Grado en Qumica

3 Curso



QUIMICA ANALITICA V


Guiones de Prcticas






2


QUIMICA ANALTICA V
Grado en Qumica
3 Curso


TILES A TRAER POR EL ALUMNO
Bata
Gafas de Seguridad
Cuaderno de Laboratorio
NORMAS DE TRABAJO
Antes de empezar
Antes de empezar cada prctica, el profesor comprobar que el alumno ha
ledo el guin correspondiente y contestado las preguntas previas.
Durante las sesiones
Cada alumno tendr asignada una mesa.
Trabajar siempre en la mesa, salvo que se necesite la campana de gases.
Mantener siempre limpia la mesa de trabajo.
Al terminar
Limpiar la mesa y el material utilizado.
Dejar el equipo individual en la mesa de trabajo.
Avisar al profesor antes de abandonar el laboratorio.


3


QUIMICA ANALTICA V
Grado en Qumica
3 Curso


NDICE
pgina

Prctica n 1.- DETERMINACIN DE YODO EN ALIMENTOS USANDO UN
MTODO CINTICO. .........................................................................................................4
Prctica n 2.- DETERMINACIN DE HIERRO (II) MEDIANTE ANALISIS
POR INYECCIN EN FLUJO (FIA)................................................................................. 8
Prctica n 3.- DETERMINACIN DE FRAGANCIAS POLICCLICAS EN
COSMTICOS MEDIANTE CROMATOGRAFA DE GASES ..................................13

4


QUIMICA ANALTICA V
Grado en Qumica
3 Curso
Prctica n 1
DETERMINACIN DE YODO EN ALIMENTOS USANDO UN
MTODO CINTICO



Pequeas cantidades de yodo, en forma de yoduro (I

), pueden detectarse usando el

efecto cataltico de esta especie sobre la reaccin de oxidacin-reduccin entre los
iones Ce(IV) y As(III) en medio cido

As(III) + 2 Ce(IV) As(V) + 2 Ce(III)
(Reaccin de Sandell-Kolthoff)

El yoduro acelera esta reaccin que puede transcurrir en 1 minuto (dependiendo de la
cantidad de yoduro presente). La cuantificacin de yodo se lleva a cabo sabiendo que el
tiempo en que transcurre la reaccin es inversamente proporcional a la cantidad de
yodo presente en la muestra.


El in Ce(IV) en disolucin ofrece una coloracin amarillenta a la misma mientras
que el in reducido Ce(III) disuelto origina disoluciones incoloras. De esta forma,
se registra el descenso de de la coloracin de la disolucin de Ce(IV) (descenso de
la absorcin de radiacin a 370 nm) en presencia de yoduro (catalizador). A mayor
concentracin de yoduro presente, ms brusco ser el descenso en la absorbancia
monitorizada. Se establece as una relacin lineal entre la pendiente negativa de la
lnea que representa la disminucin con respecto del valor de absorbancia
registrado, y la concentracin de yoduro presente.

PREPARACIN DE REACTIVOS :

Disolucin de cido sulfrico /cido clorhdrico (0,35 M / 0,065 M). (250 ml). Esta
disolucin se encuentra preparada.

Disolucin de Ce(IV) 5 x 10
-3
M. (250 ml ). Preparada a partir de nitrato crico
amnico ((NH
4
)
2
Ce(NO
3
)
6
) en agua.

5
Disolucin de As(III) 6 x 10
-2
M. (250 ml ). Preparada a partir de xido arsenioso
(As
2
O
3
) en agua (es necesario adicionar aproximadamente 0,6 g de hidrxido
potsico para facilitar la disolucin del xido).

Patrn de yoduro de 1000 g/l. (50 ml). A partir de la sal yoduro potsico.

Patrn de yoduro de 10 g/l. (10 ml) Preparar en agua a partir del patrn de yoduro
de 1000 ppm. Enrasar con agua.

Disoluciones patrn de la curva de calibrado.- Preparar 10 ml de cada patrn.
Concentraciones: 40, 80 y 120 g/l por dilucin de la de 10 g/l y enrasar con agua.


PREPARACIN DE LA MUESTRA DE SAL DE MESA:

1.- Pesar en balanza analtica la muestra de sal de mesa (una cantidad entre 0,5 y
1,0 g). Apuntar el peso exacto.

2.- Disolver la muestra de sal de mesa con agua y enrasar a 25 ml.


MEDIDA:

Se llena la celda de referencia del espectrofotmetro con 2,5 ml de agua. A
continuacin se aaden 250 l de la disolucin de cido sulfrico / cido
clorhdrico, 250 l de la disolucin de Ce(IV), 250 l de la disolucin de As(III)
y un volumen de agua equivalente a los 2,5 ml (celda llena) menos los volmenes
de reactivos anteriormente aadidos (750 l) y el volumen de disolucin patrn
de yoduro (o de muestra) a ensayar (Tabla adjunta).
Se deja reposar la mezcla a temperatura ambiente durante 2 minutos
Se aade el volumen de patrn (o de muestra) en la celda de medida y se
registra el descenso de la absorbancia a 370 nm durante 1 minuto


[I

]
(g/l)
Agua (l) H
2
SO
4
/HCl
(l)
Ce(IV)
(l)
As(III)
(l)
I

(l)
0 1750 250 250 250 0
5 1435 250 250 250 315 (patrn de 40
g/l)
10 1435 250 250 250 315 (patrn de 80
g/l)
15 1435 250 250 250 315 (patrn de 120
g/l)
20 1335 250 250 250 415 (patrn de 120
g/l)
Muestra 2,5-0,75-
X
250 250 250 X
6

PRECAUCIN:

Ya que se trata de una cintica, es necesario realizar las mediciones
cronometrando de manera exacta el tiempo. Adems, es necesario adicionar
los reactivos en el orden mencionado (el patrn de yoduro y la muestra se
adicionan en ltimo lugar).
Vais a utilizar cidos que son muy corrosivos para la piel y la ropa. Tened
mucho cuidado en el manejo de estas sustancias.

7
Prctica 1: DETERMINACIN DE YODO EN ALIMENTOS USANDO UN
MTODO CINTICO

Nombre ... Grupo:


Resultados para la Determinacin de yodo:

Ajuste por mnimos cuadrados
Ecuacin de la recta:






Determinar el contenido de yodo en la muestra de sal de mesa. Dar el resultado
en g de yodo por gramo de sal.

Muestra Problema: . . g I
-
/ g sal


CUESTIONES

Por qu es necesario llevar a cabo la reaccin en medio cido?


Cul es el orden de reaccin?




[I

] g/L pendiente
0
Patrn1
Patrn2
Patrn3
Patrn4
Muestra
8


QUIMICA ANALTICA V
Grado en Qumica
3 Curso
Prctica n 2
DETERMINACIN DE HIERRO (II) MEDIANTE ANALISIS
POR INYECCIN EN FLUJO (FIA).



La o-fenantrolina forma un complejo con los iones Fe (II) para dar un quelato
de color rojo: el in tri - o- fenantrolin hierro (II), que absorbe notablemente a
regiones del espectro visible, alrededor de 505-510 nm.

El Fe (III) no presenta absorcin a esa longitud de onda y debe ser reducido a Fe (II)
con un agente reductor apropiado, como el clorhidrato de hidroxilamina. La reaccin
es cuantitativa y reproducible.


La formacin de este quelato se puede utilizar para establecer un mtodo
espectrofotomtrico para la determinacin de hierro, en el que, en un determinado
intervalo de concentraciones de hierro (II), se cumple la Ley de Lambert-Beer :

A = . b . c A : Absorbancia
: Coeficiente de absortividad molar.
(Para =510 nm ; = 1.1 . 10
4
)
b: Paso ptico de la clula de medida. 1 cm
c : concentracin.

Este mtodo puede ser fcilmente adaptado a la tcnica de Anlisis por Inyeccin
en Flujo (FIA).

9
PRACTICA :

MONTAJE DE FIA














Revoluciones Bomba Peristltica: 55%
Volumen de carga del bucle de inyeccin: 100 l
Longitud serpentn de reaccin: 1 m
D. i. del tubo de tefln: 0.8 mm


MONTAJE DE LA VLVULA DE INYECCIN:















LOAD INJECT


CONDICIONES INSTRUMENTALES ESPECTROFOTOMETRO: = 510 nm.

Portador: agua
Detector:
Espectrofotomet
Muestra
Desagu
Portador:
Detector:
Espectrofotometro
Desagu
Muestra
Portador
Bomba
Peristltica

Muestra
o-fenantrolina
Vlvula de
inyeccin
Serpentn de
reaccin
Detector:
Espectrofotome
tro
10


PREPARACIN DE REACTIVOS :

Tampn Actico-Acetato 0.2 M. (500 ml). Preparar con una disolucin de Acido
Actico 0.2 M, ajustando a pH 4.5 con NaOH 2 M, antes de enrasar con agua milli-
Q.

O-Fenantrolina 2 x 10
-3
M. (250 ml). Preparada en tampn Actico/Acetato 0.2 M
de pH=4.5. Enrasar con tampn Actico/Acetato

Clorhidrato de Hidroxilamina 0.5 % (P/V) (500 ml.) Preparar en agua milli-Q.

Patrn de Hierro (II) de 1000 ppm. (50 ml). A partir de la sal Sulfato amnico de
Hierro (II). Preparar en el Clorhidrato de hidroxilamina, que acta como reductor.
Enrasar con Clorhidrato de hidroxilamina.

Patrn de Hierro (II) de 100 ppm. (100 ml) Preparar en Clorhidrato de
hidroxilamina, a partir del patrn de hierro de 1000 ppm. Enrasar con Clorhidrato
de hidroxilamina

Disoluciones patrn de la curva de calibrado.- Preparar 100 ml de cada patrn.
Concentraciones: 0.5, 1.5, 3, 5 ppm. Por dilucin de la de 100 ppm y enrasar con
agua milliq.

Preparar una muestra de hierro (II).


PREPARACIN DE LA MUESTRA DE HIERRO:

Vamos a cuantificar la cantidad de hierro contenido en un complejo vitamnico
(Ferrogradumet), con disolucin previa de la tableta (1/4 de pastilla), reduccin a
Fe (II) con clorhidrato de hidroxilamina y complejacin con ortofenantrolina para
la medida por espectrofotometra, o bien medida directa por espectroscopia de
absorcin atmica.

1.- Pulverizar finamente la muestra en un mortero y luego con ayuda de una
esptula pasar dicho polvo a un pesasustancias. Pesar del orden de 50 mg de la
pastilla de hierro.

2.- Verter el contenido del pesasustancias a un vaso de precipitados. Lavar los
restos de partculas del pesasustancias con un poco de agua y arrastrarlos tambin
al vaso de precipitados (repetir esta operacin al menos dos veces). Aadir,
tambin a dicho vaso, 25 ml de HCl 6 M (HCl:H
2
O 1:1) y calentar en vitrina hasta su
disolucin.

11
3.- Una vez disuelto el complejo vitamnico, agitar lentamente (cuidando de no
quemarse) y filtrar la disolucin directamente a un matraz aforado de 100 ml.
Lavar el vaso y el filtro con varias porciones de Clorhidrato de hidroxilamina y
transferirlas al matraz. Dejar enfriar y completar el volumen con Clorhidrato de
hidroxilamina.

4.- Transferir 2.5 ml de la disolucin que contiene la tableta disuelta, a un matraz
de 100 ml. Ajustar el pH a 4.5.Completar el volumen a 100 ml. con tampn
actico/acetato,.


MEDIDA:


Inyectar en el sistema FIA las disoluciones patrn (4 niveles: 0.5, 1.5, 3, 5,
ppm). Inyectar cada nivel dos veces. A continuacin inyectar la muestra o
muestras por triplicado.




PRECAUCIN:

.El tratamiento de la muestra ha de realizarse en vitrina.
Vais a utilizar cidos concentrados para disolver la muestra, que son muy
corrosivos para la piel y la ropa. Tened mucho cuidado en el manejo de estas
sustancias.

12
Prctica 2: DETERMINACIN DE HIERRO (II) MEDIANTE ANALISIS
POR INYECCIN EN FLUJO (FIA).

Nombre ... Grupo:


Resultados para la Determinacin de Fe:

Ajuste por mnimos cuadrados
Ecuacin de la recta:






Cuantificar la muestra problema de Hierro (II). Dar el resultado en mg de Fe en
la pastilla.
Calcular la recuperacin, en funcin del resultado prctico respecto al terico
(anotar concentracin exacta y peso de la pastilla).

Muestra Problema: . . mg Fe
Recuperacin: .................%


CUESTIONES

Presentar el Fiagrama correspondiente.

Determinar el Tiempo de residencia (Tiempo transcurrido desde la inyeccin
hasta que se obtiene el mximo del pico). Anotar la altura del pico.

Cul es la misin de la o-fenantrolina?

Cul es la misin del Clorhidrato de Hidroxilamina?


[Fe] mg/L Absorbancia

Patrn1
Patrn2
Patrn3
Patrn4
Muestra
13


QUIMICA ANALTICA V
Grado en Qumica
3 Curso

Prctica n 3
DETERMINACIN DE FRAGANCIAS POLICCLICAS EN
COSMTICOS MEDIANTE CROMATOGRAFA DE GASES

OBJETIVO

El objetivo de la prctica es la determinacin de un grupo de aditivos de uso
general en productos de cuidado personal: las fragancias policclicas. Estas
sustancias se utilizan adems en muchos otros productos de uso cotidiano entre los
que podemos destacar los productos de limpieza de textil y hogar.

Para ello se utilizar la cromatografa de gases, que permitir la separacin de los
compuestos y su identificacin. Como detector se utilizar el detector de
ionizacin de llama (FID). La presencia de alguno de los analitos objeto de estudio
en las muestras reales se confirmar gracias a la cromatografa de gases acoplada
a espectrometra de masas, tcnica que nos permite obtener el espectro de masas
de los compuestos eluidos de la columna cromatogrfica.



O
O
O
O
O
O
CELESTOLIDE
PHANTOLIDE TRASEOLIDE
GALAXOLIDE TONALIDE CASHMERAN
OO
OO
OO
OO
OO
OO
CELESTOLIDE
PHANTOLIDE TRASEOLIDE
GALAXOLIDE TONALIDE CASHMERAN
14
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Preparacin de patrones: Los patrones se suministrarn ya preparados

1.- Determinacin Cualitativa: Inyeccin individual de las fragancias para
determinar su tiempo de retencin (caracterstico) en las condiciones
cromatogrficas utilizadas, y as, posteriormente poder identificarlos mediante
GC-FID
2.- Curva de calibrado: Inyeccin, por duplicado, de 3 o 4 niveles de
concentracin de una mezcla conteniendo las 4 fragancias. Rango de calibrado: 5-
50 g/mL.
3.- Anlisis de muestras: Las muestras sern perfumes o colonias y se
prepararn por simple dilucin para obtener una respuesta analtica dentro del
rango lineal (empezar por una dilucin 1:100).
En caso de tratarse de otro tipo de cosmtico se suministrar un extracto ya
preparado.
4.- Confirmacin de la presencia de fragancias policclicas en la muestra: La
muestra se analizar mediante GC-MS para confirmar la presencia de los analitos.
El espectro de masas obtenido para cada una de las fragancias presentes se
comparar con el espectro del patrn y con el de la librera de espectros de la base
de datos del equipo (NIST).

EQUIPOS, MATERIAL Y REACTIVOS
Instrumentacin:

Cromatgrafos de gases
Las condiciones de cada uno de los cromatgrafos utilizados estarn previamente
seleccionadas y se comentarn con los alumnos.
Material:
Viales y matraces de vidrio
Pipetas y micropipetas automticas

Reactivos y Muestras:
Disolventes orgnicos (acetato de etilo, hexano), disoluciones patrn
(individuales y mezclas) y muestras de cosmticos

15
Prctica 3: DETERMINACIN DE FRAGANCIAS POLICCLICAS EN
COSMTICOS MEDIANTE CROMATOGRAFA DE GASES

Nombre ... Grupo:


Resultados para la Determinacin de fragancias alergnicas:

Cuantificar la muestra problema teniendo en cuenta la dilucin o preparacin de
muestra llevada a cabo. Dar el resultado final en mg/mL y en % (w/v)

Muestra Problema: . .
.......... .

CUESTIONES

Presentar las rectas de calibrado y los R correspondientes.

Qu compuestos estn presentes en la muestra real?

Comparar los espectro de masas de la muestras con los de los patrones y con la
librera de espectros.

Cul es la ventaja o ventajas de la utilizacin de la deteccin mediante
espectrometra de masas?
[ ] mg/L rea o
altura
rea o
altura
rea o
altura
rea o
altura
Fragancia
t
retencin

Patrn1
Patrn2
Patrn3
Patrn4
Ecuacin de
la recta

Muestra