- Os microorganismos habitam todos os locais

Os microrganismos tm em comum:
-O tamanho (em geral, s podem ser vistos com um micros-cpio)
-A organizao simples (so unicelulares ou coloniais)
-Os microrganismos no apresentam tecidos (o que no quer dizer absoluta falta de
especializao celular)
Embora os microrganismos no tenham tecidos, pode existir um certo grau de especializao
em clulas que fazem parte de um organismo colonial, visvel ou invisvel.
Por exemplo, em fungos filamentosos microscpicos denominados bolores podemos
verificar uma clara distino entre os filamentos (hifas) destinados ao metabolismo geral e as
estruturas destinadas proliferao (corpo de frutificao ou conidiforo e esporos ou
condios). Confira na segunda figura (em cinza) na fileira inferior deste slide.
Em cianobactrias filamentosas tambm podemos encontrar especializao celular, como o
denominado heterocisto, envolvido na fixao de nitrognio. H muitos casos adicionais.
Relaes ecolgicas entre os micrbios e os seres humanos
-Os mecanismos atravs dos quais algumas espcies podem causar doenas em humanos
-Os recursos disponves para controlar as populaes microbianas e as doenas causadas por
elas
-A utilizao dos microrganismos na produo de materiais de interesse humano
-Outros aspectos
Os microrganismos esto muito presentes em nossa vi-da moderna. Veja estes poucos
exemplos:
-Cervejas, vinhos, iogurtes e muitas variedades de queijos s podem ser produzidos com a
participao de germes especiais
-A maioria dos antibiticos que usamos provm dos microrga-nismos
-O lcool combustvel depende da ao fermentativa
-As vacinas usadas hoje contm microrganismos vivos atenua-dos ou produtos imunizantes
derivados dos mesmos
-Algumas espcies de microrganismos podem causar doena no homem, em outros animais e
nos vegetais
-A Indstria vale-se de microrganismos para a produo de im-portantes matrias primas
-A Engenharia Gentica revolucionou os mtodos de vacinao e de controle de doenas (vg,
insulina)
Desinfetantes e Esterelizao
Desinfetantes so substncias que so aplicadas em superfcies no vivas para
destruir os microorganismos que vivem nesses objetos.
-Cresis
-Hipoclorito de Sdio
-Autoclave
Antisspticos
Antissptico se refere a tudo o que for utilizado no sentido de degradar ou inibir a
proliferao de microrganismos presentes na superfcie da pele e mucosas
-lcool
-lcool iodado
Terapia gnica
- Primeiro sucesso: ADA-SCID
Terapia gnica o tratamento baseado na introduo de genes sadios com uso de
tcnicas de DNA recombinante. Vrus ou Bactria contendo o gene de interesse
inserido dentro da clula e despeja o DNA modificado no ncleo celular. Se der tudo
certo, o novo gene vai produzir uma protena funcional.
Muitas espcies de microrganismos so patognicas
J houve pocas em que os microrganismos mataram mais seres
humanos do que importantes conflitos b-licos!!
A humanidade ainda vtima de quase todas as doen-as infecciosas que
foram registradas pelos povos mais antigos que viveram na Terra
A Peste Negra foi uma das mais devastadoras epidemias da histria da humanidade,
resultando num nmero de mortos estimado em 75 a 200 milhes de pessoas. Isto
ocorreu na Europa entre 1343 e 1356. A doena causada por Yersinia pestis. Muito
frequentemente existe infeco nos gnglios linfticos, que aumentam de tamanho.
Esses gnglios infectados so mais proeminentes nas axilas e virilhas, recebendo o
nome de bubes. Da a expresso peste bubnica. Na realidade, os pacientes
apresentam uma doena sistmica e, em muitos locais da pele, o quadro de sepse
leva a reas de isquemia e necrose, com produo de colorao preta nas zonas de
gangrena. possvel que o nome da pestilncia tenha algo a ver com as fases
terminais do quadro clnico, mas o tema controverso.

Microrganismos eucariticos
- Protozorios PROTOZOOLOGIA
- Fungos (microscpicos) MICOLOGIA
- Mixomicetos MICOLOGIA
- Algas unicelulares FICOLOGIA
Microrganismos procariticos
- Eubactrias BACTERIOLOGIA
- Arqueobactrias BACTERIOLOGIA
Nem eucariticos nem procariticos
-Vrus
-Virides
Molculas de RNA de filamento nico, altamente compactas, exibindo intenso
pareamento de bases (intracadeia), sem capsdio protico. Os virides so
patognicos para vegetais
-Prions
Molculas proticas, com caractersticas especiais
Observao: No h aceitao geral da idia de que os virides e os prons sejam
considerados como microrganismos
Giardia lamblia Flagelado
Fungos Apresenta hifas que so os seus filamentos. O conjunto de hifas chamado
de miclio. No apresentam tecidos, mas sim clulas com funes especializadas.
Diatomceas Algas unicelulares sem interesse para ns
Escherichia coli bastonete
Descoberta dos microorganismos
Ocorreu no sculo XVII, quando Anton van Leeu-wenhoek (1632-1723) os descreveu
em vrios tipos de materiais naturais, usando microscpios simples fabricados por ele
mesmo
Ao longo de sua vida, construiu cerca de 500 microscpios dotados de uma s lente
(simples), cujo poder de aumento variava de 50x a 300x
Composto por: Lentes, suporte da amostra, boto de foco, interprete da amostra

Poder de resoluo (PR)
a capacidade de um sistema de lentes de mostrar dois pontos muito prximos
entre si como pontos distintos
PR do olho humano = 0,1mm ou 100m
PR do microscpio = 0,2 m ou 200nm
PR do ME = 1,0 nm ou 10

Qtu menor o PR, melhor a resoluo. Quanto maior o PR, mais prximos esto os
objetos.
= comprimento de onda da luz usada
= ndice de refrao do meio situado entre o objeto em estudo e a lente
objetiva
= metade do ngulo do cone de luz que entra na objetiva
x sen = abertura numrica da lente
Quanto maior a abertura numrica, maior o PR.
Evoluo
Eles surgiriam por gerao espontnea (Abiognese)
Eles originar-se-iam de pais iguais a eles (Biognese)
Aps o Renascimento, ficou claro que no havia gerao espontnea de animais
e vegetais. (Aps o Renascimento, os experimentos de muitos zo-logos e botnicos
deixaram claro que a gerao es-pontnea no ocorria para animais e vegetais)
Apesar de algumas vozes teimosas defenderem a existncia de GE para insetos,
os experimentos de Redi mostraram que no. S restavam, assim, os
animalculos de Leeu-wenhoek
Os experimentos de Redi demonstraram que as larvas presentes na carne em
decomposio resultam da deposio de ovos de moscas
Contribuies de Pasteur
-Louis Pasteur era formado em Qumica
-Como qumico, aceitou a incumbncia de estudar a razo da deteriorao do vinho de
alguns produtores da cidade de Lille, na Frana
-Pasteur conseguiu resolver o problema e seu envolvimento na questo acabou por
transform-lo no primeiro microbiologista prtico da Histria Moderna
ESTUDOS SOBRE AS FERMENTAES
-Provou que as fermentaes eram causadas por microrganismos
-Mostrou que havia diferentes tipos de fermentaes, carac-erizadas por seus
produtos finais
-Constatou que microrganismos diferentes estavam envolvidos nos diferentes tipos de
fermentaes
-Observou que as fermentaes eram fenmenos anaerbios (termo criado por ele)

Lquido no estril derramado no frasco; gargalo ou pescoo do frasco estirado na
chama; lquido esterilizado por aquecimento; ar forado a sair na extremidade aberta;
poeira e microrganismos presos na curvatura; o lquido esfria lentamente; passa um
longo tempo; extremidade aberta e o lquido permanece estril por muitos anos.


#a pasteurizao consiste em um aquecimento (63) seguido de um rpido
resfriamento (4)

INVALIDAO DA ABIOGNESE
-Desafiado por renitentes defensores da idia da abiognese, demonstrou
experimentalmente que a gerao espontnea no ocorre em materiais
convenientemente esterilizados
-Provou que o crescimento microbiano observado em matria orgnica deve-se sua
contaminao pelos onipresentes micrbios
INTRODUO DE MTODOS DE ESTERILIZAO
-Demonstrou que os microrganismos esto presentes em todos os lugares, materiais e
objetos com os quais usualmente entra-mos em contato:
No solo; Nas guas; No ar; No prprio corpo humano e Em outros seres vivos
-Sob sua orientao, a industria metalrgica francesa projetou e comercializou os
primeiros fornos de ar quente e as primeiras autoclaves

TEORIA MICROBIANA DA DOENA INFECCIOSA (Pasteur &Koch) - 1877
Seus estudos sobre o carbnculo, a clera aviria e sobre as estafilococcias e
estreptococcias humanas, levaram-no a afir-mar (e provar) que as doenas infecciosas
so causadas por germes especficos
NOTA: Os trabalhos de Robert Koch conduziram s mesmas concluses
CONTRIBUIES DE LOUIS PASTEUR

Introduo de importantes vacinas
-Contra o carbnculo
-Contra a clera aviria
-Contra a raiva
AS CONTRIBUIES DE ROBERT KOCH

Descubridor do agente etiolgico da tuberculose
DESCOBERTA DE BACTRIAS PATOGNICAS
BACILO DA TUBERCULOSE
Mycobacterium tuberculosis
BACILO DA CARBNCULO
Bacillus anthracis
VIBRIO COLRICO
Vibrio cholerae
Introduo dos esfregaos corados em Bacteriologia
Adoo do agar (gelose) como agente solidificante nos meios de cultura
Introduo dos postulados que caracterizam um agente etiolgico
Seus estudos sobre as bactrias patognicas levaram-mo a afirmar que as doenas
infecciosas so causadas por germes especficos
Louis Pasteur e Robert Koch foram os grandes pioneiros da Bacteriologia
Estes pesquisadores atraram muitas pessoas ansiosas por estudar a
nova cincia
No sculo XIX destacaram-se muitos investigadores, cujos nomes so
apresentados num resumo que voc ver ao final desta exposio




Ateno: os ribossomos bacterianos so do tipo 70S e so formados por uma
subunidade 30S mais uma subunidade 50S. Por que 30S mais 50S no d 80S?
que este S (unidade Svedberg, que mede a velocidade de centrifugao de uma
partcula num lquido de densidade especial) no uma unidade para medida direta
de massa. A velocidade de sedimentao numa ultracentrfuga depende da massa,
mas depende tambm de outros fatores, como a forma da partcula.Nos eucariotas,
existem ribossomos 80S no citoplasma e 70S nas organelas capazes de diviso.
O ME permite analisar a ultra-estrutura celular

Nucleoide
No caso dos procariotas, no usamos a ex-presso ncleo
O nucleide pode ser visto no ME em cortes ultrafinos de clulas bacterianas
Sob certas condies, o nucleide tambm pode ser visto em microscopia ptica
Propriedades:
Aspecto de massa fibrilar dispersa no citopla-ma
Ausncia de carioteca e de centrolos
O material gentico Feulgenpositivo
DNA de fita dupla
Cromossomo nico, em geral circular
Tamanho: 1mm e PM de 3 x 10
9
Da
Acomoda de 2.500 a 3.500 genes, em mdia
Plasmideos
Alm do cromossomo, muitas espcies de bactrias apresentam plasmdios
Um plasmdio uma molcula circular pe-quena de DNA de fita dupla, preso mem-
brana por mesossomo
Freqentemente h mais de uma cpia do plasmdio por clula e, na mesma clula, di-
ferentes tipos de plasmdios podem ser en-contrados
Os plasmdios variam de tamanho. Com fre-qncia, tm PM 100 ou mais vezes
menor do que o PM do cromossomo
Os plasmdios transportam informaes ge-nticas acessrias. Em geral, so
designados de acordo com funes tpicas a eles as-sociadas
Tipos de plasmdios
Plasmdios conjugativos
Plasmdios degradadores
Plasmdios de virulncia
Fatores R (de Resistncia a drogas antimicrobi-anas)
Importncia em Engenharia Gentica
Remoo e clivagem
Introduo de genes exgenos
Introduo em clulas bacterianas
Expresso dos genes clonados
Extrao do plasmideo de dentro da bactria; clivagem do plasmideo a partir de uma
endonuclease de restrio; insero do gene da insulina de seres humanos no
plasmideo bacteriano ( ocorre pois o DNA universal); transformao ( coloca o
plasmideo dentro da bactria); expresso do gene produzindo insulina, a mesma
purificada e retirada da bactria e por fim vendida.
Citpoplasma
todo o espao delimitado pela membrana, exceto o nucleide. No usamos o termo
hi-aloplasma
Contm cerca de 70% de gua, um nmero muito grande de compostos orgnicos e
inorgnicos dissolvidos, muitas centenas de ribossomos e, eventualmente incluses
Incluses
Orgnicas
Glicognio (Ex.: E. coli)
Poli--hidroxibutirato (Ex.: Pseudomonas)
Inorgnicas
Grnulos de enxofre (espcies fotossintticas)
Fosfato polimerizado (Ex.: Corynebacterium)
Este material conhecido com o nome de granulao metacromtica, por tomar
colorao vermelha diante de certos corantes azuis, como azul de toluidina
O fosfato polimerizado tambm conhecido como volutina

Membrana celular
visualizvel - aspecto trilaminar tpico; apresenta espessura de 7nm;
uma bicamada fosfolipidica com protenas inseridas nela ( perifricas e integrais)
descrita pelo modelo mosaico fluido.
Funes:
Permeabilidade seletiva
Transporte de eltrons Nos eucariotos que realiza esse processo so as
mitocndrias, nos procariotos o mesmo ocorre na membrana plasmtica atravs das
integrinas de membrana. Os citocromos realizam o transporte dos eltrons.
Transporte de solutos Apresenta uma permeabilidade seletiva. Pequenas molculas
hidrofbicas passam facilmente, pequenas molculas polares no carregadas tambm
passam pela membrana, grandes molculas polares no carregadas n passam pela
mo conseguem atravessar a membrana (s com ajuda de protenas carreadoras),
ons tambm no atravessam a membrana ( s atravpes de canais inicos)
Secreo
Participao na biossntese
Stio de receptores diversos
Transporte de solutos
Sem gasto de energia
DIFUSO SIMPLES
DIFUSO FACILITADA
Com gasto de energia
GRADIENTE QUIMIOSMOTICO
UNIPORTE, SIMPORTE e ANTIPORTE
TRANSLOCAO DE GRUPO
Translocao de grupo ou sistema fosfotransferase
Uma enzima (Piruvato quinase) converte o PEP (fosfoenolpiruvato)formando fosfato e
cido pirvico. O fosfato se liga a integrina. A integrina fosforilada muda a sua
conformao e a glicose se liga a mesma e ao passar pela enzima ela sai fosforilada
(o fosfato da enzima posto na glicose) formando a glicose 6-fosfato

SISTEMAS SECRETORES
Mecanismo formado por integrinas de membrana que expulsam componentes para
fora da clula.

Biossntese e transduo sensorial
Enzimas membranares sintetizam os fosfolipideos de membrana e enzimas
translocadoras (ex: undecaprenilfosfato) transportam molculas para o espao
intermembranas.
Receptores de transduo sensoriais recebem um tipo de sinal e o convertem em
outro ( ex: receptores dos flagelos)
Complexo protico para ancoragem e replicao - o mesossomo segura o
plasmideo/nucleosssomo na membrana

Leso da membrana celular
-Ao de detergentes
-Ao de antibiticos
-Outros agentes lesivos
Colorao gram
As bactrias podem ser divididas em dois grandes grupos: as gram-positivas e as
gram-negativas
Na colorao de Gram so usados os se-guintes reagentes, na seqncia indicada:
-Cristal Violeta ou Violeta de Genciana
-Lugol (I
2
+ KI + H
2
O)
-lcool absoluto = Etanol
-Fucsina diluda (ou safranina). Corante no roxo

Durante a lavagem com lcool, um grupo de bactrias se descora e outro continua
corado.
Como explicar a gram-positividade?
No est clara, em termos moleculares, a razo pela qual as clulas gram-positivas
retm o complexo violeta + iodo
Seria a espessura da murena? Seria sua composio qumica? Seriam ambos os
fatores?

Todas as Eubactrias, com exceo dos re-presentantes da classe Mollicutes,
possuem parede celular. As arqueobactrias tambm possuem parede celular
BACTRIAS GRAM-POSITIVAS
Os principais componentes das paredes celulares grampositivas so a murena
(glicopeptdio ou peptidioglicano) e os cidos teicoicos
Protenas diversas podem estar intercaladas na camada de murena + cidos teicoicos
A mureina composta por NAG (cido N-acetilglicosaminico) e NAM (cido N-
acetilmuranico) ligados um ao outro (NAG-NAM-NAG-NAM...).
Um tetrapeptideo se liga ao NAM. Cada NAM apresenta um tetrapeptideo ligado e este
se liga a outro tetrapeptideo presente em outro NAM paralelo por meio de ligaes
cruzadas.

# Uma camada se encontra sobre a outra, formando redes
A penicilina inibe a transpeptidase, a mesma responsvel por realizar a ligao
cruzada. Como no ocorre a ligao cruzadas, as bactrias B-lactamicas morrem
atravs da entrada de gua na clula levando a uma alterao da presso osmtica
resultando assim na lise osmtica.
cidos teicoicos
Esto dentro de um envoltorio
Classificao
-cidos lipoteicoicos
-cidos teicoicos de parede
O cido teicoico formado por glicerol (1,2,3-propanotriol) Moleculas de glicerol
unidas entre si por pontes fosfodiester. Ele se liga a mureina.
Funes dos cidos teicoicos
-Adesinas
-Ancoragem da murena
-Parecem ser necessrios para certas funes
-Os cidos teicoicos so imunognicos
-O ser humano produz anticorpos contra estas substncias
BACTRIAS GRAM-NEGATIVAS
-As bactrias gram-negativas tm uma membra-na externa, acima da murena (2
redes de mureina)
-O volume delimitado pelas duas membranas conhecido com o nome de espao
periplasmatico
BACTRIAS GRAM-NEGATIVAS
-A membrana externa assimtrica. No folheto externo existem molculas de LPS
(lipopolis-sacardio)
#O folheto superior da MExt diferente do folheto inferiro da MExt
-O LPS uma substncia muito txica para mamferos. Denomina-se tambm
endotoxina
Diversas integrinas podem ser encontradas na membrana externa. Exemplos
em E. coli:
Vrias porinas (OmpC, OmpD, OmpF)
OmpA Proteina de membrana externa Receptor para pelo sexual
LamB - Receptor de bacteriofago
Tsx - Receptor de bacteriofago
Protenas transportadoras
Vitamina B
12

Ferro
Outras
LPS
Formado pelo lipdeo A, pelo Cerne e pelo antgeno [Polissacardeo]
Alguns LPS no tem o antgeno, sendo chamados de LOS
O LPS reage com o receptor TLR4 que envia uma mensagem para o ncleo
produzindo citocinas.

Parede celular
Funes:
D forma clula
Vide protoplastos e esferoplastos
Protege a clula contra a lise osmtica
Contm receptores para bacterifagos
Os bacterifagos esto intimamente envolvidos na evoluo das espcies que
infectam
A parede a estrutura celular responsvel pelo carter diferencial da colorao de
Gram
Produo de um protoplasto Uma lisoenzima degrada a parede da bactria ( deve
ocorrer em um meio isotnico) para no ocorrer alterao entre o interior e o exterior
da clula.
Cpsula
Muitas espcies de bactrias apresentam po-lissacardios* associados parede
celular, que recebem nomes variados. Usaremos a seguinte conveno:
Cpsula = camada razoavelmente bem definida de polissacardio
Glicoclice = o polmero forma uma espcie de rede que envolve a clula
CLULAS CAPSULADAS FORMAM COLNIAS LISAS
CLULAS ACAPSULASDAS FORMAM COLNIAS RUGOSAS
CLULAS PRODUTORAS DE CPSULAS MUITO GRANDES FORMAM
COLNIAS MUCIDES (Colnias mucides de Streptococcus pneumoniae)

Funes da cpsula e glicoclice
-Bloqueio ou retardo da fagocitose
-Formao de um gel hidroflico capaz de difi-cultar a dessecao das clulas
-Aderncia (adesina)
-Interferncia na adeso de bacterifagos
-Mimetismo molecular (evaso do sistema imu-ne)
-Reserva alimentar (?)
Em geral, o polissacardio capsular imunognico
-Anticorpos podem ligar-se ao polissacardio capsular e isto promove a fagocitose
-Neste contexto, o processo de revestimento por anticorpos denomina-se
opsonizao, e os anticorpos envolvidos chamam-se opsoninas
POLISSACARDIOS SUPERFICIAIS ADESIVOS
Algumas bactrias, possuem polissacardios de superfcie capazes de aderir a
polmeros sintticos
As clulas bacterianas mais a matria orgnica aderente formam um biofilme
Bactrias em biofilmes so mais resistentes aos antibiticos (!)
Plos ou Fmbrias
-Apndices inseridos na membrana celular
-Variedade proteica
Funes:
-Adesina
-Pelo sexual (F+ F-) material gentico
Flagelo
Implantao (membrana e parede)
Estrutura
-So formados por um corpo basal, um gancho e um filamento
-A protena polimerizvel mais abundante dos flagelos a flagelina

Atrquias (sem flagelos) Bacillus spp

Monotrquias (um nico flagelo) Pseudomonas aeruginosa

Peritrquias (apresentando flagelos ao longo de todo o corpo bacteriano) Proteus vulgaris
Lofotrquias (um tufo de flagelos em uma, ou ambas as extremidades) Spirillum spp
Estrutura geral de um flagelo bacteriano
Corpo basal Formando por 2 aneis ( gram +) ou 4 aneis ( gram-)
Os flagelos se movimentam por bomba de prtons O proton passa do espao
periplasmatico para o citoplasma girando a bomba. ( gira no sentido anti-horrio)
O flagelo na presena de glicose, nada na direo da mesma
Algumas espcies de bactrias so capazes de produzir esporos
-As de maior importncia so as que perten-cem aos gneros Clostridium e Bacillus
-So exemplos de germes de grande interes-se mdico:
C. tetani C. botulinum C. perfringens
B. anthracis
Caractersticas dos esporos
Refringncia
Termorresistncia
Desidratao
Cada clula produz apenas um esporo, que liberado quando ocorre lise celular. O
processo de esporulao demorado (at cerca de 10 horas) e requer a ativao de
diversos operons