Efectos de las perturbaciones operacionales sobre las poblaciones
microbianas clave para biogs produccin en UASB (anaerobio de flujo
ascendente de lodos Manta) reactores Palabras clave: La produccin de biogs, reactores UASB, funcionamiento intermitente, perturbaciones operacionales, Las poblaciones microbianas, Syntrophomonadaceae.
Resumen Este trabajo compara el rendimiento y la produccin de biogs general de continua e intermitente UASB (Anaerbico de flujo ascendente de lodos Manta) reactores de tratamiento de aguas residuales lcteas y sometidos a la grasa, hidrulica y choques de temperatura. Los sistemas fueron monitorizados para la produccin de metano, la concentracin de efluente, voltiles cidos grasos, y las poblaciones microbianas de los grupos de eubacterias, Archaea y Syntrophomonadaceae. Este ltimo grupo microbiana ha sido reportado en la literatura como factor determinante para la degradacin de cidos grasos, sustratos presentes en la produccin de aguas residuales y biogs posteriores. Resultados muestran que tantos sistemas continuos e intermitentes apoyaron las simulaciones aplicadas. Sin embargo, los sistemas intermitentes exhibieron un mejor rendimiento que los sistemas continuos en la produccin de biogs y fsico-qumica parmetros. Syntrophomonadaceae grupo microbiana estaba presente en los sistemas de intermitentes, pero era no detectado en la biomasa de los sistemas continuos. choques hidrulico y temperatura, pero no el choque de grasa, causado graves prdidas en la abundancia relativa del grupo Syntrophomonadaceae en intermitente sistemas, dando lugar a niveles indetectables durante el choque de temperatura. La gravedad de los efectos de las simulaciones aplicadas en el grupo microbiano clave Syntrophomonadaceae, se clasifican en: grasas <hidrulico <temperatura. Los resultados de un reactor anaerbico a gran escala confirmar el efecto de intermitente operacin en la presencia de Syntrophomonadaceae y el efecto sobre el rendimiento del reactor.
1. Introduccin El inters en el desarrollo y la utilizacin de la no petrolera fuentes renovables de energa a base de ha sido impulsada por las preocupaciones en la energa de las emisiones de gases de efecto invernadero y de seguridad [1]. Entre recursos de energa renovable, la bioenerga es uno de la ms rpida creciente alternativa de energa, con un enorme potencial en muchos regiones del mundo [2E5]. Por ejemplo, la estrategia europea de fuentes de energa renovables identifica bioenerga como la ms importante fuente de energa renovable para el futuro. El desarrollo de bioenerga es una medida importante para mejorar la estructura de la energa, salvaguardar la seguridad energtica, proteccin del medio ambiente, y promover un desarrollo sostenible [2]. En este contexto, el tratamiento anaerbico de la industria lechera aguas residuales que contienen altas concentraciones materia orgnica de complejo es muy atractivo debido a la alta rendimientos de metano y el potencial de produccin de energa. Adems de su naturaleza qumica compleja, aguas residuales lcteas se caracteriza por una amplia variacin en el flujo, la composicin de la materia orgnica y la concentracin, debido a la naturaleza cclica de los procesos de produccin y de limpieza. En general, las plantas de tratamiento de aguas residuales incluyen un flujo depsito de igualacin que reduce las fluctuaciones de flujo y de carga. Sin embargo, en las plantas lecheras a escala real, las variaciones en el flujo, orgnica cargar y concentraciones de grasa pueden llegar a un orden de 100% en comparacin con los valores medios [6]. Estas fluctuaciones son importantes ya que el principales inconvenientes de la tecnologa anaerbica son un funcionamiento inestable, poca resistencia a las variaciones de carga alta, y transitoria operativa condiciones [7,8]. En aguas residuales lcteas, los componentes ms problemticos para el tratamiento anaerbico son las grasas y los LCFA (cadena larga cidos grasos) que resultan de la hidrlisis de grasas [9E11]. Varias investigaciones se han publicado en los ltimos aos con respecto a la degradacin anaerobia de grasas y LCFA y sus efectos sobre la rendimiento de los procesos en general [12,13]. grasas se degradan a travs del metabolismo vas distintas de las de protenas e hidrocarburos. En un primer paso, grasas neutras son hidrolizados (lipolysed) a libre LCFA y glicerol, un proceso catalizado por lipasas extracelulares. La libre LCFA se convierten en acetato y H2 por acetognica microbiano bacterias a travs del proceso b-oxidacin. microorganismos de la Grupo Syntrophomonadaceae se han encontrado para desempear un importante papel en este paso de la degradacin anaerbica LCFA [14e16], y se por lo tanto, considerarse un grupo microbiana clave para el anaerbico la degradacin de las aguas residuales que contienen grasa (es decir lcteos de aguas residuales) y la produccin de biogs posteriores. Desde lpidos y LCFA tienen un alto potencial de metano, el grupo Syntrophomonadaceae es tambin una tecla grupo microbiano para la maximizacin de la produccin de biogs. El ltimo paso del proceso anaerobio es la produccin de metano por metangenos (microorganismos Archaea). El paso b-oxidacin tiene han informado que el paso limitante en la degradacin anaerobia de los grasas [11]. LCFA ejercen un efecto inhibidor sobre el proceso de b-oxidacin, que se consider inicialmente como permanente [9], pero fue ms tarde demostrado ser reversible despus de una fase de latencia [17]. Estudios recientes enfatizar la importancia de una comunidad microbiana bien equilibrada para la estabilidad y el buen funcionamiento de los reactores anaerbicos [8,18e20], y para la produccin de biogs optimizado. Sin embargo, transitoria condiciones de operacin son conocidos por alterar este equilibrio necesario [21]. Se ha informado de que las poblaciones anaerobias sufrieron cambios provocados por la sobrecarga [8,22] o por los cambios de temperatura [23]. Aguas residuales y otros efluentes lcteos, tales como la elaboracin de alimentos efluentes, estn sujetas a fuertes fluctuaciones en la composicin que puede afectar al rendimiento de sistemas anaerbicos. Significativo disminuye en la eficiencia global se observaron por Schmidt y Ahring [24] cuando UASB (anaerobio de flujo ascendente de lodos Manta) feed reactores composicin fue cambiado. Variaciones en la fuente de carbono presente en las aguas residuales se inform a causar cambios graduales en la estructuras fsicas, la distribucin y las caractersticas de sedimentacin bacteriana de los lodos en reactores UASB [25]. Informacin por Fukuzaki et al. [26] tambin demostr que las variaciones de la fuente de carbono presente en las aguas residuales provocado cambios en la estructura fsica, contenido qumico (sustratos polimricos extracelulares) y bacteriana distribucin. Especficamente en lo que se refiere a la sobrecarga repentina de sustratos grasos, gotas graves de actividad metanognicas y la produccin de biogs se han reportado como resultado de la inhibicin, acompaada por el deterioro de la calidad del lodo [27]. flotacin con frecuencia da como resultado, debido a la adsorcin de LCFA en el lodo superficie [27,28]. Otro efecto es la desintegracin de los agregados de lodos, lo que puede ocurrir cuando los lpidos estn presentes, debido a la efecto surfactante de LCFA. Los acetgenos hidrofbicas que pueden degradar LCFA se ve muy afectado por este desagregacin surfactante efecto [29]. La respuesta de los reactores anaerobios a los choques hidrulicos tiene han reportado en la literatura como que resulta en la cada de la eliminacin eficiencia [27], la desagregacin y el lavado de organismos filamentosos [29,30], y AGV (cidos grasos voltiles) la acumulacin y la inhibicin de las bacterias metanognicas con la consiguiente cada de la produccin de biogs [31]. En este tipo de choque operativa, una mejora efecto tambin se ha observado en la DQO (qumica de oxgeno la demanda) la concentracin del efluente tratado, atribuido a cambios en la estructura de las poblaciones microbianas en el interior del reactor [32], o a cambios en el medio constante de saturacin Monod [7]. Algunos autores sugieren que el aumento de la velocidad de difusin sustratos con la concentracin de sustrato superior (ley de Fick) y disminuir con una velocidad de flujo ms alta [33], mientras que otros autores [34] encontr que la resistencia de transferencia de masa externa se puede disminuir mediante el aumento de la velocidad de flujo. Brito y Melo [35] informaron de que bajo condiciones de flujo de lquido turbulento, y por lo tanto ms alto cizallamiento el estrs, la velocidad de flujo tena un efecto pronunciado sobre la biopelcula espesor y compacidad, que conduce a la transferencia de masa diferente coeficientes. Si el lquido a granel sufre un cambio en la velocidad, hay una aumento de coeficiente de transferencia de masa interna. En lo que se refiere lavado de la biomasa causada por sobrecarga hidrulica se inform [36] que los microorganismos responsables de la degradacin de los LCFA eran los ms susceptibles con el lavado a baja HRT (hidrulica tiempo de retencin). Temperatura de funcionamiento es amajor factor sobre el desempeo de reactores anaerbicos [37,38]. operacin termoflica ha sido sealado como presentar algunas ventajas sobre el funcionamiento mesfilos, es decir, en trminos de tasas de degradacin del sustrato y biogs produccin [23,39]. Sin embargo, los reactores mesfilas presentan una mayor estabilidad operacional [38,40]. biomasa metanognicas Significativo lavado fue reportado por Khemkhao et al. [23] debido a mesoflica a transicin termfilo de la temperatura operativa de una UASB efluente del reactor de tratamiento de molino de aceite de palma. Otros efectos resultantes de el aumento de la temperatura operativa incluyen el aumento de la produccin de biogs y menor contenido de metano del biogs. Cuando el proceso se expone a una alteracin repentina de la temperatura, el proceso condiciones pueden ser desequilibrada debido a las diferentes respuestas de la diversos grupos metablicas [41]. Van Lier et al. [42] encontr que la exposicin de un reactor UASB a temperaturas superiores a 45 C dio como resultado grave cada en la actividad de lodo granular debido a mesoflica alta descomposicin bacteriana. Inmediatamente despus del choque de temperatura, un aumentar la produccin de biogs se observ, seguido por una fuerte disminuir. Los microorganismos que oxidan propionato son los ms susceptibles a la elevacin de la temperatura, y se inform tambin de que metangenos son ms susceptibles a los cambios bruscos de temperatura que agentes acidgenos. Tambin se sabe que las variaciones de temperatura pueden afectar la capacidad de retencin de lodos, ya que la temperatura afecta la viscosidad, y, en consecuencia, las fuerzas de cizallamiento hidrulicas ejercidas sobre el lodo partculas [43]. UASB (anaerobio de flujo ascendente de lodos Manta) reactores son los ms tecnologa anaerbica ampliamente utilizado para el tratamiento de la industrial aguas residuales [44,45]. El rendimiento de estos sistemas puede ser en gran medida reforzada por una nueva forma de operacin llamado intermitente operacin, en la que se combinan los perodos de alimentacin y de feedless para elevar la produccin de biogs [46]. El efecto beneficioso de la operacin intermitente se atribuye a una adaptacin forzada de la biomasa anaerobia para sustratos resistentes a la degradacin (grasas y LCFA) que se produce durante los perodos feedless [47]. Estudios sobre las poblaciones microbianas esforzndose en reactores UASB continuas e intermitentes el tratamiento de aguas residuales lcteas han mostrado un aumento significativo en Syntrophomonadaceae abundancia relativa en reactores intermitentes como en comparacin con los reactores continuos [47]. Hasta la fecha, ningn estudio ha sido publicado comparar el rendimiento de continuo e intermitente Reactores UASB sometidos a choques operativos y su efectos sobre el grupo microbiano clave Syntrophomonadaceae. 2. Materiales y mtodos Este trabajo compara el rendimiento de intermitente y reactores UASB continuas tratamiento de aguas residuales lcteas con una carga de 12 g DQO / L / da y sujetos a choques operativos. Dos rplica a escala de laboratorio reactores UASB (volumen de 6 L de trabajo) se operados en un modo continuo y dos fueron operados en un el modo intermitente. El ciclo intermitente constaba de 48 h de alimentacin seguido de 48 h feedless [46]. La concentracin de la alimentacin para el reactores intermitentes siempre fue el doble de la concentracin de la alimentacin utilizado para los reactores continuos, de modo que en un perodo de 96 h del total Masa COD admitido en cada reactor fue el mismo. La alimentacin era compuesto por leche semidesnatada diluido o leche entera, complementado con nutrientes y alcalinidad. Los reactores fueron sembradas C.S. Couras et al. / Energia 73 (2014) 867 866e874 con aproximadamente 4 L de lodos floculante adaptado a los productos lcteos las aguas residuales de una planta de tratamiento de aguas residuales industriales. La lodos inoculacin tuvo un SMA (actividad metanognicas especfica) de 7,1 ml CH4 / g SSV / da mide con acetato de sodio a (35 1)? C. A lo largo de todo el experimento, el efluente de los reactores era recogida en 24 h muestras compuestas. Todas las determinaciones fsico- qumicas se realizaron de acuerdo con los mtodos estndar [48]. El biogs producido se midi mediante medidores de gas hmedo (Schlumberger). Contenido de metano en el biogs se control utilizando un Shimadzu GC e Cromatgrafo de gases equipado con un 9a Supelco Molecular Sieve 5 A columna y un detector de conductividad trmica (T 100 C). Inyeccin temperatura era de 45? se utiliz C y helio como gas portador (P = 4,4 kg / cm2). Voltil determinacin de cidos grasos se llev a cabo en un Chrompack CP 9001 cromatgrafo de gases equipado con un Chrompack columna CB Sil5 e CP electrnico y un detector de ionizacin de llama (T 300 C). La inyeccin temperaturewas 270? C y Heliumwas utilizado como gas portador con un flujo volumtrico de 8 ml / min. Biomasa muestras para FISH (Hibridacin Fluorescente In Situ) analiza se recogieron inmediatamente antes de cada choque aplicada, al final de el perodo de shock, y 20 das despus del final del choque. Despus coleccin, muestras de biomasa se congelaron inmediatamente en? 20? C. Para (FISH) experimentos, las muestras se les permiti alcanzar la temperatura ambiente y se agita en vrtex durante 5 min para interrumpir grnulos y otra agregados, y posteriormente se fijaron con formaldehdo (4% v / v). Las muestras fijadas se lavaron 3 veces con PBS (tampn fosfato solucin salina) y se almacen a? 20 C en una mezcla que contiene 50% de PBS y 50% de etanol. Las muestras fueron vistos sobre la superficie del portaobjetos de vidrio (2 puntos por portaobjetos) y se dej secar durante 30 min a 42 C. Las muestras? se deshidrataron adems por 3 incubaciones de 3 minutos cada uno con concentraciones crecientes de etanol (50, 80 y 100% v / v) y se finalmente se sec a temperatura ambiente. Cada mancha se cubri con 9 ml de tampn de hibridacin (0,9 MNaCl, tampn 20 mMTris, 10mMEDTA (cido etilendiaminotetraactico), 0,01% de SDS, pH 7,2) y 1 ml de solucin de la sonda de trabajo (50 mg / ml) de cada sonda. Las sondas utilizadas fueron EUB338 (50-GCGCCTCCCGTAGGAGT-30, [49]) especfico para Eubacterias, Arc915 (de 50, [50] GTGCTCCCCCGCCAATTCCT-30) especfico para Archaea, y SYNM700 (50-ACTGGTN5TTCCTCCTGATATCTA-30, [51]) especfico para Syntrophomonadaceae. Fueron elegidos Estas sondas para evaluar la composicin de la poblacin microbiana, es decir, el total de poblacin bacteriana incluyendo bacterias acidognicas (EUB338), la Poblacin Archaea que incluye los metangenos (Arc915), y los microorganismos degradadores de cidos grasos pertenecientes a la Syntrophomonadaceae (SYNM700). Sondas marcadas con FITC (EUB338), CY3 (ARC915), o CY5 (SYNM700) fueron adquiridos de Eurofins GTM Operon (Alemania). La hibridacin se realiz en una cmara humidificada para 3 horas a 45 C. Despus de la hibridacin, las diapositivas se lavaron posteriormente con tampn de lavado (NaCl 180 mM, Tris 20 mM, EDTA 5 mM, 0,01% SDS, pH 7,2) durante 30 min a 48? C. Los portaobjetos se incubaron adicionalmente con 10 ml de DAPI (2 mg / ml) en PBS a temperatura ambiente durante 15 min, seguido por 3washes con agua destilada a temperatura ambiente. La portaobjetos se analizaron con un microscopio equipado con Axioplan una fuente de luz UV externo y filtros adecuados para el fluorescente colorantes bajo uso. Las imgenes fueron capturadas por una cmara CCD (Roper Cientfico) y procesados con el software Metamorph. La imagen Software J se utiliz para cuantificar la intensidad de fluorescencia obtenida con cada sonda. Los resultados son los valores medios obtenidos para al menos 3 diapositivas, cada manchado al menos tres veces. Los reactores fueron operados en condiciones basales (HRT 12 h; OLR (velocidad de carga orgnica) 12 g DQO / L / d) durante varios meses antes del comienzo de los experimentos de choque operacionales. Tres tipos de se aplicaron choques operacionales, que consiste en el aumento de los piensos contenido de grasa, el flujo volumtrico de alimentacin, o la temperatura operativa. El porcentaje de remocin de DQO se calcul con la siguiente frmula: Removal% CODT? Feed? CODS? Efluentes ? RSS CODT ? 100 (1) La metanizacin porcentaje se calcul con la siguiente frmula: Methanisation% COD? CH4 CODR ? 100 (2) Resultados para un reactor anaerobio a escala real de un tratamiento de la leche y la planta industrial de produccin de queso tambin se presentan en este trabajo. El reactor era un tanque continuamente agitado mesoflica reactor con un volumen de trabajo de 2.500 m3. Toda la physicalechemical y se realizaron determinaciones microbiolgicas en el mismo laboratorio y con los mismos mtodos que para el reactores UASB a escala de laboratorio. 3. Resultados y discusin 3.1. Experimentos de choque con escala de laboratorio reactores UASB Se establecieron tres perodos de lnea de base, correspondiente a la tres perodos antes de cada una de las simulaciones aplicadas. El rendimiento de los los sistemas intermitentes que operan en condiciones basales era mejor que la observada para los sistemas continuos relativos eficiencia metanizacin, de acuerdo con otros informes [47,52,53]. Bajo condiciones basales, los valores medios de esta parmetro vari 86% e90% y 53% E58%, para el intermitente y los sistemas continuos, respectivamente. El promedio de remocin de DQO eficiencias en la operacin de la lnea de base variaron 94% E96% para el intermitente sistemas, y el 85% e90% para los sistemas continuos. Estos diferencias en los resultados operativos se han atribuido a la feedless fase de la operacin intermitente [54], en la que el anaerbico biomasa se ve obligado a adaptarse a sustratos complejos difciles de degradar (principalmente grasas y LCFA), por medio de la poblacin microbiana cambios que aumentan la abundancia relativa de la Syntrophomonadaceae grupo [47] implicada en la degradacin de sustratos grasos. En De hecho, la abundancia relativa del grupo en Syntrophomonadaceae la poblacin microbiana desarrollado en los sistemas intermitentes operando a condiciones de base vari de 17% a 20%, mientras que este grupo microbiano clave no estaba presente a niveles detectables en el sistemas continuos a lo largo de todos los experimentos realizados en este trabajo. Resultados para la grasa, hidrulica, y cambios bruscos de temperatura, aplicadas a sistemas UASB continuas e intermitentes se discuten a continuacin. Perodos iniciales y posteriores al choque eran inmediatamente antes y inmediatamente despus de los choques, respectivamente. valores para la lnea de base perodos y por los perodos posteriores a los shocks son promedios de 20 das o 5 ciclos intermitentes. barras de error representan las desviaciones estndar. 3.1.1. Choque Fat El choque de grasa aplicada consisti en un aumento en la grasa de alimentacin promedio el contenido de 110 mg / L a 261 mg / L en los sistemas de intermitentes y de 63 mg / L a 130 mg / L en los sistemas continuos. El choque dur 20 das o 5 ciclos intermitentes. concentracin COD feed Promedio y el flujo volumtrico se mantuvieron a fin de mantener un OLR constante durante el experimento. Las grasas son substratos de mayor potencial de produccin de metano de los hidrocarburos y de las protenas. Tericamente, sera de esperar que un aumento en el contenido de grasa de alimentacin podra causar un aumento en la produccin de metano si no se alcanzan los umbrales de inhibicin. La concentraciones de grasa durante el choque de grasa estaban por encima de la inhibicin valor umbral de 100 mg / L reportado por Perle et al. [10]. Resultados en Fig. 1A muestran que, frente a la observada para el continuo 868 C.S. Couras et al. / Energia 73 (2014) 866e874 sistemas, la produccin de metano en los sistemas intermitentes plantearon ligeramente cuando el contenido de grasa de alimentacin se elev. Esta diferencia en el sistemas de respuesta al choque de grasa es probablemente debido a la mejora degradacin del sustrato se producen en los reactores intermitentes como consecuencia de la adaptacin de la biomasa a los sustratos complejos presente en la alimentacin. Los sistemas intermitentes no presentaron significativa variaciones en la eficiencia de remocin de DQO del efluente (Fig. 1b) o en el lavado de TSS (slidos suspendidos totales) (Fig. 1c) como un consecuente del choque grasa. Sin embargo, el choque de grasa result en una disminucin de la eficiencia de remocin de DQO en los sistemas continuos. Este era probablemente debido a la degradacin del sustrato mejorada que ocurre en los sistemas intermitentes, lo que resulta en un lodo anaerobio con capacidad de adsorcin no afectado, y que conduce a la eficiencia de remocin de DQO similar a la observada para la lnea base. Este efecto no fue observado en los sistemas continuos, cuando la ininterrumpida la alimentacin no permiti la degradacin completa de la adsorbido sustratos complejos [55]. En los sistemas continuos, el efecto de choque grasa en suspendi slidos (Fig. 1c) fue ms pronunciado que el efecto sobre el efluente COD soluble. El aumento en el contenido de grasa de piensos, caus un aumento en efluentes slidos en suspensin en los sistemas continuos de un promedio de 0,79 g / L a 1,30 g / L. Una gran acumulacin de flotar biomasa se observ en la seccin superior de los reactores continuos. Tambin flotationwas observ Esta biomasa, aunque en mucho menor medida, en los sistemas intermitentes, ya que los perodos feedless disminuido de flotacin y de lavado de la biomasa. La metanizacin de la COD eliminado difera para los dos tipos de sistemas (. Fig 2). El sistema continuo sufri una prdida en eficiencia metanizacin, de un promedio de 59% e34% durante el perodo de shock, mientras que los sistemas intermitentes presentan un ligero aumento de la eficiencia de metanizacin durante el perodo de choque, desde un promedio de 90% e92%. Despus del perodo de descarga, el intermitente reactores presentaron una eficiencia similar a la metanizacin observado antes del choque. Los reactores continuos alcanzaron un valor promedio de 48%, inferior a la observada antes del choque. Se encontraron diferencias importantes en el contenido de AGV de ambos sistemas sometido al choque grasa (. Fig 3). En la operacin de lnea de base, actico y los cidos propinico fueron los cidos predominantes en ambos sistemas, aunque la concentracin total de AGV fue mayor en el continuo sistemas. El choque grasa caus un fuerte aumento de la concentracin de cido propinico 28 a 105 mg / L (como cido actico) en el continuo sistemas. El aumento de cido propinico es consistente con inhibidor efectos de las grasas y sustratos grasos sobre la biomasa anaerobia. Otros cidos presentes en el efluente de los sistemas continuos se caproico y cidos n-butrico. En los sistemas intermitentes, el choque de grasa provocado la aparicin de n-butrico y cidos i-valrico, y para un en menor medida, de cido caproico. Resultados de FISH (fig. 4a y b) obtenidos muestran la Syntrophomonadaceae , un grupo microbiana clave para la degradacin de sustratos grasos y la maximizacin de la produccin de biogs, estaba ausente en el continuo reactores antes, durante, o despus del choque. En estos reactores, una disminuir en la abundancia relativa de Archaea (metanognicas) microorganismos tambin se observ, durante y despus del choque de grasa. En los sistemas intermitentes, el choque de grasa caus un ligero aumento en el abundancia relativa del grupo Syntrophomonadaceae, durante y despus del choque. Un ligero aumento en la abundancia relativa fue tambin detectado para el grupo microbiana Archaea. Estos resultados apoyan la prestaciones observadas para la produccin de biogs de la continua y reactores intermitentes. 3.1.2. Amortiguador hidrulico El choque hidrulico dur 12 h o la mitad del perodo de alimentacin de funcionamiento intermitente. Esto consisti en la disminucin de la media HRT de 11,3 h a 6,1 h en los sistemas intermitentes, y de 12,0 a 6,1 h en los sistemas continuos. Durante el choque hidrulico del COD de la alimentacin se reduce a la mitad con el fin de mantener un constante OLR durante todo el experimento: 10,9 g DQO / L / da y 11,3 g DQO / L / da para los sistemas intermitentes y continuas, respectivamente. La hidrulica impacto fue severo para ambas continuas e intermitentes sistemas de produccin de metano. (Fig. 5) en los sistemas intermitentes disminuido de un promedio de 0,89 L / h a un promedio de 0,26 L / h, equivalente a una disminucin del 70%. En los sistemas continuos el efecto que es an ms grave, con la disminucin de la produccin de metano por 76%, de un promedio de 0,50 L / h a un promedio de 0,12 L / h. La ligeramente superior capacidad de recuperacin de la produccin de metano en el intermitente Figura 1. Resultados de la conmocin de grasa en a) la produccin de metano;. B) remocin de DQO;. C) TSS en lnea de base efluente tratado; Choque; post- descarga I intermitente;. C continua. Figura 2. metanizacin con el experimento de choque grasa basal; .. Choque; Post- . Choque I intermitente; C continua. Figura 3. VFA en el efluente del experimento de choque de grasa I intermitente; .. C continua. B de lnea de base; S Choque; PSPost-Shock. C.S. Couras et al. / Energia 73 (2014) 869 866e874 sistema puede ser atribuido a la presencia de microorganismos desde el grupo Syntrophomonadaceae (Fig. 8) y a una biomasa menor lavado (. figura 5c). El lavado pesado TSS observado en el continuo sistema se atribuye al efecto combinado de la alta velocidad de flujo ascendente y la presencia de sustratos acumulados en la superficie de la biomasa, un resultado tpico de funcionamiento continuo de UASB reactores [55]. Al igual que en los reactores intermitentes los flculos de biomasa eran no tan fuertemente rodeado de sustratos grasos adsorbidos, los efectos de alta velocidad de flujo ascendente no fuera tan grave. La biomasa limpia resultante de la operacin intermitente tambin se traduce en una mayor capacidad para la adsorcin de los sustratos de aguas residuales, por lo tanto explicar las eficiencias de eliminacin de DQO superiores (Fig. 5b). Vale la pena sealando que la DQO del efluente para el sistema continuo disminuy ligeramente despus de que el choque hidrulico en comparacin con el valor basal. Esto es probablemente debido al efecto de las fuerzas de cizallamiento de la ascendente lquido, lo que resulta en la liberacin de sustratos adsorbidos y consecuencia, aumentar la disponibilidad de sitios de adsorcin de sustrato remocin. El efecto de la mayor velocidad de flujo ascendente en la transferencia de masa [35] tambin debe ser considerado. En ambos sistemas, la eficiencia de metanizacin fue negativamente impactado por el choque hidrulico (Fig. 6), disminuyendo de 89% a 53% en los sistemas intermitentes, y del 56% al 32% en el sistemas continuos. Durante el choque hidrulico, la concentracin de AGV en los efluentes aument de un 42 a 125 mg / L y de 69 a 182 mg / L (como ACH), en los sistemas intermitentes y continuas, respectivamente. En los sistemas intermitentes, los principales cidos producidos debido al choque eran n-butrico, i-butrico y valrico i-, mientras que en los sistemas continuos de los principales cidos resultantes eran propinico, n-butrico y n-valrico (Fig. 7). Tras el choque, los valores del total Concentracin de AGV fueron 54 y 132 mg / L (como ACH), respectivamente, para los sistemas intermitentes y continuas. Los resultados del monitoreo de la biomasa de peces en el intermitente sistemas (Fig. 8b) muestran que los microorganismos de la Syntrophomonadaceae grupo sufri lavado, resultando en una disminucin de su abundancia relativa de 17% a 5%. Segn Hwu et al. [36] las bacterias que degradan LCFA son los ms sensibles a lavado causado por una baja HRT. Despus del choque, la abundancia relativa del grupo Syntrophomonadaceae elevado a 10%. En el sistemas continuos del grupo microbiano que sufri de lavado debido al choque hidrulico fue el grupo (metanognicas) Archaea (De 59% a 50%). Despus del choque, una ligera recuperacin de la relacin Poblaciones figura 4. microbianos en el experimento de choque grasa;. A) sistema continuo;. B) del sistema intermitente eubacterias excluyendo Syntrophomonadaceae; Syntrophomonadaceae; . Archaea B de lnea de base; S Choque; PS post-descarga. Figura 5. resultados del choque hidrulico a) la produccin de metano;. B) remocin de DQO;. C) TSS en lnea de base efluente tratado; Choque; post- descarga I intermitente;. C continua. Figura 6. metanizacin con el experimento de choque hidrulico de lnea de base; .. Choque; Post-descarga I intermitente;. C continua. .. Figura 7. VFA en el efluente del experimento choque hidrulico I intermitente; . C Continuo B de lnea de base; S Choque; PS post-descarga. 870 C.S. Couras et al. / Energia 73 (2014) 866e874 se observ abundancia (55%) para este grupo microbiano. Estos resultados se correlacionan con la produccin de metano observado en el reactores. 3.1.3. Choque de temperatura El choque trmico se prolong durante 12 das o 3 ciclos intermitentes y consisti en un aumento de sueldo a un paso de la temperatura de funcionamiento a partir de (35 1)? C a (55 1)? C. El choque condujo a un aumento en la produccin de biogs en ambos sistemas (resultados no mostrados). Un similares efecto fue reportado por Van Lier et al. [42]. Sin embargo, el metano porcentaje en el biogs se redujo en ambos sistemas. Esta reduccin fue ms grave en los sistemas continuos (67% e52%), en comparacin con los sistemas de intermitentes (75% e67%). Sera espera que un aumento en la temperatura de funcionamiento puede mejorar el rendimiento general y la produccin de biogs de ambos sistemas, desde termfilo reactores se han descrito como ms eficaz en el tratamiento de aguas residuales complejas en comparacin con los sistemas de mesfilos [23,39]. Sin embargo, el rendimiento de ambos sistemas disminuy, teniendo en cuenta todos los parmetros monitorizados (Figs. 9E11). La ms grave efecto se observ para el lavado TSS, que puede haber sido causada por la desagregacin de los flculos de biomasa debido a la alta temperatura [43] y debido a los efectos de la turbulencia del incremento inicial en la la produccin de biogs. El choque de temperatura tambin dio lugar a una prdida severa de los microorganismos del grupo Syntrophomonadaceae en el intermitente reactores (. Fig 12b). El choque de temperatura generan condiciones que dieron lugar a una reduccin de la abundancia relativa de la Grupo Syntrophomonadaceae desde un valor inicial de 20% a los valores sin ser detectados por la metodologa utilizada FISH. Sorprendentemente, despus de la mesfilo se reanud la operacin, la abundancia relativa de este grupo microbiana alcanz niveles detectables (9%). Esta reduccin de el grupo Syntrophomonadaceae no afect la produccin de biogs del reactor intermitente. Estos resultados sugieren que la produccin de metano a partir de sustratos distintos de los lpidos / LCFA y / o a travs de otras vas metablicas que b-oxidacin se vieron afectados por el cambios bruscos de temperatura en menor medida ms limitada que la microorganismos del grupo Syntrophomonadaceae. En la sistemas continuos del grupo microbiano Archaea fue el ms susceptible con el lavado, con abundancias relativas disminucin de 60% a 47%, y la recuperacin de 52% despus del choque. Poblaciones figura 8. microbianos en el experimento de choque hidrulico;. A) sistema continuo;. B) del sistema intermitente eubacterias excluyendo Syntrophomonadaceae; Syntrophomonadaceae; Archaea Choque;. PS post-descarga. Figura 9. resultados del choque de temperatura a) la produccin de metano;. B) remocin de DQO;. C) TSS en lnea de base efluente tratado; Choque; post- descarga I intermitente;. C continua. Figura 10. metanizacin con el experimento de choque de temperatura basal; .. Choque; Post-descarga I intermitente;. C continua. .. Fig 11 VFA en el efluente del experimento de choque de temperatura I intermitente; . C Continuo B de lnea de base; S Choque; PS post-descarga. C.S. Couras et al. / Energia 73 (2014) 871 866e874 Para cada experimento de choque realizado en este trabajo (grasas, hidrulica y los choques de temperatura), un ManneWhitney (no paramtrica) Se realiz prueba estadstica para comprobar la estadstica significacin de las diferencias en la abundancia relativa de los diferentes grupos microbianos entre las condiciones de funcionamiento para cada par de reactores. Para cada par de reactores de todas las diferencias en la relacin abundancia de los diversos grupos microbianos de la lnea de base, a los golpes o se encontraron condiciones post-choque para ser significativo para un significado nivel de 5%. La Tabla 1 resume los efectos de los shocks aplicados sobre la abundancia relativa del grupo microbiana Syntrophomonadaceae en los sistemas intermitentes. En cuanto a este grupo microbiano clave, la gravedad de las simulaciones aplicadas se puede clasificar como: grasas <hidrulico <temperatura. 3.2. Reactor anaerobio a escala real En otros trabajos de investigacin realizados por nuestro grupo hemos utilizado varios muestras de biomasa recogidos a lo largo de un perodo de ms de 3 aos a partir de un reactor industrial anaerbico en un aguas residuales lcteas planta de tratamiento ubicada en el norte de Portugal. Aunque el agua residual pasa a travs de un tanque de ecualizacin algunas variaciones ocurrido en las condiciones operativas del reactor. El funcionamiento del reactor se puede dividir en dos fases (ver Tabla 2). En fase 1 el reactor anaerbico trabaj en un modo continuo y presentados varios problemas causados por los materiales grasos en el aguas residuales, como la encapsulacin de flculos de biomasa y la consiguiente , debido a una alteracin en la biomasa de lavado. En la segunda fase programa de produccin, el reactor se hizo funcionar en un intermitente el modo en el que los feedwas interrumpida durante un da de la semana (Domingos). Los datos que se presentan en la Tabla 2 muestran que en la fase 2 del reactor tena un rendimiento mejorado en comparacin con la fase 1 en lo que se refiere a la remocin de DQO y eficiencia metanizacin. El los resultados de las determinaciones de pescado en la biomasa desarrolladas en el reactor industrial durante la fase 1 mostr que la Syntrophomonadaceae grupo microbiana no estaba presente en niveles detectables en la biomasa y la abundancia relativa de las eubacterias y arqueobacterias fueron 63% (SD 12%, n = 27) y 37% (SD 10%, n = 27), respectivamente. Los resultados de las determinaciones sobre la biomasa desarrollaron en el reactor industrial durante la fase 2 muestran que el Syntrophomonadaceae estuvo presente con una abundancia relativa de 2% (SD 1,7%, n = 18), mientras que las eubacterias excluyendo Syntrophomonadaceae y Archaea tena abundancia relativa de 57% (SD 13%, n = 18) y 41% (SD 17%, n = 18), respectivamente. La funcionamiento intermitente result en un mejor desempeo de la reactor (Tabla 2) y en la presencia de la Syntrophomonadaceae grupo microbiano, aunque en una abundancia relativa inferior a detectado en los reactores UASB intermitente a escala de laboratorio. Segn resultados publicados [46,56] un perodo ms largo feedless en intermitente operacin mejora la adaptacin a sustratos de biomasa grasos y en consecuencia, resulta en mayor remocin de DQO y metanizacin eficiencias. La baja frecuencia y la corta duracin de la perodos feedless en el reactor industrial (fase 2) explica la menor abundancia relativa de la Syntrophomonadaceae en comparacin a lo que se detect en los reactores UASB a escala de laboratorio. Estos resultados muestran que la operacin intermitente favorece la desarrollo del grupo microbiana clave en Syntrophomonadaceae una escala completa anaerbico de aguas residuales reactor tratar lcteos sometido a transitorios condiciones operacionales. 4. Conclusiones En este trabajo hemos comparado el rendimiento de continua y reactores UASB intermitentes cuando se somete a la grasa, hidrulica, o cambios bruscos de temperatura, con un enfoque especial en sus efectos sobre la tecla grupo microbiano Syntrophomonadaceae, detect slo en el sistemas intermitentes. Este grupo microbiana juega un papel clave en la degradacin de sustratos ricos en metano, como lpidos y LCFA. Syntrophomonadaceae tambin se consideran un grupo microbiano clave para Poblaciones Figura 12. microbianos en el experimento de choque de temperatura;. A) sistema continuo;. B) del sistema intermitente eubacterias excluyendo Syntrophomonadaceae; Syntrophomonadaceae; . Archaea B de lnea de base; S Choque; PS post-descarga. Tabla 1 Efectos de las perturbaciones operacionales sobre los niveles detectables de Syntrophomonadaceae microbiana grupo en reactores UASB intermitentes que tratan aguas residuales lcteas (porcentajes referirse a las variaciones de la abundancia relativa de lnea de base). Shock Shock effect (%) Recovery level (%) Fats 11.8 112 Hydraulic ?85.7 57 Temperature ?100 45 Table 2 Operational data for an industrial scale anaerobic reactor treating dairy wastewater from a milk processing and cheese production industry. Parameter Average SD Max Min n Phase 1 (continuous) Volumetric flow (m3/d) 476.3 58.3 701 223 93 O&G (g/m3) 130 26 204 92 113 OLR (g COD/m3/d) 398 65.2 674 165 85 COD removal (%) 71 14 89 52 87 Methanisation of removed COD (%) 55 28 71 18 50 VSS (g/L)a 11.9 1.3 14.1 8.8 33 Phase 2 (intermittent) Volumetric flow (m3/d) 552.5 77.4 886 337 196 O&G (g/m3) 145 49 211 72 97 OLR (g COD/m3/d) 468 98.3 850 190 123 COD removal (%) 92 11 96 84 110 Methanisation of removed COD (%) 80 16 97 63 98 VSS (g/L)a 16.5 3.2 23.3 10.3 55 SD standard deviation; Max maximum value; Min minimum value; O&G oils and greases; n number of observations. a VSS measured at the bottom sampling port of the reactor. 872 C.S. Couras et al. / Energy 73 (2014) 866e874 the maximization of biogas production in anaerobic reactors treating fatty substrates. The relative abundance of this microbial group increased slightly with the increase of fat content of the feed of the intermittent systems. This group of microorganisms proved to be extremely sensitive to hydraulic and temperature variations. Contrary to the fat shock, the hydraulic and the temperature shocks caused a loss in the relative abundance of the Syntrophomonadaceae group on the populations developed in the intermittent systems, this leading to undetectable levels during the temperature shock. In terms of this key microbial group, the severity of the applied shocks may be classified as: fats < hydraulic < temperature. As a final conclusion, our results show that the intermittent operation has a better performance than the continuous system both in baseline operation and in transient operational conditions. Full scale bioreactors treating complexwastewaters containing fats, such as dairy effluents, are often subject to transient conditions (hydraulic and load fluctuations) which turns them ideal candidates for intermittent operation in order to achieve a long term stable process with high efficiency. This resilience of the intermittent system is apparent in methanisation and COD removal efficiencies, which correlate with the presence of the Syntrophomonadaceae group in the microbial populations of this system................