SUSTANCIAS ANTIMICROBIANAS-QUE ACTAN EN LA PARED CELULAR BACTERIANA

El trmino antimicrobiano hace referencia a aquellas sustancias con capacidad para

reducir o inhibir el crecimiento de microorganismos. Muchos de ellos se producen de
forma natural, mientras que otros son el resultado de un proceso artificial. Ambos, sin
embargo, tienen una misma finalidad DE REDUCIR EL CRECIMIENTO DE BACTERIAS o su
capacidad de reproduccin en animales o seres humanos, plantas.
Los agentes antimicrobianos actan por una serie de mecanismos, muy diferentes entre ellos y
cuyos blancos se encuentran en diferentes regiones de la clula atacada. Las diversas regiones de
ataque antibacteriano en general son consideradas:

Pared bacteriana

Las drogas que atacan la pared bacteriana ejercen su efecto a travs del bloqueo de su sntesis.
Interfieren con la sntesis de peptidoglucanos, elementos esenciales de la constitucin de la
pared. Los defectos de la pared celular llevan a la lisis bacteriana. Actan solamente frente a
microorganismos que estn en crecimiento activo. Pertenecen a este grupo: Beta lactmicos/,
Todos los antibiticos de este grupo contienen un anillo caracterstico: el anillo -lactmico. De
ellos, los ms importantes son las penicilinas y las cefalosporinas-cefamicinas/, glucopptidos
(vancomicina, teicoplanina y avoparcina), bacitracina y estreptograminas (virginiamicina,
quinupristina-dalfopristina).
Los antibiticos que inhiben la sntesis de la pared necesitan para ejercer su accin que la bacteria
se halle en crecimiento activo, y para su accin bactericida requieren que el medio en que se
encuentre la bacteria sea isotnico o hipotnico, lo que favorece el estallido celular cuando la
pared celular se pierde o se desestructura. Suelen ser ms activos sobre las bacterias
grampositivas por su mayor riqueza en peptidoglucano.
La sntesis de la pared celular se desarrolla en 3 etapas, sobre cada una de las cuales pueden
actuar diferentes compuestos: la etapa citoplsmica, donde se sintetizan los precursores del
peptidoglucano; el transporte a travs de la membrana citoplsmica, y la organizacin final de la
estructura del peptidoglucano, que se desarrolla en la parte ms externa de la pared

PENICILINA
Como ya sabemos, las penicilinas fueron los primeros antibiticos naturales en descubrirse, pero
en general, todos los -lactmicos tienen el mismo mecanismo de accin. Actualmente las
penicilinas suponen un 17% del mercado total de antibiticos.
El grupo comn a todas las penicilinas es el cido 6-aminopenicilnico (6-APA), que en realidad es
un dipptido ciclado por condensacin de L-cys y D-val, que genera el anillo -lactmico (anillo A) y
el anillo tiazolidnico (anillo B).
La penicilina natural, purificada por primera vez en los aos 40, es la penicilina-G (o benzil-
penicilina), en la que el radical acilo es el grupo bencilo (=fenilactico). Esta penicilina presenta
una serie de limitaciones e inconvenientes:
Tiene un espectro estrecho: acta frente a estreptococos y otros cocos Gram-positivos,
pero no frente a la mayora de bacterias Gram-negativas, porque estas ltimas son
impermebles debido a su membrana externa.
Es sensible a cidos, por lo que no puede ser administrada va oral (se inactiva a su paso
por el estmago).
Es susceptible a enzimas inactivadoras (penicilinasas) producidas por muchas bacterias.
Para solventar estos problemas se fueron creando variantes de esta penicilina que mejoraban
algunas de sus cualidades .La mayor parte de estas variantes son penicilinas semisintticas, que se
obtienen de la natural introduciendo artificialmente nuevos grupos radicales (-R) con carboxilo en
el cido 6-aminopenicilnico
1. Resistentes a penicilinasas (p. ej., meticilina, oxacilina). Se usan sobre todo frente a cocos
Gram-positivos (Staphylococcus aureus, S. epidermidis). Adems, son resistentes en medio cido,
lo que permite su administracin va oral.
2. De espectro ampliado. Permiten un uso efectivo frente a muchas bacterias Gram-negativas
(Haemophilus influenzae, E. coli, Proteus, Salmonella, Shigella, etc). Dentro de este grupo,
destacamos las aminopenicilinas, como la ampicilina, o la amoxicilina: el grupo -NH2 del radical
acilo permite que estas penicilinas puedan atravesar la membrana externa de las bacterias Gram-
negativas. Resisten los cidos, pero desgraciadamente slo tienen la mitad de actividad contra
Gram-positivas, y algunas son inactivadas por -lactamasas.
3. Penicilinas anti-Pseudomonas. La carbenicilina se usa frente a Pseudomonas, un patgeno
oportunista muy peligroso cuando coloniza grandes quemaduras, heridas quirrgicas, etc.

Mecanismo de accin de las penicilinas y otros antibiticos -lactmicos:
Todas las penicilinas (incluidas las semisintticas), son bactericidas sobre bacterias en crecimiento,
y poseen el mismo mecanismo: Inhiben el sistema enzimtico implicado en la reaccin de
transpeptidacin del peptidoglucano naciente, o sea que impiden los entrecruzamientos entre
cadenas de PG. Ello origina:
acumulacin de precursores del PG, sin ensamblar;
activacin de una serie de autolisinas (amidasas, glucosidasas), que hidrilozan el
PG maduro de la bacteria; si la bacteria se encuentra en un medio hipotnico,
termina lisndose.
Por lo tanto, la accin bactericida y ltica de las penicilinas depende de que la bacteria se
encuentre creciendo en un medio hipotnico (en un medio hipertnico se originan protoplastos y
esferoplastos). Cuando la bacteria no est creciendo, no est haciendo renovacin (turnover) de
su pared celular, lo que implica que la penicilina no tiene diana sobre la que actuar; por lo tanto,
en estas condiciones la bacteria puede sobrevivir.
Las penicilinas tienen como dianas a una serie de autolisinas llamadas protenas de unin a la
penicilina (PBPs). Como ya vimos en el captulo 5, las PBPs son protenas implicadas en las ltimas
fases de la sntesis y maduracin del PG. Concretamente, las PBPs 1 a 3 son esenciales para la
bacteria, y son las dianas de las penicilinas que explican la actividad bactericida.
VANCOMICINA
Es un glucopptido complejo producido por Streptomyces orientalis. Se une rpida e
irreversiblemente con el extremo D-alanil-D-alanina del pentapptido del precursor del
peptidoglucano que se halla unido al undecaprenil-P (a nivel de membrana citoplsmica), de modo
que inhibe la reaccin de transglucosidacin.
CEFALOSPORINAS
El ncleo de estos B-lactmicos es el cido 7-aminocefalospornico. El anillo B es el anillo
dihidrotiazina (esqueleto de 6 tomos) en lugar del anillo tiazolidina (esqueleto de 5 tomos). Las
cefalosporinas estn producidas por hongos del gnero Cephalosporium, mientras que las
cefamicinas lo son por ciertas especies de actinomicetos del gnero Streptomyces. Estos
antibiticos son muy usados actualmente en clnica, suponiendo casi el 40% del total.
La cefalosporina natural tiene poca actividad, pero sustituyendo artificialmente R1 y R2 se
obtienen derivados semisintticos muy activos. Como es habitual con muchos antibiticos de uso
clnico, a lo largo de los aos la industria farmacutica ha ido creando sucesivas generaciones de
estos compuestos, con aplicaciones y ventajas diferentes. Las cefalosporinas y cefamicinas de
tercera generacin han sustituido en muchos casos a las penicilinas, debido a su mayor espectro
de accin y a que resisten mejor las B-lactamasas.
LISOZIMA
Se pueden encontrar otros mecanismos de los leucocitos para la destrucion por propias enzimas
que ellos adquieren de sus granulos, enzimas como la elastasa, defensinas, catelicidinas, lisozima ,
lactoferrina, la proteina basica mayor y la proteina bactericida todas con poder bactericida

Inhibidores de la fase citoplsmica
En el citoplasma bacteriano se sintetizan los precursores del peptidoglucano a partir de diferentes
elementos: uridindifosfato-N-acetil-glucosamina (UDP-NAG), cido fosfoenolpirvico,
uridintrifosfato (UTP) y NADH, a partir de los cuales se forma el cido uridindifosfato-N-
acetilmurmico (UDP-NAM). Despus se unen al azcar una cadena de aminocidos
(frecuentemente 5) en la que se alternan las formas L y D y en la que los dos ltimos conforman el
dipptido D-alanin-D-alanina.
En esta etapa de sntesis de precursores de peptidoglucano actan la fosfomicina y la cicloserina.
1. Fosfomicina. Acta inhibiendo la piruviltransferasa, enzima causante de la adicin del
fosfoenolpiruvato a la molcula de UDP-NAG para formar el precursor UDP-NAM. Esta reaccin se
inhibe porque la fosfomicina, que es un anlogo estructural del fosfoenolpiruvato, se une
covalentemente con la enzima. La fosfomicina atraviesa la membrana externa mediante las
porinas; debido a su pequeo tamao pasa la barrera de peptidoglicano sin dificultad y finalmente
atraviesa la membrana citoplsmica a travs de sistemas de transporte activo, uno de los cuales es
de expresin inducible, que se favorece en presencia de glucosa-6-fosfato. Por eso, a los medios o
discos para estudiar la sensibilidad de las bacterias a la fosfomicina debe aadirse glucosa-6-
fosfato8.
Es un antibitico de amplio espectro que incluye bacilos gramnegativos y grampositivos y
Staphylococcus spp. (excepto S. saprophyticus y S. capitis).
2. Cicloserina. Acta sobre la base de su analoga estructural con la D-alanina, inhibiendo
competitivamente la actividad de la L-alanina-racemasa (transforma L-ala en D-ala) y la D-alanin-D-
alanina-sintetasa (forma dmeros de D-ala). Por su elevada toxicidad slo se usa como frmaco
antimicobacteriano de segunda lnea.
Inhibidores de la fase de transporte de precursores
En esta fase, que se desarrolla en la membrana citoplsmica, un transportador lipdico tomar a su
cargo el precursor formado en el citoplasma y lo har atravesar la membrana citoplsmica. Se
trata de un fosfolpido de 55 tomos de carbono, el undecaprenilfosfato. Tambin en la membrana
citoplsmica, termina de formarse el precursor mediante la adicin de una molcula de N-
acetilglucosamina, que se enlaza al tomo C1 del cido murmico, formndose as un polmero
lineal de peptidoglucano constituido por unidades de NAG y NAM-pentaptido. Una vez que este
precursor disacrido-pentapptido es transferido a un lugar aceptor en la pared preexistente, el
transportador queda pirofosforilado y se separa, y debe presentar una defosforilacin para
convertirse en su forma monofosfato activa, que puede transportar ya nuevos precursores a la
capa de peptidoglucano.
Bacitracina
Este antimicrobiano se une al transportador y bloquea su defosforilacin, e impide que pueda
utilizarse de nuevo en el transporte de los polmeros lineales de disacrido-pentapptido a travs
de la membrana citoplsmica, hasta la pared en formacin. Este antibitico es activo contra cocos
grampositivos (excepto estreptococos del grupo B), Neisseria spp. y de forma variable C. difficile.
Mureidomicinas
Son un nuevo grupo de antimicrobianos producidos por Streptomyces flavidivirens, que por su
analoga estructural con el precursor disacrido pentapptido, se unen competitivamente con el
transportador lipdico, bloqueando el transporte de los precursores a travs de la membrana
citoplsmica. No existen derivados de uso clnico.
Inhibidores de la organizacin estructural del peptidoglucano
En esta etapa, los precursores de peptidoglucano se ensamblan con la ayuda de enzimas situados
en su superficie conocidos como protenas fijadoras de penicilina (penicillin binding proteins
*PBP+). En esta etapa tienen su accin los glucopptidos y los -lactmicos.
Glucopptidos
Los glucopptidos (vancomicina y teicoplanina) actan en un paso previo al de los -lactmicos.
Impiden la transferencia del disacrido pentapptido, unido al transportador lipdico de la
membrana citoplsmica, al aceptor de la pared celular. Esto se debe a que estos compuestos
recubren el extremo D-alanin-D-alanina del disacrido-pentapptido, evitando as la accin de las
glucosiltransferasas y transpeptidasas, y en consecuencia evitando la elongacin del
peptidoglucano9.
El gran tamao de estas molculas impide su paso a travs de la pared de las bacterias
gramnegativas, de forma que slo resultan activas frente a grampositivos (incluyendo con gran
frecuencia cepas multirresistentes). Aunque son bactericidas frente a Staphylococcus spp., slo
tienen actividad bacteriosttica frente a Enterococcus spp.
-lactmicos
Representan el grupo ms numeroso y de mayor uso en clnica. Su nombre deriva de la presencia
de un anillo lactmico en su estructura, con un oxgeno en posicin con respecto a un nitrgeno.
En funcin de los radicales que se unen a este anillo se distinguen varios subgrupos, de los que los
ms importantes son: penicilinas, cefalosporinas, monobactamas y carbapenemas10.
Los -lactmicos son compuestos bactericidas que inhiben las fases finales de la sntesis del
peptidoglucano, en la que intervienen activamente las ya citadas encimas PBP. Las PBP tienen
actividad transpeptidasa, transglucosilasa y carboxipetidasa, por lo que pueden entrelazar los
componentes del peptidoglucano11. Los -lactmicos bloquean estas enzimas porque el anillo -
lactmico tiene una estructura espacial similar a la del residuo acil-D-alanin-D-alanina de las
cadenas del peptidoglicano, que es el sustrato natural de las PBP.
Las bacterias poseen varias PBP, cuyas funciones difieren unas de otras. Por esta razn, las
consecuencias de su bloqueo tambin son distintas. Las PBP-1a y PBP-1b actan como
transpeptidasas causantes de la elongacin, y su bloqueo provoca la formacin de esferoplastos
que rpidamente se lisan. La PBP-2 determina la forma bacteriana, y su inhibicin da lugar a
formas ovoideas que se lisan fcilmente. La PBP-3 interviene en la divisin bacteriana, y su
bloqueo provoca la aparicin de formas filamentosas sin septos. Las PBP-4, PBP-5 y PBP-6 tienen
actividad carboxipeptidasa, e intervienen en la liberacin del quinto aminocido del pentapptido,
necesaria para la polimerizacin del peptidoglucano.
Pese a tener el mismo mecanismo de accin, hay diferencias en la actividad de los diferentes -
lactmicos, y ello se debe principalmente a 3 factores: rapidez en la difusin de los antibiticos al
espacio periplsmico, resistencia a las -lactamasas, capacidad para escapar a los sistemas de
expulsin activa y afinidad variable por las distintas PBP. As, un -lactmico que difunda
rpidamente, tenga una gran estabilidad frente a las -lactamasas, no sea sustrato de las bombas
de expulsin y tenga una alta afinidad por las PBP ms crticas, ser un antibitico de gran
actividad como es el caso de las cefalosporinas de cuarta generacin y los carbapnemes.
La accin bactericida de los -lactmicos no est relacionada directamente con la inhibicin de la
sntesis de peptidoglucano impidiendo su crecimiento (efecto bacteriosttico), sino con la
activacin de un sistema de enzimas lticos (autolisinas) que, a la inversa de las PBP, estn
implicadas en la degradacin del peptidoglucano12. El peptidoglucano est en continua
renovacin, resultante del equilibrio entre los procesos de sntesis (PBP) e hidrlisis (autolisinas a
bajo nivel de actividad); la rotura de este equilibrio por la accin de los -lactmicos (inhibicin de
las PBP y activacin de las autolisinas) provoca la muerte bacteriana.
Las bacterias que carecen de autolisinas son inhibidas pero no destruidas, por lo que se dice que
son tolerantes. En clnica, se define el fenmeno de tolerancia como la necesidad de una
concentracin al menos 32 veces mayor a la CMI para que un antimicrobiano destruya una cepa
bacteriana13.
El espectro de los -lactmicos abarca las bacterias grampositivos, gramnegativas y espiroquetas.
No son activos frente a micoplasmas por carecer de pared celular, ni frente a bacterias
intracelulares como Chlamydia spp. y Rickettsia spp.
Muchas de las bacterias afectadas por lisozimas no son patognicas. En algunos casos, la lisozima
es la razn principal por la que estos organismos no llegan a ser patognicos. La lisozima tambin
altera la pared celular de bacterias patgenas transformndolas en esferoplastos o protoplastos,
denominados formas L. La lisozima puede actuar como una opsonina innata o como una enzima
cataltica. Las lisozimas sirven como opsoninas innatas unindose a la superficie bacteriana,
reduciendo la carga negativa y facilitando la fagocitosis de las bacterias, todo esto antes de la
llegada de las opsoninas del sistema inmunitario. En otras palabras, la lisozima hace que las clulas
fagocticas puedan absorber ms fcilmente a la bacteria. Como enzima funciona atacando a los
peptidoglicanos, lo que explica su localizacin en la pared celular de las bacterias, especialmente
en las gram positivas. La lisozima hidroliza el enlace glucosdico entre el carbono 1 (C1) del residuo
de cido N-acetilmurmico (NAM) y el carbono 4 (C4) de la N-acetilglucosamina (NAG).
Hace esto uniendo la molcula de peptidoglicano en el sitio activo, una prominente hendidura
entre sus dos dominios, provocando que la molcula substrato adopte una conformacin muy
tensa, similar a la de un estado de transicin. Segn el mecanismo de Phillips, la lizosima se une a
un hexasacrido deformando el cuarto azcar (el anillo D) que adopta una conformacin de media
silla. En este estado de tensin el enlace glucosdico es fcilmente roto.
Se ha descubierto que el cido glutmico 35 (Glu35) y el cido asprtico 52 (Asp52) son
indispensables para la actividad de esta enzima. El Glu35 acta como donador de protones para el
enlace glucosdico, cortando el enlace C-O en el sustrato. El Asp52 acta como nuclefilo para
generar el intermediario enzimtico-glucosdico (complejo enzima-sustrato). Luego, este
intermediario reacciona con una molcula de agua para volver a dejar intacta a la enzima y liberar
el producto de la hidrlisis.

Membrana bacteriana
Los agentes activos en la membrana celular bacteriana son las polimixinas (polimixina B y colistn).
Estas drogas son pptidos catinicos con actividad de tipo detergente que disrumpen la porcin
fosfolipdica de la membrana de las bacterias Gram negativas.
Sntesis de protenas
Interfiriendo con la sntesis de protenas, a diversos niveles del organoide encargado de su
elaboracin, el ribosoma, acta un cmulo de agentes, a saber: Aminoglucsidos y aminociclitoles,
tetraciclinas, cloranfenicol y sucedneos, lincosamidas y macrlidos. Dada la complejidad de este
proceso, hay diversos blancos que son impactados por los diferentes agentes antiinfecciosos. Los
aminoglucsidos y aminociclitoles actan a nivel de la porcin 30 S del ribosoma, induciendo
errores en la lectura de la informacin aportada por el ARN mensajero. De esta manera, la
protena que se sintetice contendr errores y no ser til. Tambin son capaces de inducir
alteraciones de las membranas. Las tetraciclinas, por su parte, tambin se unen al ribosoma en la
porcin 30 S, en forma similar a lo que ocurre con los aminoglucsidos. Cloranfenicol, tianfenicol y
florfenicol, actan a nivel de la porcin 50 S del ribosoma, inhibiendo la transpeptidasa, lo que
impide que se formen los pptidos. Lincosamidas y macrlidos, tambin se unen a la porcin 50 S,
inhibiendo la traslocacin. Todos estos mecanismos, de una u otra manera, detienen o desvan la
sntesis de protenas.
Sntesis de cidos nucleicos
Los agentes que actan a nivel de los cidos nucleicos son varios y sus sitios de accin diversos.
Entre ellos tenemos a las sulfamidas y trimetoprima cuya accin como antimetabolitos impidiendo
la sntesis de purinas los distingue del resto. Las fluoroquinolonas y novobiocina actan a nivel de
las cadenas de ADN, impidiendo el superenrrollamiento, por inhibicin de una topoisomerasa, la
girasa de ADN. Los nitroimidazoles, como dimetridazol, metronidazol y tinidazol dan lugar a la
disrupcin de las cadenas de ADN, impidiendo su reparacin. Los nitrofuranos, por su parte
impiden la lectura codnica ADN-ARN mensajero.