UNIVERSIDAD ATONOMA DE CHIAPAS

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

CAMPUS IV

MATERIA
LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA II

DOCENTE
LUIS ROSALES FURUKAWA



ALUMNOS

AYMIR TOCHTLI VAZQUEZ JIMENEZ
MARIA JOSE HERNANDEZ PEREYRA
DAVID ENRIQUE RODRIGUEZ RINCON
VICTOR GABRIEL SANCHEZ LEON
ALONDRA VIDALMA GONZALEZ RUIZ

GRADO Y GRUPO
6
o
SEMESTRE

A

TAPACHULA CHIAPAS A 05 DE SEPTIEMBRE DEL 2014

PRACTICA No 1
SENSIBILIDAD MICROBIANA A ANTIBIOTICOS

INTRODUCCIN:
Los estafilococos son cocos grampositivos que forman racimos cuando crecen en
un medio de agar, pero que generalmente se observan en las muestras clnicas en
forma de clulas nicas o en pequeos grupos de microorganismos. El xito de la
deteccin de estos microorganismos en las muestras clnicas depende del tipo de
infeccin (p. ej., absceso, bacteriemia, imptigo) y de la calidad del material
remitido para el anlisis. Las muestras obtenidas a partir de la base del absceso
con un hisopo o un raspado presentan un gran nmero de microorganismos en la
tincin de Gram. El aspirado con pus contiene fundamentalmente material
necrtico con un nmero relativamente bajo de microorganismos, por lo que estas
muestras carecen de utilidad. Por lo general, hay pocos microorganismos
presentes en la sangre de los pacientes bacterimicos (una media de menos de 1
microorganismo por mililitro de sangre), por lo que las muestras de sangre se
deben cultivar pero no se deben teir. Se observa la presencia de estafilococos en
la nasofaringe de los pacientes con SPEE y la vagina de las pacientes con SST,
pero estas clulas no se pueden distinguir de los microorganismos que
normalmente colonizan estas localizaciones.
El diagnstico de estas enfermedades se basa en las manifestaciones clnicas del
paciente y se confirma con el aislamiento de S. aureus en el cultivo. Se sospecha
la implicacin de los estafilococos en una intoxicacin alimentaria por las
manifestaciones clnicas del paciente (p. ej., inicio rpido de los vmitos y los
espasmos abdominales) y por los antecedentes de ingestin de un tipo de
alimento determinado (p. ej., el jamn salado). Generalmente no est indicada la
tincin con Gram de la comida ni de las muestras de los pacientes.
Las muestras clnicas se deben inocular en medios de agar enriquecidas
complementados con sangre de carnero. Los estafilococos crecen rpidamente en
los medios no selectivos, tanto aerobia como anaerobiamente, y se pueden
apreciar colonias lisas de gran tamao en el plazo de 24 horas. Como se ha
mencionado anteriormente, las colonias de S. aureus adquieren gradualmente una
coloracin dorada, en especial cuando los cultivos se incuban a temperatura
ambiente.
Casi todas las cepas de S. aureus y algunas cepas de estafilococos coagulasa-
negativos producen hemolisis en el agar sangre de carnero. La hemolisis se debe
sobre todo a citotoxinas, fundamentalmente la toxina a. Cuando la muestra
contiene una mezcla de varios microorganismos (p. ej., una muestra respiratoria o
de una herida), se puede aislar de forma selectiva S. aureus en un medio de agar
complementado con cloruro sdico al 7,5% (el cual inhibe el crecimiento de la
mayor parte de los microorganismos), y de manitol (fermentado por S. aureus,
pero no por la mayora de las restantes especies de estafilococos).
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Caractersticas morfolgicas:
Macroscpicas:
Para apreciarla debemos contar con un aislamiento de la cepa a estudiar en una
placa de Petri. El aislamiento nos permitir observar las caractersticas de las
colonias. En medios no selectivos, S. aureus presenta colonias de 1 a 3 mm de
dimetro, lisas, levemente elevadas, de bordes enteros, levemente convexas y
generalmente pigmentadas con un color que puede ir desde el crema al amarillo.
La produccin de pigmento se ve favorecida si se incuban los cultivos por 24 a 48
horas adicionales a temperatura ambiente. Cuando crecen en agar sangre ovina
se puede observar una zona de -hemlisis alrededor de las colonias. S.
epidermidis presenta colonias generalmente de menor tamao y estas no
presentan pigmentacin.
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Microscpica:
Como ya hemos dicho se trata de cocos Gram positivos que poseen tendencia a
agruparse en racimos. Tienen una forma esfrica y un dimetro de alrededor de
una micra.
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Antibitico empleado:
DICLOXACILINA:
La principal indicacin es el tratamiento de infecciones por estafilococo productor
de penicilinasa, neumococo grupo A-beta, estreptococo hemoltico y penicilina G-
resistentes y penicilina G-estafilococo sensible.
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Estudios recientes han reportado que el porcentaje de cepas resistentes de
estafilococo a penicilina G han aumentado en nosocomios, por ello, se recomienda
contra bacterias productoras de penicilinasa en terapia inicial.
3
El principal componente estructural de la pared bacteriana es la capa de
peptidoglicano; La estructura bsica es una cadena de 10 a 65 residuos de
disacridos formados por molculas de N-acetilglucosamida que alternan con
molculas de N-acetilmurmico. Estas cadenas se entrelazan entre s mediante
puentes peptdicos que confieren a la bacteria una cubierta rgida. Unas enzimas
especficas catalizan el proceso que da lugar a la disposicin de las cadenas y los
puentes (transpeptidasas, carboxipeptidasas y endopeptidasas). Estas enzimas
reguladoras se denominan protenas fijadoras de penicilina (PBP por sus siglas en
ingls) debido a que se pueden unir a los antibiticos -lactmicos. Cuando las
bacterias en crecimiento se exponen a estos antibiticos, el frmaco se une a las
PBP de la pared celular bacteriana en fase de formacin, inhibiendo as la sntesis,
pero no el recambio (degradacin) de los peptidoglicanos, lo que conduce a la
muerte de la bacteria. As, los antibiticos -lactmicos generalmente actan como
frmacos bactericidas.
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OBJETIVOS:
Conocer a que antibitico es sensible un determinado microorganismo.





















OBSERVACIONES:
Al observar al da siguiente nuestros tubos de ensaye, no observamos ningn tipo de crecimiento,
debido a que la concentracin mnima inhibitoria fue aproximadamente alrededor de un
microgramo y nuestras diluciones no llegaron hasta esa cantidad de antibitico.

ANALISIS DE LOS DISCOS EN EL ANTIBIOGRAMA
Medicamento Dimetro Sensible o no sensible
LEV 1.1CM sensible
EDC 4.4CM resistente
GE 0.6CM sensible
TE 0.1CM sensible
PFE 0.OCM resistente
CF 3.6CM resistente
CTX 0.5CM resistente
SXT 1.3CM sensible
AM 1.0CM sensible
E 0.7CM sensible
PE 0.0CM sensible


CALCULOS
Medicamento: Dicloxacilina 500mg
Agua destilada: 5ml
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()
Se afor a 4 ml y se coloc la mitad al tubo nmero 2, despus se procedi a diluir
en serie en los siguientes tubos de ensaye.
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()
()
Se continuo hasta obtener las siguientes concentraciones:
Tubo 1: 32 mg
Tubo 2: 16 mg
Tubo 3: 8 mg
Tubo 4: 4 mg
Tubo 5: 2 mg
Tubo 7: 1 mg
Tubo 8: 0.5mg
Tubo 9: 0.25 mg
Tubo 10: 0.125 mg
Tubo 11: 0.06125 mg




DISCUSION:

Aislamos una cepa de Staphilococcus Aureus al que le realizamos una prueba de antibiograma,
complementada con la dilucin en tubo para conocer la sensibilidad que presenta este
microorganismo ante los antibiticos presentes en el multidisco para GRAM positivas (BIORAD), la
CMI y la CMB usando dicloxacilina.
De acuerdo a la bibliografa consultada esperbamos encontrar resistencia de parte del
microorganismo aislado contra dicloxacilina, pero al observar el antibiograma descubrimos que
nuestra cepa era muy sensible a este antibitico; el medicamento dicloxacilina en el multidisco
presenta una concentracin de 1 g.
La concentracin mnima obtenida en las diluciones en tubo fue de 0.06125 que equivalen a
61.25g, siendo esta concentracin suficiente para destruir a este microorganismo por ende no
encontramos ningn crecimiento en los tubos, y aunque utilizamos las 4 ltimas concentraciones
para hacer las diluciones en placa, no se observ crecimiento alguno.


CONCLUSION:

No se logr observar la CMI y la CMB debido a que la cepa aislada es muy sensible a la
Dicloxacilina a muy bajas concentraciones.
Podemos aseverar que nuestra bacteria aislada no ha estado en contacto con otros
microorganismos resistentes a este antibitico ya que la resistencia presente en Staphilococus
Aureus se debe a que esta adquiere una nueva PBP que es transferida a travs de un plsmido
que le es cedido a travs de otra bacteria.





BIBLIOGRAFA:

1:
Patrick R. Murray. (2007). Microbiologa mdica. Madrid, Espaa: Elsevier.

2
: Sheagren J. and Schaberg D. (1998) Staphylococci. En Infectious Diseases. Gorbach, Barlett
and Blacklow.Ed WB Saunders.

3
: Octavio Rivero Serrano & et al. (1998). Catlogo de medicamentos genricos intercambiables.
Mxico, DF: Secretara de salud.

4
: Patrick R. Murray. (2007). Microbiologa mdica. Madrid, Espaa: Elsevier.