Biodegradacin de residuos orgnicos de plazas de mercado
En el presenteproyecto se caracterizaron, clasificaron y acondicionaron los residuos orgnicos
de la plaza de mercado de Caucasia(Antioquia), analizndose los posibles tratamientos para su conversin en productos de valor agregado. Se eligi transformar el almidn y la celulosa presentes en los residuos. Se establecieron las mejores condiciones de temperatura, pH y dosificacin de enzima para transformar los polisacridos en azcares reductores. Para la transformacin del almidn y la celulosa se utilizaron glucoamilasa y celulasas comerciales. La conversin de almidn alcanz valores del 60% a 50 C, y un pH de 6,0. La conversin de celulosa fue de un 4% a 60 C y un pH de 4,0. Se llev a cabo el estudio cintico de la hidrlisis de almidn con base en el modelo de Michaelis-Menten. A partir de la nueva materia prima (azcares reductores) se obtuvo etanol. Igualmente se evalu la produccin de biogs y compost a partir de los residuos slidos estudiados. En la produccin de biogs se determin que por cada kilogramo de residuos tratados se producen, en el rango de temperatura mesoflica, aproximadamente 4 L de biogs. A pesar de los valores relativamente bajos de la relacin C/N para los residuos vegetales, se evidenci la posibilidad de llevar a cabo un proceso de compostaje para este tipo de desechos. INTRODUCCIN En el mundo se producen aproximadamente 1600 millones de toneladas por ao de residuos slidos (Skinner, 2000), los cuales generan graves problemas, no slo por el deterioro progresivo del medio ambiente, sino tambin desde el punto de vista econmico puesto que los costos de recoleccin, transporte y disposicin final son cada vez mayores. Se estima que los servicios de disposicin, tratamiento y aprovechamiento de los residuos slidos mueven mundialmente un mercado anual de 100000 millones de dlares, de los cuales 43000 millones corresponden a Norteamrica, 42000 millones a la Unin Europea y slo 6000 millones a Suramrica, siendo la produccin de residuos de 250,200 y 150 millones de toneladas por ao respectivamente (Skinner, 2000). En el caso de Colombia, las cifras del Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial indican que en un da el pas produce 27300 toneladas de basura de las cuales el 65% son residuos orgnicos y el 35% inorgnicos. Los componentes que constituyen la fraccin orgnica de las basuras colombianas son residuos de alimentos, papel, cartn, madera y residuos de jardn (Stoecklein y Surez, 1998). Slo el 40% de los residuos slidos municipales tiene un manejo adecuado, el 50% es manejado de forma indebida y el 10% es recuperado gracias al reciclaje. La mayor parte del comercio mayorista de productos agrcolas de consumo humano, y gran parte del minorista, se lleva a cabo en las centrales de abasto de las ciudades colombianas. En el caso de Caucasia, la comercializacin se realiza en la plaza de mercado (EL CENTRO) que en conjunto con los otros locales que lo rodean conforman el sector de la plaza de mercado local. Los residuos slidos que se producen diariamente en este sector son sobre todo de origen vegetal y estn constituidos por frutas y verduras que no alcanzan la calidad necesaria para su comercializacin debido, por ejemplo, a su alto estado de madurez; igualmente estos residuos estn constituidos por diferentes estructuras vegetales de desecho (cscaras, tallos, semillas, etc.). Los polisacridos contenidos en este tipo de materiales pueden ser aprovechados por medio de la transformacin enzimtica de los complejos amilceos (Guzmn y Paredes, 1995) y celulsicos (Ho-ward et al., 2003) en azcares que posteriormente son fermentados hasta alcohol u otros productos de valor agregado. La mayora de investigaciones sobre residuos orgnicos realizadas tanto en los pases desarrollados como en Colombia, han concentrado sus esfuerzos en la transformacin de estos residuos a biogs y compost (Castillo et al., 2003; Faras et al., 1999; Hamzawi et al., 1999; Salas y Giraldo, 1996; Tcho-banoglus et al., 1994; Cecchi y Traverso, 1988). Igualmente, se han llevado a cabo estudios para el diseo de procesos de conversin de residuos slidos municipales a alcohol, algunos de los cuales han sido patentados para su implementacin a nivel comercial (Titmas, 1999). En particular, se ha reportado que la compaa Masada Resource Group planea iniciar en 2004 la operacin de la primera planta productora de etanol en Estados Unidos a partir de residuos slidos municipales mediante la hidrlisis cida de la celulosa contenida en los mismos (Ames y Werner, 2003). Sin embargo, la mayora de estos procesos se limita al tratamiento de la celulosa mediante hidrlisis cida y no explora la utilizacin de enzimas ni la potencialidad de hidrolizar el almidn presente en los residuos slidos de origen vegetal. Objetivos Estudiar en forma preliminar diferentes estrategias para el aprovechamiento integral de los desechos orgnicos de origen vegetal producidos en una plaza de mercado mediante procesos biolgicos de degradacin: tratamiento enzimtico, conversin en productos de valor agregado por fermentacin, digestin anaerbica y compostaje. MATERIALES Y MTODOS Pretratamiento de residuos orgnicos. Se tom un total de nueve muestras aleatorias de residuos orgnicos de las unidades de almacenamiento del sector de la plaza de mercado de Manizales durante nueve das diferentes. Los materiales que componan las muestras fueron separados, clasificados cualitativamente y pesados. Se determinaron los porcentajes en peso de los diferentes materiales presentes en las muestras. Posteriormente los materiales fueron mezclados y sometidos a un pretrata-miento que consisti en su molienda y licuado, pro- cedimiento que fue realizado en tres oportunidades hasta la obtencin de un lodo fluido de 1,220,2 g/mL. Se llev a cabo la caracterizacin fsico-qumica del lodo realizando determinaciones de humedad, almidn, azcares reductores y celulosa. Hidrlisis enzimtica. La hidrlisis enzimtica del almidn y la celulosa presentes en los residuos orgnicos se realiz en un reactor enchaquetado de hierro de 1 L con un revestimiento hidroltico y posterior niquelado superficial acoplado a un termostato tipo MLW de 0-100 C. Al reactor se le adapt un agitador mecnico MLW tipo MR 25 con un rango de 30-2500 rpm. La hidrlisis del almidn se llev a cabo utilizando una glucoamilasa comercial (Naturalzyme GA-300). Se evaluaron tres diferentes niveles de temperatura (50, 55 y 60 C) y de pH (6,0; 6,5 y 7,0) con tres repeticiones para cada tratamiento. En cada tratamiento se tomaron 600 g de residuos orgnicos pretratados de acuerdo con el procedimiento descrito anteriormente, y se determin su contenido de humedad y de almidn. Se estableci una relacin constante de almidn a agua de 1:8, adicionndose agua en caso de necesidad, y se ajust el pH con bicarbonato de sodio. El almidn de la mezcla se gelatiniz a temperaturas mayores de 70 C durante no menos de 15 min, regulando la agitacin para permitir una adecuada homogeneizacin. Esta mezcla no se esteriliz. Luego de este proceso se enfri la mezcla hasta la temperatura definida y se adicion la glucoamilasa. Cuando fue necesario, se ajust de nuevo el pH a los valores predefinidos para cada tratamiento inmediatamente antes de la adicin de la enzima; a partir de este momento el pH no se control. La reaccin de hidrlisis se llev a cabo durante 90 min con agitacin. Se midi la concentracin de azcares reductores al final de la reaccin as como la de almidn, evalundose su conversin, definida como la cantidad de almidn transformada con respecto al contenido inicial de almidn (en porcentaje). El anlisis estadstico se realiz mediante el software Statgraphics Plus 2.0 usando herramientas de estadstica descriptiva y de inferencia estadstica (Montgomery, 1991). Para la determinacin de la dosificacin ptima de la enzima se emple el diseo experimental de la regla de oro (dgar et al., 2001) en el rango10-100 |j.L/kg siendo el valor recomendado en la ficha tcnica de la enzima 70 |uL/kg de materia prima, midindose la concentracin de azcares reductores al final de la reaccin. El criterio empleado en estos estudios para la seleccin de las condiciones ptimas de la hidrlisis enzimtica se asoci a la maxi-mizacin de la conversin de almidn presente y de la formacin de azcares reductores. La hidrlisis de celulosa se llev a cabo empleando un complejo enzimtico comercial con acti- vidad celulsica (Celulasa TR-5000), evalundose dos niveles de temperatura (55 y 60 C) y tres de pH (4,0; 5,0 y 6,0) con dos repeticiones por tratamiento. Debido a que la lignina presente en el material vegetal recubre la celulosa y no permite que acten las celulasas (Whitaker, 1994), se realiz un pretrata-miento adicional a la mezcla inicial agregando hidr- xido de sodio al 1 % en peso a una temperatura de 80 C durante 1,5 h con una relacin de materia prima a lcali de 1:5 (Osorio y Lasso, 1996; Ros, 1996). Esta mezcla no se esteriliz. Luego del pretratamiento el pH fue ajustado con cido actico inmediatamente antes de la adicin de la enzima; a partir de este momento el pH no se control. Se determin la concen- tracin de azcares reductores al inicio y al final del proceso de hidrlisis. La determinacin de la dosificacin ptima de la enzima se llev a cabo con el mismo procedimiento aplicado a la hidrlisis del almidn. El rango de variacin de la dosis fue de 100-1000 ppm. Para el anlisis Estudio cintico de la hidrlisis de almidn. La cintica de la reaccin de hidrlisis enzimtica del almidn se realiz llevando a cabo diferentes experimentos por lotes variando la concentracin inicial del sustrato. Para ello se emplearon cinco soluciones preparadas a partir de la mezcla inicial de residuos orgnicos pretratados considerando el contenido inicial de humedad de la misma; las soluciones correspondieron a las siguientes proporciones de almidn y agua (en peso): 1:8, 1:9, 1:10, 1:11, 1:12. Se utilizaron las mejores condiciones determinadas de temperatura, pH y dosificacin de enzima. Durante el transcurso de la hidrlisis se tomaron muestras cada 3 minutos al inicio de la reaccin, y cada 15 minutos al final hasta completar un tiempo de 2 h. Se simul la cintica de la hidrlisis de almidn em- pleando el modelo de Michaelis-Menten descrito ampliamente en la literatura (Bailey y Ollis, 1984) con ayuda de los paquetes MS Excel y Simulink v. 1.3c de Matlab v. 4.2c. Fermentacin alcohlica. El producto de las reacciones de hidrlisis fue sometido a fermentacin alcohlica en reactores de porcelana de 1 L de capacidad. Se garantizaron las condiciones de fermentacin utilizadas industrialmente (32 C y pH entre 3,5 y 4,0). Se prepararon siete medios con diferentes concentraciones iniciales de sustrato que correspondieron a 4, 6, 8, 10, 12, 14 y 23 Brix. Para preparar los medios de cultivo con altos valores de Brix, se procedi a evaporar el agua contenida en los hidrolizados. Se utiliz levadura comercial (levadura activada Fleis-chman, 1 g/L) y se adicionaron al medio urea (0,48 g/L) y sulfato de amonio (0,24 g/L). La fermentacin se llev a cabo durante 8 das. Se determin la concentracin de azcares reductores al principio y al final del cultivo. El contenido de etanol se estableci al trmino del proceso. Produccin de biogs y compost. La digestin anaerbica para la obtencin de biogs (metanog-nesis) a partir de los residuos orgnicos sometidos a molienda y licuado se realiz en botellones de vidrio inerte, utilizando un volumen de trabajo de 8 L correspondientes a 9,8 kg de residuos pretratados, los cuales fueron llevados a valores neutros de pH adicionando bicarbonato de sodio, y mantenidos en este rango durante todo el proceso. Se utiliz un inculo preparado a partir de digestiones anaerbi-cas anteriores realizadas en el Laboratorio de Aguas de la Universidad Nacional de Colombia, sede Mani-zales. El porcentaje de inculo empleado fue del 15% (v/v). El volumen de biogs producido fue medido por el desplazamiento de agua en una botella invertida garantizando la hermeticidad del sistema y realizando una purificacin del biogs resultante mediante la remocin de CO 2 por absorcin en una solucin de hidrxido de calcio. En todos los casos, la medicin del volumen de biogs recolectado se hizo a presin atmosfrica y a temperatura ambiental, registrndose la misma con el fin de expresar los resultados a presin y temperatura normales. Para la me-tanognesis se fij un rango de temperatura crioflica correspondiente a la temperatura ambiente de la ciu- dad de Manizales (18 C en promedio) y otro de temperatura mesoflica (37 C) en condiciones anaerbi-cas. La metanognesis mesoflica se desarroll en un digestor con serpentn integrado a un termostato. Para el proceso crioflico se tomaron datos durante 85 das, mientras que para las condiciones mesofli-cas se tomaron datos durante 25 das. El proceso de compostaje de los residuos orgnicos sometidos a molienda y licuado se realiz en un recipiente de porcelana sellado con un agitador manual para el mezclado peridico de los residuos. Se utilizaron 2 kg de materia prima. El inculo utilizado consisti en una suspensin de estircol bovino, excretas de cerdo y suelo adicionado a razn de un 2% en peso a la masa de residuos. Las condiciones fueron aerbicas y la agitacin se llev a cabo cada dos horas. Se hizo el seguimiento tanto a la temperatura como al pH durante 70 h. Para la produccin de compostse evalu la relacin inicial y final de carbono a nitrgeno (C/N), as como el contenido de nitrgeno orgnico a los 10 das de haberse iniciado el proceso. Tcnicas analticas. La determinacin de la humedad se realiz por el mtodo de prdida de peso (AOAC, 1990a). El contenido de almidn se determin por el mtodo de Von Asboth, el de azcares reductores por el mtodo de Lane-Eynon y el de etanol por destilacin simple (Pearson y Cox, 1976). La cuantificacin de la concentracin de celulosa se desarroll por el mtodo de Updegraff (1969). El contenido de nitrgeno orgnico se determin por el mtodo de Kjeldahl modificado (AOAC, 1990b) y el carbono orgnico por el mtodo de prdidas durante la volatilizacin de la muestra a 430 C (Navarro et al., 1993). RESULTADOS Y DISCUSIN La clasificacin cualitativa de los residuos orgnicos procedentes de la plaza de mercado local arroj que la mayor parte de los mismos corresponde a tubrculos y frutas enteras de mala calidad o con diferente grado de descomposicin (papas, naranjas, mandarinas, papaya) con porcentajes que en promedio fueron mayores al 20%. Los residuos son as mismo ricos en cscaras de papa, yuca, pltano, frutas (naranja, banano, papaya) y hortalizas (cebolla, repollo) con porcentajes superiores al 15%; cabe destacar el elevado contenido de cscaras de papa que en algunas muestras alcanz porcentajes mayores al 40%. Finalmente, se encontraron en menor proporcin frutas y verduras no aptas para su consumo como tomate, pia (pulpa y cscara), mango, papayuela, pepino, as como diferentes desechos como bagazo de pltano y de choclo, pasto y ramas. De la clasificacin realizada se puede inferir que estos residuos tienen un mayor contenido de almidn que de celulosa, lo que se comprob al realizar su caracterizacin fsico-qumica.