Metodos NMP PDF

Nmero Mais Provvel (NMP)
Eduardo Alcio CEFET/PE

Mtodos Microbiolgicos para
Contagem de Bactrias em gua
1
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Nmero Mais Provvel - NMP
Tcnica de diluio idealizada por McCrady (1915), onde se faz uma
estimativa da densidade mdia dos microrganismos na amostra
De fcil execuo, mas laboriosa.
Baseia-se em frmulas de probabilidade
estimada utilizando frmula ou tabelas
A densidade microbiana estimada pela relao de tubos positivos e
negativos
Aplicado apenas para contagem de Bactrias
2 Eduardo Alcio CEFET/PE
Coliforme Total (Grupo Coliformes)
Confirmativo
Presuntivo
Bastonete Gram negativo (no esporulado), aerbio ou anaerbio facultativo,
oxidase negativo, que crescem na presena de sais biliares ou de outros
surfactantes e fermentam a lactose com produo de aldedo, cido e gs a 35C
em 24 48 horas.
Caldo Lauril Triptose
Crescimento com Gs e/ou
Formao de cido24-48
h/35C
Caldo Verde Brilhante
Crescimento com Gs
24-48 h/35C
Os tubos positivos no caldo lauril e que tambm positivaram no caldo verde
brilhante so os que devem ser considerados como pertencentes ao grupo
Coliformes (Coliforme Total). Ler na tabela o NMP relativo ao nmero de tubos
positivos.
Nmero Mais Provvel - NMP (cont.)
Coliformes Termotolerantes (Antigo Fecais)
Confirmativo
Presuntivo
Bactrias que apresentam as caractersticas do grupo coliformes, porm
temperatura de incubao de 44,5C 0,2C (Escherichia, Klebsiella, Serratia,
Enterobacter, Arizona, Edwardsiella, Citrobacter).
Caldo Lauril Triptose
Crescimento com Gs e/ou
Formao de cido 24-48 h
/35C 0,5C)
Caldo Verde Brilhante
Crescimento com Gs
24-48 h/ /35C 0,5C)
Os tubos positivos no caldo verde brilhante a 44,5C 0,2C so considerados
pertencentes ao grupo Coliforme Termotolerante (Fecal). Ler na tabela o NMP
relativo ao nmero de tubos positivos. A diferenciao por espcie (E. coli,
Klebsiella sp., et), s possvel atravs de provas bioqumicas especficas.
Coliforme Total (Grupo Coliformes)
Caldo E.C.
Crescimento com Gs
6-48 h/ 44,5C 0,2C
Coliforme
Termotolerante
5
1. Inoculao Direta: 100 mL de amostra Etapa PRESUNTIVA
Caldo LST 35C 0,5C
10
Tubos
Com
10 mL
Amostras de gua Tratada: Mtodo Convencional CT
Incubar e Ler.
Repicar tubos
positivos
para confirmao
Em Caldo Verde
Brilhante
05
Tubos
Com
20 mL
(*) 05
Tubos
Com
10 mL
(*) Excesso
6
1. Inoculao Direta: 100 mL de amostra Etapa PRESUNTIVA
Caldo LST 35C 0,5C
7
1. Inoculao Direta: 02 a 03 aladas Etapa CONFIRMATIVA
Caldo VB 35C 0,5C
10
Tubos
Com
10 mL
Incubar e Ler em
Tabela 10 tubos
10 mL cada
05
Tubos
Com
20 mL
Incubar e Ler em
Tabela 05 tubos
20 mL cada
(*) 05
Tubos
Com
10 mL
Incubar e Ler em
Tabela 05 tubos
10 mL cada
(*) Excesso
8
1. Inoculao Direta: 02 a 03 aladas Do confirmado em CT
Caldo E.C./44,5C 0,2C
10
Tubos
Com
10 mL
Amostras de gua Tratada: Mtodo Convencional Termotolerantes
Incubar e Ler em
Tabela 10 tubos
10 mL cada
05
Tubos
Com
20 mL
Incubar e Ler em
Tabela 05 tubos
20 mL cada
(*) 05
Tubos
Com
10 mL
Incubar e Ler em
Tabela 05 tubos
10 mL cada
(*) Excesso
Leitura: Tabela estatstica para 10 tubos
com inculo de 10 mL cada.
9 Eduardo Alcio CEFET/PE
- 12 >23 10
53 8.1 23 9
33 5.9 16 8
24 4.8 12 7
19 3.3 9.2 6
15 2.5 6.9 5
13 1.6 5.1 4
9.7 .91 3.6 3
8.1 .37 2.2 2
5.9 .05 1.1 1
3.3 - <1.1 0
Superior Inferior
Limite Confiana
NMP/100
mL
Tubos
Posit.
1
0
1. Diluies sucessivas:
1 mL
da
Amostra
1mL 1mL
9 mL 9 mL
Dil 1/ 10 Dil 1/ 100 Dil 1/ 1000
1 mL Dil. 1/ 10
1 mL Dil. 1/ 100
1 mL Dil. 1/ 1000
2. Inoculao: Em meios adequados
Amostras de gua No-Tratadas:
9 mL
3. Incubar
Nmero de tubos cujo crescimento
visvel para cada quantidade do
produto sob exame
Nmero
Mais
Provvel
de
microrga
nismos /
mL
Limite
NMP
0,1 mL
/tubo
0,01 mL
/tubo
0,001 mL
/tubo
Inferior Superio
r
0
0
0
1
1
1
1
1
2
2
2
2
3
3
3
3
3
0
0
1
0
0
1
1
2
0
0
1
1
2
3
3
3
3
0
1
0
0
1
0
1
0
0
1
0
1
2
0
1
2
3
<3
3
3
4
7
7
11
11
9
14
15
20
210
240
460
1100
>2.400
-
<0,5
<0,5
0,5
1
1
3
3
1
3
3
7
35
36
71
50
-
-
9
13
20
21
23
36
36
36
37
44
89
470
1300
2400
4800
-
1
1
Leitura: Tabela estatstica para
combinaes de 3 tubos
1
2
1. Inoculao Direta: 100 mL de amostra CT e E. coli
Caldo LMX 35C 0,5C
10
Tubos
Com
10 mL
Amostras de gua Tratada: Mtodo MUG (Fluorescente)
Incubar e
Ler em Tabela
de 10 tubos /
10 mL
(*) 05
Tubos
Com
10 mL
(*) Excesso
1
3
Caldo LMX 35C 0,5C
Incubar e
Ler em Tabela
de 05 tubos /
10 mL
(*) 05
Tubos
Com
10 mL
(*) Excesso
1
4
Caldo LMX 35C 0,5C
Incubar e
Ler em Tabela
de 05 tubos /
10 mL
(*) 05
Tubos
Com
10 mL
(*) Excesso
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