ESPECTROMETRIA DE MASSAS

Introduo
A espectrometria de massas uma ferramenta importante para a anlise estrutural,
podendo ser usada para identificar ou caracterizar substncias orgnicas e inorgnicas,
incluindo as biologicamente ativas de estruturas complexas. A tcnica no propriamente
um mtodo espectral no sentido usual, pois nenhuma radiao eletromagntica
absorvida, mas o espectro de massas lembra um espectro convencional, no qual uma
srie de picos de diferentes tamanhos so registrados ao longo de uma escala numrica.
s princ!pios fundamentais da espectrometria de massas datam de "#$#, porm o
primeiro espectr%metro s& foi constru!do em "$"#.
espectr%metro de massas um instrumento no qual as molculas de uma
amostra so bombardeadas por um feixe de eltrons de energia que pode alcanar at
'( e). resultado direto desta aplicao de energia a retirada de um eltron da
molcula, resultando na formao de um ction radical denominado ion molecular*

+ , e
-
+
,.
, .e
-
/omo o ion molecular possui alta energia, ele se fragmenta dando origem a ions
positivos e espcies radicalares ou molculas neutras. s ions positivos so acelerados,
usualmente por campos eltricos e magnticos fortes, em uma cmara de vcuo, de
acordo com sua relao massa0carga 1m0z2. 3uando um feixe de ions, com uma dada
relao m0z, colide com o coletor de ions, do origem a uma corrente eltrica que
amplificada e mostrada em um monitor como um pico, onde a amplitude proporcional ao
n4mero de ions que tocam o detector. espectr%metro, ento, registra,
quantitativamente, o resultado na forma de um espectro de fragmentos i%nicos positivos e
o registro obtido o espectro de massas. registro tambm pode ser obtido na forma de
tabela de dados das rela5es massa0carga dos ions e sua abundncia relativa. /omo a
maioria dos fragmentos tem carga ",, a relao m0z igual 6 massa do ion, ou em alguns
casos, 6 metade desta massa, quando a carga do fragmentos .,. 3uanto mais estvel
for o ion positivo formado, mais abundante ele ser e, consequentemente, maior ser o
pico registrado no espectro. s ions mais estveis so, por conveno, considerados com
abundncia de "(( 7 e as porcentagens dos demais ions so obtidas em relao 6
1
abundncia destes. pico correspondente aos ions mais estveis, portanto, o maior do
espectro, sendo denominado pico base.
8ortanto, o espectr%metro de massas possui tr9s fun5es*
:onizar as molculas a serem analisadas
;eparar os ions produzidos de acordo com a relao massa0carga dos mesmos
+edir as abundncias relativas de cada tipo de ions.
Instrumentao
Figura ! Es"uema de um espectr#metro de massas
A amostra introduzida num sistema aquecido para manter algumas, ou todas, molculas
no estado gasoso. <stas molculas passam, ento, para uma cmara de ionizao
atravs de uma abertura denominada orif!cio molecular. A cmara de ionizao mantida
6 presso de "(
-=
torr para minimizar as colis5es entre as part!culas e a interface do ar de
ionizao. As molculas so, ento, bombardeadas por um feixe de eltrons, o que faz
com que percam um eltron, dando origem ao ion molecular. <ste sofre fragmentao
produzindo vrios ions que so empurrados e atravessam uma fenda indo para placas de
repulso carregadas positivamente. <m seguida, os ions so acelerados a alta
velocidade por placas de acelerao carregadas eletricamente e direcionadas a um
separador magntico onde um poderoso campo magntico desvia cada tipo de ion em um
caminho curvo cu>o raio depende da razo massa0carga de cada ion. s ions mais leves
so desviados mais do que os ions mais pesados 1? m0z2. ;ob a influ9ncia de uma fora
2
<ntrada para
in>eo da
amostra
de campo magntico espec!fica, somente ions de uma determinada massa ou relao
massa0carga podem passar atravs da entrada que leva ao coletor de ions. /omo a fora
do campo aumentada, ion de massas progressivamente maiores alcanam o coletor de
ions e so detetados. 3uando um feixe de ions colide com o coletor de ions, ele gera um
sinal eltrico, cu>a intensidade proporcional ao n4mero de ions, isto , 6 sua
abundncia. /ada sinal ampliado e mostrado em um monitor ou registrado em um
espectro de massas.
<xistem dois tipos importantes de espectr%metros de massas de deflexo do
campo magntico* os de baixa e os de alta resoluo. @os instrumentos de foco simples
de baixa resoluo, as varia5es de energias cinticas de ions de mesma massa causam
alargamento de seu feixe de ions quando passam atravs do separador magntico,
reduzindo, assim, seu poder de resoluo. @este tipo de aparelho poss!vel, por
exemplo, distinguir um ion de massa A(( de picos de massa B$$ e A(". <ste grau de
resoluo chamado de Cresoluo unitriaD. @os espectr%metros de massas de foco
duplo de alta resoluo, os ions so inicialmente direcionados ao longo de um caminho
curvo em campo eletrosttico, o qual permite que somente part!culas de mesma energia
cintica passem atravs de uma fenda que conduz ao separador magntico. <ste tipo de
instrumento pode separar ions como /E
.
@
,
e @
.
,
em que os n4meros de massas
1.#,("#' e .#,((="2 diferem menos que (,(F7. Assim, poss!vel, usando este tipo de
instrumento, medir a massa de um ion com preciso suficiente para que se possa
determinar sua composio at%mica.
Cromatogra$ia gasosa acoplada % espectrometria de massas
Alguns espectr%metros podem ser interfarceados com cromat&grafo a gs. <sta
combinao de instrumentos, denominada /G0massa 1G/-+;2, particularmente 4til na
identificao de componentes de misturas de dif!cil separao. Assim, constituintes de
&leos essenciais, componentes fisiologicamente ativos de vegetais, poluentes do
ambiente e metab&litos de drogas presentes em l!quidos de indiv!duos suspeitos, podem
ser caracterizados por esta tcnica sem a aplicao de processos de isolamento de
substncias.
<H<+8I* <spectro do .-pentanol
3

espectro mostra um pico do ion molecular pequeno e um pico tambm pequeno
resultante da perda de um tomo de hidrog9nio do lcool. 8erda de um grupo metila
fornece o pico +-"F e peda de radical hidroxia d origem ao ion +-"'. pico base
formado pela expulso da cadeia alqu!lica e corresponde ao fragmento de m0z AF.
4
<spectrometria de ressonncia magntica de hidrog9nio
:ntroduo
A espectrometria de ressonncia magntica nuclear 1J+@2 basicamente uma outra
forma de espectrometria de absoro,semelhante espectrometria de infravermelho ou
de ultravioleta. ;ob condi5es apropriadas em um campo magntico, uma amostra pode
absorver radiao eletromagntica na regio de radiosfera 1rf2 em uma frequ9ncia
governada pelas caracter!sticas estruturais da amostra./om algum dom!nio da teoria
bsica, a interpretao dos espectros de J+@,meramente por inspeo,pode ser feita em
a maior detalhe do que no caso dos espectros de infravermelho ou ultravioleta
:nstrumentao e manuseio de amostras
aparecimento em "FB do primeiro espectr%metro comercial de J+@ tornou-se poss!vel
utilizar a J+@ como tcnica anal!tica.s primeiros instrumentos usavam !ms
permanentes ou eletro!ms,com campos de ",A" ",#' .,.( ou .,BFK, correspondendo a
=(,#(,$( ou "(( +Ez respectivamente,para a ressonncia de hidrog9nio 1esta a forma
usual de descrio de um instrumento de J+@2.
A necessidade maior de resoluo e sensibilidade levou ao desenvolvimento de
instrumentos de .(( a F(( +Ez, ho>e muito disseminados e produo de aparelhos de
=(( +Ez, de uso mais restrito. Kodos os instrumentos acima de "(( E+z baseiam-se em
magnetos supercondutores 1solenoides2 resfriados com hlio e operam no modo pulsado
com transformada fourier altos,so a estabilidade e a homogeneidade do campo de
radiofrequ9ncia.
Leslocamento qu!mico
Apenas um pico deveria ser obtido com a interao da energia de radiofrequ9ncia e do
campo magntico intenso com os hidrog9nios, de acordo com a equao bsica da J+@,
na qual a razo giro magntica,M, uma propriedade intr!nseca do n4cleo.
s eltrons circulam sob influencia de um campo magntico,produzindo seu pr&prio
campo magntico que age em posio ao campo aplicado, de acordo com a regra de
mo direta.:sso resulta no efeito de blindagem
<ste efeito contribui para o diamagnetismo exibido por todos os materiais orgnicos.
grau de blindagem depende da densidade dos eltrons em movimento.8odemos,admitir,
em uma aproximao muito grosseira, que o grau de blindagem de um hidrog9nio ligado a
um tomo de carbono depender do efeito indutivo dos demais grupos ligados ao tomo
de carbono. A diferena da posio de absoro do hidrog9nio e a de refer9ncia
chamada de deslocamento qu!mico do hidrog9nio em questo.

Eidrog9nios em heterotomos
s hidrogeneos ligados a um heterotomo diferem dos hidrog9nios ligados ao tomo de
carbono por que podem ser trocados esto su>eiots a ligao hidrog9nio e esto su>eitosa
um acoplamento parcial ou total pelos efeitos do quadrupolo eltrico de alguns dos
heterotomos. A sregi5es habituais de deslocamento para hidrog9nio ligadosa
heterotomos aparecem no ap9ndice <.
5
Eidrog9nios ligados ao oxig9nio
Nlcoois
A menos que precau5es especias se>am tomadas 1ver adiante2,o espectro do etanol puro
mostra usualmente o hidrog9nio da hidroxila como um pico alargado em F,BF. A formao
de ligao hidrog9nio explica por que a posio do hidrog9nio depende da concentrao,
da temperatura e dosolvente. A formao de ligao hidrog9nio e aasim causa um
deslocamento da absoro intermoleular diminui pela diluio em solventes apolares e
com o aumento de temperatura. s solventes polares introduzem uma complica5a
adicional por competirem pela formao de ligao de hidrpg9nio com o soluto.
Ngua
Alm dos problemas de troca rpida discutimos a impureza potencialmente presente em
quase todas as amostras,interfe com outros picos extremamente importantes.A presena
de gua sob aforma de got!culas em suspenso ou de filmes nas paredes dotubo
responsvel por um pico em A,', aproximadamente em /L/I
B
1 a specie EL
encontrada nos experimentos de troca de L
.
2.

Oen&is
/omportamento de hidrog9nio da hidroxila fen&lica assemelha-se ao do hidrog9nio
hidrox!lico de lcoois. pico corresponde e usualmente um singlete agudo 1troca rapida
sem acoplamento2 e sua regio,dependendo da concentrao solvente e temperatura,
geralmente em campo baixo.

Ncidos carboxilicos
s aPcidos existem em solventes apolares como d!meros estveis mantidos por ligao
hidrog9nio, mesmo em grande diluio. hidrog9nio da caboxila, em consequencia,
absorve em uma regio estreita. A lagura dopico na temperatura do ambiente depende da
velocidade de troca do cido em questo. Kroca e rpida co hidrog9nios de gua e dos
lcoois,produzindo um 4nico pico cu>a posio depende da concetrao.

Jeagentes de deslocamento
s reagentes de deslocamento foram introduzidos em"$=$ e permite a abertura dos
modelos de absoro de J+@ sem que se torne necessrio aumentar a fora do acmpo
magntico aplicado. <m outras palavras a adio dos reagentes dd deslocamento em
amostras contendo determinadas fun5es provoca um amento suctancial nas diferenas
de deslocamento qu!mico dos hidrog9nios no-equivalentes. s reagentes de
deslocamento so !ons de elemento da srie das terras raras 1lantan!deos2 coordenados
a ligantes orgnicos.A pesar de > ser reconhecido h bastante tempo o fato de que
alguns !ons de metais causam deslocamentos, somente com a aplicao de reagentes de
deslocamento como <u 1dpm2
B
e <u 1fod2
B
mais recentemente, que estes
deslocamentos puderam ser obtidos sem que houvesse alargamento sustancial das linhas
do espectro.
6
<spectrometria de ressonncia magntica nuclear de
"B
/
:ntroduo
A observao direta do esqueleto de carbono de substncias orgnicas tornou-se prtica
a partir do inicio dos anos '(. n4cleo
"B
/, da mesma forma que o n4cleo
"
E, tem
n4mero se spin Q. /ontudo, como a abundncia isot&pica de
"B
/ de somente ","7 da
de
".
/ e sua sensibilidade apenas ",=F da de
"
E, a sensibilidade total de
"B
/ comparada
de
"
E de cerca de "0F.'((, apenas.
procedimento primitivo de varredura lenta com onda continua exigia uma grande
quantidade de amostra e um tempo proibitiva para obteno do espectro de
"B
/. A
disponibilidade de instrumentao OK, que permite a irradiao simultnea de todos os
n4cleos de
"B
/, a partir do comeo dos anos '(,em comparao com o rpido
desenvolvimento da espectrometria de
"
E > no fim dos anos F(.
:nterpretao dos espectros de
"B
/ 1assinalamento dos picos2
@a espectrometria de
"
E a varredura repetitiva 1onda cont!nua2 resulta em uam relao
satisfat&ria entre as reas integradas dos picos e o n4mero de n4cleos neles
contidos,porque existe tempo suficiente entre irradia5es sucessivas de um determinado
hidrog9nio para que a relaxao ocorra.L e modo semelhante,seria poss!vel obter uma
integrao satisfat&ria no caso de espectros adequado seria proibitivo para trabalho de
rotina.
A tcnica de tempo de relaxao1K
"
2 variam e m uma ampla faixa,no sofrem o mesmo
grau de relaxao e as reas dos picos integrados nocorespondem ao n4mero correto
de tomos de carbono.Rintervalos mais longos entre os per!odos de aquisio podem ser
utilizados,porm tempo necessrio para isto limita a tcnica a situa5es especiais.Alem
disso, h outra complicao.
Alm das correla5es estrutura0deslocamento qu!mico, a tcnica mais 4til para
assinalamento dos picos tem sido o desacoplamento fora de ressonncia. efeito
diurtico em uma molcula 1solventes deuterados2 deve ser entendido e o conceito de
equival9ncia de deslocamentos qu!micos.
Lesacoplamento fora de ressonncia
)imos que o desacoplamento total $banda larga2 simplifica o espectro e aumenta a
intensidade dos picos,porm h perda da informao relativa aos acoplamentos.
desacoplamento fora de ressonncia fornece um espectro simplificado,que ainda retm a
informao sobre o acoplamento residual. desacoplamento da frequ9ncia central do
desacoplador de banda larga de hidrog9nios de ".(((-..((( Ez para campo mais alto ou
de ..(((-B.(((Ez para campo mais baixo em relao a frequ9ncia do hidrog9nio do
K+;,isto , irradiando em campo mais alto ou mais baixo do que o espectro de hidrog9nio
usual 1largura de varredura de ".(((Ez2.:sto resulta em um acoplamento residual dos
hidrog9nios diretamente ligados aos tomos de
"B
/,com perda eventual dos
acoplamentos a longa distncia.
7
Lesacoplamento seletivo de hidrog9nios
3uando u n4cleo de hidrog9nio espec!fico irradiado na sua frequ9ncia exata com uma
pot9ncia menor do que a utilizada para o desacoplamento fora de ressonncia,a absoro
do
"B
/ diretamente ligado a ele apresenta um acoplamento residual.<ssa tcnica tem ;id
empregada no assinalamento do espectro,porm resultados satisfat&rios dependem de se
encontrar a frequ9ncia exata do hidrog9nio e a pot9ncia apropriada para desacopla-lo,o
que pode ser dif!cil.
Jeagentes de deslocamento lantan!dicos
s reagentes de deslocamento lantan!deos podem ser empregados para espalhar o
espectro de
"B
/ da mesma forma como so empregados em estudos de
"
E. /omo
resultado,picos coincidentes podem ser separados concomitantemente com o
espalhamento dos deslocamentos qu!micos dos hidrog9nios.:sso facilita o
desacoplamento seletivo Lops hidrog9nios./ontudo, fazer analogias entre os efeitos de
"B
/ e
"
E um risco
Leslocamentos qu!micos
8ara simplificar as coisas,podemos dizer que os deslocamentos qu!micos de
"B
/ so
paralelos aos de
"
E, de forma que algumas correla5es utilizadas para os espectros de
"
E, podem ser tambm aplicadas aos espectros de
"B
/ esto relacionados principalmente
com a hibridao e a eletronegatividade do substituinte.<feitos de solventes so
importantes em ambos os espectros.s deslocamentos qu!micos de
"B
/ so afetados por
substitui5es que ocorrem nas posi5es S, ,T, U e V,.@o caso de anis
benz9nicos,deslocamentos pronunciados para
"B
/ so usados pela substituio nas
posi5es orto, meta e para.
/omo em outros tipos de espectrometria,o assinalamento dos sinais feito com base em
compostos de refer9ncia. +aterial de referencia para muito as classes de compostos foi
se acumulando rapidamente na literatura.
Acoplamento de spin
acoplamento W primeira vista- menos importante em
"B
/-J+@ do que em
"
E-
J+@,por que os espectros de
"B
/ rotina so em geral,totalmente desacoplados dos
hidrog9nios.:sto e feito para que se obtenham espectros em tempo mais curto e com
menor quantidade de amostra.:sto simplifica tambm o espectro,que fica livre de
absor5es sobrepostas complexas./ontudo,conforme > mencionamos,informao sobre
o acoplamento residual pode ser obtida atravs do acoplamento parcial1 fora de
ressonncia2.
Anlise quantitativa
A anlise quantitativa por
"B
/-J+@ dese>vel em duas situa5es.<m primeiro lugar,
determina5es estruturas,em que e claramente 4til para confirmar se cada sinal devido
a apenas um a carbono.Lepois, na anlise quantitativa de misturas de dois ou mais
8
componentes.@este caso e fundamental que a rea do sinal se>a proporcional ao n4mero
de tomos de carbono responsvel pelo sinal.
<xistem motivos pelos quais os espectros desacoplados no usualmente
quantitativos.8rimeiro, os tomos de carbono com tempos de ralaxao spin-rede 1t
"
2
Iongos podem no retornado completamente distribuio de Xoltzmann no intervalo
entre os pulsos.
9