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Orgnica
Alejandro Fukusaki Yoshizawa
Nstor Gomero Ostos
Lima Per
2014
Reservados todos los derechos: ningn material de este manual puede ser reproducido sin autorizacin expresa por
escrita por los autores. La autorizacin ser en hoja aparte y firmada y adosada a este material. Todo compromiso
suscrito aparte, no se refiere a este manual. Queda exento del compromiso, el fotocopiado interno en una cantidad
no mayor de 100, solo para uso con fines educativos y sin lucro
CONTENIDO
Introduccin
Normas de seguridad
ii
Captulo 2. Cristalizacin
19
Captulo 3. Destilacin
28
Captulo 4. Extraccin
36
Captulo 5. Cromatografa
45
58
68
78
86
93
104
Bibliografa
117
INTRODUCCIN
Agradezco a todos y cada uno de los profesionales que han revisado y sugerido
algunas modificaciones a los escritos previos a este Manual de Prcticas.
Asimismo, a los doctores Pedro Cueva M. y Juan Jos Len Cam coautores de las
anteriores ediciones del Manual de Prcticas de Laboratorio en Qumica Orgnica y que
muchas de las experiencias son tomadas de esa edicin, cuyo registro se encuentra
actualmente en la Biblioteca Agrcola Nacional.
SISTEMA DE EVALUACION:
Evaluacin Continua de laboratorio
[Promedio de 10 pasos (Pasos cortos)(10%) +
Promedio de Informes (5%) +
Investigacin en el laboratorio (5%)]
Primer examen parcial (cuarta semana)
Examen final (sptima semana)
10%
10%
Total Laboratorio
Nmero
de
campos
10
12
01
1
1
Normal
(%)
10
5
5
10
10
40
NORMAS DE SEGURIDAD
El descuido o desconocimiento de las normas de seguridad del laboratorio, muy a
menudo pueden originar accidentes. Por lo tanto, el estudiante debe leer todas las
normas de seguridad que se encuentra en el laboratorio y estar atento a todas las
indicaciones que el profesor haga en clases.
1. Leer cuidadosamente y con anticipacin las instrucciones que se dan en este
manual.
2. Evite las bromas y juegos en el laboratorio
3. No consumir alimentos ni bebidas en un laboratorio.
4. No llevar el cabello largo suelto. stos fcilmente se pueden quemar por accin
de los reactivos o mechero.
5. El estudiante en el laboratorio debe contar con un mandil o batas protectoras.
Mantener el mandil siempre abotonado.
6. Debe conocer la ubicacin exacta del extintor y los caos de agua.
7. Jams sentarse en la mesa del laboratorio. Trazas de soluciones custicas
pueden quemar la ropa y causar daos a la piel.
8. Si se produce un accidente, por ruptura del material, daos leves del material de
vidrio u otros, avise de inmediato al profesor.
9. No calentar ningn material de vidrio daado.
10. Tener conocimiento del encendido del mechero. Antes de abrir la llave general,
asegurarse que la llave del mechero se encuentre cerrada.
11. No encender el mechero en lugares cercanos a los reactivos inflamables, aun si
stos estuviesen cerrados.
12. Jams calentar a fuego directo lquidos inflamables. Use el bao Mara o
planchas de calentamiento.
13. Nunca calentar recipientes cerrados.
14. Calentar el tubo de ensayo con la boca de salida dirigida a la pared o a un lugar
donde la posible proyeccin del lquido no dae al compaero.
15. Al trasvasar algn solvente o reactivo a un tubo de ensayo, hgalo con cuidado
y luego lavarse las manos, aun si cree no haber derramado su contenido.
16. Si hay derramamiento de algn contenido del recipiente avise de inmediato al
profesor.
17. Si algn contenido de un recipiente salpica o cae en algn lugar del cuerpo, de
inmediato lavarse con abundante agua y avise al profesor.
18. No intente llevar la boca de los frascos a la nariz.
19. Nunca inhale los vapores de los frascos, aun si stos fueran de los slidos.
20. Cuando intente introducir un tubo de vidrio a un tapn, hgalo utilizando una
franela.
21. No arrojar residuos de los tubos de ensayos al lavatorio. Consulte al profesor.
22. No arrojar residuos slidos, ni papeles al lavatorio.
23. Antes de abandonar el laboratorio, lavarse las manos.
24. Otras indicaciones del profesor.
PROPIEDADES DE LOS
COMPUESTOS ORGNICOS
INTRODUCCIN
NH4CNO
NH2CONH2
Cianato de amonio
Urea
CaC2
+ H2O
Carburo de calcio
C2H2
Ca(OH)2
Acetileno
+ 5 O2
3 CO2 + 4 H2O
+ 3,5 O2
3 CO +
C3H8
+ 2 O2
3C
4 H2O
+ 4 H2O
CO2 + Cu
CO2 + Ba(OH)2
BaCO3 + + H2O
Parte experimental
A. Reconocimiento de la presencia de carbono e hidrgeno
1. Prueba preliminar de la presencia de carbono
En una cpsula o crisol de porcelana se coloca una pequea cantidad de una pastilla
de aspirina o cido acetil saliclico
o antalgina u otro compuesto orgnico,
previamente molida en un mortero, y se somete al calor del mechero. Despus de
unos minutos de calentamiento, observe y llene el cuadro correspondiente.
Cpsula
2. Prueba definitiva
Colocar en un tubo de ensayo seco, pequea cantidad ( 0.5 g ) de la muestra y aada
0,5 g de xido de cobre (II) en polvo muy fino.
Coloque en la boca del tubo de ensayo un tapn con un tubo de desprendimiento,
cuya salida va sumergida en una solucin de hidrxido de bario. Someterlo a la
accin de la llama de un mechero.
Si despus de unos minutos la solucin de hidrxido de bario (transparente), se
enturbia o existe la formacin de un precipitado de color blanco nos indicar la
presencia de carbonato, que indirectamente nos indicar que el compuesto orgnico
tiene carbono.
Asimismo, si observa la presencia de gotas de lquido en la parte superior fra del
tubo, indicar la presencia de hidrgeno en la muestra.
Nota: La presencia de un residuo negro, en esta prueba confirmatoria, no indica
la presencia de carbono, debido a que el xido de cobre aadido es de ese color.
CO2
Tubo con solucin de
hidrxido bario
Figura.1.2 Equipo de
combustin para la
prueba definitiva del
compuesto orgnico
muestra
BaCO3
CO2 +
10
Ba(OH)2
B. COMBUSTIN
Coloque 15 gotas de muestra (indicada por el profesor) en una cpsula y llevar a
ignicin, con un fsforo. No utilice mechero. Reporte los resultados: color de la
llama y residuo.
Figura .1. 3 Combustin de un
compuesto orgnico
C. SOLUBILIDAD O MISCIBILIDAD
Miscibilidad en Agua
Coloque 10 a 15 gotas (1mL) de muestra orgnica y aada 3 mL de agua. Agite y
observe si se forma una sola fase. En el caso de formar dos fases o si la "solucin"
se torna lechosa nos indicar que es inmiscible. Nota: observe que si se forman dos
fases, la de mayor volumen corresponde al agua (depende de la densidad del lquido
orgnico)
Agua
11
12
Mesa N
PROFESOR:
Integrantes:
1)
2)
3)
4)
Prueba preliminar
(Residuo carbonoso)
Antalgina
Muestra problema N
Conclusin sobre
la muestra problema
13
Observacin
Muestra
Confirmatoria
CO2
Observacin
agua
(Formacin de
BaCO3)
Muestra
problema N
Conclusin
Evaluacin
Plantear las ecuaciones qumicas de: combustin completa y la reaccin del
dixido de carbono con hidrxido de bario.
14
Muestra
Confirmatoria
CO2
Observacin
agua
(Formacin de
BaCO3)
Muestra
problema N
Conclusin
B. COMBUSTIN
Muestras Orgnicas
Color de la llama
1.
2
3.
4.
Evaluacin
Todos los compuestos orgnicos son combustibles?
15
C. SOLUBILIDAD O MISCIBILIDAD
Miscibilidad en Agua (Solvente polar)
Muestra orgnica
Miscibilidad en agua
Observacin
(formacin de fases)
1.
2.
3.
4.
Observaciones
1.
2.
3.
Sustancia orgnica
Solubilidad en agua
Fro
Caliente
Sacarosa
Acetanilida
rea
16
Observacin
Evaluacin
A qu atribuye las diferentes solubilidades de los compuestos
orgnicos?.
17
CUESTIONARIO
18
CRISTALIZACIN
19
INTRODUCCIN
La cristalizacin es uno de los mtodos para purificar compuestos slidos, es un
mtodo que nos permite eliminar impurezas. Muchas veces, no es suficiente un solo
proceso de cristalizacin, debido a que existen las posibilidades que ciertas
impurezas queden atrapadas en la red cristalina y para ello es necesario realizar una
recristalizacin con el fin de obtener al compuesto con un alto grado de pureza. El
grado de pureza, puede ser monitoreado a travs de mtodos como el de punto de
fusin, cromatografa en capa fina, papel, etc.
Para conseguir buenos resultados en la purificacin debern tener en cuenta los
siguientes requisitos:
El compuesto a cristalizar debe ser muy soluble a temperatura elevada.
El soluto debe ser muy poco soluble a baja temperatura.
El compuesto no debe reaccionar con el solvente, sobre todo si se trabaja a altas
temperaturas.
El soluto no debe correr el riesgo de descomposicin a la temperatura del proceso.
El solvente a emplear, adems de cumplir los requisitos anteriores puedan ser
eliminados fcilmente.
Generalmente la solubilidad de un compuesto aumenta con la temperatura. La
solubilidad de un slido en un lquido determinado es limitada y depende
fundamentalmente de la temperatura. Por ello es importante hacer un anlisis de la
curva de solubilidad y para ello se trazan un sistema de coordenadas en el cual se
comparan las cantidades de sustancias disueltas en la abscisa y temperatura en la
ordenada.
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0
10
11
12
13
14
20
Parte experimental
1. Eleccin del solvente
Colocar unos miligramos de la muestra indicada por el profesor en un tubo de
ensayo y tratar de disolverlas (fro y caliente) en los siguientes disolventes:
1. Solvente no polar
2. Cloroformo
3. Etanol
4. Agua destilada
Nota: Si la muestra es insoluble en fro calentarla en un bao mara
2. Cristalizacin
Una vez elegido el solvente ideal de cristalizacin, se colocan 5g de muestra
impura en un Erlenmeyer de 250 mL y se disuelve en 100 mL del solvente
elegido y se lleva a ebullicin. Luego se enfra y se aade 0,2 g de carbn
activado y se calienta a ebullicin, siempre con una constante agitacin). La
solucin se filtra por gravedad en caliente y se recibe en un vaso de 250 mL
(siempre mantenerlo en caliente) y el filtrado (que debe ser claro) se enfra en
un bao de agua y despus en un bao de hielo. Cuando se requieren
temperaturas ms bajas se utiliza el "hielo seco" (dixido de carbono slido) por
unos 15 minutos., no se debe forzar el enfriamiento. Se filtra a presin reducida
utilizando un embudo Bchner, con un papel filtro previamente pesado y se
lavan con unos mililitros de agua fra. Colocar el papel filtro y los cristales en
una luna de reloj y dejarlo en un desecador por 24 horas y pesar.
En el caso de tratar de recuperar al mximo el compuesto, es necesario que todo
el lquido filtrado se pase a un Erlenmeyer y se concentre por ebullicin hasta
una cuarta parte de su volumen y se enfra obtenindose una nueva porcin de
cristales (mnima).
Varilla de vidrio
Solucin
Asbesto
a)
b)
21
Varilla de vidrio
Bomba de vaco
Embudo Buchner
Cristales
Kitasato
Trampa
Muestra a
secar
Desecador
22
Mesa N
PROFESOR:
Integrantes:
1)
2)
3)
4)
PRCTICA N 2: CRISTALIZACIN
Cloroformo
Etanol
fro
fro
fro
calor
calor
Agua
calor
Conclusin
23
fro
c. actico
calor
fro
calor
Evaluacin
Cules son las caractersticas de un buen solvente de purificacin?
3. Cristalizacin de la acetanilida
Muestra
origina(g)
Cristales
+
papel filtro(g)
Cristales(g)
Porcentaje del
cristales
Evaluacin
Existe alguna diferencia al comparar muestras que utilizaron carbn activado y
otras que no la hicieron
En esta ltima operacin, por qu fue necesario filtrar con embudo de Vstago
corto y no largo?
24
25
CUESTIONARIO
1.Cul fue el rendimiento prctico, que obtuvo en la cristalizacin de la sustancia
purificada?
110
10 0
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0
g / 10 0 mL
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0
10
11
12
13
26
14
27
DESTILACIN
28
INTRODUCCIN
La destilacin es un mtodo de purificacin de lquidos o de lquidos con impurezas
no voltiles, se basa en la conversin de un lquido a vapor ebullicin (vaporizacin)
y el enfriamiento de ste para retornar al estado lquido (condensacin).
El mtodo se basa en las diferentes volatilidades de los componentes que forman el
lquido a purificar o separar. Por ello hay varios tipos de destilacin , siendo los ms
importantes : Destilacin Simple, destilacin fraccionada, destilacin a presin
reducida (al vaco) y Destilacin por arrastre con vapor.
29
T
Figura 3.2 . Grfica obtenida en la
destilacin simple de lquidos puros o
con impurezas no voltiles.
Vol
DESTILACIN DE MEZCLAS
En una mezcla de 2 o ms sustancias voltiles, la PRESIN DE VAPOR TOTAL
estar en funcin de la presin de vapor de los componentes y de sus fracciones
molares (excepto cuando forman mezclas azeotrpicas).
Segn la ley de Raoult: La presin parcial de un componente (en una solucin
ideal) es igual a su presin de vapor multiplicada por su fraccin molar.
Adems, la presin de vapor total ser igual a la suma de las presiones (de vapor)
parciales de los componentes. Para una mezcla de lquidos a,b,c, etc., esto se
representa as.
P = PaNa + PbNb + PcNc + .... + PnNn
Donde: P = presin de vapor total
Pa, Pb, Pc, etc. Son las presiones parciales de a, b, c, etc.
Na, Nb, Nc, etc. Son las fracciones molares de Na, Nb, Nc, etc.
Por consiguiente: Pa Na o Pb Nb, etc. Ser la presin parcial de a,b,, etc.
respectivamente. La solucin empezar a hervir cuando la presin de vapor total
(P) alcanza el valor de la presin atmosfrica.
P = PaNa + PaNa + + PnNn
La separacin de mezclas formadas por componentes de presin de vapor similar
slo podr hacerse mediante una destilacin fraccionada.
30
DESTILACIN FRACCIONADA
Es una tcnica que nos permite realizar una serie completa de vaporizaciones y
condensaciones pequeas en una operacin sencilla y continua, valindose para ello
de una columna de fraccionamiento cuyo principio es proporcionar una gran
superficie para el intercambio de calor entre el vapor ascendente (ms caliente) y el
condensado descendente (ms fro). La columna de fraccionamiento se coloca entre
el baln de destilacin y el condensador o refrigerante.
DESTILACIN A PRESION REDUCIDA
Pra separar o purificar compuestos que tengan puntos de ebullicin superiores a
200C o que se descompongan a temperaturas menores o prximas a su punto de
ebullicin es conveniente tomar en cuenta que el p.e. depende de la presin
circundante; por lo tanto, se le puede disminuir reduciendo la presin a la que se
efecta la destilacin.
PROCEDIMIENTO
APLICACIN DE LA DESTILACIN SIMPLE EN LA DETERMINACIN
DEL GRADO ALCOHLICO DEL VINO
a) Si el vino est cido (avinagrado) neutralizarlo con 0,1 g de CaCO3 u otro
lcali, hasta neutralidad.
b) Colocar 100 mL de vino y tmaras de ebullicin al baln de destilacin
simple y proceder a la destilacin segn lo indicado anteriormente . Ir
recogiendo el destilado en una probeta graduada.
c)
Volumen de 5
destilado
(mL)
10 15 20 25 30
Temperatura
(C)
32
35
40 45 50
vo l/vol
11,0
12,0
13,0
14,0
15,0
16,0
17.0
18,0
19,0
20,0
21,0
22,0
23,0
24,0
25,0
26,0
27,0
28,0
29,0
30,0
35,0
40,0
45,0
50,0
55,0
60,0
65,0
70,0
75,0
80,0
85,0
90,0
95,0
100,0
Gravedad
especfica
Peso/peso
Peso/vol
8,86
9,67
10,49
11,31
12,13
12,95
13,78
14,60
15,43
16,26
17,09
17,92
18,76
19,59
20,43
21,27
22,11
22,96
23,81
24,66
28,96
33,35
37,84
42,47
47,23
52,16
57,21
62,45
67,84
73,54
79,40
85,66
92,41
100,0
8,73
9.52
10,31
11,11
11,90
12,69
13,49
14,28
15,08
15,87
16,66
17,46
18,26
19,04
19,84
20,63
21,43
22,22
23,01
23,81
27,78
31,74
35,71
39,69
43,66
47,63
51,59
55,56
59,53
63,51
67,47
71,44
75,41
79,39
33
0,98546
0,98435
0,98326
0,98219
0,98114
0,98011
0,97909
0,97808
0,97708
0,97608
0,97507
0,97406
0,97304
0,97201
0,97097
0,96991
0,96883
0,96772
0,96658
0,96541
0,95910
0,95185
0,94364
0,9344
0,9244
0,9136
0,9021
0,8900
0,8773
0,8639
0,8496
0,8339
0,8161
0,7939
Mesa N
PROFESOR:
Integrantes:
1)
2)
3)
4)
PRCTICA N 3: DESTILACION
Evaluacin:
Utilizara una destilacin simple para purificar el agua potable?. Dnde se
quedaran las impurezas?. cules serian las impurezas en el agua potable?
34
muestra?.
35
CUESTIONARIO
1. Graficar la curva de destilacin de A (p.e. 50 C) y B (p.e. 100 C) para
cada una de las siguientes situaciones:
a.
b.
c.
A y B no forman azeotropo
A y B forman azeotropo : A. est presente en gran exceso en
la mezcla inicial.
A y B forman azeotropo; B est presente en gran exceso en la
mezcla inicial.
2. Calcular la presin de vapor total a 100 C de una solucin ideal que consta
de 0,6 moles del compuesto X y 0,4 moles del compuesto Y. La
presin de vapor de X puro a 100 C es de 600 mm, y el de Y puro a 100
C es de 80 mm Hg. Cul es la presin parcial de cada componente en el
vapor?.
3. Diferencias entre evaporacin y ebullicin
4. Fundamento y aplicaciones de la destilacin por arrastre con vapor de agua.
36
EXTRACCIN
37
EXTRACCION LQUIDO-SLIDO
Para ello se hace uso de equipos adecuados, siendo el mas utilizado el extractor
SOXHLET, que consta de 3 partes fundamentales: El matraz inferior; que contiene
el solvente de extraccin, la parte central o extractor propiamente dicho, donde se
coloca la muestra slida a extraer (Aqu se realiza la extraccin) y un refrigerante
superior.
38
COEFICIENTE DE REPARTO
Cuando se agita una solucin acuosa de una sustancia con un solvente orgnico
(por ejemplo ter), el compuesto se distribuye parcialmente en ambos solventes.
Esta distribucin se realiza hasta que alcanza el equilibrio, el que se logra cuando la
relacin entre las concentraciones de la sustancia en la capa orgnica y acuosa sea
igual a una constante, llamada Coeficiente de reparto o Coeficiente de
distribucin (Kd) que es especfica del soluto, del par de solventes y la temperatura
de trabajo.
A su vez, este coeficiente es proporcional a la solubilidad del compuesto en el
solvente orgnico y en el agua.:
Kd = Co/Ca = So/Sa
Co = Concentracin en la capa orgnica
Co = Concentracin en la capa acuosa
So = Solubilidad en el solvente orgnico
Sa= solubilidad en agua
Por ejemplo, si la solubilidad de un compuesto en ter es de 0,6 g/100 mL y en
agua es de 0,12 g/100 mL, su Kd para el sistema ter/agua es: :
Kd = 0,60/0,12 = 5
Conociendo la concentracin de la sustancia en la solubilidad acuosa y su Kd,
puede calcularse la cantidad que se puede extraer con un volumen determinado de
solvente, o la cantidad del solvente que se necesita para extraer una cantidad del
compuesto.
Puede tambin comprobarse que si se hacen varias extracciones con cantidades
pequeas del lquido exactamente (extraccin mltiple) se puede extraer mayor
cantidad de sustancia que haciendo una extraccin con el mismo volumen total del
solvente.
Por ejemplo: si se tiene una solucin de 40 mg de cido butrico en 50 mL de agua:
39
Solucin:
Sea X la cantidad extrada, tendremos:
a) Extraccin simple:
X
50
Kd = Co/Ca = 3 =
X = 30 mg de c. Butrico extrado
40-X
50
b) Extraccin mltiple:
1ra. Extraccin (25 mL de benceno)
X/25
3=
X = 24 mg extradas con 25 mL de
benceno (quedan en la fase acuosa
40-24 = 16 mg de c. Butrico)
(40-X`)/50
2 da. Extraccin (25 ml de benceno)
X/25
3=
(16-X)/50
CONCLUSIN
Como se puede deducir, en la extraccin mltiple se extrae ms (24 + 9.6 =33.6
mg) que en la extraccin simple (30 mg) habindose utilizado en ambos casos un
volumen total de 50ml de Benceno.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
EXTRACCIN LQUIDO SLIDO. Extraccin de grasas de harina de
pescado o extraccin de grasa de harina de maz.
Tarar el matraz y armar el equipo Soxhlet sobre la plancha elctrica de
calentamiento o bao mara, como se indica en la figura.
Colocar en el cartucho de extraccin 10 g de harina de pescado y cubrirlo con un
pedazo de algodn. Agregar ter de petrleo o n-hexano por la parte superior del
refrigerante (use un embudo) hasta que el lquido sifone. Adicione unos 30 mL
ms de solvente.
Haga circular agua por el refrigerante e inicie el calentamiento de tal manera que el
solvente hierva suavemente. Contine la operacin hasta que el extracto sifone de
color claro, casi incoloro.
EXTRACCIN LQUIDO-LQUIDO DE UN COLORANTE
1. ELECCIN DE UN SOLVENTE
Agregar a 4 tubos de prueba 10 gotas de solucin de cristal violeta, aadir a
cada tubo 20 gotas de etanol, cloroformo, n-hexano y agua, respectivamente.
41
Agitar a fin de poner en contacto los diferentes solventes con la solucin del
colorante, dejar en reposo y observe la densidad y color de la capa orgnica.
(agregar NaCl si se formase emulsin). Observe y compare los resultados.
2. EXTRACCIN SIMPLE
Elegido el solvente que rene las condiciones necesarias para una buena
extraccin, se procede a poner en un embudo de separacin 15 mL de la
solucin de cristal violeta y se aaden 15 mL del solvente elegido. Recoger la
fase orgnica en un tubo de ensayo y la acuosa en otro tubo, tapar los tubos y
guardarlos para una observacin y comparacin posterior.
3. EXTRACCIN MLTIPLE
Tomar 15 mL de la solucin acuosa de cristal violeta elegido y proceder a
extraer con porciones de 5 mL por tres veces, reunir los extractos en un tubo de
ensayo y recoger la solucin acuosa remanente en un cuarto tubo. Comparar la
intensidad del color de las soluciones orgnicas y de las dos acuosas. Anotar los
resultados.
42
1)
2)
3)
4)
PRCTICA N 4: EXTRACCIN
ETANOL
CLOROFORMO
n-HEXANO
Evaluacin:
Es necesario que en una extraccin lquido-lquido, se formen las dos
fases?.Por qu?
43
Extraccin Simple
Evaluacin
Cmo pudo comprobar que en la solucin acuosa queda muy poco de la
sustancia extrada?.
Evaluacin
Cmo demuestras que la extraccin mltiple es ms eficiente que la
simple?.
44
CUESTIONARIO
1. Teniendo en cuenta la densidad y solubilidad en agua de los siguientes
solventes, indicar cules de ellos ocuparn la capa superior en una
extraccin acuosa utilizando el embudo de separacin:
a. Tetracloruro de carbono
c. cido aradquidnico
e. Alcohol isoproplico
b. Alcohol etlico
d. cido lurico
f. Acetona
El coeficiente de distribucin
del cido isobutrco en el sistema ter
etlico/agua a 25 C es 3. Si tenemos una solucin de 40 g de cido
isobutrico en 1 L de agua y la extraemos con 800 mL de ter etlico (una
sola extraccin). Cuntos gramos del cido pasarn a la capa orgnica y
cuntos permanecern en la capa acuosa?. Cuntos gramos de cido se
extraern , si se realizarn dos extracciones con 400 mL de ter etlico cada
una?. Cul de los dos casos la extraccin es ms eficiente?.
45
CROMATOGRAFA
46
INTRODUCCIN
a) Vista frontal
b) Vista transversal(corte)
Fija o estacionaria
(Silicagel, almina
almidn, celulosa, etc.)
S o p o r t e (v i d r i o ,
Plstico fibras,,
metal)
Fase mvil
Muestra
47
TIPOS DE CROMATOGRAFA
Segn el fenmeno fsico predominante y el estado fsico de las fases involucradas,
existen 3 tipos bsicos de cromatografa: de adsorcin, de particin y de
intercambio inico.
Por ello, es ms comn clasificarla en: Cromatografa sobre papel, en capa fina
(c.c.f.), en columna (c.c.), en fase gaseosa (c.g.), Cromatografa de alta
performancia (HPLC) segn la tcnica empleada y la naturaleza de las fases.
1. CROMATOGRAFIA DE ADSORCIN
Es aquel sistema cromatogrfico en que la fase fija es un slido y la separacin o
desplazamiento depende del equilibrio adsorcin-desorcin entre el compuesto y las
fases fija y mvil.
La adsorcin es un fenmeno fsico de superficie que consiste en que las molculas
de una sustancia (adsorbato) se adhieren o concentran en la superficie de un slido
finamente dividido (adsorbente). El proceso inverso, o sea la separacin de las
molculas adsorbidas se denomina desorcin.
Solvente
Muestra
Fase estacionaria
soporte
48
Muestra
Fase estacionaria
(lquida)
Sembrado
Secado
Desarrollo
Frente
c
A
a
Origen
Rf de A = a/c y Rf de B = b/c
Figura 5.5 .Esquema de un cromatograma desarrollado y el clculo de Rf
50
debe estar pulverizado y seco. Si es de particin, las partculas slidas deben estar
cubiertas de una capa lquida.
Se deposita o siembra la muestra a separar (en solucin) por la parte superior de la
columna y luego se va adicionando la fase mvil (elucin).
El eluyente tratar de arrastrar las sustancias hacia abajo, mientras que la fase fija
tratar de retenerlas. Segn el equilibrio adsorcin desorcin o segn el coeficiente
de solubilidad de cada compuesto, algunos sern desalojados (eluidos) ms
rpidamente que otros, y los recibiremos primero.
El mtodo consta de 3 etapas: llenado de la columna, aplicacin de la muestra y
elucin.
El llenado tiene por objeto preparar una columna uniformemente compacta, sin
rajaduras ni burbujas de aire. Puede hacerse de 2 maneras:
a)
Solvente de desarrollo
Adsorbente
Columna
cromatogrfica
eluato
Figura 5.6. . Elusin de la columna cromatogrfica.
51
53
53
54
Integrantes:
1)
2)
3)
4)
PRCTICAS N 5: CROMATOGRAFA
Mezcla
Comp.
Distancias
(Muestra, cm)
Distancia
(solvente, cm)
Rf
54
Comp. B
55
Comp. A
Comp. B
Mezcla
comp. A
comp.B
Distancias B
(Muestra, cm)
Distancia
(solvente, cm)
Rf
EVALUACIN
Cules son las partes de un cromatograma desarrollado?.
Cul de los dos compuestos tiene mayor afinidad por la fase fija
o estacionaria?
Rf B =
C.C.F
Rf A =
Rf B =
3. CROMATOGRAFIA EN COLUMNA
Evaluacin
Hubo diferencia en cuanto a la cantidad de muestra sembrada?
56
56
57
57
58
CUESTIONARIO
1. Haga un esquema de un cromatograma desarrollado e indique cada una de las
partes.
2. Cules son las diferencias entre la c.c.f. y la de papel?
3. Cmo ubicaras las posiciones de las sustancias incoloras en un
cromatograma?
4. Cmo encuentras el solvente ideal de separacin cromatogrfica para una
muestra desconocida?.
5. Cite algunas aplicaciones de la cromatografa en su especialidad.
6. Interprete los valores de Rf 0,05; 0,5 y 0,98
7. Si al realizar el desarrollo de un cromatograma y encuentra el Rf de 0,1, lo
escogera como un buen solvente de desarrollo. Por qu?.
8. Explique algn mtodo para localizar las bandas de adsorcin cuando se trabaja
con sustancias incoloras en una columna.
9. D algunas aplicaciones prcticas de la cromatografa en columna?.
10. Haga un breve resumen del la Cromatografa lquida de alta performance.
58
59
PROPIEDADES QUMICAS
DE HIDROCARBUROS
59
60
INTRODUCCIN
La familia ms simple de los compuestos orgnicos son los hidrocarburos.
Estos se encuentran constituidos por tomos de carbono e hidrgeno.
Los ALCANOS, son prcticamente inertes y generalmente insolubles no slo
en disolventes polares corrientes (agua) sino tambin en cido sulfrico
concentrado en fro. En condiciones especficas estos hidrocarburos sufren
algunas reacciones, la mayora de las cuales no son de carcter preparativo en
el laboratorio.
En los ALQUENOS y ALQUINOS, el doble y triple enlace respectivamente,
hace que las molculas sean mucho ms reactivas que un alcano y capaces de
dar reacciones de ADICION antes que de SUSTITUCION.
En el caso de los hidrocarburos AROMTICOS, se diferencian de los
hidrocarburos NO SATURADOS porque generalmente no sufren las
reacciones de ADICIN sino de SUSTITUCIN.
ALCANOS Y ALQUENOS
Las siguientes pruebas sirven para distinguir las propiedades caractersticas de
los hidrocarburos SATURADOS y NO SATURADOS, y con ellas poder
diferenciarlos. En esta primera parte se har uso del bromo disuelto en
tetracloruro de carbono y permanganato de potasio en medio acuoso, reactivos
con los cuales se podr visualizar la ausencia o presencia de insaturaciones en
la cadena hidrocarbonada, sea por desprendimiento del bromuro de hidrgeno
(HBr) o por cambio de coloracin.
Ejemplo: bromacin de un hidrocarburo saturado (sustitucin):
1-Bromobutano
2-Bromobutano
60
61
1-Buteno
1,2-dibromobutano
Eteno
1,2-Etanodiol
No hay reaccin
Butano
No hay reaccin
Benceno
Otro ensayo para doble enlace C = C, es la reaccin con cido sulfrico (H2SO4).
Los hidrocarburos saturados y aromticos al medio ambiente no reaccionan,
mientras que los instaurados adicionan H2SO4.
Ejemplo de reaccin con H2SO4
61
62
HIDROCARBUROS AROMTICOS
En ausencia de energa y catalizadores el bromo no ataca a los compuestos
aromticos (el anillo bsico), pero cuando se le aade limaduras de fierro
(catalizador) y se calienta suavemente tiene lugar la reaccin producindose
derivados bromados con desprendimiento del bromuro de hidrgeno (HBr).
Obsrvese que resulta una reaccin de SUSTITUCIN y no de ADICIN.
+ Br2
Benceno
Bromobenceno
- NO2
+ H2O
PARTE EXPERIMENTAL
1. Ensayo con solucin de bromo en tetracloruro de carbono (Br2/CCl4)
Tome 5 tubos de ensayo y numrelos. A los tubos N 1 y 2 colocarle 15 gotas
de n-Hexano, al N 3 15 gotas de un alqueno, al N4, 15 gotas de benceno, al
N 5, 15 gotas de la muestra problema.
A cada uno de los tubos agrguele 4 gotas de Br2/CCl4. Guardar el tubo N1 en
un cajn (oscuridad).
Observe las diferencias en la coloracin. Despus de 10 retirar el tubo N1 del
cajn y comparar con el tubo N2. Explique
2. Ensayo de Baeyer (Solucin acuosa de KMnO4)
62
63
63
64
1)
2)
3)
4)
COMPETENCIA ESPECFICA:
Verificacin de la reactividad de los
compuestos hidrocarbonados y los factores que influyen una reaccin mediante la
visualizacin en el cambio de color, formacin de precipitado u otros parmetros
de medida tangibles que demuestren que la reaccin se ha llevado a cabo, de
manera que se puedan diferenciar los tipos de hidrocarburos.
1.
Hidrocarburos
Oscuridad
Alcano
Alqueno
Aromticos
Muestra problema N
64
Observacin
65
Evaluacin
Es necesaria la presencia de luz, en la reaccin de halogenacin, para que
reaccionen los alcanos?. Cmo verific la necesidad de luz en la reaccin?
KMnO4 / H2O
Hidrocarburos
Alcanos
Alquenos
Aromticos
Muestra Problema N
65
Observacin
66
Evaluacin:
Reactivos
H2SO4
Hidrocarburos
Alcanos (enlaces simples)
Alquenos (enlaces dobles)
Aromticos
Muestra Problema N
66
Observacin
67
Evaluacin:
Cmo visualiz que la reaccin ha procedido?
Es la reaccin exotrmica?
Muestra Problema N
67
Observacin
68
CUESTIONARIO
1. Se tiene cuatro frascos con muestra de hidrocarburos (saturados,
insaturados y aromticos) y de cada uno de los frascos se toman muestras
para realizar las pruebas qumicas para identificarlos. El siguiente cuadro
muestra los resultados de las pruebas.
En la columna de identificacin coloque el tipo de hidrocarburos
Muestras
1
2
3
Baeyer
+++
-
Bromo/CCl4
++++
+
H2SO4
+++
-
Identificacin
KMnO4 + H2O
KMnO4 + H2O
+ H2SO4
5.
6.
68
69
PROPIEDADES QUMICAS
DE ALCOHOLES
69
70
INTRODUCCIN
Los alcoholes son compuestos orgnicos que tienen el grupo hidroxilo unido
directamente a un carbono saturado y los fenoles a un anillo aromtico.
CH3
CH3 C - OH
CH OH
CH3 - CH2 - OH
Alcohol etlico
(Primario)
CH3
CH3
Alcohol isoproplico
(Secundario)
Fenol
CH3
Alcohol t-butlico
(Terciario)
1-Naftol
(-Naftol)
2-Naftol
(-Naftol)
Los alcoholes son menos cidos que los fenoles. La diferencia de la acidez relativa
entre el alcohol y fenol se debe a: por el efecto inductivo de los grupos alquilos
que refuerza el enlace O-H y por estabilidad por resonancia del anillo aromtico,
que debilita el enlace O-H en los fenoles.
Los ensayos experimentales que realizaremos para alcoholes estn orientados a
reconocer el grupo funcional HIDROXILO y a la vez diferenciar su reactividad.
As, utilizaremos sodio metlico (Na) para diferenciar los alcoholes:
2R - OH + Na
Alcohol
2R - O - Na+
alcxido
H2
Hidrgeno (gas)
70
71
R- CHOH - R
R - CO - R
RED
Alcohol 1
R - CH2OH
Alcohol 2
R2CHOH
Alcohol 3
R3COH
RCOOH
cido carboxlico
R2C = 0
Cetona
OXI
OXI
No reacciona
71
72
72
73
1)
2)
3)
4)
Reactivos
Sodio
Compuestos
Alcohol primario
Alcohol secundario
Alcohol terciario
Fenol
Muestra problema N
73
Observacin
Evaluacin
Cmo verific que los compuestos reaccionaban con el sodio metlico?
74
74
75
Observacin
Compuestos
Alcohol primario
Alcohol secundario
Alcohol terciario
Muestra problema N
Evaluacin:
Cmo verific que se produjo la reaccin?
75
76
Reactivos
H2SO4/CrO3
Observacin
Compuestos
Alcohol primario
Alcohol secundario
Alcohol terciario
Muestra problema N
Evaluacin:
Cmo reconoci que hubo reaccin?
76
77
Observacin
Compuestos
Alcohol primario
Alcohol secundario
Alcohol terciario
Fenol
Muestra problema N
Evaluacin:
Cmo verific que solamente los fenoles reaccionan con el reactivo?
77
78
CUESTIONARIO
1. Proponga, al menos dos reacciones qumicas que demuestren el
comportamiento diferenciados entre los alcoholes y los fenoles?
2. Que utilidad tiene la reaccin de los alcoholes con el reactivo de BordellWellman con los alcoholes?. Explique
3. Cmo comprobar, mediante reacciones qumicas, que la muestra recibida es
un fenol o derivado de ste?.
4.
Dibuje las estructuras de los alcoholes y los reactivos que se necesitan para
producir:
a) Cloruro de t-butilo
b) 2-buteno
Incluya las reacciones para producir estos compuestos a partir del alcohol que
eligi.
5.
6. Con cul de los reactivos utilizados en esta prctica , podemos afirmar que una
infusin de t tiene derivados fenlicos.
78
79
PROPIEDADES QUMICAS
DE ALDEHDOS Y CETONAS
79
80
CH3CH2CHO
Propanal
48
CH3COCH3
Acetona
56
CH3CH2CH2OH
Propanol
97,1
Aldehdos
H
R
C=O
H
Cetonas
R
C=O
Ar
C=O
R
Ar
C=O
C=O
C=O
Ar
Ar
Los aldehdos y cetonas por tener el mismo grupo funcional presentan numerosas
reacciones qumicas comunes. Entre ellas tenemos las de adicin (Bisulfito de
sodio), condensacin (formacin de fenilhidrazonas, 2-4-dinitrofenilhidrazonas)
etc.
Sin embargo, otras reacciones permiten diferenciarlos por ejemplo las cetonas se
caracterizan por ser muy estables y son oxidadas solamente en condiciones
enrgicas mientras que los aldehdos son oxidados fcilmente a cidos. Es por ello
que los aldehdos reducen el licor de Fehling y la solucin de nitrato de plata
amoniacal (ensayo Tollens) con formacin de xido cuproso y plata metlica,
respectivamente. Estas dos primeras pruebas nos permiten diferenciar los aldehdos
de las cetonas (ensayos de diferenciacin).
Ecuacin de reaccin con el reactivo de Fehling
_
_
R. de Fehling
Cu2O
+ 3H2O
80
81
R - C = N - NH
+ H2O
|
H
Fenilhidrazona (slido)
(de aldehdo o cetona)
C = O + H2N- NH -
- NO2
C = N - NH -
NO2
Aldehdo o
Cetona
2,4-D.N.F.Hidracina
- NO2 + H20
NO2
2,4-D.N.F. Hidrazona del Aldehdo o
Cetona (slido)
Ciclohexanol
Ciclohexanona
81
82
82
83
Integrantes:
1)
2)
3)
4)
2,4-Dinitrofenilhidracina
Aldehdo
Cetona
Muestra N
83
Discusin
84
Evaluacin
Cmo verific la presencia de los grupos carbonlicos de aldehdos y cetonas?
Evaluacin:
Cmo verific que la reaccin de Fehling dio positiva?
84
85
Evaluacin:
Schiff
Aldehdo
Cetona
Muestra Problema No
85
Observacin
86
CUESTIONARIO
1. Marque con una X los compuestos que se pueden oxidar con el reactivo de
Tollens
(
(
) Gliceraldehdo
) 2- metil pentano
(
(
) Pelargonaldehdo (
) Formol
(
) Dietilcetona
)Valeraldehdo
2. Se tiene una muestra "M" con grupo carbonilo, a la cual se le ha realizado las
siguientes pruebas:
Reactivos
Resultado
Fehling
Tollens
2,4-DNF
Hidracina
86
87
PROPIEDADES QUMICAS
LPIDOS SAPONIFICABLES
87
88
INTRODUCCIN
Las grasas de origen animal o vegetal estn constituidas principalmente por
glicridos o triglicridos. El trmino de glicrido es un nombre especial para
designar los steres del glicerol (1,2,3-propanotriol) con cidos monocarboxlicos,
generalmente de elevado peso molecular (cidos grasos), saturados o instaurados.
Como cualquier ster, los glicridos pueden ser hidrolizados, obtenindose el
glicerol y los correspondientes cidos grasos.
O
||
O
CH2 - OC - R1
CH2OH
|
CH - OH
R2 - COOH
|
CH2OH
||
R1 - COOH
R3 - COOH
|
GLICEROL
R2 - CO - CH
CIDOS
GRASOS
Los tres radicales cidos unidos a la molcula de glicerol pueden ser iguales o
diferentes en este ltimo caso se conoce como glicrido mixto y por hidrlisis
obtendremos una mezcla de varios cidos grasos diferentes.
88
89
PARTE EXPERIMENTAL
1. Saponificacin de una grasa
En un vaso de 250 mL colocar 10 g de sebo. En otro vaso se disuelve 3 g de
hidrxido de sodio en 12 mL de agua. se adicionan 5 mL de esta solucin al
vaso que contiene el sebo y se calienta en bao mara a 60-70C durante unos
20 minutos con constante agitacin.
Aadir 3 4 mL de la solucin de hidrxido de sodio y 5 mL de etanol. Cubrir
el vaso con una luna de reloj y seguir calentando (con agitacin) por unos 15
minutos. Luego aadir el resto de la solucin de hidrxido de sodio y dejar que
la temperatura suba a unos 90-95C mantenindola por unos minutos ms.
Para comprobar que la saponificacin se ha completado, sacar unas gotas de la
solucin y verterlas en unos mL de agua; si aparecen gotitas de aceite la
saponificacin an no es completa. En este caso retirar el b.m., aadir unos 5
mL de agua y 5 mL de alcohol y calentar el vaso con llama pequea de un
mechero de Bunsen (utilizar rejilla de amianto) manteniendo a ebullicin por
unos minutos, hasta completar la saponificacin.
Aadir 50 mL de agua caliente y agitar hasta tener una mezcla homognea.
Luego verter con agitacin sobre 250 mL de agua fra en la que se ha disuelto
20g de sal comn.
El jabn que se separa es filtrado con succin y se lava con 10 mL de agua fra
y luego realice los siguientes ensayos:
a) Reaccin.- Disolver un trocito de jabn en etanol absoluto calentando si es
necesario. Dejar enfriar y ensayar la reaccin con una gota de fenolftaleina.
No debe dar reaccin alcalina.
Al diluir esta solucin con agua, aparecer una coloracin roja (Explique
este fenmeno).
b) Precipitacin con sales de calcio, magnesio, etc.- Disuelva un trocito de
jabn en unos 5 mL de agua destilada, calentando si es necesario. Divida la
solucin de jabn en 2 partes: adicionar gotas de solucin de cloruro de
calcio (a una parte) y de cloruro de magnesio (a la otra). Observar y
explicar.
89
90
90
91
Integrantes:
1)
2)
3)
4)
91
92
92
93
CUESTIONARIO
1. Sugiera un mtodo para recuperar la glicerina que queda como subproducto
en la fabricacin de jabones.
2. Qu sucede cuando se utiliza un jabn con las llamadas "aguas duras"?
3. Por qu un jabn que aparece como neutro en soluciones alcohlicas resulta
alcalino en solucin acuosa?
4. A qu se llama ndice de saponificacin e ndice de yodo? cul es su
utilidad?
5. Formule la ecuacin entre un jabn sdico y los iones calcio.
6. En qu consiste y para qu sirve la hidrogenacin de aceites?
7. Qu diferencias existen entre un jabn sdico y uno potsico?
93
94
PROPIEDADES QUMICAS
DE CARBOHIDRATOS
94
95
INTRODUCCIN
Los carbohidratos, glcidos o azcares, son los componentes ms abundantes de la
mayora de las plantas, siendo los productos naturales ms oxigenados. Como
azcares simples proveen de una rpida y suplementaria fuente de energa para
animales y plantas.
Los de mayor peso molecular (polisacridos, polmeros naturales) cumplen
importante rol en los organismos vivos, sea como almacn de energa (almidn y
glucgeno) o formando el material estructural de las paredes celulares, cumpliendo
la funcin de sostn del vegetal (celulosa).
ENSAYO DE MOLISH
Es una prueba que
nos permite reconocer azcares de otras sustancias. Los
monosacridos por accin de un cido fuerte se deshidratan produciendo furfural o
derivados del furfural, que por accin del -naftol forma un complejo coloreado
(Azul). Los di y polisacridos son hidrolizados a monosacridos, por accin del
cido fuerte y luego son convertidos a furfural o derivados del furfural.
CHO
|
CHOH
|
CHOH
|
CHOH
|
CHOH
|
CH2OH
H+
CHO
|
C
||
CH
|
O
CH
HOCH2
CH+O 3 H2O
O
||
C
|
5-hidroximetilfurfural
CH2OH
El carcter reductor de las cetosas ha sido explicado como un efecto del medio
alcalino en que se encuentran estos reactivos. Se ha encontrado que los lcalis
diluidos producen en estas molculas una parcial ISOMERIZACIN que
transforma molculas de cetosa en aldosa.
95
96
CH2OH
|
C=O
|
H - C - OH
Cetosa
CHOH
CHO
HO - C - H
|
H - C - OH
CHO
C - OH
H - C - OH
|
H - C - OH
|
H - C - OH
(A)
"ENO-DIOL"
(A)
CH = N - NH N - NH H2N - NH
NH2
+ 3
CH2OH
D-Glucosa
+
CH2OH
Glucosazona
96
+ NH3 + 2H2O
Anilina
97
HIDRLISIS DE Di Y POLISACRIDOS
Los di, oligo y polisacridos
pueden ser degradados o hidrolizados hasta
transformarlos en las unidades - monosacridos - que los constituyen. La hidrlisis
puede realizarse por mtodos qumicos (en el laboratorio) o mediante enzimas (en
los organismos vivos). La hidrlisis qumica requiere, generalmente, de
catalizadores (por ej. cidos minerales) y calor. La hidrlisis enzimtica tiene
carcter selectivo.
La hidrlisis de un disacrido como la sacarosa, puede representarse as:
C12H22O11 +
Sacarosa
H2O
C6H12O6 + C6H12O6
D-Glucosa
D-Fructosa
PARTE EXPERIMENTAL
1. Ensayo de Molish: Reconocimiento de Glcidos
Este ensayo es positivo con todos los carbohidratos solubles.
Colocar en un tubo de ensayo 15 gotas de glucosa al 0.1% y aada 2 gotas de
solucin de -naftol. Agregar cuidadosamente H2SO4 concentrado de tal
manera que resbale lentamente por la pared interna del tubo de ensayo (adicin
"en zona"). La formacin de un anillo de color prpura en la interfase nos
indica que la reaccin es positiva. Repita con la sacarosa, solucin de almidn
y muestra problema.
98
caliente por 1.5, saque y agite. Contine calentando. Despus de los 20de
calentamiento aparecen los cristales de osazona.
4. Hidrlisis de la sacarosa
Colocar en 2 tubos de ensayo 20 gotas de sacarosa al 5% a uno de ellos
agregarle 3 gotas gotas de HCl concentrado, caliente ambos tubos en b.m. por
5. Enfre y agregue una solucin saturada de carbonato de sodio hasta
neutralizar. Hacer prueba de Fehling en los 2 tubos de ensayo. Anote y
explique lo ocurrido.
5. Hidrlisis de almidn
Agite 1 g de almidn en unos 10 mL de agua fra y vierta esta suspensin
lechosa en 150 mL de agua a ebullicin. Se formar una solucin coloidal.
Saque 1 mL de esta solucin, enfrela y adicione 1 2 gotas de Lugol, observar
la coloracin intensamente azul caracterstica del almidn con este reactivo
(guarde el tubo en su gradilla).
Al resto de la solucin adicinele 30 gotas de cido clorhdrico concentrado y
mantngala a ebullicin con llama baja. Cada 3 minutos tome dos muestras de
la solucin (de 1 cc c/u) en tubos de prueba: En uno de ellos realice el ensayo
de Fehling y al otro tubo enfriarlo y agrguele 1 gota de LUGOL. Coloque los
2 tubos en su gradilla, observe y anote la coloracin con Lugol y si hay
precipitado rojo en el ensayo de Fehling.
Estos ensayos deben realizarse hasta que la coloracin con el lugol y el ensayo
de Fehling nos indiquen que todo el almidn se ha transformado en glucosa.
98
99
Integrantes:
1)
2)
3)
4)
Glucosa
Fructosa
Sacarosa
Almidn
Muestra problema N
99
Observacin
100
Evaluacin:
Fenilihidracina
Glucosa
Fructosa
Sacarosa
Almidn
Muestra problema N
100
Observacin
Evaluacin:
Cmo se comprueba el poder reductor de un glcido?.
101
101
102
Observacin
Sacarosa
Sacarosa hidrolizada
Evaluacin :
Cmo comprob que la sacarosa se encuentra hidrolizada?.
Hidrlisis de almidn
Tiempo
(min)
Lugol
Fehling
102
12
15
18
21
103
Evaluacin
103
104
CUESTIONARIO
1. Indique cules de los siguientes glcidos son reductores
a)
b)
c)
d)
D-Alosa
D-Arabinosa
Glucgeno
Celulosa
e) Lactosa
f) Maltosa
g) Sacarosa
h) D-Ribosa
3. Dibujar las estructuras de los glcidos que dan la misma osazona que la
D-Ribosa.
4. Expl i que por qu l as cet osas dan reacci n posit i va con el
react ivo de Fehl i ng.
5. Dar las nomenclaturas y estructuras de los productos orgnicos de la reaccin
entre el reactivo de Fehling y los siguientes glcidos:
a) D-Arabinosa
b) D-manosa
c) D-Altrosa
d) D- Sacarosa
6.
E x p l iq u e , al me n o s t r es r ea c t i vo s , q u e s e ut il i za n par a
reconocer a los azcares reductores.
104
105
PROPIEDADES QUMICAS
AMINOCIDOS Y PROTENAS
105
106
INTRODUCCIN
Las protenas, junto con los carbohidratos y los lpidos constituyen los 3 grupos de
compuestos de mayor importancia en los sistemas biolgicos.
Qumicamente las protenas, son polmeros naturales (su peso molecular puede ser
de varios millones) cuyas unidades (monmeros) son los aminocidos. Son mucho
ms complejos que los polisacridos porque, a diferencia de stos, las unidades
que forman las protenas no son idnticas.
Se diferencian casi siempre por la estructura diferente del grupo -R, el que puede
ser aliftico, alicclico, aromtico, heterocclico, etc., pudiendo adems contener
otros grupos funcionales o grupos amino o carboxilo adicionales.
Los aminocidos se unen mediante un enlace tipo amida (conocido como ENLACE
PEPTDICO) entre el carboxilo de una unidad y el grupo amino de la otra,
formando as los: dipptidos, tripptidos, etc., cuando el peso molecular es mayor
se llaman polipptidos (PM hasta unos 10,000). Si la cadena es an ms grande,
toman el nombre de protenas.
R O
R O
| ||
H
|
||
N-CH-C-OH +
N - CH - C - OH
H
H
H R O H R O
||
-H2|O | || | |
-N-CH -C-N-CH-C-
Enlace peptdico
R - CH - COOH
|
NH2
H+
-OH
-
R - CH - COO
|
NH2
Forma
Aninica
o bsica
H+
R - CH - COO
|
+NH3
Sal interna
"Zwitterion"
-OH
R - CH - COOH
|
+NH3
Forma
Catinica
o cida
Desnaturalizacin de protenas
Se da este nombre a todo proceso que, sin ruptura o formacin de enlaces qumicos
o de valencia, determina una modificacin en las propiedades de la protena nativa;
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REACCIONES DE COLORACIN
Reaccin con ninhidrina
Los aminocidos en solucin acuosa, calentados con ninhidrina (Hidrato de
tricetohidrindeno) dan un producto de condensacin de color violeta o violeta
azulado. Con esta reaccin podemos identificar grupos aminos libre en posicin .
Reaccin xantoproteica
Esta reaccin se debe a la presencia de grupos bencnicos en ciertos aminocidos.
El cido ntrico en presencia de esos grupos aromticos da lugar a la formacin de
derivados nitrados de color amarillo que por alcalinizacin intensifican su color.
Prueba de Millon
Es una prueba caracterstica para restos fenlicos, dando una coloracin rosa
salmn: el reactivo de Milln es una mezcla de mercurio y cido ntrico (nitrato
mercurioso y mercrico)
Prueba para aminocidos azufrados
Todos los aminocidos azufrados o protenas que tengan restos de estos
aminocidos reaccionan con el acetato de plomo en medio alcalino formndose el
sulfuro de plomo,
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tomando la solucin un color marrn o gris oscuro. Esto se debe a que el azufre se
libera en medio alcalino y a ebullicin, formando la sal de plomo.
Reaccin de Biuret
Las protenas y pptidos que contienen por lo menos 3 unidades aminocidos (2
enlaces peptdicos) dan una coloracin violeta caracterstica al reaccionar (en
medio alcalino) con una solucin de sulfato cprico.
Esta prueba es muy sensible, utilizada para detectar la presencia de enlaces
peptdicos y tambin en la determinacin cuantitativa de protenas. Es negativa con
los dipptidos y con los aminocidos libres.
PARTE EXPERIMENTAL
1. Reaccin de ninhidrina
Tomar 3 tubos de ensayo y agregar por separado 15 gotas de Glicina ,
albmina y muestra problema agregar a cada uno de ellos 2 gotas de la
solucin de ninhidrina
al 0.3%. Calentar a bao mara, unos minutos y
observar. Se considera positiva la reaccin si la solucin toma un color violeta.
2. Reaccin xantoproteica
En 4 tubos de ensayo colocar 15 gotitas de tirosina, glicina, albmina y
muestra problema. Aadir 1 mL de cido ntrico concentrado. Calentar por
unos minutos y observar. Agregue a cada uno de los tubos 1 mL de hidrxido
de sodio al 20%, observe.
3. Prueba de Millon
En cuatro tubos de prueba colocar 15 gotas de glicina, tirosina, albmina y
de muestra problema y agregar a cada uno de ellos 5 gotas del reactivo de
Milln, calentar por unos minutos y observar. La aparicin de un color rosa
salmn o rojo nos indica que la prueba es positiva.
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5. Reaccin de Biuret
En cada uno de 4 tubos ensayos se le adiciona por separado 15 gotas de
glicina, cistena de solucin de albmina y la muestra problema. Aadir 10
gotas de
hidrxido de sodio al 10%, luego dos gotas de solucin de sulfato de cobre al
1%. Observar el color que se forma. Repetir el ensayo con un aminocido y su
muestra problema.
6. Desnaturalizacin de la albmina
En cada uno de 5 tubos de ensayo colocar 20 gotas de solucin de albmina.
Uno se calienta poco a poco observando la temperatura aproximada a la que
tiene lugar de la coagulacin.
Al segundo tubo se adiciona 30 gotas de alcohol (etlico)
Al tercer tubo adicionar unas gotas de cido clorhdrico concentrado
Al cuarto tubo aadir cido ntrico concentrado
Al quinto tubo, solucin concentrada de hidrxido de sodio
Anotar en qu casos se produce la coagulacin
20 gotas de agua
20 gotas de solucin de albmina
20 gotas de agua ms 3 gotas de cido clorhdrico 10%
20 gotas de solucin de albmina ms 3 gotas de cido clorhdrico al 10%
20 gotas de agua ms 3 gotas de solucin de NaOH al 10%
20 gotas de solucin de albmina ms 3 gotas de solucin de NaOH al
10%.
Observe que los 6 tubos constituyen 3 parejas: a con b; c con d y e con f. Los
miembros de cada pareja se diferencian nicamente en que mientras un tubo
tiene solucin de protena, en el otro sta se ha sustituido por agua destilada.
Los tubos con agua (a,c y e) constituyen el "blanco" o patrn de comparacin
de aquellos que tienen protena. Una de las parejas estn en medio neutro, la
otra en medio alcalino y la otra en medio cido. Los ensayos en blanco (sin
protena) son necesarios para determinar si el efecto observado se debe
realmente a la precipitacin de la protena o es el hidrxido metlico el que
est precipitando.
A continuacin, adicione a cada tubo 2 mL de solucin de sulfato de cobre al
10%, agite los tubos y observe los resultados, haciendo las comparaciones por
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Integrantes:
1)
2)
3)
4)
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Observacin
Tirosina
Glicina
Albmina
Muestra problema N
Evaluacin:
De qu manera identific que el aminocido y la protena cuenta con restos
bencnicos?.
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Observacin
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Evaluacin:
Cmo verific la presencia de restos fenlicos?
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Observacin
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Evaluacin:
De qu manera verific la presencia de restos azufrados en aminocidos y
protenas?.
Cistena
Glicina
Albmina
Muestra problema N
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Observacin
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Evaluacin:
En las pruebas realizadas con el reactivo de Biuret, encontr alguna
diferencia con cada una de las muestras ensayadas?. Cmo lo diferenci?.
Desnaturalizacin de la albmina
Temperatura (C)
Alcohol etlico
cido clorhdrico
(concentrado)
c. Ntrico (Concentrado)
Soluc. Conc. de NaOH
[Fe(CN)6]3-
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Evaluacin:
En cul de los tubo precipit la protena con : el Cu2+?
Formule una ecuacin qumica, para cada uno, que explique estas reacciones.
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CUESTIONARIO
1. Con cul de los reactivos empleados en la prctica se utiliza para verificar la
presencia de -aminocidos en una hidrlisis de la protena?.
2. Cul es el grupo responsable de la reaccin positiva con la prueba
Xantoproteica?
3. Cmo comprobara que la albmina de huevo contiene aminocidos con
restos fenlicos?
4. Cul o cules de los siguientes aminocidos dan positiva con el reactivo de
Xantoproteica?
a) Triptfano
b) Tirosina
c) Histidina
d) Fenilalanina
e)Metionina
f) Glicina
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Bibliografa
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2. Cueva , J. Len. J y Fukusaki .,A. Laboratoriod eQumica Orgnica . Ed.
Juam Gutemerg Lima Per- 2008
3. Mc Murray, John Qumica Orgnica. Ed. IBEROAMRICA. Mxico.
2007
4. Morrison, Robert y Boyd, RQumica Orgnica. Ed. ADDISONWESLEY IBEROAMERICANA. EUA. .2006.
5. S olomons, T.W. Qumica Orgnica. Ed. LIMUSA. Mxico. 2000
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