ENZIMAS

WILLIAM BENJAMIN RUIZ CHANG

MAGISTER EN BIOQUMICA
DOCENTE DE LA CTEDRA DE BIOLOGA CELULAR Y MOLECULAR
Y BIOQUMICA - UPAO
Las enzimas son biocatalizadores excelentes, mas eficaces y especficos que dirigen y
regulan reacciones de los sistemas biolgicos.
Todas las enzimas tienen las siguientes propiedades qumicas:
* Aumentan la velocidad de una reaccin al disminuir la energa de activacin.
* No se consume ni sufre cambios en sus estructura durante el proceso cataltico.
* Acta sobre una molcula orgnica denominada sustrato, transformndola en un
producto o productos.
* Son reguladas por una gran variedad de controles celulares, genticos y alostricos.
ENZIMAS
Catalizan reacciones de transferencia de electrones y/o protones de un sustrato a otro; es
decir reacciones de oxido-reduccin.
- * Deshidrogenasas * Oxidasas * Oxigenasas
- * Reductasas * Peroxidasas * Hidroxilasas
CLASIFICACION ENZIMATICA
LACTATO
DESHIDROGENASA
CLASE 1: OXIDORREDUCTASAS
LACTATO PIRUVATO
Catalizan la transferencia de un grupos funcionales entre donadores y aceptores.
Los grupos que son transferidos frecuentemente son: fosfato, amino, glucosilo.
* Quinasas * Transaminasas * Transmetilasas
CLASE 2: TRANSFERASAS
GLUCOCINASA
GLUCOSA ADENOSIN TRIFOSFATO
GLUCOSA-6-FOSFATO ADENOSIN DIFOSFATO
CLASE 3: HIDROLASAS
Estas reacciones implican la ruptura hidroltica
de enlaces C-O, C-N, O-P y C-S.
Se les puede considerar como como una clase
especial de transferasas en las que el sustrato
es escindido siendo sus fragmentos transferidos a
los componentes del agua (OH y H).
* Lipasas * Esterasas
* Glucosidasas * Peptidasas
LACTASA
LIPASA
TRIGLICERIDO
CIDOS GRASOS LIBRES GLICEROL
LACTOSA
GLUCOSA
GALACTOSA
CLASE 4: LIASAS
Catalizan reacciones en la que se rompen enlaces C-C, C-N y C-O, sin intervencin de
agua y con prdida de grupos funcionales simultnea a la aparicin de dobles enlaces.
* Descarboxilasas * Desaminasas
Catalizan reacciones de isomerizacion de cualquier tipo, pticos, geomtricos o de posicin.
* Epimerasa * Racemasa * Mutasa
CLASE 5: ISOMERASAS
PIRUVATO
DESCARBOXILASA
ALANINA
RACEMASA
PIRUVATO
ACETALDEHIDO
DIOXIDO DE
CARBONO
L-ALANINA
D-ALANINA
CLASE 6: LIGASAS
Participan en reacciones en las que se unen
dos molculas a expensas de un enlace
fosfato de alta energa procedente del ATP.
El termino sintetasa se reserva para este
grupo de enzimas.
* Tiocinasa * Sintetasa
CITRATO
SINTASA
Oxalacetato Citrato
GLUTAMINA
SINTETASA
GLUTAMATO
GLUTAMINA
NATURALEZA QUIMICA DE LAS ENZIMAS
La mayora de las enzimas (Apoenzimas)
son de naturaleza proteica (90%).
Algunas enzimas requieren de un
componente adicional (cofactor o coenzima)
para su funcionamiento. Estos se unen por
medio de enlaces dbiles no covalentes.
Las Coenzimas son molculas orgnicas,
generalmente derivan de las vitaminas (NAD,
FAD, Biotina, Tiamina).
Los Cofactores son iones inorgnicos (Mg
+2
,
Cu
+2
, Fe
+2
, Zn
+2
).
Cofactor
Apoenzima
HOLOENZIMA
ENZIMA
SUSTRATO
OXIDADO
NADH
SUSTRATO
REDUCIDO
NAD
ENZIMA
COMPLEJO
ENZIMA-SUSTRATO
+
+ +
Coenzima

SITIO CATALITICO
El sitio cataltico o centro de fijacin del
sustrato, es una pequea grieta o hendidura en
una molcula proteica grande, donde se fija el
sustrato.
La estructura terciaria de la enzima est
plegada de tal manera que se origina una
regin con las dimensiones moleculares
idneas para acomodar un sustrato especfico.
sitio cataltico de
carboxipeptidasa
La especificidad reside en una regin
determinada de la superficie enzimtica, el
centro de fijacin del sustrato.
Pueden presentar especificidad ptica
absoluta para al menos, una porcin de la
molcula del sustrato o a la totalidad de
dicha molcula.
ESPECIFICIDAD DE LAS ENZIMAS
PROENZIMAS
Sitio de
sntesis
Zimgeno Enzima
Estmago Pepsingeno Pepsina
Pncreas Quimotripsingeno Quimotripsina
Pncreas Tripsingeno Tripsina
Pncreas Procarboxipeptidasa Carboxipeptidasa
Pncreas Proelastasa Elastasa
Tambin denominados Zimgenos,
se sintetizan como precursores
inactivos en un determinado tejido
u rgano.
Para poder transformarse a su
forma activa (enzimas) se debe
producir una ruptura proteoltica de
un segmento de aminocidos, este
proceso se tiene que realizar en un
tejido diferente del cual fueron
originados.
ISOENZIMAS
Son enzimas que tienen diferente
secuencia de aminocidos, es
decir, son formas moleculares
diferentes. pero catalizan la misma
reaccin qumica.
Estas isoformas son codificadas por
genes diferentes y sintetizados en
tejidos u rganos diferentes.
Su accin la realizan de forma
intracelular por eso cuando se
encuentran elevadas en el suero o
plasma son de gran utilidad en el
diagnostico de enfermedades.
MUSCULO
ESQUELETICO
CEREBRO
Y RION
MUSCULO
CARDIACO
ISOENZIMAS DE CREATINA FOSFOQUINASA
ISOENZIMAS DE LACTATO DESHIDROGENASA
ELECTROFORESIS
DENSITOGRAMA
Ribozimas.- son RNAs catalticos, estn
constituidos por nucletidos, son
importantes en la eliminacin de intrones
y ensamblaje de exones, es decir en el
mecanismo de maduracin del RNA
Abzimas.- son anticuerpos catalticos de
naturaleza proteica del tipo de las
inmunoglobulinas (Ig), sirven como
molculas de proteccin neutralizando
sustancias extraas de daan las clulas.
Sinsimas.- son enzimas de origen
sinttico, se utilizan para el tratamiento
de enfermedades, como las adicciones a
drogas.
Granzimas.- son proteasas que inducen
o activan procesos de apoptosis, se
sintetizan como zimgenos y se activan
en lugares especficos de la clula.
Apoptosis
Clula normal
Clula modificada
Gen
pre RNAm
RNA maduro
Transcripcin
Maduracin
MODELOS ENZIMTICOS
MODELO DE LLAVE Y CERRADURA
(E. Fischer).
El sitio cataltico es una estructura
rgida, por lo tanto el sustrato y la
enzima se acoplan de forma
estereoespecfica, de la misma manera
que una llave se ajusta a su cerradura.
MODELO DEL AJUSTE INDUCIDO
(D. Koshland).
El sitio cataltico es una estructura
dotada de flexibilidad, cuando el sustrato
se une a la enzima, induce cambios
conformacionales en esta molcula, para
asegurar la ubicacin ms efectiva.
FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD ENZIMTICA
CONCENTRACIN DEL SUSTRATO
Cuando aumenta la concentracin de sustrato, se produce un aumento en la velocidad
de reaccin, al seguir aumentando la concentracin de sustrato la velocidad de reaccin
se hace constante. Por lo tanto obtiene una velocidad mxima de reaccin.
Esto nos sirve para obtener la velocidad mxima media, y por ende determinar el Km de
la reaccin (constante de Michaelis-Menten)
L
Km = Afinidad
EFECTO DE LA TEMPERATURA
En nuestro organismo la temperatura optima es de 37C promedio, cuando
disminuye o aumenta esta temperatura la actividad enzimatica disminuye, la enzima
sufre alteraciones en su estructura.
Por debajo de la temperaura promedio la actividad de la enzima disminuye por que
esta sufre un proceso de inactivacion (proceso reversible), pero si la temperatura
aumenta por encima de la optima la actividad enzimatica tambien disminuye, pero a
diferencia de la primera la enzima sufre un proceso de desnaturalizacin (proceso
irreversible).
Temperatura ptima para
enzima de termfila
A
c
t
i
v
i
d
a
d
0 20 40 80 100
Temperatura (C)
Temperatura ptima para dos enzimas
Temperatura ptima para una
tpica enzima humana
EFECTO DEL PH
La mayoria de las enzimas tiene un pH ptimo
que varia entre 6-8. Pero tambien va a
depender del tejido o del organo para poder
determinar el pH mas optimo para las
enzimas. Los cambios de pH en el medio
pueden afectar el estado de ionizacin de
ciertos grupos funcionales en la enzima y
tambin en la del sustrato.
Tanto la disminucion, como el aumento del
pH, afectan la actividad enzimatica por que
producen la desnaturalizacion de la enzima.
ENZIMA pH
Fosfatasa alcalina 9.5
Lipasa pancretica 8.0
Quimotripsina 8.0
Tripsina 7.9
Catalasa 7.6
Carboxipeptidasa 7.5
Amilasa salival 6.8
Fosfatasa cida 5.0
Pepsina 1.5
A
c
t
i
v
i
d
a
d
pH ptimo para dos enzimas
pH ptimo para pepsina
(enzima del estmago)
pH ptimo para
tripsina
(enzima
intestinal)
1
0 2 3 4
5 6 7 8 9
INHIBICIN ENZIMTICA
Los inhibidores enzimticos son aquellos agentes que interfieren con la catlisis,
disminuyendo o deteniendo la reaccin enzimtica. Se dividen en 2 grandes grupos:
1.- INHIBICIONES REVERSIBLES 2.- INHIBICION IREVERSIBLE
Inhibicin no competitiva
Inhibicin competitiva y
Inhibicin acompetitiva
INHIBICIN COMPETITIVA
El inhibidor generalmente tiene una estructura quimica semejante al sustrato, por lo tanto
puede combinarse con la enzima libre, de tal modo que compite con el sustrato especifico por
el sitio cataltico. Una caracterstica de este tipo de inhibicin est dada por el hecho de que
puede ser revertida aumentando la concentracin de sustrato.
Sustrato
Inhibidor
Competitivo
Inhibidor Competitivo
INHIBICIN NO COMPETITIVA
El inhibidor no tiene una estructura semejante a
la del sustrato, por lo tanto se une a un sitio
activo diferente al sitio catalitico de la enzima,
deformndola de tal manera que no puedan
formarse el complejo enzima-sustrato (ES).
No existe competencia por el sitio catalitico
entre el sustrato y el inhibidor.
Sustrato
Sustrato
Inhibidor
No Competitivo
Inhibidor No competitivo
INHIBICIN IRREVERSIBLE:
El inhibidor produce un cambio permanente en la molcula de enzima, que resulta en un
deterioro definitivo de su capacidad cataltica.
Por lo general estos inhibidores modifican qumicamente residuos de aminocidos en la
enzima que tienen funciones fundamentales en la catlisis. Ej. los gases nerviosos, como el
fluorofosfato de diisopropilo (DIFP) que reaccionan con aminocido serina de la enzima
acetilcolinesterasa, el cido iodoactico y iodoacetamida que reaccionan con cistena.
INHIBICION ACOMPETITIVA
El inhibidor no tiene ninguna semejanza estructural con el sustrato, se une a un sitio activo
de la enzima, pero no se une a la enzima sola, este se une al complejo ES, formando de
esta manera un complejo ESI.
Sustrato
Inhibidor
Acompetitivo
Inhibidor Acompetitivo
Enzima srica Abreviatura Enfermedad
Aspartato aminotransferasa AST Enfermedades hepticas
Isquemia miocrdica
Alanina aminotransferasa ALT Enfermedades hepticas
Isquemia miocrdica
Amilasa Pancreatitis aguda
Creatinfosfocinasa CPK Isquemia miocrdica
Colinesterasa CHE Intoxicacin alcohlica aguda
Fosfatasa cida ACP Carcinoma de Prstata
Fosfatasa alcalina AP Ictericia obstructiva. Tumores
Glutamato descarboxilasa GAD Diabetes mellitus(tipo I)
-Glutamil transferasa GT Cirrosis alcohlica.
Lipasa Pancreatitis aguda
IMPORTANCIA DE LAS ENZIMAS EN EL DIAGNOSTICO