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ndice
Resumen ............................................................................................................................................. 3
Introduccin ....................................................................................................................................... 4
Antecedentes ...................................................................................................................................... 7
Taxonoma y caracterizacin botnica .......................................................................................... 7
Constituyentes qumicos de H. patens .......................................................................................... 8
Insecticidas de origen vegetal ...................................................................................................... 10
Rotenona ................................................................................................................................... 10
Azadirachtin ............................................................................................................................. 10
Sabadilla .................................................................................................................................... 10
Nicotina .................................................................................................................................... 11
Azadiractina .............................................................................................................................. 12
Piretrinas .................................................................................................................................. 12
Objetivo General .............................................................................................................................. 13
Objetivos especficos .................................................................................................................... 13
Metodologa ...................................................................................................................................... 14
Obtencin del material biolgico ................................................................................................ 14
Extracto etanlico de Hamelia Patens ......................................................................................... 14
Cromatografa en capa fina del extracto etanlico ..................................................................... 14
Extracto metanlico 24 horas ...................................................................................................... 15
Pruebas colorimtricas ................................................................................................................. 15
Pruebas del extracto para determinar la actividad insecticida en el sarcoptes scabiei de la
variedad canis(acaro de la sarna) contra un insecticida comercial. ........................................... 15
Bibliografa ....................................................................................................................................... 17




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Resumen
Las plantas a lo largo de su evolucin han desarrollado mtodos para
defenderse de plagas y patgenos que pudieran daarla. Hamelia patens es una
planta medicinal ampliamente usada para tratar diferentes enfermedades, rica en
diferentes compuestos como alcaloides, flavonoides, y terpenos que se han usado
como insecticidas vegetales.
En este trabajo se realizar la obtencin de diferentes extractos para ser
evaluados con la especie sarcoptes scabiei cannis por una metodologa en donde
se evaluara el ndice de mortalidad de dicha especie con el extracto obtenido
anteriormente y se comparara el efecto insecticida con un insecticida comercial ,
esta metodologa se realizara en una jaula hermtica con las condiciones
adecuadas para mantener a la especie en sus ptimas condiciones de vida para
que el anlisis sea lo ms afn para este proyecto.
Posteriormente los extractos evaluados se analizaran para ser
caracterizados qumicamente por la metodologa de cromatografa de capa fina.










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Introduccin
En el pasado el conocimiento del efecto beneficioso de algunas plantas
permiti darle diferentes aplicaciones de acuerdo al efecto beneficioso que tena.
Al convertirse en la fuente de compuestos qumicos lo que resultaba importante
conocer era, solamente, el principio activo presente en el vegetal.
La etnobotnica es el estudio del uso de las plantas, as como las
interrelaciones del hombre con ellas a lo largo de la historia, en donde intervienen
los medios fsicos y sociales, adems de las cualidades inherentes a las plantas.
(Argaez, 2014).
Dicho en otra forma, la Etnobotnica es el estudio contextualizado del uso
de las plantas. (Alcorn, 2001)
En nuestro pas existe una gran diversidad de especies vegetales de origen
tropical, de las cuales unas cinco mil plantas son usadas como medicinales y que
dada la diversidad vegetal podran a llegar a ser hasta 20 mil (Aguilar, 1994).
Las plantas han evolucionado por ms de 400 millones de aos y para
contrarrestar el ataque de los insectos han desarrollado mecanismos de
proteccin, como la repelencia y la accin insecticida. (Silva-Aguayo, 2002)
El uso masivo de insecticidas vegetales se ha topado con muchos
obstculos pues al principio eran utilizados por indgenas y agricultores, que en su
mayora basaban su uso en supersticiones, que al ser sometidas al rigor cientfico
demostraban no tener efecto alguno; y los que se demostraron que si tenan un
notable efecto fueron sustituidos rpidamente por los insecticidas sintticos. Sin
embargo debido a que estos resultaban muy dainos para el ambiente y ante la
creciente ola de conciencia ambiental el uso de los insecticidas vegetales vuelve a
tomar gran importancia nuevamente.
Podemos definir un insecticida como una sustancia que interviene
qumicamente con el ciclo vital de un insecto, o sea que tiene un efecto biocida
debido a la naturaleza de su estructura qumica.
El modo de accin de las sustancias que producen las plantas para su
proteccin, ms que un efecto insecticida tiene un efecto insectiesttico es decir
5

que no mata directamente al insecto sino que inhiben su desarrollo normal. Esto lo
pueden hacer de diferentes maneras como se describe en la siguiente tabla:



Modo de accin Descripcin
Reguladores de
crecimiento
Afecta las etapas del crecimiento del insecto evitando
o alterando la metamorfosis desfavorablemente, o
bien afectando la funcin de sus hormonas
produciendo insectos con malformaciones o muertos.
Inhibidores de la
alimentacin
Luego de una pequea prueba, el insecto se deja de
alimentar y muere por inanicin.
Repelentes Las plantas producen un compuesto con un olor
desagradable para el insecto o bien una sustancia
irritante.
Confusores Los compuestos qumicos de una determinada planta
constituyen una seal inequvoca para el insecto para
poder encontrar su fuente de alimento.

Ventajas y desventajas de los insecticidas vegetales:
Ventajas
Son conocidos por el agricultor ya que generalmente se encuentran en su
mismo medio.
Muchas veces poseen otros usos como medicinales o repelentes de
insectos caseros.
Su rpida degradacin puede ser favorable pues disminuye el riesgo de
residuos en los alimentos.
Algunos pueden ser usados poco tiempo antes de la cosecha
Varios actan rpidamente inhibiendo la alimentacin del insecto aunque a
la larga no causen la muerte del insecto.
Debido a su accin estomacal y rpida degradacin pueden ser ms
selectivos con insectos plaga y menos agresivos con los enemigos
naturales
6

Muchos de estos compuestos no causan fitotoxicidad.
Desarrollan resistencia ms lentamente que los insecticidas sintticos.


Desventajas
No todos son insecticidas sino que muchos son insectistaticos lo que los
hace tener una accin ms lenta
Se degradan rpidamente por los rayos ultravioleta por lo que su efecto
residual es bajo.
No todos los insecticidas vegetales son menos txicos que los sintticos.
No se encuentran disponibles durante toda la temporada.
Los lmites mximos de residuos no estn establecidos
No hay registros oficiales que regulen su uso.
No todas las recomendaciones que manejan los agricultores han sido
validadas con rigor cientfico.


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Antecedentes
Hamelia Patens es una planta utilizada en la medicina tradicional mexicana
a la que se le asocian propiedades antimicrobianas, analgsicas y
antiinflamatorias. Es conocida en la pennsula de Yucatn como XKanaan, y
comnmente como coloradillo o chichipince.
Hasta la fecha se sigue utilizando la infusin de las hojas y tallos aplicados
localmente para tratar afecciones drmicas, para lavados vaginales y baos para
aliviar el reumatismo y piernas hinchadas, El polvo de hojas de Chichipince
tostadas al comal se aplica en llagas persistentes. La extraccin del jugo de hojas
alivia piquetes de insectos e irritaciones. A esta planta se le reconocen
propiedades antisptica, astringente, para cicatrizar la piel, desinflamante,
emoliente, estomaqumica y vulneraria (Mrques et al, 1999)
Taxonoma y caracterizacin botnica
Reino -- Plantae
Filo -- Magnoliophyta
Clase -- Magnoliopsida
Orden -- Rubiaceae Familia
Rubiaceae Gnero -- Hamelia
Especie -- Hamelia patens Jacq.

Hojas: Opuestas, sobre el tallo entre 2 hojas contiguas se presentan las
estpulas que son como hojillas triangulares, diminutas. De 2 a 4 hojas brotando
del mismo nudo, elpticas y a veces ms anchas hacia el pice, de 5 a 23 cm de
largo, puntiagudas, base variable; los pecolos de tamao muy variable.
Inflorescencia: En la punta de las ramas; sus ejes estn arqueados y
generalmente se dividen en 2, sobre ellos se disponen las flores erguidas.
Flores: De color amarillo oscuro, anaranjado o rojo; el cliz acampanado y
terminado en 5 dientecillos triangulares muy pequeos; la corola largamente
tubular y terminada en 5 lbulos, a veces cubierta con pelillos que pueden ser
erguidos o reclinados.
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Frutos y semillas: El fruto carnoso, globoso, de color rojo, al madurar
negro, de hasta 1.3 cm de largo. Semillas numerosas, angulosas. (Recinos, 2011)

Constituyentes qumicos de H. patens
A partir de las hojas secas de H. patens se identificaron 10 productos
naturales: 2 alcaloides, 1 flavona, 2 esteroles, 1 sesterterpeno y 4 triterpenos. En
la siguiente tabla se muestran los productos naturales identificados por
cromatografa de capa fina, usando diferentes eluyentes principalmente de
acetona y hexano en diferentes proporciones:



(Aguilar-Guadarrama, 2006)

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Tambin se han identificado los alcaloides Isopterodina y Pteropodina;
estos son un complemento para los agentes anticancergenos que son las clulas
T, como un estimulante del sistema inmune. As como tambin para el tratamiento
de la leshmaniasis. Otros alcaloides encontrados tambin con actividad anti
leshmania fueron rumberina, palmirina y mitrajavina.


(Suarez- Daz- Tillet- Valvbidieso- Compagnone 2008)

Entre los flavonoides que se encontraron en H. patens estn:
Kaempferol-3-0 rutinosida (5)
(-) epicatequina. (6)















(Suarez- Daz- Tillet- Valvbidieso- Compagnone 2008)
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Insecticidas de origen vegetal
Rotenona
La rotenona es un flavonoide que se extrae de las races de dos plantas
que son Derris spp (Fabaceae) y Lonchocarpus spp (Fabaceae). De la primera se
puede obtener un 13% de rotenona mientras que de la segunda un 5%. Derris spp
es nativa de los trpicos orientales, mientras que Lonchocarpus spp es del
hemisferio occidental. Este compuesto es un insecticida de contacto e ingestin,
que acta tambin como repelente.
Su modo de accin implica una inhibicin del transporte de electrones a
nivel de mitocondrias bloqueando la fosforilacin del ADP a ATP. Por esto se dice
que acta inhibiendo el metabolismo del insecto. Los sntomas que presentan los
insectos intoxicados con rotenona son; disminucin del consumo de oxigeno,
depresin en la respiracin y ataxia que provocan convulsiones y conducen
finalmente a la parlisis y muerte del insecto por paro respiratorio. (Silva-Aguayo,
2002)



Azadirachtin
Este insecticida biolgico se deriva del rbol de Neem (Azadirachta indica).
Regula el crecimiento de los insectos, interfiriendo con la hormona mudadora
ecdisona.
Sabadilla
Es un compuesto derivado de las semillas de una planta de origen sudamericano
conocido como Schoenocaulon officinale (Liliaceae).Las semillas de esta planta
han demostrado tener cantidades importantes de alcaloides que le confieren las
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propiedades txicas. Su modo de accin es a travs de las membranas celulares
de las neuronas causando una disminucin de las funciones nerviosas, parlisis y
muerte. El polvo de estas semillas es uno de los insecticidas vegetales de menor
toxicidad para mamferos pero no as si se aslan sus alcaloides que pueden llegar
a ser altamente txicos adems de irritantes para la piel.

Nicotina
La nicotina es un alcaloide derivado de plantas de la familia Solanaceae,
especialmente tabaco (Nicotiana tabacum). Sus propiedades insecticida fueron
reconocidas en la primera mitad del siglo XVI. Este compuesto no se encuentra en
la planta en forma libre sino que formando maleatos y citratos. La nicotina es
bsicamente un insecticida de contacto no persistente. Su modo de accin
consiste en mimetizar la acetilcolina al combinarse con su receptor en la
membrana postsinptica de la unin neuromuscular.
El receptor acetilcolnico, es un sitio de accin de la membrana
postsinptica que reacciona con la acetilcolina y altera la permeabilidad de la
membrana; la actividad de la nicotina ocasiona la generacin de nuevos impulsos
que provocan contracciones espasmdicas, convulsiones y finalmente la
muerte.Hoy en da se encuentran en el mercado un grupo de insecticidas
conocidos como neonicotinoides que son copias sintticas o derivadas de la
estructura de la nicotina como son Imidacloprid, Thiacloprid, Nitempiram,
Acetamiprid y Thiamethoxam entre otros.







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Azadiractina
Este compuesto es un tetraterpenoide caracterstico de la familia Meliaceae
pero especialmente del rbol Neem (A. indica), originario de la india. Este se
encuentra en la corteza, hojas y frutos de este rbol pero la mayor concentracin
se ubica en la semilla. Este compuesto no ha podido ser sintetizado en laboratorio
adems de que cuando ha sido aislado y probado solo, los resultados han sido
menores a cuando se aplican extractos.
En el extracto se han identificado alrededor de 18 compuestos entre los que
destacan salanina, meliantrol y azadiractina que es el que se encuentra en mayor
concentracin.




Piretrinas
Las piretrinas son esteres con propiedades insecticida obtenidas de las
flores del piretro (T. cinerariaefolium). Los componentes de esta planta con
actividad insecticida reconocida son seis steres, formados por la combinacin de
los cidos crisantmico y pirtrico y los alcoholes piretrolona, cinerolona y
jasmolona.





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Objetivo General
Evaluar el efecto insecticida del extracto de Hamelia Patens en la especie
de sarcoptes scabiei canis (acaro de la sarna).
Objetivos especficos
Recolectar del material biolgico de xkanaan (Hamelia patens)
Obtener el extracto de Hamelia Patens
Evaluar los componentes y determinar la mayor efectividad posible
Determinar el modo de accin insecticida (inhibicin, confusin, repelente) y
precisar la mejor aplicacin para dicho insecticida



































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Metodologa

Obtencin del material biolgico
El material biolgico se recolectara en el Instituto Tecnolgico de Mrida. Se
seleccionaran las hojas que se consideran sanas, de tamao mediano, enteras y
que no presentaran algn tipo de contaminacin

Extracto etanlico de Hamelia Patens
Las hojas frescas de H. Patens se van a triturar en un mortero, una vez trituradas
sern mantenidas en etanol absoluto (CTR) por 24 horas (1/8) para
posteriormente evaporar el extracto etanlico a sequedad.

Cromatografa en capa fina del extracto etanlico
Se probaran diferentes mezclas de solventes para lograr la separacin de los
compuestos de H. patens. Las mezclas de solventes a utilizar seran: Butanol-cido
actico-agua en diferentes proporciones (1:1:1, 3:2:1, 3:1:2) y como fase
estacionaria papel filtro de poro fino, papel cromatogrfico y slica (solamente en
proporcin 1:1:1) (Aquino et al 1990).
En caso de que los compuestos del extracto etanlico de H. patens no se
observen completamente separados y definidos en ninguna de las mezclas de
solventes ni en ninguno de los soportes empleados, se realizara la cromatografa
en capa fina en almina (Aquino et al 1990). probando nuevamente diferentes
mezclas de solventes.
Los solventes a utilizar seran butanol-cido actico-agua en diferentes
proporciones (1:1:1, 1:2:1, 2:1:2, 2:1:1, 2:2:1, 2:1.5:1, 3:2:1 y 3:1:2), hexano-
acetato de etilo (1:1 y 3:7), butanol solo y agua-butanol-acetona-cido actico
(16:2:2:1).



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Extracto metanlico 24 horas
Las hojas de H. patens se secaran a temperatura ambiente y en oscuridad,
posteriormente se pulverizaran en un molino tradicional (Pulvex) y desengrasadas
con ter de petrleo por otras 24 horas. Despus de una filtracin y secado a
temperatura ambiente, las hojas pulverizadas se mantendrn en metanol por 24
horas en constante agitacin.

Pruebas colorimtricas
Se realizaran diferentes pruebas colorimtricas cualitativas para determinar en los
extractos etanlicos diferentes compuestos como: polifenoles totales, flavonoides,
esteroides, saponinas, alcaloides. Los polifenoles se determinaran a travs del uso
del reactivo de Folin-Ciocalteau (Aquino et al 1990). mientras que los flavonoides
se van a determinar por la reaccin colorimtrica resultado de la reaccin de nitrito
de sodio, cloruro de aluminio e hidrxido de sodio (Oropeza et al 2004 ).
Determinacin de alcaloides: el residuo de extracto etanlico en cido
clorhdrico se mezclar con solucin de Dragendorff (Nitrito de Bismuto, cido
actico glacial, yoduro de potasio). La formacin de un precipitado indica una
reaccin positiva.

Pruebas del extracto para determinar la actividad insecticida en el
sarcoptes scabiei de la variedad canis(acaro de la sarna) contra un
insecticida comercial.
Las pruebas o ensayos con insecticidas deben ser precisos y exactos. Esto es, de
hacerse muchas pruebas siguiendo minuciosamente un protocolo, no deben
existirse diferencias marcadas en sus resultados; adicionalmente los resultados,
en la experiencia de los investigadores, no deben distanciarse con lo observado
en la naturaleza o realidad, fuera del laboratorio: esto debe presentar menor sesgo
posible. Grupos de factores a controlarse en una prueba con insecticidas:
1 Insecticidas a probarse
1.1 La pureza de la sustancia qumica
1.2 La identidad de la formulacin
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1.3 Identidad del producto comercial
1.4 Caractersticas de su estado fsico
2 Caractersticas propias de los insectos que servirn como animales
experimentales
2.1 Identidad de la especie
2.2 Su tamao
2.3 Estado de desarrollo
2.4 El sexo de los adultos asi como su estado reproductivo
2.5 El estado de alimentacin
2.6 Pureza gentica de la poblacin
2.7 Caractersticas de resistencia/susceptibilidad/irritabilidad
3 Condiciones ambientales que rodean al insecto o los insecticidas antes y
durante la prueba
3.1 Temperatura
3.2 Luminosidad
3.3 Calidad del agua
3.4 Amplitud de las jaulas
3.5 Caractersticas de los sustratos

Se utilizara un mtodo para la evaluacin de la resistencia a insecticidas en caros
adultos. Este mtodo consiste en impregnar las jaulas hermticas con un
concentrado mnimo del extracto de la hammelia patens, se transferir los grupos
de insectos y se registrara la mortalidad a intervalos de tiempo regulares por una
hora y de la misma manera aplicaremos para el insecticida comercial.
Se transferirn durante una hora en las jaulas con los siguientes tratamientos: 1)
sin aditivos, 2) 0,5ml del extracto y 3) 1,0ml del extracto. Se realizaran de tres a
cinco replicas para cada tratamiento y especie.
Las ventajas de este mtodo frente al convencional, en esta evaluacin preliminar,
fueron: su bajo costo, fcil uso en campo, superficie de exposicin totalmente
impregnada y visibilidad del comportamiento de los insectos.

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Bibliografa
Aguilar-Guadarrama, D. M. (2006). Alcaloides indlicos, terpenos, esteroles y
flavonoides de las hojas de Hamelia patens Jacquin (Rubiaceae). revista cubana.
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Argaez. (2014). estudio preliminar de compuestos medicinales en Hamelia Patens
(X Kanaan). Mrida.
Mrquez C, Lara F, Esquivel R, Mata R. Plantas Medicinales de Mxico II.
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Reyes-Chilpa, R., Rivera, J., Oropeza, M., Mendoza, P., Amekraz, B., Jankowski,
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Recinos, O. H. (2011). Anlisis Fitoqumico de la planta Medicinal Amelia patens,
Chichipince. guatemala.
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http://ipmworld.umn.edu/cancelado/Spchapters/GsilvaSp.htm
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