laminacin cortical similar a la de las C a
P8. A P40, se observ una alteracin en la distribucin radial de neuronas
(NeuN+ y BrdU+) en la neocorteza de cras H16 y H16+T420. Con
el mtodo de TIMM, se observ una disminucin de zinc en el estrato
oriens de CA3 en cras H16, en paralelo con una disminucin en el transportador de zinc ZnT3. A P40, las cras H16 mostraron alteraciones en la
conducta respecto a las C. En conclusin, las hormonas tiroideas maternas son esenciales para el normal desarrollo de los fetos an despus del
inicio del funcionamiento de la tiroides fetal, las alteraciones causadas no
se evitan si se retrasa el tratamiento con T4. FIS PI03/0576 y SAF200614068 a PB, PI05/0590 a CF y PI03/1417 a GME.

Localizacin de genes en el ADN mediante
inferencia gramatical
Piedachu Peris Garca; Damin Lpez, Marcelino Campos
Departamento de Sistemas Informticos y Computacin Universidad Politcnica de Valencia,Cam de Vera S/N 46022 Valencia
La informacin disponible del genoma de numerosas especies aumenta rpidamente, por lo que resulta cada vez ms necesario automatizar
el anlisis de las secuencias de ADN. Esta tarea se ha abordado desde el
campo de la bioinformtica, con paquetes de programas que emplean diferentes tcnicas, como Modelos Ocultos de Markov, estadstica o redes
neuronales. El objetivo de este trabajo es analizar las secuencias de ADN
para localizar sus genes. Si abstraemos la estructura secuencial de las cadenas de ADN, interpretando cada nucletido como un smbolo o letra,
es posible aplicar al terreno biolgico tcnicas de Inferencia Gramatical,
considerendo las cadenas de ADN como pertenecientes a un lenguaje.
Nuestro mtodo codifica las cadenas etiquetando cada smbolo segn
si el nucletido al que representa pertenece o no a un gen (subsecuencia
codificiante dentro de la cadena). Las cadenas obtenidas se consideran

palabras de un lenguaje regular. Estas cadenas se utilizan en un proceso de
inferencia gramatical que genera una gramtica regular. La codificacin se
deshace y a partir de las cadenas obtenidas se infiere un transductor, esto
es, un autmata finito que por cada smbolo analizado genera un smbolo
de salida. Este transductor genera, por tanto, una cadena de salida por
cada cadena procesada.
Para analizar una secuencia, utilizamos un algoritmo de analsis de
correcin de errores, que devuelve la transduccin ms probable a partir
de una cadena de entrada. Este mtodo halla un 70% de los genes de las
secuencias analizadas.
M.Burset Genomics, 34:353--367, 1996.
J.M. Sempere. LNAI, 862:38--44, 1994.
C.Math, . Nucleic Acid Research, 30(19):4103--4117, 2002.

Papel de los receptores A2a en las disquinesias inducidas por L-DOPA en modelos
animales de Parkinson.
Vilma Mueton Gomez; Darmopil S y Moratalla R
Los receptores de adenosina A2a se encuentran casi exclusivamente
localizados en el estriado, donde se expresan en las mismas neuronas
junto con el receptor dopaminrgico D2, modulando de esta manera la
actividad dopaminrgica. La activacin del receptor A2a antagoniza los
efectos comportamentales y bioqumicos mediados por los receptores
D2 en los ganglios basales, mientras que su bloqueo potencia estas acciones. El mecanismo por el cual existe un efecto antagonstico entre el
receptor A2a y el D2 puede deberse a la formacin de heterodmeros
A2a/D2 descrita anteriormente. En el presente trabajo, mediante la utilizacin de animales carentes del receptor A2a, hemos investigado la participacin de los receptores A2a en las disquinesias inducidas por L-DOPA
en animales lesionados con 6-OHDA. Conductualmente, hemos evaluado
las rotaciones contralaterales y las discinecias orofaciales, axiales y de
las extremidades y hemos demostrado que la inactivacin del receptor
A2a en animales A2a-/- , retrasa la aparicin de las disquinesias y disminuye la intensidad de las mismas. De la misma manera hemos demostrado
que la ausencia del receptor A2a disminuye la expresin estriatal de los
marcadores moleculares de las disquinesias inducidos por L-DOPA en
comparacin con la expresin observada en animales salvajes. Por tanto,
nuestros resultados indican que los antagonistas de los receptores A2a
representan una diana alternativa a la terapia antiparkinsoniana ya que
alivian los sntomas motores de la enfermedad de Parkinson y disminuyen
las disquinesias. Financiado por MEC, MSC y PNSD.

Distribucin de las formaciones en cesto
complejas (FCC) en la corteza cerebral humana
Virginia Garca-Marn; Blazquez-Llorca L* y DeFelipe J. (*ha contribuido igualmente)
Dpto. Neuroanatoma y Biologa Celular. Instituto de Neurobiologa
Ramn y Cajal, CSIC,Avda. Doctor Arce, 37; Madrid -28002
En la corteza cerebral se distinguen dos tipos principales de neuronas: piramidales y no piramidales. Las piramidales son las principales
neuronas de proyeccin y son excitadoras. Las no piramidales se caracterizan porque su axn permanece dentro de la corteza (interneuronas).
La mayora de las interneuronas carecen de espinas y son inhibidoras;
existen diferentes tipos morfolgicos destacando las clulas de double
bouquet, las clulas en cesto y las clulas en candelabro, que inervan distintas regiones de las clulas piramidales.
Ciertas subpoblaciones de interneuronas se tien inmuno-citoqumicamente con anticuerpos dirigidos contra las protenas fijadoras de
calcio parvoalbmina (PV), calbindina (CB) o calretinina (CR); o son marcadas mediante glicoprotenas que reconocen azcares de la superficie
neuronal, como la lectina Vicia villosa agglutinin (VVA). Se ha observado
que las clulas en cesto y en candelabro son PV-positivas, mientras que
las clulas de double bouquet son CB- y/o CR-positivas
En el presente trabajo hemos realizado un estudio de colocalizacin

de VVA, PV y V-GAT (transportador vesicular de GABA) en diferentes
reas corticales (motora, frontal, visual, temporal y cingular) del cerebro
humano. Hemos encontrado que ciertas interneuronas estn inervadas
por formaciones en cesto V-GAT de una gran complejidad que hemos
denominado Formacin en Cesto Compleja (FCC). Estos FCC inervan
clulas PV-positivas/VVA-positivas, PV-positivas/VVA-negativas o PV-negativas/VVA-positivas, y se encuentran en todas las reas de la corteza
cerebral, aunque son mucho ms frecuentes en la corteza motora. Estos
resultados indican que existen diferencias regionales muy notables con
respecto a la distribucin de los FCC en la corteza cerebral.
Peters y Jones, EG eds. En Cerebral cortex.Vol.1. New York: Ed. Plenum Press, 1984
Somogyi et al., Brain Res Rev 26: 113-35, 1998 ;
DeFelipe, J Cereb Cortex 3: 273-289, 1993;
DeFelipe, J Chem Neuroanat 13:243-251, 1997;
DeFelipe et al., 2006 Prog Brain Res. 2006;154:15-32.
Ballesteros-Yez et al., J Comp Neurol. 486:344-360, 2005

Estudio de los mecanismos alternativos de
supresin de la respuesta inmune en un modelo animal de esclerosis mltiple
Virginia Vila del Sol; Clemente D.(1), Surez L. (2) y de Castro F. (1)
(1) Grupo de Neurobiologa del Desarrollo-GNDe. Hospital Nacional de Parapljicos. Toledo. Espaa. (2) Servicio de Citometra.
Unidad de Neurologa Experimental. Hospital Nacional de Parapljicos. Toledo. Espaa
La esclerosis mltiple (EM) es una enfermedad desmielinizante que
presenta una gran heterogeneidad en cuanto a las manifestaciones clnicas
e inmunolgicas. Desde el punto de vista inmunolgico, se postula que la
EM ocurre por un fallo en el control de la autoinmunidad natural. En el
sistema inmune existen diversos tipos de clulas encargadas de regular la
respuesta de los linfocitos ante los antgenos propios (clulas T reguladoras
y clulas mieloides supresoras). En la EM, parece que existe una disminucin de la actividad de las clulas T reguladoras, que provoca una prdida
de la capacidad de discriminacin entre lo propio y lo ajeno por parte del
sistema inmune. El objetivo del trabajo es el estudio de los cambios en las
poblaciones celulares de tipo supresor en el transcurso de la EM. Para ello,
inmunizamos ratones C57BL6 (6-8 semanas) con el pptido MOG35-55
(Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein), y a distintos das post-inmunizacin obtuvimos distintos rganos: bazo, lquido peritoneal, cerebro y mdula espinal. Mediante citometra de flujo analizamos las poblaciones celulares
presentes en bazo y lquido peritoneal, as como la proliferacin y activacin de las mismas en respuesta a MOG. Por otro lado, hemos estudiado el
grado de desmielinizacin y la presencia de infiltrados inflamatorios en cerebro y mdula espinal. Adems, hemos analizado la expresin de distintos
genes mediante RT-PCR (iNOS, COX-2, TNF, Arginasa I, IL-4, TGFbeta) en
diferentes rganos. Con los datos obtenidos, pretendemos establecer una
correlacin entre sntomas clnicos, desmielinizacin y los cambios observados en las poblaciones celulares presentes en la periferia.
Financiado con fondos del Ministerio de Educacin y Ciencia (SAF2006-28387E), Consejera de Sanidad de Castilla-La Mancha
(ICS06024/00) y Federacin de Cajas de Ahorros de Castilla y Len

EFECTO DEL ENU EN LA MIGRACION DE NUEVAS
NEURONAS AL BULBO OLFATORIO DEL RATON
ADULTO
Vivian Capilla-Gonzlez1,2, Sara Gil-Perotin2, Carlos de la RosaPrieto2, Juan Antonio Barcia-Albacar1, Jose Manuel Garcia-Verdugo1,2
(1) C. I. Prncipe Felipe, Valencia, Espaa (2) Inst. Cavanilles, Univ.
Valencia, Espaa
La zona subventricular (SVZ) es uno de los centro de proliferacin
ms estudiados en el cerebro del ratn adulto. En ella, las clulas madre
(clulas B) son las responsables de producir las clulas C (clulas progenitoras) que se van a diferenciar en los neuroblastos (clulas A), los cuales
van a migrar a travs del rostral migratory stream (RMS) hasta alcanzar el
157
bulbo olfatorio (BO), donde, una vez transformados en las nuevas neuronas, van a reponer la perdida neuronal y reforzar la discriminacin olfativa
del roedor.
El N-ethyl-N-nitrosourea (ENU) es un compuesto qumico del grupo
alquilo que induce mutaciones en diversos genes del ratn como resultado de la transferencia de su grupo ethyl a las bases nitrogenadas de los
cidos nucleicos.
Como ya hemos demostrado en estudios previos de ultraestructura,
la administracin del ENU produce una alteracin de la SVZ, encontrando un aumento en la proporcin de clulas C y un descenso en la de las
clulas A, lo cual podra indicar un fallo en la diferenciacin de clulas C
a clulas A. As, nuestra hiptesis en este trabajo es que debe haber una
tendencia a disminuir la cantidad de neuroblastos que van a migrar por
la RMS, desde la SVZ hasta el BO. Tambin cabra esperar que este hecho
tenga consecuencias en la discriminacin olfativa del animal, pero esto
aun lo estamos estudiando.

Expresin de la IL-15 en el SNC y su implicacin en procesos neuroinflamatorios: Inhibicin de la reactividad glial mediante
el bloqueo de su actividad
Diego Gomez Nicola; Valle-Argos B, Pita-Thomas WD, Nieto-Sampedro M
Instituto Cajal (CSIC). Hospital Nacional de Parapljicos (SESCAM)
Los eventos inflamatorios que contribuyen a la progresin de las
enfermedades neurodegenerativas, o que participan en las etapas iniciales
de las lesiones traumticas, continan siendo, en parte, desconocidos. La
generacin de un tejido glitico compuesto por astrocitos y microglia
reactivos, as como por infiltrados de clulas inmunes esta regulada por
un balance de citoquinas. En el presente trabajo proponemos que la interleuquina 15 (IL-15), citoquina proinflamatoria implicada en la regulacin
de respuestas de clulas T y B, es una molcula clave en la generacin
temprana de respuestas inflamatorias en el SNC. As, describimos detalladamente su expresin en el SNC, tanto in vitro como in vivo, donde
es ms abundante en el cerebelo y el hipocampo, con los astrocitos y
algunas poblaciones neuronales como sus principales fuentes celulares.
Tras administracin aguda de LPS en el cerebro, la IL-15 se expresa tanto
en astroglia como en microglia reactiva, en los primeros pasos de la generacin del tejido glitico. El bloqueo de la actividad de la IL-15 provoc
una severa disminucin de la reactividad en astrocitos y microglia, medida
mediante descenso en inmunoreactividad de vimentina, GFAP, MHC-II y
lectina de tomate. Por tanto, IL-15 parece relevante en el desarrollo y
fisiologa normal del SNC, y nuestros resultados indican que es crucial en
la modulacin del ambiente inflamatorio generado tras una lesin aguda,
surgiendo como un factor clave en la generacin del tejido glitico, surgiendo as como un importante candidato para futuras terapias antiinflamatorias en enfermedades neurodegenerativas y en trauma al SNC.

Disponibilidad de Gla Envolvente Olfatoria p75-NTFR positiva en ratas de distintas
edades como fuente de clulas para su
uso en terapia autloga.
J. Jaramillo-Merchn, A Ramn-Cueto
Laboratorio de Regeneracin Neural, Instituto de Biomedicina de
Valencia (CSIC), Valencia, Espaa
La gla envolvente olfatoria p75-NTFR positiva, purificada del bulbo
olfatorio de ratas adultas (BO-OEG), promueve el crecimiento axonal y
la recuperacin funcional de ratas parapljicas. Como aproximacin para
averiguar si un individuo de cualquier edad pudiera ser buen donante
de OEG para terapia autloga, hemos estudiado en ratas de distintas
edades la disponibilidad de stas clulas a partir de bulbos olfatorios tras
su puesta en cultivo y sus propiedades in vitro, en relacin con la densidad de las mismas en los bulbos olfatorios in vivo. Para la obtencin
de OB-OEG, se han utilizado los bulbos olfatorios de ratas Wistar de
edades comprendidas entre 2,5 y 18 meses. Se analiz la expresin de
158
actividad B-galactosidasa asociada a senescencia y las propiedades inmunocitoqumicas de las clulas empleando los marcadores tpicos de la
OEG. En cultivo, observamos que el nmero total de clulas que se puede
obtener disminuye a medida que aumenta la edad de la rata. Sin embargo,
el porcentaje de clulas p75-NTFR positivas del cultivo se incrementa
significativamente. Al normalizar el porcentaje de clulas que expresan
p75-NTFR con respecto al nmero total, encontramos, en cambio, que el
nmero absoluto de clulas p75-NTFR positivas se mantiene constante
a medida que la edad de la rata avanza. Por tanto, la cantidad de clulas
p75-NTFR positivas que se puede obtener es la misma independientemente de la edad del individuo. Esto sugiere que la edad no afecta a la
disponibilidad de OEG ptima para la realizacin de trasplantes autlogos
en el sistema nervioso.
Financiado por la Fundacin Investigacin en Regeneracin del Sistema Nervioso.

Trasplante de Gla envolvente olfatoria
en ratas con lesin medular completa:
cuantificacin del grado de regeneracin y cambios de la zona de la lesin.
M. B. Llamusi, F. F. Santos Benito, A. Ramn Cueto
Financiado por el Ministerio de Ciencia (SAF2001-2242), y la Fundacin Investigacin en Regeneracin del Sistema Nervioso.
La eficacia de la gla envolvente olfatoria (OEG) trasplantada en la
fase aguda de una lesin medular ha sido confirmada por varios grupos
en roedores. Sin embargo, an no se ha determinado qu tipo de haces
descendentes regeneran en respuesta al trasplante de OEG, ni la magnitud de dicha regeneracin, ni se conocen los cambios que acontecen en
la cicatriz glial tras el trasplante. Por ello, trasplantamos OEG de bulbo
olfatorio de rata adulta en fase aguda de una lesin medular completa.
Durante ocho meses post-lesin evaluamos la recuperacin funcional,
encontrando diferencias entre los animales lesionados no trasplantados y
los controles. Para determinar el grado de regeneracin axonal a travs
de la lesin, utilizamos un cctel de peroxidasa como trazador retrgrado, inyectado 0,5cm por debajo de la lesin, demostrando as, que la OEG
promueve regeneracin neuronal cuantificable en los ncleos rafe, locus
Coeruleus, ncleo rojo, ncleo vestibular y formacin reticular. Adems,
utilizando anticuerpos frente a astrocitos reactivos (GFAP), microgla
(ED-1), neurofilamento (NFL) y condroitin sulfato (CS-56) demostramos;
que el trasplante de OEG favorece la aposicin de los muones, sin alterar la formacin de quistes, que en los animales trasplantados, aumenta la
presencia axonal en la cicatriz meningea y que no se producen cambios
significativos detectables tras ocho meses en la intensidad de expresin
de molculas inhibitorias en zona de lesin. En definitiva, la OEG promueve la regeneracin de haces de la mdula espinal relevantes para la
funcin motora y favorece cambios en la zona lesionada favorables para
el proceso regenerativo.

Cambios en la expresin de Protenas Ligantes de Calcio y gla en el Colculo Superior
de ratas con Glaucoma Experimental.
M. A. Rivas, M. Hernndez, M. Galds, S. Pinar, E.Vecino.
Universidad del Pas Vasco
Objetivo: Analizar los posibles cambios moleculares que tienen lugar
en el Colculo Superior (CS) de ratas durante fases avanzadas de glaucoma experimental.
Mtodos: Se utilizaron ratas a las cuales se les cauteriz tres venas
epiesclerales en el ojo izquierdo con el fin de incrementar la presin
intraocular (PIO), el ojo derecho se utiliz como control. El estudio se
realiz a dos tiempos de supervivencia con PIOs altas en el ojo operado:
Grupo I: 6 meses (n=3). Grupo II: 9 meses (n=3). Trascurrido el periodo
experimental requerido en cada grupo, los animales fueron sacrificados,
el CS diseccionado y procesado posteriormente para realizar inmunohistoqumica. Se utilizaron anticuerpos contra parvalbmina, calbindina y
protena cida fibrilar glial (GFAP).
Resultados: Hemos establecido un modelo experimental de glaucoma en rata donde poder estudiar los cambios en la expresin de mol-

culas presentes en las clulas del CS. Tras provocar un dao en la retina,
hemos observado en CS un aumento de la expresin de protenas ligantes de calcio y de marcadores gliales, tanto a 6 meses como a 9 meses de
aumento de la PIO.
Conclusin: El aumento de la PIO en ratas provoca un aumento en
la expresin de protenas ligantes de calcio en las zonas del CS a donde
proyectan las clulas ganglionares, de las retinas daadas. As mismo, se
produce un aumento en la expresin de protenas gliales despus de 9
meses de aumento de la PIO.
Financiacin: ONCE, Fundaluce, Ministerio de Ciencia y Tecnologa
(BFI2003-07177), Universidad del Pas Vasco (00077.327-15350/2003),
Fundacin Gangoiti.

La sensibilizacin locomotora inducida
por morfina modula FADD (transductor
de la seal de muerte de Fas) en cerebro de
rata.
A. Ramos-Miguel, A. Miralles, J.A. Garca-Sevilla.
Laboratorio de Neurofarmacologa, IUNICS, Universidad de las Islas Baleares, 07122 Palma de Mallorca.
FADD se acopla con el receptor Fas y activa caspasas efectoras para
inducir apoptosis. FADD tambin puede mediar seales no apoptticas
(e.g. diferenciacin celular) a travs de una fosforilacin (p-Ser191/194)
mediada por caseina cinasa I. Los frmacos opiceos reducen el contenido de FADD y aumentan el de p-FADD en cerebro (1). En este contexto
se estudi la modulacin de FADD, y otras vas de sealizacin inductoras
de plasticidad sinptica, tras sensibilizacin locomotora inducida por morfina (modelo de plasticidad neuronal). Grupos de ratas fueron tratadas
con salino (n=15) o morfina (10 mg/kg/da, durante 5 das) (n=25), sacrificndose a las 2 horas (TC, n=5-7), 3 das (W3, n=5-9) o 14 das (W14,
n=5-9) de la ltima dosis. Una nueva dosis de morfina fue administrada
en W3 y W14 para cuantificar la esperada sensibilizacin locomotora (incremento: 85% en W3, n=5, p<0.01; 11% en W14, n=5, p>0.05). Paralelamente (en ratas que no recibieron morfina en W3 y W14), la densidad de
p-FADD (comparada con salino o TC) aument en la corteza y estriado
(W3: 24-38%, p<0.01) y la de FADD disminuy (20-34%, p<0.05). En estas regiones cerebrales tambin se observ un incremento de p-MEK/pERK1/2 (W3: 27-51%, p<0.01) sin cambios en la fosforilacin de otras
MAP cinasas tales como JNK (incremento: 5-9%, p>0.05) y p38-MAPK
(decremento: 3-21%, p>0.05). Los resultados sugieren una participacin
de FADD y/o de su forma fosforilada, as como de p-MEK-ERK, en la
sensibilizacin locomotora inducida por morfina. SAF2004-03685 (MEC),
PRIB-2004-10147 (Govern Balear) y RETICS RD06/001/003 (MSC).
1.
Garca-Fuster, M.J., Miralles, A., Garca-Sevilla, J.A. Effects of
opiate drugs on Fas-associated protein with death domain (FADD) and
effector caspases in the rat brain: Regulation by the ERK1/2 MAP kinase
pathway. Neuropsychopharmacology, 2007. 32: 399-411.

Distribucin de glicina en la mdula espinal de la lamprea de mar durante el desarrollo: comparacin con el sistema GABArgico
Verona Villar-Cervio1, Gay R. Holstein2, Giorgio P. Martinelli2, Ramn Anadn1, Mara Celina Rodicio1
1Departamento de Biologa Celular y Ecologa, Facultad de Biologa,
Universidad de Santiago de Compostela, Santiago de Compostela 15782, Espaa. 2Departments of Neurology and Neuroscience, Mount Sinai School of Medicine, New York, New York 10029,
U.S.A.
prano en el desarrollo que las inmunorreactivas al GABA (GABA-ir). A

lo largo del desarrollo observamos un mayor nmero de clulas glicina-ir
que GABA-ir, tanto en la sustancia gris lateral como en la dorsomedial.
Slo una parte de estas neuronas muestran colocalizacin de ambos neurotransmisores, presentndose como dos poblaciones claramente separadas. A pesar de que las clulas GABA-ir son ms escasas, la mayor parte
de las neuronas que contactan con el lquido cefalorraqudeo aparecen
fuertemente GABA-ir, mientras que slo una pequea parte presenta
baja inmunorreactividad a la glicina. Las clulas de borde no muestran
inmunorreactividad a GABA en ninguno de los estados del desarrollo de
la lamprea, identificndose nicamente como glicina-ir. La organizacin de
las poblaciones neuronales glicina-ir y GABA-ir no sufren cambios morfolgicos significativo desde la etapa larvaria hasta el adulto.
Estos resultados indican que el sistema glicinrgico espinal se encuentra ya presente en circuitos tempranos de la mdula espinal de la
lamprea y que, en este grupo de vertebrados primitivos, no se origina a
partir de poblaciones transitorias preexistentes de GABA, como se ha
especulado en algunos trabajos llevados a cabo en mamferos.
Palabras clave: inmunohistoqumica, microscopa de laser confocal,
colocalizacin, desarrollo

COLOCALIZACIN DE DOPAMINA Y GABA EN
NEURONAS DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL DE
LA LAMPREA DE MAR
M. Celina Rodicio, Verona Villar-Cervio, Antn Barreiro-Iglesias y
Ramn Anadn
Departamento de Biologa Celular y Ecologa, Facultad de Biologa,
Universidad de Santiago de Compostela, 15782 Santiago de Compostela, Espaa.
La colocalizacin de neurotransmisores y/o neuropptidos es un aspecto importante de la organizacin neuroqumica del sistema nervioso
central (CNS) y del procesamiento de la informacin. En rata se ha descrito colocalizacin de GABA en algunas neuronas dopaminrgicas (clulas amacrinas, clulas periglomerulares del bulbo olfatorio o una parte
del sistema mesoestriatal), pero ese aspecto no se ha estudiado en otros
vertebrados. En este estudio investigamos la colocalizacin de GABA en
neuronas de poblaciones dopaminrgicas del SNC de adultos de lamprea
de mar (Petromyzon marinus) con tcnicas de doble inmunofluorescencia. Hemos encontrado codistribucin de GABA y dopamina en algunas
neuronas de poblaciones dopaminrgicas del SNC de lamprea conocidas por trabajos previos (Abalo et al., Brain Res Bull. 2005, 66:560-4). Se
observ colocalizacin de dopamina y GABA en algunas clulas grano
de los bulbos olfatorios, en neuronas del estriado que contactan con el
lquido cerebroespinal, en el ncleo de la comisura postptica, los ncleos
hipotalmicos dorsal y ventral, el ncleo de la comisura postinfundibular
y en todas las poblaciones dopaminrgicas del rombencfalo caudal y de
la mdula espinal. No se encontr colocalizacin en el ncleo preptico
y ncleo del tubrculo posterior. Estos resultados indican que las clulas
dopaminrgicas de la lamprea muestran importantes diferencias neuroqumicas, y sugieren que la colocalizacin GABA/dopamina en algunas
poblaciones es una caracterstica primitiva en la evolucin de los vertebrados. Aunque la colocalizacin observada de dopamina y GABA sugiere
cotransmisin en los terminales axnicos, su posible papel e interacciones en la sealizacin neuronal y/o glal requiere ser investigado.
Keywords: Petromyzon, cotransmission, dopamine, GABA, neuromodulation, brain, spinal cord.
El principal objetivo de este trabajo es la descripcin de la distribucin de la glicina en la mdula espinal a lo largo del desarrollo de la
lamprea de mar, as como su comparacin con las poblaciones GABArgicas, utilizando tcnicas de doble inmunofluorescencia. Los resultados
obtenidos en mdulas de embriones y prolarvas de lamprea muestran
que las clulas inmunorreactivas a la glicina (glicina-ir) aparecen ms tem-
159
COMUNICACIONES ORALES (Auditorio I, II, III A Y III B) - SABADO 8
16:00 a 16:15 en la sala Auditorio 1 (sesin: 1B)
Papel de un domino de argininas en el preM1 en la biognesis de receptores nicotnicos homomricos alfa7
CARACTERIZACIN ELECTROFISIOLGICA IN
VIVO DE RATONES (ARALAR -/-) CON DEFICIENCIA
EN LA LANZADERA MITOCONDRIAL MALATO-ASPARTATO
Alves, D.S y Ballesta J.J.

Instituto de Neurociencias de Alicante, Universidad Miguel Hernndez, San Juan (Alicante) jj.ballesta@umh.es
Los receptores nicotnicos de acetilcolina neuronales que se unen a
la alfa-bungarotoxina (a-Btx) forman hommeros, pudiendose ensamblar
el subtipo alfa9 tambin con subunidades alfa10. Los subtipos alfa7 y alfa8
poseen una regin conservada en el pre-M1 formada por tres argininas.
El objetivo principal de este trabajo fue estudiar el papel de dos de estas
argininas (R208 y R210) en la biognesis del subtipo alfa7 bovino. Para
ello, a travs de tnicas de mutagnesis dirigida se crearon mutantes que
fueron expresados en oocitos de Xenopus laevis mediante inyecciones
de los cRNAs correspondientes. La cuantificacin de los receptores ensamblados se realiz por estudios de unin a la [125I]a-Btx. Los resultados indican que en el caso de la R208 la presencia de un residuo de
aminocido positivo (R208K), negativo (R208E) o polar (R208T) en dicha
posicin disminuye la expresin superficial y total del receptor, pero no la
elimina como es el caso del residuo apolar (R208L). Por otro lado, para el
residuo 210 solamente con el mutante R210K se obtuvo una expresin
significativa, mientras que en el resto de los mutantes no haba expresin.
Por lo tanto, se puede concluir que la presencia de la carga positiva en la
posicin 210 es esencial para el ensamblaje del receptor, mientras que la
presencia de la arginina en la posicin 210 es esencial para el ensamblaje
del mismo, comprobando que las argininas R208 y R210 estn involucradas con la biognesis de los receptores alfa7.

Presencia de roturas de la doble hebra del
DNA durante la neurognesis de la retina
Jimena Baleriola Gmez de Pablos, Pedro de la Villa, Antonio Bernad, Luis Blanco y Enrique de la Rosa
Centro de Investigaciones Biolgicas (CSIC), Universidad de Alcal
de Henares, Centro Nacional de Enfermedades Cardiovasculares
(CNIC), Centro de Nacional de Biologa Molecular Severo Ochoa
(UAM-CSIC)
La muerte celular programada que afecta a las neuronas de proyeccin durante su maduracin es un proceso fisiolgico altamente regulado,
necesario para la correcta formacin del sistema nervioso central (SNC)
y est descrito segn la conocida como teora neurotrfica. Sin embargo
en estadios previos a la diferenciacin neuronal, los neuroblastos recin
diferenciados y las clulas proliferativas tambin mueren de una forma
regulada. Aunque an se desconocen las causas que provocan la entrada
en apoptosis de estas clulas, este fenmeno podra cumplir diferentes
propositos: controlar el nmero de precursores neuronales, seleccin
de fenotipos neuronales o eliminacin de anormalidades genticas en las
clulas. Por otro lado, daos producidos en el DNA parecen un estmulo
apopttico bastante significativo para las clulas del sistema nerviosos en
desarrollo. El fenotipo observado en ratones nulos para protenas que
participan en las vas de recombinacin homloga (HR) y la unin no
homloga (NHEJ) indican que las roturas que afectan a la doble hebra del
DNA (DSBs) comprometen especialmente la viabilidad de los neuroblastos si no son reparadas adecuadamente por complejos enzimticos especializados. Nuestro objetivo es establecer qu tipo de relacin pudieran
tener los procesos de apoptosis, neurognesis y roturas de la doble hebra
del DNA durante el desarrollo de la retina de vertebrados
Cepko, CL et al. (1996) Proc Natl Acad Sci USA, 93, 589-595
Covo, S et al. (2004) J Biol Chem, 279, 859-865
de la Rosa, EJ et al. (2000) Trends Neurosci, 23, 454-458
Daz, B et al. (2000) Development, 127, 1641-1649
Lucas, D et al. (2005) Eur. J. Immunol, 35, 1601-1611
Marquardt, T et al. (2002) Trends Neurosci, 25, 32-38
Morgan, WF et al. (1996) Radiat Res, 146, 247-258
Morgan, WF et al. (1998) Mutat Res, 404, 125-128
Oppenheim, RW (1991) Annu Rev Neurosci, 14, 453-501
Pequignot, MO et al. (2003) Dev Dyn, 228, 231-238
160
Marta Gmez Galn, Julia Makarova,Valeri Makarov, Beatriz Pardo,

Takeyori Saheki, Jorgina Satrstegui y Oscar Herreras
Instituto Cajal CSIC, Madrid, CBM-UAM y CIBERER, Madrid. Inst.
Health Sci, Tokushima Bunri Univ., Japn.
Hemos estudiado las consecuencias de la alteracin del metabolismo
energtico cerebral en la actividad electroencefalogrfica (EEG) de una
cepa de ratones SVJ119/C57BL deficiente para el gen ARALAR (-/-)1, que
codifica por el transportador de aspartato-glutamato mitocondrial de neuronas, un componente de la lanzadera de NADH malato-aspartato. Bajo
anestesia, se ha realizado un anlisis espectral del EEG registrado en diversas regiones cerebrales mediante sondas Michigan multielectrodo que
permiten un estudio laminar simultneo en varios trayectos paralelos. En
animales de 18-21 das, la comparacin entre animales KO y control revel
las siguientes diferencias. La potencia del EEG cortical es 5-10 veces inferior
en el KO vs. control. El hipocampo (CA3/ Hilus) y subculo del animal KO,
muestra una actividad epilptica persistente con brotes multi-espiga a una
frecuencia de ~1 Hz. La prdida de potencia del EEG y el status epilepticus del sistema lmbico indican una fuerte alteracin de la conectividad
funcional que se relaciona con las alteraciones comportamentales de estos ratones. Financiado por CSIC-I3/200620I186, MCyT-BFU2005-C02-01,
CAM-S-GEN-0269-2006, FIS-PI042457, FMM-616/2007.
1(Jalil MA et al, J Biol Chem 2005, 280: 31333-9)

APOPTOSIS NEURONAL Y DEFICIT MOTOR REVERSIBLE EN RATONES TRANSGNICOS CON EXPRESIN CONDICIONAL DE UNA FORMA DOMINANTE
NEGATIVA DE GSK-3
Raquel Gmez Sintes (1), Flix Hernndez (1), Anala Bortolozzi
(2), Francesc Artigas (2), Jess Avila (1), Paola Zaratin (3), Jean Pierre
Gotteland (4) and Jos J. Lucas (1)
1. Centro de Biologa Molecular Severo Ochoa, CSIC/UAM, Madrid, Spain. 2. Departamento de Neuroqumica y Neurofarmacologa, Instituto de Investigaciones Biomdicas de Barcelona (CSIC),
IDIBAPS, Barcelona, Spain. 3. Istituto di Ricerche Biomediche A.
Marxer, LCG-RBM/Serono Discovery, Colleretto Giacosa, Italy. 4.
Merck Serono International, Geneva, Switzerland
Se ha descrito que un incremento de la actividad de GSK-3 contribuye a patologas como la enfermedad de Alzheimer o la diabetes, lo
que hace interesante el estudio de inhibidores de GSK-3 como posible
terapia para estas enfermedades. Sin embargo, una inhibicin sostenida
de GSK-3 podra producir tumorognesis a travs de una desregulacin
en la ruta b-catenina-APC. Adems, la generacin de un ratn knock-out
para GSK-3b result en letalidad embrionaria debida a apoptosis masiva de hepatocitos. Como abordaje alternativo para estudiar in vivo la
inhibicin sostenida de GSK-3 evitando la letalidad embrionaria, hemos
generado recientemente ratones transgnicos con expresin condicional
(Tet-Off) de una forma dominante negativa de GSK-3 en neuronas adultas
(Gmez-Sintes et al, 2007, EMBO J in press). Dichos ratones denominados Tet/DN-GSK-3 mostraron una disminucin de actividad GSK-3 en el
estriado. Se observ una mayor incidencia de apoptosis en el estriado y
tambin en corteza. Adems, estos ratones presentan un marcado dficit
en la coordinacin motora. Por ltimo, el silenciamiento del transgn restableci la normal actividad de GSK-3 y revirti los efectos de apoptosis
y dficit motor. Estos resultados revelan la importancia de mantener ciertos niveles de actividad GSK-3 para la fisiologa y viabilidad de neuronas
adultas y advierten de la potencial toxicidad neuronal de una inhibicin
farmacolgica de GSK-3 ms all de los niveles normales. Adems, los
datos de reversin sugieren que los posibles efectos secundarios de una
inhibicin farmacolgica de GSK-3 podran revertir slo dejando de administrar el inhibidor.
SABADO 8 - COMUNICACIONES ORALES (Auditorio I, II, III A Y III B)

P2X2/NR2B: a hybrid ionotropic receptor
Supported by: Spanish Ministries of Education and Science and Health

(BFU2005-08130, FPU and BEFI)
R.J. Alves Rodrigues, A. Domingues, A.C. Rego, R. A.Cunha, J. Lerma

Instituto de Neurociencias de Alicante. CSIC-UMH, Alicante, Espana. Center for Neuroscience of Coimbra, Institute of Biochemistry,
Faculty of Medicine, University of Coimbra, Coimbra, Portugal.
In the CNS, fast signalling is achieved by activation of ligand-gated ion

channels. Interestingly, ATP and glutamate are co-released from nerve terminals [1] and P2X and NMDA receptors have an overlapping subcellular
localization in the CNS [2, 3]. Therefore, according to other precedents,
a functional interaction between P2X and ionotropic glutamate receptors would be possible. For this reason, we looked for the existence of
an interaction between P2X and NMDA receptors. HEK293 cells were
co-transfected with cDNAs encoding P2X2 and NR2B subunits, which in
the absence of NR1 do not form functional NMDA receptor channels.
In non-transfected HEK293 cells or those transfected with NR2B alone, NMDA was unable to elicit any modification in [Ca2+]i, However, in
a proportion of cells co-transfected with both subunits, NMDA elicited
[Ca2+]i transients. These NMDA-induced [Ca2+]I transients were inhibited by selective antagonists of NMDA (AP5) and P2X (PPADS) receptors. These data were further assayed by using patch clamp recordings,
from which we observed that the activation of this putative P2X2/NR2B
ionotropic receptor requires the co-application of ATP and NMDA. In
addition, P2X2 co-immunoprecipitated NR2B subunits from both cells
co-transfected with P2X2 and NR2B and mouse brain. The present study gives both functional and molecular evidences for the existence of a
hybrid P2X2/NR2B ionotropic receptor, thus indicating the existence of
ionotropic receptors composed by subunits from totally different families
of subunits, providing a new concept of receptor complex.
Eduardo D. Martn (1), Miriam Fernndez (1), Gertrudis Perea (2),

Olivier Pascual (3), Philip G. Haydon (3), Alfonso Araque (2), Valentn
Cea (1)
1Unidad Asociada Neurodeath, UCLM-CSIC, Departamento de
Ciencias M edicas, Universidad de Castilla-La Mancha, Albacete,
Spain. 2Instituto Cajal, Consejo Superior de Investigaciones Cient
ficas, Madrid, Spain. 3Department of Neuroscience, Conte Center
for Integration at the Tripartite Synapse, University of Pennsylvania
School of Medicine, Philadelphia, Pennsylvania
[1] - Pankratov Y et al., (2006) Pflugers Arch. - Eur. J. Physiol. 452: 589-597.
[2] - Pankratov Y et al. (1998) Eur. J. Neurosci. 10: 3898-3902.
[3] - Rubio ME et al. (2001) J. Neuroscience 21: 641-653

Synaptic transmission and neurodegeneration in mouse hippocampal cultures
without Cysteine String Protein-alpha
(CSP-alpha).
Pablo Garca-Junco Clemente, Pedro Linares-Clemente,

Gloria Cantero-Nieto and Rafael Fernndez-Chacn
Department of Medical Physiology and Biophysics,
School of Medicine, University of Seville, Avda. SnchezPizjun 4, 41009-Seville (Spain)
Nerve terminals continuously maintain the synaptic vesicle cycle to
drive efficient synaptic transmission. Very probably, nerve terminals are
endowed with autonomous mechanisms to overcome the use-dependent
damage of proteins. Cysteine String Protein-a (CSP- a) is a synaptic vesicle
protein that prevents presynaptic neurodegeneration. Presumably, CSPalpha functions as a co-chaperone. Mice lacking CSP-alpha present normal
synaptic transmission early after birth, but neurotransmitter release fails
at the third week of life when presynaptic terminals degenerate. In order
to understand how synaptic activity impacts the functional degeneration
of nerve terminals deprived of CSP-alpha we are studying hippocampal
neurons in two types of cultures. Low density cultures where a single
neuron only forms synapses with itself (autapses) and conventional cultures where synaptic contacts occur between multiple neurons. Autaptic
cultures lacking CSP-alpha display a robust synaptic transmission and, only
after two weeks in culture, a subtle decrease in EPSC size and no changes in spontaneous release. In contrast, conventional cultures, develop
apparently stronger alterations reflected by (i) a reduction in the size
of the recycling vesicle pool (FM4-64), (ii) a progressive decrease in the
density of synaptic punctae and (iii) a strikingly reduction in the size of
spontaneous mEPSCs after 30 days in culture. Our results indicate that,
in conventional cultures, the absence of CSP-alpha leads to a progressive
neurodegenerative phenotype comparable to the in vivo phenotype in
mice. That phenotype is ideally suited to investigate the protective role of
CSP-alpha against synaptic activity overloads.
LA LIBERACIN DE ADENOSINA POR LOS ASTROCITOS DURANTE LA HIPOXIA MODULA PRESINPTICAMENTE LA TRANSMISIN SINPTICA
Recientes estudios han identificado a los astrocitos como una importante fuente de una gran variedad de gliotransmisores capaces de
modular la transmisin sinptica. El objetivo de este trabajo ha sido investigar si la depresin de la transmisin sinptica excitadora inducida por la
hipoxia puede ser mediada por la adenosina liberada por los astrocitos.
Empleando tcnicas electrofisiolgicas en rodajas de hipocampo, se observ que la hipoxia induce una depresin transitoria de la transmisin
sinptica excitadora a travs de la activacin presinptica de receptores
A1 de adenosina. El fluorocitrato (FC), un inhibidor metablico que acta
especficamente a nivel glial, fue tan efectivo como los antagonistas de los
receptores A1 de adenosina en prevenir la reduccin de la transmisin
sinptica excitadora durante la hipoxia. Adems, el FC fue capaz de abolir
el incremento de la concentracin extracelular de adenosina durante la
hipoxia, medida con tcnicas de bioluminiscencia, en cultivos de astrocitos. Estudios realizados en rodajas de hipocampo as como en cultivos puros de astrocitos, demostraron que el incremento de los niveles
de adenosina extracelular durante la hipoxia no resulta del catabolismo
extracelular del ATP o cAMP y que los astrocitos liberan directamente adenosina en respuesta a la hipoxia. La liberacin de adenosina no
se modifica por el bloqueo de sus transportadores especficos, pero es
modulada por la concentracin externa o interna de Ca2+. Por lo tanto,
la adenosina puede considerarse un verdadero gliotransmisor capaz de
regular negativamente la actividad sinptica en condiciones de demanda
tales como la hipoxia.

POTENCIACIN DE LA TRANSMISIN SINPTICA
POR ASTROCITOS
Gertrudis Perea, Alfonso Araque
Instituto Cajal, CSIC, Madrid
El estudio de la comunicacin entre neuronas y astrocitos ha demostrado que los astrocitos responden a la actividad sinptica y modulan la
transmisin sinptica y la excitabilidad neuronal. Sin embargo, se desconoce cul es el efecto modulador de los astrocitos sobre una nica sinapsis.
Hemos investigado las consecuencias de la actividad astrocitaria sobre la
transmisin sinptica de una nica sinapsis en rodajas de hipocampo de
rata, usando tcnicas electrofisiolgicas y de imagen de Ca2+.
Hemos encontrado:
El aumento de Ca2+ en astrocitos aumenta transitoriamente la eficacia sinptica debida a un aumento de la probabilidad de liberacin de
neurotransmisor, sin afectar a la amplitud de las corrientes sinpticas.
Esta potenciacin a corto plazo es debida a la liberacin dependiente
de Ca2+ y de protenas SNARE de glutamato por astrocitos y, a la activacin de receptores metabotrpicos de glutamato de tipo I.
Adems, la coincidencia de la actividad astrocitaria y la despolarizacin postsinptica conduce a la potenciacin de larga duracin de la
transmisin sinptica.
Concluimos que los astrocitos son capaces de potenciar la transmisin sinptica, pudiendo jugar un papel activo en la transferencia de
informacin en el Sistema Nervioso.
Financiado por MEC (BFU2004-0448) y CAM (200620M083) a AA.
161
CELULAS GANGLIONARES INTRINSICAMENTE FOTOSENSIBLES: PAPEL FUNCIONAL EN LA ADAPTACIN A LA LUZ
Interaccin de seales serotoninrgicas y

noradrenrgicas en corteza prefrontal a
travs de receptores alfa1-adrenrgicos y
5-HT2A
Nuria Forns Escud, Javier Vicente Tejedor, Francisco Germain Martnez, Pedro de la Villa Polo
Departamento de Fisiologa. Universidad de Alcal. 28871 Alcal de
Henares. Madrid
Recientemente se ha descrito un nuevo tipo de clula ganglionar en
la retina de los mamferos que expresan una opsina (melanopsina), que
permite detectar energa luminosa intrnsecamente (intrinsically photosensitive Retinal Ganglion Cell, ipRGC). Aunque las ipRGC se despolarizan por efecto directo de la luz, tambin reciben un input de los fotorreceptores (conos y bastones) a travs de interneuronas retinianas. Con el
fin de determinar la posible contribucin de las ipRGC a los mecanismos
de adaptacin lumnica se han llevado a cabo una serie de experimentos
de conducta animal, registros electrorretinogrficos (ERG) y de marcaje
inmunocitoqumico en ratones controles (C57BL/6J) y ratones que sufren
una degeneracin de fotorreceptores (ratones rd). Nuestros resultados
muestran que los ratones controles son capaces de sincronizar su actividad circadiana con la luz ambiental incluso para intensidades lumnicas
de magnitud insuficiente (<10 cdm-2) como para excitar directamente
las ipRGC, demostrando la participacin de conos y bastones en la regulacin de los ritmos circadianos. En animales rd se produce una sincronizacin de la actividad circadiana con la luz, pero slo a intensidades
suficientes (>200 cdm-2) como para excitar directamente las ipRGC.
Los experimentos de ERG muestran una mayor sensibilidad lumnica para
iluminaciones >200 cdm-2, lo que implica la participacin de las ipRGC
en el mecanismo retiniano de adaptacin a la luz. El marcaje inmunocitoqumico muestra que las ipRGC establecen conexiones sinpticas con las
clulas amacrinas domaminrgicas, tradicionalmente involucradas en los
mecanismos de adaptacin lumnica, lo que de nuevo indica la participacin de las ipRGC en la adaptacin lumnica.

Papel del sistema kappa/dinorfina en el desarrollo de la tolerancia a los efectos
antinociceptivos de la nicotina
Lola Galeote, Rafael Maldonado y Fernando Berrendero
Laboratori de Neurofarmacologia, Facultat de Cincies de la Salut i
de la Vida, Universitat Pompeu Fabra, Barcelona
El objetivo del presente estudio fue analizar el papel del sistema kappa/dinorfina en el desarrollo de la tolerancia a los efectos antinociceptivos de la nicotina en ratones C57BL/6. En primer lugar, observamos que
los receptores opioides kappa participan en los efectos agudos antinociceptivos espinales de la nicotina. As, el tratamiento con el antagonista
kappa nor-binaltorfimina atenu esta respuesta nicotnica en el ensayo de
la inmersin de la cola. Mediante tcnicas autorradiogrficas se estudi
la posible existencia de cambios compensatorios en la expresin de los
receptores opioides kappa en ratones tolerantes al efecto antinociceptivo
de la nicotina. La densidad de los receptores opioides kappa disminuy en
la mdula espinal como consecuencia del tratamiento crnico con nicotina. Adems observamos la existencia de tolerancia bi-direccional entre
la nicotina y el agonista kappa U50,488H en el ensayo de la inmersin de
la cola. Este efecto no se observ en el ensayo de la placa caliente ni en
las respuestas locomotoras. Evidencias recientes indican que el aumento
en los niveles de dinorfina en la mdula espinal y la activacin posterior
de los receptores NMDA participan en el desarrollo de la tolerancia a los
efectos antinociceptivos de los cannabinoides y opioides. Sin embargo, el
contenido de dinorfina en la mdula espinal fue similar en ratones control
y tolerantes a la nicotina. La pre-administracin del antagonista NMDA
MK-801 antes de cada inyeccin de nicotina tampoco modific el desarrollo de la tolerancia al efecto antinociceptivo de la misma.
162
Noem Santana Ramos, Juan F. Lpez-Gimnez*, Graeme Milligan*,

Guadalupe Mengod, Francesc Artigas
Departamento de Neuroqumica y Neurofarmacologa, Institut
dInvestigacions Biomdiques de Barcelona, CSIC, IDIBAPS. *Division of Biochemistry and Molecular Biology, Institute of Biomedical
and Life Sciences, University of Glasgow, Glasgow, UK
La corteza prefrontal (CPF) est implicada en gran nmero de funciones cerebrales superiores. Las neuronas serotoninrgicas y noradrenrgicas que proyectan a CPF modulan la actividad de neuronas corticales a
travs de diversos receptores, incluyendo los a1-adrenrgicos y 5-HT2A
serotoninrgicos. Ambos pertenecen a la superfamilia de receptores acoplados a protenas G, estn acoplados a la subunidad a de la protena
Gq/11 y su estimulacin aumenta los niveles de Ca2+ intracelular por
activacin de la va de la fosfolipasa C. El inters en el estudio de las interacciones entre ambos receptores reside en que frmacos antipsicticos
poseen alta afinidad por uno o ambos tipos de receptores. Por otra parte,
los efectos de agonistas 5-HT2A pueden ser revertidos por antagonistas a1-adrenrgicos, lo que sugiere una estrecha relacin funcional entre
ambos.
Para examinar dicha posible interaccin, hemos estudiado su localizacin celular en de CPF de rata. Ambos receptores estn expresados
en neuronas piramidales y GABArgicas y presentan un muy alto grado
(~80%) de co-expresin en corteza cingulada y prelmbica. Estudios de
co-inmunoprecipitacin del receptor 5-HT2A con cada uno de los tres
subtipos del receptor a1-adrenrgico (1a, 1b y 1d), expresados heterlogamente en clulas HEK293T, revelan la capacidad de dimerizar de stos
dos tipos de receptores, aspecto sugerido tambin por estudios de FRET
(fluorescence resonance energy transfer). La presencia de ambos receptores en las misma neuronas neuronas corticales y la formacin de heterodmeros puede explicar las interacciones funcionales existentes, quizs
a travs de mecanismos de modulacin alostrica cruzada (off-target).

Full-length mutant huntingtin expression modifies the susceptibility of striatal
cells to dopamine inputs in the presence of
NMDA receptor activation
Paola Paoletti Rubia, Maria Rif, Xavier Xifr, Jordi Alberch, Silvia
Gins
Facultat de Medicina - Universitat de Barcelona. Fundaci Clnic
- IDIBAPS. HiQ Foundation
Huntingtons disease (HD) is a progressive neurological disorder characterized by involuntary movements and progressive cognitive decline.
Clinical symptoms reflect dysfunction and death of neurons in specific
brain regions. The most vulnerable neurons to degenerate are the medium spiny GABAergic neurons in the striatum. The two major inputs
that these neurons receive are glutamatergic projections from the cortex
and dopaminergic projections from the substancia nigra pars compacta.
Under physiological conditions there is a delicate balance between glutamatergic and dopaminergic systems that, if disturbed, may have fatal consequences. Given the evidence of dopamine receptor abnormalities and
altered dopamine transmission in HD, and the important role of the dopaminergic system in the control of motor function, dopamine could contribute to striatal vulnerability in HD. Thus, we hypothesized that mutant
huntingtin may alter the sensitivity of striatal cells to dopamine inputs and
contribute to enhance NMDA-mediated excitotoxicity in HD. To confirm
our hypothesis we studied the potential crosstalk between glutamatergic and dopaminergic signalling in HD knock-in striatal cells that express
full-length wild type or mutant huntingtin. Wild-type and mutant striatal
cells were treated with glutamate and dopamine receptor agonists and
cell death was analyzed by Hoechst staining. The results obtained clearly demonstrate that full-length mutant huntingtin expression increases
the susceptibility of striatal cells to dopamine inputs in the presence of

NMDA receptor activation. Moreover, the dopamine effect on cell survival was mediated specifically through D1 receptor since quinpirole, a D2
receptor agonist, did not produce any cell death either in wild-type or
mutant striatal cells.
Martin and Gusella 1986
De la Monte et al 1998
Graveland et al 1985
Jakel et al 2000

Estudio de la transmisin noradrenrgica
y serotonrgica en SNC de rata mediante
microdilisis cerebral in vivo tras tratamiento crnico con el antidepresivo mirtazapina.
Jorge E. Ortega, Igor Horrillo, J. Javier Meana.
Departamento de Farmacologa. Universidad del Pas Vasco/Euskal
Herriko Unibertsitatea. Leioa (Bizkaia).
La desensibilizacin de los adrenoceptores alfa-2 puede ser un mecanismo necesario para la eficacia clnica de los antidepresivos. La mirtazapina es un frmaco antidepresivo antagonista de los adrenoceptores
alfa-2, serotonrgicos 5-HT2, 5-HT3 e histaminrgicos H1 que no interacciona con los transportadores para monoaminas. El objetivo de este
trabajo fue estudiar mediante microdilisis cerebral la respuesta funcional
de los adrenoceptores alfa-2 tras la administracin del antagonista alfa-2
RS79948 (1 mg/kg i.p.), en ratas tratadas con mirtazapina (10 mg/kg i.p.;
14 das, washout 48 h), midiendo la concentracin extracelular de NA y
5-HT en locus coeruleus (LC) y corteza prefrontal (CPF). La administracin de RS79948 indujo incrementos de NA y 5-HT en LC, tanto en ratas
tratadas como en controles sin diferencias significativas entre ellos. La
administracin de RS79948 indujo un incremento de NA en CPF de ratas control (Emax=563158%) mayor que en tratadas (Emax=25748%),
(p=0,002; n=12). En CPF se observ un mayor incremento de 5-HT en
ratas tratadas (Emax=618374%) que en sus respectivos controles (Emax
=11515%); (P=0,0044; n=12). El tratamiento crnico con mirtazapina
induce la desensibilizacin de los adrenoceptores alfa-2 localizados en
CPF y que regulan la liberacin de NA as como de los adrenoceptores
alfa-2 de reas terminales noradrenrgicas que inervan ncleos serotonrgicos, favoreciendo de esta manera el control tnico excitatorio mediado por los adrenoceptores alfa-1 sobre las neuronas serotonrgicas
en estas reas.
MSC (REM-TAP), DIPE 06/04, MCyT/MEC (SAF 01/0553, SAF
04/02784) y FEDER. JEO e IH son becarios del MEC y UPV/EHU, respectivamente.

CAMBIOS EN LA RED CAPILAR DEL NERVIO PTICO EN UN MODELO EXPERIMENTAL DE HIPERTENSIN OCULAR Y TRAS LA APLICACIN DE FRMACOS HIPOTENSORES.
Daz F, Garca-Campos J,Villena A, Moreno M,Vidal L, Prez de Vargas I
Dpto Histologa y Anatoma Patolgica y Dpto .de Oftalmologa.
Facultad de Medicina. Universidad de Mlaga
El glaucoma es una neuropata ptica progresiva que origina muerte
de las clulas ganglionares de la retina, alteraciones de la circulacin en
la cabeza del nervio ptico (CNO) y prdida progresiva de la visin. Se
considera como uno de los principales factores de riesgo la elevacin de
la presin intraocular (PIO). En este estudio se analizan los cambios en la
red capilar del nervio ptico de ratas sometidas a elevacin crnica de
la PIO y despus del tratamiento con dos drogas hipotensoras -timolol
y latanoprost-. Se han utilizado ratas machos Wistar divididas en cuatro
grupos: control; experimental, con PIO elevada y tratados con un -bloqueante, timolol y una prostaglandina, latanoprost, respectivamente. Los
capilares fueron marcados inmunohistoqumicamente con el anticuerpo
policlonal GLUT-1 y analizados diversos parmetros en las regiones prelaminar, laminar y postlaminar de la CNO y en el propio nervio ptico.
Se demuestra que la densidad capilar disminuye, significativamente, en el
grupo experimental en todas las regiones excepto en la regin prelaminar.
Asimismo disminuyen la fraccin de volumen y la superficie y longitud

total por unidad de volumen, principalmente en las regiones laminar y
postlaminar. En los grupos tratados no existen cambios en la regin prelaminar. En las dems regiones se observa que aumentan todos los parmetros respecto al grupo experimental. Concluimos que la PIO elevada
provoca cambios en la red capilar de la CNO. Los frmacos hipotensores
utilizados si bien no modifican la densidad capilar, podran mejorar parcialmente la funcin capilar en las regiones laminar y postlaminar.
Bakalash S et al (2002) Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.43,2648-2653.
Garca-Valenzuela E et al.(1995) Exp.Eye Res.61,33-44.
Moore CG et al. (1993) Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.34,363-369.
Shareef SR et al. (1995) Exp.Eye Res.61,379-382.
Zimmerman TJ (1993) J.Ocul.Pharmacol.9,373-384.

Los antipsicticos revierten las alteraciones corticales inducidas por el bloqueo
del receptor NMDA con fenciclidina.
Lucila Kargieman, Noemi Santana, Guadalupe Mengod, Pau Celada
y Francesc Artigas.
Departamento de Neuroqumica y Neurofarmacologa, Institut
dInvestigacions Biomdiques de Barcelona (CSIC), IDIBAPS, 08036
Barcelona,
Los dficits cognitivos en pacientes esquizofrnicos estn asociados
con alteraciones de la corteza prefrontal (CPF) si bien los circuitos y
mecanismos neuronales implicados son poco conocidos. Los antagonistas
del receptor NMDA (R-NMDA) son usados como modelo farmacolgico
de esquizofrenia por su capacidad de provocar sntomas positivos, negativos y cognitivos similares a los de esta enfermedad. Los dficits cognitivos
son de particular inters ya que una mejora rpida en la funcin cognitiva
tras el inicio de un tratamiento antipsictico predice una evolucin favorable de la enfermedad.
En este estudio mostramos que el antagonista no competitivo del
R-NMDA fenciclidina (PCP) provoca una marcada alteracin de la actividad de la CPF en ratas, aumentando la actividad del 45% de las neuronas
piramidales registradas y disminuyendo la actividad del 33%. Asimismo la
PCP reduce la sincrona cortical en el ritmo delta (0.3-4 Hz). La administracin de los frmacos antipsicticos clozapina y haloperidol revierte el
aumento de actividad y la supresin de la sincrona cortical inducidos por
PCP. Paralelamente, la PCP aumenta la expresin de c-fos en las neuronas
piramidales de la CPF (vGluT1+), efecto antagonizado por clozapina. La
PCP aumenta tambin la expresin de c-fos en los ncleos centromedial
y mediodorsal del tlamo, pero no en el hipocampo. Estos resultados indican que a) la CPF juega un papel importante en la generacin de los sntomas psicmimticos inducidos por la PCP y b) los frmacos antipsicticos
ejercen su efecto teraputico normalizando la actividad cortical, efecto
que se aadira al ejercido por el bloqueo dopaminrgico subcortical.

LA D-SERINA EN EL REA TEGMENTAL VENTRAL
PARTICIPA EN EL DESARROLLO DE LA SENSIBILIZACIN A LA COCANA
Emilio Fernandez Espejo, Susana Ramiro-Fuentes, Roco MorenoPaublete
Departamento de Fisiologa Mdica, Universidad de Sevilla, 41009
Sevilla
La administracin repetida a la cocana da lugar a sensibilizacin motora que, en el rea tegmental ventral (ATV), se asocia a un aumento en
la liberacin de glutamato, lo cual incrementa los niveles de calcio en las
neuronas de dopamina. La D-serina del ATV podra participar en dichos
efectos, y el objetivo fue discernir su tras un rgimen sensibilizador de
cocana, y estudiar los cambios consecuentes en CaMKII.
Con este fin, D-serina, benzoato de sodio (inhibidor de DAO, enzima que degrada D-serina), y 7-clorokinurenato (inhibidor de receptores
NMDA) se inyectaron en el ATV (en las fases de induccin o de expresin
de la sensibilizacin), y el estado de CaMKII se analiz mediante inmunoblot. La administracin de D-serina en el ATV (5 mM) y de benzoato
163
de sodio (100 y 200 g/L) durante la fase de induccin (no expresin)

aument la sensibilizacin a cocana, sugiriendo que la D-serina del ATV
participa en el inicio de la sensibilizacin a esta droga psicoestimulante.
Las infusiones de D-serina, benzoato de sodio y 7-clorokinurenato no
indujeron efectos motores per se. Confirmando la importancia de los
receptores NMDA, el empleo de 7-clorokinurenato (2 y 5 g/L) bloque el desarrollo de sensibilizacin. La CaMKII en el ATV participaba en
dichos efectos, porque se activa tras tratamiento repetido con cocana,
se activ an ms tras D-serina o benzoato de sodio, y su activacin se
regul a la baja con 7-clorokinurenato.
Financiado a EFE por FIS (PI051493), Plan Andaluz de Investigacion (CVI127), RED de trastornos adictivos (RD06/0001), y PNSD
(3SI/05/14).
16:00 a 16:15 en la sala Auditorio 3A (sesin: 3B)

Relacin entre la actividad metablica
y la respuesta neuronal en el Ncleo Geniculado Lateral dorsal (NGLd) del gato
anestesiado
Carmen De Labra Pinedo, Casto Rivadulla, Nelson Espinosa, Kenneth Grieve and Javier Cudeiro.
La activacin neuronal en una regin del cerebro provoca un incremento del flujo sanguneo local para suministrar oxgeno a las clulas
activas. Aunque esta unin neurovasculas se utiliza habitualmente para
monitorizar la funcin cerebral, las propiedades y mecanismos subyacentes son todava desconocidos. Hemos investigado esta relacin realizando, simultneamente, registros extracelulares de neuronas invdividuales y
anlisis espectrofotomtrico de la concentracin de oxyhemoglobina en
el NGL del gato.
La presentacin del estmulo visual aument los niveles de oxihemoglobina hasta un 30%. Este incremento se relacion con la respuesta
neuronal y mostr varias propiedades interesantes:
1- Dominio temporal: El aumento en los niveles de oxihemoglobina
empez 4seg despus de la respuesta neuronal, alcanz su pico a los
10seg y mostr una evolucin lenta, no acompaada por una disminucin
de la respuesta neuronal. Al finalizar el estmulo el 30% de los registros
mostraron una cada con respecto a los niveles iniciales.
2- Amplitud: A diferencia de la respuesta neuronal que mostr una
rpida saturacin del contraste, los niveles de oxihemoglobina mostraron
una relacin lineal con el estmulo. El hecho de que la respuesta neuronal alcanzase un mximo y la vascular no, sugiere que la saturacin del
contraste es un proceso activo que requiere la activacin de circuitos
neuronales especficos no detectables mediante registros extracelulares
pero s detectables a nivel del consumo de oxgeno.
Estos resultados muestran diferencias entre los mecanismos reguladores de la respuesta neuronal y vascular que podran ser relevantes para
los estudios de fMRI.

Una oscilacin muy lenta (0.15Hz) de los niveles de oxihemoglobina en el Ncleo Geniculado Lateral dorsal (NGLd) del gato
anestesiado
Casto Rivadulla Fernndez, Carmen de Labra, Nelson Espinosa,
Kenneth Grieve(1) and Javier Cudeiro
Grupo de Neurociencia y Control Motor (NEUROcom), Universidad de A Corua. (1)Faculty of Life Sciences, University of Manchester
La contraccin/relajacin espontnea de las arterias ha sido observada en una amplia variedad de tejidos y especies. Aunque se acepta la
existencia de variaciones rtmicas en el flujo sanguneo con una frecuencia
oscilatoria media de 6-11 por minuto, poco se sabe sobre los mecanismos
responsables de este fenmeno, sus caractersticas y su significado funcional. Utilizando las variaciones en los niveles de oxihemoglobina medidos
espectofotometra como un indicador de la motilidad vascular, estudiamos las variaciones de la microvasculatura talmica del gato anestesiado
164
(isofluorano/alfa-cloralosa) durante actividad espontnea y evocada por

estimulacin visual, correlacionndola con la actividad neuronal. Durante anestesia con isofluorano, un 35% de los registros mostr motilidad
vascular (frecuencia oscilatoria media de 0.16Hz). La estimulacin visual
evoc respuestas celulares normales, interrumpi la oscilacin de los vasos e increment los niveles de oxihemoglobina de forma similar a los
periodos de no movimiento vascular.
Durante anestesia con cloralosa el 100% de los registros mostr
oscilacin de los vasos, apareciendo 30min despus de la inyeccin y con
mximo efecto a las 2h. El pico de frecuencia fue de 0.14Hz y se observ
una disminucin en los niveles basales de oxihemoglobina (41%). Durante
este periodo las clulas dispararon en rfagas, y ni los niveles de oxihemoglobina ni la motilidad vascular variaron durante la estimulacin visual.
Esto sugiere la existencia de un mecanismo de movimiento vascular
relacionado con los receptores GABA que podra tener implicaciones
importantes en los protocolos de anestesia utilizados para el estudio de
las respuestas neuronales.
Financiado por: MEC BFU2005-00502

Codificacin de frecuencia espacial en el
crtex temporal
Francisco Gonzalez Garcia, Maria C Romero, Maria A Bermudez,
Rogelio Perez
Departamento de Fisiologia, Facultad de Medicina, Universidad de
Santiago de Compostela.
El cortex temporal es uno de los niveles ms altos del procesamiento
de la informacin visual. En esta zona se han descrito respuestas celulares
a estmulos complejos y se piensa que es un rea involucrada en el reconocimiento de objetos y caras (Perret et al., 1982). Hemos registrado las
respuestas de 40 clulas en el crtex temporal de un mono rhesus a la
presentacin aleatoria de 6 imgenes de caras diferentes. Tres caras estaban asociadas a una recompensa y otras tres no. El animal tena que pulsar
una palanca cuando apareca una de las tres caras asociadas a la recompensa para recibir una gota de agua. La mayor parte de las clulas (72%)
respondieron a tres o ms caras, pero sin relacin con la recompensa y
con diferente intensidad de respuesta para cada una. Mediante una trasformada rpida de Fourier (FFT) hemos calculado la potencia espectral
de las frecuencias espaciales de cada imagen y hemos observado que la
intensidad de la respuesta celular estaba en relacin con el componente
de frecuencias espaciales de las imgenes. Aproximadamente un 60% de
clulas mostraron una correlacin estadsticamente significativa (p<0.05)
con bajas, medias o altas frecuencias espaciales. Nuestros resultados preliminares apoyan la idea de que el filtrado de frecuencias espaciales que
se produce en el sistema visual (De Valois y De Valois, 1988) es mantenido
en areas con un nivel jerrquico alto, y que posiblemente se utilice para
el reconocimiento de formas. Agradecimientos: MEyC BFU2004-01839
y FEDER.
Perrett DI et al. (1982) Exp Brain Res 47: 329342, 1982.
De Valois RL, De Valois KK (1988) Spatial Vision. New York. Oxford Univ Press.

Modulacin colinrgica del disparo repetitivo de las motoneuronas del ncleo
motor ocular comn de la rata, un estudio en preparaciones de rodajas in vitro
Jose Luis Nieto Gonzlez, Livia Carrascal, Pedro Nez Abades,
Blas Torres
Dpto Fisiologa y Zoologa. Univ Sevilla
Una pregunta bsica en neurofisiologa es cmo las motoneuronas
(Mns) procesan las seales sinpticas para generar las propiedades repetitivas de disparo. Estudios recientes sugieren que las entradas colinrgicas,
va receptores muscarnicos y nicotnicos, podran modificar la excitabilidad neuronal. El objetivo de este trabajo fue evaluar esta hiptesis en las
Mns del ncleo motor ocular comn de la rata, estudiando las propiedades de disparo repetitivo en presencia de agonistas y antagonistas colinrgicos en preparaciones in vitro. Los resultados obtenidos se resumen
a continuacin: a) todas las Mns responden ante un agonista colinrgico

(carbacol) con una despolarizacin en el potencial de membrana y con la
generacin de un disparo sostenido de potenciales de accin; b) el umbral
de disparo decreci con la activacin colinrgica; c) las Mns en presencia
de carbacol mostraron una mayor frecuencia de disparo que las controles
en respuesta a la inyeccin de corriente, que curs con una disminucin
en la fase de posthiperpolarizacin del potencial de accin; y d) ensayos
electrofisiolgicos e inmunohistoqumicos indican que la principal familia
de receptores implicados en las respuestas registradas es muscarnica, y
en particular el receptor de tipo M1. Estos datos sugieren que la activacin de los receptores colinrgicos en estas Mns podra llevar a cabo una
funcin fisiolgica dual: por un lado, su despolarizacin y, por otro lado, el
aumento en la excitabilidad de las Mns mediado por vas de modulacin
de las conductancias implicadas en las propiedades de disparo repetitivo.
Estudio subvencionado con una ayuda del MEC (BFU 2006-08895).
incluyendo un grupo control. Los datos estereolgicos mostraron un

incremento exponencial significativo de neuronas inmunorreactivas hasta
los 6 meses postlesin, en todas las subdivisiones del CI bilateralmente. El
aumento mayor se detect en la CD, siguiendo en orden descendente la
CE y el NC. Para el estudio de RT-PCR se procesaron 3 controles y dos
grupos de 3 animales lesionados (95 y 180 das post -lesin) evaluando
los cambios producidos en las subunidades de los receptores postsinpticos de glutamato ionotrpicos (AMPA, NMDA y Kainatos). Observando
a los 3 meses postlesin con respecto a los controles, una prdida de
expresin de distintas subunidades mientras que en el grupo de 6 meses
se observ una recuperacin de estas subunidades perdidas. Los datos
procedentes del estudio de PPI mostraron la falta de discriminacin de
las frecuencias analizadas y la total recuperacin de sus propiedades a
los 180d.
Potashner y col., 1995; Lee y col., 1996; Saldaa y col., 1996; Merchn y col., 1995
Cambios en la actividad del ncleo subtalmico (NST) con la observacin de un movimiento

Manuel Alegre Esteban, Miguel Valencia, Marta Prez-Alczar,
M.Jess Nicols, M. Cruz Rodrguez-Oroz, Jorge Guridi, Jos A. Obeso,
Julio Artieda
Area de Neurociencias, Centro de Investigacin Mdica Aplicada,
Universidad de Navarra
Introduccin. La realizacin de un movimiento voluntario se acompaa
de cambios en la actividad oscilatoria en paralelo a nivel cortical y subcortical. En el NST se ha descrito una atenuacin de la actividad beta (1530Hz) y un incremento de la actividad gamma (60-90Hz) en relacin con
movimientos balsticos. A nivel cortical, la observacin de un movimiento
se acompaa de cambios similares a los de la ejecucin, fenmeno probablemente mediado por la activacin del sistema de neuronas en espejo.
Nuestro objetivo fue estudiar los cambios en el NST en relacin con la
observacin de un movimiento.
Material/Mtodos. Se estudi a 11 pacientes con enfermedad de Parkinson, registrndose bipolarmente potenciales de campo a travs de los
electrodos implantados para tratar la enfermedad mediante estimulacin
cerebral profunda. Se analizaron los cambios en el NST en tres condiciones: movimiento, observacin de movimiento y observacin de un
estmulo visual simple. El anlisis de los cambios en distintas bandas de
frecuencia fue realizado mediante transformadas tiempo-frecuencia.
Resultados. La observacin del movimiento (pero no la del estmulo
visual simple) se acompa de una atenuacin de la actividad beta en el
NST de menor amplitud y duracin a la observada durante el movimiento
voluntario. No se constataron cambios en la actividad gamma durante la
observacin del movimiento o del estmulo simple.
Conclusiones. La observacin de un movimiento se acompaa de cambios en la actividad del NST. Estos cambios nicamente representan una
parte de los observados durante la ejecucin de ese mismo movimiento
(menor atenuacin beta sin cambios gamma).
1. M Alegre et al. Eur J Neurosci 2005; 22: 2315-2324
2. S Cochin et al. Eur J Neurosci 1999; 11: 1839-1842
3. F Alonso-Frech et al. Brain 2006; 129: 1748-1757

Cambios en el Coliculo Inferior (CI) tras
ablacin cortical auditiva unilateral:
estudio inmunocitoqumico y de biologa
molecular
C. Clarkson, J. Herrero, M.D. Lopez y M. Merchn
Instituto de Neurociencias de Castilla y Len
La proyeccin descendente de la corteza auditiva al CI utiliza como
neurotransmisor el Glutamato (Potashner, 1995) y es densa, bilateral,
simtrica y topogrficamente organizada, distribuyndose en sus tres
subdivisiones. En 27 ratas Wistar (260 gr) se aspir, bajo control estereotxico y unilateralmente la CA. En todos ellos se midi el reflejo de
sobresalto (Lee y col., 1996) previo a la ciruga y a la perfusin.
Los animales (n=4 por grupo) se sacrificaron a los 15, 95 y 180 das
utilizando la tincin inmunocitoqumica de Cr para anlisis estereolgico,

Modulacin de la respuesta a estmulos
tctiles en el ncleo gracil ante la estimulacin elctrica de la corteza somatosensorial primaria
Nazareth P. Castellanos (1), Eduardo Malmierca (2), Angel Nuez
(2), y Valeri A. Makarov (3)
1) Instituto Pluridisciplinar, Universidad Complutense de Madrid, Paseo Juan XXIII, 1, 28040 Madrid. 2) Dept. de Anatoma Histologa
y Neurociencia, Facultad de Medicina, Universidad Autnoma de
Madrid, c. Arzobispo Morcillo s/n, 28039 Madrid. 3) Dept. De
Matemtica Aplicada, Escuela de ptica, Universidad Complutense
de Madrid, Avda. Arcos de Jaln s/n, 28037 Madrid.
El SNC recibe y procesa constantemente informacin que le llega
del entorno. Los estmulos tctiles se codifican en forma de patrones
espacio-temporales de pulsos elctricos que se transmiten por las fibras
nerviosas hasta los ncleos del cordn posterior (NCP). Las neuronas
de los NCP reciben adems una importante proyeccin desde la corteza
somestsica primaria (SI), ejerciendo un control selectivo sobre la transmisin somato-sensorial en el NCP. La corteza modula las respuestas a
estmulos somestsicos en los NCP, siendo capaz de aumentar la agudeza
de la percepcin. Se ha demostrado que la activacin de SI aumenta la
respuesta a estmulos tctiles en los NCP con su mismo campo receptivo. Para caracterizar dinmicamente dichos cambios proponemos el uso
de la coherencia basada en la transformada wavelet, que nos permite
estudiar simultneamente tanto en el dominio de frecuencias como en el
de tiempo la correlacin entre los estmulos tctiles y el tren de disparo neuronal (coherencia) antes y despus de estimular elctricamente la
corteza SI de la rata. Con este mtodo demostramos que la activacin de
SI, en reas con campos receptivos coincidentes con las neuronas de los
NCP, no slo aumenta el nmero de espigas/estmulo, sino que aumenta
tambin la coherencia de la respuesta a los estmulos tctiles. Permite
adems evaluar los cambios a lo largo del periodo de estimulacin tctil,
con lo que hemos objetivado la presencia de oscilaciones de muy baja
frecuencia en la coherencia.
Financiado por: BFU2005-07486. 2005 y Santander-Complutense
PR41/06-15058.

Conectividad funcional y potenciacin a
largo plazo (LTP): un estudio simultneo
de fMRI, electrofisiologa y microestimulacin elctrica del hipocampo
Santiago Canals Gamoneda, Oxana Eschenko, Nikos K. Logothetis
Max Planck Institute for Biological Cybernetics. Tuebingen, Germany
La estimulacin repetida de las neuronas del hipocampo induce un
aumento inmediato y prolongado de la fuerza sinptica, al que denominamos LTP (long-term potentiation). La LTP representa el principal modelo
celular de aprendizaje asociativo y memoria. A pesar de la importancia de
este fenmeno y de todo lo aprendido en las ltimas dcadas sobre sus
mecanismos celulares y moleculares, poco sabemos sobre su relevancia
165
en la estructura o conectividad funcional del cerebro en conjunto. Afecta

la modificacin de los pesos sinpticos en el hipocampo a la distribucin
de informacin en la corteza cerebral o a la comunicacin del hipocampo
con estructuras subcorticales? Que repercusin tiene, si alguna, en la representacin de estmulos sensoriales?
La presente investigacin representa el primer estudio de resonancia magntica funcional (fMRI) sobre potenciacin sinptica a largo plazo
(LTP) en el hipocampo. Para realizarlo ha sido necesario combinar, por
primera vez de forma simultnea, tcnicas de microestimulacin elctrica intracerebral, registro electrofisiolgico y fMRI en la rata. Aplicando
protocolos clsicos de estimulacin elctrica en las principales vas de
entrada y salida del hipocampo (va perforante, va asociativa comisural y
subculo ventral), hemos elaborado mapas funcionales del cerebro completo antes, durante y despus de la induccin de la LTP que demuestran
modificaciones en la conectividad funcional del cerebro fruto de la potenciacin sinptica. Nuestros resultados muestran adems que los mapas
de potenciacin obtenidos son heterogneos en magnitud, aprecindose
diferencias entre las distintas reas hipocmpicas y extrahipocmpicas y
que la comunicacin interhemisfrica se potencia tras la LTP. Este modelo
(BOLD-LTP) nos permitir estudiar el intercambio de informacin entre
el hipocampo, la corteza cerebral y estructuras subcorticales, aportando
nuevos datos a la comprensin de los fenmenos de aprendizaje y memoria.
16:00 a 16:15 en la sala Auditorio 3B (sesin: 4B)

APLICACIONES DE LOS POTENCIALES RELACIONADOS CON EVENTOS AL ESTUDIO DE FUNCIONES COGNITIVAS: PROCESAMIENTO DEL LENGUAJE EN SUJETOS SANOS Y AFSICOS CRNICOS
J.P. Lara (1), M.A. Barbancho (1), C. Montes (1), M. Berthier (2), C. Green(2),
M.S. Dawid-Milner (1), F. Pulvermller (3), S. Gonzlez-Barn (1)
1) Unidad de Neurofisiologa Cognitiva. 2) Unidad de Neurologa
Cognitiva. Centro de Investigaciones Mdico-Sanitarias. Universidad
de Mlaga. 3) MRC Cognition and Brain Sciences Unit. University
of Cambridge
Son cada vez ms numerosos los estudios con potenciales relacionados con eventos (ERPs) orientados a analizar diversos aspectos del
lenguaje. Sin embargo, no estn an bien definidos los mtodos ms adecuados para su estudio ni sus patrones de normalidad. Este trabajo presenta un protocolo de evaluacin mediante ERPs que muestra activaciones secuenciales de sistemas neuronales en el procesamiento cortical del
lenguaje tanto en sujetos sanos como en pacientes afsicos crnicos.
El estudio se realiz en 15 sujetos sanos (44 5 aos de edad) y 15
pacientes afsicos crnicos post-ictus (47 8 aos de edad) que tenan
que realizar una tarea de lectura de palabras y pseudopalabras (400 estmulos controlados en longitud y frecuencia de uso, presentados de forma
aleatoria; STIM 2.0 de Neuroscan). Se obtuvieron EEG continuo (SI 1020), ERPs y cartografa cerebral (SCAN 4.1 de NeuroScan).
Los ERPs y la cartografa cerebral mostraron diferencias significativas entre los sujetos sanos y los pacientes afsicos a latencias post-stimulus de 120-140 ms (onda negativa), 220-270 ms (onda positiva), 280-310
ms (onda positiva) y 400-470 ms (onda negativa) incluyendo diferencias
en la amplitud y la topografa de la actividad electrocortical. Se realiz
estudio comparativo de las diferentes categoras de estmulos para los
dos grupos estudiados.
El protocolo con ERPs empleado caracteriz diferentes patrones de
actividad cortical en sujetos sanos y afsicos crnicos durante el procesamiento del lenguaje. Su aplicacin puede ser de gran inters para
conocer mejor aspectos clnicos de la afasia como su severidad, evolucin
o respuesta al tratamiento.
Berthier ML et al. Neurology, 2006
Berthier ML. Drugs Aging, 2005
Lara JP et al. Rev Neurol, 2007
Lara JP et al. Rev Neurol, 2005
Pulvermller F et al. Cereb Cortex, 2007
Pulvermller F et al. Neuropshychologia, 2007
Pulvermller F et al. Prog Neurobiology, 2006
166

LA ESTIMULACIN ELCTRICA DE LA CORTEZA
PREFRONTAL ROSTRO-MEDIAL INHIBE EL REFLEJO
CORNEAL Y LA EXPRESIN DE RESPUESTAS PALPEBRALES APRENDIDAS, PERO NO SU ADQUISICIN
Rocio LEAL CAMPANARIO (1), Alfonso Fiaren (2), Jos M. Delgado-Garca (1) y Agns Gruart (1)
(1) Divisin de Neurociencias, Universidad Pablo de Olavide, Sevilla.
(2) Instituto de Neurociencias, CSIC, Alicante
Se estudiaron los efectos de la estimulacin elctrica de la regin
medial derecha de la corteza prefrontal (CPFmd) durante un aprendizaje
asociativo en conejos despiertos. Se us un paradigma de demora en el
que el estmulo condicionado (EC) consisti en un tono de 370 ms y el
estmulo incondicionado (EI) fue un soplo de aire de 100 ms de duracin
dirigido hacia la crnea del ojo izquierdo. Ambos estmulos terminaron al
mismo tiempo. El estmulo elctrico fue un tren de alta frecuencia (200
Hercios) aplicado en la CPFmd que produjo una inhibicin significativa de
la respuesta refleja inducida por el soplo de aire. Cuando se estimul la
CPFmd con el mismo tren de alta frecuencia, presentado en el intervalo
EC-EI, se redujo significativamente la generacin de respuestas condicionadas (RCs) en comparacin con los valores alcanzados por los animales
control. Sin embargo, el porcentaje de RCs casi alcanz los valores del grupo control cuando el estmulo de alta frecuencia se suprimi a partir de la
5 sesin de condicionamiento. La estimulacin elctrica de la CPFmd, en
animales previamente condicionados, produjo una reduccin significativa
del porcentaje de RCs. La estimulacin elctrica de la CPFmd fue tambin
capaz de modificar las propiedades cinemticas (latencia, amplitud) de las
RCs obtenidas. Estos resultados sugieren que la estimulacin elctrica de
la CPFmd es un potente inhibidor de las respuesta palpebrales reflejas as
como de las RCs palpebrales, pero no inhibe su adquisicin. El mecanismo descrito puede formar parte del comportamiento de congelamiento
tpico de esta especie.

NUEVO MODELO DE MONITORIZACIN DE LOS POTENCIALES EVOCADOS MOTORES SIN ANESTESIA
EN LA ENCEFALOPATA HEPTICA EXPERIMENTAL
Marc Oria, Nria Raguer, Nicolas Chatauret, Juan Crdoba
Servicio de Medicina Interna-Hepatologa. Hospital Universitario
Vall dHebron
Introduccin: La encefalopata heptica es una complicacin grave de
la insuficiencia heptica, que se precipita por hemorragia digestiva. Las
manifestaciones neurolgicas incluyen alteraciones funcionales de la va
motora.
Objetivos: Crear un modelo experimental sin anestesia para monitorizar la funcin de la va motora central, que pueda reproducir las alteraciones de la encefalopata heptica.
Material y mtodos: Se desarroll un modelo en ratas que permite medir los potenciales evocados motores (PEM). Se implantaron seis
electrodos subcutneos y un tornillo craneal. Se registraron los PEM en
el msculo tibial anterior tras estimulacin transcranial y se compararon
con los obtenidos tras estimulacin del nervio citico. Se evaluaron los
efectos de anestsicos (propofol, ketamina/xylazina, pentobarbital) en ratas normales y el efecto de la hemorragia digestiva (administracin de
sangre bovina en duodeno) en ratas con anastomosis portocava (APC).
Resultados: A) Los electrodos fueron bien tolerados y se consiguieron registros estables durante 3 semanas. B) Los tres anestsicos inhibieron de forma dosis dependiente la amplitud y la latencia de los PEM. C)
La hemorragia digestiva en ratas APC inhibi la latencia y la amplitud de
los PEM, que se normalizaron a las 24 horas.
Conclusiones: Se ha desarrollado un nuevo modelo que permite el
estudio neurofisiolgico del tracto motor sin necesidad de anestsicos.
Este modelo reproduce las alteraciones de la va motora de la encefalopata heptica. El nuevo modelo puede ser muy til para investigar los
efectos de nuevos tratamientos para la encefalopata heptica y para otras
formas de lesin espinal.

El papel funcional de la sincronizacin en

frecuencias del rango gamma entre reas
corticales durante tareas de atencin selectiva
TrkC as a possible interface for the coocurrence of panic disorder an substance

abuse as revealed by a mouse model of panic disorder
Salva Ardid, Xiao-Jing Wang, Albert Compte

Institut dInvestigacions Biomdiques August Pi i Sunyer (IDIBAPS),
08036 Barcelona, Espaa. Department of Neurobiology and Kavli
Institute for Neuroscience, Yale University School of Medicine,
06510 New Haven CT, EE.UU.
Gallego, X. (1), Murtra, P. (2), Zamalloa,T. (3), Pineda, J. (3), Maldonado,

R. (2), Dierssen, M. (1)
1. Centre de Regulaci Genmica, Barcelona (Spain), 2. Laboratori de Neurofarmacologia, Universitat Pompeu Fabra, Barcelona
(Spain). 3. Departamento de Farmacologa, Universidad del Pas
Vasco, Vizcaya, (Spain)
Datos neurofisiolgicos relacionan funciones cognitivas con oscilaciones en la actividad neuronal dentro del rango gamma de frecuencias (3080 Hz). En tareas de atencin, el espectro de potencias de la actividad en
reas visuales aumenta en el rango gamma en ensayos exitosos [1,2]. No
obstante, se desconocen los mecanismos responsables. Abordamos este
problema mediante un modelo biofsico de dos microcircuitos corticales.
El primero representa un circuito visual, que recibe dos entradas, la informacin sensorial y la seal de atencin. El segundo representa un circuito
de memoria de trabajo [3], fuente de tal seal de atencin. Constreimos
el modelo mediante la fenomenologa neurofisiolgica de la atencin visual
selectiva: biased competition [4,5] y feature-similarity gain modulation [6,7].
Partiendo de la capacidad de modificar las oscilaciones intracircuitales y la
sincrona recproca en el modelo, obtenemos los siguientes resultados: (1)
la actividad oscilatoria en el circuito de memoria de trabajo aumenta las
oscilaciones en el circuito visual; (2) este efecto permanece an imponiendo oscilaciones no detectables a nivel de neurona nica en el circuito de
memoria de trabajo, siempre que el circuito visual incorpore un grado suficiente de oscilaciones intrnsecas; y (3) aumentando la actividad oscilatoria
gamma del circuito visual se aumenta la selectividad en su perfil de actividad poblacional. Puesto que el comportamiento se correlacionara con la
actividad poblacional en las reas relevantes, proponemos que el aumento
de sincrona en atencin selectiva mejora la capacidad de llevar a cabo una
tarea, en la medida en que aumenta la relacin seal/ruido en la codificacin
de la informacin en reas sensoriales.
[1]Fries, P et al. (2001) Science 291(5508), 15601563.
[2]Womelsdorf, T et al (2006) Nature 439(7077), 733736.
[3]Compte, A et al. (2000) Cereb Cortex 10(9), 910923.
[4]Moran, J et al. (1985) Science 229(4715), 782784.
[5]Desimone, R et al. (1995) Annu. Rev. Neurosci. 18, 193222.
[6]Treue, S et al. (1999) Nature 399, 575579.
[7]Martinez-Trujillo, JC et al. (2004) Curr Biol 14(9), 744751.
[8]Financiacin: Fundacin Volkswagen y MEC.
Locus coeruleus (LC) is important in physical dependence and

withdrawal. Previous studies in a mouse model overexpressing TrkC
showed an increase in tyrosine hydroxylase (TH) positive neurons of the
LC, suggesting a possible differential effect in opioid withdrawal. To test
this hypothesis we studied opiate tolerance and dependence after chronic
treatment with morphine. No differences were found between genotypes
during the development of tolerance or in withdrawal signs, although a
significantly less effect of morphine was found in TgNTRK3 mice after
acute administration. Expression of NT-3, BDNF and their receptors TrkC
and TrkB was detected in the brainstem by in situ hybridization in all experimental conditions. A differential regulation of these neutrophins and
their receptors was observed between genotypes in some conditions.
Finally, single-unit extracellular recordings were performed in noradrenergic neurons of the LC in brain slice preparations. In the electrophysiological assays, noradrenergic neurons of the LC from TgNTRK3 had an
increased firing rate compared with wild-type animals. During morphine
withdrawal the firing rate of LC neurons was elevated in WT animals, but
there was no further increase in morphine-dependent TgNTRK3, showing
no differences between genotypes. In the concentration-response curve
for met-enkephalin, wild-type but not TgNTRK3 showed the typical shift
to the right upon addition of met-enkephaline to the medium, suggesting
that neuroadaptative mechanisms involved in opiate receptor desensitization are disrupted in TgNTRK3. These results suggest that overexpression of TrkC, could alter opiate-induced neuronal plasticity in LC without
modifying the behavioural and somatic signs of opiate withdrawal.
Funded by SAF2004-02808; Fundacin R. Areces; GEN2003-20651C06-03

ESTRUCTURAS INVOLUCRADAS EN APRENDIZAJE
ASOCIATIVO EN UN MODELO DE DEGENERACIN
DE CORTEZA CEREBELOSA
Porras Garca E, Snchez-Campusano R, Martnez-Vargas D, Domnguez del Toro E
Divisin de Neurociencias, Universidad Pablo de Olavide, 41013Sevilla, Espaa.
El ratn Lurcher heterocigoto presenta una mutacin que provoca
ataxia por degeneracin de las clulas de Purkinje y de las clulas granulares del cerebelo. De esta manera, resulta un buen modelo para el estudio
del papel que ejerce esta estructura en diversos procesos motores, incluyendo la adquisicin de nuevas habilidades. Las pruebas comportamentales mostraron un dficit en las habilidades motoras del ratn Lurcher,
pero tambin una adaptacin tarda a las diferentes tareas. Las curvas de
aprendizaje del condicionamiento clsico palpebral del ratn Lurcher fueron similares a las del control, pero el rea de estas respuestas fue menor
en el animal mutante. Sin embargo, al lesionar el ncleo interpsito, ningn
animal fue capaz de aprender la tarea y las respuestas reflejas corneales
se vieron afectadas. Los registros electrofisiolgicos poblacionales de las
neuronas del ncleo interpsito y del ncleo rojo podran indicar una
compensacin por parte del primer ncleo en el ratn Lurcher, sugiriendo que la corteza del cerebelo no es indispensable para este tipo de
aprendizaje, pero su ausencia provoca un evidente dficit motor.
Porras-Garca E et al. (2005) Eur. J. Neurosci., 21, 979-988
167
workshops - miercoles 5
PROGRAMA:

09:00 - 10:30 h Rosa Mara Planells Cases

Centro de Investigacin Prncipe Felipe

11:00 - 12:30 h Pilar Monfort

Laboratorio de Neurobiologa

Centro de Investigacin Prncipe Felipe.Valencia

12:30 - 14:00 h Angel Nez Molina

Departamento de Anatoma Histologa y Neurociencia.

Facultad de Medicina, UAM
Neurofisiologa y biofsica
Movimientos de iones a travs de membrana. Patch
Clamp.
9:00 a 10:30 Rosa Mara Planells Cases.
Centro de Investigacin Prncipe Felipe. Avenida Autopista del Saler, 16. 46013-Valencia.
rplanells@cipf.es
Los gradientes inicos y el potencial a travs de la membrana son responsables de
muchos procesos biolgicos, desde la sealizacin del impulso nervioso, mantenimiento
del volumen celular, transporte activo de diversas molculas, e incluso como seal intracelular iniciadora o reguladora de la contraccin muscular y de la secrecin de hormonas
y neurotransmisores. El movimiento de iones, a travs tanto de las membranas plasmtica
como de organelas, est mediado por canales inicos y por co-transportadores. La mayor
parte de nuestro conocimiento actual sobre estas protenas de membrana procede de la
implantacin de la tcnica del pinzamiento zonal o patch-clamp, introducida en 1976 por
Erwin Neher y Bert Sakmann. Esta tcnica, que permite el registro de corrientes inicas
muy pequeas (hasta 10-2-10-3 A) a travs de pequeas zonas de membrana, requiere la formacin de sellos con una elevada resistencia (Giga-Ohm) entre fragmentos de membrana
celular y la punta de una pipeta de vidrio que es un electrodo. Diversas configuraciones
permiten el registro de corrientes a travs de un canal nico en un parche de membrana
o corrientes totales en pequeas clulas enteras. La sensibilidad y el rango de las posibles configuraciones hace de este mtodo una tcnica muy verstil e imprescindible en el
campo de estudio de los canales inicos. Las bases biofsicas de esta tcnica as como sus
diversas configuraciones sern abordadas. Asimismo, se introducirn las nuevas tecnologas
automatizadas todava en desarrollo que permitirn la obtencin rpida de resultados para
cribado de nuevas molculas.
11:00 a 12:30 MECANISMOS DE PLASTICIDAD SINPTICA: LTP Y LTD.

Pilar Monfort
Laboratorio de Neurobiologa. Centro de Investigacin Prncipe Felipe.Valencia.
La potenciacin a largo plazo (LTP) en hipocampo es un modelo de plasticidad sinptica que consiste en un aumento persistente en el tiempo de la transmisin sinptica y se
considera la base de ciertas formas de memoria y de aprendizaje.
Los puntos que se van a detallar son los siguientes: Estructura y caractersticas del
168
miercoles 5 - workshops
Hipocampo. Potenciacin a largo plazo (LTP): Fundamento y descripcin. Mecanismo y bases

moleculares (papel de los receptores de glutamato, vas de transduccin de seales, segundos
mensajeros...). Propiedades. Tipos de potenciacin. Fases y componentes de dicho proceso.
Relacin con procesos de memoria y aprendizaje.
La depresin a largo plazo (LTD) es otro modelo de plasticidad sinptica que al contrario
que la LTP se caracteriza por una disminucin a largo plazo de la respuesta sinptica. Se expondrn los siguientes puntos: Caracterizacin. Mecanismos moleculares, vas de transduccin de
seales, segundos mensajeros. Similitudes y diferencias respecto la LTP.
12:30 a 14:00 Registros electrofisiolgicos, EEG, potenciales de campo, registros mltiples y unitarios
Angel Nez Molina

Departamento de Anatoma Histologa y Neurociencia. Facultad de Medicina, UAM.
Las tcnicas de registro electrofisiolgico se basan en la medida de la diferencia de potencial
entre dos electrodos. Estos electrodos registran las corrientes elctricas generadas por los
potenciales de accin y los potenciales sinpticos que ocurren en las neuronas. Los registros
electrofisiolgicos se pueden dividir en dos tipos fundamentales: registros extracelulares y
registros intracelulares.
Existen dos tipos de registro extracelular: registros unitarios o multiunitarios, que recogen
la actividad de potenciales de accin de una o unas pocas neuronas, y registro de la actividad de
campo que recoge la actividad generada por los potenciales sinpticos.
Las seales registradas tienen una amplitud de V. Por tanto, para poder ser analizadas estas
seales tienen que ser previamente filtradas y amplificadas.
En el estudio del comportamiento electrofisiolgico de una o varias neuronas no solo nos
interesa conocer su actividad espontnea, sino tambin su respuesta a diferentes estmulos.
Estos estmulos pueden ser naturales (un estimulo visual como un flash de luz) o pueden ser
estmulos elctricos generados por un estimulador elctrico que aplica pulsos de corriente.
Los registros se pueden realizar en animales anestesiados situados en un aparato estereotxico que permite colocar los electrodos en posiciones fijas en el espacio correspondientes
con reas cerebrales determinadas. En este tipo de registros es importante elegir bien el anestsico ya que nos va a influir en nuestros resultados.
protemica, genomica y bioinformtica

APLICACIONES DE LA GENTICA MOLECULAR Y GENMICA EN
LAS NEUROCIENCIAS
Mara Jess Sobrido, Beatriz Quintns
Fundacin Pblica Galega de Medicina Xenmica
La Gentica Molecular y la Genmica estn transformando la investigacin biolgica y esta
revolucin alcanza tambin a las Neurociencias. El advenimiento de nuevas tecnologas, la disponibilidad de bases de datos genticos de numerosos organismos, as como las herramientas
informticas y estadsticas para analizar estos datos permiten abordar cuestiones antes implanteables a los investigadores del sistema nervioso. Clsicamente, las Neurociencias han planteado paradigmas cientficos ms basados en el anlisis de problemas, rutas o funciones concretas,
mientras que la Gentica se ha desarrollado ms en base a screening. La aplicacin de mtodos
de screening gentico a los problemas planteados por los investigadores en neurociencias est
siendo muy fructfera.
La Genmica puede definirse como la confluencia de la tecnologa para adquirir datos
genticos y el desarrollo matemtico y computacional para analizarlos a nivel de genomas
169
completos, con el objeto de conocer la posicin, estructura y funcin de cada gen del
genoma. Por ello dentro de la Genmica ocupa un lugar destacado el anlisis comparativo
de secuencias y la metodologa para el anlisis a gran escala de la avalancha de datos que
provienen de la secuenciacin de organismos completos y sistemas. Los resultados de estas
aproximaciones estn teniendo un profundo impacto en los diseos experimentales para
manipular genes, genomas y organismos modelo para comprender el funcionamiento del
sistema nervioso y comportamientos complejos, as como para desarrollar nuevas estrategias teraputicas en enfermedades del sistema nervioso.
El anlisis transcripcional, clsicamente gen-a-gen, se puede realizar actualmente sobre miles de genes de manera simultnea, proporcionando nuevas perspectivas sobre la
complejidad de la regulacin gnica durante el desarrollo y permitiendo llevar los estudios
moleculares a un nivel de rganos y sistemas. Los microarrays de cDNA son el mtodo
ms eficiente en la actualidad para analizar la expresin gnica a nivel de RNA. Permiten
analizar la expresin de mltiples genes simultneamente, de importancia en prcticamente
cualquier aspecto de las Neurociencias. Sobre los microarrays se pueden colocar genes
conocidos, ESTs o cDNAs identificados con tcnicas de sustraccin como RDA (Representational Difference Analysis). El RDA permite comparar dos colecciones complejas de
genes y aislar (clonar) aquellos genes representados de manera desigual. Por ejemplo, se
pueden identificar genes activados, amplificados o inactivados en determinada circunstancia
fisiolgica o patolgica, natural o experimental.
Pero los microarrays representan una tcnica de screening y siguen siendo necesarias
tcnicas ms centradas en el estudio de un gen concreto para confirmar los hallazgos de
los arrays (Northern blot, RT-PCR). Otro mtodo eficiente para el estudio de la transcripcin es el anlisis en serie de la expresin gnica (SAGE), pero este depende de la capacidad de secuenciacin a gran escala. Por otra parte, tcnicas como la PCR de clula nica
o la microdiseccin lser asociada a screening de expresin sobre microarrays ofrecen la
posibilidad de identificar las marcas moleculares de tipos celulares especficos durante fase
concretas del desarrollo.
El reciente descubrimiento de una herramienta molecular para el control de la expresin gnica, los ARN de interferencia (iRNA), abre nuevas posibilidades experimentales.
Los iRNA, intervienen en un mecanismo de regulacin de expresin gnica en el cual una
molcula de doble hlice (dsRNA) inhibe la expresin de genes con secuencias complementarias. La va iRNA es una valiosa herramienta en biologa experimental para el estudio funcional de genes en cultivos celulares y en modelos animales. La introduccin en la
clula u organismo de un dsRNA diseado con una secuencia complementaria al gen de
inters logra disminuir drsticamente la expresin del mismo. Debido a la gran robustez y
selectividad de los iRNA tambin es posible su empleo en el screening simultneo a gran
escala de los genes que participan en un determinado proceso. El empleo de la va iRNA
es tambin muy prometedor en terapia gnica. Se ha propuesto su utilizacin para inactivar
la expresin de ciertos genes en clulas tumorales o genes implicados en la divisin celular,
as como potencial tratamiento en enfermedades neurodegenerativas como por ejemplo
las poliglutaminopatas.
El desarrollo del Proyecto Genoma Humano y posteriormente tambin la secuenciacin de otros organismos permiti identificar y anotar abundantes polimorfismos a lo
largo de la secuencia de ADN, fundamentalmente polimorfismos biallicos (SNPs). Los polimorfismos de ADN se pueden utilizar para el mapeo gentico y fsico de cualquier locus
a lo largo de un genoma. El proyecto internacional HapMap pretende describir regiones
de alelos compartidos (bloques haplotpicos o zonas de baja recombinacin) a lo largo del
genoma humano. El conocimiento de estos haplotipos facilita enormemente los estudios
de variabilidad gentica asociados a enfermedades comunes. El anlisis de estos datos est
facilitado por la disponibilidad de bases de datos pblicas, as como herramientas informticas para interrogar estos datos.
En resumen, la investigacin genmica ha llevado a una manera diferente de abordar
los problemas biolgicos y a una escala completamente nueva en las cuestiones de inves-
170
miercoles 5 - workshops
tigacin planteadas. El objetivo de este curso e revisar los principios y tcnicas bsicas para
obtener y analizar datos genmicos con el fin de responder a cuestiones biolgicas, en particular referidas a los genes que controlan el desarrollo y la funcin del sistema nervioso y sus
trastornos. Algunos de los captulos especficos que se revisarn son: Organizacin y estructura
de los genomas, secuenciacin a gran escala, anlisis de homologa estructural y funcional, acceso y utilizacin de bases de datos de genmica, anlisis del transcriptoma (gen-a-gen o a gran
escala), polimorfismos en las secuencias de los genomas (genotipado y aplicaciones), mapeo
fsico y gentico, mapeo de genes por ligamiento y asociacin.
neurociencia del comportamiento

Procedimientos experimentales para la investigacin de
la memoria relacional y sus bases neurales en animales
Fernando Rodrguez
Laboratorio de Psicobiologa. Facultad de Psicologa. Universidad de Sevilla.
En esta conferencia se presentarn diferentes modelos conductuales habitualmente utilizados para evaluar diversos procesos cognitivos dependientes del lbulo temporal medial. Para
cada procedimiento se mostrarn los diseos experimentales ms habituales y se discutir los
procesos cognitivos subyacentes, as como sus bases neurales. Se prestar especial atencin a
las tareas clsicas y los nuevos procedimientos que permiten estudiar las capacidades de memoria declarativa y relacional dependientes de la formacin hipocampal. La mayora de estas
tareas han sido ampliamente utilizadas para evaluar capacidades de aprendizaje y memoria
espacial pero recientemente se han desarrollado una serie de nuevos procedimientos que permiten estudiar capacidades de memoria relacional sin un componente espacial.
tecnicas avanzadas en microscopia

Tcnicas avanzadas en microscopia confocal
Mara Burgal
Laboratorio de Esclerosis mltiple. Servicio de Microscopa Confocal. Centro de Investigacin Prncipe
Felipe. C/EP Avda. Autopista del Saler, 16.Valencia-46013. E-mail: burgal@cipf.es
La microscopa confocal supone un avance importante dentro de la microscopa de fluorescencia, al eliminar los dos problemas fundamentales que acompaan a esta ltima y que son:
la fluorescencia difusa que rodea a las muestras fluorescentes y el fotoblanqueo debido a la
exposicin continuada del total de la muestra a la luz de excitacin. Mediante la insercin de
dos pequeos diafragmas de tamao micromtrico en el camino ptico de un microscopio
de fluorescencia, se consigue la confocalidad entre el punto de excitacin, en el interior de la
muestra, y el de deteccin de la fluorescencia emitida por el mismo.
La excitacin de un solo punto o boxel en el plano focal, unido a la utilizacin de una
fuente de luz coherente de lser y un tiempo de excitacin del orden de picosegundos, hace
posible la obtencin de delgados planos focales de la muestra perfectamente enfocados. Con
el desplazamiento del plano focal en el eje de la Z, se obtienen secciones pticas virtuales de la
muestra que pueden dar lugar a la reconstruccin tridimensional enfocada de la imagen. Con
esta tecnologa se puede analizar el interior de un orgnulo, clula u organismo vivo, en condiciones no agresivas para los mismos. Con las condiciones adecuadas de temperatura y CO2,
se pueden realizar estudios cuantitativos en el interior de clulas vivas, adherentes, sin apenas
modificar sus condiciones de cultivo.
171
Entre las aplicaciones ms usuales dentro del campo de las ciencias biolgicas, cabe distinguir:
Estudios morfolgicos y estructurales en muestras biolgicas, orgnulos intracelulares, clulas, tejidos, embriones etc.
Reconstrucciones estructurales tridimensionales.
Estudios cuantitativos de parmetros fluorescentes o inmunofluorescentes.
Estudios dinmicos in vivo en clulas, tejidos, embriones, etc.
Estudios cinticos y de activacin celular, movilidad de orgnulos o cuantificacin de la concentracin intracelular de iones.
Comunicacin celular y movilidad de componentes intracelulares, FRAP.
Colocalizacin de molculas, FRET.
Estudios de biomateriales.
Anlisis microbiolgicos.
Entre los ltimos avances en ptica, aplicados al campo de la microscopa confocal, cabe
destacar la Microscopa Confocal Multifoton 4Pi y la Microscopa STED que han hecho
posible aumentar la resolucin espacial, definida por Ernest Abbe, en 1873. Debido a la
naturaleza ondulatoria de la luz, la resolucin de la microscopa ptica viene delimitada por
la longitud de onda, el ndice de refraccin del medio y la apertura numrica del objetivo,
siendo menor en el eje Z, ~ 200 nm, que en los ejes X e Y, ~ 400 nm.
La tecnologa 4Pi, combinando la apertura numrica de dos objetivos contrapuestos,
mejora hasta 7 veces la resolucin axial del microscopio ptico, permitiendo un seccionado ptico confocal ms fino. Con este nuevo sistema se pueden obtener imgenes tridimensionales ms ajustadas a la realidad, reconstruidas a partir de puntos focales de menos
de 100 nm de resolucin, en los tres ejes.
La tecnologa STED (Stimulated Emission Depletion Microscopy), supera el lmite de
difraccin de la microscopa ptica convencional, reduciendo el rea activa de la luz que
rodea al punto luminoso, al superponer sobre el mismo y de manera sincronizada otro
haz luminoso en forma de anillo, el cual depleciona la fluorescencia antes de que esta sea
emitida. Baja la resolucin en el plano XY a nivel molecular < 20 nm.
Por ltimo, es importante mencionar la Microscopa Raman Confocal que en combinacin con la tecnologa Raman espectral, mediante un mtodo no destructivo, hace posible
la obtencin de una imagen qumica de la clula, de alta resolucin. Aporta la capacidad
no solo de identificar los componentes qumicos en el interior de una clula viva, sino de
identificar los orgnulos celulares en funcin de su composicin, en su entorno fisiolgico
y sin necesidad de marcarlos previamente.
172
VI REUNIN DEL CLUB

PEDRO RAMN Y CAJAL
DE NEUROBIOLOGA COMPARADA
ORGANIZADORES:
Luis Puelles (Universidad de Murcia); Agustn Gonzlez (Universidad Complutense de

Madrid); Carlos Crespo (Universidad de Valencia).

PROGRAMA:
08:00 h Apertura de la Reunin.

08:15 h

Desarrollo del encfalo en peces cartilaginosos: claves para un mejor conocimiento

de la evolucin del sistema nervioso de vertebrados
Isabel Rodrguez-Moldes
Departamento de Biologa Celular y Ecologa, Universidad de Santiago de Compostela

08:45 h Neuroanatoma comparada de un novedoso ncleo auditivo del cerebro

de los mamferos

Enrique Saldaa, Mara Auxiliadora Aparicio

Laboratorio de Neurobiologa de la Audicin, Instituto de Neurociencias de Castilla y Len

(INCyL), Universidad de Salamanca

09:15 h La eminencia pretalmica de amniotas: una estructura embrionaria?

Antonia Alonso1, Ana Delgado1, Fernando Delgado2, Elena Darias1, Carmen Damas2,
Luis Puelles3 y Carmen M Trujillo1.

Departamento de Microbiologa y Biologa Celular, Universidad de La Laguna. 2Departamen

to de Psicobiologa y Metodologa de las Ciencias del Comportamiento, Universidad de La
Laguna. 3Departamento de Anatoma y Psicobiologa, Universidad de Murcia.
09:45 h Descanso

10:00 h La amgdala basolateral en reptiles macrosmticos y microsmticos. Implicaciones

para entender la organizacin del telencfalo de las aves.

Enrique Lanuza1, Alino Martnez-Marcos3, Amparo Novejarque2 y Fernando Martnez-Garca2.

1
Departament de Biologia Cellular y 2Departament de Biologia Funcional, Facultat de Biolo
gia, Universitat de Valncia. 3Departamento de Ciencias Mdicas, Facultad de Medicina de
Albacete, Universidad de Castilla-La Mancha.

10:30 h El ncleo entopeduncular

Luis Puelles

Departamento de Anatoma y Psicobiologa, Universidad de Murcia.
11:00 h Clausura y organizacin de la VII reunin en 2009
173
reunin de club P. ramn y cajl - JUEVES 6
Desarrollo del encfalo en peces cartilaginosos: claves

para un mejor conocimiento de la evolucin del sistema
nervioso de vertebrados
Isabel Rodrguez-Moldes.
Departamento de Biologa Celular y Ecologa, Universidad de Santiago de Compostela.
Tradicionalmente se ha explicado la evolucin del sistema nervioso (SN) de vertebrados en trminos de una escala ascendente desde peces a mamferos pasando secuencialmente por anfibios, reptiles y aves. Siguiendo esta visin simplista se ha utilizado al pez
cebra como especie representativa de todo el grupo de peces mandbulados o gnatostomados, el de mayor diversidad entre los vertebrados y que engloba no slo a los peces
seos (Actinopterigios) como el pez cebra sino tambin a los cartilaginosos (Condrictios)
como los tiburones. Ambos grupos presentan marcadas diferencias en el desarrollo del
telencfalo, que en Actinopterigios sucede por eversin y en Condrictios, como en agnatos
y tetrpodos, por evaginacin. Indudablemente los Condrictios son un grupo clave para
conocer la historia evolutiva del SN de vertebrados y descifrar los detalles de su desarrollo
resulta, al menos, tan prioritario como en Actinopterigios. Los Condrictios son especialmente tiles para estudios morfogenticos del encfalo ya que su lento desarrollo y el tamao relativamente grande de los embriones permiten evidenciar detalles que pueden ser
subestimados en peces pequeos y de desarrollo rpido como el pez cebra. Como prueba,
nuestros recientes estudios sobre el desarrollo en tiburones han revelado que procesos
como la migracin tangencial de clulas gabargicas telencflicas, que se crea exclusiva de
tetrpodos, tiene lugar en Condrictios. Tambin apreciamos gran similitud con mamferos
en los mecanismos de formacin del cerebelo. Asimismo, los patrones de expresin de
genes del desarrollo como Pax6 y otros relacionados con la segmentacin del encfalo
resultan significativamente similares a los de amniotas.
Neuroanatoma comparada de un novedoso ncleo auditivo del cerebro de los mamferos
Enrique Saldaa y M Auxiliadora Aparicio
Laboratorio de Neurobiologa de la Audicin, Instituto de Neurociencias de Castilla y Len (INCyL), Universidad de Salamanca.
La columna longitudinal tectal (CLT) es un ncleo largo y estrecho que recorre longitudinalmente el techo mesenceflico junto a la lnea media. Ocupa parte de lo que tradicionalmente se ha considerado la porcin ms medial de los colculos superior e inferior.
Hace unos aos la descubrimos en el mesencfalo de la rata por sus conexiones nerviosas
y posteriormente comprobamos que sus neuronas responden a estmulos auditivos. En
esta Reunin comentaremos las peculiaridades tintoriales y estructurales de la CLT de mamferos tan diversos como el ratn, la rata, el cobaya, el conejo, el gato, el mono cangrejero
(Macaca fascilcularis) y el hombre.
En todos los rdenes de mamferos estudiados, la CLT difiere de los ncleos circundantes (colculo superior, sustancia gris periacueductal y colculo inferior) por su citoarquitectura. Es un ncleo de gran tamao cuya longitud oscila entre los casi 2 mm en el ratn y los
ms de 11 mm en el hombre. Estos datos sugieren que se trata de una estructura comn a
la mayora de los mamferos, si no a todos ellos, y suscitan la necesidad de identificar la(s)
estructura(s) homloga(s) de la CLT en vertebrados inferiores.
El crecimiento experimentado por la CLT a lo largo de la evolucin de los mamferos
es proporcionalmente menor que el de otras regiones enceflicas, incluido el propio techo
mesenceflico. Parece, pues, probable que, ms que participar en conductas especficas,
derivadas de sofisticados fenmenos evolutivos, la CLT desempee funciones bsicas, compartidas por una amplia gama de animales.
174
jueves 6 - reunin de club P. ramn y cajl
La eminencia pretalmica de amniotas: una estructura embrionaria?

Antonia Alonso1, Ana Delgado1, Fernando Delgado2, Elena Darias1, Carmen Damas2, Luis
Puelles3 y Carmen M Trujillo1.
1
Departamento de Microbiologa y Biologa Celular, Universidad de La Laguna. 2Departamento de Psicobiologa
y Metodologa de las Ciencias del Comportamiento, Universidad de La Laguna. 3Departamento de Anatoma y
Psicobiologa, Universidad de Murcia.
La eminencia pretalmica (Emt) ha sido identificada en el cerebro adulto de numerosos vertebrados anamniotas, mientras que en amniotas se ha considerado una estructura embrionaria.
Por este motivo no se le ha prestado atencin en los estudios neuroanatmicos del cerebro
adulto. Nosotros hemos utilizado el embrin de pollo como modelo de estudio. Con el objetivo de identificar esta estructura y hacer un seguimiento de su desarrollo, hemos estudiado el
patrn de expresin de tres genes que definen su territorio, Tbr1, Tbr2 y Pax6. Hemos comprobado que dicho patrn es similar al descrito para algunos anamniotas. Adems, hemos realizado
quimeras pollo/codorniz del territorio presuntivo de la Emt para hacer un seguimiento de sus
clulas y saber si permanecen en esta regin o migran a zonas vecinas. Nuestros resultados
evidencian que, si bien la cresta ventricular que define a la Emt desde el E.4-E.5 (HH-23-26)
desaparece en la segunda mitad del desarrollo (E.11, HH-37), el resto del territorio eminencial
permanece en el pretlamo como una regin positiva para el gen Tbr1. As pues, la Emt es una
estructura que no desaparece al final del desarrollo embrionario de amniotas, aunque s lo haga
la cresta ventricular que la define por la actuacin combinada de al menos dos procesos: por
una parte, a la exportacin de clulas hacia otras estructuras ms o menos prximas, y por otra,
al crecimiento de las zonas adyacentes.
LA AMGDALA BASOLATERAL EN REPTILES MACROSMTICOS Y MICROSMTICOS. IMPLICACIONES PARA ENTENDER LA ORGANIZACIN DEL TELENCFALO DE LAS AVES
Enrique Lanuza1, Alino Martnez-Marcos3, Amparo Novejarque2 y Fernando Martnez-Garca2.
1
Departament de Biologia Cellular y 2Departament de Biologia Funcional, Facultat de Biologia, Universitat de Valncia. 3Departamento de Ciencias Mdicas, Facultad de Medicina de Albacete, Universidad de Castilla-La Mancha.
En este trabajo estudiamos la influencia del desarrollo de los sistemas olfativo y vomeronasal sobre la organizacin de la amgdala palial, comparando reptiles macrosmticos y
microsmticos. El anlisis citoarquitectnico y de la distribucin de marcadores colinrgicos y
dopaminrgicos muestra que la amgdala lateropalial profunda consta del ncleo dorsolateral
amigdalino (DLA), densamente inervado por fibras colinrgicas y dopaminrgicas, y un segundo
ncleo ms superficial, que hemos nombrado transicin cortico-amigdalina (CAT) que carece
de inervacin colinrgica y muestra una inervacin dopaminrgica moderada. El DLA corresponde topolgica, hodolgica y neuroqumicamente con el ncleo basolateral de la amgdala
de mamferos, y la CAT parece corresponder a la transicin amgdalo-piriforme. En los reptiles
macrosmticos (la serpiente Thamnophis sirtalis y la lagartija Podarcis hispanica) el ncleo esfrico
(NS, el crtex vomeronasal) ocupa la mitad caudal del telencfalo, desplazando rostralmente
el DLA y la CAT. En cambio, en los microsmticos (los geknidos Tarentola mauritanica y Gekko
gecko, y el camalen americano Anolis carolinensis) el NS est notablemente reducido y el DLA,
y especialmente la CAT, aparecen notablemente desarrollados y ocupan niveles comisurales y
postcomisurales. Esta situacin recuerda al DVR de aves, que no poseen sistema vomeronasal,
donde el arcopalio dorsal ms el rea temporo-parieto-occipitalis (TPO), profusamente inervadas por fibras colinrgicas y dopaminrgicas, ocupan una posicin relativamente caudoventral
desplazadas por un ADVR hiperdesarrollado (el nidopallium), lo que apoya que la amgdala
lateropalial de aves incluye el arcopalio dorsal y parte (al menos) del TPO.
Financiacin: Ministerio de Educacin y Ciencia-FEDER (BFU2004-04272), Gobierno de
Castilla-La Mancha-FEDER (PAC-05-007-1 y PAC-05-007-2).
175
reunin de club P. ramn y cajl - JUEVES 6
EL NCLEO ENTOPEDUNCULAR
Luis Puelles
Departamento de Anatoma y Psicobiologa, Universidad de Murcia.
La literatura es confusa sobre el desarrollo y la sistematizacin comparada del ncleo

entopeduncular. Es bien conocida la nocin casi dogmtica (ya que se afirma en base a mera
similitud hodolgica, sin apoyo embriolgico) de que el ncleo entopeduncular de los roedores
se corresponde con el plido interno de los primates. Esta nocin se conecta con la vieja idea
de Spatz (1924) y Richter (1965) de que los ncleos plidos se originan en el hipotlamo y
migran a una posicin intratelenceflica, fenmeno que slo sera completo en los primates.
No obstante, diversos datos recientes sobre la especificacin molecular diferencial de los
territorios matrices para los ganglios basales ponen en duda tales supuestos y sugieren que los
ncleos plidos se desarrollan integramente en el telencfalo (Puelles et al., 2000). La hodologa
conocida claramente no casa con la embriologa conocida. En esta contribucin presentaremos
datos sobre el orgen del ncleo entopeduncular del ratn, usando mapeos de expresin gnica
y trazado de poblaciones neuronales derivadas de progenitores que expresan genes Dlx5/6.
Este origen resulta ser hipotalmico y doble, esto es, hay dos ncleos entopedunculares en el
pednculo telenceflico, cada uno con diferentes propiedades moleculares y (aparentemente)
conectivas. La comparacin con los primordios palidales sugiere que estas poblaciones
entopedunculares son en todo momento independientes de las palidales, aunque algunas se
parezcan en muchos aspectos de su cdigo molecular, lo cual puede explicar quiz que tambin
posean conexiones anlogas. Hay indicios de que tambin existen neuronas entopedunculares
en los primates. Todo ello pone en duda uno de los conceptos bsicos hasta la fecha en la
traslacin de datos hodolgicos de los roedores a los primates.
176
ndice de autores
Pgina
Aaron, H. L. .........................................................119
Abad, J. L. ............................................................... 83
Abasolo, I. .............................................................. 68
Abelln, A. .............................................................. 63
Abolafia, J. A. .......................................................135
Abreu, P. ................................................................. 86
Acebes, A. ............................................... 114, 141
Acland, G. M. .......................................................133
Acosta Boj, M. C. ...........................................148
Adanez Gurich, R. .........................................137
Adanez, R. .............................................................. 77
Adell, A. ......................................................... 89, 149
Afonso Orama, D. D. ..................................... 71
Aguado, C. ............................................................. 81
Aguilar Lepe, J..................................................123
Aguilar, E.................................................................. 66
Aguilar, J. ..............................................................131
Aguirre Garcia, N. .................................72, 151
Aguirre, G. ........................................................133
Aguirre, J. A. ...................................................... 94
Agustn-Pavn, C. . ............................ 37, 47, 91
Aijn, J. ........................................................... 35, 141
Airado, C. ............................................................... 76
Aisa Vega, B. .............................................43, 133
Aivar Mateo, P. ...............................................154
Alaimo, A. ...................................................122, 154
Alberch, J. ................................... 68, 101, 110, 162
Alberola-Die, A. .................................................... 42
Alborch, E. ...........................................................131
Alcalde Domnguez, I. .................................105
Alcntara, S. ........................................................... 84
Alcorta, E. .................................................... 75, 88
Alegre Esteban, M. .......................................165
Alegre, M. ....................................................134, 144
Aln Farias, F. ................................................. 77
Alenda, A. ........................................................... 39
Alfaro-Cervell, C. ............................................147
Alfonso-Oramas, D. ............................................. 86
Aliaga, M. ..............................................................139
Aller, M. A. ...........................................................144
Almazn, G. . .......................................................... 72
Almela, R. M. ......................................................... 72
Alonso Fuentes, A. ...................................... 62, 107
Pgina
Alonso Pablos, D. ............................................ 70

Alonso, A. ....................................................... 33, 62
Alonso, J. R. ........................69, 76, 88, 115, 142
Alonso-Llos, G. ........................................ 50, 80
Alonso-Nanclares, L. .........................................127
lvarez Bermdez, M. .......................................131
Alvarez de la Rosa, D. ......................................... 71
lvarez, B. ............................................................142
lvarez-Dolado, M. .............................................. 88
Alvarez-Erviti, L. .......................................... 77, 137
Alvarez-Lopez, C................................................... 95
Alvaro Bartolome, M. .................................130
Alves Rodrigues, R. J. ...................................161
Alves, D. S. ........................................................160
Alves-Sampaio, A. ........................................... 36
Anadn, R. ................................................62, 63, 64
Andreu, C. ...........................................................110
Angulo, A................................................................. 96
Ansorena, E. ........................................................106
Aparicio, M. A. ...................................................... 74
Aracil, A. .....................................................35, 148
Araque, A. ..................................................49, 161
Araya, F.................................................................... 99
Arbizu, J. ................................................................. 77
Arce, C. ................................................................134
Ardid, S. .............................................................167
Arenzana, J. ................................................... 35, 141
Areso, P..................................................................122
Arvalo, M. A.......................................................... 85
Arvalo, R. .................................................... 35, 141
Arvalo-Martn, A. ........................................ 68, 72
Argandoa, E. G..................................................... 97
Arguelles-Castilla, S. ............................................ 39
Arias de Saavedra, J. M. .............................. 96, 134
Arias, J. L. .............................................79, 129, 144
Arias, P. ................................................................ 89
Arnaiz-Cot, JJ. . ...................................................... 90
Arnold, M. M. ......................................................135
Arochena Gmez, M. M. .............................. 64
Arqu Fust, G. ..............................................110
Arroyo-Jimnez, M. M. ...............73, 90, 139, 154
Artacho-Prula, E. ..............................73, 139, 154
Artieda, J. ........................................... 134, 144, 165
177
NDICE DE AUTORES
Pgina
Artigas, F. ...........15, 39, 40, 89, 128, 145, 149,

154, 160, 162, 163
Asensio, V. J. ........................................................104
Ashmore, J. F. ......................................................123
Atwood, H. L. ....................................................... 91
Aujla, H. .................................................................. 80
Aus, E. .................................................................156
Avendao, C. ......................................................... 44
vila Martn, G. ..................................................... 74
vila, J. ...........................................34, 72, 105, 160
Ayala, V. ......................................................... 67, 151
Ayerdi-Izquierdo, A. ..........................................149
Aymerich Soer, M. ...............................106, 156
Ayuso-Sacido, A. .............................................. 31
B
Babot, Z. ................................................. 89, 99, 146
Baena, S. . ................................................................ 46
Baglietto-Vargas, D. ..................................106, 136
Bahamonde, O. ..................................................... 83
Baier, H. ................................................................119
Bajo Gaeras, R. .............................................. 82
Balbuena, E.............................................................. 92
Bale, M. R. .............................................................. 39
Baleriola Gmez de Pablos, J. .................160
Ballesta J. J. ...........................................................160
Ballester, B. ..........................................................152
Baltans, F. C. ............................................ 69, 76
Barbancho , M. A. ...............................................166
Barbanoj, M. ........................................................... 66
Barcia, C.................................................................100
Barcia, J. A. 33, 47, 83, 100, 120, 130, 139, 157
Barco, A.......................................................... 97, 104
Bardet, S. M. .......................................................... 83
Barrachina, M. .............................................. 75, 139
Barreiro Iglesias, A. ........................................ 62
Barrondo, S. .........................................................143
Barroso Chinea, P. ....................................137, 156
Bartolome Pascual, M. V. ................ 106, 135
Bartolom, D. . ...................................................... 94
Bayon, A. ................................................................ 72
Bazn, E. ................................................................120
Beccari, L. .............................................................142
Becerra, M. ............................................................ 62
Bellver Estells, C. .......................................... 47
Belmonte, C. . ................... 35, 40, 41, 79, 98, 148
Beltrn Belea, E. ........................................... 71
Belzunegui, S. ......37, 101, 106, 132, 142, 153
Benavent, V. .........................................................130
Benavides-Piccione, R. ................................138
Bentez-Temino, B. ............................... 77, 82, 137
178
Pgina
Berbel, P. ...........................................................156
Berliocchi, L. ........................................................128
Bermudez, M. A. ........................................131, 164
Bernad, A. ............................................................160
Bernal, A. ..................................................... 41, 51
Bernal, J. ................................................................140
Bernedo, V. ............................................................ 68
Berrebi, A. S. ......................................................... 74
Berrendero, F. ................................................162
Bertaso, F. .............................................................. 22
Berthier, M. ..........................................................166
Besalduch Canes, N. M. ....................................152
Biber, U. ................................................................. 87
Bilbao, A. ..............................................................120
Bisogno, T. ............................................................. 68
Blanchart Aguado, A. .................................... 31
Blanco Snchez, A. M. . .......................... 38, 50
Blanco, A. M. ......................................................... 50
Blanco, L. ..............................................................160
Blanco-Calvo, E. ..................................................129
Blanco-Prieto, M. J. ............................................106
Blasco-Ibez, J. M. ...............73, 75, 81, 133, 140
Blasi, J. ..................................................................... 92
Blzquez, L. ......................................36, 127, 157
Blzquez, P. M. ....................................................130
Blazquez-Llorca, L. .............................................127
Blesa, F. J. ...................................................77, 137
Boadas-Vaello, P..................................................... 92
Bobo, V. ................................................................115
Bock, E. ................................................................... 74
Bockaert, J. ............................................................. 22
Boix, J...................................................................... 92
Bols, M. ............................................................143
Boluda, S. ................................................................ 43
Bonastre, M. .....................................................145
Boockvar J. A. . ...................................................... 31
Borcel, E. ............................................................. 74
Borde, M. ..............................................................103
Borreda-Gasc, I. ...............................................126
Borrell Franco, V. ..........................................108
Borrell, V. ............................................................... 84
Bortolozzi Biassoni, A. ........39, 40, 145, 160
Bosca, I. ................................................................... 71
Bosch-Morell, F. .................................................... 78
Boto, T. ................................................................... 75
Bovolenta, P. .............................................. 23 (s)
Bregestovski, P. ..............................................119
Bren, S. ................................................................. 45
Bribian Arruego, A. .............................103, 155
Brionne, T. ............................................................. 74
Briz Herrezuelo, V........................................... 99
Brotons, J. ........................................................... 80
Brunet, N. .........................................................151
NDICE DE AUTORES
Pgina
Bueno-Carrera Ma, G. ......................................136

Bulloch, K. ............................................................110
Bulnes Sesma, S................................................. 97
Buo, W. ................................................ 18, 48, 103
Burgal, M. ............................................................... 71
Burgal, M. ............................................................... 71
Burgos Gila, E. .....................................................133
Burgos, M.............................................................. 49
Burguera, J. A. ................................................122
Burguete, M. C. ...................................................131
Bustamante, J. ........................................................ 95
Bustillo, P. J. ........................................................... 67
C
Caballero, C. ..............................................106, 136
Cabaero, D. .............................................. 37, 69
Cabaero, M. J. ..................................................... 81
Cabezas-Fernndez, C. . ......................48, 108
Calder, J. ...................................................151, 152
Calopa, M. .............................................................. 43
Calvo Adamuz, M. ........................................104
Calvo, S. .................................................................. 49
Cambn-Bonet, N. ............................................... 66
Caminos Benito, M. E. ................................148
Camins, A. ..........................................46, 50, 88, 93
Campillo Ajenjo, A. ................................. 37, 69
Campos, M. ..........................................................156
Campoy, F. J. ......................................................... 78
Canales, J. J. ..........................................66, 120, 126
Canals Gamoneda, S. ..................................165
Canals, J. M. .................................................. 68, 110
Candal, E. . .............................................................. 64
Cano Garca, J. ...................................................... 39
Cano, F. ................................................................ 67
Cantarero, M. ......................................................141
Cantero-Nieto, G. .............................................161
Canudas, A. M. .........................................46, 88, 93
Caete, T. .............................................................. 87
Capilla-Gonzalez, V. . ...................31, 142, 157
Caraballo, V. ...............................................104, 125
Carams, C. .........................................................141
Cardona, F. ......................................................... 76
Carmena, A. . ...................................................103
Carrascal, L. ................................................109, 164
Carrasco Viuela, M. ...................................121
Carrasco, M. C. ...............................................138
Carrasco, P. .........................................................151
Carrera de Figueiredo, I. M. ...............63, 64
Carreres Snchez, M. I. .......................33, 141
Carril Mundiano, I. ....................................... 86
Carrillo, M. A....................................................100
Pgina
Carrin Rodrguez, A. M. .......................... 40, 138

Caruncho, H. J. ............................................ 48, 136
Casaccia-Bonnefil, P. ..........................................120
Casado Pinna, M..................................................... 92
Casals Daz, L. .................................................126
Casals Farr, N. ..............................................151
Casanova, B. .......................................................... 71
Casanovas, A. ................................... 110, 121, 152
Casarejos, M. J. ..................................................... 46
Casas, C. ...............................................66, 146, 147
Cascabelos Barral, D. .................................... 67
Cases, O. ................................................................ 34
Casis, L. ................................................................... 91
Casta Forn, A. .............................................. 40
Castellanos, N. P. ..........................................165
Castello-Ruiz, M. ............................................131
Castillo, A. . ..........................................................139
Castillo, M. J. .......................................................... 36
Castillo-Gmez, E. ................... 73, 75, 81, 140
Castle, M. .............................................................156
Castro Castro, A. M. ............................... 62, 65
Castro, A. .............................................................132
Castro, C. . ........................................ 121, 125, 127
Castro, E. ..................................................132, 137
Cataln, M. J. ........................................................130
Cauli, O. ........................................................ 92, 150
Cavada, C. .........................................................107
Cebada Snchez, S. ...............................73, 139
Celada, P.......................................... 128, 154, 163
Celerier, E. ............................................................. 69
Cea, V. ................................44, 69, 146, 153, 161
Cernuda Cernuda, R. ................................... 87, 95
Cervera Ferri, A. ............................................. 38
Chabbert, C............................................................ 92
Chamorro, A. ........................................................ 77
Chandellier, J. ........................................................ 34
Chatauret, N. ......................................................166
Choquet, D. ......................................................... 17
Chun, J. .......................................................... 44, 120
Churruca, I. ............................................................ 91
Cifuentes, M. .......................................................142
Ciordia, E. ............................................................106
Ciruela, F. ............................................................... 81
Ciutat, D. ..............................................................152
Clarkson, C. .........................................................165
Clasca Cabr, F. ...............................65, 98, 108
Clemente Lpez, D. .....................33, 103, 157
Clotet, J. ...............................................................151
Cobacho Tom, N. ................................46, 151
Cobo Aceituno, M. ..................................... 96, 134
Colado, M. I. ........................................................150
Colino-Matilla, A. ............................................ 43
Collantes, M. . ........................................................ 77
179
NDICE DE AUTORES
Pgina
Collazo, O. ...........................................................146
Comella, J. X. ......................................................146
Compte, A. ...................................... 35, 118, 167
Conejo, N. M. ....................................................... 79
Contreras, J. ....................................................... 61
Crdoba, J. ...........................................................166
Coret, F. ................................................................. 71
Corredoira, A. ....................................................156
Corts Denia, P. .......................................... 96, 134
Corts, F. ...................................................... 89, 154
Corts, R. ....................................................126, 154
Coto-Montes, A. .................................................. 50
Cotrufo, T. .......................................................... 24
Cozzi, A. ................................................................. 72
Crespo Galan, I...................................................... 94
Crespo, C. . ............................73, 75, 81, 133, 140
Crespo, E. ............................................................110
Crespo, I. ................................................................ 77
Crespo-Biel, N........................................................ 93
Crespo-Enriquez, I. ......................................... 83
Criado, J. M. ........................................................... 34
Cristfol, R. ........................................................... 50
Cruz-Muros, I. ....................................................... 71
Cuadrado, A. ............................. 38, 100, 139, 155
Cuadrado, M. .......................................................105
Cuadrado-Tejedor, M. ......................................130
Cubelos, B. .......................................................... 33
Cudeiro, J. ............................. 30, 42, 89, 93, 164
Cuenca, N. .................................................96, 150
Cunha, R. A. ........................................................161
Curto, G. G. ........................................................115
D
Dalf, E. ..............................................41, 67, 75, 79
Damas, C................................................................. 62
Dantuma, N. ........................................................102
Darias Prez, E. M. ......................................... 62
Darmopil, S. ..............................................82, 157
Dason, J. S. ............................................................. 91
Dvalos, A. ...........................................................122
Dvila, J. C. ..................................................147, 148
Davis-Lpez de Carrizosa, M. A. ....45, 130
Dawid-Milner, M. S. ...........................................166
de Almeida, J. ..................................................125
De Bernardo, S. ........................................... 77, 137
de Blas, M. ..................................36, 80, 143, 155
de Bock, F. ............................................................. 22
de Carlos J. A. ........................... 31, 107, 109, 141
de Castro, F. ................... 33, 34, 103, 155, 157
De Ceballos, M. L............................................100
de Felipe, C. .................................................. 76, 144
180
Pgina
de Juan, E. .............................................................124
De la Calle, A. ................................................ 45, 70
De la Chica Rodrguez, S. .......................... 96, 134
De la Cruz Muros, I. ....................................... 86
De la Cruz, R. R. ....................................... 45, 82
de la Fuente Ayuso, I. ........................................105
de la Fuente, A. J. ................................................. 34
de la Rosa, E. .......................................................160
de la Rosa-Prieto, C. .........................................157
de la Torre, L. .....................................................148
de la Villa Polo, P. ...............................................162
De Labra Pinedo, C. .......................30, 93, 164
De Pablo, F. .................................................... 31, 83
de Sagarra, M. R. .................................................139
Deco, G. .............................................................117
DeFelipe, J. ........................ 36, 127, 131, 138, 157
Del Arco Gonzlez, A. .........36, 80, 143, 155
Del Bene, F. .........................................................119
del Cid-Pellitero, E. ........................................ 75
Del Olmo, J. A. ..................................................... 48
del Puerto, A.................................................... 82, 85
del Ro Medina, P. . ........................................155
Del Rio, E. .............................................................. 76
Del Rio, J. ............ 37, 39, 43, 105, 127, 130, 153
Del Rio, J. A. ................................................... 68, 99
del Toro Ruz, D. ............................................. 68
del Valle, I. .............................................................. 33
Del Valle, J. ...................................................... 46, 88
Delgado Garca, J. M. ...... 87, 122, 132, 138, 166
Delgado, A. ............................................ 33, 62, 107
Delgado, F. ............................................................. 62
Descalzo, V. F. .....................................................148
Devaud, J. M. ..................................................115
Di Marzo, V. .......................................................... 68
Di Sante, G. .........................................................136
Daz Martinez, A. ............................................ 36
Daz, A. .................................................................149
Daz, C. ........................................................124, 150
Daz, F. ..................................................................163
Daz-Cabiale, Z. .......................................94, 102
Daz-Gil, J. J. .........................................................120
Daz-Hernndez, M. ...........................................102
Daz-Llopis, F. ........................................................ 78
Daz-Lpez, D. ........................................... 69, 88
Daz-Mataix, L. ...................................................... 39
Daz-Quesada, M. ..........................................143
Daz-Regueira, S. M. ...................................... 63, 64
Dierssen, M. ..............................58, 60, 110, 167
Dez-Padrisa, N....................................................... 92
Dez-Vives, C. ........................................................ 50
Do Carmo, S. ........................................................ 70
Docagne, F. ............................................................ 68
Dolz, P. ................................................................... 80
NDICE DE AUTORES
Pgina
Domingues, A. .....................................................161
Domnguez del Toro, E. . ..................................167
Domnguez Hidalgo, I. ......................................... 81
Domnguez, L. ................................................ 62, 64
Domnguez, V. ....................................................... 70
Domnguez-Berzosa, L. ..................62, 63, 64
Domnguez-Escrib, L. .......................126, 120
Domnguez-Hidalgo, I.................................... 81, 96
Donovan-Rodrguez, T. ................................ 40, 98
Dopazo, A. ............................................................. 85
Dopazo, H............................................................... 96
Dopeso-Reyes, I. G. .................................... 48, 136
Dorca, J. ............................................................... 92
Duran-Moreno, M. ........................................132
Durany, N. ........................................................152
E
Ecay, M. ................................................................... 77
Echevarra, D. ........................................................ 83
Echevarra, E. ......................................................... 91
Echezarra, L. ........................................................143
Edin, F. . .................................................................118
Egea, G. ................................................................... 68
El Banoua, F. ...................................................... 76
El Milili, N. .........................................................150
Elezgarai, I. ......................................................... 88
Elizalde, N. ............................................................. 37
Encinas, J. M. ....................................................123
Engel, T. ................................................................154
Enikolopov, G. .....................................................123
Erceg, S. ................................................................144
Escalada-Massanes, A. ............................ 42, 93
Escalante Rodrguez, A. ............................... 32
Escarabajal, M. D. ..........................................148
Eschenko, O. .......................................................165
Escobedo, I. . ........................................................150
Escribano Serrano, L. ........ 39, 105, 127, 153
Escudero, M. .............................................89, 146
Espada Serrano, S. ........................................139
Espinosa Oliva, A. M. ..................................... 39
Espinosa, N. .......................... 30, 42, 93, 93, 164
Esquerda, J. E. .............................. 121, 151, 152
Esteban Ruiz, P. F. ........................33, 103, 155
Esteban, F. J. .........................................................148
Esteban, S. .......................................... 65, 97, 130
Estivill-Torrs, G. ........................................ 44, 120
Estrada, C. ...................................................121, 127
Etxeberra Larraza, A. ..............................122, 154
Pgina
Fagni, L. ................................................................ 22
Fairen, A. ..............................................................166
Farias, A................................................................. 94
Farias, I. . .............................................................110
Faura, C. ...............................................................156
Feijo, C. G............................................................. 99
Feinstein, D. ........................................................... 49
Flez, M. C. .......................................................130
Felipo, V. ........................................48, 92, 144, 150
Feria-Velasco, A..................................................... 98
Fernndez Castro, A. ........................................131
Fernandez de Lamo, I. .................................. 87
Fernndez de Sevilla, D. .....................48, 103
Fernandez Espejo, E. ...................................163
Fernndez Prez, A. ...................................... 32
Fernndez Snchez, L. .......................................150
Fernndez Villarn, R. . ................................. 39
Fernndez, M. ........................................146, 161
Fernndez, O. ........................................................ 44
Fernandez, S. .......................................................143
Fernndez-Chacn, R. .......................................161
Fernndez-Gmez. F. J. ........................ 78, 90
Fernndez-Llebrez, P. ...............................120, 142
Fernndez-Teruel, A. .........................................148
Ferragud, A. ....................................................... 66
Ferran, J. L. ......................................... 83, 85, 140
Ferreiro-Glve, S........................................ 63, 64
Ferrer, I. ..... 35, 41, 43, 67, 75, 79, 99, 105, 139
Ferrus, A. . ..................................................... 91, 141
Figueroa Ortiz, L. C. ....................................126
Fischer, A. ............................................................103
Fisher, A. S. ..........................................................128
Fitzgerald, M. ......................................................... 69
Flames, N. ............................................................109
Flannery, J. ............................................................119
Flrez, J. ......................................................... 47, 121
Foffani, G. ..........................................56, 123, 131
Fontn Lozano, A. .................................40, 138
Font-Nieves, M. ..............................................146
Fors, J. ................................................................... 66
Forns Escud, N. ............................................162
Fortin, D. L. .........................................................119
Frechilla, D. ....................... 39, 105, 127, 130, 153
Freund,T. ............................................................. 16
Fuxe, K. ............................................ 45, 70, 94, 102
G
Gabaldn, P............................................................. 96
Gago-Caldern, B. ................................... 45, 70
Galds, M. ............................................72, 155, 158
181
NDICE DE AUTORES
Pgina
Galeote, L. ............................................................162
Galiano, R. ............................................................139
Galindo, MF. .......................................................... 90
Gallar, J. ......................................................... 35, 148
Gallego, J. M. ........................................................139
Gallego, X. ...........................................................167
Galofr Centelles, M. ............................99, 146
Gandia, L. ............................................................... 90
Ganfornina, M. D. ............................70, 82, 107
Garau, C. ............................................................. 65
Garbayo, E. ..........................................................106
Garca Cabezas, M. G................................107, 108
Garca Campos, J. ...............................................126
Garca Cruz, D. M................................................. 33
Garca de Sola, R. ................................................. 49
Garca de Sola, R. ................................................. 49
Garca de Yebenes, J. .........................................124
Garca Esparza, M. A. ................................... 33, 83
Garca Fernndez, J. M. ......................... 87, 95
Garca Garca, A. ............................................. 37
Garca Gil-Perotin, S. ............... 120, 132, 157
Garca Lpez, M. .................................................. 63
Garca Matas, S. ............................................... 50
Garca Maurio, M. .............................................. 85
Garca Moreno, F. .........................................107
Garca Prez, E. ........................................ 73, 91
Garca Prez, R. ............................................... 82
Garca, A. G. .......................................................... 90
Garca, A. J. ..........................................................100
Garca, D. .............................................................146
Garcia, N. ................................ 129, 132, 145, 152,
Garca-Campos, J. .........................................163
Garca-Daz, B. . .......................................44, 120
Garca-Esparza, M. A. .......................................... 83
Garca-Falgueras, A. ...........................................136
Garca-Frigola, C. ............................................ 33
Garca-Junco Clemente, P. .......................161
Garca-Lpez, R. ............................................139
Garca-Marn, V. ......................................71, 157
Garca-Marqus, J. .........................................109
Garca-Medina, V. ................................................. 67
Garca-Morales, I. ...............................................139
Garca-Nogales, P. ......................................... 37, 69
Garca-Ovejero, D. .................................. 68, 72
Garca-Pino, E. .....................................................148
Garca-Rabaneda, L. E. ...............................127
Garca-Ramos, R. ...........................................130
Garca-Segura, L. M. ...........................................143
Garca-Sevilla, J. A. ............................... 65, 97, 130
Garca-Velasco, J. V. ...........................................156
Garca-Verdugo, J. M. ..............31, 32, 33, 47, 83,
98, 120, 126, 130, 132, 139, 142, 147, 157
Garrido Vega, P. ............................................155
182
Pgina
Garrido, A. M.......................................................... 92
Garrido, J. J. .................................................24, 85
Garrido, P. ............................................. 36, 80, 143
Garrido-Gil, P. . ............37, 101, 106, 142, 153
Garzn, M. ............................................................. 75
Gasull, T.................................................................122
Gasull, X. ..............................................42, 104, 141
Gayoso Babio, J. A. .............................................. 65
Gayoso Rodrguez, M. J. ...................................105
Gaytn Guia, S. P. ........................................... 64
Geijo-Barrientos, E. ............................................. 73
Gelman, D. M. .....................................................109
Georges, F. ............................................................. 88
Granton, S. M.....................................69, 123, 128
Germain Martnez, F. .........................................162
Gibert, M. ............................................................... 92
Gil, V........................................................................ 99
Gil-Bea, F. J. ........................................................... 43
Gimnez y Ribotta, M. ......................................144
Gimenez-Llort, L. ................................................. 87
Gins, S. ................................................................162
Giraldez, R. M. ...................................................... 64
Girldez, T. ............................................................ 71
Godino, M. C. ................................................ 48, 94
Goicoechea Garca, C. ......................................133
Gmez Climent, M. A. ........... 73, 75, 81, 140
Gmez de Barreda Santiago, E. ............... 72
Gmez Galn, M. ...........................................160
Gmez Prez-Nievas, B........................................ 49
Gmez Roda, O. ................................................152
Gmez Roldn, M. C. ..................................142
Gmez Scholl, F. ................................................... 84
Gmez Sintes, R. ................................................160
Gmez Soriano, J. ................................................ 74
Gmez, C. .........................................................115
Gmez, L. ............................................................... 45
Gmez, M. ...........................................................153
Gmez, M. C. ......................................................138
Gmez, M. J. ........................................................148
Gmez, O. ............................................................. 72
Gmez-Bautista, V. .............................................. 34
Gmez-Daz, C. .................................................... 75
Gmez-Heras, R. .................................................. 77
Gmez-Nicola, D. ...........................44, 50, 158
Gmez-Prez, L. ............................................125
Gomez-Pinedo, U. ....... 47, 98, 120, 126, 147
Gmez-Posada, J. C. . ................................122, 154
Gmez-Ramos, P. ...............................................105
Gmez-Ribelles, J. L. ................................... 33, 130
Gmez-Scholl, F. ....................................84, 116
Gmez-Tubo, A. ................................................146
Gomis, A. ............................................................... 79
Gonzlez Duarte, R. ..........................................150
NDICE DE AUTORES
Pgina
Gonzalez Garcia, F. ............................................164

Gonzlez Menndez, I. .......................... 87, 95
Gonzlez Valdizn, E. .................................... 74
Gonzlez, A. ........................................ 62, 63, 64
Gonzlez, C. .......................................................... 34
Gonzlez, E. ........................................................... 42
Gonzlez, F. .........................................................131
Gonzlez, J. C. ....................................................... 90
Gonzlez, M. C. .................................................... 86
Gonzlez, M. P. ..........................................134, 137
Gonzlez-Barn, S. .............................94, 102, 166
Gonzlez-Cuevas, G. ....................... 77, 80, 94
Gonzlez-Forero, D. . ............ 45, 47, 76, 77, 125
Gonzlez-Hernndez, T. .............................. 71, 86
Gonzlez-Pardo, H. .............................................. 79
Gonzlez-Rivero, F. . ............................................ 67
Gonzalo-Gobernado, R. . .....................46, 120
Goi Oliver, P. ................................................154
Goi, B. .......................................................... 72, 151
Goi, J. .................................................................... 91
Gorostidi-Pogola, A. ................................... 92, 149
Gorostiza, P. ....................................................119
Gotteland, J. P. ....................................................160
Gottfried-Blackmore, A. C................................110
Gou-Fabregas, M. ...............................................104
Granado, N. .............................................150, 153
Grandes, P. . ........................................................... 88
Grandjean, B. .......................................................117
Grandoso, L............................................................ 67
Granero. L. ..........................................................127
Graa Carams, P. ......................................... 65
Gratacs, E. .........................................................151
Green, C. .............................................................166
Greer, C. A. .........................................................109
Grieve, K. .............................................................164
Grijota Martinez, M. C. ..............................140
Gringich, J. .............................................................. 39
Groc, L. . .............................................................118
Gromova, P............................................................. 97
Gruart, A. .............................................87, 132, 166
Gruart-Mass, A. ............................................. 25
Grupo ENAE.........................................................122
Guadao-Ferraz, A. . ............................................ 87
Guasch, R. M. ..................................................... 50
Guaza, C. ................................................................ 68
Guerra, M. J. ........................................84, 100, 105
Guerri Sirera, C. ................................... 38, 50, 135
Guillamn, A. .......................................................136
Guilln, J. ..............................................................106
Guirado, R. . ................................. 73, 75, 81, 140
Guirado, S. ..................................................147, 148
Gundlach, A. .......................................................... 78
Guridi, J. ................................................................165
Pgina
Gurung, I. S. .........................................................124
Gutirrez, A. .................................... 106, 129, 136
Gutirrez, R. ........................................................139
Gutirrez-Cuesta, J. ............................................. 50
Gutirrez-Mecinas, M. .......................................133
Guzmn- Lenis, M. S. ..........................146, 147
H
Hagen-Lapido, C. .................................................. 68
Halliwell, J. V. ......................................................... 43
Haydon, P. G. ......................................................161
Heredia, M. ............................................................ 34
Hernndez, A. ....................................................... 71
Hernndez, F. .............................................154, 160
Hernndez, I. ......................................................... 72
Hernndez, M. ............... 31, 72, 133, 155, 158
Hernndez, S. ......................................................121
Hernndez-Guijo, J. M. .......................... 49, 90
Hernndez-Rabaza, V. .......................120, 126
Herranz, A. S. ......................................................120
Herranz-Prez, V. ..................76, 99, 124, 144
Herrera, E. ............................................. 32, 33, 141
Herrera, M. ..........................................................144
Herrera, N. ..........................................................146
Herreras Espinosa, O. ....... 93, 124, 153, 160
Herrero, A. I. ........................................................ 74
Herrero, J. .............................................................. 34
Herrero, M. T. .............................67, 78, 100, 165
Herrero-Turrin, J. .............................................. 34
Hidalgo-Snchez, M. ...................................... 83, 85
Hiplito, L. ........................................................127
Hirsch, E. ................................................................ 78
Hirsch, J. A. ............................................ 67, 78, 128
Horcajadas, J. A. . ................................................148
Horrillo, I. . .................................................86, 163
Hosseini, R. ............................................................ 69
Hoyo-Becerra, C. ................................................. 90
Hunot, S. . ............................................................... 78
Hunt, S. P. ............................................................128
Hurtado Chong, A. ......................................... 31
Hurtado, O. .........................................................122
I
Ibarz del Olmo, J. M. ...................................... 93
Igartua, I................................................................... 95
Iglesias, E. . .............................................................. 77
Ikuta, I. .................................................................... 90
Inda, M. C. ..................................................... 36, 131
Innamorato, N......................................................100
Insausti, A. M. ........................................................ 73
183
NDICE DE AUTORES
Pgina
Insausti, R. .....................................73, 90, 139, 154

Insua, D. ......................................................68, 156
Iraola, S. ................................................................146
Iriarte, J. .......................................................131, 144
Irujo, A..................................................................... 95
Isacoff, E. Y. ..........................................................119
Ivan Manuel.......................................................... 87
Ivorra, I. ......................................................... 42, 124
Izal Azcrate, A. ......... 37, 101, 106, 142, 153
J
Jacob, V. ............................................................... 27
Jambrina, C. .........................................................145
Jancic, D. ...............................................................104
Janu, A. ............................................................... 41
Jaramillo-Merchn, J. ...................................158
Jimnez Daz, L. ....................................123, 128
Jimnez, A. ...........................................................145
Jimnez, A. J. .............................................. 32, 44
Jimenez, S. ...................................................106, 136
Joglar-Santos, B. ............................................. 45, 84
Johansson, E. ...................................................... 74
Johansson, P. ........................................................118
Johnsen-Soriano, S. .............................................. 78
Jordn, J. .......................................................... 78, 90
Jov, M. ................................................................... 67
Juiz, J. M. ......................................................124, 148
K
Kandel, E. R. ........................................................104
Kargieman, L. ..................................................163
Kasparov, S. ..............................................45, 47, 76
Khan, Z. U. ........................................ 106, 129, 136
Kim, S. ..................................................................... 33
Klingberg, T. ........................................................118
Knafo, S. ................................................................138
Knoblich, J..............................................................103
Kolstad, K. D. ......................................................119
Koulakov, A. ........................................................123
Kozyraki, R. ........................................................... 34
Kramer, R. H. ......................................................119
Kratovac, S. ............................................................ 31
Krimmer, A. .........................................................123
Kulisevsky, J. .......................................................... 66
L
La Ferla, F. M. ........................................................ 87
Labandeira-Garca, J. L. .......45, 84, 100, 105
Laborda, J. ............................................................150
184
Pgina
Labrador Spnola, M. C. ....................147, 148

Ladera-Rivero, C. ..................................... 48, 94
Lafuente Sanchez, J. V........................................... 97
Lafuente, E. M. ....................................................... 71
Lanez, S. ................................................................. 83
Lamas Criado, I.................................................. 63
Lamas, J. A. ............................................................. 70
Lana, G. ................................................................... 79
Lanciego, J. L. .................................... 101, 106, 156
Lanuza, M. A. ........................... 129, 132, 145, 152
Lanuza-Navarro, E. ........................ 37, 47, 91, 108
Lara, J. ...................................................................141
Lara, J. P. ...............................................................166
Larrouy, P. .............................................................. 34
Lasheras, B. ................................................... 72, 151
Lavado, R. .............................................................156
Lzaro-Dieguez, F. ................................................ 68
le Cam, J. ................................................................ 27
Leal Campanario, R. ....................................166
Ledent, C. .............................................................130
Lee, R. ..................................................................... 33
Legaz, I. ................................................................... 63
Leis Esnaola, O....................................................... 97
Lerma, J. .................................. 21, 103, 138, 161
Lerner-Natoli, M. ................................................. 22
Levi, R. .................................................................... 46
Leyva, L. .................................................................. 44
Leza, J. C. ................................................................ 49
Lezameta, M. . ......................................................147
Lianne Leith, J. .....................................................128
Linares-Clemente, P. .........................................161
Llad, J. .............................................. 104, 125, 128
Llad, L. ................................................................128
Llamusi, M. B. ...........................................66, 158
Llansola, M. ..............................................144, 150
Llieva, K.................................................................... 67
Llorens Baucells, J. .......................................... 92
Llorens, F. ............................................................... 99
Llorens-Martn, M. ...............................120, 121
Lo, D. ...................................................................... 91
Lobo, D. ................................................................101
Logothetis, N. K. ................................................165
Lois, P....................................................................... 99
Lpez valos, M. D. .....................................142
Lpez Bendito, G. ....................................... 84, 109
Lpez de Armentia, M. ...............................104
Lpez de Cobos, M. ..........................................126
Lpez de Jess, M. ....................................... 91, 143
Lpez de Maturana, R. ......................39, 127, 153
Lpez Gil, J. ........................................................ 89
Lpez Jimnez, M. E. ............................................ 85
Lpez Mascaraque, L. .............. 31, 107, 109, 141
Lpez, B. ..................................... 37, 101, 142, 153
NDICE DE AUTORES
Pgina
Lpez, D. ..............................................................156
Lpez, J. M. ...............................................62, 63, 64
Lpez, L. ......................................................129, 144
Lopez, M. D. ........................................................165
Lpez, S. ...............................................................145
Lpez-Aranda, M. F. ....................................129
Lpez-Atalaya, J. P. ............................................... 97
Lpez-valos, D. .................................................. 90
Lpez-Barroso, D. ................................................ 94
Lpez-Garcia, C. ............................................50, 80,
Lpez-Garca, I. ..................................................... 71
Lopez-Gimenez, J. F. ..........................123, 162
Lpez-Hernndez, B. ..................................... 44
Lpez-Jimnez, M. E. ............................................ 85
Lpez-Mascaraque, L. .......................................... 31
Lpez-Moreno, J. A. ......................... 77, 80, 94
Lpez-Ramos, J. C. ..............................122, 132
Lpez-Real, A. ....................................................... 45
Lpez-Tllez, J. F. ...............................................129
Lpez-Toledano, M. A. . ....................................127
Lucas, J. J. ........................................... 102, 154, 160
Lujn Miras, R. .................................................. 81
Lujn, R. ........................................... 48, 81, 94, 104
Lumb, B. M. ..........................................................128
Luna, C. L. ............................................................148
Luquin, M. R. ..................... 37, 101, 106, 142, 153
Luquin, R. .............................................................132
Lyndell, E. .............................................................122
M
Ma, S. ....................................................................... 78
Machado de la Quintana, A. ............................... 39
Madrid, R. ............................................................... 41
Mahaut-Smith, M. P..............................................124
Maha Rodrguez, J. ........................................ 41, 51
Maier, M. A. ......................................................117
Makarov, V. A. ...........................................124, 165
Makarova, J. ......................................124, 93, 153
Maldonado, R. .....................................40, 162, 167
Malinow, R. ..........................................................103
Malkia, A. ................................................................ 41
Malmierca, E. ................................................ 44, 165
Mancebo Azor, R............................................... 81
Mancebo Azor, R................................................... 96
Manrique, M..........................................................106
Mansilla, F. ............................................................154
Manso, M. J.................................................... 62, 65
Manzoni, O. J. ........................................................ 88
Maranillo, E. ........................................................... 42
Maravall-Rodrguez, M. ................. 26, 39, 143
Marcilla, I. ................................... 37, 101, 142, 153
Marco, S. ............................................................101
Pgina
Marcos lvarez, B. .......................... 43, 43, 133

Marcos, P. .............................................73, 139, 154
Marfany, G. ..........................................................150
Mara Laura Ceci.............................................141
Marin, C. .....................................................66, 145
Marn, O.......................................................... 84, 109
Mario, J. ............................................... 30, 42, 93
Mrquez-Ruiz, J. ......................................89, 146
Marrn, E. ..................................................... 36, 132
Mart-Climent, J. M. . ............................................ 77
Martn Fontelles, M. I. .................................133
Martn- Ibaez, R. ..........................................110
Martn Lopez, E................................................. 71
Martn Martnez, B. Y. .................................. 44
Martin Moreno, A. M..........................................100
Martn Nieto, J. ...................................................150
Martn, A. .............................................................137
Martn, E. D. ............................................153, 161
Martn, F. ..............................................................109
Martn, M. .............................................................139
Martn, R. .............................................67, 74, 137
Martnez Casals, A. ......................................... 41
Martnez Cerdeo, V. ........................................108
Martnez de Pablos, R. ......................................... 39
Martnez Galn. J. R. ....................................124
Martnez Garca, F. ........................ 37, 47, 91, 108
Martnez Hernandez, J. ..............................108
Martnez Martos, J. M. . ........................96, 134
Martnez Millan, L. ................................................ 86
Martnez Navarrete, G. C............................. 96
Martnez Pinilla, E. ................................................ 70
Martnez Ramos, C. ............................................. 83
Martnez Rics, J. ...................................... 47, 91
Martnez, A. ........................................... 68, 79, 152
Martnez, C. .........................................................130
Martnez, G........................................................140
Martnez, L. M. ................................................128
Martnez, S. ........................................31, 32, 70, 83
Martnez-Cu, C. ....................................47, 121
Martnez-de Lagrn, M.......................................... 60
Martinez-de-la-Torre, M. ........................... 83, 140
Martnez-Guijarro, F. J. ........81, 73, 75, 133, 140
Martnez-Marcos, A. .................................139, 154
Martnez-Pinna, J. ..........................................124
Martnez-Ramos, C. ................33, 47, 83, 130
Martnez-Ruiz, J. . ............................. 73, 90, 139
Martnez-Sanchez, P. ..........................................107
Martnez-Vargas, D. ...........................................167
Martini, M. . .......................................................136
Martn-Satu, M. ................................................... 92
Masana Nadal, M. ..........................................145
Masmudi-Martn, M. ...........................................129
Mason, C. ............................................................... 33
185
NDICE DE AUTORES
Pgina
Massi, L. .................................................................. 88
Matas-Rico, E. ...........................................44, 120
Mateos Grondona, J. ...................................... 90
Matas-Guiu, J. ............................................130, 139
McEwen, B. S. ......................................................110
McNab, F. .............................................................118
Meana, J. J. ..................................................... 86, 163
Medina Hernndez, L...................................... 63
Mella Lpez, R. ....................................................154
Mella, R. M. ..........................................................122
Membrive, G. ......................................................... 85
Mena, M. A. ............................................................ 46
Mndez Gmez, H. R. ................................... 83
Mndez-Lpez, M. ............................... 129, 144
Mengod, G. ................ 67, 74, 125, 126, 162, 163
Merchn, A. ........................................................... 42
Merchn, M. .....................................................165
Merchn, P. ............................................................ 34
Meredith-Middleton, J. ........................................ 69
Merino, M. R. ......................................................... 90
Meseguer, V. .......................................................... 41
Mesonero, J. E. ....................................................152
Messeguer, A. ........................................................ 77
Michurina, T. ........................................................123
Miguelez, C. ....................................................... 67
Milligan, G. ..................................................123, 162
Mingorance-LeMeur, A. ...................................... 68
Miambres, R. ....................................................... 50
Mir, M. ..........................................................104, 125
Miralles, A. ................................................65, 66, 13
Mohedano-Moriano, A. .............................. 73, 154
Moleres, FJ............................................................... 95
Molina, F. .....................................................135, 147
Molina-Holgado, E. .................................. 68, 72
Molist, P.................................................................... 63
Molowny, A. ......................................................50, 8
Moncho-Bogani, J. ..............................................148
Monfort, P. ...........................................................144
Monlen Pradas, M. ...................... 33, 47, 83, 130
Montaa, M. ..............................................91, 143
Montenegro, M. F. ................................................ 78
Montero, F. .................................................. 45, 77
Montero-Pedrazuela, A. ...................................... 87
Montes, A. .............................................................. 90
Montes, C. ...........................................................166
Montesinos, M. L. ................................................. 36
Montoliu, L. ........................................................ 61
Montoliu-Felix, C. ...................................48, 144
Mora, F. .........................................36, 80, 143, 155,
Morado Daz, C. J. ........................................... 45
Morales Botello, M. L. ........................123, 131
Morales Delgado, N. ....................................150
Morales, A. .................................................... 42, 124
186
Pgina
Morales, L. . ..........................................................153
Morales, M. .......................................42, 104, 141
Morn, M. A. . ......................................................105
Moranta, D.............................................................. 97
Morante-Redolar, J. M. ............................... 99, 149
Moratalla, R. . .......................32, 82, 150, 153, 157
Morcuende Fernndez, S. ........................... 82
Moreno Carrascal, L. ...................................109
Moreno Cela, A. ................................................... 34
Moreno Lpez, B. .............. 45, 47, 76, 77, 125
Moreno Sanz, G. ............................................ 77, 94
Moreno, M. ..........................................................163
Moreno, N. ...............................................62, 63, 64
Moreno-Gonzalez, I. ...........................106, 136
Moreno-Paublete, R. ..........................................163
Morn, I. ...............................................................148
Morona, R. ............................................ 62, 63, 64
Morreale de Escobar, G. ..................................156
Morte, B. ..............................................................140
Moss, A. .................................................................. 69
Mostany, R. ..........................................................137
Moxon, K. A. .......................................................131
Moya, F...................................................................109
Muhaisen, A. .......................................................... 24
Mulle, C. ............................................................... 22
Muntan, G. . ............................................... 41, 79
Muetn Gmez, V. ..............................82, 157
Muiz Solaz, C. ................................................. 46
Muoz Araujo, M. D. ...................................132
Muoz Bravo, J. L. ................................................ 84
Muoz Madrigal, J. L. ..................................... 49
Muoz Quiles, C. ............................................. 66
Muoz, A. ............................................... 36, 85, 131
Muoz, A. ....................................................100, 105
Muoz, M. .................................................62, 63, 64
Muoz-Delgado, E. ............................................... 78
Murillo-Carretero, M. .......................................121
Murtra, P. .............................................................167
Musumeci, G. .................................................. 81, 96
N
Ncher, J. ................................73, 75, 81, 133, 140
Narvaz . M. ................................................. 94, 102
Narvez J. A. ........................................94, 101, 102
Naud, A. ................................................................ 67
Navarrete-Llins, M............................................... 49
Navarro Inicio, A. ................................................. 70
Navarro, C. ..........................................................156
Navarro, I. .............................................................. 77
Navarro, M. ..............................................77, 80, 94
Navarro, X. ...................................33, 66, 126, 147
Navarro-Lobato, I. .............................................129
NDICE DE AUTORES
Pgina
Navarro-Lpez, J. ..........................................123
Navea, A. ................................................................ 78
Nebot, I. ................................................................. 50
Nicols Apestegua, M. J. ............... 134, 144, 165
Nicols, O. ............................................................. 99
Nieto Daz, M. ................................ 33, 50, 71, 140
Nieto Gonzlez, J. L. .................................109, 164
Nieto Sampedro, M. ..................... 44, 50, 71, 158
Nombela Otero, C. ........................................ 67
Novejarque Gadea, A. ......................................... 37
Numano, R. ..........................................................119
Nez Abades, P. ......................................109, 164
Nez-Molina, A. .................38, 44, 78, 103, 165
O
ORourke, D. ......................................................... 31
OShea, E. .............................................................150
Obeso, J. ................... 13, 77, 114, 137, 165, 168
Odena, MA. ........................................................... 41
Olivn Sierra, A. M. ...................................134, 137
Olivares, R.............................................................104
Oliv, M. ................................................................. 41
Oliveira, E. .............................................................. 41
Olmos, G. .................................................104, 125
Olucha-Bordonau, F........................................ 78
Oria, M. ................................................................166
Ortega Llorente, Z. ......................................102
Ortega, J. A.......................................................... 84
Ortega, J. E. ................................................... 86, 163
Ortega, Z...............................................................102
Ortiz, L. ................................................................139
Ortiz, N. ...............................................................132
Ortiz_, O. . ...........................................................153
Ortuzar, N............................................................... 97
Oset Gasque, M. J. ...............................134, 137
Osuna-Almagro, L. .............................................142
Ozaita Mintegui, A. ........................................ 40
P
Pez Gmez, J. A.............................................. 84
Pano, C. L. ................................................46, 151
Pano, C. L. .................................................... 46, 151
Palls, M. .............................................46, 50, 88, 93
Palma Alvarado, V. A...................................... 99
Paloma, C. ............................................................136
Paly, E........................................................................ 58
Pamplona, R. .......................................................... 67
Panetsos Petrova, F. . ........................................... 34
Panzica, G. C. ......................................................136
Paoletti Rubia, P. ...........................................162
Pgina
Pardo, B. ...............................................................160
Parga Martn, J. A...........................84, 100, 105
Parnaudeau, S.......................................................... 78
Parrado, C...................................................... 94, 102
Parra-Martn, A. ............................................. 40, 98
Psaro, R.................................................................. 64
Pascual Serrano, D. ............................................133
Pascual, M. .................................................68, 135
Pascual, O. . ..........................................................161
Pascual-Font, A. .................................................... 42
Pascual-Leone, A.................................................... 11
Pastor Campos, D. . ........................................ 70
Pastor, A. M. .......................................... 45, 82, 130
Pastor, D. ............................................................ 70
Pastor, F. . .............................................................151
Pastor, J. . ................................................................ 49
Pastor, M. D. ......................................................... 49
Paternain, A. V. ..............................................103
Paternain, B. ........................................................... 95
Pazos, A. ..................................... 36, 132, 137, 149
Pearce-Kelling, S. E. ............................................133
Pecero, M. L. ......................................................... 82
Pedraza, C. ...........................................................120
Pelegr, C.....................................................46, 88, 93
Penas, C. .....................................................66, 146
Peas, R. ...............................................................149
Peuelas, I................................................................ 77
Perea, G. ...............................................49, 161, 161
Prez Alczar, M. ............................ 134 , 144, 165
Prez de la Ossa, N. ..........................................122
Prez de Manzo, F...............................................108
Prez de Vargas, I. ..............................................163
Prez Gracia, E. ............................................... 75
Prez Miranda, M. C. .................................. 96, 134
Prez Rodrguez, R. ..................................134, 137
Prez, J...................................................................... 90
Prez, M................................................... 34, 72, 105
Prez, R. ......................................................131, 164
Prez, S. .............................................................139
Prez, V.................................................................... 66
Prez-lvarez, L. . ................................................. 74
Prez-Arag, A. .................................................... 50
Prez-Asensio , F. J. ....................................... 77
Prez-Balaguer, A. ................................................ 32
Prez-Brangul, F. .................................................. 24
Prez-Fgares, J. M. ............................................... 32
Prez-Martn, M. ........................................121, 142
Perz-Martinez, M. M. .......................................105
Prez-Mediavilla, A. ......................... 105, 130, 153
PrezOtao, I. ..................................... 21, 71, 101
Prez-Rodrguez, R. ..................................134, 137
Prez-Tur, J. ....................76, 92, 96, 99, 124, 149
Prez-Villalba, A. .......................................... 66, 120
187
NDICE DE AUTORES
Pgina
Prez-Villamil, B. ................................................... 32
Prez-Villegas, A. ............................................ 35
Peris Garca, P. ....................................................156
Peris, B. ................................................................... 50
Pesini Ruiz, P. ............................................... 68, 156
Petegnief, V............................................................146
Petersen, R. S. ................................................ 26, 39
Petrosino, S............................................................. 68
Pic, E. .................................................................... 84
Piedrafita, B. .................................................... 48, 92
Pinar, S. .......................................................... 72, 158
Pineda, J. ...............................................................167
Pineda, J. R. ..........................................................110
Pinos, H. ...............................................................136
Piquer, M. ...................................................... 88, 142
Pita Thomas, W. .................................50, 140, 158
Pla, R. ...........................................................84, 109
Planas, A. M. .......................................... 41, 77, 146
Planeis, R................................................................ 83
Planeis, R................................................................ 83
Polache, A. ...........................................................127
Pombero A. ........................................................... 31
Ponce Torrent, J...................................................122
Ponsoda, X. ..................................................... 50, 80
Popoff, M. R. .......................................................... 92
Porras Garca, E. .................................................167
Porrero, C...................................................65, 108
Portero-Otn, M..................................................... 67
Porteros, A. ........................................................... 35
Portillo, F. ...................................... 45, 47, 76, 77
Posadas, I. ............................................................... 44
Prieto, M. D............................................................. 86
Pro-Sisitiaga, P. ............................................. 73, 154
Puelles, E. . .............................................................. 32
Puelles, L. ..............................83, 85, 107, 109, 140
Puente, N................................................................. 88
Puerta Ruz de Aza, F. ......................72, 151
Puerto, A. ...............................41, 51, 82, 135, 147
Puig, B.................................................................... 79
Puig, M. M. ....................................................... 37, 69
Puigcerver, A. ........................................................ 94
Puighermanal, E. ............................................. 40
Pujol Sabate, M. ..................................................... 43
Pulvermller, F. .............................................166
Q
Quincoces, G. ....................................................... 77
Quirce-Vzquez, S............................................ 98
188
Pgina
Rada, D. .................................................................. 91
Ramirez Exposito, M. J.......................................... 96
Ramiro Fuente, S. M........................................ 98
Ramn-Cueto, A. ................................................. 66
Ramos-Moreno, T.................................................. 98
Ramos, A. .............................................................159
Rassart, E. ............................................................... 70
Real, F. X. ............................................................... 68
Recio, J. S. .................................... 69, 76, 142, 88
Redolat Iborra, R. ..........................................138
Redondo, J. M. ....................................................... 33
Rego, A. C. ...........................................................161
Reguero, L. ............................................................. 88
Reig Garca, R. .................................................. 81
Reimers, D. ..........................................................120
Reina-Snchez, M. D. ........................................... 70
Reinchisi, G.............................................................. 99
Reinoso-Surez, F. ........................................... 15
Rey, M. J. ................................................................. 43
Rey, P. ..................................................... 45, 84, 105
Reyes-Irisarri, E. ............................................. 67, 74
Richter, J. A. . ......................................................... 77
Rico Gozalo, B. ...................................................104
Rioja, J....................................................................... 94
Rivadulla, C. ........................................................... 93
Rivera, A. ................................................................ 70
Rivern Miranda, J. ......................................... 88
Robert, I. ................................................................ 66
Rodicio, M. C. .............................................. 62, 159
Rodrigo, R................................................................ 92
Rodrguez Castro, P. ........................................... 70
Rodrguez Ferrer, J. M. ........................................ 81
Rodrguez, A. ............................................35, 139
Rodrguez, A. E. ..................................................156
Rodriguez, D. ........................................................ 72
Rodrguez, F. B. ..................................................... 46
Rodrguez, F. B. ..................................................... 46
Rodrguez, M. ........................................................ 86
Rodrguez-Alfaro, J. A. .............................122, 154
Rodrguez-Chacn, M. ................................104
Rodrguez-Ferrer, J. M. .......................... 81, 96
Rodrguez-Gallardo, L. ........................................ 85
Rodrguez-Gaztelumendi, A. ..................... 36, 149
Rodrguez-Moldes, I. ..................................... 63, 64
Rodrguez-Oroz, M. C. ...... 77, 113, 137, 165
Rodrguez-Pallares, J. ...........45, 84, 100, 105
Rodrguez-Prez, A. I. ......................................... 45
Rodrguez-Puertas, R. .......................................... 87
Rodrguez-Sunico, C. .............................. 47, 76
Rodrguez-Tebar, A. ............................................ 85
Rojo Antua, M. L. ........................................149
Rojo Sanshs, A. I. ................ 38, 100, 139, 155
NDICE DE AUTORES
Rojo, M. L. .............................................................. 36
Pgina
Romaguera-Ros, M. ...............................31, 147

Romay-Talln, R. ...........................................136
Romero Gmez, F. J. ..................................... 78
Romero Granados, R. ..................................138
Romero Pita, M. C..........................................131
Romero, A. ...............................................37, 39, 69
Romero, M. C. ....................................................164
Romero-Acebal, M. ...................................106, 136
Romero-Pozuelo, J. ........................................ 91
Roncero, C. .........................................................137
Ros-Bernal, F. ................................................. 67, 78
Rossell, J. ............................................................121
Roy, N. S. ............................................................... 31
Rozas, J. L. ............................................................138
Ruano, D. ....................................................106, 136
Rubenstein, J. L. ..................................................109
Rubio, A. ................................................................. 72
Rubio, A. ................................................................. 66
Rubio-Acero, R. .................................................... 50
Rubio-Garrido, J. P. ...............................65, 108
Rueda, A. ..............................................................122
Rueda, N. ...................................................... 47, 121
Ruz de la Encarnacin, M. ........................144
Ruz, E. .................................................................... 67
Ruiz-Hidalgo, M. J . .............................................150
Ruiz-Torner, A. ..................................................... 38
Ruvira, M. A. ........................................................150
S
Sabat Martnez, M. M. ..............................132
Sabat, M. .............................................................152
Saenz del Burgo, L. ...............................91, 126
Sez Moreno, J. A........................................... 81, 96
Sez-Valero, J.......................................................... 99
Saheki, T. ..............................................................160
Saint-Michel, E. ................................................. 71
Salazar Colocho, P. .............................127, 153
Salazar, I................................................................ 86
Saldaa, E. ........................................................... 74
Salinas, M. .............................................................139
Salls, J. .................................................91, 126, 143
Salmern, M. ................................................. 33, 130
Salom, J. B. ...........................................................131
San Sebastin, W. ......37, 101, 106, 142, 153
Sanabra Palau, C. ............................................ 67
Snchez Alcaiz, J. A. .................................... 84
Snchez Guardado, L. O. . ........................... 85
Snchez Jimnez, A......................................... 34
Snchez Quinteiro, P. .......................................... 86
Snchez Riolobos, A. ..................................... 34
Snchez Romero, D. ...................................... 70

Pgina
Snchez Varo, R. M. ............................106, 136

Snchez Veloz, J. .................................................136
Snchez, A. ............................................................. 35
Snchez, D. ............................................ 36, 82, 107
Snchez-Alonso, J. L. ............................................ 43
Snchez-Arrones, L. ............................................. 83
Snchez-Campusano, R. ....................................167
Snchez-Cataln, M. J. . ......................................127
Snchez-Gonzlez, M. A. ..................................107
Snchez-Gonzlez, R. ...........................35, 141
Snchez-Huertas, C. ...................................... 46
Snchez-Jimnez, A. ...................................... 34
Snchez-Lpez, . .................................................... 89
Snchez-Mut, J. V. .................................... 76, 96
Snchez-Ponce, D. .......................................... 85
Snchez-Prieto, J. ..................... 48, 85, 94, 137
Snchez-Vives, M. V. 35, 55, 80, 81, 101, 135
Sancho-Bielsa, F. J. ..............................83, 130, 139
Sancho-Tello, M. ................................................... 78
Sandi, C. ......................................................... 74, 138
Sandoval, J. E. ................................................ 83, 140
Sandoval, J. E. ......................................................... 83
Sanfeliu, C. ............................................................. 50
Santaf Martnez, M. ....................................129
Santaf, M. M. ................................... 132, 145, 152
Santaluca, T. .......................................................... 41
Santamarina, G. ............................................ 68, 156
Santana Ramos, N. ..............................162, 163
Santana-Castro, I. ...............................................122
Santn, L. ........................................................ 94, 120
Santos Benito, F. F. . .................................... 66, 158
Santos Ledo, A. .......................................35, 141
Santpere, G. ....................................................... 79
Sanz, J. C. ..............................................................145
Saudo, J. R. ........................................................... 42
Sarasa, M. ...................................................... 68, 156
Satrstegui, J. .......................................................160
Saura, J. ................................................................... 92
Scaglione, A. . .......................................................131
Scanlan, T. ............................................................140
Scharff, C. .............................................................140
Schiapparelli, L. ........................... 105, 127, 153
Scorza, C. ........................................................ 39, 40
Scott, E. K. ........................................................119
Seamari, Y. .......................................................101
Sebastian, A. .......................................................... 33
Segovia, G. .................................36, 80, 143, 155
Segura, M. F. ........................................................146
Selak, S. .................................................................103
Seoane, A. .............................................................. 92
Sergent-Tanguy, S. ..............................................110
Serra, A. ............................................................... 41
189
NDICE DE AUTORES
Pgina
Serra, M. A. ............................................................ 48
Serrano, M. ............................................................ 46
Serratosa, J. ............................................................ 92
Sherwood, N. M..................................................... 62
Shulz, D. E. ......................................................... 27
Sierra, A. ...........................................................110
Sierra, A. Y. ..........................................................151
Sighemoto, R........................................................... 94
Silva, A. .......................................................... 33, 103
Simn Martn, J. ............................................... 85
Simn, A. M. .......................... 39, 105, 127, 153
Simon, M. J. ...............................................82, 135
Simonneaux, V. ................................................ 58
Sirerol-Piquer, M. S. .....................................149
Sivasubramaniam, A. K. .....................................128
Sobrado, M. ........................................................... 90
Soler Martn, C....................................................... 92
Soler, R. ................................................................104
Soler-Jover, A. ....................................................... 92
Sols, J. M. ..........................................95, 128, 153
Solsona, C. ........................................................118
Sommer, F. T. ......................................................128
Soria, J. M. ...........................33, 47, 83, 130, 139
Soriano beda, S. ........................................... 79
Soriano, E. ............................................. 24, 68, 69
Soriano-Navarro, M. ................................... 32, 126
Soussi-Yanicostas, N. .........................................103
Spagnolo, A. ........................................................... 49
Speicher, S. ...........................................................103
Surez, L. ..............................................................157
Surez, L. M. ...........................................128, 153
Surez, M. ...................................................... 68, 156
Surez-Boomgaard, D. ................................. 70
Sumoy, L................................................................... 99
Suol, C.................................................................... 99
Szab, G. ..............................................................109
Szobota, S. ............................................................119
T
Talens-Visconti, R. . .............................................. 50
Talln, R. ....................................................48, 136
Tapia, M. ................................................................. 85
Tarabal, O. ...............................................121, 152
Taylor, J. S. ............................................................. 74
Tegnr, J. ..............................................................118
Terni, B. ............................................................... 43
Terrado, J. ............................................................152
Teruel-Marti, V. .................................................... 38
Tobea, A. . ..........................................................148
Tolivia Fernndez, J. ............................................. 70
Tolosa, L. ..................................................125, 104
190
Pgina
Toms Marginet, M. ........................... 145, 152

Toms, J. ...................................................... 132, 145
Tordera, R. ............................................................ 43
Tordera, R. M. ....................................................... 37
Tordo, J. ...............................................................123
Tornero Prieto, D. .......................................... 69
Torregrosa, G . ...................................................131
Torrejon-Escribano, B. ........................................ 43
Torres Alemn, I. ...............................................121
Torres, B. ....................................................109, 164
Torres, C. ............................................................148
Torres, J. ................................................................. 34
Torres, M. ...................................................106, 136
Torres, M. ........................................... 85, 94, 137
Torres-Alemn, I. ...............................................121
Torres-Alemn, I. ...............................................143
Torres-Peraza J. ..................................................101
Tortosa Binacua, E. ........................................ 34
Tramu, G. .............................................................139
Tranque, P. ............................................................. 49
Trauner, D. ..........................................................119
Trejo, J. L. ...................................... 120, 121, 121
Tremblay, L. ....................................................113
Trigo Damas, I. ................................................. 87
Troca-Marn, J. A. ................................................. 73
Tronche, F. .................................................... 78, 100
Trujillo, C. M. ....................................33, 62, 107
Trujillo-Estrada, L. ..................................... 136, 106
Tulleuda-Martnez, A. ................................... 42
Tulyathan, O. .......................................................119
Tusell, J. M. ............................................................. 92
U
Ugedo, L. ................................................................ 67
Urbn, N. .............................................................110
Urea Peralta, J. ............................................124
Urigen, L. .............................................................. 86
Urios, A. ................................................................. 48
Uwe LLg................................................................... 87
V
Valdeolmillos, M.......................................84, 109
Valderrama, J. J. .............................................. 45, 70
Valderrama, J. J. ..................................................... 70
Valderrama-Canales, F. J. .................................... 42
Valdizn, E. M. .............................................. 36, 132
Valencia, M. ....................................... 134, 144, 165
Valero, J. .......................................... 69, 76, 88, 115
NDICE DE AUTORES
Pgina
Valiente, M. ..........................................................109
Valle-Argos, B. .........................................44, 158
Vallejo, M. ............................................................... 32
Valls-Sol, J. ........................................................ 28
Valverde, O. .........................................................130
Valverde-Navarro, A. A. ..................................... 38
van Leeuwen, F. .................................................... 43
Varea, E. ..............................73, 75, 81, 133, 140
Varela-Nieto, I. ................................. 44, 120, 60
Vargas, J. P. ........................................................ 27
Vargas, M. L. ....................................................147
Varona, P. ............................................................... 46
Vazquez Claverie, M. 37, 101, 106, 142, 153
Vzquez, P. .......................................89, 149, 154
Vzquez, T. . ........................................................... 42
Vecino, E. ................................ 72, 133, 155, 158
Vega Avelaira, D. ............................................. 69
Vegar, C. ................................................................. 33
Vela, C. .................................................................102
Velayos, J. L.......................................................... 95
Velzquez Snchez, C. ................................... 66
Venero, C. .............................................................. 74
Vergao-Vera, E. ................................................... 31
Vergara, R. ...........................................................135
Verona Villar-Cervio, I. .....................................159
Verschure , P. ......................................................117
Viana, F. ........................................................... 41, 79
Vicario-Abejn, C. ........................................ 31, 83
Vicente Tejedor, J. .............................................162
Vico, F. J. ...............................................................101
Vidal, C. J. ............................................................... 78
Vidal, L. .................................................................163
Vidal, M. ................................................................115
Vidal, M. ................................................................123
Vidal, R. .................................................................132
Vidal-Casado, R. .............................................137
Vidueira Fernndez, S. ...............................139
Vila del Sol, V. ........................................155, 157
Vilaplana, J. ........................................... 46, 88, 93
Vilario Camen, M. ....................................130
Vilar Comas, M. T. ..............................99, 149
Villac Lozano, P. .......................................122, 154
Villar-Cervio, V. .................................................. 62
Villaroel, A. .................................... 154, 122, 119
Villena, A. .............................................................163
Viosca Ros, J......................................................... 97
Viso Len, M. C. ................................................... 70
Vitorica, J. ....................................................106, 136
Viv, M. .................................................................126
Volgraf, M. ............................................................119
Vyas, S.....................................................................100
Vyas, S. .................................................................... 78
Pgina
Walsh, C. ................................................................ 33
Wang, X. J..............................................................167
Watanabe, M. ........................................................ 81
Weiss, F. ................................................................. 80
Weruaga, E. .................................... 69, 76, 88, 142
Wesseling, J. ................................................ 73, 91
Wickman, K. .......................................................... 81
Wright, C. V. ......................................................... 68
Wyart, C. .............................................................119
X
Xifr, X. ................................................................162
Y
Yajeya, J. .................................................................. 34
Yaez, J. .................................................................. 65
Yllanes, D................................................................. 95
Yusta-Boyo, M. J. .................................................. 31
Z
Zafra, M. A. . ............................................135, 147
Zamalloa, T. .........................................................167
Zanollini, I. ...........................................................127
Zarate, J. .............................................................. 91
Zaratin, P. .............................................................160
Zarzo Castell, M. .........................................129
Zipancic, I. ............................................................142
Zubieta, J. L. ........................................................... 77
191
COLABORADORES INSTITUCIONALES
COLABORADORES PRIVADOS

XII Congreso de Neurociencia

Caricato da

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XII Congreso de Neurociencia

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XII CONGRESO

SOCIEDAD ESPAOLA DE NEUROCIENCIA

Editado por: Publicacions de la Universitat de Valncia

Carta de presentacin del comit..................................5

Estimados amigos y compaeros

Conferencia Plenaria Dr. Tamas Freund

Psteres. Sesin 1 (Hall)

Reunin de Club: P. Ramn y Cajal

Conferencia Inaugural: Dr. Francesc Artigas Serotonina : Falsas Impresiones y

Presentacin histrica de la SENC

Pausa Caf (Hall)

Psteres. Sesin 2 (Hall)

Psteres. Sesin 3 (Hall)

Cena de Gala (LHemisfric)

* REUNIN DE CLUB GANGLIOS BASALES - SALA DE COMISIONES 1 - DE 09:00 A 17:00

Conferencia Plenaria Dr. Washington

Psteres. Sesin 5 (Hall)

Psteres. Sesin 4 (Hall)

Simposio 11: Aproximaciones

Pausa Caf (Hall)

Simposio 10: Anlisis estructural y fun- Simposio 12: Iluminando los

Simposio 9: Funciones distributivas

Presentacin histrica de la SENC.........................................................................15

13:00 - 14:00 h Conferencia Inaugural................................................................................................15

Trafficking and sorting of non-conventional NMDARs?; I Perez- Otao,

Receptores de gua axonal, protenas SNARE y exocitosis asimtrica en

Mapas somatosensoriales y aprendizaje asociativo; A. Gruart

Mecanismos de control de la actividad cortical y epilepsia; M. V. Snchez-Vives

Simposio 6: Las neuronas hipotalmicas KiSS-1 y la reproduccin.................57

Protective effect of catechins on brain alterations in murine models

Modelos animales genticamente modificados de enfermedades neurosensoriales; M. Arbores

11:00 - 11:30 h Caf (Hall)

Reunin de Club Ganglios Basales (Sala comisiones I)

Simposio 9: Funciones distributivas de los ganglios basales............................113

Organizacin anatmico-funcional de los ganglios basales: Circuitos paralelos; M. T. Herrero.

Simposio 10: Anlisis estructural y funcional de la sinaptognesis................114

9:00 - 11:00 h Simposio 11: Aproximaciones computacionales a la funcin cortical

Simposio 12: Iluminando los mecanismos de receptores y canales inicos......

11:00 - 11:30 h Caf (Hall)

12:30-13:00 h Presentacin histrica de la SENC (Auditorio I)

13:00- 14:00 h Conferencia Inaugural: (Auditorio I)

La serotonina es uno de los neuorotransmisores filogenticamente ms antiguos y juega mltiples

18:30-19:30 h Conferencia Plenaria (Auditorio I)

Endocannabinoids are thought to be retrograde mediators in several forms of synaptic plasticity.

18:15 a 19:15 h Conferencia Plenaria: (Auditorio I)

18:15 a 19:15 h Conferencia Plenaria: (Auditorio I)

15:00 a 17:00 Simposio 1: Regulacin del trafico de los receptores de glutamato

PKC MEDIATED REGULATION OF MEMBRANE KAINATE RECEPTORS

DISRUPTION OF mGluR7a-PDZ INTERACTION TRIGGERS ABSENCE-LIKE EPILEPTIC SEIZURES

15:00 a 17:00 Simposio 2: Perspectivas moleculares y celulares del desarrollo neuronal

VIAS DE SEALIZACION ASOCIADAS A MORFOGENOS Y GUIA

RECEPTORES DE GUA AXONAL Y PROTENAS SNARE EN EL

LOCALIZACIN POLARIZADA DE RECEPTORES Y CANALES INICOS DURANTE EL DESARROLLO AXONAL

15:00 a 17:00 h Simposio 3: Anlisis funcional de la corteza en barriles: representaciones de

o perifrica durante seis sesiones de condicionamiento, tras las cuales se intercambi el

ADAPTATION AND CONTEXT-DEPENDENT VELOCITY CODING

ELECTROPHYSIOLOGICAL CORRELATE OF TEXTURE REPRESENTATION IN THE WHISKER SYSTEM

15:00 a 17:00 h Simposio 4: Modulacin no invasiva de redes cerebrales: de la bsica a la

Umbral motor en reposo

Nivel de excitabilidad basal

Umbral motor durante contraccin

Nivel de excitabilidad durante contraccin

Estimulacin focal mltiples puntos

Mapas de representacin cortical