Nutricin

Nutricin
microbiana
microbiana

Toda la naturaleza es,
como se ha dicho, una
conjugacin activa y
pasiva del verbo comer
-Wam Raph Inge

Metabolismo
Metabolismo
Conjunto de reacciones catablicas y
Conjunto de reacciones catablicas y
anablicas
anablicas

Catabolismo:
Catabolismo:
Con|unto de procesos que partcpan en a
degradacin de compuestos en productos
ms pequeos; as reaccones enzmtcas que
toman parte de denomnan reaccones
catabcas.

Anabolismo:
Anabolismo:
Reaccones medante as cuaes os m.o.
construyen o sintetizan sustancias qumicas
complejas a partir de molculas simples; as
reaccones enzmtcas que toman parte se
denomnan reaccones bosnttcas y requeren
energa. E ATP formado en as reaccones
catabcas es empeado en e anabosmo.

Nutricin
Nutricin

A as sustancas en e medo ambente utzadas
por os organsmos para e catabosmo y e
anabosmo, se es ama nutrientes.
Dcho de otro modo, para obtener energa y
eaborar nuevos componentes ceuares, os
organsmos tenen que dsponer de materas
prmas o nutrientes.

Nutrientes:
Nutrientes:
Son sustancas que se empean en a bosntess
y produccn de energa.
Son necesaros para e crecmento mcrobano

Requerimentos de
Requerimentos de
nutrientes comunes
nutrientes comunes

Macroeementos.

Mcroeementos (amados
tambn ogoeementos).

Macronutrientes o
Macronutrientes o
macroelementos
macroelementos

Son captados por os m.o. en

cantdades reatvamente grandes.

Ms de 95% de peso seco de a

cua mcrobana esta consttudo
por C, O, H, N, S, P, K, Ca, Mg y Fe.

C, O, H, N, S y P.
Son componentes de carbohdratos, pdos,
protenas y cdos nucecos. Son necesaros
en cantdades de !" de medo de cutvo.

Carbono.
Fuente de energa y/o compuestos para
bosntess

Nitreno y a#u$re%.
Se encuentran en as cuas en forma
reducda como grupos amino y sulfhidrilo;
generamente en forma reducda, aunque
agunos m.o. os asman en forma oxdada.
Sufatos, ntratos, peptonas (N y S) y cstena.
F|acn de N
2
(N
2
NH
3
)

&, Ca, M y 'e: se encuentran en a cua en

forma de catones, desempeando varas funcones. Se
utzan en cantdades de m.
-
&
(
: necesaro para actvdad de enzmas,
entre eas agunas que partcpan en a
sntess de protenas.
-
Ca
)(
: contrbuye a a termorresstenca de
endosporas.
-
M
)(
: acta como cofactor de muchas
enzmas, forma compe|os con e ATP y
estabza os rbosomas y as membranas
ceuares.
-
'e
)(
y 'e
*(
: Forma parte de os ctocromos
y es cofactor de enzmas y de protenas
transportadoras de eectrones.

Requerimientos de N,
Requerimientos de N,
P y S
P y S
Se deben ncorporar en grandes cantdades. Aunque
pueden adqurrse a partr de os msmos nutrentes
que aportan C, os m.o. sueen empear tambn
fuentes norgncas.

N: necesaro para sntetzar a.a., purnas,

prmdnas, agunos CHTOS y pdos.

P: presente en cdos nucecos,

fosfopdos, nucetdos como ATP, varos
cofactores, agunas protenas y otros
componentes ceuares.

S: necesaro para a sntess de sustancas

como os a.a. cstena y metonna, agunos
CHTOS, botna y tamna.

Micronutrientes o
Micronutrientes o
microelementos
microelementos
u
u
olioelementos
olioelementos

Son aqueos que se requeren en

cantdades tan pequeas, que os
contamnantes presentes en agua, en os
recpentes para e cutvo y en os
componentes habtuaes de medo son a
menudo sufcentes.

Normamente son parte de enzimas y

coactores; factan a catss de
reaccones y mantenmento de a
estructura de protenas.

Mn, Zn, Co, Mo, N y Cu deben estar

dsponbes en cantdades de .

+n
)(
: se ocaza en e centro actvo
de agunas enzmas.

Mn
)(
: facta a muchas enzmas a
catss de a transferenca de os
grupos fosfato.

Mo
)(
: necesaro para f|ar
ntrgeno.

Co
)(
: componente de a vtamna
B
12
.

Cu
)(
: tene funcones en agunas
enzmas de xdo-reduccn.

'actores de crecimiento
'actores de crecimiento
Son sustancas precursoras de certos
consttuyentes orgncos de a cua que e
m.o. es ncapaz de sntetzar; generamente
se requeren en pequeas concentracones.
Exsten tres cases prncpaes:
,. Amino-cidos sntess de protenas
). Purinas y .irimidinas sntess de cdos
nucecos
*. /itaminas normamente forman a
totadad o parte de os cofactores enzmtcos;
consttuyen grupos prosttcos o centros
actvos de certas enzmas.

0lemento 'unciones $isiolicas
Hdrgeno Consttuyente de agua ceuar, materaes ceuares orgncos
Oxgeno Consttuyente de agua ceuar, materaes ceuares orgncos;
como O
2
, aceptor de eectrones en a respracn de os aerobos
Carbono Consttuyente de materaes ceuares orgncos
Ntrgeno Consttuyente de protenas, cdos nucecos, coenzmas
Azufre Consttuyente de protenas (como amnocdos cstena y
metonna), de agunas coenzmas (por e|empo, CoA,
cocarboxasa).
Fsforo Consttuyente de cdos nucecos, fosfopdos, coenzmas
Potaso Uno de os prncpaes catones norgncos de as cuas,
cofactor de agunas enzmas.
Magneso Importante catn ceuar, cofactor norgnco en muchas
reaccones enzmtcas, ncuyendo aqueas que requeren ATP;
funcona unendo as enzmas a os sustratos; consttuyente de as
corofas.
Manganeso Cofactor norgnco de varas enzmas, a veces rempazando a
Mg.
Caco Importante catn ceuar, cofactor de agunas enzmas (por
e|empo proteasas)
Herro Consttuyente de ctocromos y otras hemo o no hemoprotenas;
cofactor de certo nmero de enzmas.
Cobato Consttuyente de a vtamna B
12
y de sus coenzmas dervados.
Cobre, znc, nque,
mobdeno
Consttuyentes norgncos de enzmas especaes.


!equerimentos de ", #
!equerimentos de ", #
y $
y $

Las necesdades de C, H y O sueen

cubrrse smutneamente.

E carbono es necesaro para

construr e esqueeto de todas as
mocuas orgncas; as mocuas
que srven como fuente de C aportan
tambn tomos de H y O, excepto e
CO
2
.

Clasi$icacin .or
Clasi$icacin .or
requerimientos nutricionales
requerimientos nutricionales
1
1
%uente de carbono
%uente de carbono
2
2

Auttro$os:
Auttro$os:
Son m.o. que pueden utzar CO
2
como prncpa
y nca fuente de carbono.

Hetertro$os:
Hetertro$os:
Son organsmos que utzan mocuas orgncas
preformadas y reducdas como fuentes de
carbono. La mayora usan nutrentes orgncos
como fuente tanto de C como de energa. Este
grupo ncuye a todos os anmaes, hongos,
protozoaros y a mayora de as bacteras.

Requerimientos
Requerimientos
nutricionales debidas a
nutricionales debidas a
mutaciones
mutaciones
.
.
Las necesdades nutrconaes de os m.o. varan segn as
especes; pueden cambar en una msma espece debdo a
mutacones.

Prottro$o:
Prottro$o:
Es un m.o. que precsa de os msmos nutrentes
que a mayora de os membros de su espece.

Au3tro$o:
Au3tro$o:
Es un m.o. mutado que carece de a capacdad
para sntetzar un nutrente esenca y por eo,
debe obtenero, o a su precursor, de medo.

Requerimientos de
Requerimientos de
energa
energa
de los m.o.
de los m.o.

Todos os organsmos requeren

fuentes de energa, H y e
-
para
poder crecer.

Exsten ncamente dos fuentes de

energa dsponbes para os
organsmos:
-
Energa umnca captada durante a
fotosntess.
-
Energa dervada de a oxdacn de
mocuas orgncas e norgncas.

Clasi$icacin
Clasi$icacin
energtica
energtica
de
de
m.o.
m.o.

4uimitro$os:
4uimitro$os:
Obtenen a energa a partr de a oxdacn de
compuestos qumcos (orgncos o norgncos).
-
Oumoauttrofos.
-
Oumohetertrofos.

'ottro$os 1o $otosint5ticos2:
'ottro$os 1o $otosint5ticos2:
Empean a uz como fuente de energa.
-
Fotoauttrofos.
-
Fotohetertrofos.

"ittro$os:
"ittro$os:
("que comen roca") obtenen su energa
de a oxdacn de compuestos
norgncos como e azufre eementa
(S
0
), e n amono (NH
4
+
), e herro
ferroso (Fe
2+
) o e H
2
.

Orantro$os:
Obtenen eectrones o hdrgeno a
partr de compuestos orgncos.

'uentes de carbono, ener6a e 'uentes de carbono, ener6a e
7idreno!electrones 7idreno!electrones
'uentes de carbono
Auttrofos CO
2
como nca o prncpa fuente de
carbono.
Hetertrofos Mocuas orgncas preformadas,
reducdas, a partr de otros
organsmos.
'uentes de ener6a
Fottrofos Luz.
Oumtrofos Oxdacn de compuestos orgncos o
norgncos.
'uentes de 7idreno o electrones
Lttrofos Mocuas norgncas reducdas.
Organtrofos Mocuas orgncas.

Clasificacin Fuente de carbono Fuente de energa
Auttrofos CO
2
-------
Hetertrofos Compuestos
orgnicos
--------
Quimitrofos --------- Compuestos qumicos
Quimiolittrofos _______ Compuestos qumicos
inorgnicos
Quimiorgantrofos _______ Compuestos qumicos
orgnicos
Quimioauttrofos CO
2
Compuestos qumicos
Fottrofos _______ Luz
Fotoauttrofos CO
2
Luz
Fotoetertrofos Compuestos
orgnicos
Luz
Quimioetertrofos Compuestos
orgnicos
Compuestos qumicos



Com.uesto 8acteria
(% base seca)
"e9aduras
(% base seca)
Honos
(% base seca)


Promedo

Promedo

Promedo

Carbono 48 46-52 48 46-52 48 45-55
Ntrgeno 12.5 10-14 7.5 6-8.5 6 4-7
Protenas 55 50-60 40 35-45 32 25-40
Carbohdratos 9 6-15 38 30-45 49 40-55
Lpdos 7 5-10 8 5-10 8 5-10
Acdos nucecos 23 15-25 8 5-10 5 2-8
Cenzas 6 4-10 6 4-10 6 4-10

Com.osicin t6.ica de
Com.osicin t6.ica de
com.uestos or-nicos e
com.uestos or-nicos e
inor-nicos de m.o.
inor-nicos de m.o.

!,:: en .eso seco
0lemento 8acteria Honos "e9aduras
Fsforo 2-3 0.4-4.5 0.8-2.6
Azufre 0.2-1.0 0.1-0.5 0.01-0.24
Potaso 1-4.5 0.2-2.5 1-4
Magneso 0.1-0.5 0.1-0.3 0.1-0.5
Sodo 0.5-1 0.02-0.5 0.01-0.1
Caco 0.01-1.1 0.1-1.4 0.1-0.3
Ferro 0.02-0.2 0.1-0.2 0.01-0.5
Cobre 0.01-0.02 --------- 0.002-0.01
Manganeso 0.001-0.01 --------- 0.0005-0.007
Mobdeno -------- --------- 0.0001-0.0002
Tota Cenzas 7-12 2-8 5-10

Com.osicin t6.ica de com.uestos
Com.osicin t6.ica de com.uestos
or-nicos e inor-nicos de m.o.
or-nicos e inor-nicos de m.o.
Constituyentes inor-nicos Constituyentes inor-nicos

Sustrato
Sustrato
s
s
S,
S)
Sn
C5lulas
C5lulas
;
Productos
Productos
P,
P)
Pn

Producto:
Producto:
Compuesto qumco dferente de
matera ceuar que es berado a
medo.

Sustrato:
Sustrato:
Compuestos que son consumdos a
partr de medo como resutado de
crecmento ceuar o formacn de
producto.

'actores que limitan la
'actores que limitan la
$ormulacin de medios de
$ormulacin de medios de
culti9o
culti9o:
-
Agunos eementos de sustrato
berados como productos no
asmados a matera ceuar.
-
Veocdades mtantes y
estequometra, deben consderarse
os rendmentos.
-
Nutrentes especfcos que puderan
ser mtantes, o productos especfcos
que pueden ser nhbtoros.

'actores que limitan la
'actores que limitan la
$ormulacin de medios de
$ormulacin de medios de
culti9o
culti9o:
-
Factores ambentaes.
-
Factores de crecmento.

Crecimiento microbiano: <escri.cin
Crecimiento microbiano: <escri.cin
qu6mica
qu6mica
&"
a
#
b
$
c
' ($
)
' *N#
+
,"
a
#
b
$
c
N
d
'
-"$
)
' .#
)
$
"
donde/ &, (, *, - y . son moles0
"
a
#
b
$
c
uente carbono1energa0
, son moles de una unidad celular, "
a
#
b
$
c
N
d

<atos de com.osicin
<atos de com.osicin
celular
celular

(acterias
"
203+
4 N
205)
4 $
2056
4

#
2027

8evaduras
"
2097
4 N
20273
4 $
20+5
4 #
202:3

aCH
x
O
y
+ bO
2
+ cNH
3
CH

O

N

+ dCO
2
+ eH
2
O

C:
C: a = , ( d
H:
H: a3 ( *c = ( )e
O:
O: ay ( )b = ( )d ( e
N:
N: c =
R4 = moles de "$
)
; moles de $
)
< d;b

Rendimiento biomasa
Rendimiento biomasa
sustrato 1>
sustrato 1>
;!S ;!S
2
2
>
;!S
;
s
(iomasa producida =>

?
>
2
@
Austrato consumido =A
2
?
A

@
=

Medios de
Medios de
Culti9o
Culti9o

Aunque todos os m.o. necestan fuentes

de energa, C, N, P, S y varos mneraes,
la composicin precisa de un medio
de cultivo adecuado depender de la
especie que se quiere cultivar0

Un medo se utza frecuentemente para

seleccionar y culti9ar m.o.
es.ec6$icos, o para $acilitar la
identi$icacin de una es.ecie en
partcuar.

De acuerdo a estado fsico, os medos de

cutvo se casfcan en slidos y l6quidos.

Medio sint5tico o
Medio sint5tico o
de$inido
de$inido

Son medos en que se conocen todos

os componentes.

Los medos defndos se empean

ampamente en nvestgacn ya que
con frecuenca se requere conocer
qu est metabozando e m.o. en
estudo.

Medio 8?@,, .ara cianobacterias
Cantdad (g/ L)
NaNO
3
1.5
K
2
HPO
4
.
3H
2
O 0.04
MgSO
4
.
7H
2
O 0.075
CaC
2
.
2H
2
O 0.036
Acdo ctrco 0.006
Ctrato amnco frrco 0.006
Na
2
CO
3
0.02
EDTA (sa de Na
2
Mg) 0.001
Soucn de metaes traza 1 mL/ L



Medios com.lejos
Medios com.lejos

Contenen agunos ngredentes cuya

com.osicin qu6mica se
desconoce. Son medos
su$icientemente ricos para
satsfacer as necesdades
nutrconaes de dversos
mcroorgansmos.

De gran utdad cuando se

desconoce os requermentos
nutrconaes de un m.o. en
partcuar.

8os medios complejos contienen
8os medios complejos contienen
peptonas, eBtracto de carne y de
peptonas, eBtracto de carne y de
levadura0
levadura0

Pe.tonas: hdrozados de protenas obtendos

de a dgestn parca de carne, casena, harna
de soya y otras protenas. Srven como fuente de
C, N y energa.

03tracto de carne: contene a.a., pptdos,

nucetdos, cdos orgncos, vtamnas y
mneraes.

03tracto de le9adura (de cerveza): fuente

de vtamnas de compe|o B, y de compuestos de
N y C.

Aar MacConAey
Cantdad (g/ L)
Peptona de geatna 17.0
Peptona de casena 1.5
Peptona de carne 1.5
Lactosa 10.0
Saes bares 1.5
Coruro sdco 5.0
Ro|o neutro 0.03
Crsta voeta 0.001
Agar 13.5



Bi.os de medio
Bi.os de medio

Selecti9os.

<i$erenciales

Medios selecti9os
Medios selecti9os
"ontienen sustancias especicas que
avorecen el crecimiento de un tipo particular
de m0o0
Las sales biliares o colorantes como a fucsna y
e crsta voeta favorecen e crecmento de
Gram(-), nhbendo e desarroo de Gram(+).
Aar Salmonella@S7iella 1SS2, adconado con saes
bares para nhbr coformes. Se producen coonas ncooras
por a ncapacdad de fermentar actosa.
Aar sul$ito de bismuto 18S2. Para asar Salmonella typhi;
coonas negras con tono metco.
Aar sal manitol 1MS2, adconado con 7.5% de sa. Se usa
para asar estafococos.

Medios di$erenciales
Medios di$erenciales
"ontienen productos qumicos para dar lugar a una
alteracin visible del medio de cultivo
Dferencan entre grupos dstntos de bacteras e ncuso
permten una dentfcacn tentatva de m.o. segn as
caracterstcas bogcas. E|empo: agar sangre.
Aar 0osina a#ul de metileno 10M82. Contene actosa, saes y
coorantes (eosna y azu de meteno), para dferencar entre
fermentadores y no fermentadores de actosa. E|. E. co
(fermentador) produce coonas oscuras o con bro metco.
Aar McConAey. Adconado con saes bares y crsta voeta. Para
seeccn y recuperacn de Enterobacteriaceae y bacteras Gram(-).
Bacteras fermentadoras de actosa producen coonas ro|as.
Aar ent5rico de HeAtoen. Adconado con eevada concentracn
de saes bares como nhbdor. Para aumentar e rendmento de
Salmonella y Shigella.



'ormulacin de medios
'ormulacin de medios
de culti9o
de culti9o

Consste en a $ormulacin cuantitati9a

de medo, tomando en cuenta todos os
eementos o nutrentes requerdos.

Los macronutrentes son os que controan

a veocdad de crecmento.

Los medos de cutvo deben prepararse

con una $ormulacin balanceada
cualitati9a y cuantitati9a.

<CS0DO CEA"CBABC/O <0" M0<COS <0
CE"BC/O :
<0'CNCCCON 4ECMCCA
"a de$inicin del medio debe 9incularse con los ti.os
microbianos:
Hetertro$os 1sim.les2 Autottro$o
?lucosa Amoniaco
Sul$ato de amonio Sales de sul$ato
'os$ato monob-sico de & Sales de $os$ato
NaCl NaCl
CaCl) Cationes 1Cu, MoF2

'ORME"ACCON > 8A"ANC0O <0"
M0<CO
<eterminacin de las concentraciones de los
sustratos limitantes
"a relacin C!N como criterio de GbalanceoH
C!N Bi.o de Medio
IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII
Prote6na microbiana ,J
Ora7eterotr$ico
Res.iracin )@J: "itoautotr$ico
1desasimilati9o2
IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII I

Rendimiento biomasa
Rendimiento biomasa
sustrato 1>
sustrato 1>
;!S ;!S
2
2
>
;!S
;
s
(iomasa producida =>

? >
2
@
Austrato consumido =A
2
? A

@
=
Rendimiento de biomasa .roducida .or
$uente de carbono consumida
M.o. aerobio = 0.K biomasa
M.o. anaerobio = :., biomasa

Sustrato
1S
:
2
K:L 8iomasa + 50%
produccn de metabotos y
mantenmento ceuar.
,:L 8iomasa + 90%
produccn de metabotos y
mantenmento ceuar.
m.o. m.o.
anaerobio anaerobio
m.o. m.o.
aerobio aerobio
Rendimiento = Y =
0.5
Rendimiento = Y =
0.1

Com.osicin celular
Com.osicin celular

Cantdad de C = 50%

Cantdad de N = 8%

Cantdad de P = 5%

Cantdad de S = 3%
E hdrgeno y e oxgeno consttuyen e
agua

0jercicio ,
0jercicio ,
Dsear un medo de cutvo para un m.o.
hetertrofo smpe anaerobio.
Fuente de C: gucosa
Fuente de N: coruro de amono, NH
4
C
Fuente de S: sufato de magneso, MgSO
4
Fuente de P: fosfato cdo de potaso, KH
2
PO
4
8a clula bacteriana tiene 32C ", DC N, 3C - y +C A0
Ou cantdad de cada uno de os compuestos se
tene que aadr a 1 L de agua para producr 20
g/L de bomasa?

Solucin
Solucin
?lucosa
20 g bomasa 0.5 g C 180 g Gucosa =
)K !"
L g bomasa 72 g C
NH
M
Cl
20 g bomasa 0.08 g C 53.5 g NH
4
C = N.,
!"
L g bomasa 14 g N

MSO
M
20 g bomasa 0.03 g C 120.3 g MgSO
4
=
).)K !"
L g bomasa 32 g S
&H
)
PO
M
20 g bomasa 0.05 g C 136 g KH
2
PO
4
=
M.M) !"
L g bomasa 30.9 g P

Rendimiento
Rendimiento
?lucosa
20 g bomasa 0.5 g C 180 g Gucosa =
25 g/L
L g bomasa 72 g C
25 g Gucosa 10% bomasa (anaerobio)
x 100% bomasa
x = )K: ?lucosa
Si el m.o. fuera aerobio entonces se re!uieren
50 g "lucosa

0jercicio )
0jercicio )
Formuar y dsear un medo de cutvo para
una bactera mesofca, hetertrofa smpe y
anaeroba estrcta, basado en 100 g/L de
fuente de carbono.
Cuntos g/L de bomasa se producrn en 1
L de medo dseado?
Hetertrofa smpe, anaeroba estrcta.
Fuente de C: gucosa
Fuente de N: coruro de amono, NH
4
C
Fuente de S: sufato de magneso, MgSO
4
Fuente de P: fosfato de potaso, K
2
HPO
4