LABORATORIO DE BIOQUMICA RUIZ SIMBAA GIUVITZA DEL CARMEN

1.- COMPONENTES DE LA SANGRE:

La sangre tiene dos componentes:
Plasma: Matriz lquida acuosa que contiene sustancias disueltas. 55%
Elementos corpusculares: Clulas y fragmentos celulares. 45%
a) Plasma: Lquido amarillento. Contiene:
- Agua: 91.5%
- Solutos no proteicos: 1,5%
Ac. Orgnicos
Hormonas
Sustancias inorgnicas
- Protenas Plasmticas : 7%
Albumina : 55% - 3.5 5 mg/dl
Globulinas : 40% - 2-3g/dl
o Alfa 1- Antitripsina: 85-213 mg/dl
o Alfa 2- macroglobulina: 150-400 mg/dl
Fibringeno: 4%
b) Elementos corpusculares:
- Glbulos rojos:
Hombres: 4,5 5 millones/mm
3

Mujeres: 4- 4,5 millones/mm
3

- Glbulos blancos:
5 000 10 000/mm
3

o Linfocitos: 23-35%
o Monocitos: 4-8%
o Neutrfilos segmentados: 55-65%
o Neutrfilos en cayado: 0-5%
o Basfilos: 0-2%
- Plaquetas: 150 000 400 000/mm
3

Constituyentes Bioqumicos de la Sangre:
Acetona: 0,3 2,0mg/dl
Ac. Ascrbico: 0,4 1,5mg/dl
Ac. Biliares: 0,2 3mg/dl
Ac. Grasos totales: 190-420mg/dl
Ac. Flico: 3,3 20ng/dl
Ac. rico: 3-6,6mg/dl
Aminocidos:3-5,5mg/dl
Amoniaco: 80-100mg/dl
Bilirrubina total: 0,4 1,2mg/dl
Bilirrubina directa: hasta 0,4 md/dl
Bilirrubina indirecta: Hasta 0,5mg/dl
Calcemia: 8,5 10,5 mg/dl
Calcio inico: 4,5 5,5mg/dl
Carotenoides: 100-300mg/dl
CEA:<2,5mg/dl
Ceruloplasmina: 20-35mg/dl
Cinc: 80-150mg/dl
Citrato: 17,5 4mg/dl
Cloruros: 345-380mg/dl
ClNa: 550-650mg/dl
Cobre: 88-150mg/dl
Creatinina: 0,5 1,3mg/dl
CO2: 24-30mEq/l
Enzimas:
-aldolasa: 1,3-2,2mU/ml
-amilasa: 4-25Mu/ml
-creatinfosfocinasa: 32_162mU/ml
-fosfatasa cida: >11mU/ml
-fraccin prosttica: <4mU/ml
-Fosfatasa alcalina: 30-110mU/ml
TRANSAMINASAS:
-GOT:5-32mU/ml
-GPT: 7-33 mU/ml
-5-NUCLEOTIDASA: 0,3-3,2U
Bodansky
Ferremia:
-Hombre: 80-150mg/dl
-Mujer: 60-140mg/dl
Ferritina: 15-300ng/dl
Fibringeno: 200-400mg/dl
Fosfolpidos: 150-250mg/dl
Galactosa: 0-10mg/dl
Glucemia: 80-110mg/dl
Hemoglobina srica: 2-3mg/dl
Hierro: 250-410mg/dl
Lactato: 5-20mg/dl
Magnesio: 1,8 3,6mg/dl
Peptido C: 0,3-3,7mg/l
Piruvato: 0,7-1,7mg/dl
Potasio: 3,5-5mEq/l
Saturacin arterial de Oxgeno: 96-
100%
Sodio: 135-142mEq/l
Transferrina: 200-400mg/dl
Yodo proteico: 4-8mg/dl
-GGT: 10-41mU/ml
-LDH: 130-500Mu/ml
LABORATORIO DE BIOQUMICA RUIZ SIMBAA GIUVITZA DEL CARMEN
2.- Mtodos de determinacin de:
a) Glucosa: Nivel Normal: 70-110mg/dl
-Mtodo Qumico:
Reductimtricos: Se basa en la capacidad reductora de la glucosa. Pero dan resultados superiores
a los verdaderos por la presencia en sangre de otros compuestos reductores.
Furfurlicos: Se basan en la capacidad de formar furfural al sufrir deshidratacin en un medio
cido.
-Mtodo Enzimtico:
M. de la Hexoquinasa: Emplea enzimas hexoquinasa y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. Por cada
molecula de glucosa se forma un NADPH y esto se mide en el espectrofotmetro.
M. de la glucosa oxidasa y peroxidasa: La GOD cataliza la oxidacion a acido glucnico con
formacin de perxido de hidrogeno, ste es utilizado por la peroxidasa para oxidar a la 4-
aminofenazona y al fenol, dando lugar a una quinoniamina coloreada. La cantidad de color es
proporcional a la cantidad de glucosa.
a) Fierro: Nivel Normal: 60-110mcg/dl
Capacidad de Fijacin de hierro: 240-450mcg/dl
- Mtodo Colorimtrico directo ferene: Se libera el hierro en medico cido con valencia II junto al
ac. Ascrbico y reacciona con el reactivo de color ferene tomando un color azul.
- Capacidad Total de Fijacin de Hierro: La transferrina se satura aadiendo Hierro III, lo que
excede precipita y lo que est unido a la transferrina est en el sobrenadante y se mide en el
espectrofotmetro.
- M. de la Cianohemoglobina: Al combinar sangre con K
3
Fe(CN)
6
yKCN (solucin de Drabkin), el
ferrocianuro convierte el hierro ferroso de las hemoglobinas en frrico, para formar
metahemoglobina y la molcula pierde su capacidad para transportar O
2
. Luego la
metahemoglobina se combina con el cianuro de potasio para formar cianometahemoglobina de
color rojo anaranjado brillante, esto se mide en el espectrofotmetro.
b) Calcio: Nivel Normal: 8.5 a 10.5 mg/dL
- Mtodo colorimtrico: El calcio reacciona arsenazo III dando un complejo de color azul que se
mide fotocolorimetricamente a 650nm.
- Mtodo de Clark y Collins: El calcio reacciona con la cresolftalen complexona a pH 11, dando un
complejo de adicin color magenta que se mide fotocolorimtricamente a 570 nm.
- Mtodo Colorimtrico O- Cresolftaleina Complexona sin Desproteinizacin:
El calcio forma un complejo color violeta con la o- cresolftalena complexona en medio alcalino que
se mide espectrofotomtricamente.
c) Creatinina: Valor Normal: H: 0,6-1,1 mg/dl M: 0,5-0,9 mg/dl
- Mtodo Colorimtrico Reaccin de Jaff: Creatinina reacciona con el ac. Pcrico formando un
complejo de color rojo que se lleva al espectrofotmetro para leer a 510-520nm.
- Mtodo de deteccin ultravioleta en modo isocrtico (Cromatografa): Se diluye la muestar de
orina con una solucin de un pH3,2. Se lleva a cabo por cromotografa y se lee a 236nm.
- Mtodo Enzimtico: Se expone a la muestra con una serie de enzimas catalticas hasta obtener
un producto final que es cuantificable.
d) Bilirrubina: Valor Normal: (Total): Hasta 1mg/dl Directa: Hasta 0,4mg/dl Indirecta: Hasta 05mg/dl
- Mtodo no enzimtico: La bilirrubina se mezcla con un acelerador (benzoato de cafena) ms
nitrato de sodio y ac. Sulfalinico. Se lleva a medir a 555nm ya que presenta un color rojo violceo.
- Mtodo para determinar bilirrubina directa: Se utiliza tartrato alcalino que provoca la formacin
de un complejo azul con capacidad de ser ledo a 546-578nm.
- Mtodo de Hall: El reacctivo de de Fouchet transforma el color de la bilis entre verde y esmeralda
que es ledo espectrofotomtricamente. Dependiendo del color es la cantidad de bilirrubina en
sangre.
e) Albmina: Valor Normal: 3.4 5,4g/dl
- Mt. Inmunologico RIA: Se une la albumina a colorzantes o pigmentos, en este caso se utiliza
verde de bromocresol. Luego se lee la absorbancias a 620nm.
- Nefelometra: Es la deteccin de energa lumnica de microparticulas en la sangre, entre estas la
albumina.
- Electroforesis Proteica: Se separan las protenas gracias a la aplicacin de un campo elctrico.
Se trabaja en pH alcalinos. Y las separa por tamaos, se trabaja con sodio dodecil sulfato.
f) Protenas: Valores Normales: 6-8,3g/dl
- Mtodo de Absorcin: Las protenas tienen una propiedad para absorber la luz, stas se leen en
la regin ultravioleta.
LABORATORIO DE BIOQUMICA RUIZ SIMBAA GIUVITZA DEL CARMEN
- Mtodo Colorimtrico de Biuret: Se forma un complejo coloreado con la unin de Cu y NH, la
intensidad del color de indirectamente proporcional a la cantidad de enlaces peptdicos.
- Mtodo BCA: Las protenas se unen al Cu II en un medio alcalino cambiando la valencia del Cu a
I, a ste se le aade el BCA y se forma un complejo purpura.
- Mtodo de Bradford: El colorante Comassie Blue se une a las protenas, las protenas se unen a
la coloracin azul formando un complejo.
g) Transaminasas: Valor Normal: GOT:5-40U/ml GPT: 5-30U/ml
- Mtodo Enzimtico - Colorimtrico: Utilizando 2,4 dinitrofenilhidrazina las transaminasas y
colocndolo a bao mara se observan a 505nm.
- Mtodo de IFCC: La GOT cataliza la reaccin, formando oxalacetato que reacciona con la malato
desh. De modo que la velocidad de oxidacin del NADH se mide a 340nm y este resultado es
proporcional al GOT de la muestra.
- Mtodo de Wrodlewsky y LaDue: Se mezclan alanina, cetoglutarato, glutamato y piruvato, de
acuerdo al consumo de NADH se cuantifica la cantidad de trsnsaminasas.
h) Fosfatasa Alacalina: Niveles Normales: 44-147UI/L
- Mtodo Enzimtico-Colorimtrico: En medio alcalino el fenilfosfato es desdoblado por la
fosfatasa, teniendo como tampn al aminometil propanol, el producto se trata con ferricianuero y
una peptina, el color se observa a 520nm.
- Mtodo Cintico: El sustrato es hidrolizado por la fosfatasa, liberando fenol, que es un compuesto
de color que absorbe la luz y puede observarse a 405nm, para detener la reaccin se aade
fosfato.

Referencias Bibliogrficas:

1. Revista Bioanlisis. Diagnostico bioqumico. Nmero 1. Editorial Khunz. Enero 2005.
2. 4. Revista Factores de riesgo hoy. Laboratorios Phoenix. Nmero 2. Talleres Grficos Vald
3. http://www.fundaciondiabetes.org/diabetesinfantil/diabetes_escuela/glosario.htm
4. http://www.biosimex.com.mx/pdf/insertos/QUIMICA%20CLINICA/11554.pdf
5. http://www.linear.es/ficheros/archivos/6_1102015C.pdf