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Universidad De San Carlos De Guatemala

Facultad de Ingeniera
Laboratorio de Bioqumica
Ing. Erwin Ortiz









REPORTE NO. 1
TITULACION DE ACIDO GLUTAMICO





Vivian Mara cano Salazar
200512129
Seccin B


Fecha de realizacin: 1 de agosto de 2011
Fecha de entrega: 8 de agosto de 2011

2



INTRODUCCIN


La practica No. 1 bioqumica trato acerca de la titulacin del acido Glutmico,
la practica tena como principal objetivo el conocimiento acerca de los
aminocidos, as mismo al estudiar uno de los 20 aminocidos que forman
proteica como lo es el acido glutamico se observo que sus pk varan desde
2.55 hasta 9.1.

As mismo fue encontrado el punto isoelctrico el cual fue calculado al
promediar los el pk de la grafica que arrojo la titulacin del acido glutamico.


Las condiciones a las que se trabajaron son las normales












3



OBJETIVOS

1. Que el estudiante conozca las diferentes formas en que pueden existir
los aminocidos.

2. Que el estudiante determine prcticamente el punto isoelctrico de un
aminocido



















4
RESULTADOS
Tabla No.1
Compuesto Pk1 Pk2 Pk3 Punto isoelctrico
Acido glutamico 2.55 9.1 4.9 3.3
Fuente: datos calculados





Tabla No. 2
Porcentaje de error
Compuesto
Pk experimental 2.55 9.1 4.9
Pk terico 2.19 9.67 4.25
% e error 16.43 0.43 15.29






Grafica No. 1


Fuente: datos calculados









y = -0.4602x + 11.075
R = 0.9358
0
2
4
6
8
10
12
0 5 10 15 20 25
P
H

VOLUMEN HCL
PH VRS VOLUMEN HCL
5



Grafica No. 2










Grafica No. 3



Fuente:










-300
-200
-100
0
100
200
300
0 5 10 15 20 25
V
o
l
t
a
j
e

(
m
V
)

Volumen de HCl (mL)

Voltaje vrs. Volumen Agregado
0
1
2
3
4
5
6
0 5 10 15 20 25
D
e
l
t
a

p
H
/

D
e
l
t
a

V
o
l
.

vol de HCl (mL)
6
MECANISMO DE REACCIN



COOH
-Na

H
3
N C H NaOH
CH
2
HCL
CH
2

COOH















7
Metodologa de calculo
Curva de titulacin.
Grfica de dispersin de pH respecto del volumen de titulante cido
clorhdrico.

Determinacin grfica de punto isoelctrico.
El punto isoelctrico fue determinado a partir de los fundamentos
tericos de la ecuacin de Henderson-Hasselbach:

[Ecuacin No.1


Donde:
[]
= cociente de concentracin cida entre la concentracin de la especie
disociada.


Determinacin de Pk1 es el punto medio de la grafica No. 1

Determinacin de pK2
Se determinaron los valores del punto medio entre el valor del punto
isoelctrico y el estado final de la titulacin en este punto se encontr pK2
para el cido glutmico

Error porcentual

100 *
Dt
De Dt
Er

[Ecuacin]
Er Porcentaje de error relativo.
Dt Dato terico.
De Dato experimental.



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Datos calculados
Tabla No. 2

Corrida
Vol.
agregado PH mV Delta pH Delta vol. Delta pH/ Delta mL
0 0 0 0
1 0 11 -246.7 11 0
2 0.2 10.88 -237.8 0.12 0.2 0.6
3 0.4 10.8 -231.6 0.08 0.2 0.4
4 0.6 10.66 -224.2 0.14 0.2 0.7
5 0.8 10.33 -217.6 0.33 0.2 1.65
6 1 10.38 -208 0.05 0.2 0.25
7 1.2 10.3 -204.6 0.08 0.2 0.4
8 1.4 10.23 -199.4 0.07 0.2 0.35
9 1.6 10.15 -195.5 0.08 0.2 0.4
10 1.8 10.11 -192.8 0.04 0.2 0.2
11 2 10.04 -188.5 0.07 0.2 0.35
12 2.2 9.99 -185.1 0.05 0.2 0.25
13 2.4 9.91 -181.7 0.08 0.2 0.4
14 2.6 9.86 -178.4 0.05 0.2 0.25
15 2.8 9.82 -175.4 0.04 0.2 0.2
16 3 9.76 -171.8 0.06 0.2 0.3
17 3.2 9.66 -166.8 0.1 0.2 0.5
18 3.4 9.63 -164 0.03 0.2 0.15
19 3.6 9.58 -161.5 0.05 0.2 0.25
20 3.8 9.53 -159 0.05 0.2 0.25
21 4 9.51 -157.3 0.02 0.2 0.1
22 4.2 9.47 -155.1 0.04 0.2 0.2
23 4.4 9.43 -153.3 0.04 0.2 0.2
24 4.6 9.39 -150 0.04 0.2 0.2
25 4.8 9.34 -147.4 0.05 0.2 0.25
26 5 9.32 -146.8 0.02 0.2 0.1
27 5.2 9.31 -145.8 0.01 0.2 0.05
28 5.4 9.28 -144 0.03 0.2 0.15
29 5.6 9.24 -141.6 0.04 0.2 0.2
30 5.8 9.2 -139.3 0.04 0.2 0.2
31 6 9.17 -137.5 0.03 0.2 0.15
32 6.2 9.13 -135.1 0.04 0.2 0.2
33 6.4 9.09 -132 0.04 0.2 0.2
34 6.6 9.03 -129.8 0.06 0.2 0.3
35 6.8 8.98 -125 0.05 0.2 0.25
36 7 8.93 -122.6 0.05 0.2 0.25
9
37 7.2 8.87 -119.2 0.06 0.2 0.3
38 7.4 8.78 -114.3 0.09 0.2 0.45
39 7.6 8.68 -108.02 0.1 0.2 0.5
40 7.8 8.58 -102.4 0.1 0.2 0.5
41 8 8.5 -96.9 0.08 0.2 0.4
42 8.2 8.41 -90.9 0.09 0.2 0.45
43 8.4 8.32 -70.2 0.09 0.2 0.45
44 8.6 8.21 11.3 0.11 0.2 0.55
45 8.8 8.1 76.6 0.11 0.2 0.55
46 9 7.11 67.5 0.99 0.2 4.95
47 9.2 6.8 44.5 0.31 0.2 1.55
48 9.4 5.8 66.5 1 0.2 5
49 9.6 5.29 93.5 0.51 0.2 2.55
50 9.8 5.21 101.8 0.08 0.2 0.4
51 10 5.1 105.8 0.11 0.2 0.55
52 10.2 5.04 109.3 0.06 0.2 0.3
53 10.4 4.96 113.5 0.08 0.2 0.4
54 10.6 4.9 117.4 0.06 0.2 0.3
55 10.8 4.8 124.8 0.1 0.2 0.5
56 11 4.7 129.1 0.1 0.2 0.5
57 11.2 4.68 129.8 0.02 0.2 0.1
58 11.4 4.67 130.9 0.01 0.2 0.05
59 11.6 4.53 139.2 0.14 0.2 0.7
60 11.8 4.49 141.4 0.04 0.2 0.2
61 12 4.44 144.9 0.05 0.2 0.25
62 12.2 4.39 147.4 0.05 0.2 0.25
63 12.4 4.32 151.7 0.07 0.2 0.35
64 12.6 4.28 154 0.04 0.2 0.2
65 12.8 4.19 159.5 0.09 0.2 0.45
66 13 4.16 161.4 0.03 0.2 0.15
67 13.2 4.12 163.4 0.04 0.2 0.2
68 13.4 4.09 165.2 0.03 0.2 0.15
69 13.6 4.04 168.6 0.05 0.2 0.25
70 13.8 3.99 170.9 0.05 0.2 0.25
71 14 3.82 181.9 0.17 0.2 0.85
72 14.2 3.7 185.7 0.12 0.2 0.6
73 14.4 3.86 178.8 0.16 0.2 0.8
74 14.6 3.86 178.9 0 0.2 0
75 14.8 3.78 184.3 0.08 0.2 0.4
76 15 3.74 186 0.04 0.2 0.2
77 15.2 3.7 188.6 0.04 0.2 0.2
78 15.4 3.67 190 0.03 0.2 0.15
79 15.6 3.64 192.1 0.03 0.2 0.15
80 15.8 3.55 197.2 0.09 0.2 0.45
81 16 3.48 201.5 0.07 0.2 0.35
10
82 16.2 3.45 203.5 0.03 0.2 0.15
83 16.4 3.39 206.9 0.06 0.2 0.3
84 16.6 3.36 208.7 0.03 0.2 0.15
85 16.8 3.35 209.2 0.01 0.2 0.05
86 17 3.21 217.9 0.14 0.2 0.7
87 17.2 3.19 219 0.02 0.2 0.1
88 17.4 3.12 221.1 0.07 0.2 0.35
89 17.6 3.13 222.2 0.01 0.2 0.05
90 17.8 3.08 226.2 0.05 0.2 0.25
91 18 3.01 229.7 0.07 0.2 0.35
92 18.2 2.94 233.7 0.07 0.2 0.35
93 18.4 2.89 236.9 0.05 0.2 0.25
94 18.6 2.82 241.6 0.07 0.2 0.35
95 18.8 2.79 242.8 0.03 0.2 0.15
96 19 2.74 245.6 0.05 0.2 0.25
97 19.2 2.7 247.8 0.04 0.2 0.2
98 19.4 2.68 249.3 0.02 0.2 0.1
99 19.6 2.64 252.5 0.04 0.2 0.2
100 19.8 2.6 253.8 0.04 0.2 0.2
101 20 2.57 255.7 0.03 0.2 0.15
102 20.2 2.53 258 0.04 0.2 0.2
103 20.4 2.5 259.8 0.03 0.2 0.15
104 20.6 2.45 262.5 0.05 0.2 0.25
105 20.8 2.41 269.8 0.04 0.2 0.2
106 21 2.35 268 0.06 0.2 0.3
107 21.2 2.31 270.7 0.04 0.2 0.2
108 21.4 2.27 273 0.04 0.2 0.2
Fuente: Datos originales, metodologa de clculo









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INTERPRETACIN DE RESULTADOS

En la prctica nmero se realizo la titulacin de acido glutamico para encontrar
los valores de pk as como el punto isoelctrico de dicha titulacin

El cido glutmico es un tipo de aminocido que posee una constante de
Equilibrio debido a su grupo R, esta constante se considero que se
encontraba en el punto medio de la reaccin el volumen medio de cido
clorhdrico y como pKr el pH a ese volumen. Esto se debe a que el punto
de equivalencia, la concentracin de la especie cida y la concentracin de la
especie disociada es la misma, por lo tanto en el punto de equivalencia se
encuentra el punto isoelctrico.

los valores de Pk fueron encontrados al examinar la grafica de Ph vrs Vol.
agregado, en este caso se utilizo HCl, dichos valores de pk son (2.55, 9.1 y
4.9)para pk1, pk2 y pk3 respectivamente.

As mismo se calculo el error porcentual de los Pk siendo el mayor el de Pk1
con un error de 16.63% siendo un error aceptable por lo cual da la practica
como aceptable.











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CONCLUSIONES

La disociacin del acido glutamico se da en tres pasos
El cido glutmico es uno de los 20 aminocidos que ocupa el organismo
para sintetizar las protenas

El punto isoelctrico o insoluble es el promedio de los Pk

















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RECOMENDACIONES

1. Evitar la contaminacin de la muestra para as obtener los
valores de PH correctos
2. Calibrar correctamente el potencimetro
3. No tocar el electrodo


OBSERVACIONES

1. El pH variaba al aumentar el volumen













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REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS


1. J. G. Morris
FISICOQUIMICA PARA BIOLOGOS
Editorial original: Eduar Arnold Publisher
Traducida por Dr.Ricardo Guerrero
Editorial : Revert
Ao: 1995
Pginas: 147-160


2. Pea, Arroyo BIOQUIMICA
Editorial: Limusa
Edicin: undcima copia de segunda
edicin
Ao: 2000
Pginas: 448-452


























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ANEXOS
Procedimiento


1. Prepare 250 ml de una solucin de glutamato mono sdico 1 M. Use agua
destilada a pH=7, como disolvente.

2. Determinar el valor de pH de la solucin preparada.

3. Tomar dos alcuotas de 10 ml cada una, de la solucin del paso 1, y
colquelas en erlenmeyers separados.

4. Al primer erlenmeyer adicione un volumen de NaOH 1 M, hasta que la
solucin alcance un pH = 11. Anote el volumen agregado. Guarde este
erlenmeyer previamente identificado para la segunda parte.

5. Al segundo erlenmeyer adicione un volumen de agua destilada de pH = 7
aproximadamente igual, al volumen de NaOH agregado en el inciso 4.
Identifique el erlenmeyer y anote el valor de pH de esta nueva solucin.

6. Coloque en una bureta una solucin de HCl 1 M.

7. Inicie la titulacin; agregue los volmenes de HCl segn lo indique el
instructor/a.








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Titulacin acido glutamico