TESTE DE TETRAZLIO (TZ)

Mtodo rpido que estima a viabilidade das sementes com base na alterao da
colorao dos tecidos vivos, em presena de uma soluo de sal de tetrazlio.
O teste de germinao para a maioria das espcies cultivadas pode durar de sete a 30
dias para obteno dos resultados, ao passo que o teste de tetrazlio pode informar a
viabilidade em algumas horas.

UTILIZAO DO TESTE DE TETRAZLIO

-para avaliao rpida da viabilidade das sementes
-para verificar se houve danos durante a operao de colheita
-para avaliar o beneficiamento das sementes
-durante o armazenamento das sementes

PRINCPIO DO TESTE

O teste se baseia na atividade das enzimas desidrogenases, as quais catalizam as
reaes respiratrias nas mitocndrias. Quando a semente imersa na soluo incolor do
sal de tetrazlio, esta difundida atravs dos tecidos, ocorrendo nas clulas vivas a reao
de reduo, resultando na formao de um composto vermelho, estvel e no difusvel,
conhecido por trifenilformazan.
Assim, o tecido vivo adquire cor vermelho caracterstico e o tecido morto
permanece sem alterao de cor (j que no h respirao).
A distribuio das reas vivas e mortas nas sementes pode ser visualizada e, em
funo de sua localizao, permite avaliar a viabilidade das sementes.

METODOLOGIA

1) Utilizam-se amostras de sementes puras (2 repeties de 50 sementes cada).

2) Pr-condicionamento das sementes: entre papel de germinao umedecido
O pr-condicionamento necessrio para hidratao da semente, reativao do
metabolismo, permitir o preparo e facilitar absoro da soluo de TZ e proporcionar
nitidez de colorao.

3) Preparo: para algumas espcies necessrio preparar a semente antes da colorao,
como em milho e amendoim. Exemplos:
-Remoo do tegumento (amendoim)
-Corte (ex: milho)
-Sem preparo (ex: soja)

4) Colorao
-Imerso na soluo de TZ (concentrao do sal, tempo e temperatura de colorao)
-Lavagem das sementes em gua corrente para avaliao

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EXEMPLOS:

Soja
-pr-condicionamento Entre papel umedecido (16h/25C)
-colorao soluo TZ a 0,075% 2-3h / 35-40C

Milho
-Pr-condicionamento Entre papel umedecido (16h/25C)
-Preparo corte das sementes
-Colorao soluo TZ a 0,075% 2-3h / 35-40C


AVALIAO DO TESTE

Para avaliao do teste, observar:

a) Diferenciao de cores dos tecidos
Vermelho carmim: tecido vivo e vigoroso
Vermelho carmim FORTE: tecido em deteriorao
Branco leitoso: tecido morto


b) Localizao das injrias (reas vitais)
reas vitais:

-para sementes de SOJA, cuidados especiais devem ser tomados durante a avaliao do
eixo-embrionrio e da regio vascular (metade superior do cotildone).



Adaptado de Frana Neto et al. (1998)



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-para sementes de MILHO, as reas vitais so o eixo-embrionrio e a regio central
do escutelo (cotildone).



Adaptado de Dias & Barros (1995)


c) Tipo de dano (para sementes de soja)

O TZ proporciona um diagnstico das principais causas da deteriorao da semente
de soja:
-Danos mecnicos: resultam de impactos fsicos durante as operaes de colheita,
trilha, secagem, beneficiamento e transporte. Tipos: rachaduras, amassamentos
-Deteriorao por umidade: Resulta da exposio das sementes a ciclos alternados
de condies ambientais midas e secas na fase final de maturao, antes da colheita.
Apresentam rugas caractersticas nos cotildones.
-Danos de percevejo: Percevejo verde (ezara viridula); Piezodorus guildini e
Euschistus heros. Ao se alimentar das sementes de soja, o percevejo as inocula com a
levedura ematospora coryli, que ir ento colonizar os tecidos da semente, deteriorando-
os, o que resulta em severas redues de vigor e viabilidade. A infeco forma leses
circulares caractersticas.

LIMITAES DO TESTE

Resposta rpida, mas maior consumo de horas de trabalho
Exige conhecimentos tcnicos e treinamento intensivo de analistas
No identifica sementes dormentes
No mostra a eficcia de tratamentos qumicos, nem as injrias que estes possam causar
No detecta a presena de microrganismos

escutelo
Eixo-embrionrio
endosperma
pericarpo
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VANTAGENS DO TESTE

Agilidade na obteno de resultados
Permite diagnosticar causas de perda de viabilidade (para sementes de soja)
Equipamento necessrio simples e barato


REFERCIAS

DIAS, M.C.L.L.; BARROS, A.S.R. Avaliao da qualidade de sementes de milho.
Londrina: IAPAR, 1995. 42p. (Circular, 88).

FRANA NETO, J.B.; KRZYZANOWSKI, F.C.; COSTA, N.P. O teste de tetrazlio em
sementes de soja. Londrina: EMBRAPA-CNPSo, 1998. 72p. (Documentos, 116).