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Fosforilao Oxidativa
Cadeia transportadora de eltrons
Prof. Dr. Jlio Csar Borges
Depto. de Qumica e Fsica Molecular DQFM
Instituto de Qumica de So Carlos IQSC
Universidade de So Paulo USP
E-mail: borgesjc@iqsc.usp.br
Fosforilao oxidativa
Fim das rotas metablicas de produo de energia em
organismos aerbicos
- Representa o estgio 3 do processo
Acoplamento da oxidao de NADH e FADH2 e sntese de ATP
- o principal stio de produo de ATP
- Envolve o consumo de O2 e formao de H20
Teoria Quimiosmtica
- Fluxo de eltrons por carreadores criam um gradiente de
concentrao de prtons na membrana mitocondrial
- A quebra deste gradiente est acoplada com a sntese de ATP
Fosforilao oxidativa
LOCAL: MITOCNDRIA
- Organela de eucariotos
Possui duas membranas
Membrana Mitocondrial externa - MME
- Permevel a pequenas molculas
Membrana Mitocondrial interna - MMI
- Impermevel a maioria das molculas
- Inclusive H+
- Necessidade de transportadores
de membrana
Espao intermembranal
-Cristas membranais
Matriz mitocondrial
- Local de oxidaes
- Ciclo de Krebs
- -oxidao de lipdeos
- Oxidao de Aminocidos
Mitocndria
Os carreadores que transportam os eltrons do NADH e FADH2
at O2 esto na MMI
A oxidao de NADH e FADH2 promovida pela CTE
Alguns desses centros redox so mveis ou protenas
integrais de membrana
Fosforilao oxidativa
LOCAL: MITOCNDRIA
Fosforilao oxidativa
LOCAL: MITOCNDRIA
MMI
-~ 75% de protenas: mais
rica em protenas do que a
MME
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
OU
CADEIA RESPIRATRIA
Transporte de e
1) 1 e
Fe3+ para Fe2+
2) 1 e + 1 H+
3) 2 e na forma de :H-
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
OU
CADEIA RESPIRATRIA
= potencial de reduo
= potencial redox
= potencial de oxidorreduo
H+ : H2
Potencial de reduo 0
A forma oxidada tem menor afinidade por eltrons que o H2
Potencial de reduo 0
A forma oxidada tem maior afinidade por eltrons que o H2
Um agente redutor forte (como o NADH) tem a tendncia de doar eltrons (E0 < 0);
um agente oxidante forte (como o O2) est pronto para aceitar eltrons (E0 > 0)
A fora impulsora da fosforilao oxidativa o potencial de transferncia
de eltrons de NADH e FADH2 em relao ao do O2
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
OU
CADEIA RESPIRATRIA
Os carreadores de e
NAD(P)H
So carreadores de eltrons solveis em gua, que se associam reversivelmente
a desidrogenases
Substrato reduzido + NAD(P)+
**Desidrogenases
[NADH]
[NAD+ ]
Nas clulas
NADH
Razo baixa
carreador de e- no
catabolismo
[NADPH]
[NADP+ ]
Razo
alta
NADPH
Poder redutor a reaes
anablicas
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
OU
CADEIA RESPIRATRIA
Os carreadores de e
Flavoprotenas
Contm um nucleotdeo de flavina (FMN ou FAD) parte do stio ativo da
flavoprotena
Pode aceitar 1 eltron semiquinona ou 2 eltrons FADH2 FMNH2
A forma oxidada (FMN) reage com um prton e um eltron, convertendo-se na forma semiquinona
(FMNH); a incorporao de mais um prton e um eltron resulta na forma totalmente reduzida (FMNH2).
Flavoprotenas
podem participar da transferncia de 1 ou 2 e- intermedirios entre reaes
onde 2e- so doados (desidrogenaes) e onde 1 e- doado (reduo de uma quinona
a hidroquinona).
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
OU
CADEIA RESPIRATRIA
Os carreadores de e
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
Constituda de unidades
isoprenides (cada uma com 5C)
A coenzima Q10 a mais
comum em mamferos (10
unidades de isopreno)
Fcil de desprotonar,
formando um radical
aninico de semiquinona
Aceita 2
eltrons
Lipossolvel
se difunde livremente no espao
intermembranas
Capaz de fazer a juno entre o doador
de 2e- e um aceptor de 1e- (como as
flavoprotenas)
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
O fluxo de eltrons pelos carreadores vai daquele com menor potencial para o maior
potencial
NADH
Cit b
Cit c1
Cit c
Cit a
Cit a3
O2
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
Complexo III
do Ubiquinol para o Citocromo c
Ubiquinona:Citocromo c-oxidoreductase
Complexo IV
do Citocromo c para o O2
Citocromo c-oxidase
Fosforilao oxidativa
COMPLEXO I: NADH:UBIQUINONA-OXIDOREDUTASE
OU
NADH-DESIDOGENASE
NAD+ + QH2
Exergnico
2) Transferncia de 4 H+ para o espao
intermembrana
Endergnica
Fosforilao oxidativa
COMPLEXO II: SUCCINATO-DESIDOGENASE
Porta de entrada dos e do FADH2 produzidos no ciclo do cido ctrico
Porta de entrada dos e do NADH
produzidos no citoplasma
- Canaliza diretamente os e do succinato
para a cadeia transportadora de e
FADH2 + Q
FAD + QH2
Exergnico
Sem transferncia de H+ para o
espao intermembrana
Porta de entrada de e de outras vias
oxidativas
- -oxidao de cidos graxos
Fosforilao oxidativa
COMPLEXO I
E COMPLEXO
II
4)
Vias de entrada de e para a
ubiquinona:
1) NADH mitocondrial,
2) Succinato do ciclo do cido
ctrico,
2)
3) e da -oxidao de cidos
graxos via Acil-CoA-
3)
1)
Fosforilao oxidativa
COMPLEXO III: UBIQUINONA:CITOCROMO C-OXIDOREDUTASE
Canaliza os 2 e do Ubiquinol (QH2) para o Citocromo C com a transferncia de H+ da
matriz mitocondrial para o espao intermembrana
- possui duas unidades de Citocromo b enterrados em 1 fenda na membrana
QH2 + 2 Citc1 (Oxi) + 2 H+N
Q + 2 Citc1 (Red) +
4 H+P
Fosforilao oxidativa
COMPLEXO III: UBIQUINONA:CITOCROMO C-OXIDOREDUTASE
2 e do Ubiquinol so afunilados no Citc
carreador de 1 e
1 Ciclo
2 Ciclo
Fosforilao oxidativa
COMPLEXO IV: CITOCROMO OXIDASE
Os e do Citocromo c so entregues ao O2
4 Citc (Red) + 8 H+N +
O2
4 Citc (Oxi) +
4 H+P
2 H2O
aparentemente 3 so essenciais
Fosforilao oxidativa
COMPLEXO IV: CITOCROMO OXIDASE
Os e do Citocromo c so entregues ao O2
4 Citc (Red) + 8 H+N +
O2
4 Citc (Oxi) +
4 H+P
2 H2O
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
Resumo do processo
O2
NAD+ +
10 H+P
FADH2 + 6 H+N +
O2
FAD+ +
6 H+ P
+
+
1 H2O
1 H2O
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
NADH
H+ +
O2
DE
ELTRONS
NAD+
1 H2O
A G da reao pode ser medida a partir da diferena de voltagem entre meias clulas
n+
[
A
][
B
0'
red
ox ]
G = G + RT ln n+
n
[ Aox ][ Bred ]
wel = nfE
G = nfE
Reorganizando
n+
[
][
A
B
RT
0'
red
ox ]
E = E
ln n+
n
nf [ Aox ][ Bred ]
Equao
de Nernst
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
NADH
NADH/NAD+
O2/H2O
H+ +
DE
ELTRONS
NAD+
O2
E0 = + 0,320 V
E0 = +0,816 V
TERICO
+
1 H2O
O2
Fumarato
1 H2O
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
EFETIVO
- Gradiente de prtons
- Gradiente eletroqumico
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
FORA PROTON-MOTRIZ
DE
ELTRONS
ENERGIA ELETROQMICA
C2
G = RT ln( ) + zf
C1
C2 = H+p
C1 = H+n
Espao intermembrana
Matriz mitocondrial
1 para 1 H+
pH = log[H + ]
C2
ln
= 2,3(log[H + ]p log[H + ]n ) = 2,3( pHn pHp ) = 2,3pH
C1
Logo:
Fosforilao oxidativa
CADEIA TRANSPORTADORA
DE
ELTRONS
O2
NAD+ +
10 H+P
Logo:
G = 19 kJ/mol*10 = ~190 kJ/mol
G0 = 220 kJ/mol
1 H2O
Fosforilao oxidativa
SISTEMAS
DE
TRANSPORTE MITOCONDRIAL
Fosforilao oxidativa
SISTEMAS
DE
TRANSPORTE MITOCONDRIAL
- No h uma protena
transportadora de NADH
na MMI
- Somente os eltrons do
NADH citoslico so
transportados para a
mitocndria por um dos
vrios sistemas de
transporte
LANADEIRA DE MALATOASPARTATO
Fosforilao oxidativa
SISTEMAS
LANADEIRA
DE
GLICEROL-3-P
A glicerol-3-fosfato desidrogenase
catalisa a oxidao do NADH
citoslico pela DHAP para produzir
NAD+, o qual retorna gliclise
Os eltrons do glicerol-3-fosfato
so transferidos para a
Flavoprotena-desidrogenase da
MMI, formando FADH2,
O FADH2 fornece eltrons
diretamente para Cadeia
Transportadora de Eltrons
DE
TRANSPORTE MITOCONDRIAL
Fosforilao oxidativa
SISTEMAS
TRANSLOCADOR
DE
DE
TRANSPORTE MITOCONDRIAL
ATP/ADP-PI