BIORREACTORES

1.1. DEFINICIN.
Es un recipiente o sistema que mantiene un ambiente biolgicamente activo. En algunos casos, un biorreactor es un
recipiente en el que se lleva a cabo un proceso qumico que involucra organismos o sustancias bioqumicamente activas
derivadas de dichos organismos, se lleva a cabo una reaccin catalizada por enzimas o clulas, libres o inmovilizadas.
Este proceso puede ser aerbico o anaerbico. Estos biorreactores son comnmente cilndricos, variando en tamao
desde algunos mililitros hasta metros cbicos y son usualmente fabricados en acero inoxidable.
El biorreactor busca mantener ciertas condiciones ambientales propias (PH, temperatura, concentracin de oxgeno) al
organismo o sustancia qumica que se cultiva. En funcin de los flujos de entrada y salida, la operacin de un biorreactor
puede ser de tres puntos distintos:
Lote (batch).
Lote alimentado (fed batch).
Continuo o quimiostato.
1.2. CLASIFICACIN:
1.2.1. DE ACUERDO A SUS FASES:
Homogneos.
Heterogneos.
1.2.2. DE ACUERDO AL METABOLISMO (CLASIFICACIN BIOLGICA).
Los sistemas biolgicos deben interaccionar con el ambiente externo para poder crecer y desarrollarse, es por eso
que los biorreactores se clasifican biolgicamente de acuerdo al metabolismo procesal del sistema: ANAERBICO,
FACULTATIVO, AERBICO.
Los bioprocesos de cultivo y las fermentaciones estn basados en el metabolismo celular del cultivo. El metabolismo
define los parmetros y caractersticas operativas biolgicas de diseo y de operacin del biorreactor. Estas
caractersticas son las que intervienen en la parte biolgica del sistema y tienen que ver con el crecimiento,
productividad y rendimiento del cultivo; por lo que , definen la clasificacin biolgica . procesal del sistema de cultivo.
1.2.3. DE ACUERDO A SU PROCESO DE OPERACIN:
Continuos.
Semicontinuo.
Discontinuos.
Esta es una clasificacin operativa y se aplica a cualquier reactor, sea qumico o biolgico (biorreactor). En los
reactores biolgicos el modo de operacin define el sistema de cultivo que es el mismo y delimita la clasificacin
procesal productiva del bioproceso (cultivo). Al operar un biorreactor en una determinada categora (discontinuo,
semicontinuo, continuo), automticamente queda determinado el modo de cultivo del sistema y se definen los
parmetros y las caractersticas operativas y de diseo que intervienen en el proceso productivo del sistema.
1.2.4. DE ACUERDO A LA MEZCLA:
Biorreactor discontinuo de mezcla completa.
Biorreactor continuo de mezcla completa.
Biorreactor continuo de flujo de pistn.
Biorreactor reactores de lecho fluidizado.
1.3. ELECCIN DEL TIPO DE REACTOR:
Control de PH y temperatura.
Exigencias de suministro o eliminacin de reactores gaseosos.
Presencia de partculas slidas deseadas o indeseadas en la alimentacin.
Estabilidad qumica y/o biolgica de sustratos y productos.
Sustitucin del catalizador.
Inhibicin por sustratos y/o productos.
Escala de operacin.
Destinos del producto.

1.4. DISEO DE BIORREACTORES.
Es una tarea de ingeniera bastante compleja, los organismos o clulas son capaces de realizar su funcin deseada con
gran eficiencia bajo condiciones ptimas. Las condiciones ambientales de un biorreactor tales como flujo de gases (por
ejemplo; oxgeno, nitrgeno, dixido de carbono, etc.), temperatura, PH, oxgeno disuelto y velocidad de agitacin o
circulacin, deben ser cuidadosamente monitoreadas y controladas.
La mayora de los fabricantes industriales de biorreactores usan recipientes, sensores, controladores y un sistema de
control interconectados para su funcionamiento en el sistema biorreaccin.
La misma propagacin celular puede afectar la esterilidad y eficiencia del biorreactor, especialmente en los
intercambiadores de calor. Para evitar esto, el biorreactor debe ser fcilmente limpiable y con acabados lo ms sanitario
posible (de ah sus formas redondeadas).
Se requiere de un intercambiador de calor para mantener el bioproceso a temperatura constante. La fermentacin
biolgica es una fuente importante de calor, por lo que en la mayor parte de los casos, los biorreactores requieren de
agua de enfriamiento. Pueden ser refrigerados con una chaqueta externa o, para recipientes sumamente grandes, con
serpentines internos.
En un proceso aerobio, la transferencia ptima de oxgeno es tal vez la tarea ms difcil de lograr. El oxgeno se disuelve
poco en agua (y an menos en caldos fermentados) y es relativamente escaso en el aire (20,8 %). La transferencia de
oxgeno usualmente se facilita por la agitacin que se requiere tambin para mezclar los nutrientes y mantener la
fermentacin homognea. Sin embargo, existen lmites para la velocidad de agitacin, debidos tanto al alto consumo de
energa ( que es proporcional al cubo de la velocidad del motor) como al dao ocasionado a los organismos debido a un
esfuerzo de corte excesivo.
Los biorreactores industriales usualmente emplean bacterias u otros organismos simples que pueden resistir la fuerza de
agitacin. Tambin son fciles de mantener ya que requieren solo soluciones simples de nutrientes y pueden crecer a
grandes velocidades.
En los biorreactores utilizados para crecer clulas o tejidos, el diseo es significativamente distinto al de los
biorreactores industriales. Muchas clulas y tejidos, especialmente de mamfero, requieren una superficie u otro soporte
estructural para poder crecer y los ambientes agitados son comnmente dainos para estos tipos de clulas y tejidos.
Los organismos superiores tambin requieren medios de cultivo ms complejos.
PRINCIPIOS EN EL DISEO DE BIORREACTORES.

A. BIORREACTOR DISCONTINUO DE MEZCLA COMPLETA.
Variacin de forma continua.
Constante a travs del reactor.
Empleo de enzimas solubles.
Volumen pequeo de produccin.
DESVENTAJAS:
Cambios en las condiciones de operacin.
Grado de mezcla en reactores a gran escala.

B. BIORREACTOR CONTINUO DE MEZCLA COMPLETA.
Composicin uniforme.
Verstiles y baratos.
Facilidad de control de PH, temperatura, etc.
DESVENTAJAS:
Gastos energticos elevados.

C. BIORREACTOR DE FLUJ O EN PISTN.
Invariable a lo largo del tiempo.
Vara a travs del reactor.
Clulas o enzimas libres (inoculacin).
Clulas o enzimas inmovilizados.
VENTAJAS:
Ms eficaces que los de mezcla completa.
Simples y fciles de manejar y automatizar.

D. BIORREACTOR DE LECHO FLUIDIZADO
Fluidizacin: winkler (1921).
De lecho fluido o turbulento.
Biocatalizador o en suspensin.
Flujo de sustrato.
VENTAJAS:
Buen control de PH, T, gas, etc.
Gran rea de interaccin.
Facilidad de hacer trabajo en continuo.
DESVENTAJAS:
Tcnica de trabajo cara.
El diseo en bioingeniera no es solo la aplicacin de conceptos bsicos y tericos que conlleven a lograr un
prototipo; para la realizacin integra de un modelo, otra gran parte, trata de la adaptacin creativa y de la utilizacin
del ingenio propio para lograr el objetivo de conjuntar el ambiente biolgico de un cultivo vivo con el ambiente artificial
de un dispositivo controlado; este es el resultado denominado biorreactor o reactor biolgico. Un biorreactor es por
tanto un dispositivo biotecnolgico que debe proveer internamente un ambiente controlado que garantice y maximice
la produccin y el crecimiento de un cultivo vivo; esa es la parte biolgica. Externamente el biorreactor es la frontera
que protege ese cultivo del ambiente externo: contaminado y no controlado. El biorreactor debe por tanto suministrar
los controles necesarios para que la operacin o proceso (bioproceso) se lleve a cabo con economa, alto rendimiento
(productividad) y en el menor tiempo posible; esa es la parte tecnolgica.
El biorreactor es un sistema totalmente cerrado para la recepcin y tratamiento de las aguas residuales, residuos
agrcolas y de cualquier otro tipo de residuos orgnicos biodegradables, donde son convertidos en abono biolgico
formulado, libre de todo patgeno, y genera un gas, llamado biogs, el cual se purifica hasta llevarlo a metano puro
en la mayor proporcin posible para ser utilizado en cualquier sistema de combustin, motores o cualquier otro tipo de
equipo que opere con gas natural, incluyendo los vehculos particulares convertidos a gas natural pues tiene un alto
porcentaje de metano de no menos del 91% y su composicin, poder calorfico, etc. Es casi idntico a la del gas
natural, debido a que se purifica hasta su punto ptimo.


1.5. CULTIVOS Y FERMENTACIONES.
Lo primero que hay que entender en el diseo de reactores biolgicos es que contrario a los qumicos, su cintica no
est determinada exclusivamente por la velocidad de reaccin y las variables que la determinan. Aunque se puede
describir de manera similar a la qumica, la cintica biolgica tambin depende de caractersticas intrnsecas del
organismo o cultivo tales como crecimiento y tasa de divisin celular, as como del tipo de operacin que se lleve a cabo.
Por eso, lo primero que se define en el diseo de un biorreactor es el propsito de utilizacin; es decir, qu tipo de cultivo
se va utilizar, el modo de operar y/o el proceso de cultivo. El biorreactor sistema de cultivo debe cumplir con los
siguientes objetivos:
a. Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el volumen de cultivo.
b. Mantener constante y homognea la temperatura.
c. Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes.
d. Prevenir la sedimentacin y la floculacin.
e. Permitir la difusin de gases nutrientes a la velocidad requerida por el cultivo.
f. Mantener el cultivo puro.
g. Mantener un ambiente asptico.
h. Maximizar el rendimiento y la produccin.
i. Minimizar el gasto y los costos de produccin.
j. Reducir al mximo el tiempo.
Una fermentacin es un proceso biolgico o bioproceso que consiste en la descomposicin de la materia orgnica por
microorganismos fermentadores (bacterias y hongos).
Un cultivo tambin es un bioproceso; pero generalmente se asocia a organismos o microorganismos superiores (en
orden jerrquico) a las bacterias; los cultivos son casi todos del reino Eucariota.
1.6. BIORREACTORES Y TIPOS DE CULTIVO
Los sistemas biolgicos que determinan el metabolismos celular de cultivo y el modo procesal biolgico del sistema
son:
A. CLULAS Y MICROORGANISMOS ANAERBICOS.
Bacterias en su gran mayora, son microorganismos de metabolismos degradativo (catablico); generalmente
unicelulares, estos microorganismos son autnomos y nutricionalmente independientes ( auttrofos); sus clulas
(cuerpos) no respiran (no utilizan la gluclisis para la respiracin celular), en cambio, utilizan vas alternas, donde una
molcula orgnica, producida durante el proceso metablico (catabolismos), es utilizada como aceptor de electrones,
en un proceso bioqumico como respiracin oxidativa; esta molcula es reducida a producto orgnico en un proceso
comnmente denominado fermentacin.
B. CLULAS Y MICROORGANISMOS FACULTATIVOS.
Son ambivalentes, tienen la capacidad de vivir o sobrevivir entre ambientes: aerbico y anaerbico; microorganismos
de metabolismos mixto por lo que, pueden tanto degradar (catabolismo) como construir (anabolismos) materia
orgnica, a partir de diferentes sustratos (materia prima), tanto orgnicos como inorgnicos. Pese a su versatilidad,
sus mayores representantes son microorganismos que presentan relaciones parsitas o simbiontes tales como;
hongos y levaduras, por lo que son muy extensos.
C. CLULAS Y MICROORGANISMOS AERBICOS.
Pertenecen en su mayora al reino Eucariota (pero tambin hay procariotas) son microorganismos y clulas que
respiran (utilizan la gluclisis como forma de respiracin celular); por lo que su metabolismo es constructivo
(anablico) y deben obtener sus nutrientes de diferentes fuentes. Sus principales grupos estn representados por:
bacterias y microorganismos aerbicos, plantas y animales; cuyas clulas se pueden cultivar en suspensiones
celulares o bien, en diferentes arreglos artificiales o modificadas.

1.7. MODO DE OPERACIN Y SISTEMAS DE CULTIVO.
El modo de operacin de un sistema de cultivo, es sinnimo del modo de operar del biorreactor o fermentador. ste no
solo influye en el diseo propio del reactor, tambin, en el modelo cintico de crecimiento del cultivo y en el proceso de
produccin. Existen tres modos de cultivo aunados a tres modos bsicos de operacin:
1.7.1. DISCONTINUO (batch).
Por lotes o tandas, sin alimentacin (F); se coloca dentro del biorreactor la carga total de cada proceso (tanda o lote)
de cultivo o fermentacin y se deja que se lleve a cabo el proceso productivo o la fermentacin por el tiempo que sea
necesario; el cual se denomina tiempo de retencin.
Las clulas se cultivan en biorreactor con una concentracin inicial, sin que esta sea alterada por nutrientes
adicionales o el lavado, por lo que el volumen permanece constante y slo las condiciones ambientales del medio
(PH, temperatura, velocidad de agitacin) son controladas por el operador. Es proceso finaliza cuando todo el
sustrato es consumido por la biomasa.
1.7.2. SEMICONTINUO (Fed batch).
Por lotes alimentados, con alimentacin de entrada (F1); se alimenta una lnea de entrada o alimentacin (F1) para
que el sistema de cultivo tenga un producto (biomasa) con mximo crecimiento (exponencial) y aumente la
productividad. Los nutrientes son alimentados al biorreactor de forma semicontinua o continua, mientras que no hay
efluente en el sistema. La adicin intermitente del sustrato mejora la productividad de la fermentacin manteniendo
baja la concentracin del sustrato. Este proceso est restringido por la capacidad volumtrica del reactor.
1.7.3. CONTINUO.
Por quimioestato, se alimenta una lnea de entrada F1 con nutrientes de manera continua y se drena una salida F2 o
lavado; de manera que los flujos o caudales de ambas lneas sean iguales y la produccin sea continua.

1.8. BALANCES Y ECUACIONES
La parte terica del diseo consiste en modelar; es decir, poner en ecuaciones el proceso biolgico (bioproceso) que se
lleva a cabo, para que, a partir de esas ecuaciones, dimensionar (dar dimensiones) y simular el comportamiento terico
de un modelo prototipo.
1.8.1. BALANCE GENERAL BIOMASA
Velocidad de Acumulacin = Velocidad de Entrada Velocidad de Salida + Velocidad de Formacin Velocidad de
Consumo.



= - + -



1.8.2. BALANCE GENERAL POR COMPONENTE
Una vez dado el balance general de biomasa, debe tomarse en cuenta que, en un sistema de cultivo, existen muchos
componentes: sustratos, productos, compuestos metablicos que conforman el caldo de cultivo (medio interno);
incluso la biomasa, se considera un componente en s misma. A partir del balance general, debe establecerse un
balance general para cada componente del cultivo o la biomasa.
(

)

. Ec.1





Donde:
(

) : Velocidad de acumulacin del componente .
: Volumen del cultivo (m).

: Flujo o caudal de entrada (m/s).

: Concentracin inicial del componente . (kg/m).

: Flujo o caudal de salida (m/s).

: Concentracin del componente . (kg/m).

: Velocidad de formacin del componente . (kg/ms).

: Velocidad de consumo del componente . (kg/ms).

Velocidad
de
Entrada
Velocidad
de Salida
Velocidad
de
Formacin
Velocidad
de
Consumo
Velocidad de
Acumulacin
VELOCIDAD
DE
ACUMULACI
N
VELOCIDAD
DE
CONSUMO
VELOCIDAD
DE
ENTRADA
VELOCIDAD
DE
FORMACIN
VELOCIDAD
DE SALIDA

Respecto a las velocidades de formacin y consumo:
Si se trata de un componente metablico, responden a la acumulacin (formacin) del componente dentro de la clula
y al consumo del metabolito por parte de la clula (consumo).
Si se trata de biomasa, formacin corresponde a la generacin de biomasa y el consumo al consumo de biomasa
durante el bioproceso; esto es, a la produccin metablica en el primer caso y a la produccin o productividad en el
segundo.

1.8.3. BALANCE GENERAL POR COMPONENTE PARA CADA MODO DE OPERACIN
La ecuacin de balance general por componente Ec. 1, por ser general, se define para una operacin continua. La
condicin fundamental de toda operacin continua es:
En una operacin continua el flujo de entrada (F1) debe ser igual al flujo de salida (F2):
F1 = F2
Esta condicin se conoce como flujo en estado estacionario (FEE). Para modelar el comportamiento de la biomasa
del cultivo en el estado estacionario (EE) adems de la condicin de flujo (FEE) debe haber equilibrio en la densidad
o concentracin de sta. Esto se conoce como quimioestsis o equilibrio quimioesttico y es por eso que a los
sistemas de cultivo continuo se les llama quimioestatos. Est condicin est dada por la ecuacin:

Ec. 2.
Bajo la condicin de FEE y suponiendo que la densidad del cultivo y de la alimentacin son iguales (Ec.2,
quimioestsis) la Ec.1 se reduce a la ecuacin de balance para una operacin continua en estado estacionario.

) (

) .. Ec. 3.
De no existir el estado estacionario (EE) se produciran dentro del biorreactor dos condiciones de flujo indeseables:
Si F1 > F2 se produce el rebalse o desborde del biorreactor, condicin que se da cuando el flujo de entrada
sobrepasa la capacidad del reactor.
Si F2 > F1 se produce el lavado o drenado de producto o biomasa, condicin que se da cuando el flujo de salida
sobrepasa la capacidad del reactor.
Cuando el modo de operacin es semicontinuo (fed-batch) el caudal de salida F2 es nulo (F2 = 0) por lo que, el
volumen V aumentar con el tiempo en funcin del caudal de entrada:

. Ec.4.
Y en el balance de materia se anula el trmino

resultando:

(

) .. Ec.5.
Observe que el volumen que permanece dentro del operador diferencial es porque vara con el tiempo (Ec.4), en
tanto que el otro no lo hace (Ec.3). Esa es la razn por la que una operacin semicontinua tiene duracin limitada en
el tiempo (el volumen no puede incrementarse ms all del volumen de trabajo o volumen til del biorreactor). El
tiempo que dura una operacin semicontinua se conoce como tiempo de residencia (tr) y es el tiempo que dura el
cultivo o bioproceso en un sistema semicontinuo.
Cuando el modo de operacin es discontinuo (batch) ambos caudales son nulos
F1 = F2 = 0
Por lo que, el volumen es constante y se anulan los trminos

en la Ec.1. Eso da como resultado:

(

Ec.6.
La duracin de un cultivo discontinuo (batch) es tambin, limitada en el tiempo, pero se diferencia de la del cultivo
semicontinuo (fed-batch) en que depende nicamente de las condiciones iniciales del cultivo; esto por cuanto, no
existe alimentacin (F1). Una vez cargado el biorreactor e inoculado el medio de cultivo, la concentracin de la
biomasa aumenta gracias a los nutrientes, pero una vez que el sustrato que limita el crecimiento se haya agotado, el
crecimiento ya no es posible y finaliza el cultivo. Por este motivo, el tiempo que dura el cultivo dentro de un biorreactor
con un modo de operacin discontinuo se llama tiempo de cultivo (tc).
1.8.4. BALANCES INDIVIDUALES
Los principales balances por componente en su forma individual son:
Balance de Biomasa:
d (VX) / dt = FiXi + VrgX FoXo VrcX
Velocidad de crecimiento celular
rgX = X
velocidad de muerte celular
rcX = kdX
Balance de Sustrato:
d (VS) / dt = FiSi FoSo VrcS
rcS = qSX / YX/S = X / YG + m X + qPX / YP
Balance de producto:
d (VP) / dt = FiPi FoPo VrgP
rgP = qP X
Balance de Oxgeno:
d (VCL) / dt = FiCLi FoCLo VrcO
2
+ VNiO
2

Balance de Anhdrido Carbnico:
d(VCCO
2
) / dt = FiCCO
2
i FoCCO
2
o + VrgCO
2
VNoCO
2

NOMENCLATURA
V: Volumen del lquido en el biorreactor, L
t: Tiempo, h
y: Concentracin del componente y en el lquido dentro del biorreactor, g/L
X: Concentracin de biomasa en el lquido dentro del biorreactor, g/L
S: Concentracin de sustrato en el lquido dentro del biorreactor, g/L
P: Concentracin de producto en el lquido dentro del biorreactor, g/L
CL: Concentracin de oxgeno en el lquido dentro del biorreactor, g/L
C*: Concentracin de oxgeno en el lquido en equilibrio con el gas, g/L
CCO
2
: Concentracin de CO
2
en el lquido dentro del biorreactor, g/L
F: Velocidad de flujo de lquido, L/h
Ni: Velocidad de transferencia de un componente del gas al lquido, g/Lh
No: Velocidad de transferencia de un componente del lquido al gas, g/Lh
rg: Velocidad de generacin, formacin o produccin, g/Lh
rc: Velocidad de consumo o utilizacin, g/Lh
: Velocidad especfica de crecimiento celular, h-1
qS: Velocidad especfica de consumo de sustrato, g/gh
qP: Velocidad especfica de formacin de producto, g/gh
m: Velocidad especfica de consumo de sustrato para mantenimiento celular, g/gh
Kd: Velocidad especfica de muerte o declinacin celular, h-1
YP: Coeficiente (estequiomtrico) de rendimiento de producto basado en el consumo de sustrato consumido
para formacin de producto, g/g
YP/S: Coeficiente de rendimiento de producto basado en el consumo total de sustrato, g/g
YG: Coeficiente de rendimiento de biomasa basado en el consumo de sustrato para crecimiento, g/g
YX/S: Coeficiente de rendimiento de biomasa basado en el consumo total de sustrato, g/g
kLa: Coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno, h-1
SUBNDICES
i = Ingreso
o = Salida

S = Sustrato
P = Producto
O
2
= Oxgeno
CO
2
= Anhdrido carbnico