Toxicidade de Metais em Solues Aquosas QUMICA NOVA NA ESCOLA

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Vol. 35, N 2, p. 79-83, MAIO 2013
QUMICA E SOCIEDADE
Recebido em 22/06/2011, aceito em 25/01/2013
Soraya Moreno Palcio, Marcia Borin da Cunha, Fernando Rodolfo Espinoza-Quiones e
Daniele Alves Nogueira
Este artigo tem como objetivo propor a utilizao de um bioensaio simples e de baixo custo para abordar
os efeitos de metais em solues aquosas em diferentes concentraes. O bioensaio realizado utilizando-
se bulbos de cebola (Allium cepa) para monitorar os efeitos do cobre, expondo-os diretamente em gua
contaminada com ons Cu
2+
. O procedimento consiste em observar o crescimento das razes da cebola por
um determinado perodo e analisar a inibio desse crescimento em funo da presena de concentraes
crescentes de um metal. Os resultados obtidos no laboratrio escolar possibilitam vericar o efeito to-txico
do aumento da concentrao do metal ao organismo-teste e correlacionar com a contaminao ambiental e
suas consequncias sade humana.
metais, toxicidade, bioensaio
Toxicidade de Metais em Solues Aquosas:
Um Bioensaio para Sala de Aula
Um dos possveis motivos para a falta de
tratamento de temas ambientais nas aulas
de qumica pode estar atrelado ao escasso
material nessa rea para o desenvolvimento
de atividades relevantes e criativas. Muitas
vezes, as discusses em qumica ambiental
resumem-se leitura de textos sobre o
assunto que, embora sejam importantes,
podem levar o estudante a achar o assunto
maante e desestimulante.
A
s questes ambientais e suas anlises, muitas vezes,
so deixadas em segundo plano no desenvolvimento
da qumica nas escolas de ensino mdio, mesmo
com todo apelo que se tem feito em relao necessidade
da formao de jovens mais conscientes e por uma qumica
integrada ao meio em que vivemos. Um dos possveis moti-
vos para a falta de tratamento de
temas ambientais nas aulas de
qumica pode estar atrelado ao
escasso material nessa rea para
o desenvolvimento de atividades
relevantes e criativas. Muitas
vezes, as discusses em qumica
ambiental resumem-se leitura
de textos sobre o assunto que, em-
bora sejam importantes, podem
levar o estudante a achar o as-
sunto maante e desestimulante.
Atividades experimentais,
de modo geral, desempenham um papel importante para
despertar a curiosidade e estimular questionamentos acerca
do tema trabalhado. Dessa forma, apresentamos, neste ar-
tigo, uma atividade experimental de fcil execuo e baixo
custo, que tem como objetivo principal propor a discusso
da interferncia de metais potencialmente txicos sobre
determinados organismos, quando estes esto presentes em
solues aquosas. O experimento proposto um bioensaio,
utilizando a cebola como organismo-teste, e a proposta
consiste em monitorar os efeitos no crescimento das razes,
cultivando-se os bulbos de cebola diretamente em solues
aquosas contaminadas por metais.
As possibilidades didticas
desse experimento no se es-
gotam na sua realizao, pois a
partir dele podem ser propostas
outras atividades como: pesquisa
bibliogrca sobre a presena de
metais em guas de abastecimento
pblico, pesquisa de campo em
ambientes prximos escola,
atividades integradas com outras
disciplinas como a biologia, fsica,
matemtica, histria, entre outras.
No ensino mdio, esse experi-
mento pode ser utilizado na disciplina de qumica no estudo
de solues e suas concentraes ou em projetos relaciona-
dos ao tratamento de temas ambientais, tendo em vista que
as questes ambientais so importantes temas transversais
e desencadeiam propostas interdisciplinares.
Para compreenso da proposta experimental, importante
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lembrar que a toxicidade dos metais depende da dose a que
o organismo foi exposto e da forma qumica em que ele se
apresenta. Muitos metais so essenciais para o crescimento
de todos os tipos de organismos,
desde as bactrias at mesmo o ser
humano, mas eles so requeridos
em baixas concentraes e podem
danificar sistemas biolgicos
quando presentes em concentra-
es maiores. Outros metais, no
entanto, no so essenciais, isto
, no so requeridos pelos orga-
nismos e pequenas concentraes
podem causar danos aos orga-
nismos. Dessa forma, os metais
so classicados em: elementos
essenciais: sdio, potssio, clcio,
ferro, zinco, cobre, nquel e mag-
nsio; e elementos no essenciais:
arsnico, chumbo, cdmio, mercrio, alumnio, titnio,
estanho e tungstnio.
A utilizao da cebola como organismo-teste no recen-
te, esta vem sendo estudada e utilizada desde 1938, quando
Levan introduziu o uso da espcie Allium cepa (cebola
comum) como sistema de bioensaio para avaliar os efeitos
citogenticos da colchicina em clulas vivas (Fiskesj, 1985).
Desde ento, a cebola tornou-se um material de larga utiliza-
o em testes de laboratrio, devido ao rpido crescimento
de suas razes e facilidade com que so observados seus
cromossomas em fases de diviso celular. O teste com a
cebola tem sido aplicado em diversas reas de conhecimento
para avaliar a toxicidade de compostos qumicos de interesse
ecolgico e sanitrio. Por exemplo, Fiskesj (1975) cultivou,
em srie, bulbos de cebola em amostras coletadas ao longo do
rio Bran ao sul da Sucia. Os resultados desse experimento
demonstraram que o crescimento das razes de cebola
inibido pela presena de substncias txicas quando estas
se encontram dissolvidas na gua.
Testes com a utilizao de cebolas tm sido recomendados
por agncias internacionais de proteo ambiental para veri-
cao do nvel de toxicidade de misturas complexas como
resduos de uma indstria (Fiskesj, 1985), pois a cebola
sensvel mesmo em concentraes consideradas aceitveis aos
padres da Organizao Mundial da Sade (OMS).
Um estudo realizado por Palcio et al. (2005), em gua
de rio, mostrou que uma concentrao de 0,03 mg L
-1
de Cu
dissolvido provoca uma inibio de 40% no crescimento das
razes de cebola. A mesma reduo foi observada na presena
de 1,00 mg L
-1
de Zn dissolvido.
Outro estudo realizado por Espinoza-Quiones et al.
(2009) utilizou a cebola como organismo-teste para avaliar
os efeitos do cromo (VI) em gua de rio. Neste, guas con-
sideradas poluda e no poluda tiveram adio de cromo
(VI) e testada a inibio do crescimento das razes da ce-
bola. Os resultados mostraram que, tanto na gua poluda
quanto na no poluda, concentraes de cromo (VI) acima
de 1,00 mg L
-1
provocaram inibio do crescimento das
razes, concluindo-se que no houve interferncia de outros
poluentes ou da matria orgnica quando a concentrao do
metal elevada.
Assim, neste trabalho, pro-
pomos um experimento didtico
que pode ser realizado sem cus-
tos elevados ou procedimentos
complexos. Nesse experimento,
utiliza-se um bioensaio com a
cebola comum (Allium cepa),
para avaliar o efeito de solues
aquosas contendo concentraes
crescentes de ons metlicos, in-
serindo, desse modo, a discusso
do efeito de metais em organis-
mos e no ambiente. Essa proposta
est direcionada para estudantes
do ensino mdio e tem como foco
principal as aulas de qumica.
Solues aquosas contendo ons Cu
2+
sero utilizadas e a
avaliao ocorrer pela observao da inibio do crescimen-
to das razes da cebola. Pretende-se, dessa forma, estabelecer
condies para a insero do bioensaio no ensino de qumica
ou em projetos interdisciplinares para discusso dos efeitos
de metais no ambiente e na sade humana.
Metodologia
Materiais utilizados: sulfato de cobre (CuSO
4
.5H
2
O)
obtido em lojas de produtos para tratamento de piscinas;
cinco litros de gua mineral; bulbos de cebola com dimetro
de 3,5 a 4,0 cm, secos e sem formao de folhas e/ou razes;
16 copos plsticos descartveis de 80 mL (reutilizar material)
ou 16 copos de requeijo com tampa; palitos de dente; 1
recipiente de medida com volume de 1 L; balana com uma
casa decimal; colheres plsticas (caf) descartveis; seringa
de 10 mL sem agulha; uma rgua escolar.
Montagem do experimento: preparar uma soluo
de aproximadamente 100 mg L
-1
de Cu pesando 0,4 g de
CuSO
4
.5H
2
O e dissolvida em 1 L de gua mineral. A partir
dessa soluo, preparar oito solues com concentraes
de aproximadamente 0,04; 0,06; 0,08; 0,10; 0,20; 0,40;
1,00 mg L
-1
e uma soluo de controle negativo constituda
de gua mineral pura. Para medir os volumes necessrios
para o preparo dessas solues, sugere-se seguir o esquema
apresentado na Tabela 1. Com o auxlio de uma seringa,
transferir o volume indicado para um copo medidor e com-
pletar o volume at 100 mL com a gua mineral. Misturar
bem com o auxlio de uma colher de plstico descartvel.
Numerar oito copos plsticos descartveis ou reutilizar
recipientes de alimentos (tipo copos de requeijo ou simila-
res) de 1 a 8. Encher os copos at a borda com as solues 1
a 8, respectivamente. Colocar em cada copo uma cebola, de
modo que somente a regio radicular que em contato com
as solues. No caso da utilizao de copos descartveis,
A utilizao da cebola como organismo-
teste no recente, esta vem sendo
estudada e utilizada desde 1938, quando
Levan introduziu o uso da espcie Allium
cepa (cebola comum) como sistema
de bioensaio para avaliar os efeitos
citogenticos da colchicina em clulas
vivas (Fiskesj, 1985). Desde ento, a
cebola tornou-se um material de larga
utilizao em testes de laboratrio, devido
ao rpido crescimento de suas razes e
facilidade com que so observados seus
cromossomas em fases de diviso celular.
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utilizar palitos de dentes como suporte para os bulbos da
cebola (Figuras 1a e 1b) e, em caso de copos de requeijo,
colocar o bulbo da cebola sobre um orifcio feito na tampa
(Figura 1c).
Esse bioensaio realizado normalmente com cinco dias
de exposio dos bulbos soluo contaminada, mas para
adapt-lo ao calendrio de aulas, sugere-se que os bulbos
sejam deixados em contato por sete dias para aguardar o
crescimento das razes. O local de montagem do experimento
deve ter iluminao natural e car longe de reas com calor
excessivo. Caso seja necessrio, utilizar gua mineral para
repor o volume perdido por evaporao ou absoro de gua
pela cebola. Aps os sete dias, retirar as cebolas das solues
e, com uma rgua, medir o comprimento mdio das razes. A
inibio do crescimento da raiz mostra o efeito da toxicidade
do metal. Com os valores medidos, construir uma tabela
relacionando a concentrao da soluo com o crescimento
da raiz, conforme Tabela 2.
Sugerimos que esse experimento seja realizado com pelo
menos uma rplica, de modo que se minimize a possibilidade
de interferncia ou erro em alguma soluo ou m formao
no crescimento das razes da cebola.
Resultados e discusso
Aps o perodo de sete dias, foram medidos os compri-
mentos das razes. Os resultados mostraram uma inibio
no crescimento da raiz a partir de uma concentrao apro-
ximada de 0,04 mg L
-1
de Cu na soluo, como apresentado
na Tabela 2.
Tabela 1: Relao da diluio das solues.
Soluo
Concentrao de Cu
(mg L
-1
)
Volume de soluo
(100 mg L
-1
de Cu)
1 0 0
2 0,04 0,4
3 0,06 0,6
4 0,08 0,8
5 0,10 1,0
6 0,20 2,0
7 0,40 4,0
8 1,00 10,0
Tabela 2: Comprimento das razes (em cm) e inibio do cres-
cimento (%) aps cinco dias.
Soluo
Concentrao
de Cu (mg L
-1
)
Comprimento
da raiz (cm)
Inibio do
crescimento (%)
1 0 5,0 0
2 0,04 3,2 36
3 0,06 2,8 44
4 0,08 2,0 60
5 0,10 1,5 70
6 0,20 1,3 74
7 0,40 0,5 90
8 1,00 0,3 94
Figura 1: Montagem do experimento: a) vista geral utilizando
copos plsticos descartveis; b) detalhe do suporte; e c) vista
geral utilizando copos de requeijo.
A inibio no crescimento das razes aumenta conforme
aumenta a concentrao de cobre na soluo. Houve uma
inibio de 36% com a menor concentrao utilizada (0,04
mg L
-1
) e de 94% com a maior concentrao (1,00 mg L
-1
).
A inibio em baixas concentraes demonstra a alta sensi-
bilidade do organismo-teste (cebola) frente ao efeito txico
desse elemento. O decrscimo no comprimento mdio das
razes pode ser mais bem visualizado na forma de grco
como apresentado na Figura 2, e a aparncia dos bulbos aps
a exposio ao Cu pode ser vista na Figura 3.
A partir da observao da inibio do crescimento das
razes da cebola, sugerimos que o professor conduza discus-
ses com os estudantes relativas aos fatores que inuenciam
Figura 2: Decaimento do comprimento das razes em funo da
exposio s diferentes concentraes de Cu.
Figura 3. Aparncia das razes aps a exposio s diferentes
concentraes de Cu.
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na concentrao de substncias em soluo. No caso desse
experimento, o fator ser um metal (Cu) que se encontra
dissolvido em gua e que inibe gradativamente o cresci-
mento vegetal em funo do aumento da sua concentrao.
A proposta envolve questionar os estudantes sobre o efeito
da concentrao em determinados sistemas, como o caso
do observado no experimento, enfatizando a importncia da
relao dose/resposta, pois mesmo o cobre sendo um elemen-
to essencial, o aumento da dose provoca efeitos deletrios
no organismo-teste.
No caso do experimento proposto, as concentraes
totais de metais podem ser diretamente correlacionadas
com os efeitos txicos obtidos, porm em ambientes aqu-
ticos, como rios e lagos, a toxicidade dos metais depende
da forma qumica que assumem. H evidncias de que
reaes de complexao reduzem
a concentrao dos ons metlicos
livres e podem diminuir signica-
tivamente sua toxicidade. No am-
biente aqutico, os metais podem
se complexar com as substncias
hmicas que representam 80% da
matria orgnica dissolvida nas
guas naturais e inuenciam nume-
rosos processos biogeoqumicos
(Corami et al., 2007; Lamelas
e Slaveykova, 2007). Esse fato
pode gerar desdobramentos no
experimento sugerido, no qual o
professor pode adicionar metais
gua de rio com diversas concen-
traes de matria orgnica como,
por exemplo, guas coletadas em nascentes e pontos onde
haja despejos de esgoto, dejetos de animais ou despejos de
indstrias alimentcias como frigorcos e laticnios. Dessa
forma, pode-se observar a diminuio da toxicidade quando
comparada soluo preparada com gua mineral e discutir
as reaes qumicas que podem levar a essa diminuio.
Outra discusso que pode ser levantada com a realizao
desse experimento a comparao dos resultados obtidos
com os valores permitidos pela legislao vigente para guas
de abastecimento pblico. A OMS considera 1,5 mg L
-1

como a concentrao mxima aceitvel para o cobre (Cu
2+
)
em guas para o consumo humano (WHO, 1971). Para a
legislao brasileira, de acordo com a Portaria do Ministrio
da Sade n 2914, de 12 de dezembro de 2011 (Brasil, 2011),
o limite estabelecido para o Cu
2+
de 2 mg L
-1
. No entanto,
esses valores so bem superiores concentrao que pode
ser considerada txica, obtida pelo bioensaio com razes de
cebola, pois a inibio no crescimento das razes aparece
numa concentrao de 0,04 mg L
-1
. Esses resultados podem
levar erroneamente a dvidas sobre a conabilidade acerca
da legislao pertinente, devendo-se deixar claro que a
cebola no mais uma espcie considerada adequada nas
pesquisas cientcas por sua sensibilidade extrema aos me-
tais. De acordo com Gherardi-Goldstein et al., (1990 apud
Costa et al., 2008), recomendvel que o efeito txico de
uma amostra seja avaliado para mais de uma espcie repre-
sentativa da biota aqutica, de preferncia pertencentes a
diferentes nveis trcos da cadeia alimentar (produtores,
consumidores primrios e secundrios) como, por exemplo,
algas, crustceos, peixes e bactrias, isso devido s diferenas
de sensibilidade apresentadas por organismos de diferentes
espcies frente s substncias qumicas (Costa et al., 2008).
Apesar de no ser a espcie mais adequada para avaliar
a toxicidade de metais em guas, o bioensaio com cebola
justica-se pela simplicidade, facilidade na aquisio dos
materiais, baixo custo de execuo e principalmente por
fornecer resultados satisfatrios do ponto de vista didtico,
evidenciando o efeito deletrio de ons metlicos, espcie
estudada, quando presentes em concentraes altas. Alm
disso, o efeito to-txico do co-
bre torna-se bastante importante
quanto esse elemento encontra-se
presente em guas de irrigao
ou quando o solo encontra-se
contaminado por ele.
Outra sugesto de abordagem
para o assunto a realizao
de um novo experimento para
estabelecer uma comparao do
cobre (vericado nesse experi-
mento) com outros metais como
o chumbo e o zinco, usando o
mesmo organismo-teste ou, ain-
da, sugerir pesquisa bibliogrca
para conhecer os efeitos desses
elementos nos seres humanos,
quando ingeridos diretamente ou por meio da cadeia
alimentar.
Descarte e tratamento de resduos
O resduo gerado no experimento a prpria soluo de
sulfato de cobre utilizada que foi preparada em diferentes
concentraes. Sugerimos que, aps sua utilizao, as solu-
es geradas sejam ltradas para retirar possveis resduos
que surgiram durante a formao das razes da cebola para
que possam ser utilizadas novamente. Uma alternativa a
realizao do processo de evaporao da soluo para re-
cuperao do sulfato de cobre que, recuperado, poder ser
utilizado posteriormente em outras atividades. As cebolas,
aps o experimento, no devem ser utilizadas para ns ali-
mentcios. Entretanto, a concentrao de cobre presente na
cebola baixa e sendo este um micronutriente para plantas,
estas podem ser cortadas e enterradas no jardim.
Consideraes nais
O bioensaio com a cebola proporciona um bom exerccio
para construo da conscincia ambiental em relao ao
cuidado e preservao dos ambientes aquticos e dos riscos
A OMS considera 1,5 mg L
-1
como a
concentrao mxima aceitvel para o
cobre (Cu
2+
) em guas para o consumo
humano (WHO, 1971). Para a legislao
brasileira, de acordo com a Portaria do
Ministrio da Sade n 2914, de 12 de
dezembro de 2011 (Brasil, 2011), o limite
estabelecido para o Cu
2+
de 2 mg L
-1
. No
entanto, esses valores so bem superiores
concentrao que pode ser considerada
txica, obtida pelo bioensaio com razes
de cebola, pois a inibio no crescimento
das razes aparece numa concentrao de
0,04 mg L
-1
.
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da contaminao ambiental sade humana. Alm disso, o
experimento proposto adequado ao tratamento de propostas
interdisciplinares e no desenvolvimento de projetos com
cunho ambiental que sejam desenvolvidos na escola.
Quanto ao tempo de realizao do experimento, im-
portante ressaltar que o bioensaio um experimento de
observao que demanda dispor de um tempo para o preparo
de solues e montagem do experimento, em geral dois
perodos de aula. Posteriormente, o experimento ca em
repouso durante sete dias, sendo relevante nesse perodo que
o professor organize visitas com os estudantes no laborat-
rio ou local onde se encontra o experimento para que estes
possam observar as etapas do processo, fazer anotaes,
fotografar etc. Lembramos que essas observaes devem
ser feitas mantendo o experimento em repouso, evitando
interferncias, a m de obter um melhor resultado nal.
Todas as etapas de registro dos dados podem ser exploradas
pelo professor como elementos para formao de habilidades
dos estudantes.
Soraya Moreno Palcio (soraya_palacio@yahoo.com.br), mestre em Qumica e
doutora em Cincias pela UEM, pesquisadora CNPq, professora adjunta do
curso de Qumica e do Programa de Ps-Graduao em Engenharia Qumica
da Universidade Estadual do Oeste do Paran (Unioeste). Toledo, PR BR.
Marcia Borin da Cunha (marciaborin@uol.com.br), mestre em Educao pela
UFSM, doutora em Educao pela FEUSP, coordenadora do Ncleo de Ensino
de Cincias na Unioeste (NECTO), coordenadora PIBID-Qumica da Unioeste,
professora adjunta do curso de Qumica e do Programa de Ps-Graduao
em Educao da Unioeste. Toledo, PR BR. Fernando Rodolfo Espinoza-
Quiones (f.espinoza@terra.com.br), doutor em Fsica pela USP, ps-doutor
em Fsica Nuclear Aplicada pela UEL, pesquisador CNPq, coordenador do
Programa de Ps-Graduao em Engenharia Qumica da Unioeste, professor
associado do curso de Engenharia Qumica e do Programa de Ps-Graduao
em Engenharia Qumica da Unioeste. Toledo, PR BR. Daniele Alves Nogueira
(d_a_nogueira@hotmail.com) mestranda do Programa de Ps-Graduao em
Engenharia Qumica da Unioeste. Toledo, PR BR.
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Abstract: Toxicity of Metals in Aqueous Solutions: A Bioassay for the Classroom. The present article aims to propose the use of a bioassay simple and in-
expensive to address the effects of metals in aqueous solutions at different concentrations. The bioassay is performed using bulbs of onion (Allium cepa) to
monitor the effects of copper, exposing the bulbs directly in water contaminated with Cu
2 +
. The procedure consists in observing the growth of the roots of the
onions in a specic period and analyzing this growth inhibition due to the presence of increasing concentrations of a metal. The results obtained in laboratory
school makes possible to verify the phyto-toxic metal effect of increasing the concentration of the test organism and its correlation with the environmental
contamination and its effects on human health.
Keywords: Metals, toxicity, bioassay.
Encontro sobre Educao em Cincias atravs a Aprendizagem Baseada na Resoluo de Problemas
Universidade do Minho, Braga, Portugal, sbado, 12-10-2013
Realizar-se- se no prximo dia 12 de outubro, na Universidade do
Minho (Braga, Portugal), o Encontro sobre Educao em Cincias
atravs da Aprendizagem das Cincias Baseada na Resoluo de
Problemas (ABRP).
Os seus destinatrios so: investigadores da rea da Educao em
Cincias; futuros professores e professores de Cincias Fsicas e
Naturais, de todos os nveis de ensino; professores de outras disci-
plinas que fazem interface com as Cincias; outros interessados na
temtica do Encontro.
O Encontro prev conferncias orais, convidadas, e apresentao de
comunicaes em poster. Os textos das propostas de comunicao
em poster devero ser submetidos entre 01 e 30 de junho, segundo
as normas disponveis no website do Encontro.
Mais informaes: http://webs.ie.uminho.pt/encontro-abrp