Universidad de Antioquia

Facultad de Ingeniera
Escuela Ambiental
Grupo GeoLimna
2013

Prof. Nstor J. Aguirre R. Dr. rer. nat



Mtodos de campo y de laboratorio para estudios de calidad de agua dulce


Mtodos de campo y de laboratorio para el estudio de algas fitoplanctnicas

En la figura 1, se presenta el mtodo de campo para el estudio de algas microscpicas
de agua dulce.
Recipientes
plsticos y
Rotular
Inicio
Botella
Kemmerer
Red
fitoplancton
10 m, 2m
Metodologa en campo
Tomar muestra con
Lugol al
10%
Nevera a 4C
(Gel, Hielo)
Transferir a
Fijar con
Transportar en
Variacin
vertical 100%,
50%, 1%
Integrar la
zona ftica
Toda la
columna
Estudios de:
N. Aguirre
F
F

Figura 1. Mtodo de campo de algas fitoplanctnicas

Las muestras de agua superficial para el conteo de algas se tomarn directamente en
recipientes plsticos de un litro. Para la recoleccin de la muestra de agua se emplea una
botella muestreadora tipo Kemmerer y el agua se transfiere inmediatamente a un
recipiente de plstico. La recoleccin de algas en los sitios con presencia de bloom se
realiza mediante el empleo de una red de fitoplancton en la superficie del bloom. Las
muestras de agua para el conteo algal se fijarn con 10 ml de lugol por cada 100 ml de
muestra. El material colectado se transporta en neveras de tefln refrigeradas con geles
hasta el laboratorio.

Las muestras de fitoplancton tambin pueden obtenerse al integrar la zona ftica por
medio del volumen derivado de tres secciones en la columna de agua correspondientes a
la subsuperficie, al 50% y 1% de atenuacin en la intensidad lumnica. Es deseable
embalar las muestras en recipientes oscuros y protegidos de la luz para evitar el efecto
de la luz sobre el lugol.

En la figura 2, se presenta el mtodo de laboratorio para el anlisis de las muestras de
algas.

Metodologa en Laboratorio
Cmara de
Utermhl
1,10,50 ml
Observar en el
microscopio
invertido.
400X
Densidad
de
organismos
(Ros, 1979)
Medir 20
clulas segn
Hillebrand et
al., (1999)
Biomasa de
cada
spp=[*vol.]
Strathmann
(1967) y Davies
et al., (1984)
Cmara
S-R
1ml
Agitar muestra y depositar en:
Esperar 24 H y
Determinar y contar en
Para spp dominantes
Obtener
Para biovolumen
n: nmero de organismos contados , s: rea mm
2
del campo visual, h: altura de cmara mm, c:
nmero de campos contados , F: 10
3
mm
3
/1ml
30 Campos, 1 r, o hasta curva
saturada (Uehlinger, 1964)
Contar, medir y dibujar para obtener
biovolumen
N:Org/ml
= nF
sch
bis 100 ml
N. Aguirre
F
F
F
Figura 2. Mtodo de laboratorio de algas fitoplanctnicas

Antes de la observacin en el laboratorio, las muestras se deben agitar suavemente y el
procedimiento empezar depositndose volmenes conocidos en cmaras de
sedimentacin tipo termohl durante 24 horas.

Para la observacin de las muestras se puede emplear un microscopio invertido Leica
DMIN, provisto de una reglilla ocular utilizando una cmara de conteo de capacidad
conocida. Las observaciones al microscopio se efectan segn Ros (1979) en Ramrez,
(2000) por medio de un conteo en 30 campos con una magnificacin total de 400X, para
ello se seleccionan varias reas o campos de observacin siguiendo un sistema de
muestreo al azar (Uehlinger, 1964). Las determinaciones de los taxa fitoplanctnicos se
realizarn mnimo hasta el nivel de gnero.

La cuantificacin de organismos por mililitro ser realizada segn la siguiente frmula
sugerida por Ros (1979):

Organismos por mililitro cuando se cuentan campos = nF/ sch
n= nmero de organismos contados
s= superficie en mm
2
del campo del microscopio
c= nmero de campos contados
h= altura de la cmara en mm
F= factor de conversin= 10
3
mm
3
/ 1ml

Al final del conteo por campos aleatorios, se efecta un recorrido exploratorio de toda la
cmara para registrar el total de las especies o morfotipos. Lo importante es diferenciar
los elementos que constituyen el conjunto de algas de las muestras. Los anlisis
numricos posteriores requieren que el observador pueda diferenciar cada morfotipo de
alga y su densidad.

Para la determinacin de especies o morfotipos se emplean claves taxonpomicas y
referencias bibliogrficas como las siguientes: BOURRELLY (1966, 1968, 1985);
PRESCOTT et al., (1982); STREBEL Y KRAUTER (1988); Das Phytoplankton des
Swasser (Hrsg. HUBER-PESTALOZZI, 1938): Band XVI Teil 1 Blaualgen (1938), Band
XVI Teil 2, 1. Hlfte Chrysophyceae (1976), Band XVI Teil 4 Euglenophyceae (1955),
Band XVI Teil 5 Chlorophyceae (1961), Band XVI Teil 7, 1. Hlfte Chlorophyceae
(1983); Swasserflora von Mitteleuropa (ETTL et al. Hrsg. 1983, 1985a, 1985b, 1984,
1988, 1990, 1991a, 1991b, 1997a, 1997b) y Ramrez (2000).


Determinacin del Biovolumen o volumen celular

Para estimar el biovolumen de algas planctnicas, se puede determinar el volumen
celular medio obtenido a partir de las dimensiones de mnimo 20 clulas seleccionadas
aleatoriamente en el microscopio. La equivalencia de la forma celular a un slido
geomtrico se efecta segn Hillebrand et al., (1999). La densidad absoluta (en org/ml)
de un taxa, as como el promedio del nmero de clulas de algas que forman colonias
ser multiplicado por su volumen celular medio para obtener un estimativo de la
biomasa de cada taxa.

Las densidades de los taxa segn los registros del conteo se sumarn y se obtendr la
densidad algal en el sitio de colecta. Valores superiores a 30000 cel/ml pueden
considerarse altos.

El resultado final de la estimacin de la biomasa ser expresado en su volumen celular
(m
3
/ml) por volumen de agua.

VC medio= Vi * (n)
-1


Donde:
VC medio: volumen celular medio (m
3
)
Vi : Volumen celular individual
n= nmero de individuos medidos

Luego,
Biovolumen (m
3
/ml) = (VC medio) * nmero medio de clulas * densidad absoluta
(org/ml)



Mtodos de campo y de laboratorio para el estudio de algas perifticas

Para obtener muestras de algas perifticas se realizar una remocin por medio de
cepillos plsticos del material adherido a sustratos como piedras, troncos, hojas que
estn sumergidas en el lecho de la corriente. Como unidad de rea para efectuar la
remocin sobre los sustratos encontrados se utilizar un cuadrante de 8 cm
2
, el cual se
utilizar 30 veces al azar en el sitio de muestreo. Para ello puede emplearse un marco
de una diapositiva. En la figura 3, se presenta el mtodo de campo para obtener
muestras de perfiton.



Figura 3. Mtodo de campo para el perifiton

Para la observacin de las muestras ficoperifticas se utilizar un microscopio invertido
Leica DMIN, provisto de una reglilla ocular. Para el montaje de la muestra se utilizar
la cmara de conteo Sedgwick-Rafter de 1ml de capacidad (Wetzel & Likens, 1990).
Para anlisis cuantitativos las muestras se estandarizan en un volumen de 100 ml.
Luego la muestra se agita en un recipiente plstico de arriba abajo 10 veces e
inmediatamente con una pipeta se extrae un mililitro de muestra para su disposicin en
la cmara de conteo (figura 4).



Figura 4. Mtodo de laboratorio para el perifiton

Para efectuar el conteo de algas perifticas en la cmara se seleccionarn 30 campos de
observacin siguiendo un sistema de muestreo al azar (Uehlinger, 1964). El conteo se
realiza con una magnificacin total de 400X. La determinacin taxonmica se basar en
las mismas claves y referencias bibliogrficas para la determinacin de algas
planctnicas. Valores superiores a 30000 cel/cm
2
pueden considerarse altos.

Metodos de campo y de laboratorio para la determinacin de la produccin
primaria

En la figura 5, se presenta los mtodos de campo y de laboratorio para la determinacin
de la produccin primaria acutica por el mtodo del oxgeno propuesto por Gaarder
and Gran (1927).

Productividad Primaria
Inicio
Botellas claras y
oscuras, medicin O
2
(Gaarder & Gran,
1927)
Disco Secchi;
Quantmetro
Botella
Kemmerer
6 Botella
Winkler
por cada Z
Botella inicial
R= 2
4 botellas
Winkler:
en Z elegida
2 botellas
oscuras
(C
2
) y 2
claras
(C
3
)
PPB=
C
3
C
2
PPN=
C
3
C
1
ResP.=
C
1
C
2
0
Regla de
decisin ?
Se basa en el mtodo de
Tomar muestra de agua en
zona euftica (100%, 50%,
25%, 10%,1%) con
Determinar ambiente
lumnico con
Llenar
Determinar C
1
= concentracin O
2
Incubar t
0
Medir O
2
t
i
N. Aguirre
F
F
Analizar resultados

Figura 5. Mtodo para determinar la produccin primaria en el agua.

El mtodo del oxgeno empleando botellas claras para simular la actividad fotosnttica
y oscuras para simular la respiracin acutica fue desarrollado por Gaarder y Gran en
1927, y a pesar de ser un mtodo aproximado, es una herramienta valiosa para
determinar la produccin primaria bruta en el agua.

El mtodo consiste en tomar la muestra de agua a analizar en una determinada
profundidad. Esta profundidad se obtiene mediante la medicin previa de la
transparencia Secchi y estimando la profundidad de la zona ftica. Luego se eligen las
profundidades de extincin de la luz a las que se incubarn las botellas que contienen
las muestras de agua.

Se deben llenar seis botellas con las precauciones necesarias para determinar el oxgeno
disuelto. Las botellas tipo Winkler pueden ser de 100 a 300 ml de capacidad. Dos de las
botellas estarn pintadas de negro o recubiertas con papel aluminio para evitar la
entrada de luz (botellas oscuras); las otras dos, estarn en su condicin normal (botellas
claras). En la quinta y sexta botellas, debe determinarse la concentracin inicial de
oxgeno en el agua (C
1
). Las botellas deben emplearse teniendo en cuenta las rplicas
que permitan controlar el error experimental.

Luego del llenado de las cinco botellas, todas excepto las que contienen el agua para la
medicin de la concentracin inicial de oxgeno, se incuban in situ en el agua a la
misma profundidad de extraccin donde se tom la muestra. Todo esto, debe hacerse
rpidamente y manteniendo las botellas resguardadas de la luz directa para evitar el
shock lumnico de las algas. Si se trabaja a tres profundidades, se tendrn entonces seis
botellas claras, seis botellas oscuras y seis botellas para la concentracin de oxgeno
inicial (Ramrez, 1991a).

El tiempo de exposicin de las botellas cambiar segn la cantidad de plancton que
contenga el agua (sistemas eutrficos = 30-60 minutos, sistemas oligotrficos = 1-4
horas). Despus del tiempo de exposicin, se determina la concentracin de oxgeno en
cada una de las botellas mediante el mtodo de Winkler o directamente mediante un
oxmetro. En la botella clara se mide la produccin de oxgeno por fotosntesis (C
3
) y su
aumento se interpreta como una medida del carbono asimilado por la comunidad all
existente. En la botella oscura se mide el consumo de oxgeno por respiracin (C
2
)
(Ramrez, 1991a). Los clculos de PPB en mg C/ m
3
/h, se obtienen as:

PPB mg C/ m
3
/h= 0,312* (C
3
-C
2
)*1000 Cole (1983)
T*PQ

T= tiempo de incubacin de las botellas en horas.
PQ= Cociente fotosinttico= 1,2

Regla de decisin (ver Margalef, 1983, Esteves, 1998):

Valores entre 0-75 mg C/ m
3
/h corresponden a ambientes oligoproductivos
Valores entre 75-250 mg C/ m
3
/h corresponden a ambientes mesoproductivos
Valores > a 250 mg C/ m
3
/h corresponden a ambientes euproductivos


Clorofila a.
Para la determinacin cuantitativa de la clorofila a y de otras formas de clorofila, son
muy empleados los mtodos espectrofotomtricos. Entre stos, figuran mtodos
monocromticos como el propuesto por Talling y Driver (1963, en Ramrez 1991b).

Cl a = 11.9 A
665*
v / Vz

Donde A= A
665nm
antes de acidificar el extracto-A750nm antes de acidificar el extracto/
A
665nm
despus de acidificar el extracto-A750nm despus de acidificar el extracto

v= volumen del extracto en ml.
V=Volumen filtrado en Litros.
Z=Ancho de la celda de cuarzo en cm.

En la figura 6, se presenta el mtodo de determinacin de la clorofila a.
Clorofila A
Inicio
Espectrofotomtricos:
-Talling & driver (1963)
-Vollenweider (1971)
-Parsons & Strickland (1963)
-Sartory y Grobbelaar
(1984)
V= volumen conocido
Filtro Millipore 0.45m
<0.5 atm.
Botella Rttner
0.5-1L
Nevera de tefln
y refrigerar 4C
Etanol .
Bao mara
Centrifugar
5. 3500
rpm(2n)
Espectrofotmetro
PT
Espectrofotmetro
Feopigmentos
Se basa en mtodos
Tomar muestra con
Transportar a laboratorio en
Filtrar en la oscuridad
Extraer clorofila
Medir Abs. (665nm , 750nm)
Adicionar HCl
N. Aguirre
F
F
Recipientes plsticos
Oscuros rotulados.
500ml
Transferir a
F


Figura 6. Mtodo para determinar la concentracin de clorofila a en el agua.

La cantidad de agua a filtrar depende de la observaciones de campo y de microscopio
sobre la densidad algal esperada. 500ml pueden ser un volumen suficiente para
ambientes ricos en fitoplncteres y 1000ml para ambientes de aguas transparentes.
Despus de la extraccin de la muestra, la filtracin del agua debe efectuarse lo ms
rpido posible, evitando incidencia de luz muy fuerte y altas temperaturas. La presin
durante la extraccin no debe exceder de 0.5 atmsferas. Los filtros ms utilizados para
filtrar las muestras de agua son H.A. Millipore de celulosa con poro de 0.45 um
(Ramrez, 1991b).

Para la extraccin de la Clorofila a se sugiere emplear el Et-OH Etanol grado analtico
en bao mara. Por su parte se sugiere un tiempo de centrifugacin de 5 minutos a una
velocidad de 3500 rpm. Valores mayores a 10 ug/L de clorofila a pueden considerarse
altos.







Mtodos para el estudio de protozoos de vida libre

Los mtodos para el estudio de la comunidad de protozoos hetertrofos y mixotrficos
en los ambientes de agua dulce son diversos. Sin embargo para efectos del estudio de
esta comunidad de microorganismos se tendrn en cuenta los siguientes mtodos de
estudio. Un primer acercamiento al estudio de los flagelados heterotrficos se realizar
a travs de la clasificacin por tamao segn los criterios establecidos por Auer & Arndt
(2001), as:

Criterios de tamao para el estudio de los flagelados:
Pequeos (< 5 Um)
Medios (5-10 Um)
Grandes (> 10 Um)

Metodos para el anlisis de muestras in vivo. Las muestras de protozoos obtenidas se
transportarn al laboratorio con una temperatura igual al sitio de toma de muestra, luego
sern observadas usando la tcnica de conteo in vivo empleando un microscopio con
control de temperatura y evitando su agitacin. Estas muestras se analizan como
mximo, una hora despus de la toma de la muestra (Mathes & Arndt, 1995). Con ste
mtodo se puede determinar la abundancia, el biovolumen y el taxn (Massana & Gde,
1991; Gasol, 1993; Arndt et al., 2000).

Metodos para el anlisis de muestras fijadas. Se preparan muestras fijas con el fin de
realizar un estudio detallado de los taxa. Para ello, las muestras de protozoarios se fijan
en una solucin de formaldehido al 0,6% y se emplea un microscopio de
epifluorescencia usando 4,6 diamidino-2-phenylindol (DAPI) como reactivo de tincin
(Gde et al., 1985).

En la figurar 7 se presentan los mtodos para el anlisis de los protozoos de vida libre
en el agua dulce.


Figura 7. Mtodo de campo para el estudio de protozoos de vida libre.

Anlisis de muestras al microscopio. Para el anlisis de muestras al microscopio se
emplean cmaras de diferentes tamaos (10ul, 50 ul, 400 ul, 2 10 ml). La
diferenciacin entre los flagelados de nutricin autotrfica y los de nutricin
heterotrfica, se establece a travs de un microscopio de epifluorescencia siguiendo los
criterios propuestos por Davis & Sieburth (1982). En la figura 8 se presenta el mtodo
de laboratorio para el estudio de protozoos de vida libre.

Figura 8. Mtodo de laboratorio para el estudio de protozoos de vida libre.

El biovolumen de los organismos se determina por la medicin de las formas
geomtricas de los organismos (Premke & Arndt, 2000). Estas mediciones se efectan
empleando un microscopio Zeiss Axioplan con magnificacin desde 40X hasta 1000X y
equipado con contraste de fases y contraste de interferencia ptico. Al menos se tiene
cuenta un mnimo de tres alcuotas (2-

Determinacin de taxa. Para la determinacin taxonmica se tiene en cuenta la
sistemtica propuesta por Corliss (1979) y Patterson & Larsen (1991). Tambin se
emplearn las guas taxonmicas de Patterson et al., (1989); Larsen & Patterson,
(1990); Voers et al.,(1995); Tong et al., (1998); Bernard et al., (2000).

Mtodos de campo y de laboratorio para el estudio del zooplancton

En la figura 9 se presenta el mtodo de campo para obtener muestras de zooplancton en
ambientes de agua dulce.

Metodologa en campo
Inicio
Botella Schindler
Vol.: 5L (15 Litros )
Red
Zooplancton
45 m
Flujometro
Tiempo ,
velocidad,
GPS
Recipientes
plsticos
Rotulados
100ml
Nevera a
4C
(Gel, hielo)
Determinar
Tomar muestra con
Para
medir con
Transportar en
Formaldehido al
4%
Tomar
muestra con
botella
integradora
Variacin
vertical:
100%,
50%,1%
Integrar
zona Ftica
Toda la
columna
Fijar con
Transferir a
Estudios de:
N. Aguirre
F F

Figura 9. Mtodos de campo para el estudio del zooplancton

Como se observa en la figura 9, las muestras de agua pueden ser colectadas con el
empleo de una botella tipo Kemmerer, Schindler o Ruttner. Las muestras volumtricas
se pueden obtener a diferentes profundidades en la columna de agua, integrando zonas
especficas de la columna de agua o teniendo en cuenta un criterio lumnico. Estas
muestras permiten realizar anlisis cuantitativos de riqueza de especies o de densidad
zooplactnica expresada en No de organismos/100ml. Densidades mayores a 200
organismos/100 ml se pueden considerar altas.

Tambin pueden obtenerse muestras a travs de arrastres subsuperficiales en el agua
empleando redes de 0,45 um de dimetro, en cuyo caso el anlisis arroja resultados
cualitativos. El formaldehido al 4% suele ser el reactivo empleado para la fijacin de
muestras. Tambin puede adicionarse vaselina lquida para evitar el dao de estructuras
como toracopodos o furcas.

En la figura 10, se presenta la metodologa para el anlisis de las muestras al
microscopio. Usualmente este anlisis permite la determinacin de taxa. Si los
zooplncteres son pequeos <100 um, el conteo de estos se realiza en el microscopio
con el objetivo de 4X. Si los zooplacteres son grandes >100 um los organismos se
determinan en el microscopio pero se cuentan en un estereomicroscopio usando una caja
de Petri.





Metodologa en Laboratorio
Agitar
Organismos 1 ml
Wetzel y Likens (2000)

Ind/Litro
Disectar en
Estereomicroscopio
Depositar 1 ml de muestra en
Determinar y contar
Spp?
r = 5
Observar en Microscopio
Invertido 40X
(obj. 4X)
Cmara
S-R
N. Aguirre
F
F
F

Figura 10. Mtodos de laboratorio para el estudio del zooplancton

La densidad de zooplancton se estima mediante el conteo de los organismos presentes
en la muestra completa en caso de abundancias bajas, para lo contrario se contarn los
organismos presentes en 5 alcuotas de 1 ml cada una. Estas se depositan en una caja de
Petri y se observan al estereomicroscopio. Posteriormente se determinar el valor medio
de las cinco alcuotas contadas, se multiplicar por el volumen de la submuestra y se
dividir por el volumen total filtrado (Wetzel y Likens, 2000). Las densidades sern
reportadas en ind./100ml. La determinacin de zooplancton se realiza empleando las
claves de Edmondson (1959); Elmoor-Loureiro (1997); Paggi (1975); Sendacz y Kubo
(1982), STREBEL Y KRAUTER (1988); Villabona et al., (2009).





Mtodos para el estudio de plantas acuticas

Las plantas acuticas pueden distribuirse en diferentes lugares de los biotopos acuticos.
As se pueden encontrar plantas emergentes, de hojas flotantes, sumergidas y flotantes
libres (Aguirre et al., 2011).

Las plantas acuticas se pueden determinar directamente en campo con el empleo de
claves taxonmicas. Sin embargo, algunas especies de difcil identificacin deben
colectarse, esto teniendo en cuenta su sistema radicular, tallo, hojas y estructuras
florales, con el fin de ser determinadas en un herbario. Si la muestra debe conservarse,
se procede a prensar y secar el material en campo. La prensa consiste en listones de
madera cruzados y sujetados con correas. Las plantas pueden recibir por aspersin o
inyeccin alcohol con el fin de conservar el material hasta su arribo al herbario.

Adems de las instrucciones generales, Schmidt-Mumm (2002) tambin propone
recomendaciones sobre colecta y preservacin de material macroftico especifico para
cada grupo. A las plantas errantes emergentes de mayor tamao como Eichhornia
crassipes, se les debe eliminar hojas, tallos y races excesivas, adems de una incisin
en las hojas y peciolos inflados para lograr el aplanamiento de la planta. Macrfitas de
menor talla como las errantes emergentes: Lemna, Spirodela, Azolla y Salvinia y como
las errantes sumergidas (Riccia y Wolffia) se deben colectar empleando una red de
acuario.

Las plantas acuticas se conservan en recipientes plsticos con alcohol al 75%. Las
plantas acuticas se pueden muestrear sobre lneas transectas de 100 m sobre las cual se
registra el espcimen. Si se requiere un anlisis cuantitativo de cobertura, se dispone de
un cuadrante de 1 m de lado cada 10 m sobre la lnea transecta. El material vegetal
includo en este cuadrante se cuenta registrando el nmero de individuos por taxa, y se
pesa al menos cuatro ejemplares de cada especie para registrar la biomasa hmeda
(Aguirre et al., 2011).


Macroinvertebrados acuticos.
Para el muestreo de los macroinvertebrados acuticos se emplea un red tipo surber, con
la cual se obtienen muestras cuantitativas. Adicionalmente, se toman muestras
cualitativas empleando redes triangular y de pantalla. Tambin se obtienen muestras
cualitativas capturando manualmente los organismos adheridos a sustratos como
piedras, troncos, hojarasca y plantas acuticas.
Los macroinvertebrados colectados se fijan en alcohol y en recipientes plsticos
rotulados se transportan al laboratorio. Adicionalmente, se determina la velocidad de la
corriente, el permetro hmedo y el caudal del ambiente ltico empleandose un
correntmetro. Se recomienda tener en cuenta informacin adicional para anlisis de
resultados como la hora del da en que se realiz el muestreo, la altitud, la descripcin
general del sitio, caractersticas del entorno, registro de lluvias, entre otros aspectos.
En el laboratorio, la muestra a analizar se deposita con suficiente alcohol en una caja de
Petri. Se separan con pinzas los diferentes taxa con base en afinidades morfolgicas y
luego se procede a la determinacin de las taxa teniendo en cuenta las referencias el uso
del estereomicroscopio y claves taxonmicas. Se esquematiza y analiza la relacin de
cada uno de los taxa observados con la calidad del agua.

Los principales niveles empleadas generalmente en la identificacin de los taxa siguen
la siguiente jerarquizacin taxonmica: Reino, Phyllum, Clase, Orden, Familia, Gnero
y Especie. Cada una de estas categoras o niveles taxonmicos a su vez, pueden formar
subcategoras. El nombre cientfico de un organismo consta del gnero y de un segundo
trmino en minscula que es la especie. Los trabajos especializados de McCafferty
(1981), Needham y Needham (1982), Roldn(1988), Mller(1995) y Roldn (2003) son
algunas de las fuentes de consulta utilizadas para la determinacin de los
macroinvertebrados en el laboratorio y el anlisis de la calidad de agua basada en
bioindicadores.


Referencias Bibliograficas

Aguirre, N., Caicedo, O., Y Gonzlez, E. 2011. Las plantas acuticas del sistema
cenagoso de Ayapel Crdoba, Colombia. Texto de divulgacin cientfica. Sello editorial
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